2023新教材高考生物二轮专题复习 选择性必修3 生物技术与工程

这是一份2023新教材高考生物二轮专题复习 选择性必修3 生物技术与工程，共20页。试卷主要包含了传统发酵技术的应用，微生物的培养技术及应用，细胞工程，基因工程，生物技术的安全性与伦理问题等内容，欢迎下载使用。
提示：如果在涉及某个知识点时，你不记得，或不能确定，或判断错误，请一定要通过查阅、梳理课本相应内容，自己得出答案或进行纠错。
一、传统发酵技术的应用
1．酒精发酵时一般将温度控制在 18～30℃。( )
2．葡萄酒酿造过程中需加入红色素，使葡萄酒呈深红色。( )
3．在葡萄酒的自然发酵过程中，起主要作用的是附着在葡萄皮上的野生型酵母菌。( )
4．当缺少糖源，但氧气充足时，醋酸菌将乙醛变为乙醇，再将乙醇变为乙酸。( )
5．参与腐乳制作的微生物只有毛霉，毛霉是一种丝状真菌。 ( )
6．制作泡菜时清水和食盐配制质量分数为5%～20%盐水，煮沸后立即使用。( )
7．在发酵工程中，可通过诱变育种、基因工程育种获得菌种。( )
8．发酵罐中微生物的生长繁殖、代谢物的形成速度都与搅拌速度有关。( )
9．单细胞蛋白是从微生物细胞中提取出来的。( )
二、微生物的培养技术及应用
1．获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染。( )
2．培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时需将培养基的pH调至中性或微碱性。( )
3．倒平板操作需要在酒精灯火焰旁。( )
4．平板划线时，接种环放在火焰上灼烧冷却后再蘸取菌液，操作要在火焰旁进行。( )
5．在稀释度足够高的菌液里，微生物可以被分散成单个细胞，从而能在液体培养基中形成单个的菌落。( )
6．稀释涂布平板法统计的菌落数往往比实际数目高。( )
7．测定土壤中细菌、真菌的数量选用的稀释范围相同。( )
8．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养某种细菌后，如果pH升高，指示剂将变红。( )
三、细胞工程
1．植物分生区附近(如茎尖)的病毒极少，甚至无病毒。( )
2．动物体细胞核移植过程中，从屠宰场收集牛卵巢，采集卵母细胞，可直接用于实验。( )
3．核移植方法生产的克隆动物，是对体细胞供体动物进行的100%复制。( )
4．目前核移植技术中普遍使用的去核方法是显微操作去核法。( )
5．与植物体细胞杂交技术相比，动物细胞融合特有的诱导因素为灭活的病毒。( )
6．体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体。( )
7．对供体注射促性腺激素，使其超数排卵。( )
8．细胞核移植主要在同种动物、同种组织的细胞之间进行。( )
9．初级卵母细胞需经过减数分裂才能变成成熟的卵子，减数分裂Ⅱ是在精子和卵子结合的过程中完成。( )
10．卵裂期细胞分裂方式为有丝分裂，细胞数量不断增加，胚胎体积变大。( )
11．囊胚期形成的内细胞团将来发育为胎膜和胎盘，滋养层将来发育为胎儿的各种组织。( )
12．取滋养层细胞进行DNA分析、性别鉴定。( )
13．对囊胚阶段的胚胎进行分割时应将内细胞团均等分割，否则影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。( )
14．ES细胞在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显。( )
四、基因工程
1．限制酶主要从原核生物中分离纯化出来，限制酶只能识别由6个核苷酸组成的序列。( )
2．目的基因指编码蛋白质的基因。( )
3．PCR 是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。( )
4．标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。( )
5．农杆菌可以感染双子叶和单子叶植物，对大多数裸子叶植物没有感染能力。( )
6．花粉管通道法是我国科学家独创的一种将目的基因导入植物细胞的方法。( )
7．原核生物具有繁殖快，多为单细胞、遗传物质相对较少等特点，因此，在早期的基因工程中常被用来作为受体细胞。( )
8．利用乳腺生物反应器能够获得一些重要的医药产品，如人的血清白蛋白，这是因为将人的血清白蛋白基因导入了动物的乳腺细胞中。( )
9．由大肠杆菌工程菌获得人的干扰素后可直接应用。( )
10．在溶有DNA的NaCl溶液中，加入二苯胺试剂即呈蓝色。( )
11．DNA不溶于酒精，但某些蛋白质溶于酒精。( )
12．进行DNA片段的扩增及电泳鉴定实验所需的缓冲液和酶应分装成小份，并在20 ℃储存。( )
13．在凝胶中DNA分子的迁移速率只与DNA分子的大小相关。( )
五、生物技术的安全性与伦理问题
1．克隆人实验可能会存在流产率高、胎儿畸形率高等问题。( )
2．“设计试管婴儿”与“试管婴儿”技术没有什么不同。( )
3．生物武器可通过吸入、误食、接触带菌物品，被带菌昆虫叮咬等侵入人体。( )
