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人教版 (2019)选择性必修3一 动物细胞培养背景图课件ppt
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第2节 动物细胞工程
在治疗大面积烧伤时,通常采用的方法是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植。但对这样的病人来说,自体健康皮肤非常有限,使用他人皮肤来源又不足,而且会产生免疫排斥反应。
讨论:怎样才能获得大量的自体健康皮肤?能不能用自体皮肤的单个细胞培养出可供移植的皮肤?
可以从病人身上取少量正常、健康的皮肤在体外进行培养、扩增; 目前,科学家还在研究对皮肤干细胞进行培养,以获得适合临床上使用的人造皮肤;
从动物体中取出相关组织,将它们分散成单个细胞,然后在适宜的培养条件下,让这些细胞生长和增殖。
胚胎或幼龄动物的细胞较成体的细胞更易培养
动物细胞工程的基本技术
适宜的温度、pH和渗透压
糖类、氨基酸、无机盐、维生素等
1.动物细胞培养的条件
培养基的物理性质培养动物细胞一般使用_______ __,也称为______
思考题①为什么培养液需要定期更换? ____________________________________________②如何防止培养过程中的微生物污染? ____________________________________________
以便清除代谢物,防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害
在细胞培养液中添加一定量的抗生素
维持细胞正常的形态和功能
培养容器通常采用_______或____________
2.动物细胞培养的过程
重要概念 ①原代培养 通常将分瓶之前的细胞培养,即动物组织经处理后的初次培养称为原代培养;②传代培养 将分瓶后的细胞培养称为传代培养;③细胞贴壁 大多数体外培养的细胞需要贴附于某些基质表面才能生长增殖,这类细胞往往贴附在培养瓶的瓶壁上,这种现象称为细胞贴壁;④接触抑制 当贴壁细胞生长到表面相互接触时,细胞通常会停止分裂增殖;
1.取动物组织(1)取材动物胚胎或幼龄动物的组织、器官(2)取材原因
细胞分化程度低,增殖能力强,容易培养
2.制成细胞悬液(1)制成细胞悬液的步骤①将组织分散成单个细胞②用培养液将细胞制成细胞悬液(2)将组织分散成单个细胞的原因①从动物体取出的成块组织中,细胞与细胞靠在一起,彼此限制了生长和增殖;②能使细胞与培养液充分接触,更易进行物质交换(3)将细胞分散成单个细胞的方法①机械法②用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理一段时间
思考:1.用胰蛋白酶分散细胞,可以说明什么问题?2.可以用胃蛋白酶处理吗?为什么?3.酶解法较温和,一定不会对动物细胞造成损伤,对吗?
动物细胞间的物质主要是蛋白质
不可以;胃蛋白酶作用的适宜pH约为2,当pH大于6时,胃蛋白酶就会失去活性,多数动物细胞培养的适宜pH为7.2-7.4,胃蛋白酶在此环境中没有活性,所以用胃蛋白酶不行
不对;使用胰蛋白酶时,要控制好作用时间,因为胰蛋白酶不仅能分解细胞间的蛋白质,长时间作用还会分解细胞膜蛋白等,对细胞造成损伤。
3.原代培养(1)具体做法 将________放入_____________内(2)体外培养细胞的两大类 ①悬浮生长类 ②贴壁生长类
会因细胞密度过大、有害代谢物积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻
除受密度、有害代谢物、营养物质影响外,还会发生接触抑制
能够悬浮在培养液中生长增殖
大多数需要贴附于某些基质表面才能生长增殖(细胞贴壁)
资料:动物细胞生长特性
4.分瓶、传代培养(1)需分瓶进行传代培养的原因 (2)分瓶的具体做法 ①收集细胞 a.悬浮生长类 b.贴壁生长类 ②
悬浮培养的细胞会因细胞密度过大、有害代谢物积累和培养液中营养物质等因素而分裂受阻,贴壁细胞在生长增殖时,除受上述因素影响外,还会发生接触抑制现象
重新用胰蛋白酶等处理,使之分散成单个细胞,然后再用离心法收集
将收集的细胞制成细胞悬液,分瓶培养
机械法或胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理将组织分散成单个细胞
用培养液将细胞制成细胞悬液
一类细胞能够悬浮在培养液中生长增殖
大多数需要贴附于某些基质表面才能生长增殖
悬浮培养的细胞:直接用离心法收集
贴壁细胞:重新用胰蛋白酶等处理,使之分散成单个细胞,然后再用离心法收集
植物组织培养和动物细胞培养的比较
相同点:1.培养过程中细胞都进行有丝分裂,不涉及减数分裂;2.均需无菌操作,需要适宜的温度、pH等条件
用机械法或胰蛋白酶、胶原蛋白酶将组织细胞分散开
离体植物器官、组织、细胞
动物胚胎或幼龄动物的组织、器官
有机营养成分无机营养成分植物激素
糖类、氨基酸、无机盐、维生素等营养物质及一些天然成分如血清
1.培养过程中细胞都进行有丝分裂,不涉及减数分裂;2.均需无菌操作,需要适宜的温度、pH等条件
二、干细胞培养及其应用
干细胞:动物和人体内仍保留的少数具有分裂和分化能力的细胞。包括胚胎干细胞和成体干细胞等。
特点:具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞,并进一步形成机体的所有组织和器官甚至个体的潜能
特点:一般认为,成体干细胞具有组织特异性,只能分化成特定的细胞或组织,不具有发育成完整个体的能力
成体干细胞:存在于成体组织或器官内中
iPS细胞的培养和应用
iPS细胞(诱导多能干细胞)
将特定基因或特定蛋白导入细胞
用小分子化合物诱导形成
诱导多能干细胞优点:①诱导过程无需破坏胚胎②iPS细胞可以来源于病人自身的体细胞,将它移植回病人体内后,理论上可以避免免疫排斥反应
干细胞的应用 有着 能力及 潜能的干细胞,与 的 等密切相关;干细胞应用面临的问题存在________________
治疗白血病及一些恶性肿瘤放疗或化疗后引起的造血系统、免疫系统功能障碍等疾病
治疗神经组织损伤和神经系统退行性疾病(如帕金森病、阿尔茨海默病等)
可治疗小鼠的镰状细胞贫血症,在治疗阿尔兹海默病、心血管疾病等领域的研究也取得了新进展
体外诱导小鼠成纤维细胞
如:白血病、帕金森病、阿而茨海默病等
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