高中生物一、间接计数法课后复习题

【精选】一、间接计数法-3练习

一．单项选择

1．下列有关无菌技术的叙述错误的是（    ）

A．对实验操作空间．操作者的衣着和手进行清洁和消毒

B．用于微生物培养的器皿．接种用具和培养基要进行灭菌

C．高压蒸汽灭菌锅需将冷空气彻底排除后才能将锅密闭

D．使用后的液体培养基在丢弃前要用煮沸消毒法进行处理

2．关于微生物的分离与计数的叙述，错误的是（    ）

A．确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数

B．平板划线时最后一个区域的划线不能与第一区域相连

C．接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单菌落

D．对细菌进行计数，常采用稀释涂布平板法或显微镜直接计数

3．为了筛选能产生阿拉伯胶（一种多糖）降解酶的苗株SM01，应选用以下表中哪种培养基 （    ）

A．甲 B．乙 C．丙 D．丁

4．培养禽流感病毒时，应该选用（    ）

A．固体培养基 B．液体培养基

C．牛肉汤 D．活鸡胚

5．下列有关大肠杆菌纯化培养和计数的叙述，错误的是（    ）

A．培养基的pH应是中性或微碱性

B．测定其数目可采用滤膜法

C．培养过程包括培养基的配制和纯化

D．接种只能采用平板划线法

6．下列关于配制培养基的叙述中正确的是（    ）

A．制作固体培养基一定要加入琼脂

B．加入青霉素的培养基可培养放线菌

C．培养自生固氮菌的培养基中不需添加氮源

D．发酵工程一般用固体培养基

7．在自制酸奶的过程中，除了高温加热以外，其他灭菌方法还有（　　）

A．紫外线照射 B．真空包装 C．用保鲜膜密闭 D．添加防腐剂

8．许多生物学实验十分重视无菌操作，防止杂菌污染。下列操作正确的是（    ）

A．煮沸可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢

B．家庭制作葡萄酒时，要将容器和葡萄进行灭菌

C．加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌

D．用自然生长的离体植物组织进行组织培养时，不需要进行消毒

9．MRSA一般指耐甲氧西林金黄色葡萄球菌，是一种引起皮肤感染的“超级细菌”，临床滥用抗生素的现象，对MRSA的流行起了一定的扩散作用。某研究小组对其进行了实验室培养和计数等操作。下列叙述错误的是（    ）

