生物一、动物细胞培养经历原代培养和传代培养复习练习题

【精挑】一、动物细胞培养经历原代培养和传代培养-3随堂练习

一．单项选择

1．下图是人体抗胃癌单克隆抗体的制备过程。下列有关叙述错误的是

A．甲是能与人体抗胃癌抗体特异性结合的抗原

B．细胞融合获得乙的原理和植物原生质体融合的原理都是细胞膜的流动性

C．用特定选择培养基对乙筛选，融合细胞均能生长，未融合细胞均不能生长

D．丙需进行克隆化培养和抗体检测，多次筛选后可获得能分泌所需抗体的丁

2．下列关于动物细胞工程的叙述，错误的是 （   ）

A．PEG诱导动物细胞融合形成的杂种细胞，经动物细胞培养不能得到优良动物个体

B．使用冷冻保存的正常细胞通常为10代以内，以保持细胞正常的二倍体核型

C．在高倍显微镜下观察发生基因突变的细胞比例可推知某化学药品的毒性

D．用胰蛋白酶处理动物组织后，可用无菌生理盐水稀释制成细胞悬浮液

3．科学家利用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是

A．经过免疫的B淋巴细胞

B．不经过免疫的T淋巴细胞

C．经过免疫的T淋巴细胞

D．不经过免疫的B淋巴细胞

4．制备单克隆抗体过程中，动物细胞培养需要先分离出单个细胞，然后再进行培养和筛选。这样做的目的是（    ）

A．为了避免微生物污染

B．保证获得细胞的遗传背景相同

C．为了使细胞周期一致

D．保证细胞得到充足的营养

5．下列有关细胞工程的说法正确的是（    ）

A．植物组织培养获得的试管苗，可能为杂合子，也可能为纯合子

B．同一株绿色开花植物不同部位的细胞经组织培养获得的愈伤组织基因型一定相同

C．动物细胞融合与植物体细胞杂交都能形成杂交个体

D．为了防止细胞培养过程中病毒的污染，可向培养液中加入适量的抗生素

6．某研究小组为了测定药物对体外培养细胞的毒性，准备对某种动物的肝肿瘤细胞（甲）和正常肝细胞（乙） 进行动物细胞培养。下列叙述正确的是

A．制备肝细胞悬液时，可用胃蛋白酶处理肝组织块

B．恒温培养箱中的CO2浓度维持在5％左右，以促进细胞呼吸

C．为了保证细胞培养所需的无毒环境，需大量添加各种抗生素

D．本实验应设置对照实验，以检测药物对甲．乙的毒性大小

7．单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生命科学研究中具有广泛的应用。下列关于单克隆抗体的叙述，错误的是

A．特异性强，灵敏度高，并可大量制备

B．制备过程中第二次筛选的目的是筛选出杂交瘤细胞

C．可用聚乙二酵作诱导剂，促使细胞融合

D．在制成“生物导弹”中主要起“瞄准”的作用

8．下列关于动物细胞培养过程的叙述，错误的是（    ）

A．动物细胞培养的理论基础是细胞增殖

B．动物细胞原代培养后可用胃蛋白酶分散细胞

C．动物细胞培养的培养基中需含促生长因子．动物血清等

D．动物细胞培养的结果是获得细胞群，一般其遗传物质没有改变

9．下列关于单克隆抗体的叙述，不正确的是

A．其化学本质是蛋白质

B．治疗癌症所用的“生物导弹”中的“瞄准装置”是单克隆抗体

C．利用单克隆抗体制成诊断盒，可用于疾病的诊断

D．单克隆抗体只能在体内生产，不能在体外生产

10．甲型H1N1流感病毒属于全人类共同的敌人，某生物工程公司拟利用细胞工程方法，以甲型H1Nl病毒衣壳蛋白为抗原制备单克隆抗体。相关叙述正确的是

A．将纯化的衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体

B．体外培养单个浆细胞还可以获得大量针对甲型H1N1病毒的淋巴因子

C．将等量浆细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞

D．利用该单克隆抗体与甲型H1N1病毒衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者

11．下列关于动物细胞培养的叙述，不正确的是 

A．培养至细胞发生接触抑制时，瓶壁上的细胞呈单层分布

B．在细胞培养过程中，有部分细胞的基因型会发生改变

C．骨髓瘤细胞的传代培养次数通常不是无限的

D．传代培养时，需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理

12．如图为细胞融合的示意图，下列叙述正确的是（　　）

A．若a细胞和b细胞是植物细胞，需先去分化再诱导融合

B．a细胞和b细胞之间的融合需要促融处理后才能实现

C．c细胞的形成与a．b细胞膜的流动性都有关

D．c细胞将同时表达a细胞和b细胞中的所有基因

13．西瓜花叶病毒（WMV）是危害西瓜和甜瓜等瓜类作物的主要病害之一。为了能快速有效检测出该病毒，研究人员利用WMV的病毒粒子免疫健康小鼠，进而制备出了相应的单克隆抗体。下列有关叙述正确的是

