高中第一章 发酵工程利用微生物进行规模化生产第三节 测定微生物的数量一、间接计数法当堂达标检测题

【精挑】一、间接计数法-3同步练习

一．单项选择

1．为了判断培养基是否被杂菌污染和选择培养基是否起到了选择作用，需要设置的对照组的培养基分别是（    ）

A．未接种的选择培养基，未接种的牛肉膏蛋白胨培养基

B．未接种的培养基，接种了的牛肉膏蛋白胨培养基

C．接种了的选择培养基，接种了的牛肉膏蛋白胨培养基

D．接种了的培养基，未接种的牛肉膏蛋白胨培养基

2．可以作为硝化细菌碳源．氮源及能量来源的物质依次是（  ）

A．含碳有机物．氨．光 B．含碳无机物．氮．氮

C．含碳有机物．氨．氨 D．含碳无机物．氨．氨

3．在自制酸奶的过程中，除了高温加热以外，其他灭菌方法还有（　　）

A．紫外线照射 B．真空包装 C．用保鲜膜密闭 D．添加防腐剂

4．微生物的实验室培养中，有关叙述不正确的是（    ）

A．对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法

B．培养细菌时需将培养基的pH调至中性或微碱性

C．不同种类的微生物的碳源可能不同

D．对于需要长期保存的菌种，可以采用低温-4℃保藏的方法

5．下列关于无菌技术应用的叙述，正确的是（    ）

A．煮沸消毒可杀死物体内外所有微生物

B．使用后的培养基可以直接丢弃

C．紫外线只适用于表面灭菌和空气灭菌

D．金属器具只能采用灼烧灭菌法

6．将相等数量的硝化细菌和大肠杆菌分别接种到含铵盐的无机盐培养液中，在适宜温度下振荡培养。若用虚线表示大肠杆菌的生长趋势，实线表示硝化细菌的生长趋势，则下图中能正确表示两种菌体生长趋势的是（　　）

A． B．

C． D．

7．下列有关培养基的叙述正确的是（    ）

A．培养基的成分一般含有水．无机盐．碳源和氮源等

B．配制好的培养基在使用前需放入干热灭菌箱中灭菌

C．培养霉菌时需将培养基的PH调节至中性或碱性

D．液体培养基可以用于分离单菌落及扩大培养菌种

8．下列关于微生物培养的叙述，正确的是（    ）

A．微生物在培养液中培养一段时间后用显微镜观察，可见到形成的菌落

B．硝化细菌能以NH3作为氮源和能源物质

C．任何培养基都必须含有碳源．氮源．无机盐．水和琼脂

D．某些细菌生长过程中需要额外补充营养物质，比如培养酵母菌时，要添加维生素

9．研究人员拟从土壤样品中分离酵母菌并进行扩大培养，下图所示为操作流程。有关叙述错误的是（    ）

A．若需要调节培养基的pH，应在灭菌后进行

B．步骤④所用方法为平板划线法，划线时不能划破培养基表面

C．为了获得甲醇耐受酵母菌，可通过逐步提高培养基中甲醇的浓度

D．步骤③中将温度大约为50℃的培养基倒入培养皿混匀，冷凝后倒置培养

10．为了筛选能产生阿拉伯胶（一种多糖）降解酶的苗株SM01，应选用以下表中哪种培养基 （    ）

A．甲 B．乙 C．丙 D．丁

11．许多食品的生产需要借助微生物发酵过程。下列叙述正确的是（    ）

A．利用乳酸菌可将含较多抗生素的牛奶制作成含有抗生素的酸奶

B．在糖源充足时，醋酸菌可以利用乙醇在厌氧条件下生产醋酸

C．果酒发酵产生的酒精为醋酸菌提供碳源和氮源

D．制作泡菜利用的菌种是乳酸菌，其代谢类型为异养厌氧型

12．下表为某培养基的配方，下列叙述正确的是

A．从物理性质看该培养基属于液体培养基，从用途看该培养基属于选择培养基

B．该培养基中属于碳源的物质主要是葡萄糖，属于氮源的物质是蛋白胨

C．该培养基缺少提供生长因子的物质

D．该培养基调节合适的pH后就可以接种使用

13．许多生物学实验十分重视无菌操作，防止杂菌污染。下列操作正确的是（    ）

A．煮沸可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢

B．家庭制作葡萄酒时，要将容器和葡萄进行灭菌

C．加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌

D．用自然生长的离体植物组织进行组织培养时，不需要进行消毒

14．穿刺接种是用接种针蘸取少量的菌种，沿半固体培养基中心向管底作直线穿刺，如某细菌具有鞭毛而能运动，则在穿刺线周围能够生长。下列叙述错误的是（    ）

A．穿刺接种可用于鉴定微生物的呼吸作用类型

B．穿刺接种可用于保藏厌氧菌种或研究微生物的运动

C．相对于平板划线法，穿刺接种所需的培养基添加的琼脂较多

D．相对于稀释涂布平板法，穿刺接种不可用于样品中活菌数量统计

15．取9个洁净培养皿，均分为三组(Ⅰ．Ⅱ．Ⅲ)，各组分别加入等量的不同培养基，每个平板均用涂布法接种0.1mL大肠杆菌菌液，37 ℃培养36 h后，统计菌落数(见下表)，以下相关叙述正确的是（　　）

