生物选修3一、动物细胞培养经历原代培养和传代培养达标测试

【基础】一、动物细胞培养经历原代培养和传代培养-2练习

一．单项选择

1．人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。如图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，下列有关叙述正确的是（    ）

A．①过程常用灭活的病毒，不可用聚乙二醇

B．②过程筛选出的杂交瘤细胞都能产生抗HCG抗体

C．③过程利用的原理是抗原和抗体的特异性结合

D．④过程需要添加抗生素等物质，以防止病毒污染

2．抗体导向酶-前药技术能特异性杀死癌细胞，减少化疗药物副作用。丝裂霉素（MMC）前药几乎无毒性，经碱性磷酸酶（AP）催化后，活化的MMC对细胞有毒性。该技术核心步骤是将单克隆抗体与AP交联成抗体导向酶后注入癌症患者体内。下列叙述正确的是（    ）

A．应先向患者的体内注射MMC前药，再向患者注射抗体导向酶

B．应将MMC前药和抗体导向酶充分混合后，再注射到患者体内

C．相比MMC前药浓度过大，抗体导向酶浓度过大的副作用更大

D．抗体导向酶的抗体对抗原识别的特异性与该技术的副作用无关

3．中国科学院孙强团队对一流产雌性猕猴进行克隆，成功获得 “中中”和“华华”两姐妹，突破了现有技术无法体细胞克隆非人灵长类动物的世界难题，为建立人类疾病的动物模型，研究疾病机理，研发诊治药物带来光明前景。下图为“中中”和“华华”培育的流程，相关叙述正确的是（    ）

A．过程①将成纤维细胞注射在放射冠和透明带间，可降低对卵细胞的损伤

B．过程②在培养基中加入动物血清，可为激发成纤维细胞核的全能性提供物质条件

C．过程③进行同步发情处理，可降低代孕母猴对“中中”．“华华”的免疫排斥反应

D．与模型小鼠相比，模型猴更适合于研究人类疾病的发病机理．研发诊治药物

4．利用杂交瘤技术可以制备单克隆抗体。下列叙述错误的是（    ）

A．经灭活的仙台病毒诱导融合并筛选得到的杂交瘤细胞具有二倍体核型

B．可将阳性杂交瘤细胞注射到小鼠体内获得单克隆抗体

C．单克隆抗体制备过程中进行多次抗体检测，有利于更好地得到单克隆细胞

D．可以利用单克隆抗体研究抗原蛋白的结构和细胞学分布

5．为研究培养基成分对马铃薯叶肉原生质体培养的影响，科学家配制了如下表所示的2种培养基，开展了有关实验，其他培养条件相同且适宜，实验结果如下图所示，下列有关叙述错误的是(　　)

注：“细胞出芽”表明愈伤组织中部分细胞再分化。

A．本实验的材料可取自马铃薯试管苗的幼嫩叶片

B．培养基中还需要添加适当比例的生长素和细胞分裂素

C．制备原生质体前需用湿热灭菌法对酶解液进行处理

D．添加纤维二糖的作用可能是促进细胞壁再生和细胞持续分裂生长

6．如图表示仙台病毒诱导动物细胞融合的部分过程，下列相关叙述正确的是（    ）

A．细胞A和细胞B必须为同种细胞才能融合

B．细胞C同时有细胞A和细胞B的遗传物质

C．该融合过程体现了细胞膜具有选择透过性

D．植物细胞的融合过程与动物细胞完全相同

7．下列有关单克隆抗体制备中杂交瘤细胞制备的叙述，正确的是（    ）

A．通常用灭活的病毒诱导两个细胞的融合

B．可利用细胞中染色体的数目筛选出杂交瘤细胞

C．制备原理是利用了细胞膜的选择透过性

D．用选择培养基筛选得到的杂交瘤细胞可直接用于生产单克隆抗体

8．如图是“番茄—马铃薯”杂种植株的培育过程，其中①～⑤表示过程，字母表示细胞．组织或植株。下列相关叙述正确的是(　　)