A．为防止“超级细菌”散布到环境中应对接种时常用的工具进行灼烧灭菌

B．若采用显微镜直接计数培养液中MRSA的数量则计数结果会比活菌实际值偏低

C．可采用稀释涂布平板法进行接种以对固体培养基中的超级细菌进行计数

D．为了方便后续使用，可将超级细菌菌种在4℃条件下用斜面保藏法临时保藏起来

10．下列关于微生物营养的说法，不正确的是（ ）

A．对异养微生物而言，牛肉膏既是碳源，又是氮源

B．生长因子是指氨基酸．维生素．碱基等不可缺少的微量有机物

C．氮源不能为微生物提供能量

D．氮源主要用于合成蛋白质，核酸以及含氮的代谢产物

11．关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，叙述正确的是（    ）

A．操作顺序为计算．称量．溶化．倒平板．灭菌

B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯

C．待培养基冷却至44℃以下时进行倒平板

D．待平板冷却凝固约5～10s后将平板倒过来放置

12．关于微生物培养中的无菌技术，叙述错误的是（    ）

A．实验前需用 75%的酒精棉球擦拭双手

B．配制好的培养基可通过高压蒸汽进行灭菌

C．接种环可以通过酒精灯火焰灼烧进行灭菌

D．使用后的培养基不需要灭菌可直接丢弃

13．许多食品的生产需要借助微生物发酵过程。下列叙述正确的是（    ）

A．利用乳酸菌可将含较多抗生素的牛奶制作成含有抗生素的酸奶

B．在糖源充足时，醋酸菌可以利用乙醇在厌氧条件下生产醋酸

C．果酒发酵产生的酒精为醋酸菌提供碳源和氮源

D．制作泡菜利用的菌种是乳酸菌，其代谢类型为异养厌氧型

14．科研小组欲检测学校直饮水中大肠杆菌是否超标，下列实验操作中不合理的是（    ）

A．应设置未接种的培养基作为对照

B．待检测水样需要经过灭菌操作后再检测

C．用稀释涂布平板法接种并计数大肠杆菌

D．接种后将培养皿倒置并在适宜温度下培养

15．下图表示培养和纯化X细菌的部分操作步骤。有关叙述错误的是（    ）

A．步骤①操作时，倒好平板后，待平板冷却凝固后将其倒置

B．步骤②接种环经灼烧灭菌冷却后，再放入试管中蘸取菌液

C．步骤③经连续划线后，使接种物逐步稀释，分离得到菌落

D．步骤④经适宜条件培养一段时间后得到的都是X细菌菌落

16．微生物的实验室培养中，有关叙述不正确的是（    ）

A．对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法

B．培养细菌时需将培养基的pH调至中性或微碱性

C．不同种类的微生物的碳源可能不同

D．对于需要长期保存的菌种，可以采用低温-4℃保藏的方法

17．关于干热灭菌与高压蒸汽灭菌的操作方法，下列叙述正确的是（    ）

①操作时，均不能将物品摆放太挤

②操作过程中，灭菌物品均不能与筒壁接触

③干热灭菌时，等温度下降到70℃以下后，才能打开箱门

④高压蒸汽灭菌时，打开排气阀使压力表降到零后，才能打开盖

A．①②④ B．②③④ C．①②③ D．①③④

18．培养基．培养皿．接种环．实验操作者的双手．空气．牛奶所采用的灭菌和消毒方法依次是

①化学消毒②灼烧灭菌③干热灭菌④紫外线灭菌⑤高压蒸汽灭菌⑥巴氏消毒法

A．⑤③②①④⑥ B．①②③④⑤⑥ C．⑥②③④①⑤ D．③④②①⑥⑤

参考答案与试题解析

1．【答案】D

【解析】

试题分析：

微生物分离的基本步骤为配制培养基．接种．培养筛选等。无菌培养，是指在灭菌条件下进行的培养试验。首先要对培养材料灭菌，其次对所使用的容器．介质．营养液等都要高压灭菌，在试验全过程中严格检测无菌条件。

解答：

A．为避免杂菌污染，对实验操作空间．操作者的衣着和手进行清洁和消毒，A正确；
B．用于微生物培养的器皿．接种用具和培养基要进行灭菌，一般是进行高压蒸汽灭菌，B正确；
C．高压蒸汽灭菌锅需将冷空气彻底排除后才能将锅密闭，否则冷空气的存在会影响灭菌效果，C正确；
D．使用后的液体培养基在丢弃前要用高压蒸汽灭菌法进行处理，D错误。
故选D。

2．【答案】A

【解析】

试题分析：

常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，后者还可以用于菌落的计数。

解答：

A．需要选择菌落数在30-300的平板进行计数，A错误；
B．使用平板划线法接种时，最后一个区域的划线不能与第一区域相连，B正确；
C．通过接种划线可以获得稀释的单菌落，C正确；
D．可以用稀释涂布平板法和显微计数法对细菌进行计数，二者均有误差，D正确。
故选A。

3．【答案】D

【解析】

试题分析：

从混合样品中获得某种微生物的方法通常有两种：

第一种是可利用该分离对象对某一营养物质有一“嗜好”的原理，专门在培养基中加入或不加该营养物质，从而使它成为一种选择培养基（如在含高浓度NaCl的培养基上分离金黄色葡萄糖球菌，在不含N的培养基上分离圆褐固氮菌）；或根据分离对象对pH．温度和氧气浓度的喜好，改变培养环境的理化性质，使环境条件最适宜该微生物的生存，从而达到分离的目的，将培养基放在高温环境中培养只能得到耐高温的微生物。

第二种办法可利用该分离对象对某种抑菌物质的抗性，在混合培养物中加入该抑制物，经培养后，原来占优势的微生物生长受抑制，而分离对象却可乘机大大增殖，使之在数量上占优势（如在加入青霉素的培养基上分离真核微生物）。

解答：

根据题意可知，需要“筛选能产生阿拉伯胶（一种多糖）降解酶的菌株SM01”，需要以阿拉伯胶作为唯一碳源，因此首先排除丙培养基；甲中牛肉膏也属于碳源，因此排除甲培养基；由于该菌株能够产生阿拉伯胶的降解酶，因此培养基中不能添加阿拉伯胶酶，故排除乙培养基，而丁培养基以阿拉伯胶作为唯一碳源符合要求，即利用培养基丁培养基可以筛选该菌株。综上所述，D正确，A．B．C错误。