第2关：对接教材——填一填 说明：请你将以下表述补充完整，如果在涉及某个知识点时，你不记得，或不能确定，请一定要通过查阅、梳理课本相应内容，自己得出答案。
一、发酵工程
1．(选择性必修3 P6“探究·实践”)为什么泡菜坛只能装八成满？
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2．(选择性必修3 P6“探究·实践”拓展)乳酸菌是厌氧菌，发酵时需控制严格的无氧环境。尝试说出泡菜制作过程中制造无氧环境的措施。
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3．(选择性必修3 P6～7文字改编)制葡萄酒时，为什么要将温度控制在18～30 ℃？制葡萄醋时，为什么要将温度控制在30～35 ℃？
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4．(选择性必修3 P10“相关信息”)牛肉膏和蛋白胨来源于动物原料，含有什么营养物质？
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5．(选择性必修3 P12～13“探究·实践”)
(1)在未接种的培养基表面是否有菌落生长？如果有，说明什么？
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(2)在接种酵母菌的培养基上，如果观察到了不同形态的菌落，可能是什么原因引起的？
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6．(选择性必修3 P12“探究·实践”改编)为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？平板冷凝后，为什么要将平板倒置？
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7．(选择性必修3 P13“图示拓展”)平板划线时最后一次划线为何不能与第一次划线相连？
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8．(选择性必修3 P16“思考·讨论”)
(1)如果让你配制一种培养基，将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来，培养基的配方该如何设计？
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(2)该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点？
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9．(选择性必修3 P20“拓展应用2”拓展)在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌的原因是什么？
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10．(选择性必修3 P23“思考·讨论”节选)
(1)微生物菌种资源丰富，选择发酵工程用的菌种时需要考虑哪些因素？
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(2)怎样对发酵条件进行调控以满足微生物的生长需要？
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二、细胞工程
1．(选择性必修3 P38“拓展应用”)“番茄—马铃薯”没有如科学家所想象的那样，地上结番茄，地下长马铃薯，这是为什么？
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2．(选择性必修3 P38“概念检测”)科学家在制备原生质体时，有时使用蜗牛消化道提取液来降解植物细胞的细胞壁。据此分析，蜗牛消化道提取液中可能含有什么成分？
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3．(选择性必修3 P39“正文”拓展)从所需条件上来看，快速繁殖与传统育种方法相比的优点有哪些？
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4．(教材 P44“正文”拓展)动物细胞培养需要控制什么样的气体环境？各自起什么作用？
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5．(选择性必修3 P45“图示拓展”)动物细胞培养过程中，用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理组织块，使组织分散成单个细胞的目的是什么？
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6．(选择性必修3 P48“相关信息”)灭活病毒诱导细胞融合的原理是什么？