A．过程①表示在低渗溶液中用酶解法处理植物细胞获得原生质体

B．过程②诱导原生质体融合，主要依据细胞膜具有选择透过性的原理

C．可以根据质壁分离现象鉴别杂种细胞的细胞壁是否再生

D．植物有性杂交和体细胞杂交都能克服远缘杂交不亲和的障碍

9．为了解决杂交瘤细胞在传代培养中出现来自B淋巴细胞的染色体丢失的问题，研究者增加了一个步骤，除了抗原刺激之外，还用EBV（一种病毒颗粒）感染动物B淋巴细胞，并使之成为“染色体核型稳定”的细胞株。上述细胞株能够在HAT培养基中存活，但对乌本苷（Oua）敏感。如图为该实验操作示意图。下列叙述错误的是（　　）

A．骨髓瘤细胞无法在HAT选择培养基中存活

B．杂交瘤细胞染色体丢失可能导致抗体产生能力下降

C．B淋巴细胞来源于抗原刺激后动物的淋巴结和脾脏等

D．该实验最终目的是筛选出能产生抗EBV抗体的杂交瘤细胞

10．如图为烟草植物组织培养过程的流程图。下列有关叙述正确的是(　　)

A．对过程①获取的根组织块应做较彻底的灭菌处理

B．过程②应根据要求使用适宜的培养基，在避光的环境中进行

C．过程③发生脱分化，其实质是基因的选择性表达

D．用人工种皮包裹X细胞可获得烟草人工种子

11．为研究治疗性克隆技术能否用于帕金森病的治疗，科研人员利用人帕金森病模型鼠进行如图实验，相关叙述错误的是(    )

A．过程①中选择M II中期的卵母细胞有利于细胞核全能性恢复

B．过程②重组细胞培养经历了卵裂．桑椹胚．原肠胚和囊胚等过程

C．过程③的关键是利用特定条件诱导胚胎干细胞相关基因表达

D．过程④对受体小鼠无需注射免疫抑制剂以抑制其细胞免疫功能

12．对RNA病毒进行核酸检测需要通过PCR技术进行扩增，其周期长．专业技术和设备要求高，很多科研单位开发了能快速进行病毒检测的免疫试剂盒。下图是某科研人员提出的制备检测病毒的单克隆抗体的技术路线。下列说法错误的是（    ）

