2022-2023学年四川省成都市天府新区太平中学高二3月月考生物试题含解析

这是一份2022-2023学年四川省成都市天府新区太平中学高二3月月考生物试题含解析，共45页。试卷主要包含了单选题，综合题等内容，欢迎下载使用。
 天府新区太平中学高二3月月考生物试卷
一、单选题（共40题）
1. 下列关于果酒和果醋制作的叙述，不正确的是（ ）
A. 制作果酒时瓶口要密闭，而制作果醋时中断通氧可能会引起醋酸菌死亡
B. 在变酸的果酒表面观察到的菌膜是乳酸菌在液面大量繁殖而形成的
C. 温度对酵母菌进行酒精发酵的影响很大，而对醋酸菌进行的发酵影响也大
D. 制作果酒和果醋时都应用体积分数为70%的酒精对发酵瓶进行消毒,并注意无菌操作
【答案】B
【解析】
【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型．果酒制作的原理：
（1）在有氧条件下，反应式如下：C6H12O6+6O2+6H2O→6CO2+12H2O+能量；
（2）在无氧条件下，反应式如下：C6H12O6→2CO2+2C2H5OH+能量。
2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：
当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。
当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
【详解】酵母菌需要在无氧条件下才能发酵产生酒精，而醋酸菌是嗜氧菌，因此制作果酒时瓶口要密闭，而制作果醋时中断通氧可能会引起醋酸菌死亡，A正确；在变酸的果酒表面观察到的菌膜是醋酸菌在液面大量繁殖而形成的，B正确；醋酸菌是嗜氧菌，因此温度对醋酸菌进行的发酵影响也很大，C错误；制作果酒和果醋时都应用体积分数为70%的酒精对发酵瓶进行消毒，并注意无菌操作，D正确。
【点睛】本题考查果酒和果醋的发酵的知识点，要求学生掌握果酒和果醋发酵的过程、原理以及注意事项是该题考查的重点。要求学生识记果酒和果醋发酵的菌种和发酵条件，以及发酵过程中的反应式，这是突破该题的方法。
2. 变酸的酒表面有一层膜、泡菜坛表面长的一层膜、腐乳外面有一层致密的皮，它们可能分别是（    ）
A. 醋酸菌、乳酸菌、毛霉菌丝
B. 醋酸菌、毛霉菌、毛霉菌丝
C. 醋酸菌、酵母菌、毛霉菌丝
D. 酵母菌、醋酸菌、乳酸菌
【答案】C
【解析】
【分析】1、醋酸菌是好氧菌，在氧气充足的条件下可以将乙醇转化成醋酸。
2、泡菜制作的原理是乳酸菌发酵，在泡菜制作过程中，泡菜发酵液的营养丰富，其表面往往含有适量的氧气，适合酵母菌生长繁殖，成膜酵母生长繁殖会在泡菜坛液面的形成一层白膜。
3、腐乳表面的一层致密的皮是由毛霉的匍匐菌丝形成的，它能形成腐乳的体，使腐乳成型。
【详解】①在氧气充足的条件下，醋酸菌能将乙醇转化成醋酸，变酸的酒表面的一层菌膜，主要与醋酸菌有关；②泡菜坛液面的一层白膜，主要是成膜酵母菌繁殖的结果；③腐乳表面一层致密的皮是由毛霉的匍匐菌丝形成的．故选C。
【点睛】识记：变酸的酒表面出现膜——醋酸菌；泡菜坛内的表面膜——成膜的酵母菌；腐乳外面的皮——毛霉菌丝。
3. 下列是有关腐乳制作的几个问题，其中不正确的是( )
A. 豆腐上生长的白毛是毛霉的白色菌丝
B. 决定腐乳特殊口味的是卤汤
C. 腐乳的营养丰富，是因为大分子物质经过发酵作用分解成小分子且易于消化的物质
D. 卤汤中酒的含量应控制在12%左右，酒的含量过高，不足以抑制微生物的生长；含量过低，腐乳成熟的时间会延长
【答案】D
【解析】
