高中生物沪科版 (2019)选修3第一章 发酵工程利用微生物进行规模化生产第三节 测定微生物的数量一、间接计数法同步练习题

这是一份高中生物沪科版 (2019)选修3第一章 发酵工程利用微生物进行规模化生产第三节 测定微生物的数量一、间接计数法同步练习题，共14页。试卷主要包含了下列有关实验的叙述中，正确的是等内容，欢迎下载使用。
【精挑】一、间接计数法-3课堂练习一．单项选择1．下列关于微生物营养的说法，不正确的是（ ）A．对异养微生物而言，牛肉膏既是碳源，又是氮源B．生长因子是指氨基酸．维生素．碱基等不可缺少的微量有机物C．氮源不能为微生物提供能量D．氮源主要用于合成蛋白质，核酸以及含氮的代谢产物2．下列有关实验的叙述中，正确的是（    ）A．液体培养基可用于观察菌落，固体培养基可用于工业生产B．使用苏丹Ⅲ染液检测脂肪，显色结果是呈现橘黄色C．还原糖组织样液在加入斐林试剂后呈无色，在加热后变成砖红色D．甲基绿和吡罗红染色剂使DNA呈现红色，使RNA呈现绿色3．关于微生物的分离与计数的叙述，错误的是（    ）A．确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数B．平板划线时最后一个区域的划线不能与第一区域相连C．接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单菌落D．对细菌进行计数，常采用稀释涂布平板法或显微镜直接计数4．关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，叙述正确的是（    ）A．操作顺序为计算．称量．溶化．倒平板．灭菌B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯C．待培养基冷却至44℃以下时进行倒平板D．待平板冷却凝固约5～10s后将平板倒过来放置5．无菌技术是植物组织培养能否获得成功的关键 , 以下说法正确的是 (   )①由于植物组织培养所利用的植物材料体积小．抗性差 , 对无菌操作的要求非常严格     ②对培养基及器械用高压蒸汽灭菌 ③对培养材料进行表面灭菌时一方面要考虑药剂的消毒效果 , 另一方面还要考虑植物材料的耐受能力  ④不同药剂．不同植物材料甚至不同器官要区别对待   ⑤对培养材料可用高压蒸汽灭菌  ⑥如果不小心导致污染 , 将可能造成培养工作的前功尽弃A．①②③④⑤ B．①②③④ C．①②③④⑥ D．①②③④⑤⑥6．下图是实验室使用某种接种方法在培养基上培养某种微生物的结果，相关说法    错误的是(   )A．该图最可能是用稀释涂布平板法进行接种的B．在操作时，为防止杂菌污染，需进行严格的消毒和灭菌C．恒温培养箱中培养时需要将平板倒置D．该接种方法常用于微生物的分离纯化7．下列有关细菌培养的叙述，正确的是（    ）A．在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌B．在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长C．向液体培养基中通入氧气能促进破伤风杆菌的生长D．同一种物质既可作碳源也可作氮源，碳源并不都能提供能量8．下列有关大肠杆菌纯化培养和计数的叙述，错误的是（    ）A．培养基的pH应是中性或微碱性B．测定其数目可采用滤膜法C．培养过程包括培养基的配制和纯化D．接种只能采用平板划线法9．我国《生活饮用水卫生标准》中关于生活饮用水的细菌标准的具体规定如下：细菌总数1mL水中不超过100个，大肠杆菌数1mL水中不超过3个。为了检验某城市自来水是否达标，某生物兴趣小组进行了相关的实验。下列有关叙述错误的是（    ）A．实验过程中应用到涂布器．移液管等操作工具B．取样水龙头应用火焰灼烧，打开水龙头一段时间后再取样C．