高中生物一、生物科学与技术的发展催生了基因工程课堂检测

这是一份高中生物一、生物科学与技术的发展催生了基因工程课堂检测，共16页。试卷主要包含了基因工程的操作步骤，下列叙述正确共几项等内容，欢迎下载使用。
【优质】一、生物科学与技术的发展催生了基因工程-3作业练习一．单项选择1．基因工程的操作步骤：①使目的基因与运载体相结合，②提取目的基因，③检测目的基因的表达是否符合特定性状要求，④将目的基因导入受体细胞。正确的操作顺序是（    ）A．③②④① B．④①②③ C．②①④③ D．③②④①2．下表为几种限制性核酸内切酶识别的序列和切割的位点。如图，已知某DNA在目的基因的两端1．2．3．4四处有BamHⅠ或EcoRⅠ或PstⅠ的酶切位点。现用BamHⅠ和EcoRⅠ两种酶同时切割该DNA片段（假设所用的酶均可将识别位点完全切开），下列各种情况中，可以防止酶切后单个含目的基因的DNA片段自身连接成环状的是A．1为BamHⅠ，2为EcoRⅠ，3为BamHⅠ，4为PstⅠB．1为EcoRⅠ，2为BamHⅠ，3为BamHⅠ，4为PstⅠC．1为PstⅠ，2为EcoRⅠ，3为EcoRⅠ，4为BamHⅠD．1为BamHⅠ，2为EcoRⅠ，3为PstⅠ，4为EcoRⅠ3．基因工程需要专门的工具，其中被称为“基因剪刀“的是（    ）A．解旋酶 B．DNA连接酶C．DNA聚合酶 D．限制性核酸内切酶4．转座子是一类可在基因组中发生位置移动的DNA片段，其移动过程被称为转座。根据转座机制的不同，转座子可分为DNA转座子和RNA转座子，前者能利用自身编码的转座酶将自身序列从原有位置上切除并插入到新的基因组位点，后者需要先通过转录产生RNA中间体，再以该RNA为模板利用自身合成的某种酶生成DNA后插入到新的基因组位点。下列有关叙述错误的是（    ）A．转座子的基本组成单位是脱氧核苷酸B．转座过程会导致遗传信息发生改变C．转座酶与限制性核酸内切酶作用相似D．上述转座过程中的“某种酶”是指RNA聚合酶5．下列有关限制性核酸内切酶的叙述，错误的是（    ）A．从反应类型来看，限制性核酸内切酶催化的是一种水解反应B．限制性核酸内切酶的活性会受温度．pH等的影响C．一种限制性核酸内切酶只能识别双链DNA中某种特定的脱氧核苷酸序列D．限制性核酸内切酶识别的序列越短，则该序列在DNA中出现的概率就越小6．下列关于基因工程操作工具-载体的叙述中，错误的是（    ）A．质粒作为常见的载体，不仅存在于细菌中，某些病毒也具有B．作为基因工程的载体，标记基因不可或缺C．目的基因插入载体时，有特定的插入位点D．构建重组 DNA 分子时需 DNA 连接酶和限制性核酸内切酶等7．下列有关基因工程技术的叙述，正确的是（    ）A．基因工程又叫DNA拼接技术，所用的工具酶是限制酶B．所有的限制性核酸内切酶识别同一种特定的核苷酸序列C．形成重组质粒时，用DNA连接酶将碱基通过氢键连接D．基因工程常用的运载体有噬菌体．动植物病毒和质粒8．用Xhol和SaII两种限制性核酸内切酶分别处理同一DNA片段（限制酶在对应切点一定能切开），酶切位点及酶切产物分离结果如图。下列叙述错误的是（    ）A．图1中两种酶识别的核苷酸序列不同B．图1中酶催化反应的化学键是磷酸二酯键C．图2中②可能是用XhoI处理得到的酶切产物D．用XhoI和SalI同时处理该DNA电泳后得到7种产物9．下列叙述正确共几项（    ）①限制性内切酶的特点是识别特定的核苷酸序列和具有特定的酶切位点②上海医学遗传研究所成功培育出第一头携带白蛋白的转基因牛，可以想象这头牛发生了基因突变③根据mRNA的信息推出并获取目的基因的方法是用DNA探针测出目的基因④转基因抗虫棉的生产过程中不需要用到的工具是噬菌体⑤可以作目的基因“分子运输车”的是天然质粒⑥在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的是将目的基因导入受体细胞⑦培育成抗除草剂的作物新品种，导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体⑧基因工程常用细菌等原核生物作受体细胞的原因包括繁殖速度快．遗传物质相对较少．多为单细胞，操作简便A．三 B．四 C．五 D．六10．1987年，美国科学家将萤火虫的萤光素基因转入烟草植物细胞，获得了高水平的表达。长成的植物通体光亮，堪称自然界的奇迹。这一研究成果表明：（ ）①萤火虫与烟草植物的DNA结构基本相同②萤火虫与烟草植物共用一套遗传密码③烟草植物体内合成了萤光素④萤火虫和烟草植物合成蛋白质的方式基本相同A．①和③ B．②和③ C．①和④ D．①②③④11．下列关于基因工程工具的说法错误的是（    ）A．一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列B．两种来源不同的DNA用同种限制酶切割后，末端可以相互黏合C．