【分析】腐乳的制作过程主要是：让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制。参与豆腐发酵的微生物有青霉、酵母、曲霉、毛霉等多种，其中起主要作用的是毛霉，毛酶等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸,脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。在豆腐乳的腌制过程中，盐的作用有：盐不仅能防止豆腐腐败，还可与分解形成的氨基酸结合成氨基酸钠，使豆腐乳味道鲜美；酒精含量的高低与腐乳后期发酵时间的长短有很大关系，酒精含量越高，对蛋白酶的抑制作用也越大，使腐乳成熟期延长；酒精含量过低，蛋白酶的活性高，加快蛋白质的水解，但杂菌繁殖快，豆腐易腐败，难以成块。
【详解】A. 豆腐上生长的白毛是毛霉的白色菌丝，严格地说是直立菌丝，豆腐中还有匍匐菌丝，A正确；
B. 卤汤直接关系到腐乳的色、香、味，B正确；
C. 腐乳中毛霉能产生蛋白酶和脂肪酶，这些酶能将豆腐中的大分子物质分解成小而且易于消化的物质，C正确；
D. 卤汤中含酒量应该控制在12%左右，酒精含量过高，腐乳成熟的时间会延长；含量过低，不足以抑制微生物的生长，D错误。
4. 在发酵条件的控制中，错误的是（ ）
A. 葡萄汁装入发酵瓶时，要留有约1/3的空间
B. 制葡萄酒的过程中，温度应控制在30～35℃
C. 制葡萄酒的过程中，除在适宜的条件下，时间应控制在10～12 d左右
D. 制葡萄醋的过程中，除在适宜的条件下，时间应控制在7～8 d左右
【答案】B
【解析】
【分析】发酵条件：①将葡萄汁装入发酵瓶，要留要大约13的空间，并封闭充气口。②制葡萄酒的过程中，将温度严格控制在18℃～25℃，时间控制在10～12d左右，可通过出料口对发酵的情况进行及时的监测。③制葡萄醋的过程中，将温度严格控制在30℃～35℃，时间控制在7～8d左右，并注意适时通过充气口充气。
【详解】A、葡萄汁装入发酵瓶时，要留有约1/3的空间，防止发酵液溢出，A正确；
B制葡萄酒的过程中，将温度严格控制在18℃～25℃，制葡萄醋的过程中，将温度严格控制在30℃～35℃，B错误；
C、制葡萄酒的过程中，除要保证适宜的条件外，时间应控制应在10-12d左右，C正确；
D、制葡萄醋的过程中，将温度严格控制在30℃～35℃，时间控制在7～8d左右，并注意适时通过充气口充气，D正确。
故选B。
5. 下面为腐乳制作过程的流程图，下列说法错误的是(　　)
→→→
A. 毛霉为好氧型真菌，为避免缺氧，放豆腐时要留出一定缝隙
B. 加盐腌制的目的是析出豆腐中的水分使之变硬，同时能抑制微生物的生长
C. 加卤汤、密封腌制中，毛霉不断增殖，并产生大量的酶，分解蛋白质
D. 密封瓶口时，最好将瓶口通过酒精灯的火焰，以防止瓶口污染
【答案】C
【解析】
【分析】豆腐的主要营养成分是蛋白质和脂肪，都是大分子有机化合物，难以消化、吸收，毛霉、酵母菌等多种微生物分泌的蛋白酶，能将蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸，在多种微生物的协同下，豆腐转变成腐乳。卤汤直接关系到腐乳的色、香、味，卤汤是由酒及各种香辛料配制而成的，加酒可以抑制微生物的生长，同时能使腐乳具有独特的香味；香辛料可以调制腐乳的风味，也具有防腐作用。
【详解】毛霉为好氧型真菌，在腐乳制作过程中为避免其无氧呼吸，摆放豆腐时要留出一定缝隙，A正确；腐乳制作过程中加盐腌制的目的是析出豆腐中的水分使之变硬，同时能抑制微生物的生长，B正确；加卤汤装瓶、密封腌制中，利用的是毛霉产生的蛋白酶分解蛋白质，但毛霉的生长已经受到抑制，大多数已经死亡，C错误；为防止杂菌污染，用胶条密封瓶口时，最好将瓶口通过酒精灯的火焰，灼烧灭菌，D正确。
6. 果酒和果醋制作过程中，发酵条件的控制至关重要，相关措施正确的是（　　）
A. 发酵瓶要装1/3，留有空间，有利于酵母菌发酵
B. 在葡萄酒发酵过程中，每隔12 h左右打开瓶盖一次，放出CO2
C. 在果醋发酵过程中，葡萄汁要填满发酵瓶，密封有利于醋酸菌的代谢
D. 果酒发酵过程温度控制在20℃左右，果醋发酵过程温度控制在30℃
【答案】D
【解析】
