2020-2021学年第1章 发酵工程第2节 微生物的培养技术及应用一 微生物的基本培养技术课后测评

这是一份2020-2021学年第1章 发酵工程第2节 微生物的培养技术及应用一 微生物的基本培养技术课后测评，共6页。
【合格考全员做】(学业水平一、二)
1．下列关于培养基的说法，正确的是( )
A．任何培养基都必须含有碳源、氮源、矿质元素、水
B．培养基只有两类：液体培养基和固体培养基
C．固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基
D．配制培养基时要注意各种组分的浓度和比例
2．下列关于微生物的营养的说法，正确的是( )
A．同一种物质不可能既作碳源又作氮源
B．凡是碳源都能提供能量
C．除水以外的无机物仅提供无机盐
D．无机氮源也可能提供能量
3．自养微生物与异养微生物的培养基的主要差别是( )
A．碳源B．氮源
C．无机盐D．特殊营养物质
4．下表为某培养基的配方，有关叙述正确的是( )
A.能在此培养基上生长的只有大肠杆菌
B．该培养基调节合适的pH后就可以接种使用
C．该培养基中属于碳源的物质主要是葡萄糖，属于氮源的物质是牛肉膏
D．从物理性质看该培养基属于液体培养基
5．下列操作与消毒或灭菌无关的是( )
A．接种前用酒精灯火焰灼烧接种环
B．接种前用酒精擦拭双手
C．将平板倒置，放入培养箱中培养
D．在酒精灯的火焰旁完成接种
6．培养基、培养皿、接种针、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌或消毒方法依次是( )
①化学药物消毒 ②灼烧灭菌 ③干热灭菌 ④紫外线消毒 ⑤高压蒸汽灭菌 ⑥巴氏消毒
A．⑤③②①④⑥B．①②③④⑤⑥
C．⑥②③④①⑤D．③④②①⑥⑤
7．下列有关倒平板操作的叙述，错误的是( )
A．将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上
B．使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰
C．将培养皿打开，培养皿盖倒放在桌面上
D．等待培养基冷却凝固后需要倒过来放置
8．将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37℃恒温箱的目的是( )
A．对比观察培养基有没有被微生物利用
B．对比分析培养基是否被杂菌污染
C．没必要放入未接种的培养基
D．为了下次接种时再使用
9．下列关于平板划线操作的叙述，错误的是( )
A．每次划线前都要灼烧接种环
B．灼烧接种环后，要立即用接种环接种，防止杂菌污染接种环
C．要在酒精灯火焰旁进行
D．接种前，要将菌种试管口通过火焰
10．某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察、计数。请回答与此实验相关的问题：
(1)培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌的培养提供了________和________。除此之外，培养基还必须含有的基本成分是________和________。
(2)对培养基进行灭菌，应该采用的方法是________________。
(3)为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于____________中培养，培养的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种________作为对照进行实验。
(4)培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有________种细菌。一般来说，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越________。
【等级考选学做】(学业水平三、四)
11．下列关于制备固体培养基时倒平板的叙述，正确的是( )
A．倒好的培养基和培养皿要进行干热灭菌
B．应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上
C．为防止微生物侵入培养基，要在酒精灯火焰旁进行操作
D．倒好培养基后，立即将平板倒过来放置，不需要冷凝
12．下图是微生物平板划线示意图。划线的顺序为1→2→3→4→5。下列操作方法正确的是( )
A．操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌
B．划线操作应在火焰上进行
C．在5区域中才可以得到所需菌落
D．在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌
13．(多选)下列有关平板划线法的操作，正确的是( )
