2022届高考生物一轮复习单元过关检测十　现代生物科技专题【解析版】

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1．本试卷共4页。
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3．请在密封线内作答，保持试卷清洁完整。
一、选择题(本题包括10小题，每小题2分，共20分)
1．用XhⅠ和SalⅠ两种限制性核酸内切酶分别处理同一DNA片段，酶切位点及酶切产物分离结果如图。以下叙述不正确的是( )
A．图1中两种酶识别的核苷酸序列不同
B．图2中酶切产物可用于构建重组DNA
C．泳道①中是用SalⅠ处理得到的酶切产物
D．图中被酶切的DNA片段是单链DNA
2．如图为科学家利用耐盐碱植物中的耐盐基因培育耐盐水稻新品系的过程。下列相关说法中不正确的是( )
A．阶段Ⅰ、Ⅱ应用的技术分别是DNA重组技术、植物组织培养技术
B．对耐盐基因表达产物的检测可采用抗原—抗体杂交
C．可用抗生素抗性基因作为探针来检测受体细胞中是否插入了目的基因
D．可用分子杂交技术检测受体细胞中的耐盐基因是否转录出mRNA
3．如图为获得抗除草剂转基因玉米A的技术路线，含有内含子的报告基因只能在真核生物中正确表达，其产物能催化无色物质K呈现蓝色。转化过程中愈伤组织表面常残留农杆菌，会导致未转化的愈伤组织可能在含除草剂的培养基中生长。下列相关叙述错误的是( )
A．采用PCR扩增目的基因时，设计的引物间要避免形成氢键
B．为防止酶切产物自身环化，构建表达载体需用两种不同的限制酶
C．检测是否转化成功，需要依次利用抗生素抗性基因和报告基因
D．利用T－DNA可以将目的基因插入到农杆菌的染色体DNA上
4．(2019·江苏，20)为探究矮牵牛原生质体的培养条件和植株再生能力，某研究小组的实验过程如图。下列叙述正确的是( )
A．过程①获得的原生质体需悬浮在30%蔗糖溶液中
B．过程②需提高生长素的比例以促进芽的分化
C．过程③需用秋水仙素处理诱导细胞壁再生
D．原生质体虽无细胞壁但仍保持细胞的全能性
5．细胞工程中选择合适的生物材料是成功的关键，下列选择不合理的是( )
A．选择高度分化的动物体细胞进行培养有利于获得大量细胞
B．选择胚胎细胞作为核供体可提高克隆动物的成功率
C．选择一定大小的植物茎尖进行组织培养可获得脱毒苗
D．选择植物的愈伤组织进行诱变处理可获得优质的突变体
6．下列有关动物细胞培养和植物组织培养的叙述，错误的是( )
A．动物细胞培养和植物组织培养所用培养基中的成分不同
B．动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶
C．动物细胞培养可用于检测有毒物质，对茎尖进行组织培养可获得脱毒植株
D．烟草叶片离体培养能产生新个体，对小鼠杂交瘤细胞进行培养能得到细胞代谢产物
7．下列有关动物细胞工程和胚胎工程的叙述，正确的是( )
A．动物细胞培养时，需对细胞进行一次脱分化和两次胰蛋白酶处理
B．适宜条件下进行动物细胞培养，细胞周期的长短不随细胞培养进程而改变
C．胚胎工程中常对桑椹胚或囊胚进行二分割，以获得基因型完全相同的两个胚胎
D．为了防止早期胚胎培养过程中发生微生物污染，应将培养箱抽成真空以消毒、灭菌
8．如图表示牛胚胎移植的流程，其中①～④表示相应的操作过程。下列相关叙述不正确的是( )
A．过程①注射相关激素，使供、受体同期发情
B．过程②注射促性腺激素，以达到超数排卵的目的
C．过程③主要涉及人工授精和从卵巢中冲取胚胎
D．过程④的主要目的是选择适合移植的胚胎
9．下列关于对转基因生物安全性发生争议的原因中，错误的是( )
A．对基因的结构和调控机制等的了解仍相当有限
B．所转移的基因有不少是异种生物的基因
C．外源基因插入宿主基因组的部位往往是随机的
D．DNA重组技术需要有精心设计的“分子工具”
10．生物技术安全性和伦理问题是社会关注的热点，下列叙述错误的是( )
A．应严格选择转基因植物的目的基因，避免产生对人类有害的物质
B．我国已经对转基因食品和转基因农产品强制实施了产品标识制度
C．反对设计试管婴儿的原因之一是有人滥用此技术选择性设计婴儿
