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高中生物人教版 (新课标)选修1《生物技术实践》课题1 微生物的实验室培养随堂练习题
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这是一份高中生物人教版 (新课标)选修1《生物技术实践》课题1 微生物的实验室培养随堂练习题，共10页。试卷主要包含了5 g，25 g等内容，欢迎下载使用。
专题2 微生物的培养与应用
课题1 微生物的实验室培养
基础过关练
题组一 培养基
1.不同培养基的具体配方不同,但一般都含有( )
A.水、蛋白质和维生素
B.碳源和氮源
C.水、碳源、氮源和无机盐
D.磷元素、硫元素、钾元素、镁元素
2.(2020全国高二期中)培养细菌可以使用试管斜面培养基,其流程是:计算→称量→溶化→分装→灭菌→搁置斜面。下表是牛肉膏蛋白胨培养基的部分成分列表,以下说法错误的是( )
A.若用此培养基观察细菌菌落状况,还需加入凝固剂
B.蛋白胨在此培养基中只能提供氮源
C.培养基配制好后,分装前应进行的工作是调节pH
D.培养基凝固前搁置斜面的目的是扩大接种面积
题组二 无菌技术
3.微生物的实验室培养要进行严格的灭菌和消毒,以下理解不正确的是( )
A.灭菌能杀死物体内外所有的微生物的细胞、芽孢和孢子
B.任何消毒方法一般都不能消灭微生物的孢子和芽孢
C.灼烧法灭菌主要对象是金属器具,也可以是玻璃器具
D.常用灭菌方法有灼烧灭菌、高压蒸汽灭菌和紫外线灭菌
4.无菌技术包括以下几个方面的叙述,其中正确的是( )
A.紫外线照射前,适量喷洒石炭酸等消毒液,可以加强消毒效果
B.高压灭菌加热结束时,打开排气阀使压力表指针回到零后,开启锅盖
C.为了防止污染,接种环经灼烧灭菌后应趁热快速挑取菌落
D.在微生物接种的实验中,用酒精对实验者的双手和超净工作台进行消毒
题组三 牛肉膏蛋白胨固体培养基的制备
5.(2020辽宁沈阳铁路实验中学高二期中)关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述错误的是( )
①将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯溶解
②等培养基冷却至40 ℃左右时进行倒平板
③待平板冷却凝固5~10 min后将平板倒过来放置
④操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌
⑤牛肉膏和蛋白胨都能提供碳源、氮源、磷酸盐、维生素
A.①④⑤B.②③④C.①②③D.②④⑤
题组四 大肠杆菌的纯化
6.如图表示小方同学在实验室培养大肠杆菌过程中的部分操作,下列说法错误的是( )
A.①②③步骤需要在酒精灯火焰旁操作
B.培养基中必须含碳源、氮源、无机盐和水
C.③步骤接种环多方向划线是为了便于分离菌种
D.接种结束后,将④正放入培养箱中培养
7.沙门氏菌是一类常见的食品致病菌,可使人得肠胃炎、伤寒等,食品安全法要求其限量值为0,即样品中不得检出这类致病菌,现在检测某批次的火腿肠中是否含有沙门氏菌,要先用到1号培养基。请回答下列问题:
(1)抽取火腿肠检测样品要遵循 原则。1号培养基从物理性质上看属于 培养基;检测样品要先用1号培养基培养,目的是 。
(2)如图 (填“A”或“B”)表示采用平板划线法分离细菌,操作时,接种环通过 灭菌,在做第二次及以后的划线操作时,总是从上一次划线的末端开始划线,这样做的目的是 。
(3)接种好的培养皿在恒温箱中培养时要 (填“正”或“倒”)置,目的是 。培养基上产生的单个菌落在生态学中被称为 。
题组五 菌种保存
8.下列有关菌种保藏的叙述中,错误的是( )
A.频繁使用的菌种,可用固体斜面培养基保藏在4 ℃的冰箱中
B.临时保藏菌种的培养基不需要定期更换
C.长期保藏的菌种,需要降低代谢和变异发生的概率
D.长期保藏菌种时,可各取1 mL灭菌甘油和培养菌液混合后保存在冷冻箱中
能力提升练
一、选择题