DNA连接酶能使黏性末端的碱基之间形成氢键D．质粒是拟核或细胞核外能够自主复制的很小的环状DNA分子12．下面是 5 种限制酶所识别的 DNA 分子序列和剪切位点图（↓表示剪切点．切出的断面为粘性末端或平末端）：限制酶 1：——↓GATC——    限制酶 2：——CATG↓——；限制酶 3：——G↓GATCC——    限制酶 4：——CCC↓GGG——限制酶 5：——AG↓CT——通过对上述内容的分析，下列有关说法错误的是（    ）A．不同的限制酶可以切出相同的粘性末端B．限制酶 1 可以识别并剪切限制酶 3 所识别的 DNA 序列C．限制酶 3．4 识别的序列都是由 6 个脱氧核苷酸组成D．DNA 连接酶可拼接由限制酶 4 和 5 切出的 DNA 片段，也可拼接由限制酶 1 和 2 切出的 DNA 片段13．下列有关质粒的叙述中，正确的是（    ）A．质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状的细胞器B．质粒是细菌细胞中能自我复制的单链环状DNA分子C．质粒的存在对宿主细胞的生存有决定性的作用D．质粒可以在宿主细胞内复制14．下图甲表示限制酶EcoR I的识别序列和切割位点，图乙表示DNA片段，图丙表示质粒及限制酶的切割位点。下列分析正确的是（    ）A．目的基因被EcoR I切割后将产生序列为—TTAA的平末端B．限制酶作用于图乙中的①，DNA连接酶作用于②和③C．用HindⅢ和Pst I两种限制酶切割质粒，不会影响含目的基因的受体细胞的筛选D．用PstI和EcoR I两种限制酶切割质粒，有利于目的基因与质粒正确连接15．已知限制酶Hind Ⅲ和XhoⅠ的识别序列及切割位点分别为 A↓AGCTT 和C↓TCGAG，相关叙述正确的是（    ）A．这两种酶作用的底物都是单链DNAB．两种限制酶切割形成的黏性末端都是-AGCTC．两种限制酶的识别序列在DNA分子中出现的概率相同D．分别用这两种酶切割目的基因和质粒后能形成重组质粒16．限制性核酸内切酶能识别特定的DNA序列并进行剪切,不同的限制性核酸内切酶可以对不同的核酸序列进行剪切。现用3种不同的限制性核酸内切酶对一个6.2 kb (千碱基对)大小的线状DNA进行剪切后,用凝胶电泳分离各核酸片段,实验结果见下表。 请问:3种不同的限制性核酸内切酶在此DNA片段上的切点位置是图中的（    ）A．B．C．D．17．下图是 4 种限制酶的识别序列及其酶切位点，下列叙述错误的是（    ）A．不同类型的限制酶切割后，有的产生黏性末端，有的产生平末端B．不同类型的限制酶切割后可能产生相同的黏性末端C．用酶1和酶2分别切割目的基因和质粒，连接形成重组 DNA 分子后，重组 DNA 分子 仍能被酶2识别D．用酶3和酶4分别切割目的基因和质粒后，其产物经 T4DNA 连接酶催化不能连接形成 重组 DNA 分子18．GDNF是一种神经营养因子，研究人员构建了含GDNF基因的表达载体（如图1所示），经筛选得到的载体主要有三种。为鉴定这3种连接方式，选择限制性核酸内切酶对筛选的载体进行酶切，并对酶切后的DNA片段进行电泳分析，结果如图2所示。若图2中第②泳道显示所鉴定的载体是正向连接的，则鉴定时所选的限制性核酸内切酶是（    ）A．XhoI B．HpaI和BamHI C．HpaI和XhoI D．BamHI和XhoI
参考答案与试题解析1．【答案】C【解析】试题分析：基因工程又叫DNA重组技术，是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。解答：基因工程的基本操作步骤主要包括四步：②目的基因的获取→基因表达载体的构建，即①使目的基因与运载体结合→④将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与表达，即③检测目的基因的表达是否符合特定性状要求。故选C。2．【答案】A【解析】试题分析：由于限制酶具有特异性，一种限制酶只能识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并形成特定的黏性末端．题干中提出“为防止酶切后单个含目的基因的DNA片段自身连接成环状”，即要求目的基因两侧的黏性末端不同，因此一般选择不同的限制酶进行切割。解答：A．如果1为BamHⅠ，2为EcoRⅠ，3为BamHⅠ，4为PstⅠ，则用BamHⅠ和EcoRⅠ两种酶同时切割该DNA片段，将会在2处和3处将目的基因切割，并且形成了不同的黏性末端，可以防止目的基因的自身环化，A正确；
B．如果1为EcoRⅠ，2为BamHⅠ，3为BamHⅠ，4为PstⅠ，则用BamHⅠ和EcoRⅠ两种酶同时切割该DNA片段，将会在2处和3处将目的基因切割，并且2处和3处形成了相同的黏性末端，不符合题意，B错误；
C．C项中2处和3处均被EcoRⅠ酶切割，因此2处和3处形成了相同的黏性末端，不符合题意，C错误；