检验自来水中大肠杆菌数是否达标，可用稀释涂布平板法来分离并计数D．若空白对照组上有6个菌落，则在实验组数据基础上减去6，以获得最准确数据10．下图表示培养和纯化X细菌的部分操作步骤。有关叙述错误的是（    ）A．步骤①操作时，倒好平板后，待平板冷却凝固后将其倒置B．步骤②接种环经灼烧灭菌冷却后，再放入试管中蘸取菌液C．步骤③经连续划线后，使接种物逐步稀释，分离得到菌落D．步骤④经适宜条件培养一段时间后得到的都是X细菌菌落11．如图为纯化大肠杆菌的一个操作环节，下列相关叙述中，正确的是（    ）A．图示接种方法是平板划线法，也可在液体培养基中进行B．图中每个划线区域均可形成单个菌落C．除第一次划线外，以后的每一次划线的起点均是上一次划线的末端D．该接种方法适用于细菌的计数12．某种细菌必须从环境中摄取亮氨酸才能正常生活，此菌株对链霉素敏感（即缺乏抗性）。实验者用诱变剂处理此种菌株，欲从经处理的菌株中筛选出不依赖亮氨酸且对链霉素不敏感（即有抗性）的变异类型，则应选用的培养基是如表中的（　　）选项亮氨酸链霉素A++B+﹣C﹣+D﹣﹣ 注：表格中“+”表示加入，“﹣”表示未加入；4种培养基除添加亮氨酸和链霉素有差异外，其他成分及条件均相同且适宜细菌生长．A．A B．B C．C D．D13．下列有关微生物培养基种类及配制原则的表述，正确的是（    ）A．培养霉菌时需将培养基的 pH 调节到中性或微碱性B．液体培养基可用于观察菌落，固体培养基可用于工业生产C．任何培养基都必须含有碳源．氮源．水．无机盐及生长因子D．微生物的生长除受营养因素影响外，还受到 pH．O2．渗透压等的影响14．培养基．培养皿．接种环．实验操作者的双手．空气．牛奶采用的灭菌或消毒方法依次是（    ）①紫外线消毒       ②干热灭菌       ③ 灼烧灭菌     ④化学药剂消毒⑤高压蒸汽灭菌     ⑥巴氏消毒法A．⑤③②①④⑥ B．①②③④⑤⑥C．⑤②③④①⑥ D．③④②①⑥⑤15．酵母菌的代谢类型是A．自养需氧 B．异氧严格厌氧 C．异养需氧 D．异养兼性厌氧16．生长图形法是一种测定微生物营养需求的简便方法。为探究某嗜热菌所需生长因子的种 类，研究小组把该菌的悬浮液与不含任何生长因子但含有其他必需营养物质的培养基混合后倒成平板，然后在平板上划分数区，将甲．乙．丙 三种生长因子分别添加到不同区域，培养结果如图所示，下列说法不正 确的是（    ）A．倒成平板后直接培养可判断有无污染B．倒成平板后不需要进行灭菌处理C．图示结果表明该菌需要生长因子乙或丙D．生长图形法还可用于某些菌种的筛选17．下列关于配制培养基的叙述中正确的是（    ）A．制作固体培养基一定要加入琼脂B．加入青霉素的培养基可培养放线菌C．培养自生固氮菌的培养基中不需添加氮源D．发酵工程一般用固体培养基18．微生物培养过程中，要十分重视无菌操作，现代生物学实验中的许多方面也要进行无菌 操作，防止杂菌污染，请分析下列操作中错误的是（    ）A．紫外线不可以杀死微生物的芽孢和孢子B．家庭制作泡菜时不需要对泡菜进行灭菌C．实验操作者的双手需要消毒D．加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌
参考答案与试题解析1．【答案】C【解析】试题分析：解答：同一种物质可以即作碳源又作氮源，如牛肉膏，A正确；
生长因子是指氨基酸．维生素．碱基等不可缺少的微量有机物，B正确；
自然界中一些微生物如硝化细菌，可以通过氨氧化释放的能量获得生长所需能量，C错误；
蛋白质．核酸以及含氮的代谢产物等都含有氮元素，所以氮源主要用于合成这些含氮的化合物，D正确。2．【答案】B【解析】试题分析：常用双缩脲试剂检测蛋白质（紫色），斐林试剂检测还原糖（砖红色），碘液检测淀粉（蓝色），苏丹Ⅲ染液检测油脂（橘黄色）等。双缩脲试剂是一种用于鉴定蛋白质的分析化学试剂，它是由双缩脲试剂A（氢氧化钠）和双缩脲试剂B（硫酸铜溶液）组成，氢氧化钠可以提供碱性的环境，而溶液中的铜离子会与多肽链中的肽键生成紫色的络合物。解答：A．固体培养基可用于观察菌落，液体培养基可用于工业生产，A错误；