A．以WMV病毒粒子免疫健康小鼠，直接分离获得分泌相应抗体的B细胞

B．从小鼠体内中分离获得的B细胞，应继续培养至10代左右

C．用感染WMV的西瓜汁液，检测经筛选获得的杂交瘤细胞是否呈阳性

D．分别用未感染和感染WMV的西瓜汁液，检测相应的单克隆抗性的特异性

14．动物细胞培养应在含5%CO2的恒温箱中进行，CO2的作用是（    ）

A．为细胞提供碳源 B．促进细胞贴壁生长

C．维持培养液的pH稳定 D．防止细胞之间粘连

15．家蚕细胞具有高效表达外源基因能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用于制药。下列说法不正确的是(       )

A．家蚕细胞培养所需二氧化碳的主要作用是维持培养液的pH

B．来自cDNA文库的干扰素基因片段必须插入表达载体的启动子和终止子之间

C．采用PCR技术扩增干扰素基因的实验中是以干扰素基因为模板

D．进行转基因操作前，需用纤维素酶短时处理幼蚕组织，以便获得单个细胞

16．下列有关克隆羊“多莉”培育的叙述，正确的是（    ）

A．培育过程中需对核供体母羊注射促性腺激素，促进其超数排卵

B．重组细胞培养到 8 细胞胚过程中，有机物总量增多总体积变大

C．营养限制性培养有利于重组细胞中基因表达的分子开关的开启

D．来自于乳腺细胞核的蛋白质因子可使核 DNA 被重新编排排

17．2001年2月，一只背上长着“人耳”的老鼠在北京展览馆与众人见面，这只老鼠其实是一只切去脾脏的老鼠，它背上的“人耳”以一种高分子化学材料——聚羟基乙酸作为模型支架，培植“人耳鼠”的生物工程技术是（    ）

A．细胞和组织培养 B．细胞融合

C．动物胚胎移植 D．细胞核移植

18．现代生物技术是在分子生物学基础上建立的创建新的生物类型或新生物机能的实用技术，是现代生物科学和工程技术相结合的产物。下列有关现代生物技术的叙述，正确的是（    ）

A．植物体细胞杂交和动物细胞融合都利用了细胞的全能性

B．转基因羊和克隆羊多利的培育都克服了远缘杂交不亲和的障碍

C．试管牛和试管苗的培育过程中，都需要改变培育环境

D．脱毒草莓和转基因抗病毒草莓的培育都发生了基因重组

参考答案与试题解析

1．【答案】C

【解析】

试题分析：

解答：

A．据图可知，将甲注射到小鼠体内，小鼠可产生能分泌抗胃癌抗体的B淋巴细胞，则甲是能与人体抗胃癌抗体特异性结合的抗原，故A项正确；

B．细胞融合获得乙的原理和植物原生质体融合的原理基本相同，都是利用了细胞膜的流动性特点，B项正确；

C．用特定选择培养基对乙筛选，只有杂交瘤细胞能生长，其余自身融合细胞以及未融合细胞均不能生长，C项错误；

D．杂交瘤细胞丙需进行克隆化培养和单一抗体检测，多次筛选后可获得能分泌所需抗体的丁，D项正确。

故选C。

2．【答案】C

【解析】

试题分析：

动物细胞的培育过程是：进行细胞培养时，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理一段时间，这样组织就会分散成单个细胞，再用培养液将分散的细胞稀释制成细胞悬液进行培养。目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常在10代以内，以保持细胞正常的二倍体核型。

解答：

A．由于动物细胞的全能性受到限制，动物细胞融合形成的杂种细胞不能培育成杂种个体，故A正确；

B．目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内，以保持细胞正常的二倍体核型，故B正确；

C．基因突变是点突变，在光学显微镜下无法观察到，故C错误；

D．进行细胞培养时用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理一段时间，这样组织就会分散成单个细胞，然后也可用无菌生理盐水将分散的细胞稀释制成细胞悬液，故D正确。

故选C。

3．【答案】A

【解析】

单克隆抗体制备是利用经免疫的B细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交细胞产生的。

4．【答案】B

【解析】

试题分析：

将已免疫的小鼠的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，获得能分泌特定抗体的杂交瘤细胞的过程中至少要进行两次筛选，一次是通过选择培养基筛选出杂交瘤细胞，另一次是通过专一抗体检测筛选出能分泌特定抗体的杂交瘤细胞。

