人教版 (新课标)选修1《生物技术实践》专题2 微生物的培养与应用综合与测试当堂检测题
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易错点1 无菌技术
1.()培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌或消毒方法依次是( )
①化学消毒 ②灼烧灭菌 ③干热灭菌 ④紫外线消毒 ⑤高压蒸汽灭菌 ⑥巴氏消毒法
A.⑤③②①④⑥B.①②③④⑤⑥
C.⑥②③④①⑤D.③④②①⑥⑤
2.(2020山西运城临晋中学高二期末,)获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵,无菌技术在生产、生活和科研实践中有着广泛的应用。有关无菌技术的叙述错误的是( )
A.对于不耐高温的液体,如饮用前的鲜牛奶应用巴氏消毒法进行处理
B.耐高温且需要干燥的物品应用干热灭菌处理
C.对培养基灭菌时应用高压蒸汽灭菌法
D.使用后的培养基可以直接丢弃
3.(2020湖北武汉五校联合体高二下期中,)下列关于高压蒸汽灭菌锅的使用方法中,错误的是( )
A.使用高压蒸汽灭菌锅时,需等锅内的冷空气排尽后再关闭排气阀
B.培养基常用高压蒸汽灭菌法处理
C.灭菌结束后,需迅速将排气阀打开,等压力表降为0时再取出培养基
D.灭菌前一般需要将锥形瓶的棉塞用牛皮纸或报纸包扎好
易错点2 混淆微生物的纯化方法
4.()如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图,据图分析不正确的是( )
A.获得图A效果的接种方法是稀释涂布平板法
B.获得图B效果的接种方法是平板划线法
C.若在纯化土壤细菌时菌液浓度过高,培养基上的菌落可能会连成一片
D.在接种前要对培养基进行消毒处理
5.()下列关于微生物接种的描述,正确的是( )
A.平板划线法只用于固体培养基的接种,而稀释涂布平板法只用于液体培养基的接种
B.平板划线法不能用于微生物的计数,而稀释涂布平板法可用于微生物的计数
C.利用平板划线法不能得到单菌落,而利用稀释涂布平板法能得到单菌落
D.平板划线法所用的接种工具不需要灭菌,而稀释涂布平板法所用的接种工具需要灭菌
6.()下面是某同学采用的接种微生物的方法,请回答下列问题:
(1)该同学采用的接种微生物的方法是 法,把聚集的菌种逐步 分散到培养基的表面,为达到这一目的,操作上应注意: (至少答2项)。
(2)三位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中细菌数量,取0.1 mL进行涂布,在对应稀释倍数为106的培养基中,得到以下统计结果:
甲同学涂布了两个平板,统计的菌落数是236和260,取平均值248;
乙同学涂布了三个平板,统计的菌落数是210、240和250,取平均值233;
丙同学涂布了三个平板,统计的菌落数是21、212和25,取平均值163。
在三位同学的统计中, 同学的统计是正确的,每毫升细菌数目为 。
易错点3 微生物实验室培养对培养基的需求
7.()下列关于微生物实验室培养的说法正确的是( )
A.培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质
B.同一种物质不可能既作碳源又作氮源
C.除水以外的无机物只能提供无机盐
D.无机氮源不可能提供能量
8.(2020湖南衡阳八中高二下期中,)在三个培养皿中各加入等量但不同种的大肠杆菌培养基,在培养皿中培养36小时后计算细菌的菌落数(如表)。下列培养皿的结果中,能说明大肠杆菌生长需要碳源的是( )