【分析】葡萄汁装入发酵瓶时，要留有大约1/3的空间，这是因为酵母菌繁殖需要空气；用带盖的瓶子制葡萄酒时，发酵过程中每隔12h 左右要将瓶盖拧松一次，以放出CO2，若打开瓶盖则会导致葡萄酒被污染；参与果醋制作的醋酸菌是好氧菌，因此在果醋发酵过程中，要适时通过充气口充气，有利于醋酸菌的代谢；酒精发酵的适宜温度是在18℃～25℃，醋酸菌生长的最佳温度是在30℃～35℃。
【详解】A. 将葡萄汁装入发酵瓶，要留要大约1/3的空间，防止发酵液溢出，A错误；
B. 在葡萄酒发酵过程中，每隔12h左右拧松瓶盖一次，放出CO2，而不能打开瓶盖，否则容易引起杂菌污染，B错误；
C. 醋酸菌是好氧细菌，只有当氧气充足时才能进行旺盛的生理活动，因此在果醋发酵过程中，要适时通过充气口充气，有利于醋酸菌的代谢，C错误；
D. 果酒发酵过程温度控制在18～25℃，果醋发酵过程温度控制在30～35℃，D正确。
7. 下列相关叙述,正确的是
A. 在果酒的制作过程中,应先去除葡葡的枝梗，再进行多次反复冲洗,这样才可以洗得彻底
B. 果酒发酵装置中,充气口的作用是在发酵时连接充气泵进行充气,排气口的作用是在酒精发酵时排出二氧化碳
C. 豆腐上长了毛霉后,需加盐腌制8天左右,这样可以抑制微生物的生长,避免豆腐变质,又能使豆腐析出水分,使豆腐块变硬
D. 制作泡菜时要选火候好、无裂纹、无砂眼、盖子吻合好的坛子,需要加水密封,目的是隔绝空气,抑制细菌繁殖
【答案】C
【解析】
【分析】酵母菌在有氧和无氧的条件下都能生活，在有氧时，酵母菌大量繁殖，但是不起到发酵效果；在无氧时可以进行发酵；利用酵母菌发酵时最好是先通入足够的无菌空气，在有氧环境下一段时间使其繁殖，再隔绝氧气进行发酵，试验流程：挑选葡萄→冲洗→榨汁→酒精发酵→果酒，制作果酒时应该关闭充气口；腐乳制作过程中，加盐能给腐乳必要的咸味，能析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬，还能抑制杂菌的生长，避免豆腐腐败变质；制作泡菜时，泡菜坛的选择标准是火候好、无裂纹、无砂眼、坛沿深、盖子吻合好，否则容易引起蔬菜腐烂。
【详解】A. 在果酒的制作过程中，应先冲洗葡萄，后去除葡萄的枝梗，以防止杂菌的污染，A错误；
B. 果酒发酵装置中，充气口应关闭，B错误；
C. 豆腐上长了毛霉后，需加盐腌制8天左右，这样可以抑制微生物的生长，避免豆腐变质，又能使豆腐析出水分，使豆腐块变硬，C正确；
D. 制作泡菜时要选火候好、无裂纹、无砂眼、盖子吻合好的坛子，加水密封，有利于乳酸菌繁殖，D错误；
8. 家庭制作泡菜并无刻意的灭菌环节，在发酵过程中，乳酸菌产生的乳酸就可以抑制其他微生物的生长。当环境中的乳酸积累到一定浓度时，又会抑制乳酸菌自身的增殖。下列有关叙述错误的是（　　）
A. 在发酵的初期，乳酸菌的种内关系主要表现为种内互助
B. 在发酵的中期，由于营养物质的消耗和代谢产物的积累，乳酸菌的种内竞争趋于激烈
C. 密闭的发酵环境使乳酸菌在种间竞争中占据优势
D. 在发酵的中期，泡菜坛内各种微生物大量繁殖
【答案】D
【解析】
【分析】1、“在发酵过程中，乳酸菌产生的乳酸可以抑制其他微生物的生长”，其他微生物和乳酸菌之间属于种间关系，所以属于竞争；
2、“乳酸菌产生的乳酸”，属于乳酸菌之间的共同协作，产生乳酸抑制其他微生物的生长，所以属于种间互助；
3、根据“当环境中的乳酸积累到一定浓度时，又会抑制乳酸菌自身的增殖”，到了后期由于营养物质等资源的缺乏，导致种内发生斗争。
【详解】A、在发酵的初期，乳酸菌数目增加较快，其种内关系主要表现为种内互助、抑制其他微生物的生长，A正确；
B、在发酵的中期，随着营养物质的消耗和代谢产物的积累，乳酸菌的种内竞争趋于激烈，B正确；
C、由于乳酸对乳酸菌代谢活动的影响不大，所以在乳酸菌与其他微生物的生存斗争中乳酸占优势，C正确；
D、在发酵的中期，由于乳酸的大量积累，pH下降，抑制微生物的生长，泡菜坛内的微生物减少，D错误。
故选D。
9. 关于泡菜发酵的叙述，不正确的是（　　）
A. 泡菜发酵过程中产生的亚硝酸盐会引起细胞癌变，摄入过多对身体造成伤害