D．生物武器是用微生物、毒素、干扰素及重组致病菌等来形成杀伤力
二、非选择题(本题包括10小题，共80分)
11．(8分)(2020·豫南九校联考)油菜籽中蛋白质和油脂的相对含量与酶1和酶2对共同底物丙酮酸的竞争有关。酶1促进蛋白质的合成，酶2促进油脂的合成。通过生物工程技术对油菜进行改造，以得到含有基因A的油菜，流程图如下。请据图回答下列问题：
(1)在基因工程中使用的载体除质粒外，还有________________________________。
(2)获取目的基因A的方法有________________________________________或人工化学合成等方法。
(3)图中潮霉素抗性基因的作用有_______________________________________。
(4)利用农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞，主要利用了_________________________。
(5)图中表示植物组织培养的过程是________(填数字)。过程④中要防止杂菌污染的原因是________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。通过过程④
得到的油菜植株中，所有细胞____________(填“一定”“不一定”或“一定不”)含有基因A，原因是_____________________________________________。
12．(7分)某科学工作者首先从真核细胞细胞质的多聚核糖体中获得mRNA，再将获得的mRNA与单链DNA分子杂交，从而分离获得目的基因。该方法的操作过程如图所示，请回答下列相关问题：
(1)图中加热处理的目的是获得DNA单链，在加热过程中破坏了DNA分子结构中的_______(填名称)。利用PCR技术对DNA分子进行扩增时，需要的条件有_____________ (至少答出三点)。
(2)一个mRNA分子上可以相继结合多个核糖体(即多聚核糖体的存在)，其意义是___________________________________________________________。
(3)mRNA与单链DNA分子杂交的原理是____________________________；分子杂交形成游离的凸环3、5、7的原因是DNA中含有________，这些非编码DNA片段被转录后在mRNA加工过程中会被剪切掉。与DNA复制相比，DNA与mRNA分子杂交特有的碱基配对类型是________。
(4)在基因工程中，构建的表达载体应含有目的基因及启动子，其中启动子的作用是
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
13．(9分)(2020·临川一中质检)鸡干扰素是一种具有高效和广谱抗病毒作用的细胞因子，广泛用于动物领域的抗病毒治疗。科研人员将鸡干扰素基因作为目的基因，构建基因表达载体，通过农杆菌转化法导入烟草，以获得抗病毒烟草。下图为科研人员制备能合成鸡干扰素的烟草愈伤组织细胞的流程，①～④表示相关的操作，两种限制酶的识别序列及切割位点如表所示。请回答下列问题：
(1)步骤①中，利用PCR技术扩增干扰素基因时，设计引物序列的主要依据是______。科研人员还在两种引物的一端分别加上了__________________和________________序列，以便于后续的剪切和连接。为防止酶切产物自身环化，构建表达载体需用两种限制酶，选择的原则是Ti质粒内，每种限制酶有__________个切割位点，酶切后，目的基因形成的两个黏性末端序列________(填“相同”或“不相同”)。
(2)步骤②所构建的基因表达载体中未标注出的必需元件还有____________，步骤③中需先用____________处理农杆菌以便将基因表达载体导入细胞。
(3)步骤④中，科研人员提取愈伤组织细胞的RNA后，先通过__________获得DNA，再进行PCR扩增，若最终未能检测出干扰素基因，可能的原因是_____________________。
14．(7分)(2020·济宁模拟)如图是科学家通过不同方法培育优良种牛的过程，其中①～⑤表示操作过程。请回答以下问题：