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7．(选择性必修3 P49“图2－16”)制备单克隆抗体时，不直接用经过免疫的B淋巴细胞来获得单克隆抗体的原因是什么？
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8．(选择性必修3 P53“图2－18”拓展)动物体细胞核移植属于有性生殖还是无性生殖？并分析原因。
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9．(选择性必修3 P57“正文”)防止多精入卵的意义是什么？
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10．(选择性必修3 P58“相关信息”改编)在实际胚胎工程操作中，常以观察到两个极体或者雌、雄原核作为受精的标志，但观察不到3个极体，其原因是什么？
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11．(选择性必修3 P58“正文”拓展)卵裂期胚胎发育过程中物质和体积有何变化？
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12．(选择性必修3 P61“图2－23”)胚胎移植时怎样才能做到超数排卵？
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13．(选择性必修3 P61“图2－23”拓展)胚胎移植时怎样才能使胚胎在移植前后所处的生理环境保持一致？
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三、基因工程
1．(选择性必修3 P71“旁栏思考”)根据所掌握的知识，推测限制酶存在于原核生物中的主要作用是什么？
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2．(选择性必修3教材P71“旁栏思考”拓展)限制酶来源于原核生物，为什么不能切割自己的DNA分子？
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3．(选择性必修3教材P72“旁栏思考”)DNA连接酶和DNA聚合酶的作用相同吗？试简要说明。
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4．(选择性必修3 P72“正文”拓展)天然的DNA分子是否可以直接用作基因工程载体？为什么？
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5．(选择性必修3 P74～75“探究·实践”拓展)DNA的粗提取实验中过滤能否用滤纸代替纱布？
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6．(选择性必修3 P77“正文”)利用PCR扩增目的基因时，为什么要用两种不同的引物？
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7．(选择性必修3 P80“正文”)为什么切割含有目的基因的DNA片段和载体要选用同一种限制酶？是否只能用同一种限制酶？
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8．(选择性必修3 P81“资料卡”)在用土壤农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞的过程中，为什么一定要将目的基因插入到Ti质粒的TDNA上？
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9．(选择性必修3 P79“正文”拓展)简述新型冠状病毒核酸检测试剂盒的检测原理。
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10．(选择性必修3 P84～85“探究·实践”)DNA的电泳鉴定实验中，影响DNA分子迁移速率的因素有哪些？
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11．(选择性必修3 P88“图示拓展”)基因工程培育的抗虫、抗病作物有哪些优点？
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12．(选择性必修3 P90“正文”)利用乳腺生物反应器批量生产药物，在构建基因表达载体时有什么特别要求？为什么？
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四、生物技术的安全性与伦理问题
1．(选择性必修3 P101“正文”)对微生物的基因改造是基因工程中研究最早、最广泛和取得实际应用成果最多的领域，这是因为微生物有哪些优点？
