高中生物人教版 (2019)选择性必修3第2节 基因工程的基本操作程序说课课件ppt

这是一份高中生物人教版 (2019)选择性必修3第2节 基因工程的基本操作程序说课课件ppt，共26页。PPT课件主要包含了受精卵体细胞，受精卵，细胞个体，农杆菌转化法，基因枪法，花粉管通道法，显微注射技术，目的基因的检测与鉴定，没有抗虫基因的棉植株，有抗虫基因的棉植株等内容，欢迎下载使用。
动物细胞植物细胞原核细胞（大肠杆菌、土壤农杆菌等）
将目的基因导入受体细胞
针对不同的受体细胞，选用不同的方法。
在植物授粉后一定时间内，剪去柱头，将DNA溶液滴在花柱切面，使目的基因通过花粉管通道进入胚囊。
用微量注射器将含目的基因的DNA溶液直接注入子房中；
易感染双子叶植物和裸子植物；
内含Ti质粒，其上的T-DNA可转移至受体细胞的染色体DNA上。
目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。
将从叶片取下的圆形小片与农杆菌共培养，筛选转化细胞，再生成植株；
随转化方法的突破，用农杆菌侵染水稻 、玉米等单子叶植物也取得成功。
根据受体植物不同，具体转化方法有所区别
将花序浸没在含农杆菌的溶液中，培养植株并获得种子，再进行筛选、鉴定。
将含有目的基因的表达载体提纯
基因工程中，常用原核生物作为受体细胞。
1.繁殖周期短2.体积小易于培养操作3.多为单细胞，遗传物质相对较少4.经济实用
感受态细胞吸收DNA分子
重组表达载体与感受态细胞混合
用Ca2+处理成感受态细胞
例：科学家通过基因工程的方法，将苏云金芽孢杆菌的Bt毒蛋白基因转入普通棉株细胞内，并成功实现了表达，从而培育出了能抗棉铃虫的棉花植株——抗虫棉。其过程大致如图所示，请分析回答：
（1）Ti质粒是农杆菌中的一种质粒，其上有T-DNA，把目的基因插入Ti质粒的T-DNA中是利用T-DNA________ __________________________________________的特点。
至受体细胞并且整合到受体细胞染色体DNA上
（2）Bt 毒蛋白基因转入普通棉株细胞内并成功实现表达的过程，在基因工程中称为_________。（3）将目的基因导入受体细胞的方法有很多种，该题中涉及的是________________。
导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性呢？
目的基因的检测与鉴定的方法
①检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因
②检测目的基因是否转录出了mRNA
③检测目的基因是否翻译成蛋白质
方法：核酸分子杂交、PCR技术
方法：抗原-抗体杂交技术
接种试验，或采摘抗虫棉叶片饲喂棉铃虫等来确定Bt基因是否赋予了棉花抗虫特性及抗性的程度。
互补的核酸单链能够在一定条件下结合成双链，即能够进行杂交。这种结合是特异的，即严格按照碱基互补配对进行。
当用一段已知基因的核苷酸序列作为探针，与被测基因或mRNA进行接触，若两者的碱基完全配对成双链，则表明被测基因或mRNA中含有已知的基因序列。
用放射性同位素(如32P)、荧光分子等标记的、与目的基因互补的特异核苷酸序列。
它包括整个基因，或基因的一部分；可以是DNA本身，也可以是由之转录而来的RNA。
如果显示出杂交带，就表明待测样品含有目的基因或目的基因已经转录。
① 首先取出转基因生物的基因组DNA；
② 将含目的基因的DNA片段用放射性同位素等作标记,以此做探针；
③ 使探针和转基因生物的基因组杂交,若显示出杂交带,表 明染色体已插入染色体DNA中。
基本原理：根据目的基因特点设计特定引物，看是否扩增出目的基因。
怎样检验抗虫基因在棉细胞内是否表达呢？
若不能表达，要对抗虫基因再进行修饰。
基因工程已步入产业化发展阶段，具有巨大生产力和发展潜力。充满信心和期待的同时，要严格规范操作流程，科学、客观地评估风险。
接种试验等
1.下列有关基因工程中目的基因的检测与鉴定的说法错误的是( )A. 检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因用DNA分子杂交的方法B. 检测目的基因是否转录用分子杂交的方法C. 检测目的基因是否表达用抗原-抗体杂交的方法D. 目的基因的检测与鉴定是基因工程的核心步骤
2.利用人胰岛B细胞构建cDNA文库，然后通过核酸分子杂交技术从中筛选目的基因，筛选过程如下图所示。下列说法不正确的是( )A. cDNA文库的构建需要用到逆转录酶B. 图中的菌落是通过稀释涂布平板法获得的C. 核酸分子杂交的原理是碱基互补配对D. 从该文库中可以筛选到胰高血糖素基因