A．使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌
B．打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞上棉塞
C．不能将最后一次的划线与第一次的划线相连
D．最后将平板倒置，放入恒温培养箱中培养
14．(多选)如图为酵母菌纯培养过程中的部分操作步骤，下列说法正确的是( )
A．①步骤使用的培养基已经灭菌并调节过pH
B．②步骤接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落
C．④中每次划线前后都需要对接种环进行灼烧处理
D．①②③步骤操作时都需要在酒精灯火焰旁进行
15．在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。实验基本步骤如下：
eq \x(配制培养基)―→eq \x(灭菌、倒平板)―→eq \x(培养)―→eq \x(观察)
请回答下列有关问题：
(1)配制培养基时，各成分含量确定的原则是______________________________________。不论何种培养基，在各种成分都溶化后分装前，要进行的是________________。
(2)倒平板的适宜温度是50℃左右，原因是____________________________。待平板冷凝后，要将平板倒置，这样既可使培养基表面的水分更好地挥发，又可防止____________________________________。
(3)纯化菌株时，若使用稀释涂布平板法进行接种，应选择的涂布工具是图中的________；若使用平板划线法进行接种，应选择的接种工具是图中的________。
A B C D
(4)划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(5)若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及培养物必须经过________处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。
【素养养成练】
16．炭疽杆菌能引起人畜患炭疽病。炭疽杆菌呈竹节状排列，菌落呈卷发状。对炭疽病疑似患者，可根据噬菌体的寄主专一性，通过实验进行确诊。
①细菌培养：采集疑似患者的样本，分离培养，获得可疑菌落。
②细菌鉴定：实验流程图如下所示。
(1)对配制的液体培养基要采用______________________(方法)进行灭菌。培养基配制和灭菌时，灭菌与调节pH的先后顺序是____________________________。
(2)挑选可疑菌落制片后，用____________观察，可看到呈竹节状排列的杆菌。
(3)接种可疑菌后，35℃培养24h，液体培养基变浑浊，原因是________________。图中的对照组试管中应加入____________。两组试管同时培养6h后，进行比较，若实验组液体培养基的浑浊度________(填“提高”“降低”或“不变”)，则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染。此实验依据的原理是________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
课后分层检测案2 微生物的基本培养技术
1．解析：不同微生物对营养物质的需求不同，如自养微生物的培养基不需要加碳源，自生固氮菌的培养基不需要加氮源；按不同的分类标准，培养基种类也不同，如培养基按物理性质可分为液体培养基和固体培养基两大类，按培养基用途可分为选择培养基和鉴别培养基；固体培养基是在液体培养基里加入琼脂等凝固剂配制而成的；配制培养基时要注意各种组分的浓度和比例。
答案：D
2．解析：对一些微生物来说，含C、H、O、N的化合物既是碳源，又是氮源；CO2是光能自养细菌的碳源，但不能提供能量；CO2和N2都是无机物，也是微生物的碳源和氮源；硝化细菌所利用的氮源是氨，氨为无机氮源，同时氨也为硝化细菌提供用以化能合成作用的能源。
答案：D
3．解析：自养微生物利用的碳源是二氧化碳、碳酸盐等无机碳，异养微生物利用的碳源是含碳有机物，所以培养两种微生物的培养基的主要差别是碳源。
答案：A
4．解析：在此培养基上能生长多种微生物，不仅仅只有大肠杆菌，A错误；该培养基调节合适的pH后要进行高压蒸汽灭菌，B错误；该培养基中属于碳源的物质主要是葡萄糖，属于氮源的物质是牛肉膏，C正确；从物理性质看该培养基含有琼脂，属于固体培养基，D错误。
答案：C
5．解析：接种用具、器皿、空气中都存在大量微生物，必须进行严格地消毒或灭菌。A、B、D三项都是实验操作过程中涉及的消毒或灭菌的措施。将平板倒置，放入培养箱中培养与灭菌无关。
答案：C
