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高中生物2023年高考生物一轮复习（新人教新高考） 第10单元 第4课时 动物细胞工程课件PPT
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这是一份高中生物2023年高考生物一轮复习（新人教新高考） 第10单元 第4课时 动物细胞工程课件PPT，共60页。PPT课件主要包含了动物细胞培养，课时精练等内容，欢迎下载使用。
1.阐明动物细胞培养是从动物体获得相关组织，分散成单个细胞后，在适宜的 培养条件下让细胞生长和增殖的过程。动物细胞培养是动物细胞工程的基础。2.阐明动物细胞核移植一般是将体细胞核移入一个去核的卵母细胞中，并使重 组细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的过程。3.阐明动物细胞融合是指通过物理、化学或生物学等手段，使两个或多个动物 细胞结合形成一个细胞的过程。4.概述细胞融合技术是单克隆抗体制备的重要技术。5.简述干细胞在生物医学工程中有广泛的应用价值。
考点二 动物细胞融合技术和单克隆抗体
考点三 动物体细胞核移植技术和克隆动物
重温高考 真题演练
1.动物细胞培养的条件
梳理归纳 夯实必备知识
2.动物细胞培养的过程
细胞贴壁和接触抑制①细胞贴壁是指体外培养的细胞贴附在瓶壁生长的现象；接触抑制是指当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞通常会停止分裂增殖的现象。②细胞贴壁生长对培养瓶的要求：培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。③打破接触抑制现象的方法是将贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖。
动物细胞培养和植物组织培养的比较
糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等
水、矿质元素、蔗糖、维生素、植物激素和琼脂等
细胞培养产生大量细胞，不形成新个体
3.干细胞培养及其应用
(1)胚胎干细胞为什么可以解决供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题？其应用有什么限制因素？
提示 通过胚胎干细胞体外诱导分化，可以培育出人造组织器官，从而解决供体器官不足问题，另一方面，由于是自身细胞经诱导分化形成的，所以无免疫排斥反应。胚胎干细胞必须从胚胎中获取，这涉及伦理问题，因而限制了应用。
(2)为什么科学家认为iPS细胞的应用前景优于胚胎干细胞？
提示 iPS细胞的诱导过程无需破坏胚胎，而且iPS细胞可以来源于病人自身的体细胞，将它移植回病人体内后，理论上可以避免免疫排斥反应。
(3)科学家已尝试采用多种方法来制备iPS细胞，尝试说出几种获取iPS细胞的方法。
提示 借助载体将特定基因导入细胞中，直接将特定蛋白导入细胞中或者用小分子化合物等来诱导形成iPS细胞。iPS细胞最初是由成纤维细胞转化而来的，后来发现已分化的T细胞、B细胞等也能被诱导为iPS细胞。
考向一 动物细胞培养1.(2021·辽宁1月适应性测试，15)为了初步检测药物X和Y的抗癌活性，在细胞培养板的每个孔中加入相同数量的肝癌细胞，使其贴壁生长，实验组加入等体积相同浓度的溶于二甲基亚砜(溶剂)的药物X或Y，培养过程及结果如下图所示。下列有关叙述错误的是
考向突破 强化关键能力
A.细胞培养液中通常需要加入血清B.可用胰蛋白酶处理使肝癌细胞脱落下来并 进行计数C.对照组中应加入等体积的无菌蒸馏水D.根据实验结果，可以初步判断药物X的抗 癌效果较好
2.实验小鼠皮肤细胞培养(非克隆培养)的基本过程如图所示。下列叙述错误的是
A.甲过程需要对实验小鼠进行消毒B.乙过程对皮肤组织可用胰蛋白酶处理C.丙过程是原代培养D.丁过程直接将丙过程得到的细胞分瓶培养
考向二 干细胞培养及其应用3.(2021·辽宁1月适应性测试，14)下列有关干细胞的叙述，错误的是A.干细胞是具有分裂和分化能力的细胞B.造血干细胞可定向诱导分化成机体所有种类的细胞C.胚胎干细胞在饲养层细胞上培养能够维持不分化的状态D.移植胚胎干细胞可使退化的组织得以修复并恢复正常功能
4.胚胎干细胞必须从胚胎中获取，但这涉及伦理问题，因而限制了它在医学上的应用。科学家通过体外诱导成纤维细胞，获得了类似于胚胎干细胞的一种细胞，称为诱导多能干细胞(简称iPS细胞)。因为诱导过程无须破坏胚胎，而且iPS细胞可来源于病人自身的体细胞，因此iPS细胞的
应用前景优于胚胎干细胞。如图为iPS细胞的获得及用其培育不同种细胞的示意图(c－Myc、Klf4、Sx2和Oct3/4等基因与细胞的脱分化有关)。回答下列问题：
(1)在对成纤维细胞进行培养时，常用胰蛋白酶处理使之分散成单个细胞，这说明细胞间的物质为_______，_____(填“能”或“不能”)用胃蛋白酶处理成纤维细胞，原因是________________________________________________________________。
多数动物细胞培养的适宜pH为7.2～7.4，胃
蛋白酶在此环境中失活变性
(2)在培养iPS细胞的过程中，培养基中应含有细胞所需的各种营养物质，并定期更换培养液。定期更换培养液的目的是__________________________________________________。
清除代谢物﹐防止细胞代
谢物积累对细胞自身造成危害
(3)过程③④为iPS细胞提供的条件不同，分化得到的细胞不同，可知细胞分化是_______________的结果。若iPS细胞来源于病人自身体细胞的诱导，再将其分化出的细胞移入患者体内的优势是___________________。
(4)如果诱导iPS细胞定向分化为原始生殖细胞，该技术可能的应用是_____________。
动物细胞融合技术和单克隆抗体
PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等
2.单克隆抗体的制备(1)制备原理①B淋巴细胞特点：一种B淋巴细胞只分泌 种特异性抗体。②骨髓瘤细胞特点：能在体外 。③杂交瘤细胞的特点：既能 ，又能产生足够数量的 。
①图中给小鼠注射特定的抗原蛋白，其目的是什么？
提示 刺激机体发生免疫应答，从而产生特定的B淋巴细胞。
②若仅考虑细胞的两两融合，在获取杂交瘤细胞的过程中，筛选淘汰的细胞有几种类型？为什么？