B．使用苏丹Ⅲ染液检测脂肪，显色结果是呈现橘黄色，B正确；
C．还原糖组织样液在加入斐林试剂后呈蓝色，在加热后变成砖红色，C错误；
D．甲基绿和吡罗红染色剂使DNA呈现绿色，使RNA呈现红色，D错误。
故选B。3．【答案】A【解析】试题分析：常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，后者还可以用于菌落的计数。解答：A．需要选择菌落数在30-300的平板进行计数，A错误；
B．使用平板划线法接种时，最后一个区域的划线不能与第一区域相连，B正确；
C．通过接种划线可以获得稀释的单菌落，C正确；
D．可以用稀释涂布平板法和显微计数法对细菌进行计数，二者均有误差，D正确。
故选A。4．【答案】B【解析】试题分析：培养基的配制流程：计算．称量．溶化．灭菌（高压蒸汽灭菌）．倒平板（无菌操作）。解答：A．操作顺序为计算．称量．溶化．灭菌．倒平板，A错误；B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯，因为牛肉膏会黏在称量纸上，B正确；C．待培养基冷却至50℃以下时进行倒平板，C错误；D．待平板冷却凝固约5～10min后将平板倒过来放置，D错误。故选B。5．【答案】C【解析】试题分析：解答：植物组织培养的植物材料体积小．抗性差，灭菌不好就会导致整个技术的失败，①正确；对于整个操作过程中的凡是和植物组织接触的材料．用具和试剂都要就进行灭菌消毒，培养基及器械用高压蒸汽灭菌，②正确；对培养材料进行表面灭菌时，一方面要考虑药剂的消毒效果，另一方面还要考虑植物材料的耐受能力，③正确；培养中不同药剂．不同植物材料，甚至不同器官要区别对待，因为不同材料对药剂耐受力不同，④正确；物组织用消毒液进行灭菌而不能用高压灭菌，⑤错误；如果不小心引起污染，将可能造成培养工作前功尽弃，导致整个技术的失败，⑥正确。C正确故选C6．【答案】A【解析】培养基上微生物的分布有疏有密，应为划线培养法接种，该接种方法常用于微生物的分离纯化，A项错误，D项正确；在操作时，为防止杂菌污染，应对培养基和接种针等进行灭菌，对操作空间．衣着和手进行消毒，B项正确；恒温培养箱中培养时需要将平板倒置，防止冷凝水滴在培养基上，C项正确。7．【答案】D【解析】试题分析：（1）菌落是指由单个微生物细胞或多个同种微生物细胞在适宜固体培养基上繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体。（2）微生物培养基的配方中，一般都含有水．碳源．氮源和无机盐。碳源．氮源分别是指能够为微生物生长繁殖提供营养的含有碳元素．含有氮元素的一类物质。（3）青霉素的主要作用是杀灭细菌，对真菌等病原体无作用。（4）破伤风杆菌是一种厌氧菌。解答：A．在琼脂固体培养基上长出的单个菌落，是由单个或少数同种细菌在固体培养基上大量繁殖而形成的一个肉眼可见的子细胞群体，因此单个菌落通常只有一种细菌，A错误；B．在培养基中加入青霉素，可抑制细菌生长，但不会抑制真菌的生长，B错误；C．破伤风杆菌只能进行无氧呼吸，向液体培养基中通入氧气能抑制破伤风杆菌的生长，C错误；D．同一种物质可以同时含有碳元素和氮元素（如牛肉膏），因此既可作碳源也可作氮源，但碳源并不都能提供能量，如CO2是硝化细菌的碳源，但CO2并不能提供能量，D正确。故选D。8．【答案】D【解析】试题分析：纯化大肠杆菌（1）原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个单个菌落就是一个纯化的细菌菌落。（2）微生物常见的接种的方法①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。解答：A．培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，A正确；B．测定其数目可采用滤膜法，B正确；C．培养过程包括培养基的配制和纯化，C正确；D．接种微生物常用平板划线法和稀释涂布平板法，其中稀释涂布平板法可用于微生物的计数，因此要对微生物进行计数时应该采用稀释涂布平板法，D错误。故选D。9．【答案】D【解析】试题分析：间接计数法（活菌计数法）：