A.培养皿Ⅰ和ⅢB.培养皿Ⅰ和Ⅱ
C.培养皿Ⅱ和ⅢD.培养皿Ⅲ
9.(2020云南玉溪一中高二下期中,)某种产脂肪酶菌常被用作饲料添加剂,如表是从土壤中初筛该菌的培养基配方,请回答下列问题:
(1)在上述培养基中,橄榄油能为产脂肪酶菌提供 。用该培养基进行选择培养的目的是 。在选择培养过程中,使用摇床振荡效果较好,原因是
。
(2)分离产脂肪酶菌时,在上述培养基的基础上,还应加入琼脂和溴甲酚紫(碱性条件下呈紫色,在酸性条件下为黄色)。在平板上产脂肪酶菌菌落的周围会出现黄色圈,原理是
。
筛选时常选择黄色圈直径大的菌落,说明 。
(3)可用稀释涂布平板法对微生物进行计数,计算得出菌体数目往往比实际的数目低,原因是
。
使用该方法计数时研究人员分别在3个平板上接种稀释倍数为104的滤液各0.1 mL,培养一段时间后,平板上长出的菌落数分别为26、234、258,则每1 mL样品中的活菌个数为 。还可用滤膜法对微生物进行计数,如测定饮用水中大肠杆菌的数目,将滤膜放在 培养基上培养,根据培养基上黑色菌落的数目计算出大肠杆菌的数量。
(4)对培养基灭菌常用的方法是 。此方法用到下图仪器,图中甲、乙、丙指示的依次是 。(填序号)
①安全阀、排气阀、压力表
②排气阀、安全阀、压力表
③安全阀、排气阀、温度表
④排气阀、安全阀、温度表
易错点4 从环境中分离微生物
10.()如图为分离和纯化分解甲醛细菌的实验过程,其中LB培养基能使菌种成倍扩增。以下说法正确的是 ( )
A.需要对活性污泥作灭菌处理
B.②中LB培养基应以甲醛为唯一碳源
C.目的菌种的异化作用类型为厌氧型
D.经⑤处理后,应选择瓶中甲醛浓度最低的一组进一步纯化培养
11.(2020山东肥城高三适应性训练,)某公司在新冠疫情期间推出一款新型免洗洗手凝胶。为衡量该凝胶的效果,研究人员检测了凝胶洗手前后手部细菌的含量(如图)。下列相关叙述正确的是( )
A.图示接种方法为平板划线法
B.前后细菌含量形成对照,无需空白对照
C.该培养基类型为通用固体培养基
D.需用显微镜观察菌落的形状确定菌种类型
12.()中学印刷试卷多数使用蜡纸,蜡纸的主要成分是棉花纤维和石油蜡。蜡纸成本低,但透水性差,在自然环境中难以降解。某课题小组尝试从土壤中筛选出能够分解石油蜡的微生物,流程如图。回答下列问题:
(1)实验用的土壤样品中,下列几个地方中的 最可能筛选出目的菌,取样的工具在使用前都需要 。
A.农田里B.炼油厂附近
C.食品加工厂附近D.化肥工厂附近
(2)培养基在配制时应该以石油蜡为唯一 ,培养瓶和培养皿中的培养基在成分上的差异是前者缺少 。
(3)研究者希望通过培养皿中的分解圈来筛选分解能力最强的微生物,结果发现其中每个圈子几乎都有重叠,还有很多菌落紧挨在一起,此时应该采取的措施是 。
(4)有同学提出,将培养瓶中的石油蜡换为蜡纸碎屑,希望筛选出能够同时分解石油蜡和棉花纤维的微生物,这种方法是否可行? ,理由是
。
本专题达标检测
(满分:100分;时间:45分钟)
一、选择题(每小题4分,共56分)
1.下列对四种微生物的相关叙述,错误的是( )
A.CO2和NH3分别是硝化细菌的碳源和氮源,该生物所需的能源来自NH3的氧化
B.CO2和硝酸盐分别是褐藻的碳源和氮源,该生物所需的能源来自太阳能
C.糖类和N2是乳酸菌的碳源和氮源,该生物所需的能源来自乳酸的氧化分解
D.葡萄糖既是酵母菌的碳源也是其能源,但CO2一定不是酵母菌的碳源
2.土壤中有些细菌可以降解焦化厂淤泥中的污染物S,下图是分离、纯化和筛选高效降解S的优质菌株的过程,下列叙述正确的是( )
A.甲是土样经高温灭菌后用无菌水配制的土壤稀释液
B.丙是添加了琼脂的培养基