A．RNA病毒的核酸检测需要用到逆转录酶

B．给动物注射的抗原A是病毒的RNA

C．图中a表示对杂交瘤细胞的克隆化培养

D．可用聚乙二醇作为细胞融合的促融剂

13．下列关于现代生物技术的叙述，正确的是（    ）

A．动物细胞培养时用盐酸解离组织使之分离成单个细胞

B．单克隆抗体的制备需用到细胞融合技术和克隆培养技术

C．体外受精得到的受精卵和分割的胚胎均可以直接移植给受体

D．含目的基因的胚胎成纤维细胞，经胚胎体外培养．胚胎移植可获得转基因动物

14．P抗体能与癌细胞膜表面相应的受体特异性结合，因而具有治疗癌症的作用。下图是生产鼠源性单克隆P抗体的流程图，相关叙述错误的是（    ）

A．小鼠经多次P抗原免疫后，从脾脏中获取B淋巴细胞

B．d过程可用电激．聚乙二醇或灭活病毒促进细胞融合

C．筛选出的D细胞既能迅速大量增殖又能产生多种抗体

D．单克隆P抗体具有纯度高，特异性强的优点

15．下列关于动物细胞培养的叙述，错误的是（    ）

A．若直接取组织块进行组织培养，仅少量细胞可以生存和繁殖，为了获得大量生长良好的细胞，须把组织细胞分散开

B．连续细胞系中的细胞都丧失了接触抑制

C．细胞株一般具有恒定的染色体组型．病毒敏感性和同工酶类型等，基因型一致

D．动物细胞培养需要用到CO2培养箱，目的之一是使培养基中的pH处于平衡状态

16．某同学在学习“细胞工程”时，列表比较了动植物细胞工程的有关内容，你认为有几处不正确（    ）

A．0 B．1 C．2 D．3

17．科学家培育克隆羊时，使用了三种细胞核的供体细胞，分别将这些细胞核移入去核卵细胞的细胞质中，形成重组细胞，发育成重组胚胎，这些重组胚胎的发育情况如下：

据此分析错误的是（    ）

A．早期胚胎细胞作为细胞核的供体细胞妊娠成功率最高

B．克隆羊的遗传信息与供核细胞完全相同

C．体细胞核移植难度高于胚胎细胞核移植

D．重组胚胎的性别与去核卵细胞的细胞质无关

18．已知骨髓瘤细胞由于缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转移酶（HGPRT-），在HAT筛选培养液中不能正常合成DNA，无法生长，效应B细胞有次黄嘌呤磷酸核糖转移酶（HGPRT-），但不能无限增殖。如图是单克隆抗体制备过程示意图，下列相关叙述错误的是（    ）

A．过程①中注射的抗原能与产生的单克隆抗体特异结合

B．过程②得到的三种类型的细胞不能在HAT培养液中增殖

C．过程③采用抗原—抗体反应进行特定杂交瘤细胞的筛选

D．过程④获得的全部杂交瘤细胞都只能产生同一种抗体

参考答案与试题解析

1．【答案】C

【解析】

试题分析：

分析题图：给小鼠注射HCG，从小鼠的脾脏中获取B淋巴细胞；①过程将该B淋巴细胞与小鼠的骨髓瘤细胞融合；②过程为杂交瘤细胞的筛选与培养；③过程为专一抗体检验并筛选出能产生抗HCG抗体的杂交瘤细胞；④过程为体外培养。

解答：

A．①过程为诱导动物细胞融合，常用的诱导因素有灭活的病毒．聚乙二醇．电激等，A错误；

B．②过程为用特定的选择性培养基筛选杂交瘤细胞，在筛选出的杂交瘤细胞中，有的能产生抗HCG抗体，有的不能产生抗HCG抗体，B错误；

C．③过程是对筛选出的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，进而筛选出能产生抗HCG抗体的杂交瘤细胞，此过程利用的原理是抗原和抗体的特异性结合，C正确；

D．④过程是借助动物细胞培养技术，将能产生抗HCG抗体的杂交瘤细胞在体外进行大规模培养，在培养过程中需要添加抗生素等物质，以防止杂菌污染，D错误。

故选C。

2．【答案】A

【解析】

试题分析：

分析题文描述可知：利用单克隆抗体的导向作用，将单克隆抗体与碱性磷酸酶（AP）交联成的抗体导向酶定向带到癌细胞所在位置，经AP催化后，癌细胞所在位置的几乎无毒性的丝裂霉素（MMC）前药被活化，对细胞产生毒性，进而在原位杀死癌细胞。

解答：

AB．由题意可知：应先向患者的体内注射MMC前药，再向患者注射抗体导向酶，在导向酶的催化下，癌细胞所在位置的MMC前药因被活化而具有毒性，进而在原位杀死癌细胞，A正确，B错误；

C．抗体导向酶浓度过大，可以使更多的癌细胞所在位置的MMC前药被活化，进而对癌细胞产生更强的杀伤作用，因此相比MMC前药浓度过大，抗体导向酶浓度过大，不一定导致副作用更大，C错误；

D．抗体导向酶的抗体对抗原识别的特异性与该技术的副作用有关，D错误；

故选A。

3．【答案】D

【解析】

试题分析：

分析图：图示过程为体细胞克隆过程，对处于减数第二次分裂中期的卵母细胞去核，①是取体细胞进行细胞核移植；②是融合后的细胞激活后培养到早期胚胎，再进行③胚胎移植，最终得到克隆猴。