1.()甲、乙、丙是三种微生物,下表Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ是用来培养微生物的三种培养基。甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生长繁殖;甲能在Ⅰ中正常生长繁殖,而乙和丙都不能;乙能在Ⅱ中正常生长繁殖,甲、丙都不能。下列说法正确的是( )
A.甲、乙、丙都是异养微生物
B.甲是固氮微生物,乙是自养微生物,丙是异养微生物
C.甲、乙都是自养微生物,丙是异养微生物
D.甲是异养微生物,乙是固氮微生物,丙是自养微生物
2.()下列关于平板划线法纯化大肠杆菌过程中各种“目的”的叙述,错误的是( )
A.第一次划线前灼烧接种环的目的是杀死接种环上原有的微生物
B.在火焰旁进行接种的目的是防止低温抑制酶活性而影响大肠杆菌的生命活动
C.最后一次划线结束后灼烧接种环的目的是杀死接种环上残存的菌种,避免污染环境和感染操作者
D.在第二次及以后划线时,总是从上一次划线的末端开始,这样做的目的是获得单菌落
3.(2019湖北孝感高二期中,)含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶,原因是( )
A.抗生素呈碱性,会与乳酸发生中和反应
B.抗生素能杀死或抑制乳酸菌的生长
C.抗生素能够抑制酵母菌的生长
D.抗生素在酸性环境中会被分解破坏
4.(2019上海黄浦高考二模,)硝化细菌广泛存在于通气性较好的土壤中,其部分代谢反应如图所示,下列关于硝化细菌的培养条件的描述正确的是( )
A.碳源为葡萄糖B.培养时需隔绝空气
C.氮源是氨气D.培养时需冷藏
5.(2019贵州遵义南白中学高二联考,)下列关于微生物培养与应用的说法,正确的是( )
A.从醋酸菌和酵母菌的混合菌种中选择酵母菌可用pH<7的培养基
B.从酵母菌和乳酸菌的混合菌种中选择乳酸菌可在培养基中加入青霉素
C.接种前需要对培养基、培养皿、实验操作者的双手等进行严格的灭菌处理
D.涂布器的灭菌是将涂布器末端用体积分数为70%的酒精浸泡后在酒精灯上引燃
6.()下列有关无菌技术的说法中,正确的有几项( )
①无菌技术的关键是杀灭实验室中所有的微生物
②煮沸消毒法中,在100 ℃煮沸5~6分钟可以杀死微生物细胞和所有芽孢、孢子
③经巴氏消毒法处理的食品因微生物未被彻底消灭,所以不能在常温条件下长期保存
④高压蒸汽灭菌时若不将锅内冷空气排出则达不到预期的灭菌效果
⑤将接种环直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧,可以迅速彻底地灭菌
⑥无菌技术中,若处理对象为液体,则只能消毒,不能灭菌
A.2项B.3项C.4项D.5项
7.()图甲是稀释涂布平板法中的部分操作,图乙是平板划线法操作的结果。
下列相关叙述中,错误的是( )
A.甲中涂布前要将涂布器灼烧,冷却后才能进行涂布
B.对于浓度较高的菌液,如果甲中的稀释倍数仅为102,则所得的菌落不是由单一的细胞或孢子繁殖而成的
C.乙中培养皿中所得的菌落都符合要求
D.乙中除第一次外,划线的起点是上一次划线的末端
二、非选择题
8.(2020福建高三上期末,)根据“利用牛肉膏蛋白胨固体培养基进行大肠杆菌的纯化培养”实验。请回答下列问题:
(1)利用牛肉膏蛋白胨固体培养基培养大肠杆菌时,牛肉膏可以提供 、 、磷酸盐和维生素等营养物质。配制培养基时,各种成分在溶化后分装前必须进行 。
(2)获得纯净的培养物的关键是 。
倒平板时将锥形瓶的瓶口通过火焰的目的是 。
(3)如图采用的接种方法是 ,在2、3、4、5区域内划线接种,总是从上一次划线的末端开始划线是因为线条末端细菌的数目比线条起始处要 ,每次从上一次划线的末端开始,能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少,最终得到 ,划线结束后灼烧接种环的目的是 。接种后培养基平板应 于恒温箱中培养。
答案全解全析
专题2 微生物的培养与应用
课题1 微生物的实验室培养
基础过关练
1.C 培养基的基本成分为碳源、氮源、水和无机盐,C符合题意。
2.B 菌落是微生物在固体培养基上繁殖而来的子细胞群体,因此,若用此培养基观察细菌菌落状况,还需加入凝固剂,A正确;蛋白胨在此培养基中能提供氮源,也能提供碳源,B错误;培养基配制好后,分装前需要根据要培养的微生物调节pH,C正确;培养基需要在凝固前搁置斜面,其目的是扩大接种面积,D正确。