C.在涂布平板上长出的菌落,可通过划线法进行计数
D.经多次稀释和筛选,形成的单菌落中所有细胞的遗传物质都相同
2.如图是平板划线法接种微生物的示意图,下列叙述错误的是( )
A.该接种过程需灼烧接种环5次
B.划线结束可看到划线末端出现不连续单菌落
C.若培养的是尿素分解菌,可加入酚红指示剂
D.该接种方法不能准确计数培养液中微生物数量
4.脉孢霉的许多不同的营养缺陷型能在加有精氨酸的基本培养基上生长,其中一些还可以在加有其他物质的基本培养基上生长,实验结果如表所示 (“+”表示生长、“-”表示不生长):
进一步实验证明,在基本培养基中加入精氨琥珀酸后,Arg-10能生长而Arg-1不能生长。根据上述实验结果,能够推理出的结论是( )
A.精氨酸的合成途径是谷氨半醛→鸟氨酸→瓜氨酸→精氨酸
B.在Arg-3突变株培养基中,可能有瓜氨酸积累
C.Arg-1能够合成精氨琥珀酸,而Arg-10不能
D.精氨琥珀酸可以取代基本培养基中的瓜氨酸
5.实验测定链霉素对3种细菌的抗生素效应,用3种细菌在事先准备好的琼脂块平板上画3条等长的平行线(3条线均与图中的链霉素带接触),将平板置于37 ℃条件下恒温培养3天,结果如图所示。从实验结果分析,下列叙述不正确的是( )
A.链霉素能阻止结核杆菌的生长
B.链霉素对结核杆菌比对霍乱弧菌更有效
C.链霉素对结核杆菌比对伤寒杆菌更有效
D.链霉素可以用于治疗伤寒
6.我国《生活饮用水卫生标准》中关于生活饮用水的细菌标准的具体规定如下:细菌总数1 mL水中不超过100个,大肠杆菌数1 mL水中不超过3个。为了检验某城市自来水是否达标,某生物兴趣小组进行了相关的实验。下列有关叙述错误的是( )
A.实验过程中应用到涂布器、移液管等操作工具
B.取样水龙头应用火焰灼烧,打开水龙头一段时间后再取样
C.检验自来水中大肠杆菌数是否达标,可用稀释涂布平板法来分离并计数
D.若空白对照组上有6个菌落,则在实验组数据基础上减去6,以获得最准确数据
7.某生物兴趣小组以带有落叶的表层土壤(深5 cm左右)为实验材料,研究土壤微生物在适宜温度下的分解作用,对土壤处理情况见下表。与此有关的叙述不正确的是( )
A.探究的问题是不同土壤湿度条件下,土壤微生物对落叶的分解作用
B.该实验的自变量为土壤是否灭菌处理,实验中的对照组是1和3
C.为了控制实验中的无关变量,作为实验材料的落叶也应进行灭菌处理
D.预期结论是1、3组的落叶分解现象不明显,2、4组中的落叶被不同程度的分解
8.圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌组合可有效将厨余垃圾中的有机质迅速分解成水和CO2。为制备分解厨余垃圾的微生物菌剂,实现废物的资源化利用,研究人员采用稀释涂布平板法进行了两菌种的最佳接种量比例的探究实验,结果如图所示。下列叙述正确的是( )
A.由图可知,制备所需菌剂的最佳两菌种的接种量比例为2∶1
B.可采用平板划线法替代稀释涂布平板法统计图中的有效菌落数
C.涂布平板的所有操作都应在酒精灯火焰旁进行,而系列稀释操作不需要
D.制备好的菌剂可接种到固体斜面培养基上并放入4 ℃的冰箱中临时保藏
9.某同学用如图所示的接种方法对样品中的微生物进行分离实验,相关叙述正确的是( )
A.该接种方法是平板划线法,样品应适当稀释
B.将接种工具进行灼烧处理,冷却后再接种
C.培养基接种前后相互对照判断是否存在污染
D.接种后的培养基倒置后置于摇床上振荡培养
10.营养缺陷型菌株是指缺乏合成某些营养物质(如氨基酸、维生素)的能力,必须在基本培养基中补充特殊营养物质才能正常生长的一类菌株,可自然产生或人工诱导获得。用一定方法诱变大肠杆菌并将其接种到甲培养皿上,一段时间后将菌落影印接种(不改变菌落位置)到乙、丙两培养皿中,进一步培养一段时间可筛选出营养缺陷型菌株,结果如图所示。下列说法正确的是( )