提示 有未融合的细胞和同种细胞融合后形成的细胞(B－B融合细胞、瘤－瘤融合细胞)两种类型。出现不同类型是因为细胞融合不是100%的，且是随机的。
③单克隆抗体制备过程中两次筛选的方法及目的
第一次筛选获得杂交瘤细胞的方法：①细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。②人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但不能分裂增殖。③鼠骨髓瘤细胞中只有D途径，没有S途径，但能不断分裂增殖。在培养基中加入氨基嘌呤，B淋巴细胞及同型融合细胞不能增殖，骨髓瘤细胞及同型融合细胞(氨基嘌呤阻断)不能增殖，只有杂交瘤细胞能无限增殖。
2.单克隆抗体的应用(1)作为 ：在多种疾病的诊断和病原体鉴定中发挥重要的作用。(2)运载药物：抗体—药物偶联物(ADC)通过将 与能特异性识别肿瘤抗原的 结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。ADC通常由 三部分组成。①ADC的抗体和药物各具有什么作用？
抗体、接头和药物(如细胞毒素)
提示 ADC的抗体和药物具有的作用分别是导向和治疗。
②除了细胞毒素，还有哪些物质理论上可以作为ADC偶联的药物？
提示 放射性同位素和化学药物等。
③ADC在临床应用上的作用机理是什么？
提示 其作用机理是通过单克隆抗体的靶向作用特异性地识别肿瘤细胞表面抗原，然后利用细胞本身具备的内吞作用使化学药物进入肿瘤细胞体内发生药力，从而达到杀死肿瘤细胞的目的。
比较植物体细胞杂交和动物细胞融合
考向 单克隆抗体5.(2022·黑龙江黑河市高三一模)人乳头瘤病毒(HPV)是一种DNA病毒，可诱发细胞癌变。抗HPV的单克隆抗体可以准确检测出HPV，从而及时监控宫颈癌的发生。以HPV衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体的过程如下图所示。下列叙述错误的是
A.在HAT培养基上存活的杂交瘤细胞既能 无限增殖又可以分泌抗体B.单克隆抗体的特点是灵敏度高、特异性 强，可以大量制备C.可用HPV衣壳蛋白检测筛选出能产生特 异性抗体的杂交瘤细胞D.单克隆抗体制备过程涉及的生物学原理有细胞增殖和细胞膜的选择透 过性
6.下图为单克隆抗体制备过程的示意图。下列有关叙述错误的是A.X细胞是从脾脏中提取的已免疫的B淋巴细胞B.Y细胞是杂交瘤细胞，必须取用培养10代以内的细胞C.图中的过程至少需要筛选两次且方法不同，最终保留抗体检测呈阳性 的细胞D.图中能产生单克隆抗体的细胞在培养过程中不会出现接触抑制的现象
动物体细胞核移植技术和克隆动物
1.动物细胞核移植技术(1)概念分析①供体：动物一个细胞的 。②受体：去掉细胞核的 。③结果：重新组合的细胞发育成 ，继而发育成动物个体。④原理： 。(2)哺乳动物核移植类型： 细胞核移植和体细胞核移植。
动物体细胞核具有全能性
2.体细胞核移植的过程
(1)动物核移植技术的理论基础(原理)是什么？克隆动物属于有性生殖还是无性繁殖？
提示 动物细胞核的全能性。克隆动物属于无性繁殖。
(2)为什么体细胞核移植较胚胎细胞核移植更困难？
提示 由于动物胚胎细胞分化程度低，表现全能性相对容易；而动物体细胞分化程度高，表现全能性十分困难。因此动物体细胞核移植的难度就明显高于胚胎细胞核移植。
(3)受体细胞为什么选用卵母细胞？
提示 体积大，易操作；去核时易于同时吸走第一极体；含有激发细胞核全能性的物质。
(4)为什么不是取供体细胞核进行核移植操作，而是将供体细胞整个注入去核卵母细胞中？
提示 保证供核不被破坏，使克隆动物更像供体动物，操作也方便。
(5)在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前，为什么必须先去掉受体卵母细胞的核？
提示 为使核移植的胚胎或动物的核遗传物质全部来自有重要利用价值的动物提供的体细胞，在供体细胞的细胞核移至受体细胞之前，必须将受体细胞的核遗传物质去掉或将其破坏。
(6)从多莉的产生过程可以看出多莉有三个亲本，探究多莉的性状表现与三个亲本的关系并分析原因。
提示 ①大多数性状与母羊A(体细胞核供体)相同，因基因型与母羊A完全一样。②少数性状与母羊B(卵母细胞细胞质供体)相同，因细胞质中的基因来自母羊B，受质基因控制的性状与母羊B相同。③性状与母羊C(代孕母体)无关，因母羊C没有为新个体提供遗传物质。
源于选择性必修3 P54“相关信息”：目前动物细胞核移植技术中普遍使用的去核方法是 。也有人采用梯度离心、紫外线短时间照射和化学物质处理等方法。这些方法是在没有穿透卵母细胞透明带的情况下去核或使其中的 。
2.体细胞核移植技术的应用前景和存在的问题
细胞工程的各种技术手段及其原理总结
考向 动物体细胞核移植技术和克隆动物7.(2022·鸡西模拟)2018年1月国际顶尖学术期刊《Cell》杂志报道，我国科学家以一只雌性猕猴胎儿成纤维细胞为核供体成功克隆两只猕猴，成为全球首例体细胞克隆灵长类动物。下列相关叙述错误的是A.这项技术证明高度分化的动物体细胞具有全能性B.研究中需要使用成熟卵母细胞作为核移植的受体C.培育出的两只雌性猕猴的基因组成几乎完全相同D.克隆猕猴的成功为大量培育灵长类遗传病模型动物提供了可能
8.“中中”和“华华”是两只在我国出生的克隆猕猴，它们也是国际上首例利用体细胞克隆技术获得的非人灵长类动物。如图表示培育“中中”和“华华”的流程。下列相关叙述正确的是
A.图示过程中利用的技术有核移植和干细胞移植技术等B.这两只克隆猕猴是由同一受精卵发育而成的双胞胎C.融合细胞的培养过程需要无菌、无毒的环境和营养等条件D.利用A猴的胚胎干细胞核移植获得克隆猕猴的难度更大些
重温高考 真题演练
1.(2021·山东，15)一个抗原往往有多个不同的抗原决定簇，一个抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体，由同一抗原刺激产生的不同抗体统称为多抗。将非洲猪瘟病毒衣壳蛋白p72注入小鼠体内，可利用该小鼠的免疫细胞制备抗p72的单抗，也可以从该小鼠的血清中直接分离出多抗。下列说法正确的是A.注入小鼠体内的抗原纯度对单抗纯度的影响比对多抗纯度的影响大B.单抗制备过程中通常将分离出的浆细胞与骨髓瘤细胞融合C.利用该小鼠只能制备出一种抗p72的单抗D.p72部分结构改变后会出现原单抗失效而多抗仍有效的情况
2.(2021·湖南，22)M基因编码的M蛋白在动物A的肝细胞中特异性表达。现设计实验，将外源DNA片段F插入M基因的特定位置，再通过核移植、胚胎培养和胚胎移植等技术获得M基因失活的转基因克隆动物A，流程如图所示。回答下列问题：