解答：

A．过程①将成纤维细胞注射到去核的卵母细胞透明带间中，可降低对卵细胞的损伤，A错误；
B．在培养细胞时需在培养基中加入一定量的动物血清的作用是模拟内环境和补充未知的缺少的营养物质，激发成纤维细胞核的全能性的是卵细胞的细胞质中的物质，B错误；
C．过程③进行同步发情处理，是为了为胚胎移入受体提供相同的生理环境，C错误；
D．猴子与人类的亲缘关系比小鼠近，与模型小鼠相比，模型猴更适合于研究人类疾病的发病机理．研发诊治药物，D正确。
故选D。

4．【答案】A

【解析】

试题分析：

将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中产生的B淋巴细胞融合，再用特定的选择性培养基进行筛选。在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂种细胞才能生长。对上述经选择性培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。最后将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖，从细胞培养液或小鼠腹水中就可以提取出大量的单克隆抗体。单克隆抗体的作用：①作为诊断试剂：单克隆抗体最广泛的用途是用作体外诊断试剂；由于单克隆抗体纯度高．特异性强，所以能准确识别各种抗原物质的细微差异，并跟一定抗原发生特异性结合，因此单克隆抗体在诊断的应用上具有准确．高效．简易．快速的优点。②用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗癌症治疗，把抗癌细胞的单克隆抗体跟放射性同位素．化学药物或细胞毒素相结合，制成生物导弹，注入体内，借助单克隆抗体的导向作用，能将药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞。这样既不损伤正常细胞，又减少了用药剂量。

解答：

A．经灭活的仙台病毒诱导融合并筛选得到的杂交瘤细胞具有四倍体核型，A错误；

B．可将单克隆阳性杂交瘤细胞注射到小鼠体内获得单克隆抗体，B正确；

C．单克隆抗体制备过程中进行多次抗体检测，筛选出足够数量的杂交瘤细胞，有利于更好地得到单克隆细胞，C正确；

D．单克隆抗体可以作为诊断试剂．用于治疗疾病和运载药物，可以利用单克隆抗体研究抗原蛋白的结构和细胞学分布，D正确。

故选A。

5．【答案】C

【解析】：选C　本实验的材料可取自马铃薯试管苗的幼嫩叶片；在植物组织培养过程需要加入植物激素，生长素和细胞分裂素用量的比值低时，有利于芽的分化，反之则利于根的分化；用湿热灭菌法对酶解液进行处理，会导致酶丧失活性，使实验失败；据图分析可知，如果在培养基中加入纤维二糖后细胞的出芽率明显降低，细胞的分裂率明显升高，所以添加纤维二糖的作用可能是促进细胞壁再生和细胞持续分裂生长。

6．【答案】B

【解析】

试题分析：

细胞工程是生物工程的一个重要方面。总的来说，它是应用细胞生物学和分子生物学的理论和方法，按照人们的设计蓝图，进行在细胞水平上的遗传操作及进行大规模的细胞和组织培养。当前细胞工程所涉及的主要技术领域有细胞培养．细胞融合．细胞拆合．染色体操作及基因转移等方面。通过细胞工程可以生产有用的生物产品或培养有价值的植株，并可以产生新的物种或品系。