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2．(选择性必修3 P102“相关信息”)在转基因研究工作中，我国科学家将来自玉米的α淀粉酶基因与目的基因一起转入植物中，其原因是什么？
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3．(选择性必修3 P105“思维训练”)转基因食品是否安全是人们争论的焦点。有人说，一种转基因食品，只有证明它是安全的，才可以食用；有人说，一种转基因食品，如果没有证据表明它不安全，就可以食用。对某种转基因食品而言，证明它安全与证明它不安全，哪个获取所需证据的难度大？为什么？
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4．(选择性必修3 P107“思考·讨论”拓展)治疗性克隆与生殖性克隆的主要区别是什么？
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5．(选择性必修3 P107“思考·讨论”节选)克隆人与细胞核供体之间是什么关系？以血缘为纽带的人伦关系会因克隆人的到来而消亡吗？
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6. (选择性必修3 P112“思考·讨论”改编)在战争中，为预防敌方使用生物武器，你认为参战部队采取的最有效措施是什么？请简述这一措施的原理。
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第3关：易错易混——清一清
一、发酵工程
易错点1 不明确“自养”型与“异养”型微生物其培养基成分的显著差异
点拨：(1)自养型微生物所需的主要营养物质是无机盐，碳源可来自大气中的CO2，氮源可由含氮无机盐提供。
(2)异养型微生物所需的营养物质主要是有机物，即碳源必须由含碳有机物提供，氮源也主要是由含氮有机物提供，部分异养型微生物也可以利用无机氮源。
易错点2 误认为所有微生物培养基中均需加入“生长因子”
点拨：碳源、氮源、水分、无机盐、生长因子是微生物生长必需的五大营养成分，但大多数培养基中都含碳源、氮源、水分、无机盐四类物质，可能不需额外添加“生长因子(如维生素)”，这是因为许多微生物可自行合成这些生长因子，而那些合成能力有限或不能合成生长因子的微生物(如乳酸菌)，则需在培养基中添加维生素等生长因子。
易错点3 对平板划线操作中灼烧接种环的目的不清楚
点拨：
易错点4 不知道菌落计数比实际值“偏高”还是“偏低”
点拨：稀释涂布平板法统计样品中菌落的数目往往比实际数目“低”。这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。而显微计数法中由于不能区分死菌与活菌，故所得数值可能“偏高”。
易错点5 混淆果酒制作中，对葡萄“先冲洗再去枝梗”与“不可反复冲洗”的目的
点拨：(1)制作果酒使用的葡萄应先冲洗，再除去枝梗，不能反过来，以免除去枝梗时引起葡萄破损，增加被杂菌污染的机会。
(2)对于果酒的自然发酵，冲洗不要反复进行，以免使酵母菌数量减少，发酵周期延长，产生的果酒中酒精含量下降。
易错点6 误认为醋酸菌可在缺乏O2时将酒精转化为醋酸
点拨：醋酸菌是严格的好氧型微生物，它对O2的含量特别敏感，当进行深层发酵时，即使短时间中断通入O2，也会引起醋酸菌死亡，其将乙醇变为乙醛进而变成醋酸的条件是“糖源不足”而不是“O2不足”。
易错点7 误认为泡菜发酵时间越长越好
点拨：泡菜发酵时间并非越长越好。
(1)泡菜的发酵时间长，亚硝酸盐含量低，但是发酵时间过长会产生其他有害物质。
(2)泡菜发酵时间过长，乳酸含量过高，口味不佳。
易错点8 不明确泡菜制作中盐水(质量百分比为5%～20%的盐水)煮沸的两方面意义
点拨：煮沸有两大作用，一是除去水中氧气，二是杀灭盐水中的细菌。
示例跟踪
1.研究发现土壤中的一种极毛杆菌，能够以3，4二甲苯酚为碳源，对土壤残留农药中的该成分有较好的降解作用。请回答下列问题：
(1)某兴趣小组欲从土壤中筛选出能高效降解3，4二甲苯酚的极毛杆菌菌株，分离极毛杆菌的土样应来自____________________土壤，在配制筛选极毛杆菌的培养基时对其碳源的选择应____________________________，在实验室一般采用______________________法对配制的培养基进行灭菌。
(2)分离纯化极毛杆菌时，首先需要用________对土壤浸出液进行梯度稀释，理由是______________________________________，该分离纯化方法为________________。若采用平板划线法分离土样中的极毛杆菌，在做第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样做的目的是
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(3)为了统计土壤浸出液中极毛杆菌的总数，他们选用104、105、106稀释倍数的稀释液进行涂布，每种稀释液都设置了3个培养皿。为了保证实验的准确性，还应设置的一组对照实验是________________________________________________________________________。