(1)在构建含有片段F的重组质粒过程中，切割质粒DNA的工具酶是________________________，这类酶能将特定部位的两个核苷酸之间的___________断开。(2)在无菌、无毒等适宜环境中进行动物A成纤维细胞的原代和传代培养时，需要定期更换培养液，目的是_____________________________________________________________________________。
防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害，同时给细胞提供足够的营养
(3)与胚胎细胞核移植技术相比，体细胞核移植技术的成功率更低，原因是____________________________________________________________________________________________。从早期胚胎中分离获得的胚胎干细胞，在形态上表现为________________________________(答出两点即可)，功能上具有____________。
胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性相对容易，动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难
胞体积小，细胞核大，核仁明显
(4)鉴定转基因动物：以免疫小鼠的____淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行融合，筛选融合杂种细胞，制备M蛋白的单克隆抗体。简要写出利用此抗体确定克隆动物A中M基因是否失活的实验思路：_____________________________________________________________________。
物A和克隆动物A的肝组织细胞，分别提取蛋白质进行抗原—抗体杂交
3.(2020·全国Ⅰ，38)为研制抗病毒A的单克隆抗体，某同学以小鼠甲为实验材料设计了以下实验流程。
回答下列问题：(1)上述实验前必须给小鼠甲注射病毒A，该处理的目的是_______________________________________________。
生能够分泌抗病毒A抗体的B淋巴细胞
(2)写出以小鼠甲的脾脏为材料制备单细胞悬液的主要实验步骤：________________________________________________________________________________。
鼠甲脾脏剪碎，用胰蛋白酶处理使其分散成单个细胞，加入培养液制成单细胞悬液
(3)为了得到能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞，需要进行筛选。图中筛选1所采用的培养基属于___________，使用该培养基进行细胞培养的结果是_______________________。图中筛选2含多次筛选，筛选所依据的基本原理是___________________________。
只有杂交瘤细胞能够生存
抗原与抗体的反应具有特异性
(4)若要使能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞大量增殖，可采用的方法有_________________________________________________________(答出2点即可)。
将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内增殖；将杂交瘤细胞在体外培养
一、易错辨析1.制备肝细胞悬液时先用剪刀剪碎肝组织，再用胃蛋白酶处理( )2.动物细胞培养时，O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH( )3.制备单克隆抗体时，要选用已免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞( )4.灭活的病毒能促进动物细胞融合，但不能促进植物细胞融合( )5.克隆动物都只具备一个亲本的遗传特性( )6.克隆动物的制备属于有性繁殖( )
二、填空默写1.(选择性必修3 P44)细胞贴壁： 。2.(选择性必修3 P44)接触抑制：____________________________________ 。3.(选择性必修3 P44)细胞在培养过程中分裂受阻的原因：_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________。4.(选择性必修3 P49)杂交瘤细胞的特点是____________________________ 。
细胞贴附在培养瓶的瓶壁上的现象
当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，
细胞通常会停止分裂增殖的现象
会因细胞密度过大、有害代谢物积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻；对于贴壁细胞来说，除上述因素外，还会因为接触抑制而停止分裂增殖
既能大量繁殖，又能产生足够数
5.(选择性必修3 P50)单克隆抗体的优点是____________________________ 。6.(选择性必修3 P54)核移植技术中必须先去掉受体卵母细胞的细胞核的原因是 。7.(选择性必修3 P54)通过体细胞核移植技术培育的克隆动物，不是对体细胞供体动物进行了100%的复制，原因是___________________________________________________________________________________________。此外，动物的一些行为、习性的形成与所处环境有很大关系。
能准确地识别抗原的细微差异，
与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备
保证核移植动物的核遗传物质全部来自供体细胞
克隆动物绝大部分DNA来自供体
细胞核，其核外还有少量的DNA，即线粒体中的DNA来自受体卵母细胞
一、选择题1.(2022·通州市高三一模)下列关于动物细胞培养的叙述，错误的是A.动物细胞培养所需的营养物质与植物细胞培养不同B.传代培养时需要用胰蛋白酶处理贴壁生长的细胞C.癌细胞在培养瓶中培养会出现接触抑制现象D.动物细胞培养时需要添加抗生素以防止杂菌污染