B. 煮沸泡菜盐水的目的是除去水中的氧气和杀灭盐水中的其他杂菌
C. 泡菜坛内有时会长出白膜是因为兼性厌氧真菌酵母繁殖所致
D. 泡菜腌制时间过短，食盐用量过低，温度过高，都容易造成细菌大量滋生，亚硝酸盐含量增加
【答案】A
【解析】
【分析】泡菜在腌制过程中，乳酸菌、乳酸和亚硝酸盐的变化：发酵初期：以不抗酸的大肠杆菌和酵母菌的活动为主，同时还有一部分硝酸盐还原菌活动。该时期利用了氧气，产生了厌氧环境，乳酸菌才开始活动。此时乳酸菌和乳酸的量都比较少，而由于硝酸盐还原菌的活动，亚硝酸盐含量有所增加。发酵中期：由于乳酸菌产生了大量乳酸，其他细菌活动受到抑制，只有乳酸菌活动增强。此时期乳酸菌数量达到最高峰，乳酸的量继续积累。由于硝酸盐还原菌受抑制，同时形成的亚硝酸盐又被分解，因而亚硝酸盐含量下降。所以在整个发酵过程中，亚硝酸盐的含量表现为先增加后下降的趋势。发酵后期：由于乳酸的积累，酸度继续增长，乳酸菌活动也受到抑制。乳酸菌数量下降，而硝酸盐还原菌完全被抑制。提醒：放置时间长的蔬菜中的硝酸盐易被滋生的硝酸还原菌还原成亚硝酸盐。
【详解】A、摄入体内的亚硝酸盐含量过多，在特定的条件下会转化成亚硝胺，亚硝胺是化学致癌因子，可导致细胞癌变，A错误；
B、煮沸泡菜盐水的是为了除去水中的氧气和杀灭盐水中的其他杂菌（高温），B正确；
C、 在泡菜制作过程中，泡菜发酵液的营养丰富，适合兼性厌氧真菌酵母菌生长繁殖，成膜酵母生长繁殖，会在泡菜坛液面的形成一层白膜 ，C正确；
D、泡菜腌制时间过短，食盐用量过低，温度过高，都容易造成细菌大量滋生，亚硝酸盐含量增加，导致泡菜的品质下降，D正确。
故选A。
10. 某研究小组探究泡菜制作过程中不同浓度的食盐对亚硝酸盐产生的影响，结果如图。相关叙述正确的是（ ）

A. 如果加入“陈泡菜水”，三条曲线的亚硝酸盐含量峰值在时间上将延后
B. 腌制过程中，坛中常出现溶液量增多主要原因是细胞呼吸产生水
C. 食盐的浓度越低，亚硝酸盐含量的峰值越高，这与无法抑制杂菌繁殖有关
D. 食盐的浓度越高，亚硝酸盐含量的峰值越低，制泡菜时要尽量多加食盐
【答案】C
【解析】
【分析】泡菜制作的原理是乳酸菌发酵；由于在泡菜制作过程中，微生物会将原料中的硝酸盐还原形成亚硝酸盐，因此在发酵初期亚硝酸盐含量会逐渐升高，发酵后期亚硝酸盐又会被某些微生物氧化成硝酸盐，亚硝酸盐含量又会逐渐下降，因此在泡菜制作过程中要检测亚硝酸盐的含量，确定合适的取食时间。
【详解】A、如果加入“陈泡菜水”，乳酸菌的数量增多，三条曲线的亚硝酸盐含量峰值在时间上将提前，A错误；
B、腌制过程中，坛中出现溶液量增多现象的主要原因是蔬菜在盐水中失水，B错误；
C、由于食盐用量过低，造成微生物大量繁殖，将蔬菜中的硝酸盐还原成亚硝酸盐，所以制作泡菜时食盐的浓度越低，亚硝酸盐含量的峰值出现得越早，且峰值较高，C正确；
D、泡菜腌制时食盐含量过高会影响泡菜的口感，D错误。
故选C。
11. 下图装置可用于生物技术实践的相关实验，有关叙述不正确的是（　　）

A. 两种装置都可先用于果酒的制作，后用于果醋的制作
B. 利用装置甲制作腐乳时，多种微生物参与了豆腐的发酵，如酵母、曲霉和毛霉
C. 果酒和果醋发酵的菌种不同，但代谢类型相同
D. 装置乙的排气口通过一个长而弯曲的胶管，可防止空气中微生物的污染
【答案】C
【解析】
【分析】1、果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解为醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30-35℃。
2、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～25℃。
【详解】A、乙装置既有进气口，也有排气口，可先用于果酒的制作，后用于果醋的制作，甲装置是密闭空间，可先用于果酒的制作，打开后用于果醋的制作，A正确；
B、利用装置甲制作腐乳时，酵母、曲霉和毛霉均参与了豆腐的发酵，B正确；