(1)图中①过程涉及的精子需进行__________处理；防止多精入卵的两道屏障为____。
(2)图中②过程所用的方法是________________。外源基因插入牛受精卵中的DNA上后，有的受精卵能发育成转基因牛，而有的会死亡，请分析外源基因插入牛受精卵中的DNA上后导致受精卵死亡的最可能的原因：_________________________________________________。
(3)图中b、c分别代表囊胚的____________________________________________________。
(4)图中⑤过程表示______________，一般培养到____________________阶段才进行⑤过程。
15．(8分)(2020·咸阳模拟)目前我国超过82万人感染艾滋病，预防工作迫在眉睫，科学工作者从HIV感染自愈者体内采集相应免疫细胞，使之与骨髓瘤细胞结合，生产HIV抗体，具体过程如图。回答下列相关问题：
(1)HIV自愈者免疫细胞是指________，甲、乙、丙中只含杂交瘤细胞的是________________，②过程的目的是筛选具有________________________特点的杂交瘤细胞。
(2)HIV主要侵染T细胞的原因可能是______________________________________________
________________________________________________________________________。
(3)转基因技术被运用到HIV疫苗的研制工作中，该技术操作的关键步骤是___________，为使目的基因在受体细胞中正常表达，需要把目的基因片段插入表达载体的___________之间。
(4)用DNA—RNA分子杂交技术确定目的基因是否完成了____________(填“转录”或“翻译”)过程。
(5)科学工作者发现一种D蛋白，其第31位的色氨酸替换成酪氨酸后，就能与HIV表面的糖蛋白结合，从而使HIV失去侵染T细胞的能力。制造这种新型蛋白质防治艾滋病，用到的现代生物工程技术是______________。
16．(5分)(2020·重庆一中质检)2013年7月，中国试管婴儿之母——卢光琇教授与研究伙伴共同宣布全球首批经全基因组测序的PGD/PGS试管婴儿在长沙诞生。新技术的突破意味着通过设计试管婴儿解决部分不孕不育问题的同时，部分肿瘤疾病、遗传性疾病的家族性遗传也将有望避免。请分析回答下列问题：
(1)设计试管婴儿时为了提高受孕率，胚胎移植时多采用多胚胎移植。因此需要用___________处理，促进母体排出更多的卵子。
(2)胚胎发育的卵裂期在________(填“透明带”或“放射冠”)内进行。受精卵经72小时体外培养发育成有32个细胞左右的胚胎，叫做________，可用于胚胎移植。
(3)可利用人体细胞核移植等技术治疗人类疾病，在去除卵母细胞的细胞核时，可用微型吸管把位于__________和________之间的第一极体一并吸出。
17．(12分)(2020·厦门一中调研)回答下列有关动物细胞培养的问题：
(1)在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面____________时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的______________。此时，瓶壁上形成的细胞是________层。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，用到的酶是______________。
(2)随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现__________________现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而获得________，该种细胞的黏着性________，细胞膜表面蛋白质(糖蛋白)的量__________。