2.如图为杂交瘤细胞制备示意图。骨髓瘤细胞由于缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT－)，在HAT筛选培养液中不能正常合成DNA，无法生长。下列叙述不正确的是A.可用灭活的病毒诱导细胞融合B.两两融合的细胞都能在HAT培养液中 生长C.杂交瘤细胞需进一步筛选才能用于生产D.细胞膜的流动性是细胞融合的基础
3.干细胞具有能够分裂、分化成为人体任何一种组织的潜能，被医学界称为“万用细胞”。下列有关干细胞的叙述，错误的是A.干细胞包括胚胎干细胞和成体干细胞等B.成体干细胞具有组织特异性C.胚胎干细胞和成体干细胞均具有发育成完整个体的能力D.用正常人(异体)的造血干细胞治疗白血病，白血病患者体内会发生排 斥反应
4.(2022·江苏南通模拟)在利用细胞融合技术生产单克隆抗体的过程中，不需要考虑A.B淋巴细胞和骨髓瘤细胞之间的免疫排斥B.注射特定抗原蛋白，对实验小鼠进行免疫C.向细胞培养液中加入促融剂的种类和处理时间D.选择特定试剂筛选能产生特定抗体的杂交瘤细胞
5.科研人员在杂交瘤细胞的基础上，将两种杂交瘤细胞融合获得了双杂交瘤细胞，能够产生双特异性抗体，该抗体可同时结合α、β两种抗原。下列说法错误的是A.制备双特异性抗体时需将抗原α、β分别注射到小鼠体内， 获得免疫小鼠的脾脏细胞B.用解离液处理免疫小鼠的脾脏细胞获得单细胞，再与小 鼠的骨髓瘤细胞融合后可获得两种杂交瘤细胞C.可用PEG试剂促进两种杂交瘤细胞的融合，成功融合后经过筛选可获得 双杂交瘤细胞D.在肿瘤治疗方面研制与肿瘤细胞和抗肿瘤药物结合的双特异性抗体，能 特异性杀死肿瘤细胞
6.(2022·太原模拟)肿瘤细胞表面抗原不能诱导强的免疫应答，树突状细胞(DCs)与肿瘤细胞的融合细胞保持了DCs和肿瘤细胞的特性，能高效地将肿瘤抗原呈递给免疫系统，激发机体的免疫应答，同时还可以维持较长时期的抗肿瘤免疫。这种方法在临床应用中有着非常诱人的前景。下列有关叙述错误的是A.动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同B.融合细胞主要激活B淋巴细胞产生免疫应答C.树突状细胞可在体内起呈递肿瘤抗原的作用D.体外培养动物细胞需要在培养液中添加适量抗生素
7.将细胞毒素类药物与单克隆抗体结合形成抗体—药物偶联物(ADC)，可实现对肿瘤细胞的选择性杀伤，过程如下图。下列相关叙述错误的是
A.体外培养单个已免疫B淋巴细胞可持续大量获得单克隆抗体B.ADC通过胞吞作用进入肿瘤细胞内C.ADC在溶酶体中被裂解后释放出药物D.选择性杀伤肿瘤细胞利用了单克隆抗体特异性强的特点
8.中科院动物所和福州大熊猫研究中心合作，通过将大熊猫的细胞核植入去核后的兔子卵母细胞中，在世界上最早克隆出一批大熊猫早期胚胎，这表明我国的大熊猫人工繁殖研究再次走在世界前列。下列有关叙述中错误的是A.卵母细胞去核的方法是显微注射法，还可以用紫外光短时间照射等方法B.兔子卵母细胞质中有使大熊猫细胞核表达全能性的物质C.重构胚需要用物理或化学方法激活，使之完成细胞分裂和发育进程D.在大熊猫早期胚胎的形成过程中，囊胚期开始出现细胞的分化
9.研究人员将猴胚胎细胞(a)中的细胞核取出，移植入一雌猴的去核卵母细胞(b)中，得到重构胚(c)，经培养获得胚胎并移植到另一雌猴(d)体内进一步发育，获得克隆猴(e)。下列叙述正确的是A.e的细胞内的全部基因都来自a，b不提供基因B.c经一系列增殖和分化形成e的过程中，细胞核起控制作用C.d为胚胎发育提供遗传物质和其他适宜条件D.e的形成过程中没经过受精作用，其体细胞中无同源染色体
10.下图是生产抗新冠病毒的单克隆抗体的过程，下列相关叙述正确的是A.②过程融合的杂交瘤细胞只有一种B.④过程若进行抗体检测结果为阴性，应重新实验C.③过程经过选择培养后只有自身融合的细胞死亡D.为保证获得相应的B淋巴细胞，①过程给小鼠注射大量的新冠病毒
11.近年来，单倍体胚胎干细胞的研究发展迅速，下图为建立孤雄单倍体胚胎干细胞(AG－haESCs)的流程。获得小鼠的AG－haESCs后，科研团队又将其细胞核移植到正常未受精的卵母细胞中，获得半克隆小鼠，发现这些半克隆小鼠都是雌性。以下叙述正确的是
A.与二倍体胚胎干细胞相比，对AG－haESCs 进行基因改造，更容易获得理想表型B.若囊胚细胞中某些基因表达错误影响滋养层的功能，则会影响AG－haESCs 的获取C.根据结果推测仅携带X染色体的AG－haESCs很可能发育异常，难以稳定培 养和扩增D.哺乳动物的单倍体胚胎干细胞技术成熟后，在半克隆人的研究中有广阔的前景
12.如图表示我国体细胞克隆猴的培育过程，下列说法正确的是A.克隆小猴的遗传物质全部来自提 供体细胞的胎猴B.灭活的仙台病毒短暂处理是为了 诱导细胞融合C.代孕母猴应使用一定的激素进行 同期发情和超数排卵处理D.克隆猴培育应用了体外受精﹑胚胎移植和胚胎分割技术
二、非选择题13.Graves病(GD)可导致甲状腺功能亢进。研究发现，GD患者甲状腺细胞表面表达大量细胞间黏附分子1(ICAM－1)，导致甲状腺肿大。科研人员通过制备单克隆抗体，对治疗GD进行了尝试。(1)用ICAM－1作为抗原间隔多次免疫若干只小鼠，几周后取这些免疫小鼠的血清，分别加入多孔培养板的不同孔中，多孔培养板中需加入_________以检测这些小鼠产生的抗体。依据反应结果，选出抗原—抗体反应最___(填“强”或“弱”)的培养孔所对应的小鼠M。
(2)取小鼠M的脾脏细胞制成细胞悬液，与实验用骨髓瘤细胞进行融合，用选择培养基筛选得到具有_________能力的细胞。核酸合成有两个途径，物质A可以阻断其中的全合成途径(如图)。正常细胞内含有补救合成途径所必需的转化酶和激酶，制备单克隆抗体时选用的骨髓瘤细胞中缺乏转化酶。可用加入H、A、T三种物质的“HAT培养基”筛选出特定的杂交瘤细胞。
融合前将部分培养细胞置于含HAT的选择培养基中培养，一段时间后培养基中___(填“有”或“无”)骨髓瘤细胞生长，说明培养基符合实验要求。杂交瘤细胞可以在HAT培养基上大量增殖的原因是________________________________。
(3)将获得的上述细胞在多孔培养板上培养，用ICAM－1检测，从中选择_______________________的杂交瘤细胞，将其植入小鼠腹腔中进行克隆培养，一段时间后从小鼠腹水中提取实验用抗体。
大量产生抗ICAM－1抗体
(4)若进一步比较实验用抗体和131I对GD模型小鼠的治疗作用，可将若干GD模型小鼠等分为三组，请补充下表中的实验设计。
给GD模型小鼠腹腔注射溶于0.1 mL无菌生理盐水的抗ICAM－1单克隆抗体