C、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其代谢类型是异养兼性厌氧型，参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其代谢类型是异养需氧型，C错误；
D、装置乙的排气口通过一个长而弯曲的胶管，排出果酒和果醋制备时产生的二氧化碳，而且能防止空气中微生物的污染，D正确。
故选C。
12. 某同学尝试制作果醋，他将新鲜葡萄汁放入已灭菌的发酵装置中进行实验（见下图）。下列有关叙述正确的是

A. 新鲜葡萄汁必须灭菌
B. 发酵液的pH会下降，温度可能有所升高
C. 应把发酵装置始终放在18—25℃的环境中
D. 果酒发酵时始终关闭阀a、阀b，果醋发酵时打开阀a、阀b
【答案】B
【解析】
【分析】据图可知，该同学实现利用酵母菌的无氧呼吸制作果酒，然后利用醋酸菌的有氧呼吸制作果醋，需要根据不同发酵时期微生物代谢类型的不同控制发酵条件。
【详解】A、制作果醋过程中，初期的无氧环境和酵母菌无氧呼吸产生的酒精会抑制其他微生物的繁殖，新鲜葡萄汁不需要灭菌，A错误；
B、发酵过程中酵母菌、醋酸菌产生的代谢产物会导致发酵液的pH会下降，呼吸作用时释放的热量会使装置内温度有所升高，B正确；
C、酒精发酵适宜温度在18~25℃，醋酸发酵适宜温度在30~35℃，C错误；
D、果酒发酵时关闭阀a，需定时打开阀b释放酵母菌无氧呼吸产生的二氧化碳，D错误。
故选B。
13. 下列关于腐乳的制作过程的叙述，正确的是（）
A. 腐乳的“皮”是因盐的作用下，毛霉菌丝死亡附着在表面形成
B. 豆腐中的蛋白质在毛霉细胞中被蛋白酶分解为小分子物质
C. 装瓶阶段加入料酒可有效防止杂菌污染
D. 加盐腌制主要作用是析出豆腐中的水分，还可抑制微生物的生长，此时发酵停止
【答案】C
【解析】
【分析】腐乳的制作是利用毛霉等微生物产生的蛋白酶、脂肪酶，把豆腐中的蛋白质、脂肪分解为小分子有机物，在长出毛霉后，可用加盐、加卤汤的方法抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质。
【详解】腐乳的“皮”是霉菌菌丝繁殖于表面而形成，A项错误；豆腐中的蛋白质在毛霉细胞分泌的蛋白酶作用下分解为小分子物质，B项错误；装瓶阶段加入料酒可抑制微生物的生长，并使腐乳具有独特的香味，C项正确；加盐腌制可析出豆腐中的水分，抑制微生物的生长，此时毛霉产生的酶可继续发挥作用，发酵仍在进行，D项错误。
14. 我国劳动人民利用发酵技术的历史源远流长，下列有关传统发酵技术的应用叙述正确的是（　）
A. 制作果酒、果醋的菌种属于真核生物，制作腐乳、泡菜的菌种属于原核生物
B. 制作果酒、果醋在无氧条件下进行，制作腐乳、泡菜需在有氧条件下进行
C. 制作果酒、果醋、泡菜主要利用的是胞内酶，制作腐乳主要利用的是胞外酶
D. 变酸的果酒表面观察到的白色菌膜是酵母菌在液面大量繁殖形成的
【答案】C
【解析】
【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。果酒制作的原理：
(1)在有氧条件下，反应式如下： C6H12O6 +6O2→6CO2+6H2O；
(2)在无氧条件下，反应式如下： C6H12O6→2CO2+2C2H5OH。
2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：
当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。
当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
3、腐乳制作的菌种主要是毛霉，代谢类型是需氧型真菌，属于真核细胞，条件是15-18℃，一定湿度。
【详解】A、制性果酒的酵母菌属于真核生物，制作果醋的醋酸菌属于原核生物，制作腐乳的毛霉属于真核生物，A错误；
