沪科版 (2019)选修3一、间接计数法课堂检测

【优选】一、间接计数法-1练习

一．单项选择

1．某同学完成了探究·实践“培养液中酵母菌种群数量的变化”实验，图为利用血球计数板（1mm×1mm×0．1mm）通过显微镜观察时，实验第6天对酵母菌培养液稀释100倍后的统计结果。图2为培养液中的酵母菌数量的变化情况。下列相关叙述错误的是（　　）

A．图1的中格内酵母菌的数量约计为20个

B．取样时为避免吸到培养液底部的死菌，滴管应轻轻吸取，避免溶液晃动

C．图2中de段发生的原因可能与营养物质的消耗．pH的改变等有关

D．制片时，先将盖玻片放在血球计数板的计数室上，用吸管吸取培养液，滴于盖玻片边缘，让培养液自行渗入

2．某同学对 101．102．103倍稀释液计数的平均菌落数分别是 2760．295 和 16，则菌落总数为（所用稀释液体积为 0．1 mL）（    ）

A．2．76×104个/mL B．2．95×105 个/mL

C．4．6×104个/mL D．3．775×104个/mL

3．在农田土壤的表层自生固氮菌较多。将用表层土制成的稀泥浆接种到特制的培养基上培养，可将自生固氮菌与其他细菌分开，对培养基的要求是（　　）

①加抗生素    ②不加抗生素    ③加氮素           ④不加氮素

⑤加葡萄糖   ⑥不加葡萄糖   ⑦37℃恒温箱中培养  ⑧28～30℃温度下培养

A．①③⑤⑦ B．②④⑥⑧ C．②④⑤⑧ D．①④⑥⑦

4．平板划线法和稀释涂布平板法是常用的两种接种方法。下列相关叙述错误的是（    ）

A．平板划线法要求在培养基表面连续划线，且除第一次划线外，每一次划线的起点都是上一次划线的终点

B．除第一次划线前需要将接种环灼烧灭菌外，以后的划线不用灭菌即可划线

C．如果菌液本来浓度不高，则可以适当降低稀释倍数

D．“充分稀释”和“连续划线”的目的都是获得由单一细胞繁殖而成的菌落

5．下列有关微生物分离，培养和计数的叙述，正确的是（    ）

A．分离土壤中微生物时，需要先对土壤灭菌，再进行培养

B．测定土壤中细菌数量时，一般选用103-107倍的稀释液

C．测定土壤样品中的细菌数目，常用稀释涂布平板法或平板划线法进行计数

D．统计菌落数目时，当样品的稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落

6．下列关于菌种的选育的叙述，不正确的是（    ）

A．自然选育菌种费时且盲目性大

B．诱变育种原理的基础是基因突变

C．采用基因工程的方法可构建工程菌

D．传统发酵技术和现代工业发酵都需要选育菌种

7．伤寒是由伤寒杆菌引起的急性传染病，伤寒杆菌侵入人体后很快被巨噬细胞吞噬，并进一步在其中大量繁殖，症状包括高烧．腹痛．严重腹泻．头痛．身体出现玫瑰色斑等，大部分人可以自行痊愈。下列叙述正确的是（    ）

A．伤寒杆菌进入细胞，快速利用宿主细胞的核糖体合成大量蛋白质

B．高温可破坏病原体蛋白质的空间结构，所以煮沸处理餐具可杀死所有病原体

C．伤寒杆菌被吞噬进入细胞，说明细胞膜有控制物质进出细胞的功能

D．适当增加机体内参与免疫的细胞数量与活性，可提高对病原体的抵御能力

8．下列有关微生物的培养和分离的叙述，正确的是（    ）

A．灼烧接种环后，为避免其他杂菌的干扰，应立即伸入菌液取菌种

B．若要检测培养基是否被污染，可将未接种的培养基在相同条件下进行培养

C．在第一次划线前灼烧接种环和每次划线前灼烧接种环的目的相同

D．若对大肠杆菌进行计数，稀释涂布平板法统计的数目会比实际值略大

9．微生物培养过程中，要十分重视无菌操作，现代生物学实验中的许多方面也要进行无菌操作，防止杂菌污染，请分析下列操作中错误的有几项（　　）

①煮沸消毒可以杀死微生物营养细胞和一部分芽孢②配制培养基时可以加入未灭菌的清水  ③使用过的培养基要经过消毒后丢弃④培养基只能进行湿热灭菌，培养皿只能进行干热灭菌  ⑤加入培养基中的指示剂或染色剂不需要灭菌