解答：

A．不同种的细胞也能融合，如人鼠细胞融合，A错误；

B．如图所示，A．B融合成一个细胞，细胞C同时有细胞A和细胞B的遗传物质，B正确；

C．该融合过程体现了细胞膜具有流动性，C错误；

D．植物细胞的融合通常要先去掉细胞壁，过程与动物细胞不完全相同，D错误。

故选B。

7．【答案】A

【解析】

试题分析：

单克隆抗体的制备过程：

（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。

（2）获得杂交瘤细胞。

①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；

②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。

（3）克隆化培养和抗体检测

（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。

（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。

解答：

A．通常用灭活的病毒诱导两个细胞的融合，A正确；

B．因为观察细胞染色体需要对细胞解离等处理，细胞已死亡，所以不能通过观察染色体的数目筛选杂交瘤细胞，B错误；

C．利用了细胞膜的流动性和细胞增殖等原理，C错误；

D．用选择培养基筛选得到的杂交瘤细胞需要再专一抗体检测和克隆化培养后才能用于生产单克隆抗体，D错误。

故选A。

8．【答案】C

【解析】：选C　获得植物的原生质体，操作一般在等渗溶液中进行，若在低渗溶液中进行，则去掉细胞壁的原生质体会因吸水而涨破；过程②诱导原生质体融合，主要依据细胞膜具有流动性的原理；可根据质壁分离现象鉴别杂种细胞的细胞壁是否再生；植物有性杂交不能克服远缘杂交不亲和的障碍。

9．【答案】D

【解析】

试题分析：

题图分析：图示为单克隆抗体制备过程，除了抗原刺激之外，还用EBV（一种病毒颗粒）感染动物B淋巴细胞，该细胞株能够在HAT培养基中存活，但对乌本苷（Oua）敏感。

解答：

A．据图可知，骨髓瘤细胞在HAT选择培养基中死亡，A正确；

B．抗体是由浆细胞分泌的，杂交瘤细胞可能丢失来自（效应）B细胞的染色体，故可能导致抗体产生能力下降，B正确；

C．B淋巴细胞在骨髓中发育成熟，可分布于淋巴结和脾脏等处，故B淋巴细胞可来源于抗原刺激后动物的淋巴结和脾脏等处，C正确；

D．该实验最终目的是获得能产生可与抗原特异性结合的单克隆抗体，D错误。

故选D。

10．【答案】B

【解析】：选B　对过程①获取的根组织块应进行消毒处理，如果采用灭菌技术，会使根组织块失去活力，无法进行组织培养；过程②是脱分化形成愈伤组织的过程，需要在避光的环境中进行；过程③发生再分化，其实质是基因的选择性表达；用人工种皮包裹胚状体可获得烟草人工种子。

11．【答案】B

【解析】

试题分析：

动物胚胎发育的基本过程：

（1）受精场所是母体的输卵管。

（2）卵裂期：细胞有丝分裂，细胞数量不断增加，但胚胎的总体体积并不增加，或略有减小。

（3）桑椹胚：胚胎细胞数目达到32个左右时，胚胎形成致密的细胞团，形似桑椹。是全能细胞。

（4）囊胚：细胞开始出现分化（该时期细胞的全能性仍比较高）。聚集在胚胎一端个体较大的细胞称为内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织。中间的空腔称为囊胚腔。

（5）原肠胚：有了三胚层的分化，具有囊胚腔和原肠腔。

解答：

A．卵母细胞中含激发细胞核全能性的物质，核移植过程中选择M II中期的卵母细胞有利于细胞核全能性恢复，A正确；

B．过程②重组细胞培养经历了卵裂．桑椹胚．囊胚和原肠胚等过程，B错误；

C．过程③是诱导分化过程，其关键是利用特定条件诱导胚胎干细胞相关基因表达，C正确；

D．过程④移植的神经元细胞是取自该小鼠自身细胞诱导分化而来，不会发生免疫排斥反应，D正确。

故选B。

12．【答案】B

【解析】

试题分析：

诱导细胞融合的方法有三种：生物方法(病毒)．化学方法(聚乙二醇PEG)．物理方法(离心，震动，电刺激)。某些病毒如：仙台病毒．副流感病毒和新城鸡瘟病毒。化学和物理方法可造成膜脂分子排列的改变，去掉作用因素之后，质膜恢复原有的有序结构，在恢复过程中便可诱导相接触的细胞发生融合。

