高中生物沪科版 (2019)选修3一、间接计数法练习

【特供】一、间接计数法-1同步练习

一．单项选择

1．某科研小组欲从土壤中筛选能分解除草剂A（组成元素为C．H．O．N，在水中溶解度低，含除草剂A 的固体培养基不透明）的细菌用于生产，实验流程如下图所示。下列相关叙述错误的是（    ）

A．从经常使用除草剂A的土壤取样比从其他土壤取样更容易筛选到除草剂A分解菌

B．实验中培养基1为液体培养基，此操作的主要目的是增加除草剂A分解菌的数量

C．培养基2为选择培养基，其中以除草剂A作为唯一氮源便于分离除草剂A分解菌

D．挑选菌落时，透明圈直径与菌落直径比值越大，表明目标细菌分解除草剂A的能力越弱

2．微生物培养过程中，要十分重视无菌操作，现代生物学实验中的许多方面也要进行无菌操作，防止杂菌污染，请分析下列操作中错误的有几项（　　）

①煮沸消毒可以杀死微生物营养细胞和一部分芽孢②配制培养基时可以加入未灭菌的清水  ③使用过的培养基要经过消毒后丢弃④培养基只能进行湿热灭菌，培养皿只能进行干热灭菌  ⑤加入培养基中的指示剂或染色剂不需要灭菌

A. 1 项 B. 2 项 C. 3 项 D. 4 项

3．通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长，在培养基中加入青霉素可抑制细菌和放线菌的生长，在培养基中加入10% 酚可以抑制细菌和霉菌的生长。利用上述这些方法不能从混杂的微生物群体中分离出（    ）

A．大肠杆菌

B．霉菌

C．放线菌

D．固氮细菌

4．若在固体培养基上用稀释涂布平板法接种细菌，看到的培养结果不可能是（    ）

A． B． C． D．

5． 下列关于发酵工程及其应用的说法，正确的是（　　）

A. 黑曲霉可以用于酱油．柠檬酸．凝乳酶的工业生产

B. 接种是发酵工程的中心环节

C. 用于发酵工程的菌种，可以从自然界中筛选，也可以通过基因工程育种或单倍体育种获得

D. 可以通过蒸馏．萃取等方法对单细胞蛋白进行分离．提纯

6．下列关于传统发酵食品制作的说法中，正确的是（　　）

A. 只有在糖源和氧气充足时，醋酸菌才能发酵产生醋酸

B. 酵母菌可以直接利用糯米淀粉发酵得到糯米酒

C. 泡菜坛内的白色菌膜．变酸的果酒表面的菌膜所含的主要菌种相同

D. 泡菜．果醋．果酒．腐乳发酵的主要微生物均为异养型微生物

7．下列关于筛选和培养高活性产絮酱油曲霉的叙述不合理的是（　　）

A．筛选培养基中必须添加有机碳源

B．筛选培养基中添加青霉素可以防止杂菌的生长

C．分离得到的酱油曲霉需进一步确定其产絮活性

D．产絮酱油曲霉菌种的分离和计数必须使用液体培养基

8．某同学完成了探究·实践“培养液中酵母菌种群数量的变化”实验，图为利用血球计数板（1mm×1mm×0．1mm）通过显微镜观察时，实验第6天对酵母菌培养液稀释100倍后的统计结果。图2为培养液中的酵母菌数量的变化情况。下列相关叙述错误的是（　　）

A．图1的中格内酵母菌的数量约计为20个

B．取样时为避免吸到培养液底部的死菌，滴管应轻轻吸取，避免溶液晃动

C．图2中de段发生的原因可能与营养物质的消耗．pH的改变等有关

D．制片时，先将盖玻片放在血球计数板的计数室上，用吸管吸取培养液，滴于盖玻片边缘，让培养液自行渗入

9． 通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌的生长；在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌的生长。利用上述方法能从混杂的微生物群体中分别分离出(  )