B、制作果酒在无氧条件下进行，制作果醋、腐乳需在有氧条件下进行， B错误；
C、制作果酒、果醋主要利用的是胞内酶，制作腐乳主要利用的胞外酶， C正确；
D、在变酸的果酒表面观察到的菌膜可能是醋酸菌在液面大量繁殖形成的， D错误。
【点睛】本题考查果酒和果醋的制作、腐乳的制作，要求考生识记参与果酒制作的微生物及其代谢类型，掌握果酒制作的流程；识记腐乳制作的流程及相关细节，能结合所学的知识准确判断各选项。
15. 三唑酮是一种含氮有机物，是农业生产上常用的除菌剂。研究者为了筛选出能降解三唑酮的菌种用于土壤修复，进行了相关操作：①将10g土样加入无菌水制成101倍稀释液，再依次等比稀释后接种②灭菌③配制培养基④倒平板⑤培养、筛选和鉴定。下列叙述正确的是（ ）
A. 正确的操作顺序为③④②①⑤
B. 步骤①中应加入100mL无菌水
C. 步骤②中对培养基灭菌可采用干热灭菌法
D. 培养基中的三唑酮可为该菌种提供碳源和氮源
【答案】D
【解析】
【分析】微生物纯培养包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤。
【详解】A、筛选出能降解三唑酮的菌种的操作顺序为：配制培养基、灭菌、倒平板、将10g土样加入无菌水制成101倍稀释液，再依次等比稀释后接种、培养、筛选和鉴定，即正确顺序为③②④①⑤，A错误；
B、步骤①将10g土样加入无菌水制成101倍稀释液，应加入90mL无菌水，B错误；
C、步骤②中对培养基灭菌可采用高压蒸汽灭菌法，干热灭菌法温度高，可能会导致培养基焦糊，C错误；
D、三唑酮是一种含氮有机物，含有碳和氮，可为该菌种提供碳源和氮源，D正确。
故选D。
16. 下列有关微生物培养基及其配制的叙述，正确的是（　　）
A. 对培养基常用的灭菌方法有干热灭菌、灼烧灭菌和煮沸灭菌等
B. 若需要调节pH，则应该在对培养基进行湿热灭菌后进行调节
C. 家庭制作腐乳时，豆腐块就是毛霉、曲霉、酵母等的培养基
D. 固体培养基一般都含有碳源、氮源、水、无机盐、琼脂等营养物质
【答案】C
【解析】
【分析】实验室常用的灭菌方法：
①灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌。
②干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌。③高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100kPa,温度为121℃的条件下，维持15～30min。
【详解】A、对培养基常用的灭菌方法有干热灭菌和湿热灭菌等，A错误；
B、若需要调节pH，则应该在对培养基进行灭菌前进行调节，B错误；
C、家庭制作腐乳时，毛霉、曲霉、酵母等所需营养物质均来自豆腐块，因此豆腐块就是它们的培养基，C正确；
D、固体培养基中添加的琼脂被用作凝固剂，不属于营养物质，D错误。
故选C。
17. 如图为从土壤中分离纯化尿素分解菌的过程。酚红在碱性环境中呈红色。下列有关叙述错误的是（ ）

A. ①②③④培养基都应以尿素为唯一氮源
B. 图中所用培养基灭菌常用方法是高压蒸汽灭菌
C. ④过程采用稀释涂布平板法进行接种，接种工具是涂布器
D. 可用酚红染料鉴定，菌落周围是否出现红色圈
【答案】C
【解析】
【分析】据图分析，土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验中，需要使用以尿素为唯一氮源的选择培养基，计数的关键是经梯度稀释后的倍数要合适，计数时通常选择菌落数在30-300之间的实验组平板进行计数。
【详解】A、尿素分解菌可以产生脲酶将尿素分解，从而能利用尿素，其它微生物不能，因此要分离纯化尿素分解菌，培养基都应以尿素为唯一氮源，A正确；
B、对培养基的灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌法，B正确；
C、据图可知，④过程采用的是平板划线法进行接种，接种工具是接种环，C错误；