6．解析：培养基用高压蒸汽灭菌法灭菌；培养皿能耐高温且需要保持干燥，可用干热灭菌法灭菌；接种针可用灼烧灭菌法灭菌，以达到迅速彻底的灭菌效果；实验操作者的双手可用化学药物如酒精进行消毒；空气可用紫外线消毒法；为了不破坏牛奶的营养成分可采用巴氏消毒法。
答案：A
7．解析：整个倒平板过程要防止外来杂菌的入侵，因此灭过菌的培养皿应放在火焰旁，打开的锥形瓶瓶口应迅速通过火焰，培养皿应打开一条稍大于瓶口的缝隙，而不能将培养皿盖完全打开，等待培养基冷却凝固后需要倒过来放置。
答案：C
8．解析：对未接种的培养基进行培养，起到对照作用，可用来确定培养基是否被杂菌污染。
答案：B
9．解析：灼烧接种环后，将接种环伸入管内，让环端先接触培养基上未长菌的部位，使其冷却，然后轻轻挑取少量菌体，再进行接种。灼烧接种环后，不可立即用接种环接种，以免接种环温度过高，将菌种杀死。
答案：B
10．解析：用于培养微生物的培养基中，一般含有微生物所需要的碳源、氮源、水和无机盐等成分，碳源、氮源一般分别由糖类和蛋白质类物质所提供。对培养基常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌。在检测湖水中细菌的污染情况时，应设置对照实验，才能得出可靠的结果。
答案：(1)氮源 碳源 无机盐 水 (2)高压蒸汽灭菌 (3)恒温培养箱 无菌水 (4)多 高
11．解析：应该在倒平板之前将培养基进行高压蒸汽灭菌，将培养皿进行干热灭菌，A错误；倒平板时，用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基(10～20 mL)倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖，B错误；为防止微生物侵入培养基，要在酒精灯火焰旁进行操作，C正确；倒好培养基后，等培养基冷凝后再将平板倒过来放置，D错误。
答案：C
12．解析：在每次划线前后都要对接种环进行灭菌，接种环的灭菌方法应是在火焰上灼烧，接种时划线操作是在火焰旁进行的。在5个区域中，只要有单个活细菌，通过培养即可获得所需菌落。
答案：D
13．解析：平板划线过程中，接种环在每次划线之前和之后均需灼烧灭菌，A错误；打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后还需通过火焰灭菌，再塞上棉塞，B错误；最后一次的划线用于筛选出单个菌落，不能与第一次的划线相连，C正确；划线操作结束后，将平板倒置，放入恒温培养箱中培养，D正确。
答案：CD
14．解析：①步骤为倒平板，使用的培养基已经灭菌并调节过pH，A正确；②步骤为接种，接种环经火焰灭菌后应冷却后再挑取菌落，以防高温杀死酵母菌，B错误；④中每次划线前后对接种环进行灼烧处理，是为了杀死接种环上残留的菌种，使划线时接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到单菌落，C正确；①②③步骤操作时都需要在酒精灯火焰旁进行，防止杂菌污染，D正确。
答案：ACD
15．解析：(1)培养基中各成分含量要根据微生物的生长需要来确定。微生物生长需要一定的pH，所以培养基装瓶前需要调节pH。(3)由图可知，A为接种环，B为涂布器，C为胶头滴管，D为接种针，故稀释涂布平板法应选择的涂布工具是B，平板划线法应选择的接种工具是A。(4)由题意分析可知，造成此现象的原因可能有两个：一是接种环灼烧后未冷却，菌种接触到高温的接种环而死亡；二是划第二划线区域第一条线时未从第一区域末端开始。(5)有的大肠杆菌会释放一种强烈的毒素，因此，使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。
答案：(1)所培养微生物对各营养成分的需要量 调节pH (2)温度过高会烫手，过低培养基又会凝固 皿盖上的水珠落入培养基，造成污染 (3)B A (4)①接种环灼烧后未冷却；②划线未从第一区域末端开始 (5)灭菌
16．解析：(1)培养基一般采用高压蒸汽灭菌。在配制培养基时，需要先调节pH，后灭菌。(2)菌落可以通过肉眼观察，而单个细菌无法通过肉眼观察，需要借助显微镜观察。(3)接种可疑菌后，35 ℃培养24 h，液体培养基变浑浊，原因是细菌大量繁殖。对照组试管中应加入等量生理盐水，与实验组同时培养6 h后，若实验组液体培养基的浑浊度比对照组低，则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染；反之则排除。噬菌体的宿主具有专一性，患者被炭疽杆菌感染，则实验组加入的噬菌体就会侵染炭疽杆菌，炭疽杆菌就会裂解，细菌数量减少，浑浊度降低。
答案：(1)高压蒸汽灭菌法 先调节pH，后灭菌
(2)显微镜
(3)细菌大量繁殖 等量生理盐水 降低 实验组中的噬菌体能特异性地侵染炭疽杆菌，使细菌裂解，溶液变澄清
成分
牛肉膏
葡萄糖
K2HPO4
琼脂
蒸馏水
含量
10g
10g
2g
适量
定容至
1000mL