①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
②操作：a．设置重复组，增强实验的说服力与准确性；b．为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。
③计算公式：每克样品中的菌株数=（c÷V）×M，其中c代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数。解答：A．实验过程中应用到涂布器．移液管等操作工具，A正确；B．为避免杂菌污染，取样水龙头应用火焰灼烧，打开水龙头一段时间后再取样，是为了防止温度过高杀死目的菌；B正确；C．稀释涂布平板法可以用于活菌计数，故检验自来水中大肠杆菌数是否达标，可用稀释涂布平板法来分离并计数，C正确；D．若空白对照组上有6个菌落，则说明该实验失败，实验数据不能采用，D错误。故选D。10．【答案】D【解析】试题分析：微生物的研究通常包含微生物的获得．分离纯化．培养以及保存等。单菌落分离法包含划线分离法和涂布分离法，常用于分离获得单菌落。划线分离法是用接种环以无菌操作沾取少许待分离的材料，在无菌平板表面进行平行划线．扇形划线或其他形式的连续划线，微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少，并逐步分散开来。解答：A．步骤①为倒平板，倒好平板后，待平板冷却凝固后将其倒置，A正确；
B．步骤②接种环经灼烧灭菌冷却后，再放入试管中蘸取菌液，B正确；
C．步骤③为划线分离，经连续划线后，使接种物逐步稀释，分离得到菌落，C正确；
D．步骤④经适宜条件培养一段时间后得到的不一定都是X细菌菌落，也有可能有其它的细菌，D错误。
故选D。11．【答案】C【解析】试题分析：图示对微生物进行接种采用的是平板划线法。平板划线法通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在数次划线后，就可以得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，这就是菌落。解答：A．图示接种方法是平板划线法，该接种方法不能在液体培养基中进行，A错误；B．图中每次划线的菌种都来自上一次划线的末端，最后一次划线结束时（图中5区域）可形成单个菌落，B错误；C．在采用平板划线法对微生物进行接种时，除第一次划线外，以后的每一次划线的起点均是上一次划线的末端，C正确；D．该接种方法（平板划线法）可以分离出单个菌落，但不需要确定接种量和培养液浓度，因此不适用于细菌的计数，D错误。故选C。12．【答案】C【解析】试题分析：从混合样品中获得某种微生物的方法通常有两种：第一种是可利用该分离对象对某一营养物质有一“嗜好”的原理，专门在培养基中加入或不加该营养物质，从而使它成为一种选择培养基（如在含高浓度NaCl的培养基上分离金黄色葡萄糖球菌，在不含N的培养基上分离圆褐固氮菌）；或根据分离对象对pH．温度和氧气浓度的喜好，改变培养环境的理化性质，使环境条件最适宜该微生物的生存，从而达到分离的目的，将培养基放在高温环境中培养只能得到耐高温的微生物．第二种办法可利用该分离对象对某种抑菌物质的抗性，在混合培养物中加入该抑制物，经培养后，原来占优势的微生物生长受抑制，而分离对象却可乘机大大增殖，使之在数量上占优势（如在加入青霉素的培养基上分离真核微生物）。解答：（1）要筛选出不依赖亮氨酸的变异类型，则培养基中不应该加入亮氨酸；