A．三组实验均使用了液体培养基，以方便菌落计数

B．Ⅰ组和Ⅲ组说明大肠杆菌正常生长需要糖类物质

C．Ⅰ组和Ⅱ组说明维生素可以促进大肠杆菌生长

D．Ⅱ组计数结果偏小的主要原因是部分细菌死亡

16．在培养基中加入牛肉膏的目的是为微生物提供（    ）

A．氢元素氧元素 B．氮源和维生素 C．无机盐 D．碳源．氮源．磷酸盐和维生素

17．某同学成功分离出了土壤中的固氮菌，结果如图所示。该实验使用了（    ）

A．平板划线法 B．液体培养基

C．不含氮源的培养基 D．不含碳源的培养基

18．最常用的接种微生物的方法是平板划线法和稀释涂布平板法，下列关于二者的比较正确的（    ）

A．③④ B．②④ C．①④ D．②③

参考答案与试题解析

1．【答案】B

【解析】

试题分析：

对照实验是指除所控因素外其它条件与被对照实验完全对等的实验。判断选择培养基是否起到了选择作用，则接种了的选择培养基是实验组，而接种了的牛肉膏蛋白胨培养基属于对照组。

解答：

为了判断培养基是否被杂菌污染，需要设置的对照组是未接种的培养基，即将未接种的培养基与接种的培养基同时培养，若未接种的培养基上出现菌落，说明其被污染，否则没有被污染；用接种了的普通培养基和选择培养基进行对照，在牛肉育蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目，说明选择培养基具有选择的功能，B正确。
故选B。

2．【答案】D

【解析】

试题分析：

解答：

试题分析：硝化细菌能利用大气当中的二氧化碳，故是含碳无机物，硝化细菌能将氨氧化成亚硝酸，进而将亚硝酸氧化成硝酸，能利用这两个化学反应中释放出的化学能，故氮源是氨，能量来源也是氨，故D正确，其余错误。

3．【答案】A

【解析】

试题分析：

无菌技术的主要内容：

①对实验操作的空间．操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；

②将用于微生物培养的器皿．接种用具和培养基等器具进行灭菌；

③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；

④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。

解答：

A．紫外线照射可以杀灭真菌，A正确；

B．真空包装可以防止杂菌污染，但是不能杀灭真菌，B错误；

C．用保鲜膜密闭是为了保鲜，可以防止杂菌污染，但是不能杀灭真菌，C错误；

D．添加防腐剂可以防止杂菌污染引起的腐败变质，但是不能杀灭真菌，D错误。

故选A。

4．【答案】D

【解析】

试题分析：

菌种临时保藏为4℃斜面培养基保存，长期保存可-20℃甘油管藏。

解答：

A．对于频繁使用的菌种，长期保存不适合取用，故用临时保藏的方法，A正确；

B．培养细菌时需将培养基的pH调至中性或微碱性，B正确；

C．不同种类的微生物的碳源可能不同，如自养生物一般利用无机碳源，C正确；

D．对于需要长期保存的菌种，可以采用低温-20℃保藏的方法，D错误。

故选D。

5．【答案】C

【解析】

试题分析：

在微生物的实验室培养中获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。无菌技术围绕着如何避免杂菌的污染展开，主要包括以下几个方面：

①对实验操作的空间．操作者的衣着和手进行清洁和消毒；

②将用于微生物培养的培养器皿．接种用具和培养基等进行灭菌；

③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；

④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触。

解答：

A．煮沸消毒只能杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子），A错误；

B．使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理，不能直接丢弃，以免污染环境，B错误；

C．紫外线灭菌是利用适当波长的紫外线能够破坏微生物机体细胞中的DNA或RNA的分子结构，造成生长性细胞死亡和（或）再生性细胞死亡，达到灭菌的效果，此法只能杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子），只适用于表面灭菌和空气灭菌，C正确；