D．如果1为BamHⅠ，2为EcoRⅠ，3为PstⅠ，4为EcoRⅠ，则用BamHⅠ和EcoRⅠ两种酶同时切割该DNA片段，将会在2处和4处将目的基因切割，并且黏性末端相同，不符合题意，D错误。
故选A。3．【答案】D【解析】试题分析：解旋酶和DNA聚合酶被应用于DNA分子的复制过程中，分别用于断裂氢键打开双螺旋和合成DNA子链；基因工程中必需的工具有限制酶．DNA连接酶和载体，其中限制酶被称为“基因剪刀”，DNA链接酶被称为“基因的针线”。解答：基因工程中必需的工具有限制性核酸内切酶（限制酶）．DNA连接酶和载体，其中限制酶被称为“基因剪刀”，DNA链接酶被称为“基因的针线”，D正确。故选D。4．【答案】D【解析】试题分析：基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取．利用PCR技术扩增和人工合成。
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因．启动子．终止子和标记基因等。
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法．基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定．抗病鉴定．活性鉴定等。解答：A．根据“转座子是一类可在基因组中发生位置移动的DNA片段”可知，转座子的基本组成单位是脱氧核苷酸，A正确；B．转座过程会将自身序列从原有位置上切除并插入到新的基因组位点，后者需要先通过转录产生RNA中间体，再以该RNA为模板利用自身合成的某种酶生成DNA后插入到新的基因组位点，说明转座过程的遗传信息发生改变，B正确；C．根据转座酶能将自身序列从原有位置上切除可知，转座酶与限制性核酸内切酶作用相似，C正确；D．上述转座过程中根据“以该RNA为模板利用自身合成的某种酶生成DNA”可知，“某种酶”是指以RNA为模板合成DNA的酶，即逆转录酶，D错误。故选D。5．【答案】D【解析】试题分析：基因的“剪刀”--限制性核酸内切酶（简称限制酶）。①分布：主要存在于原核生物中。②特性：一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的切点上切割DNA分子。③切割结果：产生两个带有黏牲未端或平末端的DNA片段。④作用：基因工程中重要的切割工具，通常能将外来的DNA切断，对自己的DNA无损害。⑤实例：EcoRI限制酶能专一识别CAATTC序列，并在G和A之间将这段序列切开。解答：A．限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，即催化的是一种水解反应，A正确；B．限制性内切酶的活性受温度．pH的影响，在最适宜的温度和pH条件下，酶的活性最高，B正确；C．一种限制性内切酶只能识别双链DNA中某种特定的脱氧核苷酸序列，并在特定的位点切割磷酸二酯键，说明酶专一性，C正确；D．限制性内切酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的几率就越大，D错误。故选D。6．【答案】A【解析】试题分析：基因工程的工具：（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂；（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键；（3）运载体：常用的运载体：质粒．噬菌体的衍生物．动植物病毒。①作为运载体必须具备的条件：要具有限制酶的切割位点；要有标记基因（如抗性基因），以便于重组后重组子的筛选；能在宿主细胞中稳定存在并复制；是安全的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来。②天然的质粒不能直接作为载体，基因工程中用到的质粒都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的。解答：A．病毒中不含质粒，A错误；B．作为基因工程的载体，标记基因不可或缺，便于进行筛选，B正确；C．作为基因工程的运载体，需要有多个限制酶切点，以便于和目的基因连接，故目的基因插入载体时，有特定的插入位点，C正确；D．构建重组 DNA 分子时需 DNA 连接酶作为 “针线”将目的基因与载体相连；需要限制性核酸内切酶作为 “剪刀”将目的基因获取，并把载体在相应部位切割，便于实现连接，D正确。故选A。7．【答案】D【解析】试题分析：基因工程又叫DNA重组技术，是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程的工具：（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂；（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键；（3）运载体：常用的运载体：质粒．