二、细胞工程、基因工程
易错点1 不清楚植物脱毒苗培养时选择的要求及原理
点拨：由于植物分生区附近(如茎尖)的病毒极少，甚至无病毒，所以常采用茎尖组织培养技术获得脱毒苗。
易错点2 误认为植物组织培养均需“再分化至幼苗”、“人工种子”即平常所说的“种子”
点拨：(1)组织培养的目的不同，培养的阶段不同。如：生产细胞代谢产物，只需培养至愈伤组织时期；生产人工种子，则需要培养至胚状体时期；获得植株就需培养至幼苗时期。
(2)人工种子是通过无性生殖(植物体细胞的组织培养)形成的，只有一个亲本的性状；自然种子是有性生殖的产物，具有两个亲本的性状。
易错点3 误认为动物细胞培养时加入5%CO2的目的是维持气体平衡或用于呼吸
点拨：动物细胞培养时，通常采用培养皿或松盖培养瓶将其置于含95%空气加5% CO2的混合气体的培养箱中进行培养，加入CO2的目的是维持培养液的pH。
易错点4 不清楚动物细胞克隆化培养时为何常选10代以内的细胞，而瘤细胞却为50代以后
点拨：取供体动物的体细胞培养，一般选用传至10代以内的细胞，因为10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型，保证了供体细胞正常的遗传基础。欲获得无限增殖的瘤细胞则往往在50代以后，因为此时其遗传物质已发生变化，具癌变特性。
易错点5 误认为精子“获能”就是获得能量，误认为排卵就是排出卵泡
点拨：(1)精子获能是指精子获得受精“能力”，而不是获得能量。
(2)排卵是指卵子从卵泡中排出，而不是卵泡从卵巢中排出。
易错点6 受精的标志≠受精完成的标志
点拨：受精的标志是在透明带和卵细胞膜之间观察到两个极体；而受精完成的标志是雌、雄原核的融合。
易错点7 滋养层≠饲养层
点拨：(1)滋养层：囊胚时期沿透明带内壁扩展和排列的、个体较小的细胞，滋养层最终发育成胎膜和胎盘。
(2)饲养层：饲养层细胞一般为输卵管上皮细胞，在干细胞培养时，可作为提供干细胞分裂、增殖的营养细胞。
易错点8 人工授精≠体外受精
点拨：人工授精是用人工的方法将公畜的精子注入母畜生殖道内，使精卵细胞结合；体外受精是将人工获取的精子和卵母细胞在体外完成受精。这两者的本质都是两性生殖细胞的结合，只不过前者是在体内完成的，后者是在体外完成的。
易错点9 误认为目的基因的插入位点是“随机”的
点拨：目的基因的插入位点不是随机的，基因表达需要启动子与终止子的调控，所以目的基因应插入启动子与终止子之间的部位，若目的基因插入启动子内部，启动子将失去原功能。
易错点10 误认为切取目的基因与切取载体时“只能”使用“同一种酶”
点拨：(1)在获取目的基因和切割载体时通常用同种限制酶，以获得相同的黏性末端。但如果用两种不同限制酶切割后形成的黏性末端相同时，在DNA连接酶的作用下目的基因与载体也可以连接起来。
(2)为了防止载体或目的基因的黏性末端自己连接即所谓“环化”或“反向连接”，可用不同的限制酶分别处理目的基因和载体，使目的基因两侧及载体上具有两个不同的黏性末端。
易错点11 混淆启动子与起始密码子，终止子与终止密码子，不明确标记基因的作用
点拨：启动子≠起始密码子，终止子≠终止密码子。
(1)启动子：一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端。它是RNA聚合酶识别、结合的部位。
(2)终止子：一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。作用是使转录过程停止。
(3)起始密码子和终止密码子位于mRNA上，分别控制翻译过程的启动和终止。
(4)标记基因：一般为抗生素抗性基因或荧光基因等，其作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因(目的基因是否导入成功)，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。
易错点12 误认为基因工程可导致受体细胞或生物产生“新基因”或“新蛋白质”
点拨：基因工程的实质是“基因重组”，它是将外源基因导入受体细胞，使该基因在受体细胞中表达——由于“外源基因”是自然界已存在的“现成”基因，故基因工程并未产生新基因，因此目的基因表达时也未产生新蛋白质，基因工程只不过是让受体细胞(或生物)实现了“外源基因的表达”。
示例跟踪
2.请回答下列有关基因工程及其应用的问题：
(1)多种________________________和DNA连接酶，以及逆转录酶的发现，为DNA的切割、连接以及获得目的基因创造了条件。
(2)基因工程的核心步骤是______________；重组Ti质粒载体结构中TDNA的作用是________________________________________________________________________。