①大肠杆菌 ②霉菌 ③放线菌 ④固氮细胞

A. ④②③B. ①②③ C. ①③④D. 只有③④

10．漆酶属于木质降解酶类，在环境修复．农业生产等领域有着广泛用途。如图是分离．纯化和保存漆酶菌株的过程，相关叙述正确的是（）

A. 生活污水中含有大量微生物，是分离产漆酶菌株的首选样品

B. 筛选培养基中需要加入漆酶的底物，通过菌落特征挑出产漆酶的菌落

C. 在涂布平板上长出的菌落，再通过划线进一步计数

D. 斜面培养基中含有大量营养物，可常温下长期保存菌株

11．某同学配制某种培养基对淀粉分解菌进行筛选，实验设计如图，下列说法正确的是

A. 该固体培养基对淀粉分解菌具有选择作用

B. 该培养基中的淀粉为微生物生长提供碳源和氮源

C. 菌落①分解淀粉的能力大于菌落②

D. 该实验不可用刚果红染液替代碘液染色

12．现有两种固体培养基，已知其配制时所加的成分和含量如下表，假设用这两种培养基分别去分离土壤中的两种微生物，你认为它们适于分离（    ）

A．甲培养基适于分离自养型自生固氮菌；乙培养基适于分离异养型自生固氮菌

B．甲培养基适于分离异养型自生固氮菌；乙培养基适于分离自养型自生固氮菌

C．甲培养基适于分离酵母菌；乙培养基适于分离真菌

D．甲培养基适于分离自养型共生固氮菌；乙培养基适于分离异养型共生固氮菌

13．下表所列培养基配方中，能作为选择培养基．鉴别培养基的依次是（    ）

A．①③ B．③① C．②④ D．①②

14． 关于腐乳制作的叙述正确的是

A. 豆腐中蛋白质在多种微生物的协同作用下被分解成多肽和氨基酸

B. 影响腐乳风味和质量的因素有豆腐灭菌．发酵温度．发酵时间等

C. 加卤汤装瓶后加盐腌制，要随着豆腐层的加高而增加食盐的用量

D. 腐乳装瓶腌制时，一定需要将瓶口通过酒精灯的火焰灼烧灭菌

15．如果发酵工程生产的产品是菌体，菌体分离采用的方法是（    ）

A．蒸馏 B．过滤 C．萃取 D．离子交换

16．某同学检测土壤中细菌总数时，在10．100．1000倍稀释液的平均菌落数为2760．330．46，如果用于平板涂布的稀释液的量都是，则每克样品中的菌落总数为（    ）

A．27600个 B．30600个 C．46000个 D．37750个

17．下列有关说法，正确的是（    ）

A. 对于频繁使用的菌种，可采用甘油管藏法保藏

B. 对于需要长期保存的菌种，可以采用﹣4℃低温保藏的方法

C. 加热熔化琼脂时不要搅拌，以免水分过多蒸发导致糊底

D. 溶化牛肉膏时，称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯

18．下列有关微生物培养的叙述，正确的是（　　）

A．接种环灼烧灭菌之后，应立即伸入菌液否则杂菌会污染接种环

B．稀释涂布平板法和平板划线法都可以很好地统计待测菌液中的活菌数目

C．培养不同微生物的培养基时都必须要将pH调至中性或微碱性

D．溶化牛肉膏时，应将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯

参考答案与试题解析

1．【答案】D

【解析】

要想获得目的菌，应在富含该菌的环境中寻找；获得目的菌应在选择培养基上培养。

解答：

A．要想获得目的菌，应在富含该菌种的自然环境中筛选，故从经常使用除草剂A的土壤取样比从其他土壤取样更容易筛选到除草剂A分解菌，A正确；

B．为扩大培养，实验中培养基1为液体培养基，增目的是加目的菌（除草剂A分解菌）的数量，起到筛选作用，B正确；

C．根据题干信息“某科研小组从土壤中筛选出能够将这种化合物（除草剂A）分解的菌株”，则应以除草剂A作为唯一氮源，在该培养基上只有目的菌能够生存，其它杂菌因为缺少氮源不能存活，C正确；

D．挑选菌落时，透明圈直径与菌落直径比值越大，表明目标细菌分解除草剂A的能力越强，D错误。

故选D。

2．【答案】C

【解析】1．消毒是指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物。消毒方法有煮沸消毒．化学药物消毒．紫外线消毒。

3．【答案】A

【解析】

选择培养基的原理是：不同微生物在代谢过程中所需要的营养物质和环境不同。有的适于酸性环境，有的适于碱性环境；例如从土壤中分离放线菌时，可在培养基中加入10%的酚数滴，抑制细菌和真菌的生长；如培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入青霉素；培养金黄色葡萄球菌，可在培养基中加入高浓度的食盐。

解答：

A．大肠杆菌属于异养型细菌，不能在缺乏氮源的培养基上生存。根据题意可知，大肠杆菌也不能在加入青霉素和10%酚的培养基上生存，所以不能利用这些方法把大肠杆菌从混杂的微生物群体中分别分离出来，A正确；

B．霉菌属于真菌，可以在添加青霉素的选择培养基上筛选分离霉菌，B错误；

C．在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌的生长，可以筛选分离放线菌，C错误；

D．固氮细菌能够固氮，属于固氮微生物，在缺乏氮源的选择培养基上可以筛选分离圆褐固氮菌，D错误。

故选A。

4．【答案】D

【解析】

常用的微生物分离方法有平板划线法，稀释涂布法。

一．平板划线法：

由接种环从菌液中沾取少许待分离的材料，在无菌平板表面进行平行划线．扇形划线或其他形式的连续划线，微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少，并逐步分散开来，如果划线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，可在平板表面得到单菌落。