噬菌体的衍生物．动植物病毒。解答：A．基因工程的工具酶包括限制酶和DNA连接酶， A错误；B．限制性核酸内切酶具有特异性，一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的核苷酸序列并在特定的位点进行切割，B错误；C．所有的DNA连接酶都只能“缝合”双链DNA片段之间形成磷酸二酯键，C错误；D．基因工程常用的运载体有噬菌体．动植物病毒和质粒，D正确。故选D。8．【答案】D【解析】试题分析：基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取．利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因．启动子．终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法．基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定．抗病鉴定．活性鉴定等。解答：A．酶具有专一性，不同的限制酶识别并切割不同的核苷酸序列，A正确；B．图1中酶用来切割DNA，DNA单链是脱氧核苷酸通过磷酸二酯键相连，因此酶催化反应的化学键是磷酸二酯键， B正确；C．分析图1，限制酶XhoI有2处切割位点，切割后产生3个DNA片段，泳道②中是用XhoI处理得到的酶切产物，C正确；D．从图1可知，用XhoI和SalI同时处理该DNA电泳后得到6种产物，D错误。故选D。9．【答案】B【解析】试题分析：基因工程中常用的运载体有质粒．动植物病毒和λ噬菌体衍生物，将目的基因导入植物细胞时，体细胞和受精卵均可以。解答：①限制性核酸内切酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，故其特点是识别特定的核苷酸序列和具有特定的酶切位点，①正确； ②基因工程培育出的转基因牛发生了基因重组，②错误； ③根据mRNA的信息推出并获取目的基因的方法是以mRNA为模板反转录出目的基因，③错误； ④转基因抗虫棉的生产过程中需要用到的工具是限制性核酸内切酶．DNA连接酶．质粒，不需要噬菌体，④正确； ⑤在进行基因工程操作中，真正被用作载体的质粒，都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的，⑤错误； ⑥在基因操作的基本步骤中，人工合成目的基因．目的基因与运载体结合．检测目的基因的表达均需要碱基互补配对，将目的基因导入受体细胞不进行碱基互补配对，⑥正确； ⑦植物细胞的全能性较高，可以直接导入体细胞再进行植物组织培养，不需要像动物一样只能导入受精卵，如农杆菌转化法的受体细胞是植物伤口处的体细胞，⑦错误； ⑧基因工程常用细菌等原核生物作受体细胞的原因包括繁殖速度快．遗传物质相对较少．多为单细胞，操作简便，⑧正确。 故选B。10．【答案】D【解析】萤光素基因转入烟草植物细胞，能够表达，首先说明萤火虫与烟草植物的DNA结构都是双螺旋结构，其次它们都共用一套遗传密码，烟草通体光亮，说明其合成了萤光素，由于萤火虫和烟草都是真核生物，所以它们合成蛋白质都要经过转录和翻译。11．【答案】C【解析】试题分析：DNA重组技术至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）．DNA连接酶．运载体，其中限制酶和DNA连接酶是常用的工具酶。解答：A．限制酶具有专一性，一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，A正确；B．在基因工程中，两种来源不同的DNA用同种限制酶切割后，可形成相同的末端，故末端可以相互黏合，B正确；C．DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，C错误；D．质粒是存在于拟核（如细菌）或细胞核（如酵母菌）外，并具有自主复制的小型环状DNA分子，D正确。故选C。12．【答案】D【解析】试题分析：题图分析：限制性核酸内切酶1和2切出的DNA片段的黏性末端不同，不可通过DNA连接酶拼接，但限制性核酸内切酶1和3切出的黏性末端相同；限制性核酸内切酶1．2识别的序列都是由4个脱氧核苷酸组成，限制性核酸内切酶3．4识别的序列是由6个脱氧核苷酸组成；限制酶1．2．3切出的黏性末端，限制酶4和5切出的是平末端。限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。解答：A．由分析可知，限制酶1和3切出的黏性末端相同，故不同的限制酶可以切出相同的粘性末端，A正确；B．限制酶3识别的碱基序列中包含了限制酶 1 识别的碱基序列，故限制酶1可以识别并剪切限制酶 3 所识别的 DNA 序列，B正确；C．