高中生物人教版 (2019)选择性必修3二 微生物的选择培养和计数备课课件ppt

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[提醒]　尿素为该培养基的唯一氮源，只有能产生脲酶的微生物才能将尿素分解为氨供自身利用，其他微生物由于缺少氮源而无法生长繁殖。
[提醒]　显微镜直接计数法统计的结果一般是活菌数和死菌数的总和。
(1)筛选分解尿素的细菌的培养基以尿素为唯一氮源且为固体培养基。(　　)(2)利用稀释涂布平板法统计菌落数目时，统计的菌落数就是活菌的实际数。(　　)(3)统计菌落数目时为保证结果准确，一般选择菌落数目最多的平板进行统计。(　　)
(4)利用稀释涂布平板法和平板划线法均可实现细菌的分离和计数。(　　)(5)利用显微镜直接计数法统计的细菌数量就是活菌的数目。(　　)(6)培养分解尿素的细菌，培养基的pH会增大。(　　)
知识点一　微生物分离的两种常见方法的比较1．稀释涂布平板法
2．平板划线法和稀释涂布平板法的比较
[温馨提示]　(1)平板划线法在做第二次划线以及其后的操作时，要从上一次划线的末端开始划线。(2)稀释涂布平板操作结束后，要将一个未接种的培养基和一个已接种的培养基放在一起培养。未接种的培养基表面是否有菌落生长很关键，如果无菌落生长，说明了培养基制备成功、合格，未受到污染。
1．稀释涂布平板法是微生物培养中的一种常用的接种方法，下列相关叙述错误的是(　　)A．操作中需要将菌液进行一系列的浓度梯度稀释B．需将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基表面C．不同浓度的菌液均可在培养基表面形成单个的菌落D．操作过程中对培养基和涂布器等均需进行严格灭菌处理解析：若菌液浓度过大，形成的菌落连在一起，得不到单个的菌落。
2．结合甲、乙两图，回答下列相关问题：
(1)图甲是利用__________法进行微生物接种，图乙是利用______________法进行微生物接种。这两种方法所用的接种工具分别是________和________，对这两种接种工具进行灭菌的方法依次是__________和沾上酒精引燃。(2)在培养基上进行划线操作时，操作的第一步及________之前都要灼烧接种环。在第二次及以后的划线，总是从上一次划线的________开始。同时注意最后一区(图甲中5区)的划线与第一区(图甲中1区)__________。
(3)接种过程的所有操作一定要在火焰附近进行的原因是_____________________________________________________________。(4)接种后，在固体培养基上培养细菌时进行倒置培养的原因是___________________________________________________________________________________________________________________________。(5)下图是采用上述某接种方法接种后培养的效果图解，其接种方法是________(填 “图甲”或“图乙”)。
答案：(1)平板划线　稀释涂布平板　接种环　涂布器　灼烧灭菌(2)每次划线　末端　不要相连(3)火焰附近存在着无菌区域(4)避免培养过程中皿盖上产生的冷凝水落入培养基，影响微生物的生长(5)图乙
知识点二　微生物的选择培养1．特定培养基的设计原理与应用实例
2.实验设计原则(1)设立重复组：统计某一稀释度下平板上的菌落数时，要至少涂布3个平板作重复组，以增强实验结果的说服力与准确性。(2)设立两种对照组①判断选择培养基是否有杂菌污染，需同时将未接种的选择培养基进行培养。②判断选择培养基是否具有筛选作用，需同时设立牛肉膏蛋白胨培养基进行接种后培养，观察两种培养基上的菌落数目，进行对比得出结论。
[温馨提示]　原则上选择培养基只能允许特定种类的微生物生长，但实际上，微生物的培养是一个非常复杂的问题，有些微生物可以利用其他微生物的代谢产物生长繁殖，因此能在选择培养基上生长的微生物不一定都是所需的微生物，还需进一步验证。
1．(2021·山东淄博月考)下列关于土壤中分解尿素的细菌的分离的叙述，正确的是(　　)A．只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素B．统计样品中的活菌数目一般用平板划线法C．筛选分解尿素的细菌时，应以尿素作为培养基中唯一的营养物质D．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变蓝，则表明筛选到了分解尿素的细菌