故选D。

4．【答案】D

【解析】

试题分析：

病毒是一种个体微小，结构简单，只含一种核酸（DNA或RNA），必须在活细胞内寄生并以复制方式增殖的非细胞型生物。因此病毒离开了宿主细胞，就成了没有任何生命活动．也不能独立自我繁殖的化学物质。它的复制．转录．和转译的能力都是在宿主细胞中进行，当它进入宿主细胞后，它就可以利用细胞中的物质和能量完成生命活动，按照它自己的核酸所包含的遗传信息产生和它一样的新一代病毒。

解答：

AB两种培养基种不含活细胞，病毒不能存活，牛肉汤是给培养基提供氮源的物质，也不含活细胞不能让病毒存活，活鸡胚中具有活细胞，能够给病毒的存活提供条件，ABC错误；D正确。
故选D。

5．【答案】D

【解析】

试题分析：

纯化大肠杆菌

（1）原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个单个菌落就是一个纯化的细菌菌落。

（2）微生物常见的接种的方法

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

解答：

A．培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，A正确；

B．测定其数目可采用滤膜法，B正确；

C．培养过程包括培养基的配制和纯化，C正确；

D．接种微生物常用平板划线法和稀释涂布平板法，其中稀释涂布平板法可用于微生物的计数，因此要对微生物进行计数时应该采用稀释涂布平板法，D错误。

故选D。

6．【答案】C

【解析】

试题分析：

7．【答案】A

【解析】

试题分析：

无菌技术的主要内容：

①对实验操作的空间．操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；

②将用于微生物培养的器皿．接种用具和培养基等器具进行灭菌；

③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；

④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。

解答：

A．紫外线照射可以杀灭真菌，A正确；

B．真空包装可以防止杂菌污染，但是不能杀灭真菌，B错误；

C．用保鲜膜密闭是为了保鲜，可以防止杂菌污染，但是不能杀灭真菌，C错误；

D．添加防腐剂可以防止杂菌污染引起的腐败变质，但是不能杀灭真菌，D错误。

故选A。

8．【答案】A

【解析】

试题分析：

无菌技术的主要内容①对实验操作的空间．操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；②将用于微生物培养的器皿．接种用具和培养基等器具进行灭菌③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。

解答：

A．煮沸属于消毒，可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢，A正确；

B．家庭制作葡萄酒时，要将容器进行消毒或者灭菌，葡萄则需要冲洗即可，B错误；

C．加入培养基中的指示剂和染料也需要灭菌，否则可能会污染培养基，C错误；

D．用自然生长的离体植物组织进行组织培养时，需要进行消毒，D错误。

故选A。

9．【答案】B

【解析】

试题分析：

微生物培养剂分离的关键是无菌操作。常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。无菌操作常用的方法主要有消毒和灭菌。据此分析作答。

解答：

A．为防止“超级细菌”散布到环境中，应对接种时常用的工具进行灼烧灭菌，A正确；

B．若采用显微镜直接计数培养液中MRSA的数量，由于无法区分死菌和活菌，故计数结果会比活菌实际值偏高，B错误；

C．可采用稀释涂布平板法进行接种以对固体培养基中的超级细菌进行计数，C正确；

D．为了方便后续使用，可将超级细菌菌种在4℃条件下用斜面保藏法临时保藏起来，D正确。

故选B。
 

10．【答案】C

【解析】

试题分析：

解答：

同一种物质可以即作碳源又作氮源，如牛肉膏，A正确；
生长因子是指氨基酸．维生素．碱基等不可缺少的微量有机物，B正确；
自然界中一些微生物如硝化细菌，可以通过氨氧化释放的能量获得生长所需能量，C错误；
蛋白质．核酸以及含氮的代谢产物等都含有氮元素，所以氮源主要用于合成这些含氮的化合物，D正确。