(3)现用某种大分子染料对细胞进行染色时，观察到死细胞被染色，而活细胞不被染色，原因是________________________________________________________________________。
(4)检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用分裂________期的细胞在显微镜下进行观察。
(5)在细胞培养过程中，通常在______________________条件下保存细胞。因为在这种条件下，细胞中________的活性降低，细胞________________速率也降低。
18．(7分)(2020·汕头质检)某转基因牛的生产技术流程如图。请回答下列问题：
(1)利用过程①的方法构建的基因文库是________________(填“基因组文库”或“部分基因文库”)；PCR技术大量扩增此目的基因的前提是_______________________，以便合成引物；PCR扩增过程经过变性、复性和__________三个步骤。
(2)转入生长激素基因的牛可通过乳腺细胞分泌乳汁来生产人生长激素，过程②中，将目的基因与________________的启动子等调控组件重组在一起构建重组质粒，通过__________________技术导入受精卵中，然后利用胚胎工程的________________________
(答出2项)技术手段获得转基因牛。
(3)该转基因牛进入泌乳期后，其分泌的乳汁中并未含有人的生长激素，可能的原因是
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
19．(8分)(2020·山东等级考模拟)基因定点整合可替换特定基因，该技术可用于单基因遗传病的治疗。苯丙酮尿症是由PKU基因突变引起的，将正常PKU基因定点整合到PKU基因突变的小鼠胚胎干细胞的染色体DNA上，替换突变基因，可用来研究该病的基因治疗过程。定点整合的过程是从染色体DNA上突变PKU基因两侧各选择一段DNA序列HB1和HB2，根据其碱基序列分别合成HB1和HB2，再将两者分别与基因HSV－tk1、HSV－tk2连接，中间插入正常PKU基因和标记基因ner，构建出如图所示的重组载体。重组载体和染色体DNA中的HB1和HB2序列发生交换，导致两者之间区域发生互换，如图所示。请分析回答下列问题：
(1)构建重组载体时，常用的工具酶有__________________________________。该实验用小鼠胚胎干细胞作为PKU基因的受体细胞以培育出转基因小鼠，除了胚胎干细胞能大量增殖外，还因为胚胎干细胞____________。
(2)为获得小鼠的胚胎干细胞，可将小鼠囊胚中的________________取出，并用______处理使其分散成单个细胞进行培养，培养过程中大部分细胞会贴附在培养瓶的表面生长，这种现象称为______________。
(3)用图中重组载体转化胚胎干细胞时，会出现PKU基因错误整合。错误整合时，载体的两个HSV－tk中至少会有一个与ner一起整合到染色体DNA上。已知含有ner的细胞具有G418的抗性，HSV－tk1、HSV－tk2的产物都能把DHPG转化成有毒物质而使细胞死亡。转化后的胚胎干细胞依次在含有G418及同时含有G418和DHPG的培养液中进行培养，在双重选择下存活下来的是__________的胚胎干细胞，理由是_________________________________。
(4)将筛选得到的胚胎干细胞培育成小鼠，从个体生物学水平检测，若小鼠____________，说明PKU基因成功表达。
20．(9分)(2019·河南示范高中联考)长江的水体污染是流入长江的次级河流污染(如生活污水)引起的，某小组利用人工浮床技术对次级河流中水质进行净化分析，实验装置如图所示。
污水中TN、TP去除率的比较(%)
(1)图中植物的根系形成浓密的网，吸附水体中大量悬浮物，且植物根系表面微生物将某些污染物吞噬代谢产生______________，使其成为植物的营养物质；另一方面浮床通过遮挡阳光抑制藻类的________________，减少浮游植物的生长量，通过接触沉淀作用使浮游植物沉淀，减少“水华”的发生。