3.D 灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子,A正确;消毒是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物,不包括芽孢和孢子,B正确;灼烧灭菌法主要对象是金属器具,也可以是玻璃器具,C正确;常用灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌,D错误。
4.A 用紫外线照射30 min,可以杀死物体表面或空气中的微生物,在照射前,适量喷洒石炭酸等消毒液,可以加强消毒效果,A正确;高压灭菌加热结束时,待压力表指针回到零后,才能打开排气阀,再开启锅盖,B错误;为了防止污染,接种环经灼烧灭菌、冷却后才能挑取菌落,C错误;在微生物接种的实验中,一般用酒精对实验者的双手进行消毒,用紫外线照射30 min对超净工作台进行消毒,D错误。
5.D 将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯,加入少量的水,加热,①正确;待培养基冷却至50 ℃左右时,在酒精灯火焰附近倒平板,②错误;待平板冷却凝固约5~10 min后,将平板倒过来放置,使皿盖在下,皿底在上,③正确;制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序为计算、称量、溶化、灭菌、倒平板,④错误;蛋白胨不能提供磷酸盐,⑤错误。
6.D ①②③步骤依次表示倒平板、用接种环沾取菌液、进行平板划线,为了防止被杂菌污染,操作时都需要在酒精灯火焰旁进行,A正确;水、碳源、氮源和无机盐都是大肠杆菌生长所需的基本营养,所以培养基中必须含碳源、氮源、无机盐和水,B正确;③步骤接种环多方向划线是为了分离菌种,C正确;④步骤是培养,接种结束后,将平板倒置,放入培养箱中培养,防止冷凝水落入培养基造成污染,D错误。
7.答案 (1)随机性 液体 增加沙门氏菌(目的菌)的浓度 (2)B 灼烧 将聚集的菌体逐步稀释,以便获得单个菌落 (3)倒 防止冷凝水滴落在培养基上 种群
解析 (1)抽样检测样品时,要遵循随机取样原则。1号培养基中未加入凝固剂,从物理性质上看属于液体培养基;检测样品要先用1号培养基培养,目的是增加沙门氏菌(目的菌)的浓度。(2)图中B采用的是平板划线法分离细菌,接种过程要在酒精灯火焰附近进行,接种环通过灼烧灭菌,第二次及以后的划线操作,总是从上一次划线末端开始,目的是每一次划线都可以将聚集的菌体逐步稀释,最终获得单个菌落。(3)接种好的培养皿在恒温箱中培养时要倒置培养,防止冷凝水滴落在培养基上造成杂菌污染,培养基上产生的单个菌落在生态学中被称为种群。
8.B 频繁使用的菌种,可用固体斜面培养基保藏在4 ℃的冰箱中,A正确;临时保藏菌种的培养基需要每3~6个月定期更换一次,B错误;长期保藏的菌种,需要降低代谢和变异发生的概率,C正确;长期保藏菌种时,可各取1 mL灭菌甘油和培养菌液混合后保存在冷冻箱中,D正确。
能力提升练
一、选择题
1.B 培养基Ⅰ没有氮源,能生长的为固氮微生物,培养基Ⅱ无有机碳源,能在其上生长的为自养型微生物,培养基Ⅲ含有各种基本成分,大多数微生物都能生长;甲可在培养基Ⅰ中正常生长,故甲是固氮微生物,乙可在培养基Ⅱ中生长,故乙是自养微生物,丙只能在培养基Ⅲ中生长,氮源、碳源等都需要,因此丙是异养微生物,B正确。
2.B 接种前用火焰灼烧接种环,目的是避免接种环上可能存在的微生物污染培养物,A正确;在火焰旁进行接种的目的是防止杂菌污染,B错误;最后一次划线结束后灼烧接种环的目的是杀死接种环上残存的菌种,避免污染环境和感染操作者,C正确;在第二次及以后划线时,总是从上一次划线的末端开始,这样做的目的是使聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面,最后得到由单个细菌繁殖而来的菌落,D正确。