14.科学家们发现，在核移植过程中，卵母细胞通过表达一些特异因子“修补”了体细胞核中缺失的端粒酶基因，最终成功地从端粒酶杂合缺失的小鼠体细胞中得到多能干细胞，该多能干细胞的端粒长度被有效延长，功能得以恢复。通过核移植后形成的多能干细胞，能分化发育成身体内多种细胞，可用于自身组织修复，并具有安全性。这一成果从实验和理论层面都表明人类“返老还童”不再是梦想。请回答下列问题：
1.阐明动物细胞培养是从动物体获得相关组织，分散成单个细胞后，在适宜的 培养条件下让细胞生长和增殖的过程。动物细胞培养是动物细胞工程的基础。2.阐明动物细胞核移植一般是将体细胞核移入一个去核的卵母细胞中，并使重 组细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的过程。3.阐明动物细胞融合是指通过物理、化学或生物学等手段，使两个或多个动物 细胞结合形成一个细胞的过程。4.概述细胞融合技术是单克隆抗体制备的重要技术。5.简述干细胞在生物医学工程中有广泛的应用价值。
考点二 动物细胞融合技术和单克隆抗体
考点三 动物体细胞核移植技术和克隆动物
重温高考 真题演练
1.动物细胞培养的条件
梳理归纳 夯实必备知识
2.动物细胞培养的过程
细胞贴壁和接触抑制①细胞贴壁是指体外培养的细胞贴附在瓶壁生长的现象；接触抑制是指当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞通常会停止分裂增殖的现象。②细胞贴壁生长对培养瓶的要求：培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。③打破接触抑制现象的方法是将贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖。
动物细胞培养和植物组织培养的比较
糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等
水、矿质元素、蔗糖、维生素、植物激素和琼脂等
细胞培养产生大量细胞，不形成新个体
3.干细胞培养及其应用
(1)胚胎干细胞为什么可以解决供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题？其应用有什么限制因素？
提示 通过胚胎干细胞体外诱导分化，可以培育出人造组织器官，从而解决供体器官不足问题，另一方面，由于是自身细胞经诱导分化形成的，所以无免疫排斥反应。胚胎干细胞必须从胚胎中获取，这涉及伦理问题，因而限制了应用。
(2)为什么科学家认为iPS细胞的应用前景优于胚胎干细胞？
提示 iPS细胞的诱导过程无需破坏胚胎，而且iPS细胞可以来源于病人自身的体细胞，将它移植回病人体内后，理论上可以避免免疫排斥反应。
(3)科学家已尝试采用多种方法来制备iPS细胞，尝试说出几种获取iPS细胞的方法。
提示 借助载体将特定基因导入细胞中，直接将特定蛋白导入细胞中或者用小分子化合物等来诱导形成iPS细胞。iPS细胞最初是由成纤维细胞转化而来的，后来发现已分化的T细胞、B细胞等也能被诱导为iPS细胞。
考向一 动物细胞培养1.(2021·辽宁1月适应性测试，15)为了初步检测药物X和Y的抗癌活性，在细胞培养板的每个孔中加入相同数量的肝癌细胞，使其贴壁生长，实验组加入等体积相同浓度的溶于二甲基亚砜(溶剂)的药物X或Y，培养过程及结果如下图所示。下列有关叙述错误的是
考向突破 强化关键能力
A.细胞培养液中通常需要加入血清B.可用胰蛋白酶处理使肝癌细胞脱落下来并 进行计数C.对照组中应加入等体积的无菌蒸馏水D.根据实验结果，可以初步判断药物X的抗 癌效果较好
2.实验小鼠皮肤细胞培养(非克隆培养)的基本过程如图所示。下列叙述错误的是
A.甲过程需要对实验小鼠进行消毒B.乙过程对皮肤组织可用胰蛋白酶处理C.丙过程是原代培养D.丁过程直接将丙过程得到的细胞分瓶培养
考向二 干细胞培养及其应用3.(2021·辽宁1月适应性测试，14)下列有关干细胞的叙述，错误的是A.干细胞是具有分裂和分化能力的细胞B.造血干细胞可定向诱导分化成机体所有种类的细胞C.胚胎干细胞在饲养层细胞上培养能够维持不分化的状态D.移植胚胎干细胞可使退化的组织得以修复并恢复正常功能
4.胚胎干细胞必须从胚胎中获取，但这涉及伦理问题，因而限制了它在医学上的应用。科学家通过体外诱导成纤维细胞，获得了类似于胚胎干细胞的一种细胞，称为诱导多能干细胞(简称iPS细胞)。因为诱导过程无须破坏胚胎，而且iPS细胞可来源于病人自身的体细胞，因此iPS细胞的
应用前景优于胚胎干细胞。如图为iPS细胞的获得及用其培育不同种细胞的示意图(c－Myc、Klf4、Sx2和Oct3/4等基因与细胞的脱分化有关)。回答下列问题：
(1)在对成纤维细胞进行培养时，常用胰蛋白酶处理使之分散成单个细胞，这说明细胞间的物质为_______，_____(填“能”或“不能”)用胃蛋白酶处理成纤维细胞，原因是________________________________________________________________。
多数动物细胞培养的适宜pH为7.2～7.4，胃
蛋白酶在此环境中失活变性
(2)在培养iPS细胞的过程中，培养基中应含有细胞所需的各种营养物质，并定期更换培养液。定期更换培养液的目的是__________________________________________________。
清除代谢物﹐防止细胞代
谢物积累对细胞自身造成危害
(3)过程③④为iPS细胞提供的条件不同，分化得到的细胞不同，可知细胞分化是_______________的结果。若iPS细胞来源于病人自身体细胞的诱导，再将其分化出的细胞移入患者体内的优势是___________________。
(4)如果诱导iPS细胞定向分化为原始生殖细胞，该技术可能的应用是_____________。
动物细胞融合技术和单克隆抗体
PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等
2.单克隆抗体的制备(1)制备原理①B淋巴细胞特点：一种B淋巴细胞只分泌 种特异性抗体。②骨髓瘤细胞特点：能在体外 。③杂交瘤细胞的特点：既能 ，又能产生足够数量的 。
①图中给小鼠注射特定的抗原蛋白，其目的是什么？
提示 刺激机体发生免疫应答，从而产生特定的B淋巴细胞。
②若仅考虑细胞的两两融合，在获取杂交瘤细胞的过程中，筛选淘汰的细胞有几种类型？为什么？
提示 有未融合的细胞和同种细胞融合后形成的细胞(B－B融合细胞、瘤－瘤融合细胞)两种类型。出现不同类型是因为细胞融合不是100%的，且是随机的。
③单克隆抗体制备过程中两次筛选的方法及目的