A.将大肠杆菌接种到甲培养皿的方法为平板划线法
B.甲、丙两种培养基中均添加了特殊营养物质
C.乙培养皿中能生长的为所需的营养缺陷型菌株
D.甲中的部分大肠杆菌发生了基因突变或染色体变异
11.研究小组利用稀释涂布平板法来探究某河流中大肠杆菌的数量,每一个浓度涂布四个平板,并且设置空白对照组。下列关于操作步骤的叙述正确的是( )
A.涂布前,将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃,燃尽后还要冷却8~10 s
B.涂布完成后,在培养皿的皿盖上做标记,以避免混淆,并将培养皿倒置培养
C.计算平板上的菌落数时,四个培养皿上的菌落数无论多少,都要全部计算
D.若空白对照组上有7个菌落,则在实验组数据基础上减去7,以获得最准确数据
12.为了筛选能产生阿拉伯胶(一种多糖)降解酶的菌株,应选用表中哪种培养基 ( )
A.甲B.乙C.丙D.丁
13.取9个洁净培养皿,均分为三组(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),各组分别加入等量的不同培养基,每个平板均用稀释涂布平板法接种0.1 mL大肠杆菌菌液,37 ℃培养一定时间后,统计菌落数(见表),以下相关叙述正确的是( )
A.Ⅰ组和Ⅱ组说明维生素可以促进大肠杆菌生长
B.Ⅰ组和Ⅲ组说明大肠杆菌正常生长需要糖类物质
C.三组实验均使用了液体培养基,以方便菌落计数
D.三组实验所使用的培养基均需62 ℃、30 min消毒
14.下面是纯化微生物时采用的两种接种方法接种后培养的效果图,相关叙述正确的是( )
A.图甲三个平板中所用培养液的稀释倍数应保证相同
B.图乙只适合分离微生物而不适合对微生物进行计数
C.图甲、图乙所用的接种工具分别是接种环和涂布器
D.图乙每次划线应从同一起点开始以便使聚集的菌种逐步稀释获得单菌落
二、非选择题(共44分)
15.(15分)布设于道路周边的生物滞留池可截留雨水。某城市道路收集到的雨水含有高浓度污染物,其中的多环芳烃(PAHs)会严重危害城市水环境。科研人员希望从当地土壤中筛选耐受菌,解决污染问题。经检测发现,生物滞留池内PAHs中的芘含量相对较高。研究者尝试筛选能降解芘的菌种。
(1)筛选能降解芘的菌种基本操作步骤如图。请将“方框”内字母后面内容补充完整。
(2)从对照区域和生物滞留池中分别培养出占比较高的菌属,结果见图1、图2。在两个区域中均能检测出的菌属有 个,此结果能够说明滞留池土壤中 出现了明显的变化,推测 (填“对照区域土壤”或“滞留池中土壤”)物种多样性更大。
(3)在另一个筛选对芘具有耐受性的菌株的实验中,分离得到四个菌属中的菌株,其生长曲线见图3。研究人员欲从中选择一个构建工程菌。结合图1、图2所示结果,你认为应选择 ,理由是
。
16.(14分)分离筛选降解纤维素能力强的微生物,对于解决秸秆等废弃物资源的再利用和环境污染问题具有重要意义。研究人员用化合物A、硝酸盐、磷酸盐、硫酸盐、KCl、酵母膏以及水解酪素配制的培养基,成功地筛选到能产生纤维素酶的微生物。请回答下列问题:
(1)培养基中加入的化合物A是 。本实验将样品稀释涂布到鉴别培养基之前要进行选择培养,目的是 。
(2)为了筛选出能产生纤维素酶的微生物,向培养基中加入 溶液,等培养基上长出菌落后,能产生纤维素酶的菌落周围会出现 。
(3)为在培养基表面形成单个菌落,若将平板分为5个区域进行划线,理论上需要灼烧接种环 次。若用稀释涂布平板法进行接种,在涂布平板时,滴加到培养基表面的菌液量不宜过多的原因是