3.B 抗生素多是一些带有环状碳链的化学物质,不会与乳酸发生中和反应,A不符合题意;乳酸菌属于细菌,对抗生素敏感,抗生素能够杀死或抑制乳酸菌的生长,所以含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶,B符合题意;细菌对抗生素敏感,真菌对抗生素不敏感,且酸奶的制作与酵母菌无关,C不符合题意;含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶不是因为抗生素在酸性环境中会被分解破坏,D不符合题意。
4.C 土壤中的硝化细菌属于自养生物,能进行化能合成作用,培养基中不需要有机碳源,A错误;硝化细菌能利用NH3氧化释放的能量把二氧化碳和水合成有机物,所以培养时不能隔绝空气,且该过程需要酶的催化作用,故培养时需要适宜的温度,B、D错误;硝化细菌的培养过程中氮源是氨气,C正确。
5.D 醋酸菌和酵母菌都具有一定的耐酸性,所以不能用pH<7的培养基从醋酸菌和酵母菌的混合菌种中选择出酵母菌,A错误;青霉素可抑制细菌细胞壁的合成,故培养基中加入青霉素后乳酸菌不能生长,B错误;实验操作者的双手应进行消毒处理,C错误;涂布器的灭菌是将涂布器末端用体积分数为70%的酒精浸泡后在酒精灯上引燃,D正确。
6.B 无菌技术的关键是采用消毒或灭菌的方法消灭微生物,防止杂菌污染,并非杀灭实验室中所有的微生物,①错误;煮沸消毒法中,在100 ℃煮沸5~6分钟可以杀死微生物细胞和一部分芽孢,②错误;经巴氏消毒法处理的食品因微生物未被彻底消灭,所以不能在常温条件下长期保存,③正确;在使用高压蒸汽灭菌锅灭菌时,若不将锅内冷空气排出则达不到预期的灭菌效果,④正确;酒精灯火焰的充分燃烧层温度高,将接种环直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧,可以迅速彻底地灭菌,⑤正确;无菌技术中,若处理对象为液体,可消毒,也可灭菌,⑥错误。故选B。
7.C 灼烧后的涂布器如果没有冷却就接触菌种,会将菌体杀死,A正确;对于浓度较高的菌液,如果甲中的稀释倍数仅为102,则所得的菌落不是由单一的细胞或孢子繁殖而成的,B正确;平板划线的过程中,一般最后一次划线的末端处形成的菌落才是由单一细胞或孢子繁殖而成的,这种菌落才符合要求,C错误;连续划线中,除了第一次划线外,每一次划线的起点都是上一次划线的末端,其目的是使菌体的密度越来越小,保证最后划线末端处的菌落是由单一细胞或孢子繁殖而成的,D正确。
二、非选择题
8.答案 (1)碳源 氮源 调节pH (2)防止外来杂菌入侵 通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基 (3)平板划线法 少 由单个细菌繁殖而来的菌落 及时杀死接种环上残留的菌种,避免污染环境和感染操作者 倒置
解析 (1)牛肉膏可以提供碳源、氮源、磷酸盐和维生素等营养物质,各种成分在溶化后分装前必须进行调节pH。(2)获得纯净的培养物的关键是防止外来杂菌入侵,倒平板时将锥形瓶的瓶口通过火焰的目的是通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基。(3)题图采用的接种方法是平板划线法,平板划线法分离细菌过程中,由于线条末端细菌的数目比线条起始处要少,在第二次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端开始划线,这样做的目的是将聚集的菌体逐步稀释,以便获得由单个细菌繁殖而来的菌落。划线结束后灼烧接种环的目的是及时杀死接种环上残留的菌种,避免污染环境和感染操作者,接种后培养基平板应倒置于恒温箱中培养。
成分
牛肉膏
蛋白胨
NaCl
H2O
含量
0.5 g
1 g
0.5 g
100 mL
1号培养基
成分
含量(/1 000 mL)
牛肉膏
5 g
蛋白胨
5 g
三号胆盐
3.5 g
柠檬酸钠
8.5 g
煌绿
0.000 33 g
乳糖
10 g
三号胆盐、柠檬酸钠和煌绿可抑制大多数菌群,但不影响沙门氏菌的生长
粉状硫
10 g
K2HPO4
4 g
FeSO4
0.5 g
蔗糖
10 g
(NH4)2SO4
0.4g
H2O
100 mL
MgSO4
9.25 g
CaCl2
0.5 g
I
+
+
+
+
-
+
+
+
Ⅱ
+