解答：

由于小鼠生活过程中存在多种抗原感染，所以小鼠体内存在多种B淋巴细胞，从小鼠体内获取的经过免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，会形成多种杂交瘤细胞，同时也存在未融合的细胞和同种细胞的融合体，将这些细胞放在特定的选择培养基上培养，可筛选出杂交瘤细胞，但这些杂交瘤细胞产生的抗体是多种，为了筛选到能产生单一抗体的细胞群，可将上述杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，由于每个小孔内只有一个杂交瘤细胞，所以可筛选到产生特异性抗体的杂交瘤细胞，即两次筛选的目的是保证获得细胞的遗传背景相同。筛选的目的不是避免微生物污染，也不是使细胞周期一致和保证细胞得到充足的营养，综上分析，B正确，ACD错误。

故选B。

5．【答案】A

【解析】

试题分析：

细胞工程是生物工程的一个重要方面，总的来说它是应用细胞生物学和分子生物学的理论和方法，按照人们的设计蓝图，进行在细胞水平上的遗传操作及进行大规模的细胞和组织培养；根据细胞类型的不同，可以把细胞工程分为植物细胞工程和动物细胞工程两大类。

解答：

A．由于植物组织培养属于无性生殖，植物组培获得的试管苗的基因型与亲本的基因型相同，可能为杂合子，也可能为纯合子，A正确；

B．同一植株不同细胞经培养获得的愈伤组织基因不一定相同，如花粉细胞培养形成的愈伤组织细胞的基因只有体细胞形成的愈伤组织细胞的基因的一半，B错误；

C．植物体细胞杂交都能形成杂交个体，而动物细胞融合一般不能形成杂交个体，C错误；

D．抗生素可以防止杂菌污染，但是不能防止病毒污染，D错误。

故选A。

6．【答案】D

【解析】

试题分析：动物细胞培养制备细胞悬液时，应用胰蛋白酶进行处理，A项错误；动物细胞培养的过程中，浓度为5%的CO2的作用是维持培养液的PH，B项错误；为了防止杂菌污染，保证细胞培养所需的无毒环境，需适量添加抗生素，C项错误；为了检测药物对甲．乙的毒性大小，应设置培养液中不加该药物的对照实验，D项正确。

7．【答案】B

【解析】

试题分析：

单克隆抗体最主要的优点在于它的特异性强．灵敏度高，并可能大量制备。单克隆抗体主要由以下几方面的用途：作为诊断试剂；用于治疗疾病和运载药物。

解答：

A．单克隆抗体具有特异性强．灵敏度高，并可能大量制备的特点，A正确；

B．第二次筛选的目的是筛选出能产生特异性抗体的细胞群，B错误；

C．促使细胞融合的方法有物理诱导．化学诱导和灭活病毒诱导，如可用聚乙二酵作化学诱导剂，C正确；

D．“生物导弹”中的“瞄准装置”由识别肿瘤的单克隆抗体组成，D正确。

故选B。

8．【答案】B

【解析】

试题分析：

动物细胞培养指从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。

解答：

A. 动物细胞培养的原理是细胞增殖，A正确；

B．动物细胞原代培养后可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶分散细胞，胃蛋白酶在强酸条件下发挥活性，在偏中性的pH下无活性，动物细胞培养液偏中性，B错误；

C．动物细胞培养的培养基中需含促生长因子．动物血清等，可以为动物细胞提供营养物质，C正确；

D．动物细胞培养利用的原理是细胞增殖，结果是获得细胞群，一般其遗传物质没有改变，D正确。

故选B。

9．【答案】D

【解析】

试题分析：

单克隆抗体的制备

（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。

（2）获得杂交瘤细胞。

①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；

②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。

（3）克隆化培养和抗体检测；

（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖；

（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。

解答：

A．单克隆抗体化学本质是蛋白质，A正确；

B．“生物导弹”中的“瞄准装置”是单克隆抗体，“弹头”是药物，B正确；

C．利用单克隆抗体制成诊断试剂可用于疾病的诊断，C正确；

D．单克隆抗体既能在体内生产，也能在体外生产，D错误。

故选D。

10．【答案】D

【解析】

将纯化的衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，只能得到该抗体浓度较高的血清，但不是单克隆抗体，A错误。浆细胞高度分化，不能增殖，且产生淋巴因子的是T细胞，B错误。将等量浆细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后，考虑两两融合，产生的融合细胞有3种，不都是杂交瘤细胞，C错误。利用该单克隆抗体与甲型H1N1病毒衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者，D正确。

11．【答案】C

【解析】

试题分析：

动物细胞的培养：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖；动物细胞培养液的成分：葡萄糖．氨基酸．促生长因子．无机盐．微量元素等；动物细胞培养液的特点：液体培养基含动物血清。动物细胞培养的过程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。