由分析可知，限制酶 3．4 识别的序列都是由 6 个脱氧核苷酸组成，C正确；D．DNA经不同限制酶切割后，只有在形成相同的黏性末端时，才可以通过DNA连接酶拼接，由此可知DNA 连接酶可拼接由限制酶 1 和 3 切出的 DNA 片段，不可拼接由限制酶 1 和 2 切出的 DNA 片段，也不能连接由限制酶 4 和 5 切出的 DNA 片段，D错误。故选D。13．【答案】D【解析】试题分析：质粒是基因工程中最常用的载体，它是一种裸露的．结构简单的．独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。解答：A．质粒是环状DNA分子，不是细胞器，A错误；B．质粒是细菌细胞中能自我复制的双链环状DNA分子，B错误；C．质粒的存在对宿主细胞的生存没有决定性的作用，C错误；D．细菌质粒可以在宿主细胞内复制，D正确。故选D。 14．【答案】D【解析】试题分析：分析题图：甲图中限制酶切割完成后形成的黏性末端为—TTAA；乙图中①是氢键，③是磷酸二酯键；丙图四环素和青霉素抗性基因为标记基因，其他为限制酶切割位点。解答：A．当限制酶在它识别序列的中心轴线两侧将DNA分子的两链分别切开时，产生的是黏性末端，当限制酶在它识别序列中心轴线处切开时，产生的是平互末端，由图，目的基因被EcoR I切割后将产生序列为—TTAA的黏性末端，A错误；B．限制酶和DNA连接酶作用于相邻脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键即图中③处化学键，B错误；C．HindⅢ和Pst I两种限制酶切割位点分别位于四环素和青霉素抗性基因部位，抗性基因为标记基因，其作用是便于目的基因的鉴定和筛选，C错误；D．用PstI和EcoR I两种限制酶切割质粒，可以防止质粒自身的环化，有利于目的基因与质粒正确连接，D正确。故选D。15．【答案】C【解析】试题分析：限制酶一般指限制性核酸内切酶，可以识别并附着特定的脱氧核苷酸序列，并对每条链中特定部位的两个脱氧核糖核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割。
 解答：A．这两种酶作用的底物可以是双链DNA，A错误；
B．据题可知，HindⅢ切割形成的粘性末端是-AGCT，XhoⅠ切割形成的末端为-TCGA，B错误；
C．两种限制酶的识别序列均有六个核苷酸，其在DNA分子中出现的概率相等，C正确；
D．分别用这两种酶切割目的基因和质粒后无法形成相同的黏性末端，不能形成重组质粒，D错误。
故选C。16．【答案】D【解析】试题分析：限制性内切酶具有特异性，一种限制性内切酶能识别特定的DNA序列并进行剪切，且不同的限制性内切酶可以对不同的核酸序列进行剪切。先根据B．C和B+C切割后的片段可知B点位于C切割形成的3.6片段中，再结合A．A+B和A+C切割后的片段可知A点位于B切割的1.0片段和C切割的1.4片段中，即D项正确。17．【答案】D【解析】试题分析：限制性核酸内切酶（限制酶），来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的；功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性；结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。分析图解：酶1和酶2切割会形成黏性末端，并且形成的末端序列相同；酶3和酶4切割会形成平末端。解答：不同类型的限制酶切割后，有的产生黏性末端（酶1和酶2），有的产生平末端（酶3和酶4），A正确；不同类型的限制酶切割后可能产生相同的黏性末端，如图中的酶1和酶2，B正确；用酶1和酶2分别切割目的基因和质粒，形成的末端序列相同，连接形成重组DNA分子后，重组DNA分子仍能被酶2识别，C正确；用酶3和酶4分别切割目的基因和质粒后形成平末端，其产物经T4DNA连接酶（即可连接黏性末端，也可连接平末端）催化可以连接形成重组DNA分子，D错误，故选D。 18．【答案】B【解析】试题分析：根据题意识图分析可知，经酶切后的载体和GDNF基因进行连接，连接产物经筛选得到的载体主要有三种：单个载体自连．GDNF基因与载体正向连接．GDNF基因与载体反向连接。识图分析可知，泳道①仅有一种条带，属于载体自连；泳道②有两种条带，且长度分别与质粒和GDNF基因长度相同，为正向连接，则鉴定时所选的限制性核酸内切酶是HpaI和BamHI切后的结果；泳道③有两种条带，长度与BamHⅠ酶切后结果相同，为反向连接。解答：根据题意可知，图2中第②泳道显示所鉴定的载体是正向连接的，泳道②有两种条带，且长度分别与质粒和GDNF基因长度相同，则鉴定时所选的限制性核酸内切酶是HpaI和BamHI切后的结果。综上所述，B正确，A．C．D错误。故选B。