(2)此案例属于____________生态工程的实例，它遵循的生态工程原理是________________(写出一个即可)。
(3)该小组利用人工浮床开展了“菰(茭白)和菖蒲对生活污水净化效果的研究”，你认为该实验装置应该准备____________组，分别进行如下处理：________________________。
(4)为了避免实验误差，你认为每个实验装置中的植物株数应___________________。
(5)该小组实验结果如表所示，从此表中可看出该小组所做研究的因变量为______________，
你能从表中得出的结论是________________________________________________________。
答案精析
1．D [根据①②电泳结果可知：两种限制酶识别的核苷酸序列不同；图2中同种限制酶切割后得到的片段可以连接形成重组DNA；泳道①有4个片段，说明限制酶切点有3个，为SalⅠ的酶切产物；限制酶只能识别双链DNA分子特定的核苷酸序列。]
2．C [阶段Ⅰ将目的基因导入水稻细胞需要采用DNA重组技术，阶段Ⅱ将水稻细胞培养成完整植株需要采用植物组织培养技术，A正确；耐盐基因表达产物是蛋白质，可用抗原—抗体杂交检测，B正确；可以用含有耐盐基因的DNA探针检测细胞中是否插入了目的基因，而不是用抗生素抗性基因作为探针来检测，C错误；可用分子杂交技术检测受体细胞中的耐盐基因是否转录出mRNA，D正确。]
3．D [采用PCR扩增目的基因时，设计的引物与模板链结合，则引物间不能形成氢键；为防止酶切产物自身环化，构建基因表达载体时一般选择两种不同的限制酶；利用抗生素抗性基因和报告基因可检测目的基因是否转化成功；利用T－DNA可将目的基因插入到植物细胞的染色体DNA上。]
4．D [过程①获得的原生质体不能悬浮在30%的蔗糖溶液中，30%的蔗糖溶液可导致原生质体失水皱缩甚至死亡，A错误；过程②为再分化过程，需提高细胞分裂素的比例以促进芽的分化，B错误；过程③不需用秋水仙素处理，愈伤组织细胞就已经有了细胞壁，C错误；原生质体虽无细胞壁，但含有细胞核等结构，即含有全部的遗传信息，原生质体仍保持细胞的全能性，D正确。]
5．A [高度分化的动物体细胞的全能性受到限制，其分裂能力也随着分化程度的提高而下降，因此不利于获得大量细胞，A错误。]
6．B [动物细胞培养需要用胰蛋白酶处理，但植物组织培养过程不需要用胰蛋白酶处理，B错误。]
7．C
8．C [过程③主要涉及体内受精和从输卵管中冲取胚胎，C错误。]
9．D
10．D [生物武器种类包括致病菌、病毒、生化毒剂以及经过基因重组的致病菌等，不包括干扰素，D错误。]
11．(1)λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等 (2)从基因文库中获取、用PCR技术扩增 (3)为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来(合理即可) (4)农杆菌中Ti质粒上的T－DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上(合理即可) (5)③④ 杂菌会竞争培养基中的营养物质，还可能产生有毒有害物质 不一定 农杆菌不一定感染外植体的每个细胞，从而使每个细胞的染色体都整合了目的基因(合理即可)
解析 (3)标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。(4)农杆菌中Ti质粒上的T－DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上。根据农杆菌的这种特点，如果将目的基因插入到Ti质粒的T－DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以使目的基因进入植物细胞，并将其插入到植物细胞染色体的DNA上，使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。(5)含有基因A的外植体(油菜的下胚轴)经过植物组织培养技术(图中的③④)，最终可获得转基因油菜。杂菌会竞争培养基中的营养物质，还可能产生有毒有害物质，导致培养失败，因此，植物组织培养的全过程都需要处于无菌的环境条件下。农杆菌不一定感染外植体的每个细胞，从而使每个细胞的染色体都整合了目的基因，因此，还需要对培养出来的植物进行检测与鉴定，最终筛选出目标植物。