+
+
-
+
+
+
+
Ⅲ
+
+
+
+
+
+
+
+
1.C
2.B
3.D
4.A
5.D
6.D
8.B
1.B
2.B
3.B
4.C
5.D
6.B
7.C
专题2 微生物的培养与应用
课题1 微生物的实验室培养
基础过关练
题组一 培养基
1.不同培养基的具体配方不同,但一般都含有( )
A.水、蛋白质和维生素
B.碳源和氮源
C.水、碳源、氮源和无机盐
D.磷元素、硫元素、钾元素、镁元素
2.(2020全国高二期中)培养细菌可以使用试管斜面培养基,其流程是:计算→称量→溶化→分装→灭菌→搁置斜面。下表是牛肉膏蛋白胨培养基的部分成分列表,以下说法错误的是( )
A.若用此培养基观察细菌菌落状况,还需加入凝固剂
B.蛋白胨在此培养基中只能提供氮源
C.培养基配制好后,分装前应进行的工作是调节pH
D.培养基凝固前搁置斜面的目的是扩大接种面积
题组二 无菌技术
3.微生物的实验室培养要进行严格的灭菌和消毒,以下理解不正确的是( )
A.灭菌能杀死物体内外所有的微生物的细胞、芽孢和孢子
B.任何消毒方法一般都不能消灭微生物的孢子和芽孢
C.灼烧法灭菌主要对象是金属器具,也可以是玻璃器具
D.常用灭菌方法有灼烧灭菌、高压蒸汽灭菌和紫外线灭菌
4.无菌技术包括以下几个方面的叙述,其中正确的是( )
A.紫外线照射前,适量喷洒石炭酸等消毒液,可以加强消毒效果
B.高压灭菌加热结束时,打开排气阀使压力表指针回到零后,开启锅盖
C.为了防止污染,接种环经灼烧灭菌后应趁热快速挑取菌落
D.在微生物接种的实验中,用酒精对实验者的双手和超净工作台进行消毒
题组三 牛肉膏蛋白胨固体培养基的制备
5.(2020辽宁沈阳铁路实验中学高二期中)关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述错误的是( )
①将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯溶解
②等培养基冷却至40 ℃左右时进行倒平板
③待平板冷却凝固5~10 min后将平板倒过来放置
④操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌
⑤牛肉膏和蛋白胨都能提供碳源、氮源、磷酸盐、维生素
A.①④⑤B.②③④C.①②③D.②④⑤
题组四 大肠杆菌的纯化
6.如图表示小方同学在实验室培养大肠杆菌过程中的部分操作,下列说法错误的是( )
A.①②③步骤需要在酒精灯火焰旁操作
B.培养基中必须含碳源、氮源、无机盐和水
C.③步骤接种环多方向划线是为了便于分离菌种
D.接种结束后,将④正放入培养箱中培养
7.沙门氏菌是一类常见的食品致病菌,可使人得肠胃炎、伤寒等,食品安全法要求其限量值为0,即样品中不得检出这类致病菌,现在检测某批次的火腿肠中是否含有沙门氏菌,要先用到1号培养基。请回答下列问题:
(1)抽取火腿肠检测样品要遵循 原则。1号培养基从物理性质上看属于 培养基;检测样品要先用1号培养基培养,目的是 。
(2)如图 (填“A”或“B”)表示采用平板划线法分离细菌,操作时,接种环通过 灭菌,在做第二次及以后的划线操作时,总是从上一次划线的末端开始划线,这样做的目的是 。
(3)接种好的培养皿在恒温箱中培养时要 (填“正”或“倒”)置,目的是 。培养基上产生的单个菌落在生态学中被称为 。
题组五 菌种保存
8.下列有关菌种保藏的叙述中,错误的是( )
A.频繁使用的菌种,可用固体斜面培养基保藏在4 ℃的冰箱中
B.临时保藏菌种的培养基不需要定期更换
C.长期保藏的菌种,需要降低代谢和变异发生的概率
D.长期保藏菌种时,可各取1 mL灭菌甘油和培养菌液混合后保存在冷冻箱中
能力提升练
一、选择题
1.()甲、乙、丙是三种微生物,下表Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ是用来培养微生物的三种培养基。甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生长繁殖;甲能在Ⅰ中正常生长繁殖,而乙和丙都不能;乙能在Ⅱ中正常生长繁殖,甲、丙都不能。下列说法正确的是( )
A.甲、乙、丙都是异养微生物