第一次筛选获得杂交瘤细胞的方法：①细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。②人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但不能分裂增殖。③鼠骨髓瘤细胞中只有D途径，没有S途径，但能不断分裂增殖。在培养基中加入氨基嘌呤，B淋巴细胞及同型融合细胞不能增殖，骨髓瘤细胞及同型融合细胞(氨基嘌呤阻断)不能增殖，只有杂交瘤细胞能无限增殖。
2.单克隆抗体的应用(1)作为 ：在多种疾病的诊断和病原体鉴定中发挥重要的作用。(2)运载药物：抗体—药物偶联物(ADC)通过将 与能特异性识别肿瘤抗原的 结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。ADC通常由 三部分组成。①ADC的抗体和药物各具有什么作用？
抗体、接头和药物(如细胞毒素)
提示 ADC的抗体和药物具有的作用分别是导向和治疗。
②除了细胞毒素，还有哪些物质理论上可以作为ADC偶联的药物？
提示 放射性同位素和化学药物等。
③ADC在临床应用上的作用机理是什么？
提示 其作用机理是通过单克隆抗体的靶向作用特异性地识别肿瘤细胞表面抗原，然后利用细胞本身具备的内吞作用使化学药物进入肿瘤细胞体内发生药力，从而达到杀死肿瘤细胞的目的。
比较植物体细胞杂交和动物细胞融合
考向 单克隆抗体5.(2022·黑龙江黑河市高三一模)人乳头瘤病毒(HPV)是一种DNA病毒，可诱发细胞癌变。抗HPV的单克隆抗体可以准确检测出HPV，从而及时监控宫颈癌的发生。以HPV衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体的过程如下图所示。下列叙述错误的是
A.在HAT培养基上存活的杂交瘤细胞既能 无限增殖又可以分泌抗体B.单克隆抗体的特点是灵敏度高、特异性 强，可以大量制备C.可用HPV衣壳蛋白检测筛选出能产生特 异性抗体的杂交瘤细胞D.单克隆抗体制备过程涉及的生物学原理有细胞增殖和细胞膜的选择透 过性
6.下图为单克隆抗体制备过程的示意图。下列有关叙述错误的是A.X细胞是从脾脏中提取的已免疫的B淋巴细胞B.Y细胞是杂交瘤细胞，必须取用培养10代以内的细胞C.图中的过程至少需要筛选两次且方法不同，最终保留抗体检测呈阳性 的细胞D.图中能产生单克隆抗体的细胞在培养过程中不会出现接触抑制的现象
动物体细胞核移植技术和克隆动物
1.动物细胞核移植技术(1)概念分析①供体：动物一个细胞的 。②受体：去掉细胞核的 。③结果：重新组合的细胞发育成 ，继而发育成动物个体。④原理： 。(2)哺乳动物核移植类型： 细胞核移植和体细胞核移植。
动物体细胞核具有全能性
2.体细胞核移植的过程
(1)动物核移植技术的理论基础(原理)是什么？克隆动物属于有性生殖还是无性繁殖？
提示 动物细胞核的全能性。克隆动物属于无性繁殖。
(2)为什么体细胞核移植较胚胎细胞核移植更困难？
提示 由于动物胚胎细胞分化程度低，表现全能性相对容易；而动物体细胞分化程度高，表现全能性十分困难。因此动物体细胞核移植的难度就明显高于胚胎细胞核移植。
(3)受体细胞为什么选用卵母细胞？
提示 体积大，易操作；去核时易于同时吸走第一极体；含有激发细胞核全能性的物质。
(4)为什么不是取供体细胞核进行核移植操作，而是将供体细胞整个注入去核卵母细胞中？
提示 保证供核不被破坏，使克隆动物更像供体动物，操作也方便。
(5)在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前，为什么必须先去掉受体卵母细胞的核？
提示 为使核移植的胚胎或动物的核遗传物质全部来自有重要利用价值的动物提供的体细胞，在供体细胞的细胞核移至受体细胞之前，必须将受体细胞的核遗传物质去掉或将其破坏。
(6)从多莉的产生过程可以看出多莉有三个亲本，探究多莉的性状表现与三个亲本的关系并分析原因。
提示 ①大多数性状与母羊A(体细胞核供体)相同，因基因型与母羊A完全一样。②少数性状与母羊B(卵母细胞细胞质供体)相同，因细胞质中的基因来自母羊B，受质基因控制的性状与母羊B相同。③性状与母羊C(代孕母体)无关，因母羊C没有为新个体提供遗传物质。
源于选择性必修3 P54“相关信息”：目前动物细胞核移植技术中普遍使用的去核方法是 。也有人采用梯度离心、紫外线短时间照射和化学物质处理等方法。这些方法是在没有穿透卵母细胞透明带的情况下去核或使其中的 。
2.体细胞核移植技术的应用前景和存在的问题
细胞工程的各种技术手段及其原理总结
考向 动物体细胞核移植技术和克隆动物7.(2022·鸡西模拟)2018年1月国际顶尖学术期刊《Cell》杂志报道，我国科学家以一只雌性猕猴胎儿成纤维细胞为核供体成功克隆两只猕猴，成为全球首例体细胞克隆灵长类动物。下列相关叙述错误的是A.这项技术证明高度分化的动物体细胞具有全能性B.研究中需要使用成熟卵母细胞作为核移植的受体C.培育出的两只雌性猕猴的基因组成几乎完全相同D.克隆猕猴的成功为大量培育灵长类遗传病模型动物提供了可能
8.“中中”和“华华”是两只在我国出生的克隆猕猴，它们也是国际上首例利用体细胞克隆技术获得的非人灵长类动物。如图表示培育“中中”和“华华”的流程。下列相关叙述正确的是
A.图示过程中利用的技术有核移植和干细胞移植技术等B.这两只克隆猕猴是由同一受精卵发育而成的双胞胎C.融合细胞的培养过程需要无菌、无毒的环境和营养等条件D.利用A猴的胚胎干细胞核移植获得克隆猕猴的难度更大些
重温高考 真题演练
1.(2021·山东，15)一个抗原往往有多个不同的抗原决定簇，一个抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体，由同一抗原刺激产生的不同抗体统称为多抗。将非洲猪瘟病毒衣壳蛋白p72注入小鼠体内，可利用该小鼠的免疫细胞制备抗p72的单抗，也可以从该小鼠的血清中直接分离出多抗。下列说法正确的是A.注入小鼠体内的抗原纯度对单抗纯度的影响比对多抗纯度的影响大B.单抗制备过程中通常将分离出的浆细胞与骨髓瘤细胞融合C.利用该小鼠只能制备出一种抗p72的单抗D.p72部分结构改变后会出现原单抗失效而多抗仍有效的情况
2.(2021·湖南，22)M基因编码的M蛋白在动物A的肝细胞中特异性表达。现设计实验，将外源DNA片段F插入M基因的特定位置，再通过核移植、胚胎培养和胚胎移植等技术获得M基因失活的转基因克隆动物A，流程如图所示。回答下列问题：
(1)在构建含有片段F的重组质粒过程中，切割质粒DNA的工具酶是________________________，这类酶能将特定部位的两个核苷酸之间的___________断开。(2)在无菌、无毒等适宜环境中进行动物A成纤维细胞的原代和传代培养时，需要定期更换培养液，目的是_____________________________________________________________________________。