解答：

A．核酸检测用到的探针通常为双链DNA，而RNA病毒的核酸为单链，因此检测时需要用到逆转录酶合成病毒相应的DNA进行检测，A正确；

B．给动物注射的抗原A是病毒的蛋白质，B错误；

C．图中a表示对杂交瘤细胞的克隆化培养从而获得较多的待检测抗体，便于检测，C正确；

D．动物细胞促融也可用聚乙二醇来实现，D正确。

故选B。

13．【答案】B

【解析】

试题分析：

14．【答案】C

【解析】

试题分析：

单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一．仅针对某一特定抗原的抗体。通常采用杂交瘤技术来制备，杂交瘤抗体技术是在细胞融合技术的基础上，将具有分泌特异性抗体能力的效应B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为杂交瘤细胞，杂交瘤细胞既能产生抗体，又能无限增殖。用具备这种特性的单个杂交瘤细胞培养成细胞群，可制备针对一种抗原的特异性抗体即单克隆抗体。

题图分析，A表示经过免疫的B淋巴细胞；B表示骨髓瘤细胞；C为杂交瘤细胞；D为经过筛选获得的能产生所需特异抗体的杂交瘤细胞；d为利用电激．聚乙二醇或灭活病毒促融的过程。

解答：

A．小鼠经多次P抗原免疫后，能从脾脏中获取产生抗体的B淋巴细胞，A正确；

B．由分析可知，d过程可用电激．聚乙二醇或灭活病毒促进细胞融合，B正确；

C．筛选出的D细胞既能迅速大量增殖又能产生单一的特异性抗体，C错误；

D．单克隆P抗体具有纯度高．特异性强．灵敏度高并可在体外条件下大量增殖，D正确。

故选C。

15．【答案】B

【解析】

试题分析：

16．【答案】D

【解析】①技术手段：植物细胞工程的技术手段包括植物组织培养和植物体细胞杂交，动物细胞工程的技术包括动物细胞培养．动物细胞融合．单克隆抗体制备等，①正确；
②特殊处理：植物体细胞杂交时，需要用酶解法（纤维素酶和果胶酶）去除细胞壁，动物细胞培养时需要用胰蛋白酶处理制备细胞悬浮液，②错误；
③融合方法：诱导植物原生质体融合的方法包括物理方法和化学方法，而诱导动物细胞融合的方法还包括生物方法，③错误；
④典型应用：植物组织培养技术可用于制备人工种子，植物体细胞杂交技术可用于种间杂交等；而动物细胞融合和动物细胞培养技术可用于制备单克隆抗体，④正确；
⑤培养液区别：植物组织培养过程中利用蔗糖，⑤错误。
D正确，ABC错误，

故选D。

17．【答案】B

【解析】

试题分析：

克隆羊的培育体现了动物细胞核的全能性，分析表格数据可知：早期胚胎细胞作为细胞核的供体细胞妊娠成功率最高，体细胞核移植难度高于胚胎细胞核移植。

解答：

A．分析表格数据可知，早期胚胎细胞作为细胞核的供体细胞妊娠成功率最高，A正确；

B．克隆羊的培育用到了核移植．胚胎移植技术，克隆羊的细胞核遗传信息来自细胞核的供体，细胞质的遗传信息来自卵细胞，B错误；

C．对比表格中的数据可知：体细胞核移植难度高于胚胎细胞核移植，C正确；

D．性别由细胞核中的染色体决定，与去核卵细胞的细胞质无关，D正确。

故选B。

18．【答案】B

【解析】

试题分析：

分析题图：图示表示单克隆抗体制备过程示意图，其中①表示给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应（图中A．B．C为三种浆细胞），②表示浆细胞和骨髓瘤细胞（D细胞）融合的过程，③表示筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，④表示克隆化培养过程。

解答：

A．过程①中注射的抗原能与产生的单克隆抗体特异结合，A正确；
B．过程②得到的三种类型的细胞都是杂交瘤细胞，都能在HAT培养液中增殖，B错误；
C．过程③采用抗原-抗体反应进行特定杂交瘤细胞的筛选，C正确；
D．过程④为克隆化培养，该过程获得的全部杂交瘤细胞都只能产生同一种抗体，D正确。
故选B。