。
(4)用三种菌株对秸秆进行处理,并在第5天和第10天对秸秆和秸秆中含有的纤维素、半纤维素以及木质素等组分的降解情况进行了测定(结果如图)。据图分析可知,三种菌株对 的降解作用最强。与第5天结果相比,第10天秸秆各组分中 的降解率变化最大。
17.(15分)在1943年,曾获诺贝尔生理学或医学奖的美国科学家鲁里亚和德尔布吕克设计以下实验,研究大肠杆菌的抗噬菌体突变是发生在接触噬菌体之前还是之后。请阅读以下资料回答下列问题:
培养皿中培养基的基本配方:
(1)噬菌体与大肠杆菌这两种生物之间的关系是 。
(2)在培养基中加噬菌体的作用是 ;加伊红与美蓝的目的是 。
(3)由于大肠杆菌的同化作用类型是 ,因此在培养基中还加入了一些相应的物质,其中乳糖为大肠杆菌生长提供 ,配方中为大肠杆菌提供氮源的是 。
(4)该实验有两个假设:
假设一:大肠杆菌的抗噬菌体突变发生在大肠杆菌与噬菌体接触之前。
假设二:大肠杆菌的抗噬菌体突变发生在大肠杆菌与噬菌体接触之后。
你认为图中的实验结果支持上述哪个假设: ,如果另一个假设成立的话,实验结果应该是 。
答案全解全析
本专题复习提升
易混易错练
1.A 培养基中有水,在灭菌过程中要尽量减少水分的散失,因此选择高压蒸汽灭菌法灭菌;培养皿等玻璃器皿耐高温且需保持干燥,故用干热灭菌法灭菌;接种环等金属用具用灼烧灭菌法灭菌;实验操作者的双手不能灭菌,只能用化学药剂如酒精进行消毒;空气可用紫外线消毒;牛奶用巴氏消毒法消毒,这种方法既可以杀死牛奶中的微生物,也可以避免牛奶中的营养成分被破坏,故选A。
2.D 鲜牛奶常用巴氏消毒法进行处理,A正确;耐高温且需要干燥的物品应该用干热灭菌法处理,如玻璃器皿,B正确;常用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌处理,C正确;使用后的培养基需要进行灭菌处理后再丢弃,D错误。
3.C 使用高压蒸汽灭菌锅时,需等锅内的冷空气排尽后再关闭排气阀,A正确;培养基常用高压蒸汽灭菌法处理,B正确;灭菌结束后,让灭菌锅内温度自然下降,等压力表降为0时,打开排气阀,取出培养基,C错误;灭菌前一般需要将锥形瓶的棉塞用牛皮纸或报纸包扎好,D正确。
4.D 图A中的菌落分布均匀,接种方法是稀释涂布平板法,A正确;图B中菌落明显分区分布,且有划痕,所以应该为平板划线法,B正确;菌液浓度过高或培养过程中被杂菌污染,容易造成培养基上的菌落密集,连成一片,C正确;接种前要对培养基进行灭菌处理,D错误。
易错选C,对培养基的无菌处理方法记忆不清,同时混淆两种接种方法,对两种接种方法最终在平板上培养出的微生物效果图不清楚,不理解两种接种方法的本质区别。
5.B 这两种接种方法都只用于固体培养基的接种,都能用于形成单菌落,接种器具都要进行严格灭菌处理,A、C、D错误;平板划线法因最初的划线区域菌液浓度大,且在后续划线过程中每次都对接种环进行灼烧,无法对菌落进行计数,而涂布平板可得到均匀的菌落,可用于计数,B正确。
易错选C,认为平板划线不易得到单菌落,平板划线和涂布平板的接种工具在接种时的注意事项区分不清楚,需加强对知识的理解和记忆。
6.答案 (1)平板划线 稀释 每次划线前接种环要灼烧,冷却后从上一次划线的末端开始划线 (2)乙 2.33×109
解析 (1)据题图分析,接种所用工具为接种环,表示平板划线法接种,该接种方法需要每次划线后灼烧接种环,且从上一次划线的末端开始划线,以达到把聚集的菌种逐步稀释到培养基的表面的目的。(2)在进行菌落计数时,应选择菌落数30~300之间的平板进行计数,同时为减小误差应选择至少3个平板进行计数并取平均值。甲同学的重复平板太少,丙同学三个平板中有一个与其他两个菌落数相差悬殊,且另外两个平板菌落数均不足30,只有乙同学的统计正确。根据乙同学的结果计算每毫升细菌数目为(210+240+250)÷3÷0.1×106=2.33×109。