防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害，同时给细胞提供足够的营养
(3)与胚胎细胞核移植技术相比，体细胞核移植技术的成功率更低，原因是____________________________________________________________________________________________。从早期胚胎中分离获得的胚胎干细胞，在形态上表现为________________________________(答出两点即可)，功能上具有____________。
胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性相对容易，动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难
胞体积小，细胞核大，核仁明显
(4)鉴定转基因动物：以免疫小鼠的____淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行融合，筛选融合杂种细胞，制备M蛋白的单克隆抗体。简要写出利用此抗体确定克隆动物A中M基因是否失活的实验思路：_____________________________________________________________________。
物A和克隆动物A的肝组织细胞，分别提取蛋白质进行抗原—抗体杂交
3.(2020·全国Ⅰ，38)为研制抗病毒A的单克隆抗体，某同学以小鼠甲为实验材料设计了以下实验流程。
回答下列问题：(1)上述实验前必须给小鼠甲注射病毒A，该处理的目的是_______________________________________________。
生能够分泌抗病毒A抗体的B淋巴细胞
(2)写出以小鼠甲的脾脏为材料制备单细胞悬液的主要实验步骤：________________________________________________________________________________。
鼠甲脾脏剪碎，用胰蛋白酶处理使其分散成单个细胞，加入培养液制成单细胞悬液
(3)为了得到能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞，需要进行筛选。图中筛选1所采用的培养基属于___________，使用该培养基进行细胞培养的结果是_______________________。图中筛选2含多次筛选，筛选所依据的基本原理是___________________________。
只有杂交瘤细胞能够生存
抗原与抗体的反应具有特异性
(4)若要使能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞大量增殖，可采用的方法有_________________________________________________________(答出2点即可)。
将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内增殖；将杂交瘤细胞在体外培养
一、易错辨析1.制备肝细胞悬液时先用剪刀剪碎肝组织，再用胃蛋白酶处理( )2.动物细胞培养时，O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH( )3.制备单克隆抗体时，要选用已免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞( )4.灭活的病毒能促进动物细胞融合，但不能促进植物细胞融合( )5.克隆动物都只具备一个亲本的遗传特性( )6.克隆动物的制备属于有性繁殖( )
二、填空默写1.(选择性必修3 P44)细胞贴壁： 。2.(选择性必修3 P44)接触抑制：____________________________________ 。3.(选择性必修3 P44)细胞在培养过程中分裂受阻的原因：_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________。4.(选择性必修3 P49)杂交瘤细胞的特点是____________________________ 。
细胞贴附在培养瓶的瓶壁上的现象
当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，
细胞通常会停止分裂增殖的现象
会因细胞密度过大、有害代谢物积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻；对于贴壁细胞来说，除上述因素外，还会因为接触抑制而停止分裂增殖
既能大量繁殖，又能产生足够数
5.(选择性必修3 P50)单克隆抗体的优点是____________________________ 。6.(选择性必修3 P54)核移植技术中必须先去掉受体卵母细胞的细胞核的原因是 。7.(选择性必修3 P54)通过体细胞核移植技术培育的克隆动物，不是对体细胞供体动物进行了100%的复制，原因是___________________________________________________________________________________________。此外，动物的一些行为、习性的形成与所处环境有很大关系。
能准确地识别抗原的细微差异，
与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备
保证核移植动物的核遗传物质全部来自供体细胞
克隆动物绝大部分DNA来自供体
细胞核，其核外还有少量的DNA，即线粒体中的DNA来自受体卵母细胞
一、选择题1.(2022·通州市高三一模)下列关于动物细胞培养的叙述，错误的是A.动物细胞培养所需的营养物质与植物细胞培养不同B.传代培养时需要用胰蛋白酶处理贴壁生长的细胞C.癌细胞在培养瓶中培养会出现接触抑制现象D.动物细胞培养时需要添加抗生素以防止杂菌污染
2.如图为杂交瘤细胞制备示意图。骨髓瘤细胞由于缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT－)，在HAT筛选培养液中不能正常合成DNA，无法生长。下列叙述不正确的是A.可用灭活的病毒诱导细胞融合B.两两融合的细胞都能在HAT培养液中 生长C.杂交瘤细胞需进一步筛选才能用于生产D.细胞膜的流动性是细胞融合的基础