12．(1)氢键 热稳定DNA聚合酶(或Taq酶)、引物、原料、加热(答出三点即可) (2)少量的mRNA就可以迅速合成大量的蛋白质
(3)遵循碱基互补配对原则 内含子 A—U (4)RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录
解析 (2)多聚核糖体的存在使少量的mRNA就可以迅速合成大量的蛋白质。(3)由于mRNA分子是以DNA分子的一条链为模板转录形成的，因此mRNA能与特定的单链DNA分子杂交，其杂交的原理是遵循碱基互补配对原则，形成游离的凸环的原因是DNA中含有非编码的DNA片段，即内含子，mRNA分子中没有与其互补的碱基序列，DNA与mRNA形成的双链分子中碱基配对类型有3种，分别是A—U、T—A、G—C，与DNA复制相比，特有的是A—U。
13．(1)鸡干扰素基因两端的部分核苷酸序列 GAATTC GGATCC 1 不相同 (2)复制原点 Ca2＋ (3)反(逆)转录 鸡干扰素基因未能导入烟草愈伤组织细胞或导入烟草愈伤组织细胞的鸡干扰素基因未能转录或鸡干扰素的mRNA已经被水解
14．(1)获能 透明带反应、卵细胞膜反应 (2)显微注射技术 外源基因插入牛受精卵中的DNA上后导致受精卵内生命活动必需的某些基因不能表达(合理即可) (3)囊胚腔、内细胞团 (4)胚胎移植 囊胚或桑椹胚
15．(1)浆细胞 乙、丙 无限增殖、能产生特异性抗体 (2)T细胞表面有HIV结合的特异性受体 (3)基因表达载体的构建 启动子和终止子 (4)转录 (5)蛋白质工程
解析 (1)据题图分析可知，甲为HIV自愈者免疫细胞与骨髓瘤细胞融合后形成的细胞，该杂交瘤细胞最终产生了抗体，说明HIV自愈者免疫细胞为浆细胞；由上述分析可知，甲、乙、丙中只含杂交瘤细胞的是乙、丙；②过程的目的是筛选具有无限增殖、能产生特异性抗体特点的杂交瘤细胞。(3)基因工程共有四步操作，其中第二步基因表达载体的构建是关键步骤；为使目的基因在受体细胞中正常表达，需要把目的基因片段插入表达载体的启动子与终止子之间。(4)目的基因的检测与鉴定可分为分子水平与个体生物学水平的检测两类方法，其中用DNA—RNA分子杂交技术可确定目的基因是否完成了转录过程。(5)根据题意分析，D蛋白的第31位的色氨酸替换成酪氨酸后，就能与HIV表面的糖蛋白结合，从而使HIV失去侵染T细胞的能力，该过程从预测蛋白质的结构到合成目的基因，再到合成相关的蛋白质预防艾滋病，属于蛋白质工程。
16．(1)促性腺激素 (2)透明带 桑椹胚 (3)卵细胞膜 透明带
解析 (1)胚胎移植时多采用多胚胎移植，因此需要进行超数排卵处理，超数排卵处理的做法是给供体注射促性腺激素，母体一次排出比自然情况下多几倍到十几倍的卵子，用于体外受精和早期胚胎培养。(2)胚胎发育的早期有一段时间是在透明带中进行的，这一时期称为卵裂期。受精卵经72小时体外培养发育成有32个细胞左右的胚胎，叫做桑椹胚，桑椹胚细胞均具有全能性，可用于胚胎移植。(3)卵母细胞经过减数第一次分裂后，产生了第一极体，在去除卵母细胞的细胞核时，可用微型吸管把位于卵细胞膜和透明带之间的第一极体一并吸出。
17．(1)相互接触 接触抑制 单(或一) 胰蛋白酶(或胶原蛋白酶) (2)衰老甚至死亡 不死性 降低 减少 (3)活细胞的细胞膜具有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内(或死细胞的细胞膜丧失了选择透过性，大分子染料能够进入死细胞内而着色) (4)中 (5)冷冻(或超低温、液氮) 酶 新陈代谢
18．(1)部分基因文库 要有一段已知目的基因的核苷酸(碱基)序列 延伸 (2)乳腺蛋白基因 显微注射 早期胚胎培养、胚胎移植 (3)导入的目的基因未能表达或目的基因与载体反向连接