A. 1 项 B. 2 项 C. 3 项 D. 4 项

10．平板涂布是分离菌种常用的方法，下列相关叙述不恰当的是（    ）

A．固体培养基灭菌后，应冷却至50℃左右时倒平板

B．倒好的平板需立即使用，以免表面干燥，影响菌的生长

C．平板涂布分离到的单菌落需进一步划线纯化

D．平板涂布法既可用于微生物的分离，也可用于微生物的计数

11． 关于腐乳制作的叙述正确的是

A. 豆腐中蛋白质在多种微生物的协同作用下被分解成多肽和氨基酸

B. 影响腐乳风味和质量的因素有豆腐灭菌．发酵温度．发酵时间等

C. 加卤汤装瓶后加盐腌制，要随着豆腐层的加高而增加食盐的用量

D. 腐乳装瓶腌制时，一定需要将瓶口通过酒精灯的火焰灼烧灭菌

12．化学需氧量（COD）是衡量污水中有机污染物含量的重要指标。从某污水处理系统中分离出多种细菌，经分离筛选获得具有高效降低COD能力的菌株，过程如图所示。下列相关说法错误的是（　　）

A．可用平板划线法统计菌液中的细菌数来确定接种时菌液的最佳稀释倍数

B．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基时，需灭菌处理并冷却到50℃左右进行倒平板

C．由菌落分布情况可知，在该固体培养基上接种的方法是稀释涂布平板法

D．从固体培养基中挑取单菌落后接种到液体培养基中培养，目的主要是扩大培养

13．某同学检测土壤中细菌总数时，在10．100．1000倍稀释液的平均菌落数为2760．330．46，如果用于平板涂布的稀释液的量都是，则每克样品中的菌落总数为（    ）

A．27600个 B．30600个 C．46000个 D．37750个

14．某科研小组欲从土壤中筛选能分解除草剂A（组成元素为C．H．O．N，在水中溶解度低，含除草剂A 的固体培养基不透明）的细菌用于生产，实验流程如下图所示。下列相关叙述错误的是（    ）

A．从经常使用除草剂A的土壤取样比从其他土壤取样更容易筛选到除草剂A分解菌

B．实验中培养基1为液体培养基，此操作的主要目的是增加除草剂A分解菌的数量

C．培养基2为选择培养基，其中以除草剂A作为唯一氮源便于分离除草剂A分解菌

D．挑选菌落时，透明圈直径与菌落直径比值越大，表明目标细菌分解除草剂A的能力越弱

15．某同学配制某种培养基对淀粉分解菌进行筛选，实验设计如图，下列说法正确的是

A. 该固体培养基对淀粉分解菌具有选择作用

B. 该培养基中的淀粉为微生物生长提供碳源和氮源

C. 菌落①分解淀粉的能力大于菌落②

D. 该实验不可用刚果红染液替代碘液染色

16．某同学在稀释倍数为106的培养基上测得平板上菌落数的平均值为215，那么每毫升样品中菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为0．1mL）（    ）

A．2.15×108 B．2.15×109 C．215 D．21.5

17．化细菌是化能自养菌，通过 NH4+→NO2- →NO3- 的氧化过程获取菌体生长繁殖所需的能量，在水产养殖中具有重要作用。图是分离硝化细菌的培养基配方，下列说法错误的是（　　）