3.干细胞具有能够分裂、分化成为人体任何一种组织的潜能，被医学界称为“万用细胞”。下列有关干细胞的叙述，错误的是A.干细胞包括胚胎干细胞和成体干细胞等B.成体干细胞具有组织特异性C.胚胎干细胞和成体干细胞均具有发育成完整个体的能力D.用正常人(异体)的造血干细胞治疗白血病，白血病患者体内会发生排 斥反应
4.(2022·江苏南通模拟)在利用细胞融合技术生产单克隆抗体的过程中，不需要考虑A.B淋巴细胞和骨髓瘤细胞之间的免疫排斥B.注射特定抗原蛋白，对实验小鼠进行免疫C.向细胞培养液中加入促融剂的种类和处理时间D.选择特定试剂筛选能产生特定抗体的杂交瘤细胞
5.科研人员在杂交瘤细胞的基础上，将两种杂交瘤细胞融合获得了双杂交瘤细胞，能够产生双特异性抗体，该抗体可同时结合α、β两种抗原。下列说法错误的是A.制备双特异性抗体时需将抗原α、β分别注射到小鼠体内， 获得免疫小鼠的脾脏细胞B.用解离液处理免疫小鼠的脾脏细胞获得单细胞，再与小 鼠的骨髓瘤细胞融合后可获得两种杂交瘤细胞C.可用PEG试剂促进两种杂交瘤细胞的融合，成功融合后经过筛选可获得 双杂交瘤细胞D.在肿瘤治疗方面研制与肿瘤细胞和抗肿瘤药物结合的双特异性抗体，能 特异性杀死肿瘤细胞
6.(2022·太原模拟)肿瘤细胞表面抗原不能诱导强的免疫应答，树突状细胞(DCs)与肿瘤细胞的融合细胞保持了DCs和肿瘤细胞的特性，能高效地将肿瘤抗原呈递给免疫系统，激发机体的免疫应答，同时还可以维持较长时期的抗肿瘤免疫。这种方法在临床应用中有着非常诱人的前景。下列有关叙述错误的是A.动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同B.融合细胞主要激活B淋巴细胞产生免疫应答C.树突状细胞可在体内起呈递肿瘤抗原的作用D.体外培养动物细胞需要在培养液中添加适量抗生素
7.将细胞毒素类药物与单克隆抗体结合形成抗体—药物偶联物(ADC)，可实现对肿瘤细胞的选择性杀伤，过程如下图。下列相关叙述错误的是
A.体外培养单个已免疫B淋巴细胞可持续大量获得单克隆抗体B.ADC通过胞吞作用进入肿瘤细胞内C.ADC在溶酶体中被裂解后释放出药物D.选择性杀伤肿瘤细胞利用了单克隆抗体特异性强的特点
8.中科院动物所和福州大熊猫研究中心合作，通过将大熊猫的细胞核植入去核后的兔子卵母细胞中，在世界上最早克隆出一批大熊猫早期胚胎，这表明我国的大熊猫人工繁殖研究再次走在世界前列。下列有关叙述中错误的是A.卵母细胞去核的方法是显微注射法，还可以用紫外光短时间照射等方法B.兔子卵母细胞质中有使大熊猫细胞核表达全能性的物质C.重构胚需要用物理或化学方法激活，使之完成细胞分裂和发育进程D.在大熊猫早期胚胎的形成过程中，囊胚期开始出现细胞的分化
9.研究人员将猴胚胎细胞(a)中的细胞核取出，移植入一雌猴的去核卵母细胞(b)中，得到重构胚(c)，经培养获得胚胎并移植到另一雌猴(d)体内进一步发育，获得克隆猴(e)。下列叙述正确的是A.e的细胞内的全部基因都来自a，b不提供基因B.c经一系列增殖和分化形成e的过程中，细胞核起控制作用C.d为胚胎发育提供遗传物质和其他适宜条件D.e的形成过程中没经过受精作用，其体细胞中无同源染色体
10.下图是生产抗新冠病毒的单克隆抗体的过程，下列相关叙述正确的是A.②过程融合的杂交瘤细胞只有一种B.④过程若进行抗体检测结果为阴性，应重新实验C.③过程经过选择培养后只有自身融合的细胞死亡D.为保证获得相应的B淋巴细胞，①过程给小鼠注射大量的新冠病毒
11.近年来，单倍体胚胎干细胞的研究发展迅速，下图为建立孤雄单倍体胚胎干细胞(AG－haESCs)的流程。获得小鼠的AG－haESCs后，科研团队又将其细胞核移植到正常未受精的卵母细胞中，获得半克隆小鼠，发现这些半克隆小鼠都是雌性。以下叙述正确的是
A.与二倍体胚胎干细胞相比，对AG－haESCs 进行基因改造，更容易获得理想表型B.若囊胚细胞中某些基因表达错误影响滋养层的功能，则会影响AG－haESCs 的获取C.根据结果推测仅携带X染色体的AG－haESCs很可能发育异常，难以稳定培 养和扩增D.哺乳动物的单倍体胚胎干细胞技术成熟后，在半克隆人的研究中有广阔的前景
12.如图表示我国体细胞克隆猴的培育过程，下列说法正确的是A.克隆小猴的遗传物质全部来自提 供体细胞的胎猴B.灭活的仙台病毒短暂处理是为了 诱导细胞融合C.代孕母猴应使用一定的激素进行 同期发情和超数排卵处理D.克隆猴培育应用了体外受精﹑胚胎移植和胚胎分割技术
二、非选择题13.Graves病(GD)可导致甲状腺功能亢进。研究发现，GD患者甲状腺细胞表面表达大量细胞间黏附分子1(ICAM－1)，导致甲状腺肿大。科研人员通过制备单克隆抗体，对治疗GD进行了尝试。(1)用ICAM－1作为抗原间隔多次免疫若干只小鼠，几周后取这些免疫小鼠的血清，分别加入多孔培养板的不同孔中，多孔培养板中需加入_________以检测这些小鼠产生的抗体。依据反应结果，选出抗原—抗体反应最___(填“强”或“弱”)的培养孔所对应的小鼠M。
(2)取小鼠M的脾脏细胞制成细胞悬液，与实验用骨髓瘤细胞进行融合，用选择培养基筛选得到具有_________能力的细胞。核酸合成有两个途径，物质A可以阻断其中的全合成途径(如图)。正常细胞内含有补救合成途径所必需的转化酶和激酶，制备单克隆抗体时选用的骨髓瘤细胞中缺乏转化酶。可用加入H、A、T三种物质的“HAT培养基”筛选出特定的杂交瘤细胞。
融合前将部分培养细胞置于含HAT的选择培养基中培养，一段时间后培养基中___(填“有”或“无”)骨髓瘤细胞生长，说明培养基符合实验要求。杂交瘤细胞可以在HAT培养基上大量增殖的原因是________________________________。
(3)将获得的上述细胞在多孔培养板上培养，用ICAM－1检测，从中选择_______________________的杂交瘤细胞，将其植入小鼠腹腔中进行克隆培养，一段时间后从小鼠腹水中提取实验用抗体。
大量产生抗ICAM－1抗体
(4)若进一步比较实验用抗体和131I对GD模型小鼠的治疗作用，可将若干GD模型小鼠等分为三组，请补充下表中的实验设计。
给GD模型小鼠腹腔注射溶于0.1 mL无菌生理盐水的抗ICAM－1单克隆抗体
14.科学家们发现，在核移植过程中，卵母细胞通过表达一些特异因子“修补”了体细胞核中缺失的端粒酶基因，最终成功地从端粒酶杂合缺失的小鼠体细胞中得到多能干细胞，该多能干细胞的端粒长度被有效延长，功能得以恢复。通过核移植后形成的多能干细胞，能分化发育成身体内多种细胞，可用于自身组织修复，并具有安全性。这一成果从实验和理论层面都表明人类“返老还童”不再是梦想。请回答下列问题：
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