(3)科学家设法使烟草细胞形成微创伤，受伤部位细胞产生的乙酰丁香酮可吸引农杆菌向受伤部位集中，这时农杆菌携带某种目的基因进入烟草细胞，获得的转基因烟草细胞通过________________技术最终获得转基因烟草，检测烟草细胞中该目的基因是否成功表达出蛋白质的方法是________________________________________________________________________。
(4)利用__________________处理植物体细胞可得到原生质体，将目的基因导入植物细胞的方法中除题(3)所述方法外，还可采用
________________________________________________________________________。
3．生物技术已经渗入了我们生活的方方面面，比如：
(1)哺乳动物单倍体胚胎干细胞技术是遗传学研究的新手段，该项技术为研究隐性基因功能提供了理想的细胞模型。下图表示研究人员利用小鼠获得单倍体胚胎干细胞的方法。
①方法一中，研究人员需对实验小鼠注射促性腺激素，使其超数排卵，从而获得更多的________，在体外选用特制的培养液培养至________期，并从________中分离、筛选出胚胎干细胞。采用这种方法获得的单倍体胚胎干细胞称为孤雌单倍体胚胎干细胞。
②采用方法二可获得孤雄单倍体胚胎干细胞。受精阶段，防止多精入卵的第二道屏障是________________。研究人员用特定方法去除细胞M中的________原核，再对处理后的细胞进行进一步的培养、分离和筛选。胚胎干细胞在功能上具有________________的特点。
(2)在转基因或产品研究过程中，绝大多数科学家都能自觉地遵守科学研究道德，如把重组DNA的转移限制在遗传上具有________的生物上，如转生长激素基因鱼，受体鱼一般培育为________(填“二倍体”或“三倍体”)。
选择性必修3 生物技术与工程
第1关：基础知识——判一判
一、
1．√ 2.× 3.√ 4.× 5.× 6.× 7.√ 8.√ 9.×
二、
1．√ 2.× 3.√ 4.√ 5.× 6.× 7.× 8.√
三、
1．√ 2.× 3.× 4.√ 5.√ 6.× 7.√ 8.× 9.√ 10.× 11.× 12.√ 13.√ 14.√
四、
1．× 2.× 3.√ 4.√ 5.× 6.√ 7.√ 8.× 9.× 10.× 11.√ 12.√ 13.×
五、
1．√ 2.× 3.√
第2关：对接教材——填一填
一、
1．泡菜坛装得太满时，会使盐水不容易完全淹没菜料，从而导致菜料变质腐烂；同时发酵液可能会溢出坛外。泡菜坛留出一定空间，也方便拿取泡菜。
2．①选择气密性好的泡菜坛。②盐水煮沸后冷却待用。③装坛时压实，盐水没过全部菜料。④盖上坛盖后要在坛盖边沿的水槽中注满水；发酵期间不宜开盖，并注意在发酵过程中经常向水槽中补充水。
3．温度是酵母菌、醋酸菌生长和发酵的重要条件。酿酒酵母的最适生长温度约为28 ℃，因此果酒发酵时需将温度控制在18～30 ℃；多数醋酸菌的最适生长温度为30～35 ℃，因此制作果醋时要将温度控制在30～35 ℃。
4．含有糖、维生素和有机氮等营养物质，作为碳源、氮源及特殊营养物质。
5．（1）培养基被杂菌污染。
（2）接种的菌种不纯或者无菌操作不规范。
6．通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面湿度也比较高，将平板倒置，既可以防止培养基表面的水分过快地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。
7．最后一次划线已经将细菌稀释成单个的细胞，如果与第一次划线相连，则增加了细菌的数目，得不到纯化的效果。
8．（1）设计一种选择培养基，用尿素作为唯一氮源，可以将分解尿素的细菌分离出来。
（2）这种培养基与普通培养基相比，只是用尿素作为唯一氮源，培养基的其他营养成分基本相同。
9．由于生物与环境的相互依存关系，在富含纤维素的环境中，纤维素分解菌的含量相对较高，从这种土样中获得目的微生物的概率高于普通环境。
10．（1）在低成本的培养基上能迅速生长繁殖；生产所需代谢物的产量高，发酵条件容易控制；菌种不易变异、退化等。
（2）要对温度、pH、溶解氧等发酵条件进行严格控制，使其最适合微生物的生长繁殖，同时及时添加必要的营养组分。
二、
1．生物基因之间相互调控、相互影响。
2．纤维素酶、果胶酶。
3．快速繁殖是在具有一定人工设施的室内生产，可以不受季节、气候等自然条件的限制。
4．95%空气和5% CO2的混合气体。O2维持细胞代谢，CO2的主要作用是维持培养液的pH。
5．使细胞与培养液充分接触。保证细胞所需氧气和营养的供应；保证细胞内代谢物及时排出。
6．病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。
7．用于获得杂交瘤细胞的B淋巴细胞为浆细胞，是高度分化的动物细胞，培养时很难恢复分裂能力，不能进行无限增殖，难以获得单克隆抗体。
8．动物体细胞核移植得到的个体的细胞核遗传物质完全来自供体细胞核，不是经精卵受精得到的，因此属于无性生殖。
9．可以保证受精卵中遗传物质与亲代体细胞一致，从而保证遗传的稳定性。
10．多数哺乳动物的第一极体不进行减数分裂Ⅱ，因而不会形成两个第二极体。
11.