A. （NH4）2SO4可作为硝化细菌的氮源和能源

B. 培养基中的 Na2CO3是硝化细菌的主要碳源

C. K2HPO4和 NaH2PO4能维持培养基的 pH

D. 硝化细菌能清除水体中的铵态氮及亚硝态氮

18．如图是某实验室从葡萄果实上获取酵母菌菌种的简要操作步骤。下列相关叙述中不正确的是（    ）

葡萄果实收集冲洗液选择培养基培养扩大培养

A．图中接种的方法有平板划线法和稀释涂布平板法

B．图中①②③步骤都必须确保是无菌操作

C．图中选择培养基培养时，应在培养皿的皿盖上做好标记避免混淆

D．图中选择培养基为固体培养基，而扩大培养的培养基为液体培养基

参考答案与试题解析

1．【答案】B

【解析】

血球计数板的使用注意事项：1．稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内。

2．【答案】B

【解析】

3．【答案】C

【解析】

自生固氮微生物属于细菌，其细胞壁的主要成分是肽聚糖，对抗生素敏感；自生固氮微生物的代谢类型是异养需氧型，是一类能够独立进行固氮的微生物。

解答：

①自生固氮微生物属于细菌，其细胞壁的主要成分是肽聚糖，对抗生素敏感，①错误；

②自生固氮微生物属于细菌，对抗生素敏感，培养基不能添加抗生素，②正确；

③自生固氮微生物是一类能够独立进行固氮的微生物，培养基中可以不添加氮源，③错误；

④自生固氮微生物是一类能够独立进行固氮的微生物，培养基中可以不添加氮源，④正确；

⑤自生固氮微生物的代谢类型是异养需氧型，培养基必须添加葡萄糖作为碳源和能源，⑤正确；

⑥自生固氮微生物的代谢类型是异养需氧型，培养基必须添加葡萄糖作为碳源和能源，⑥错误；

⑦自生固氮微生物的最适温度在28℃～30℃之间，⑦错误；

⑧自生固氮微生物的最适温度在28℃～30℃之间，⑧正确。

故选C。

4．【答案】B

【解析】

5．【答案】D

【解析】

微生物接种的方法中最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，前者是指通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种，逐步稀释分散到培养基的表面，后者是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。

解答：

A．分离土壤中微生物时，不能先对土壤灭菌，再进行培养，因为灭菌后就不能分离出微生物了，A错误；

B．测定土壤中细菌数量时，一般选用104～106倍的稀释液，B错误；

C．测定土壤样品中的细菌数目，常用稀释涂布平板法进行计数，平板划线法不适宜进行计数，C错误；

D．统计菌落数目时，当样品的稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落，D正确。

故选D。

6．【答案】D

【解析】

菌种的选育方式有：

①自然选育：自然选育的菌种来源于自然界．菌种保藏机构或生产过程，从自然界中选育菌种的过程较为复杂，而从生产过程或菌种保藏机构得到菌种的自然选育过程较为简单；

②杂交育种：杂交育种杂交育种法杂交育种指不同种群．不同基因型个体间进行杂交，并在其杂种后代中通过选择而育成纯合品种的方法。杂交可以使双亲的基因重新组合，形成各种不同的类型，为选择提供丰富的材料；

③基因工程育种：它是用人为的方法将所需要的某一供体生物的遗传物质——DNA大分子提取出来，在离体条件下用适当的工具酶进行切割后，把它与作为载体的DNA分子连接起来，然后与载体一起导入某一更易生长．繁殖的受体细胞中进行正常的复制和表达，从而获得新物种。

解答：

A．自然选育菌种要到相应的环境从众多的微生物中进行筛选所以费时且盲目性大，A正确；

B．菌种的选育可以采用诱变育种的方法，其原理是基因突变，B正确；

C．可以采用基因工程定向构建工程菌的方法获得，C正确；

D．现代工业发酵需要选育菌种，传统发酵技术一般利用自然界中的菌种，不需要选育菌种，D错误。

故选D。

7．【答案】D

【解析】

消毒和灭菌：

免疫系统的功能：免疫系统具有防卫．监控和清除的功能。

解答：

A．伤寒杆菌属于原核细胞，有核糖体，可以利用自身核糖体合成蛋白质，A错误；

B．高温属于消毒，不能杀死所有的病原体，例如其芽孢和孢子，B错误；

C．伤寒杆菌被吞噬进入细胞，体现了生物免疫系统的功能和膜的流动性，不能体现细胞膜有控制物质进出细胞的功能，C错误；

D．适当增加机体内参与免疫的细胞数量与活性，可以提高人体免疫力，提高对病原体的抵御能力，D正确。

故选D。

8．【答案】B

【解析】

9．【答案】C

【解析】1．消毒是指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物。消毒方法有煮沸消毒．化学药物消毒．紫外线消毒。

10．【答案】B

【解析】

稀释平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞。计数时，首先将待测样品制成均匀的系列稀释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在（否则一个菌落就不只是代表一个细胞），再取一定稀释度．一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。经培养后，由单个细胞生长繁殖形成菌落，统计菌落数目，即可计算出样品中的含菌数。此法所计算的菌数是培养基上长出来的菌落数，故又称活菌计数。