D、分解尿素的菌能将尿素转化成氨气，使培养基碱性增强，pH升高，酚红指示剂会变红，因此可用酚红染料鉴定，菌落周围是否出现红色圈来鉴定，D正确。
故选C。
18. 下列关于微生物纯化培养的叙述，错误的是（　　）
A. 倒平板操作应等培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近进行
B. 微生物的纯化培养包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤
C. 用平板划线法和稀释涂布平板法都能在固体培养基上得到单菌落
D. 涂布平板时应先将培养皿盖置于实验操作台上
【答案】D
【解析】
【分析】微生物常见的接种的方法：
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】A、倒平板操作应等培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近进行，这样操作的目的是一方面该温度为刚不烫手的温度，另一方面在酒精灯火焰旁的目的是保证无菌环境，A正确；
B、微生物的纯化培养的步骤包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤，其目的是获得纯培养物，B正确；
C、用平板划线法通过连续划线操作可得到单菌落，稀释涂布平板法在稀释倍数足够高的情况下，可知通过涂布在培养基上获得单菌落，即平板划线法和稀释涂布平板法都能在固体培养基上得到单菌落，C正确；
D、涂布平板时不能完全掀开培养皿盖，将其置于实验操作台上，只需要打开一条缝隙，D错误。
故选D。
19. 纸片扩散法是药敏试验中一种常用的方法。取少量大肠杆菌的培养液，均匀涂在培养皿内的培养基上，再放上4片含有链霉素（抗生素的一种）的圆形滤纸，然后在无菌适宜条件培养12~16h，滤纸片周围出现抑制大肠杆菌生长的环圈（简称抑菌圈，见下图）。下列相关叙述错误的是（ ）

A. 图1中的培养基需冷却至50℃左右时再倒平板，该操作需要在酒精灯旁完成
B. 图2中所示培养基的放置方式，能防止水分过快蒸发和冷凝水珠冲散菌落
C. 图3培养皿上大肠杆菌的接种方式为涂布平板法，Ⅳ号纸片上抗生素浓度最高
D. 图3所示的抑菌圈内出现大肠杆菌菌落的原因是链霉素使其发生了基因突变
【答案】D
【解析】
【分析】抑菌圈的大小可以反映测试菌对药物的敏感程度。抑菌圈越大，说明该菌对此药敏感性越大，反之越小，若无抑菌圈，则说明该菌对此药具有耐药性。透明圈直径大小与药物浓度、细菌浓度有直接关系。
【详解】A、对培养液进行灭菌后需冷却再倒平板，倒平板时应在酒精灯前进行，可以尽可能减少培养基污染，A正确；
B、接种后的培养基需要倒置放置，这样可以防止培养基中水分过快蒸发，同时防止冷凝形成的水珠倒流冲散菌落，B正确；
C、图3所示为涂布平板法进行接种，纸片上的抗生素浓度越大，所形成的抑菌圈就越大，故Ⅳ号纸片上的抗生素浓度最高，C正确；
D、Ⅳ的抑菌圈中出现了少数几个菌落说明这几个菌落出现了抗药性，抗药性的获得是由于这些细菌发生了基因突变，抗生素只是将具有抗药性突变的细菌从中筛选出来，D错误。
故选D。
20. 某生物兴趣小组同学进行了微生物的分离与培养实验，实验结果如下图所示。下列相关叙述正确的是（　　）

A. 甲为选择培养基，接种后应立即倒置，以防止冷凝水滴落污染培养基
B. 欲获得强分解效果的菌落，可选择甲图中透明圈直径与菌落直径比值大的II菌落
C. 乙图接种方式为平板划线法，划线前必须将菌液进行梯度稀释，方可获得单菌落
D. 乙图第二次后的划线起点为上次末端，每次划线都要灼烧接种环，共需灼烧3次
【答案】B
【解析】
【分析】微生物常见的接种的方法：（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】A、甲培养基可以筛选微生物，属于鉴别培养基，接种后应立即倒置，以防止冷凝水滴落污染培养基，A错误；