11．【答案】B

【解析】

试题分析：

培养基的配制流程：计算．称量．溶化．灭菌（高压蒸汽灭菌）．倒平板（无菌操作）。

解答：

A．操作顺序为计算．称量．溶化．灭菌．倒平板，A错误；

B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯，因为牛肉膏会黏在称量纸上，B正确；

C．待培养基冷却至50℃以下时进行倒平板，C错误；

D．待平板冷却凝固约5～10min后将平板倒过来放置，D错误。

故选B。

12．【答案】D

【解析】

试题分析：

无菌技术的主要内容：
①对实验操作的空间．操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；
②将用于微生物培养的器皿．接种用具和培养基等器具进行灭菌；
③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；
④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。

解答：

A．实验前需用75%的酒精棉球擦拭双手，进行消毒，A正确；
B．配制好的培养基可通过高压蒸汽进行灭菌，B正确；
C．接种环可以通过酒精灯火焰灼烧进行灭菌，C正确；
D．为防止污染环境，使用后的培养基需要灭菌，才能丢弃到指定的地方，D错误。
故选D。

13．【答案】D

【解析】

试题分析：

制作果酒．果醋．腐乳．泡菜等都需要借助微生物的发酵过程。发酵是利用微生物，在适宜的条件下，将原料经过特定的代谢途径转化为人类所需要的产物的过程。

解答：

A．乳酸菌对抗生素敏感，不能利用乳酸菌将含较多抗生素的牛奶制作成含有抗生素的酸奶，A错误；

B．当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，B错误；

C．酒精不含氮元素，不能为醋酸菌提供氮源，C错误；

D．制作泡菜利用的菌种为乳酸菌，其代谢类型为异养厌氧型，D正确。

故选D。

14．【答案】B

【解析】

试题分析：

无菌技术的主要内容：①对实验操作的空间．操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；②将用于微生物培养的器皿．接种用具和培养基等器具进行灭菌；③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。

解答：

A．应设置未接种的培养基，作为实验的对照，以检测培养基灭菌是否彻底，A正确；
B．要检测水体中大肠杆菌是否超标，待检测水样不能进行灭菌处理，B错误；
C．可用稀释涂布平板法接种计数大肠杆菌的活菌数，C正确；
D．平板冷凝后皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，若将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染，D正确。
故选B。

15．【答案】D

【解析】

试题分析：

微生物的研究通常包含微生物的获得．分离纯化．培养以及保存等。单菌落分离法包含划线分离法和涂布分离法，常用于分离获得单菌落。划线分离法是用接种环以无菌操作沾取少许待分离的材料，在无菌平板表面进行平行划线．扇形划线或其他形式的连续划线，微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少，并逐步分散开来。

解答：

A．步骤①为倒平板，倒好平板后，待平板冷却凝固后将其倒置，A正确；
B．步骤②接种环经灼烧灭菌冷却后，再放入试管中蘸取菌液，B正确；
C．步骤③为划线分离，经连续划线后，使接种物逐步稀释，分离得到菌落，C正确；
D．步骤④经适宜条件培养一段时间后得到的不一定都是X细菌菌落，也有可能有其它的细菌，D错误。
故选D。

16．【答案】D

【解析】

试题分析：

菌种临时保藏为4℃斜面培养基保存，长期保存可-20℃甘油管藏。

解答：

A．对于频繁使用的菌种，长期保存不适合取用，故用临时保藏的方法，A正确；

B．培养细菌时需将培养基的pH调至中性或微碱性，B正确；

C．不同种类的微生物的碳源可能不同，如自养生物一般利用无机碳源，C正确；

D．对于需要长期保存的菌种，可以采用低温-20℃保藏的方法，D错误。

故选D。

17．【答案】C

【解析】

试题分析：

18．【答案】A

【解析】

试题分析：

无菌操作技术有消毒和灭菌；消毒有煮沸消毒法．巴氏消毒法和化学药剂消毒法；灭菌有灼烧灭菌法（适用于接种工具）．干热灭菌法（适用于玻璃器皿和金属工具）．高压蒸汽灭菌法（适用于培养基及容器的灭菌）。

解答：

①实验操作者的双手用化学药剂进行消毒，用酒精擦拭双手；

②接种环可用灼烧灭菌达到迅速彻底的灭菌效果；

③培养皿能耐高温，需用干热灭菌；

④空气可用紫外线消毒；

⑤培养基用高压蒸汽灭菌；

⑥巴氏消毒法用于牛奶及其制品的消毒，不会破坏其营养成分；综合以上分析，正确的顺序为⑤③②①④⑥，A正确。