（2）要筛选出对链霉素不敏感（即有抗性）的变异类型，则培养基中应该加入链霉素。
故选C。13．【答案】D【解析】试题分析：培养基的概念．种类及营养构成：（1）概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质。 （2）种类：固体培养基和液体培养基。（3）营养构成：各种培养基一般都含有水．碳源．氮源．无机盐，此外还要满足微生物生长对pH．特殊营养物质以及氧气的要求。解答：A．培养霉菌时需将培养基的pH调节到中性或微酸性，A错误；B．固定培养基可用于观察菌落，液体培养基可用于工业生产，B错误；C．培养基一般都含有水．碳源．氮源和无机盐，有些微生物的培养除了上述几种主要营养物质外，还需要添加生长因子，有的微生物培养基中可以不加碳源，如自养型的；C错误；D．培养基一般都含有水．碳源．氮源和无机盐。微生物的生长除了受到以上营养因素的影响外，还受到pH．O2．渗透压等的影响，D正确。故选D。14．【答案】C【解析】试题分析：使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞．芽孢和孢子的过程称为灭菌，常用的方法有灼烧灭菌（主要适用于金属接种工具）．干热灭菌（主要适用于需要保持干燥的玻璃器具）和高压蒸汽灭菌（主要适用于培养基的灭菌）；消毒是指用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体体表或内部的一部分微生物的过程；常用的方法有煮沸消毒法．巴氏消毒法．紫外线或化学药物消毒法等。解答：⑤培养基用高压蒸汽灭菌；②培养皿能耐高温，且须保持干燥，需用干热灭菌；③接种环可用灼烧灭菌达到迅速彻底的灭菌效果；④实际操作者的双手用化学药剂进行消毒，如用酒精擦拭双手；①空气可用紫外线消毒；⑥巴氏消毒法用于牛奶及其制品的消毒，不会破坏其营养成分；故C正确。故选C。15．【答案】D【解析】试题分析：
解答：酵母菌利用现成的有机物，所以是异养型，A错误。既可以进行有氧呼吸也可以进行无氧呼吸，所以是兼性厌氧型，B．C错误，D正确。16．【答案】C【解析】试题分析：据图分析，菌落主要分布于添加了乙和丙的区域的交界处，说明该嗜热菌必需营养物质为丙和乙。解答：A．倒平板后不接种任何菌种直接进行培养观察有无菌落的出现，可以判断培养基有无污染，A正确；B．在制作培养基的过程中，需要先进行灭菌再倒平板，故倒成平板后不需要进行灭菌处理，B正确；C．分析题图可知，嗜热菌在添加了乙．丙的区域生长，只有乙或只有丙时无菌落生长，故该菌同时需要乙和丙，C错误；D．不同的菌种所需的营养物质不同，利用生长图形法可用于某些菌种的筛选，某菌种只会在提供其需要的营养物质区域生长，D正确。故选C。17．【答案】C【解析】试题分析：18．【答案】D【解析】试题分析：消毒是使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子），而灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子）。消毒有煮沸消毒法．巴氏消毒法和化学药剂消毒法，灭菌有灼烧灭菌法适用于接种工具．干热灭菌法适用于玻璃器皿和金属工具．高压蒸汽灭菌法适用于培养基及容器的灭菌。解答：A．紫外线处理属于消毒，消毒只能杀死物体表面或内部的部分微生物，A正确；B．家庭制作泡菜时，由于泡菜发酵过程中呈现缺氧和酸性的条件，其余杂菌一般很难生长，因此不需要对泡菜进行灭菌，B正确；C．为了减少杂菌污染，需要对C实验操作者的双手需要消毒，C正确；D．加入培养基中的指示剂和染料也需要灭菌，D错误；故选D。