解析 (1)图示中生长激素基因是通过以mRNA为模板反(逆)转录形成的，故为部分基因文库。PCR技术是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术，利用PCR技术扩增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便合成引物；利用PCR扩增目的基因的过程由高温变性(90～95 ℃)、低温复性(55～60 ℃)、适温延伸(70～75 ℃)三个步骤构成一个循环。(2)过程②为基因表达载体的构建，若要人的生长激素基因在牛的乳腺细胞中表达并随乳汁分泌出来，需要将人的生长激素基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起构建重组质粒。将目的基因导入动物细胞常用显微注射技术。将导入目的基因的受精卵在体外利用早期胚胎培养技术培养形成早期胚胎，并利用胚胎移植技术将早期胚胎移植入母牛体内孕育成转基因个体。(3)由于构建基因表达载体时载体不一定和目的基因结合，以及在结合目的基因时可能与载体进行了反向结合，所以尽管在导入目的基因后检测到了受体细胞中含有载体，但这样的受体细胞中并不会形成目的基因的产物。综上分析，若该转基因牛进入泌乳期后，其分泌的乳汁中并未含有人的生长激素，可能的原因是导入的目的基因未能表达或目的基因与载体反向连接。
19．(1)限制性核酸内切酶(或限制酶)和DNA连接酶 全能性强 (2)内细胞团 胰蛋白酶(或胶原蛋白酶) 细胞贴壁 (3)PKU基因正确整合(或PKU基因定点整合) 在含有G418的培养液中培养时，不含ner的细胞全部死亡，含有PKU基因的细胞可以存活下来；在含有G418和DHPG的培养液中培养时，错误整合的细胞因含HSV－tk而死亡 (4)不患苯丙酮尿症
解析 (1)构建重组载体时，要用到基因的“剪刀”限制酶和基因的“针线”DNA连接酶。胚胎干细胞全能性强，可大量增殖，因此能作为转基因技术的受体细胞。(2)胚胎干细胞来源于早期胚胎或原始性腺，可以从囊胚中的内细胞团得到。分散成单个细胞需要用到胰蛋白酶和胶原蛋白酶。在动物细胞培养过程中，会出现细胞贴壁和接触抑制的现象。(3)根据题意可知，含标记基因ner的细胞具有抗G418的功能，因此不含ner的胚胎干细胞，不能在含有G418的培养液中生存；若基因错误整合，至少有一个HSV－tk与ner一起整合到染色体DNA中，形成含有HSV－tk和ner的胚胎干细胞，HSV－tk的产物能将DHPG转化为有毒物质而使胚胎干细胞死亡。则在含有G418的培养液中培养时，不含有ner的细胞全部死亡，含有PKU基因的细胞可以存活下来；在含有G418和DHPG的培养液中培养时，错误整合的细胞因含HSV－tk而死亡。因此，经过双重选择存活下来的都是正确互换、整合成功的细胞。(4)转基因是否成功，最后还需要进行个体生物学水平上的检测，若小鼠没有表现出患苯丙酮尿症，即可说明PKU基因成功表达。
20．(1)无机盐 光合作用 (2)城市环境 整体性原理、物质循环再生原理等 (3)4 一组只栽种菰，一组只栽种菖蒲，一组混合栽种等量的菰和菖蒲，一组不栽植物作空白对照 (4)相等且足够多 (5)污水中N、P含量的变化(或污水中N、P的去除率) 两种植物不论单独种植还是等量混合种植，净化效果均明显高于对照组(菖蒲对磷的去除效果明显高于菰和混合种植)解析 (1)人工浮床的原理就是利用浮床植物发达的根系吸附大量悬浮物，并靠根系表面的微生物净化水中的污染物，其次浮床植物在生长过程中还能利用水中的氮、磷污染物；另外，人工浮床通过遮光作用来抑制水体中藻类的生长繁殖，可有效防止“水华”发生。(2)题中是对次级河流水质(如生活污水)的净化处理，为城市环境生态工程，它需对自然、经济、社会三者进行综合考虑，遵循整体性原理；废弃物得到循环利用，遵循物质循环再生原理；如果增加植物栽种的多样性，则又遵循物种多样性原理；在栽种植物时，要考虑生物与无机环境之间的协调和平衡发展，遵循协调与平衡原理。(4)每一实验组的植物数量应相等，且数量足够多，避免因统计误差对实验结果造成影响。处理
总氮(TN)
总磷(TP)
对照
42.6
38.8
菰
92.8
83.9
菖蒲
92.7
94.3
混合
94.9
84.7