B.甲是固氮微生物,乙是自养微生物,丙是异养微生物
C.甲、乙都是自养微生物,丙是异养微生物
D.甲是异养微生物,乙是固氮微生物,丙是自养微生物
2.()下列关于平板划线法纯化大肠杆菌过程中各种“目的”的叙述,错误的是( )
A.第一次划线前灼烧接种环的目的是杀死接种环上原有的微生物
B.在火焰旁进行接种的目的是防止低温抑制酶活性而影响大肠杆菌的生命活动
C.最后一次划线结束后灼烧接种环的目的是杀死接种环上残存的菌种,避免污染环境和感染操作者
D.在第二次及以后划线时,总是从上一次划线的末端开始,这样做的目的是获得单菌落
3.(2019湖北孝感高二期中,)含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶,原因是( )
A.抗生素呈碱性,会与乳酸发生中和反应
B.抗生素能杀死或抑制乳酸菌的生长
C.抗生素能够抑制酵母菌的生长
D.抗生素在酸性环境中会被分解破坏
4.(2019上海黄浦高考二模,)硝化细菌广泛存在于通气性较好的土壤中,其部分代谢反应如图所示,下列关于硝化细菌的培养条件的描述正确的是( )
A.碳源为葡萄糖B.培养时需隔绝空气
C.氮源是氨气D.培养时需冷藏
5.(2019贵州遵义南白中学高二联考,)下列关于微生物培养与应用的说法,正确的是( )
A.从醋酸菌和酵母菌的混合菌种中选择酵母菌可用pH<7的培养基
B.从酵母菌和乳酸菌的混合菌种中选择乳酸菌可在培养基中加入青霉素
C.接种前需要对培养基、培养皿、实验操作者的双手等进行严格的灭菌处理
D.涂布器的灭菌是将涂布器末端用体积分数为70%的酒精浸泡后在酒精灯上引燃
6.()下列有关无菌技术的说法中,正确的有几项( )
①无菌技术的关键是杀灭实验室中所有的微生物
②煮沸消毒法中,在100 ℃煮沸5~6分钟可以杀死微生物细胞和所有芽孢、孢子
③经巴氏消毒法处理的食品因微生物未被彻底消灭,所以不能在常温条件下长期保存
④高压蒸汽灭菌时若不将锅内冷空气排出则达不到预期的灭菌效果
⑤将接种环直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧,可以迅速彻底地灭菌
⑥无菌技术中,若处理对象为液体,则只能消毒,不能灭菌
A.2项B.3项C.4项D.5项
7.()图甲是稀释涂布平板法中的部分操作,图乙是平板划线法操作的结果。
下列相关叙述中,错误的是( )
A.甲中涂布前要将涂布器灼烧,冷却后才能进行涂布
B.对于浓度较高的菌液,如果甲中的稀释倍数仅为102,则所得的菌落不是由单一的细胞或孢子繁殖而成的
C.乙中培养皿中所得的菌落都符合要求
D.乙中除第一次外,划线的起点是上一次划线的末端
二、非选择题
8.(2020福建高三上期末,)根据“利用牛肉膏蛋白胨固体培养基进行大肠杆菌的纯化培养”实验。请回答下列问题:
(1)利用牛肉膏蛋白胨固体培养基培养大肠杆菌时,牛肉膏可以提供 、 、磷酸盐和维生素等营养物质。配制培养基时,各种成分在溶化后分装前必须进行 。
(2)获得纯净的培养物的关键是 。
倒平板时将锥形瓶的瓶口通过火焰的目的是 。
(3)如图采用的接种方法是 ,在2、3、4、5区域内划线接种,总是从上一次划线的末端开始划线是因为线条末端细菌的数目比线条起始处要 ,每次从上一次划线的末端开始,能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少,最终得到 ,划线结束后灼烧接种环的目的是 。接种后培养基平板应 于恒温箱中培养。
答案全解全析
专题2 微生物的培养与应用
课题1 微生物的实验室培养
基础过关练
1.C 培养基的基本成分为碳源、氮源、水和无机盐,C符合题意。
2.B 菌落是微生物在固体培养基上繁殖而来的子细胞群体,因此,若用此培养基观察细菌菌落状况,还需加入凝固剂,A正确;蛋白胨在此培养基中能提供氮源,也能提供碳源,B错误;培养基配制好后,分装前需要根据要培养的微生物调节pH,C正确;培养基需要在凝固前搁置斜面,其目的是扩大接种面积,D正确。