本题的易错点为平板划线法接种时对灼烧接种环的要求和菌落数目的计算方法,容易算错稀释倍数或者忽略涂布的取样量,导致计算出错。在学习过程中需注重对每一步灼烧目的的分析,对菌落数目的计算要明确稀释倍数和取样量,同时注意平板中菌落数目的统计要求,计算最终结果。
7.A 培养基是为微生物的生长繁殖提供碳源、氮源、水和无机盐等营养的基质,A正确;对异养微生物来说,含C、H、O、N的化合物既是碳源,又是氮源,如牛肉膏,B错误;CO2和N2是无机物,也是某些微生物的碳源和氮源,C错误;硝化细菌可利用无机氮源合成细胞物质,同时能通过氧化含氮无机物获得生长所需的能量,D错误。
易错选D,对不同微生物的培养要求不明确,且对培养基中各成分的作用记忆不清,需明确各种微生物的代谢类型及培养条件,同时注意区分培养基中各成分的作用。
8.C 培养皿Ⅰ和Ⅲ这两个组别的自变量并不唯一,培养皿Ⅰ中添加了糖类,没有维生素,培养皿Ⅲ中没有糖类,有维生素,两组实验数据上的差别无法证明题述实验结论,A错误;培养皿Ⅰ和Ⅱ相互对比,自变量为维生素的有无,可以证明维生素有利于大肠杆菌的生长,B错误;培养皿Ⅱ和Ⅲ相互对比,自变量为糖类的有无,通过观察实验结果可知,没有糖类的培养基大肠杆菌无法生存,所以可证明大肠杆菌的生长需要碳源,C正确;单一的培养皿Ⅲ上没有长出菌落,无法证明题述实验结论,D错误。
9.答案 (1)碳源 增大产脂肪酶菌的浓度 能增加培养液中的溶氧量,并使菌株与培养液充分接触,提高营养物质的利用率 (2)脂肪酶将脂肪水解为甘油和脂肪酸,脂肪酸使溴甲酚紫变为黄色 菌体产脂肪酶能力强(脂肪酶活性高或量多) (3)当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落 2.46×107 伊红美蓝 (4)高压蒸汽灭菌法 ①
解析 (1)培养基中的橄榄油可以为产脂肪酶菌提供碳源;该培养基上产脂肪酶菌可以大量繁殖,进而增加产脂肪酶菌的浓度;在培养过程中,使用摇床振荡能增加培养液中的溶氧量,并使菌株与培养液充分接触,提高营养物质的利用率。(2)脂肪酶催化脂肪产生脂肪酸和甘油,脂肪酸使溴甲酚紫变为黄色,因此在平板上产脂肪酶菌菌落的周围会出现黄色圈;菌体产脂肪酶能力越强,产生的脂肪酶越多,则菌落周围的黄色圈直径越大。(3)在利用稀释涂布平板法对微生物进行计数时,由于菌落会有重叠现象,即当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落,所以计算得出的菌体数目往往比实际的数目低。已知3个平板上的菌落数分别是26、234、258,菌液稀释了104倍,体积为0.1 mL,则每1 mL样品中的活菌个数=(234+258)÷2÷0.1×104=2.46×107。还可用滤膜法对微生物进行计数,如测定饮用水中大肠杆菌的数目,将滤膜放在伊红美蓝培养基上培养,根据培养基上黑色菌落的数目计算出大肠杆菌的数量。(4)培养基常用高压蒸汽灭菌法进行灭菌;题图中甲是安全阀,乙是排气阀,丙是压力表,故选①。
10.D 本实验的目的是从活性污泥中分离和纯化分解甲醛细菌,故活性污泥不能作灭菌处理,A错误。分析题图可知①过程为制备菌悬浊液,②过程为用完全培养基培养,获得大量微生物,从而增加目的菌的菌群数量;③过程的培养基中有甲醛,为以甲醛为唯一碳源的选择培养基,B错误。由图可知培养过程需振荡,因此目的菌种的异化作用类型是需氧型,C错误。④过程可获得单菌落,经⑤处理后,瓶中甲醛浓度最低的一组说明微生物分解甲醛的效果最好,可进一步纯化培养,D正确。