解答：

A．固体培养基灭菌后，应冷却至50℃左右时倒平板，固体培养基中含有琼脂，40℃左右会凝固，因此温度过低会导致培养基凝固无法倒平板，A正确；

B．倒好的平板需要冷却后使用，且不宜久存，以免表面干燥，影响接种后微生物的生长，B错误；

C．平板涂布分离到的单菌落仍需进一步划线纯化，以利于菌种保藏，C正确；

D．结合分析可知，平板涂布法既可用于微生物的分离，也可用于微生物的计数，D正确。

故选B。

11．【答案】 A

【解析】豆腐中蛋白质在多种微生物（青霉．酵母．曲霉．毛霉等，主要是毛霉）的协同作用下被分解成多肽和氨基酸，A正确；豆腐不需要灭菌，B错误；加盐腌制后再加卤汤装瓶，C错误； 腐乳装瓶腌制时，最好将瓶口通过酒精灯的火焰灼烧灭菌，防治瓶口被污染，D错误。

12．【答案】A

【解析】

13．【答案】C

【解析】

微生物接种常用的两种方法：

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过足够稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后，可形成单菌落。

解答：

计数时应选取菌落数在30~300之间的平板，故只能选取46，根据计算公式：每克样品中的菌落数46÷0.1×1000= 46000个，即C正确。

故选C。

14．【答案】D

【解析】

要想获得目的菌，应在富含该菌的环境中寻找；获得目的菌应在选择培养基上培养。

解答：

A．要想获得目的菌，应在富含该菌种的自然环境中筛选，故从经常使用除草剂A的土壤取样比从其他土壤取样更容易筛选到除草剂A分解菌，A正确；

B．为扩大培养，实验中培养基1为液体培养基，增目的是加目的菌（除草剂A分解菌）的数量，起到筛选作用，B正确；

C．根据题干信息“某科研小组从土壤中筛选出能够将这种化合物（除草剂A）分解的菌株”，则应以除草剂A作为唯一氮源，在该培养基上只有目的菌能够生存，其它杂菌因为缺少氮源不能存活，C正确；

D．挑选菌落时，透明圈直径与菌落直径比值越大，表明目标细菌分解除草剂A的能力越强，D错误。

故选D。

15．【答案】 A

【解析】该培养基以淀粉为唯一碳源，对淀粉分解菌具有选择作用，A正确；淀粉只含C．H．O元素，不能为微生物生长提供氮源，B错误；菌落②透明圈比菌落①大，菌落②分解淀粉的能力大于菌落①，C错误；刚过红能够与多糖物质形成红色复合物，淀粉被淀粉分解菌分解，会在淀粉分解菌周围形成透明圈，D错误。

16．【答案】B

【解析】

对微生物进行分离．计数常用的接种方法是稀释涂布平板法，估算每毫升样品中的细菌数时，往往选取30～300的平板，取至少三个平板的平均值，每毫升样品中的细菌数=（平板的平均菌落数÷涂布的体积）×稀释的倍数；由于当两个或多个细胞连在一起时平板上观察的是一个菌落，因此估算的菌落数少于实际菌落数。

解答：

根据分析中相关计算公式，稀释倍数为106，0.1mL稀释液的菌落数的平均值为215，则每毫升样品中菌落数为215÷0.1×106=2.15×109，因此ACD错误，B正确。

故选B。

17．【答案】B

【解析】A．题中显示，硝化细菌能够通过NH4+→NO2-→NO3-的氧化过程获取菌体生长繁殖所需的能量，故（NH4）2SO4可作为硝化细菌的氮源和能源，A正确；

B．由分析可知，硝化细菌是化能自养菌，以培养基中的NH4+为氮源和能源，能够将二氧化碳和水合成为糖类，故硝化细菌的碳源是二氧化碳，B错误；

C．K2HPO4和NaH2PO4属于无机盐，能够调节和维持微生物细胞的渗透压和pH，C正确；

D．由题干信息可知，硝化细菌能进行NH4+→NO2-→NO3-的氧化过程，故可用硝化细菌清除水体中的铵态氮及亚硝态氮，D正确。

故选B。

18．【答案】C

【解析】

果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧型生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，在无氧条件下，酵母菌进行酒精发酵。温度是酵母菌生长和发酵的重要条件，20℃左右，酒精发酵时，一般将温度控制在18~25℃，在葡萄酒自然发酵过程当中，其主要作用的是附着在葡萄皮上的野生酵母菌。

解答：

A．微生物培养中常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，A正确；

B．微生物培养的核心是防止杂菌污染，保证培养物的纯净，因此培养过程必须保证无菌操作，以防止杂菌污染，B正确；

C．题图中选择培养基培养时，因为使用的平板较多，且平板是倒置的，为避免混淆，应在培养皿的皿底做好标记，C错误；

D．在进行酵母菌筛选时用的是固体培养基，而进行扩大培养时为了使培养的菌种充分获取营养，因此需要用液体培养基，D正确。

故选C。