3.D 灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子,A正确;消毒是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物,不包括芽孢和孢子,B正确;灼烧灭菌法主要对象是金属器具,也可以是玻璃器具,C正确;常用灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌,D错误。
4.A 用紫外线照射30 min,可以杀死物体表面或空气中的微生物,在照射前,适量喷洒石炭酸等消毒液,可以加强消毒效果,A正确;高压灭菌加热结束时,待压力表指针回到零后,才能打开排气阀,再开启锅盖,B错误;为了防止污染,接种环经灼烧灭菌、冷却后才能挑取菌落,C错误;在微生物接种的实验中,一般用酒精对实验者的双手进行消毒,用紫外线照射30 min对超净工作台进行消毒,D错误。
5.D 将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯,加入少量的水,加热,①正确;待培养基冷却至50 ℃左右时,在酒精灯火焰附近倒平板,②错误;待平板冷却凝固约5~10 min后,将平板倒过来放置,使皿盖在下,皿底在上,③正确;制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序为计算、称量、溶化、灭菌、倒平板,④错误;蛋白胨不能提供磷酸盐,⑤错误。
6.D ①②③步骤依次表示倒平板、用接种环沾取菌液、进行平板划线,为了防止被杂菌污染,操作时都需要在酒精灯火焰旁进行,A正确;水、碳源、氮源和无机盐都是大肠杆菌生长所需的基本营养,所以培养基中必须含碳源、氮源、无机盐和水,B正确;③步骤接种环多方向划线是为了分离菌种,C正确;④步骤是培养,接种结束后,将平板倒置,放入培养箱中培养,防止冷凝水落入培养基造成污染,D错误。
7.答案 (1)随机性 液体 增加沙门氏菌(目的菌)的浓度 (2)B 灼烧 将聚集的菌体逐步稀释,以便获得单个菌落 (3)倒 防止冷凝水滴落在培养基上 种群
解析 (1)抽样检测样品时,要遵循随机取样原则。1号培养基中未加入凝固剂,从物理性质上看属于液体培养基;检测样品要先用1号培养基培养,目的是增加沙门氏菌(目的菌)的浓度。(2)图中B采用的是平板划线法分离细菌,接种过程要在酒精灯火焰附近进行,接种环通过灼烧灭菌,第二次及以后的划线操作,总是从上一次划线末端开始,目的是每一次划线都可以将聚集的菌体逐步稀释,最终获得单个菌落。(3)接种好的培养皿在恒温箱中培养时要倒置培养,防止冷凝水滴落在培养基上造成杂菌污染,培养基上产生的单个菌落在生态学中被称为种群。
8.B 频繁使用的菌种,可用固体斜面培养基保藏在4 ℃的冰箱中,A正确;临时保藏菌种的培养基需要每3~6个月定期更换一次,B错误;长期保藏的菌种,需要降低代谢和变异发生的概率,C正确;长期保藏菌种时,可各取1 mL灭菌甘油和培养菌液混合后保存在冷冻箱中,D正确。
能力提升练
一、选择题
1.B 培养基Ⅰ没有氮源,能生长的为固氮微生物,培养基Ⅱ无有机碳源,能在其上生长的为自养型微生物,培养基Ⅲ含有各种基本成分,大多数微生物都能生长;甲可在培养基Ⅰ中正常生长,故甲是固氮微生物,乙可在培养基Ⅱ中生长,故乙是自养微生物,丙只能在培养基Ⅲ中生长,氮源、碳源等都需要,因此丙是异养微生物,B正确。
2.B 接种前用火焰灼烧接种环,目的是避免接种环上可能存在的微生物污染培养物,A正确;在火焰旁进行接种的目的是防止杂菌污染,B错误;最后一次划线结束后灼烧接种环的目的是杀死接种环上残存的菌种,避免污染环境和感染操作者,C正确;在第二次及以后划线时,总是从上一次划线的末端开始,这样做的目的是使聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面,最后得到由单个细菌繁殖而来的菌落,D正确。
3.B 抗生素多是一些带有环状碳链的化学物质,不会与乳酸发生中和反应,A不符合题意;乳酸菌属于细菌,对抗生素敏感,抗生素能够杀死或抑制乳酸菌的生长,所以含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶,B符合题意;细菌对抗生素敏感,真菌对抗生素不敏感,且酸奶的制作与酵母菌无关,C不符合题意;含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶不是因为抗生素在酸性环境中会被分解破坏,D不符合题意。