解答：

由于接触抑制，动物细胞培养时只能形成单层细胞，A正确；在细胞培养的传代培养过程中，有部分细胞的遗传物质发生了改变，因此基因型会发生改变，B正确；骨髓瘤细胞是癌细胞，具有无限增值的特点，C错误；传代培养时，需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞，D正确。

12．【答案】BC

【解析】

试题分析：

据图分析，图示为细胞融合的过程，a细胞与b细胞融合形成融合细胞c，c细胞具有a细胞和b细胞的遗传物质，融合过程常用聚乙二醇进行诱导，对于动物细胞融合还可以用灭活的病毒进行诱导。

解答：

A．若a细胞和b细胞是植物细胞，应该先用酶解法去掉它们的细胞壁再诱导融合，A错误；

B．无论是动物细胞还是植物细胞，两个细胞的融合都需要促融处理后才能实现，B正确；

C．两个细胞融合成一个细胞，利用了细胞膜的流动性，C正确；

D．c细胞同时具备了a细胞和b细胞中的所有基因，但是基因是选择性表达的，因此c细胞中基因不一定都能够表达，D错误。

故选BC。

13．【答案】C

【解析】

解答：

A．以WMV病毒粒子免疫健康小鼠，可以从小鼠脾脏中获得多种B淋巴细胞，经过筛选后可以获得分泌相应抗体的B细胞，A错误；

B．从小鼠体内中分离获得的B细胞实际上是浆细胞，已经高度分化，不能分裂，B错误；

C．用感染WMV的西瓜汁液，检测经筛选获得的杂交瘤细胞是否呈阳性，C正确；

D．应该用两组感染WMV的西瓜汁液，其中一组加入单克隆抗体，另一组不加，检测相应的单克隆抗性的特异性，D错误。

故选C。

14．【答案】C

【解析】

试题分析：

15．【答案】D

【解析】

试题分析：

解答：

A．胚胎干细胞培养中需一定的气体环境（95%的氧气和5%的二氧化碳），其中二氧化碳的主要作用是维持培养液的pH，A正确；

B．外源DNA必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行表达，B正确；

C．采用PCR技术大量扩增目的基因时，其体系主要包括：扩增缓冲液（含Mg2+）．水．4种脱氧核糖苷酸．模板DNA（干扰素基因）．耐高温的DNA聚合酶（taq酶）和DNA引物，C正确；

D．进行转基因操作前，需用胰蛋白酶处理幼蚕组织，以便获得单个细胞，D错误。

故选D。

16．【答案】C

【解析】

试题分析：

克隆羊“多利”是将白面绵羊的乳腺细胞核移植到黑面绵羊的去核卵细胞中，形成重组细胞后，经过一系列培育过程而成。

解答：

A．克隆羊“多莉”培育不需要对供体母牛进行促性腺激素的注射，A错误；

B．重组细胞培养到 8 细胞胚过程中总体积变小，有机物总量减少，B错误；

C．核移植前对胚胎干细胞进行营养限制性培养等，这些措施都有利于重组细胞中基因表达分子开关的启动，C正确；

D．在重组卵细胞开始第三次分裂时，原乳腺细胞的调节蛋白便全部被卵细胞质中的蛋白因子替换了，因此核重新编排，D错误。

故选C。

17．【答案】A

【解析】

试题分析：

动物细胞培养条件：（1）无菌．无毒的环境：①消毒．灭菌②添加一定量的抗生素③定期更换培养液，以清除代谢废物；（2）营养物质：糖．氨基酸．促生长因子．无机盐．微量元素等，还需加入血清．血浆等天然物质；（3）温度和pH；（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。

解答：

人耳鼠的做法是搭一个人耳形状的支架，然后让细胞生长在这个支架上，最终覆盖满整个支架，形成一个“人耳”，再把这个支架整体移到小鼠后背上，用切去脾脏的裸鼠，就是防止免疫排斥反应。所以，这个过程中不涉及任何细胞融合．移植等过程，只是单单的细胞培养．形成特定形状而已，所以A项正确，故选A。

18．【答案】C

【解析】

A．植物组织培养过程依据的原理是植物细胞具有全能性，动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性，A错误；

B．转基因羊的培育克服了远缘杂交不亲和的障碍，但克隆羊多利并没有克服远源杂交不亲和的障碍，B错误；

C．试管牛和试管苗的培育过程中，都需要改变培育环境，C正确；

D．利用植物的幼嫩的芽或茎进行植物组织培养技术可以培育脱毒苗，没有发生基因重组；转基因抗病毒草莓先用基因工程技术将抗病毒基因导入植物细胞中，再经过植物组织培养技术的培育获得抗病毒草莓，发生了基因重组，D错误。

故选C。