解析：统计样品中的活菌数目时一般用稀释涂布平板法，B错误；筛选分解尿素的细菌时应以尿素作为培养基中的唯一氮源，培养基中还应含有水、无机盐、碳源等营养物质，C错误；在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变红，则表明筛选到了分解尿素的细菌，D错误。
2．下表是微生物培养基的成分。下列说法错误的是(　　)
A.此培养基可用来培养自养型微生物B．此表中的营养成分共有三类，即水、无机盐、氮源C．若除去①，此培养基可培养圆褐固氮菌D．培养基中若加入氨基酸，则它可充当碳源、氮源和生长因子解析：分析题表可知，该培养基成分中含有水、无机盐、氮源，但不含含碳有机物，可用来培养自养型微生物，A、B正确；圆褐固氮菌的同化类型为异养型，培养基中必须存在含碳有机物，所以该培养基不能用来培养圆褐固氮菌，C错误；培养基中若加入氨基酸，则它可充当碳源、氮源和生长因子，D正确。
发展素养 长句特训与高考接轨1．(科学探究)分离分解尿素的细菌的选择培养基是如何进行选择的？_____________________________________________________________。答案：该选择培养基的配方中，尿素是培养基中的唯一氮源，因此只有能够利用尿素的微生物才能够生长2．(科学探究)应如何设置对照，判断选择培养基是否起了选择作用？_____________________________________________________________。答案：在完全营养培养基上接种
微生物纯培养的“两个妙用”(1)妙用培养基由于所取样品中微生物种类繁多、数量庞大，从中分离出单一品种的生物非常困难，因此，可用特定培养基进行初步“筛选”，去除大部分其他微生物。①利用目的菌对某种营养物质有“嗜好”的原理，在培养基中加入该营养物质，并且使该营养物质成为培养基中某类基本营养物质的唯一供给者。如筛选能分解尿素的细菌，就将尿素作为培养基中的唯一氮源。
②利用某种“抑制物”或特殊培养条件来抑制其他微生物生长，使目的菌获得充足的生存空间，从而大量增殖，在数量上占据优势。(2)妙用接种方法平板划线法、稀释涂布平板法均可以通过稀释将样品中的菌种分离开来，通过培养获得单一个体形成的菌落，再根据菌落特征鉴别筛选。　
知识点三　微生物的数量测定1．微生物的计数
[温馨提示]　显微镜直接计数法本身不能区分细菌的死活，因此一般用来统计总菌数。但是，通过一定的辅助处理，可以实现活菌计数，如在计数前用台盼蓝染液进行染色，可以通过统计无色细胞的个数来对活菌进行计数。
1．(2021·河北石家庄高二月考)下图为“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验中样品稀释示意图。据图分析，下列叙述正确的是(　　)
A．3号试管的稀释倍数为103倍B．4号试管中稀释液进行平板培养得到的菌落平均数恰好为5号试管的10倍C．5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数约为1.7×109个D．该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要高
2．(不定项)下列关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，不正确的是(　　)A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板B．取104、105、106倍的土壤稀释液和蒸馏水各0.1 mL，分别涂布于各组平板上C．将实验组和对照组平板倒置，37 ℃恒温培养24～48 hD．确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数
解析：进行培养基的制备时，用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板，A项正确；将土壤稀释液和无菌水分别涂布于各组平板上，B项错误，将实验组和对照组平板倒置，37 ℃恒温培养24～48 h，C项正确；确定对照组无菌后，选择菌落数在30～300的平板进行计数，求取平均值，再通过计算得出土壤中的细菌总数，D项错误。
发展素养 长句特训与高考接轨1．(科学思维)统计的菌落数比活菌的实际数目低的原因是____________________________________________________________________________________________________________________________。答案：当两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落
2．(科学探究)某同学在三种稀释度下吸取0.1 mL的菌液涂布平板，统计菌落数，得到以下数据，则1 g样品的活菌数为________个。答案：2.44×108