4.C 土壤中的硝化细菌属于自养生物,能进行化能合成作用,培养基中不需要有机碳源,A错误;硝化细菌能利用NH3氧化释放的能量把二氧化碳和水合成有机物,所以培养时不能隔绝空气,且该过程需要酶的催化作用,故培养时需要适宜的温度,B、D错误;硝化细菌的培养过程中氮源是氨气,C正确。
5.D 醋酸菌和酵母菌都具有一定的耐酸性,所以不能用pH<7的培养基从醋酸菌和酵母菌的混合菌种中选择出酵母菌,A错误;青霉素可抑制细菌细胞壁的合成,故培养基中加入青霉素后乳酸菌不能生长,B错误;实验操作者的双手应进行消毒处理,C错误;涂布器的灭菌是将涂布器末端用体积分数为70%的酒精浸泡后在酒精灯上引燃,D正确。
6.B 无菌技术的关键是采用消毒或灭菌的方法消灭微生物,防止杂菌污染,并非杀灭实验室中所有的微生物,①错误;煮沸消毒法中,在100 ℃煮沸5~6分钟可以杀死微生物细胞和一部分芽孢,②错误;经巴氏消毒法处理的食品因微生物未被彻底消灭,所以不能在常温条件下长期保存,③正确;在使用高压蒸汽灭菌锅灭菌时,若不将锅内冷空气排出则达不到预期的灭菌效果,④正确;酒精灯火焰的充分燃烧层温度高,将接种环直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧,可以迅速彻底地灭菌,⑤正确;无菌技术中,若处理对象为液体,可消毒,也可灭菌,⑥错误。故选B。
7.C 灼烧后的涂布器如果没有冷却就接触菌种,会将菌体杀死,A正确;对于浓度较高的菌液,如果甲中的稀释倍数仅为102,则所得的菌落不是由单一的细胞或孢子繁殖而成的,B正确;平板划线的过程中,一般最后一次划线的末端处形成的菌落才是由单一细胞或孢子繁殖而成的,这种菌落才符合要求,C错误;连续划线中,除了第一次划线外,每一次划线的起点都是上一次划线的末端,其目的是使菌体的密度越来越小,保证最后划线末端处的菌落是由单一细胞或孢子繁殖而成的,D正确。
二、非选择题
8.答案 (1)碳源 氮源 调节pH (2)防止外来杂菌入侵 通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基 (3)平板划线法 少 由单个细菌繁殖而来的菌落 及时杀死接种环上残留的菌种,避免污染环境和感染操作者 倒置
解析 (1)牛肉膏可以提供碳源、氮源、磷酸盐和维生素等营养物质,各种成分在溶化后分装前必须进行调节pH。(2)获得纯净的培养物的关键是防止外来杂菌入侵,倒平板时将锥形瓶的瓶口通过火焰的目的是通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基。(3)题图采用的接种方法是平板划线法,平板划线法分离细菌过程中,由于线条末端细菌的数目比线条起始处要少,在第二次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端开始划线,这样做的目的是将聚集的菌体逐步稀释,以便获得由单个细菌繁殖而来的菌落。划线结束后灼烧接种环的目的是及时杀死接种环上残留的菌种,避免污染环境和感染操作者,接种后培养基平板应倒置于恒温箱中培养。
成分
牛肉膏
蛋白胨
NaCl
H2O
含量
0.5 g
1 g
0.5 g
100 mL
1号培养基
成分
含量(/1 000 mL)
牛肉膏
5 g
蛋白胨
5 g
三号胆盐
3.5 g
柠檬酸钠
8.5 g
煌绿
0.000 33 g
乳糖
10 g
三号胆盐、柠檬酸钠和煌绿可抑制大多数菌群,但不影响沙门氏菌的生长
粉状硫
10 g
K2HPO4
4 g
FeSO4
0.5 g
蔗糖
10 g
(NH4)2SO4
0.4g
H2O
100 mL
MgSO4
9.25 g
CaCl2
0.5 g
I
+
+
+
+
-
+
+
+
Ⅱ
+
+
+
-
+
+
+
+
Ⅲ
+
+
+
+
+
+
+
+
1.C
2.B
3.D
4.A
5.D
6.D
8.B
1.B
2.B
3.B
4.C
5.D
6.B
7.C
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