二．稀释涂布平板法：

将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

解答：

ABC．由图可知：该固体培养基上所形成的是一个个分布较为均匀的单个菌落，是用稀释涂布法培养细菌得到的结果，ABC错误；

D．该固体培养基上所形成的不是均匀的单菌落，是平板划线法得到的结果，D正确。

故选D。

5．【答案】A

【解析】A．黑曲霉广泛分布于世界各地的粮食．植物性产品和土壤中，是重要的发酵工业菌种，黑曲霉可以用于酱油．柠檬酸．凝乳酶的工业生产，A正确；

B．发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节，B错误；

C．发酵工程的优良性状的菌种可以从自然界中筛选出来，也可以通过诱变育种和基因工程育种获得，C错误；

D．单细胞蛋白是微生物菌体，可采用沉淀．过滤等方法分离，而代谢产物则采用蒸馏．萃取．离子交换等方法，D错误。

故选A。

6．【答案】D

【解析】A．在氧气充足，糖源不足时，醋酸菌可以将乙醇转变成乙醛，再转变成乙酸，A错误；

B．酵母菌可以直接利用糯米淀粉分解产生的葡萄糖发酵产生酒精，B错误；

C．泡菜坛内的白色菌膜是产膜酵母繁殖的结果，变酸的果酒表面的菌膜是醋酸菌繁殖的结果，C错误；

D．泡菜．果醋．果酒．腐乳发酵的主要微生物均利用现成的有机物，为异养型微生物，D正确。

7．【答案】D

【解析】

8．【答案】B

【解析】

血球计数板的使用注意事项：1．稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内。

9．【答案】A

【解析】解答本题的关键是掌握选择培养基的作用，识记不同的选择培养基的作用与原理不同，因而可以选择出不同的微生物。故选A。

10．【答案】B

【解析】生活污水中含有大量微生物，但不一定含有产漆酶的菌株，就可能分离不出产漆酶菌株，A错误；筛选生活污水中含有大量微生物，将筛选培养基中加入漆酶的底物，通过菌落特征就能挑出产漆酶的菌落，B正确；在涂布平板上长出的菌落，再通过划线进一步纯化，不是计数，C错误；斜面培养基中含有大量营养物，不能在常温下保存，可在低温下长期保存菌株，D错误，所以选B。

11．【答案】 A

【解析】该培养基以淀粉为唯一碳源，对淀粉分解菌具有选择作用，A正确；淀粉只含C．H．O元素，不能为微生物生长提供氮源，B错误；菌落②透明圈比菌落①大，菌落②分解淀粉的能力大于菌落①，C错误；刚过红能够与多糖物质形成红色复合物，淀粉被淀粉分解菌分解，会在淀粉分解菌周围形成透明圈，D错误。

12．【答案】B

【解析】

据表分析：甲培养基中含有的葡萄糖和淀粉是有机物，可以作为碳源和能源，适用于异养微生物生长；乙培养基中不含有机碳源，适用于自养微生物的生长。两种培养基之间的共同点是都不含氮源，说明这两种培养基只能培养具有固氮能力的细菌。

解答：

AD．固氮菌中能独立生存的是自生固氮菌，甲培养基中含有的葡萄糖和淀粉是有机物，由此推出该培养基适于分离异养型的自生固氮菌，AD错误；

BC．乙培养基中不含有机碳源，不能用来分离异养型真菌，但可用来分离培养自养型的自生固氮菌，B正确，C错误。

故选B。

13．【答案】B

【解析】

14．【答案】 A

【解析】豆腐中蛋白质在多种微生物（青霉．酵母．曲霉．毛霉等，主要是毛霉）的协同作用下被分解成多肽和氨基酸，A正确；豆腐不需要灭菌，B错误；加盐腌制后再加卤汤装瓶，C错误； 腐乳装瓶腌制时，最好将瓶口通过酒精灯的火焰灼烧灭菌，防治瓶口被污染，D错误。

15．【答案】B

【解析】

发酵工程生产的产品有两类：一类是代谢产物，另一类是菌体本身，产品不同，分离提纯的方法一般不同。如果产品是菌体，可采用过滤,沉淀等方法将菌体从培养液中分离出来；如果产品是代谢产物，可用萃取．蒸馏．离子交换等方法进行提取。

解答：

根据分析可知，如果产品是菌体，可采用过滤，沉淀等方法，故选B。

16．【答案】C

【解析】

微生物接种常用的两种方法：

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过足够稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后，可形成单菌落。

解答：

计数时应选取菌落数在30~300之间的平板，故只能选取46，根据计算公式：每克样品中的菌落数46÷0.1×1000= 46000个，即C正确。

故选C。

17．【答案】D

【解析】A．对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法，在固体斜面培养基上菌落长成后，放入冰箱低温保藏，A错误；

B．对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏法保存，在低温-20℃下保存，B错误；

C．在熔化琼脂时，需要控制火力并不断搅拌，以免发生焦糊，C错误；

D．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯，加入少量的水，加热溶化牛肉膏，D正确。

故选D

18．【答案】D

【解析】