说明：早期胚胎发育消耗的是卵细胞提供的营养物质，有机物总量减少，但有机物种类增多。
12．对雌性个体用促性腺激素处理，诱发卵巢排出比自然情况下更多的成熟卵子。
13．应对供体和受体母畜用激素进行同期发情处理，使它们的生理条件达到同步或一致，这样才能使供体的胚胎移入受体后有相同或相似的生存条件，这是胚胎移植成功与否的关键。
三、
1．原核生物容易受到自然界外源DNA的入侵，所以它在长期的进化过程中形成了一套完善的防御机制。限制酶就是它的一种防御性工具。当外源DNA入侵时，它会利用限制酶来切割外源DNA，使之失效，以保证自身的安全。
2．限制酶具有特异性，即一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的位点上进行切割。限制酶不切割自身DNA的原因是原核生物DNA分子中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。
3．不相同。DNA连接酶连接的是两个DNA片段，而DNA聚合酶连接的是单个脱氧核苷酸。
4．不可以。具有能自我复制、有一个或多个限制酶切割位点、有标记基因及对受体细胞无害等特点的DNA分子才可以直接用作基因工程的载体。实际上天然的DNA分子一般不完全具备上述条件，往往需要进行人工改造后才能用于基因工程操作。
5．不可以。因为DNA会被吸附到滤纸上而大量损失，影响最终提取的DNA量。
6．DNA是两条反向平行的双链结构，而复制时只能从固定的方向（模板链的3′端）开始，所以引物的碱基序列是不同的。
7．选用同一种限制酶切割会产生相同的黏性末端，可以在DNA连接酶的作用下将切割的目的基因和载体连接起来。也可以使用能产生相同末端的限制酶切割。
8．Ti质粒上的T－DNA也称为可转移的DNA，可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体DNA上。
9．新型冠状病毒核酸检测试剂盒是用于快速进行体外定性检测新型冠状病毒的医疗检测用品，它的工作原理是通过提取病人样本中的RNA，进行反转录聚合酶链式反应（RT－PCR），通过扩增反应将样本中微量的病毒信息进行放大，最后以荧光的方式读取信号。如果PCR之后信号为阳性，那么就可以认为样本中存在病毒（已经感染），反之表明样本中没有病毒（未感染）。
10．电泳时，DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象等有关。DNA分子的相对分子质量越大，受到的阻力越大，迁移速率越慢，DNA分子的相对分子质量越小，受到的阻力越小，迁移速率越快。
11．减少环境污染，降低生产成本。
12．必须把药用蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控元件重组在一起。因为只有连接了乳腺蛋白基因的启动子，才能保证相应的目的基因在雌性动物泌乳期的乳腺细胞内得以表达。
四、
1．微生物具有生理结构和遗传物质简单、生长繁殖快、对环境因素敏感和容易进行遗传物质操作等特点。
2．由于α­淀粉酶基因可以阻断淀粉储藏使花粉失去活性，因而可以防止转基因花粉的传播。
3．证明转基因食品安全（没有任何危害），比证明转基因食品不安全更难。因为要证明它不安全，只要找到它存在一种危害的证据就可以。要证明它安全，则需要把所有可能造成的危害，以及潜在的风险全部排除才可以，而这样的工作难度非常大，几乎是不可能完成的。在逻辑学上证明某事物不存在是非常困难的。
4．在治疗性克隆中获得的早期胚胎用于获得胚胎干细胞，然后诱导胚胎干细胞分化出所需的特定的细胞、组织和器官；在生殖性克隆中获得的胚胎则通过胚胎移植移植到母体的子宫内，由母体孕育出婴儿。
5．克隆人的遗传信息绝大多数是由细胞核供体提供的，从基因层面来看，克隆人相当于细胞核供体的“复制品”。以血缘为纽带的人伦关系很可能因克隆人的到来而消亡。