D．金属器具可以采用灼烧灭菌法或干热灭菌，D错误。

故选C。

6．【答案】C

【解析】

试题分析：

本题考查微生物同化作用的方式，硝化细菌是自养生物，通过化能合成作用合成有机物以维持生命活动；大肠杆菌属于异养生物，必须消耗现成的有机物才能维持正常的生命活动。

解答：

硝化细菌是自养生物，可以利用培养液中的无机盐．水及大气中的CO2，通过化能合成作用合成有机物以维持生命活动，由于空间．营养等条件是有限的，其种群数量呈“S”型增长；大肠杆菌属于异养生物，必须消耗现成的有机物才能维持正常的生命活动，故在只含无机盐的培养液中不能生存，其数量是逐渐减少的，C表示的大肠杆菌和硝化细菌的生长曲线符合实际情况，A．B．D不符合。 故选C。

7．【答案】A

【解析】

试题分析：

微生物的营养物质主要包括碳源．氮源．水和无机盐等。配置培养基时一般要考虑微生物的营养物质是否全面．各种营养物质的比例及pH等因素。

解答：

A．培养基一般都含有水．碳源．氮源和无机盐，有些微生物的培养除了上述几种主要营养物质外，还需要添加生长因子，A正确；
B．配制好的培养基在使用前需放入干热灭菌箱需要用高压蒸汽灭菌法灭菌，B错误；
C．培养霉菌时需将培养基的pH调节到中性或微酸性，C错误；
D．固定培养基可用于分离单菌落，而液体培养基可用于工业生产，D错误。
故选A。

8．【答案】B

【解析】

解答：

A．微生物在固体培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落，根据菌落的特征可以判断是哪一种菌，A错误；
B．硝化细菌可以利用氧化氨释放的能量用来合成有机物，因此NH3可以作为硝化细菌的氮源和能源物质，B正确；
C．培养基不一定都含有碳源．氮源，如培养自养型微生物的培养基中不需加入碳源，分离自生固氮菌的培养基中，不需加入氮源，C错误；
D．某些细菌生长过程中需要额外补充营养物质，而酵母菌不属于细菌，D错误。
故选B。
 

9．【答案】A

【解析】

试题分析：

菌种的接种方法包括平板划线法和稀释涂布平板法，平板划线法在划线时不能划破培养基表面。培养基的制备过程可以分为计算．称量．溶化．灭菌和倒平板，其中灭菌以前需要调节pH。培养基中为了获得甲醇耐受酵母菌，则甲醇起选择作用，可以逐步提高甲醇的浓度来筛选。

解答：

A．调节培养基的pH，应该在灭菌前进行，A错误；

B．通过步骤④中菌落的分布可以发现接种方法为平板划线法，划线时不能划破培养基表面，否则使得菌落生长到培养基的内部，B正确；

C．逐步提高培养基中甲醇的浓度，可以使得甲醇的选择作用逐渐加强，从而筛选出甲醇耐受酵母菌，C正确；

D．倒平板的时候需要将培养基冷却到50℃再倒入培养皿混匀，冷凝后倒置培养，D正确；

故选A。

10．【答案】D

【解析】

试题分析：

从混合样品中获得某种微生物的方法通常有两种：

第一种是可利用该分离对象对某一营养物质有一“嗜好”的原理，专门在培养基中加入或不加该营养物质，从而使它成为一种选择培养基（如在含高浓度NaCl的培养基上分离金黄色葡萄糖球菌，在不含N的培养基上分离圆褐固氮菌）；或根据分离对象对pH．温度和氧气浓度的喜好，改变培养环境的理化性质，使环境条件最适宜该微生物的生存，从而达到分离的目的，将培养基放在高温环境中培养只能得到耐高温的微生物。

第二种办法可利用该分离对象对某种抑菌物质的抗性，在混合培养物中加入该抑制物，经培养后，原来占优势的微生物生长受抑制，而分离对象却可乘机大大增殖，使之在数量上占优势（如在加入青霉素的培养基上分离真核微生物）。

解答：

根据题意可知，需要“筛选能产生阿拉伯胶（一种多糖）降解酶的菌株SM01”，需要以阿拉伯胶作为唯一碳源，因此首先排除丙培养基；甲中牛肉膏也属于碳源，因此排除甲培养基；由于该菌株能够产生阿拉伯胶的降解酶，因此培养基中不能添加阿拉伯胶酶，故排除乙培养基，而丁培养基以阿拉伯胶作为唯一碳源符合要求，即利用培养基丁培养基可以筛选该菌株。综上所述，D正确，A．B．C错误。

