高中生物人教版 (2019)选择性必修3第2章 细胞工程第2节 动物细胞工程二 动物细胞融合技术与单克隆抗体一等奖ppt课件

这是一份高中生物人教版 (2019)选择性必修3第2章 细胞工程第2节 动物细胞工程二 动物细胞融合技术与单克隆抗体一等奖ppt课件，共24页。PPT课件主要包含了植物组织培养，植物细胞融合，灭活病毒诱导法，单一B淋巴细胞，细胞群，单克隆抗体的制备，单克隆抗体的制备思路，如何筛选杂交瘤细胞，筛选得到杂交瘤细胞，培养液等内容，欢迎下载使用。
植物体细胞杂交（P38）
②诱导融合物理法：电融合法、离心法；化学法：PEG融合法、高Ca2+ —高PH融合法
①将组织分散成单个细胞：胰蛋白酶
②诱导融合物理法：电融合法；化学法：PEG融合法；
③细胞核的融合标志融合完成（杂交细胞）
1．动物细胞融合过程中通常用灭活的病毒作为诱导剂，这里的“灭活”是指用物理或化学的手段使病毒(　　)A．具有感染力，但破坏其抗原结构B．失去感染力，但不破坏其抗原结构C．失去感染力，并破坏其抗原结构D．具有感染力，也不破坏其抗原结构
灭活的病毒为什么能够诱导细胞细胞融合？
（P48相关信息）诱导融合的原理：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞相互凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。
1.概念：使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。融合后形成的杂交细胞具有原来两个或多个细胞的遗传信息。
2.原理：细胞膜具有一定的流动性。
3.诱导融合的常用方法：PEG融合法、电融合法、灭活病毒诱导法。
4.意义：突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能。
6.应用：（1）细胞融合技术已经成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段。（2）利用动物细胞融合技术发展起来的杂交瘤技术，为制造单克隆抗体开辟了新途径。
5.融合完成的标志：细胞核的融合。
1.传统抗体的制备方法及缺陷
方法：向动物体内反复注射某种抗原，使动物产生抗体，然后从动物血清中分离所需抗体。
缺点：产量低、纯度低，而且特异性差。
2.大量制备单一抗体的思路和需解决的问题
大量纯度高特异性强的抗体
B淋巴细胞不能无限增殖
一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体骨髓瘤细胞能无限增殖
既能产生特异性抗体，又能大量繁殖的细胞
诱导小鼠产生能够分泌特定抗体的B淋巴细胞
1.未融合的细胞2.融合的具有同种核的细胞3.多种杂交瘤细胞
资料：已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基喋呤阻断。B淋巴细胞中这两种DNA的合成途径都有，但B淋巴细胞不能无限增殖；鼠骨髓瘤细胞中没有S途径，但它能不断分裂增殖。根据以上信息，设计一种方案，从培养液中筛选出杂交瘤细胞。
在培养液中加入氨基喋呤，只有杂交瘤细胞才能生长。
第一次筛选：用特定的选择培养基
能产生所需抗体的杂交瘤细胞
第二次筛选：克隆化培养和抗体检测
每一个孔中尽量只接种一个杂交瘤细胞
将杂交瘤细胞群稀释，约每孔1个细胞进行培养，即克隆化培养
一段时间后，检测每个孔内的抗体
分泌抗体能跟抗原结合的细胞即为所需细胞
抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞
（分泌的抗体能与特定抗原结合）
（能产生所需抗体的杂交瘤细胞）
单克隆抗体：由单一杂交瘤细胞克隆化培养产生的特异性抗体。
①相应的B淋巴细胞是从小鼠的 内提取。
②杂交瘤细胞的特点是__________________________________；③细胞融合后需经两次筛选。第一次筛选的目的是_____________________________________；第二次筛选的目的是_____________________________________。 ④单克隆抗体的优点：___________________________________。⑤筛选获得的杂交瘤细胞可在 条件下做大规模培养，也可以注射到小鼠的 内增殖，这样就可以从 中或小鼠的 中提取出大量的单克隆抗体
筛选得到能产生所需抗体的杂交瘤细胞
特异性强，灵敏度高，并可大量制备
既能迅速大量繁殖，又能产生抗体。
资料1 用抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体做成的“早早孕诊断试剂盒”。在妊娠第8天就可以作出诊断，这比原来的诊断方法提前了10d左右，可以避免孕妇在不知道妊娠的情况下因服用药物而对胎儿造成不利影响。该方法检测的准确率在90%以上。
资料2 使用高效的细胞毒素类药物进行化疗可以有效杀伤肿瘤细胞。但细胞毒素没有特异性，在杀伤肿瘤细胞的同时还会对健康细胞造成伤害，这限制了它在临床上的应用。抗体-药物偶联物（ADC）通过将细胞毒素与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。ADC通常由抗体、接头和药物(如细胞毒素)三部分组成，它的作用机制如下图所示。
1.ADC的抗体和药物各具有什么作用？
抗体主要发挥靶向运输作用，即通过特异性结合靶细胞表面的抗原，将连接的药物输送到靶细胞；药物发挥治疗效应，如杀伤靶细胞。
2.除了细胞毒素，还有哪些物质理论上可以作为ADC偶联的药物？
①可以用放射性同位素标记单克隆抗体进行靶向放疗；②一些作用于细胞信号转导通路的药物可以通过阻断肿瘤细胞的信号通路来抑制其生长，理论上也可以将这些药物与单克隆抗体结合进行治疗
3.单克隆抗体诊断试剂盒和ADC在临床应用上各具有什么优势？
①单克隆抗体诊断试剂盒中的单克隆抗体只与特定的抗原反应，因此检测的特异性和灵敏度大大提高；生产单克隆抗体的杂交瘤细胞可以传代培养、冷冻保存和复苏利用，有利于控制产品的质量和标准化生产诊断试剂盒；②ADC能够协同发挥抗体特异性识别的靶向作用和细胞毒素对肿瘤细胞的杀伤作用，因此它在临床上具有靶点清楚、毒副作用小等优点
单克隆抗体能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备。
1.单克隆抗体的优点：
一、概念检测1.下列有关动物细胞融合与植物体细胞杂交比较的叙述，错误的是（ ）A.它们的原理都涉及细胞膜的流动性B.都可以用电融合法或PEG融合法诱导融合C.融合前都需用纤维素酶或果胶酶处理细胞D.前者主要是为了获得细胞产品，后者主要是为了获得杂种植株
2.科学家以SARS病毒的核衣壳蛋白为抗原，制备出了单克隆抗体。下列相关叙述正确的是（ ）A. 利用该单克隆抗体可以诊断是否感染SARS病毒B.体外培养单个B淋巴细胞可以获得针对SARS病毒的单克隆抗体C.将等量B淋巴细胞和骨髓瘤细胞混合，经诱导后融合的细胞即为杂交瘤细胞D.将纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，从小鼠血清中分离出的抗体为单克隆抗体
二、拓展应用假如你掌握了动物细胞融合技术，你想用这种技术来解决哪些问题?解决这些问题的大致思路是怎样的?这样做会有什么风险?请查阅相关资料，完善自己的思路，并形成文字报告，与同学交流。
提示：可以利用动物细胞融合技术培育多倍体胚胎，研究其发育机制，甚至可能培育出新的物种。但是，目前相关技术还不成熟，存在融合率低、胚胎死亡率高等问题，并且还可能带来一些伦理方面的问题。