高中人教版 (2019)第1节 重组DNA技术的基本工具教学课件ppt

这是一份高中人教版 (2019)第1节 重组DNA技术的基本工具教学课件ppt，共21页。PPT课件主要包含了DNA的粗提取与鉴定，探究和实践，一基础知识，蛋白质，DNA，DNA的鉴定，三目的要求，四材料用具，实验材料的选取，实验用具等内容，欢迎下载使用。

　　思考：　　如何将DNA提取出来，并进行鉴定呢?
提取生物大分子的基本思路
选用一定的物理或化学方法，分离具有不同物理或化学性质的生物大分子
利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。
1、DNA不溶于酒精溶液
DNA不溶于酒精溶液，但细胞中某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理，可初步分离DNA与蛋白质。
（二）DNA粗提取的原理
2、DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同
---DNA的溶解性和耐受性
3、DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性
①蛋白酶—水解蛋白质，对DNA没有影响。②高温—大多数 在60～80℃时变性沉淀,而 在 80℃以上才会变性。③洗涤剂—溶解细胞膜， 去除 ; 但对DNA没有影响。
在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色，因此用二苯胺试剂鉴定DNA分子。
1、了解DNA的物理化学性质；理解DNA粗提取 和鉴定的原理2、学会DNA粗提取的方法以及利用二苯胺试剂 对DNA 进行鉴定
不同生物的组织中DNA含量不同。在选取材料时，应本着DNA含量高、材料易得、便于提取的原则。你认为如下提供的材料中哪些不适合提取DNA？为什么？
供选材料：（括号内为染色体条数）新鲜洋葱（16）、香蕉、菠菜（12）、菜花、、猕猴桃（58）；猪肝（38）、鱼卵、鸡血（78）、哺乳动物的成熟红细胞；在液体培养基中培养的大肠杆菌（1）
原则上，凡是含有DNA的生物材料都可以考虑选用DNA含量相对较高的生物组织，成功的可能性更大。
烧杯、量筒、玻璃棒、研钵、纱布、漏斗、试管、试管架、试管夹、酒精灯、石棉网、三脚架、火柴、刀片和天平等。
1.研磨洋葱2.过滤获取含DNA的上清液3.冷却酒精析出DNA4.DNA的鉴定
称取约30g洋葱切碎，放入研钵中，倒入10mL研磨液，充分研磨。
在漏斗中垫上纱布，将洋葱研磨液过滤到烧杯中，在4℃冰箱中放置几分钟后，再取上清液。也可直接将研磨液倒入塑料离心管中，1500r/min的转速下离心5min，再取上清液放入烧杯中。
2. 过滤获取含DNA的上清液
或将溶液倒入塑料离心管中，在10000r/min的转速下离心5min，弃上清液，将管底的沉淀物(粗提取的DNA)晾干。
3. 冷却酒精析出DNA
在上清液中加入体积相等的、预冷的酒精溶液(体积分数为95%)，静置2~3min，溶液中出现的白色丝状物就是粗提取的DNA。用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物，并用滤纸吸去上面的水分；
向两支试管中各加入4mL的二苯胺试剂。混合均匀后，将试管置于沸水中加热5min。待试管冷却后，比较两支试管中溶液颜色的变化。
取两支20mL的试管，各加入2 ml/L的NaCl溶液5mL。将丝状物或沉淀物溶于其中一支试管的NaCI溶液中。
①获取材料时，选取DNA含量多的，不同实验材料提取DNA的方法可能稍有不同。②粗提取DNA时，用玻璃棒搅拌含有悬浮物的溶液时，不要直插烧杯底部，搅拌要轻缓、并沿一个方向，以便获得较完整的DNA分子。③二苯胺试剂现配现用，否则会影响鉴定结果。④查阅资料了解实验室提取纯度高的DNA的方法。
DNA不溶于酒精。DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，可溶于2ml/L NaCl溶液。沸水浴，DNA遇二苯胺试剂呈现蓝色。
1.下列关于DNA粗提取与鉴定的叙述，错误的是( )A. DNA析出过程中，搅拌操作要轻柔以防DNA断裂B. 预冷的乙醇溶液可用来粗提取DNAC. 用二苯胺试剂鉴定DNA需要进行水浴加热D. 鉴定DNA时，应将丝状物直接加入到二苯胺试剂中进行沸水浴
2.如图为“DNA的粗提取与鉴定”实验的相关操作。(1)图中实验材料A可以是_________________________等，研磨前加入的B应该是_________________。(2)通过上述所示步骤得到滤液C后，在4℃冰箱中放置几分钟后，再取________，向其中加入等体积、预冷的酒精溶液，析出的白色丝状物为______________。
洋葱（花菜、香蕉、猪肝）