故选D。

11．【答案】D

【解析】

试题分析：

制作果酒．果醋．腐乳．泡菜等都需要借助微生物的发酵过程。发酵是利用微生物，在适宜的条件下，将原料经过特定的代谢途径转化为人类所需要的产物的过程。

解答：

A．乳酸菌对抗生素敏感，不能利用乳酸菌将含较多抗生素的牛奶制作成含有抗生素的酸奶，A错误；

B．当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，B错误；

C．酒精不含氮元素，不能为醋酸菌提供氮源，C错误；

D．制作泡菜利用的菌种为乳酸菌，其代谢类型为异养厌氧型，D正确。

故选D。

12．【答案】B

【解析】

试题分析：

微生物的营养物质主要包括氮源．碳源．水和无机盐等，液体培养基与固体培养基的区别是否添加适量的凝固剂琼脂，伊红美兰指示剂可以专一检测大肠杆菌菌落。
 

解答：

A．从物理性质看该培养基属于液体培养基，从用途看该培养基属于鉴别培养基，A错误；

B．微生物的营养物质主要包括氮源．碳源．水和无机盐等，培养基中属于碳源的物质主要是葡萄糖，属于氮源的物质是蛋白胨，B正确；

C．生长因子主要包括维生素．氨基酸和碱基等，它们一般是酶和核酸组成成分，蛋白胨可以提供生长因子，C错误；

D．该培养基调节合适的pH后经灭菌后才可以接种使用，D错误。

故选B。

13．【答案】A

【解析】

试题分析：

无菌技术的主要内容①对实验操作的空间．操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；②将用于微生物培养的器皿．接种用具和培养基等器具进行灭菌③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。

解答：

A．煮沸属于消毒，可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢，A正确；

B．家庭制作葡萄酒时，要将容器进行消毒或者灭菌，葡萄则需要冲洗即可，B错误；

C．加入培养基中的指示剂和染料也需要灭菌，否则可能会污染培养基，C错误；

D．用自然生长的离体植物组织进行组织培养时，需要进行消毒，D错误。

故选A。

14．【答案】C

【解析】

试题分析：

穿刺接种在保藏厌氧菌种或研究微生物的运动时常采用此法。做穿刺接种时，用的接种工具是接种针。用的培养基一般是半固体培养基。它的做法是：用接种针蘸取少量的菌种，沿半固体培养基中心向管底作直线穿刺，如某细菌具有鞭毛而能运动，则在穿刺线周围能够生长。

解答：

A．由分析可知，穿刺接种可用于鉴定微生物的呼吸作用类型，A正确；
B．穿刺接种常用于保藏厌氧菌种或研究微生物的运动，因此需要接种在半固体培养基中，B正确；
C．由分析可知，相对于平板划线法，穿刺接种所需的培养基添加的琼脂较少，C错误；
D．稀释涂布平板法可用于活菌计数，而穿刺接种不可用于样品中活菌数量统计，D正确。
故选C。

15．【答案】C

【解析】

试题分析：

实验设计的原则：对照原则和单一变量原则；对比Ⅰ．Ⅱ两组，可以发现含有维生素的培养基，大肠杆菌生长好，缺少C6H12O6大肠杆菌几乎不生长。微生物培养基的成分有碳源．氮源．水．无机盐。

解答：

A．根据培养基的成可知：每个平板都含有琼脂，属于固体培养基，A错误；
B．Ⅱ组和Ⅲ组的单一变量是葡萄糖的有无，两组实验结果说明大肠杆菌正常生长需要糖类物质，B错误；
C．由分析可知：Ⅰ组和Ⅱ组说明维生素可以促进大肠杆菌生长，C正确；
D．Ⅱ组计数结果偏小的主要原因是涂布平板是可能出现了两个或两个以上的菌体聚集在一起的情况，D错误。
故选C。

16．【答案】D

【解析】

试题分析：

培养基的概念及营养构成

（1）概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质；

（2）营养构成：各种培养基一般都含有水．碳源．氮源．无机盐，此外还要满足微生物生长对pH．特殊营养物质以及氧气的要求。例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件。

解答：

牛肉膏与蛋白胨培养基是一种应用十分广泛的天然培养基，其中的牛肉膏为微生物提供碳源．磷酸盐和维生素，蛋白胨主要提供氮源和维生素，维生素属于生长因子。即D正确。

故选D。

17．【答案】C

【解析】

试题分析：

18．【答案】A

【解析】

试题分析：

微生物接种到固体培养基常用的方法有稀释涂布平板法和平板划线法，其中稀释涂布平板法接种可以形成单菌落，所以常用来进行微生物的计数。

解答：

①两种方法都需要在无菌条件下操作，①错误；

②两种方法都需要配制固体培养基，均需要添加琼脂，②错误；

③平板划线法不能对菌落进行计数，稀释涂布平板法能进行活菌计数，③正确；

④平板划线法的接种工具是接种环，稀释涂布平板法的接种工具是涂布器，④正确。

综上正确的选项是③④，故选A。