高中人教版 (2019)第1节 重组DNA技术的基本工具图片ppt课件
展开什么是目的基因的表达产物?
基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,并通过体外____________和____________等技术,赋予生物以新的遗传特性,从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的,因此又叫做__________技术。
1.DNA的基本组成单位相同(都是四种脱氧核苷酸)2.都遵循碱基互补配对原则3.DNA分子的空间结构都是规则的双螺旋结构
1.基因是控制生物性状的结构与功能单位2.遗传信息传递都遵循中心法则3.生物界几乎共用一套遗传密码
基因工程的诞生理论基础
3.1重组DNA技术的基本工具
基因工程是在DNA上进行的______水平的设计施工,需要有专门的工具。
限制性内切核酸酶(简称__________)
限制酶的专一性体现在:一种限制酶能够识别双链DNA分子的_______________,并且使每一条链中特定部位的______________断开。 大肠杆菌中的一种叫做EcRI的限制酶,能够专一识别DNA中的__________序列,并在G和A之间将这段序列切开(实质是在________________与__________________之间切断磷酸二酯键)。
1.限制性核酸内切酶——“分子手术刀”
(1)实例1—EcRⅠ限制酶:EcRⅠ识别序列为GAATTC,EcRⅠ切割部位为GA之间的磷酸二酯键。
(2)实例2——SmaⅠ限制酶:SmaⅠ识别序列为CCCGGG,SmaⅠ切割部位为CG之间的磷酸二酯键。
SmaI能够专一识别DNA中的_________序列,并在______之间将这段序列切开(实质是在鸟嘌呤脱氧核苷酸与胞嘧啶脱氧核苷酸之间切断磷酸二酯键)。 当限制酶在它识别序列的__________________将DNA的两条链分别切开时,产生的是______末端,而当限制酶在它识别序列的_____________切开时,产生的则是平末端。EcRI切割DNA产生______末端,SmaI切割DNA产生______末端。
1、已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—GGATCC—,限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。 (1)能被限制酶I切割的DNA,______(能/不能)被限制酶II切割; (2)能被限制酶II切割的DNA,____________(能/不能/不一定能)被限制酶I切割。
现有来自两种生物的DNA片段1和DNA片段2,用同一种限制酶处理后,DNA片段1和2带有______的黏性末端。在一个混合体系中,DNA片段1和2随机碰撞在一起时,黏性末端之间会自发形成______,但不同DNA片段骨架上的缺口无法自动连接。 DNA连接酶的作用是:将双链DNA片段“缝合”起来,恢复被________切开的两个__________之间的____________。
2.DNA连接酶——“分子缝合针”
DNA连接酶的种类和特点
DNA连接酶的作用示意图
DNA聚合酶的作用示意图
通常是利用______作为载体,将目的基因送入受体细胞中。质粒是一种裸露的、结构简单、独立于真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA之外,并具有__________能力的很小的双链_____DNA分子。 在基因工程中使用的载体除质粒外,还有____________、__________等。
大肠杆菌及质粒结构模式图
3.基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”
质粒作为运载体的优点: ①质粒DNA分子上有一个至多个限制酶切割位点,便于_____________________; ②质粒含有复制原点,可在受体细胞中进行自我复制,或整合到受体细胞_______上; ③质粒DNA分子上有特殊的____________,如四环素抗性基因、氨苄青霉素抗性基因等,供重组DNA的_______。
外源DNA片段(目的基因)插入
将体外重组好的DNA分子导入受体细胞
1、普通的细菌一般是对抗生素______(敏感/不敏感)的,在含有青霉素或四环素的培养基中______(能/不能)生长。如果给普通细菌导入一个含有四环素抗性基因的质粒,四环素抗性基因的____________可使细菌获得抵抗四环素的性状。
2、图甲是含有目的基因的外源DNA片段,图乙是用于将目的基因导入受体细胞的质粒(阴影部分表示抗生素抗性基因),相关限制酶的作用部位如图所示,现欲培养转基因抗病植株,回答下列问题。
(1)在基因工程的操作中,不宜选用SmaI,原因是SmaI会破坏__________和__________________________。(2)在基因工程的操作中,不宜选用EcRI,原因是用EcRI切割外源DNA片段后,__________________________________________________。
质粒上的抗生素抗性基因
目的基因只有一侧含有黏性末端,不能插入到质粒中
构建重组DNA分子(EcRⅠ切割)
剪刀代表限制酶,透明胶条代表DNA连接酶。
1.剪刀和透明胶条分别代表哪种“分子工具”?
3.插入载体的这段DNA片段能称得上一个基因吗?
不能。真正的基因是有遗传效应的DNA片段,且含有几百至几千个不等的碱基对。
2. 你制作的黏性末端的碱基能不能互相配对?如果不能,可能是什么原因造成的?
可能是剪切位点或连接位点的选择不对(也可能是其他原因)。比如在书写将要重组的两个DNA分子时,一般要求有同一种限制酶的识别和切割位点,这样切割后才会露出相同的黏性末端,否则黏性末端不同,碱基就无法配对。
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