易错选A,对无菌操作理解不到位,忽略实验目的,惯性思维认为实验过程都得灭菌或消毒。解题过程中需明确实验目的,对实验结果进行综合分析。
11.C 统计洗手前后手部细菌的数量,选择的接种方法是稀释涂布平板法,A错误;除图中操作外,还需要设置一组未接种的空白培养基进行培养,验证培养基是否被杂菌污染,B错误;该培养基类型为通用固体培养基,C正确;由于菌落肉眼可见,故初步判断培养基上菌种的类型,可用肉眼观察菌体的形态特征,D错误。
12.答案 (1)B 灭菌 (2)碳源 凝固剂(琼脂) (3)将培养液稀释后再进行接种或者缩短培养时间 (4)不行 只能分解石油蜡和只能分解棉花纤维的微生物也能在培养瓶中生长
解析 (1)本实验的实验目的为从土壤中筛选出能够分解石油蜡的微生物,需从含有石油蜡的土壤中取样,因此应选择炼油厂附近,取样的工具在使用前都需要灭菌,以防止杂菌污染。(2)实验筛选的目的菌为能够分解石油蜡的微生物,因此培养基在配制时应该以石油蜡为唯一碳源,培养瓶中的培养基为液体培养基,可增加目的菌的浓度,培养皿中的培养基为固体培养基,可分离得到单菌落。两者在成分上的差异是前者缺少凝固剂。(3)此种现象的出现是因为培养液浓度过高,细菌紧挨在一起,此时应将培养液稀释后再进行接种或者缩短培养时间。(4)将培养瓶中的石油蜡换为蜡纸碎屑后,培养瓶中既有石油蜡,又有棉花纤维,在该条件下只能分解石油蜡和只能分解棉花纤维的微生物也能生长,因此不能筛选出能够同时分解石油蜡和棉花纤维的微生物。
本题的易错点为对实验结果中出现异常现象的分析,筛选不同微生物时,需从目的菌的代谢特点分析培养基的配制,对实验出现的异常结果进行比较分析,注重实验操作的具体过程和筛选原理。
培养皿
培养基成分
培养皿中的菌落数
Ⅰ
琼脂和糖类
35
Ⅱ
琼脂、糖类和维生素
250
Ⅲ
琼脂和维生素
0
(NH4)2SO4
NaCl
MgSO4·7H2O
K2HPO4
1%橄榄油
蒸馏水
pH
0.1 g
0.05 g
0.01 g
10 g
4 mL
定容至
100 mL
7.0
突变类型
不同培养基上的生长反应
基本培
养基
谷氨
半醛
鸟氨酸
瓜氨酸
精氨酸
Arg-8、Arg-9
-
+
+
+
+
Arg-5、Arg-6
-
-
+
+
+
Arg-3、Arg-12
-
-
-
+
+
Arg-1、Arg-10
-
-
-
-
+
1组
2组
3组
4组
土壤处理
灭菌
不灭菌
灭菌
不灭菌
干燥程度
湿润
湿润
较干燥
较干燥
培养基
阿拉
伯胶
阿拉伯
胶酶
NaNO3
牛肉膏
K2HPO4
MgSO4·
7H2O
KCl
FeSO4
甲
25
-
-
3
1
1
0.5
0.01
乙
25
10-6
-
-
1
1
0.5
0.01
丙
-
-
3
3
1
1
0.5
0.01
丁
25
-
3
-
1
1
0.5
0.01
组别
培养基
各平板的菌落数
1
2
3
Ⅰ
琼脂、C6H12O6、NH4NO3
30
31
27
Ⅱ
琼脂、C6H12O6、NH4NO3、维生素
169
178
193
Ⅲ
琼脂、NH4NO3、维生素
0
0
1
配方
蛋白胨
乳糖
KH2PO4
水
琼脂
20%伊红
水溶液
0.325%美
蓝水溶液
pH
含量
10 g
10 g
2 g
1 000 mL
25 g
20 mL
20 mL
7.2~7.4
1.A
2.D
3.C
4.D
5.B
7.A
8.C
10.D
11.C
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