6．最有效的措施是接种常见病原体的疫苗，目的是使参战人员体内产生相应的抗体。
第3关：易错易混——清一清
示例跟踪
1．解析：（1）筛选目的菌时，应从含该菌丰富的土壤中采集土样，极毛杆菌对土壤残留农药中的3，4­二甲苯酚有较好的降解作用，因此应从该物质含量高的土壤取样。筛选某种微生物的选择培养基应有利于该种微生物生存，而不利于其他微生物生存，极毛杆菌能够以3，4­二甲苯酚为碳源，因此配制培养基时应以3，4­二甲苯酚为唯一碳源，实验室对培养基灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌法。（2）分离纯化极毛杆菌时，首先需要用无菌水对土壤浸出液进行梯度稀释，这样既可避免杂菌污染，又可将极毛杆菌分散，以便在培养基表面形成单个菌落。利用系列梯度稀释的方法对微生物进行分离纯化属于稀释涂布平板法。利用平板划线法分离该菌时，在做第二次及以后划线时，总是从上一次划线的末端开始，这样可以将聚集的菌体逐步稀释以便得到单个菌落。（3）通过稀释涂布平板法计数该菌时，需要设置一组空白对照组，即不接种的空白培养基。
答案：（1）3，4­二甲苯酚含量高的 以3，4­二甲苯酚为唯一碳源 高压蒸汽灭菌 （2）无菌水 土壤浸出液中菌的浓度高，直接培养很难分离得到单菌落，同时用无菌水可以防止杂菌污染 稀释涂布平板法 将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落 （3）不接种的空白培养基
2．解析：（1）切割目的基因需要用限制酶，将目的基因与载体相连需要用到DNA连接酶，而利用反转录法获得目的基因需要用到逆转录酶。（2）基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建；重组Ti质粒载体结构中T­DNA为可转移DNA，可以携带目的基因进入植物细胞并整合到植物细胞中染色体的DNA上。（3）将获得的转基因烟草细胞最终培养成转基因烟草需要用到植物组织培养技术；检测目的基因是否表达出蛋白质可以采用的方法是抗原—抗体杂交。（4）植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，因此利用纤维素酶和果胶酶处理植物体细胞可得到原生质体；将目的基因导入原生质体中的方法，除了利用农杆菌转化法，还可以利用花粉管通道法。
答案：（1）限制酶（或限制性内切核酸酶） （2）基因表达载体的构建 携带目的基因进入植物细胞并整合到植物细胞中染色体的DNA上 （3）植物组织培养 抗原—抗体杂交 （4）纤维素酶和果胶酶 花粉管通道法
3．解析：（1）①方法一中，需要用促性腺激素进行超数排卵处理，从而获得更多的卵母细胞，在体外选用特制的培养液经过早期胚胎培养至囊胚期阶段，可以从内细胞团中分离出胚胎干细胞。②精子入卵的两道屏障：透明带反应和卵细胞膜反应。方法二中人工去除雌原核，再经早期胚胎培养至囊胚期阶段，可以分离出孤雄单倍体胚胎干细胞。胚胎干细胞具有发育的全能性，可以分化出各种组织细胞。（2）转基因技术一般应用于有遗传缺陷的生物，如原本缺乏生长激素，可以通过基因工程转入生长激素基因，为了避免对其他生物造成基因污染，受体细胞常选择三倍体，因为三倍体不育。
答案：（1）①卵母细胞 囊胚 内细胞团 ②卵细胞膜反应 雌 发育的全能性 （2）特定缺陷 三倍体
灼烧时间
灼烧目的
第一次划线前
杀死接种环上原有的微生物，防止外来杂菌污染培养基
第二次及以后每次划线前
杀死上次划线后接种环上残留的菌种，使下次划线的菌种直接来源于上次划线的末端
最后一次划线后
杀死接种环上残存的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者
项目
变化
细胞数量
增加
每个细胞体积
减小
DNA总量
增多
每个细胞的DNA总量
不变
有机物总量
减少