B、透明圈的越大的分解菌的分解能力越强，则透明圈直径与菌落直径比值越大，所以选择甲图中透明圈直径与菌落直径比值大的II菌落，B正确；
C、乙图接种方式为平板划线法，划线前不需要将菌液进行梯度稀释，C错误；
D、乙图第二次后的划线起点为上次末端，接种前需要灼烧接种环，每次划线前后都要灼烧接种环，所以共需灼烧4次，D错误。
故选B。
21. 无菌技术包括以下几个方面的叙述，其中正确的是（　　）
A. 紫外线照射前，适量喷洒石炭酸等消毒液，可以加强消毒效果
B. 牛奶的消毒常用紫外线消毒法
C. 为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落
D. 在微生物接种的实验中，用95%酒精对实验者的双手和超净工作台进行消毒
【答案】A
【解析】
【分析】无菌技术的概念：无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。灭菌与消毒技术是微生物有关工作中最普通也是最重要的技术。
【详解】A、用紫外线照射30min，可以杀死物体表面或空气中的微生物，在照射前，适量喷洒石炭酸等消毒液，可以加强消毒效果，A正确；
B、牛奶常利用高温消毒来杀菌以延长牛奶的保质期，因此属于巴氏消毒法，，B错误；
C、为了防止污染，接种环经火焰灭菌、冷却后才可以快速挑取菌落，C错误；
D、在微生物接种的实验中，一般用75%酒精对实验者的双手进行消毒，用紫外线照射30min对超净工作台进行灭菌，D错误；
故选A。
22. 有关培养基的叙述正确的是（　　）
A. 培养基在灭菌之后必须将pH值调至适宜范围
B. 碳源和氮源必需具有一定的比例，且碳源和氮源都越多越好
C. 微生物的生长除受营养因素影响外，还受到pH、氧等的影响
D. 倒平板时需待培养基冷却至室温，在酒精灯火焰附近倒平板
【答案】C
【解析】
【分析】培养基按其所含成分，可分为合成培养基、天然培养基和半合成培养基三类。培养基按其物理状态可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基三类。固体培养基中去除琼脂即可制成液体培养基，微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见菌落。
【详解】A、配制培养基时，先调节pH值后才能灭菌，A错误；
B、碳源和氮源没有一定的比例关系，且并非碳源和氮源都越多越好，B错误；
C、微生物的生长除受营养因素影响外，还受到 pH、氧、温度等的影响，C正确；
D、倒平板时需待培养基冷却至50度左右，为了避免污染需要在酒精灯火焰附近倒平板，D错误。
故选C。
23. 在分离、纯化大肠杆菌实验中，划线接种及其培养结果分别如下图甲、乙所示。下列相关叙述错误的是（　　）

A. 图甲中的划线操作完成的顺序是a→b→c→d
B. 图甲中的划线操作至少需要对接种环灼烧5次
C. 图甲划线完成后需放在恒温培养箱中进行培养
D. 图乙中纯化的大肠杆菌可采用甘油管藏法保存
【答案】A
【解析】
【分析】平板划线法平板划线操作的步骤是：①将接种环在酒精灯火焰上灼烧直至烧红。②在酒精灯火焰旁冷却接种环，并打开盛有菌液的试管的棉塞。③将试管口通过火焰。④将冷却的接种环伸入到菌液中，沾取一环菌液。⑤将试管口通过火焰，塞上棉塞。⑥左手将皿盖打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划3～5条平行线，盖上皿盖。注意不要划破培养基。⑦灼烧接种环，待其冷却后，从第一区域划线的末端开始往第二区域内划线。重复以上操作，在三、四、五区域内划线。注意不要将最后一区的划线与第一区相连。对于要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法。
【详解】A、采用平板划线法接种微生物，由于聚集的菌种会随着连续划线的操作逐步被稀释分散到培养基的表面，因此得到的菌落数会随着划线操作完成的顺序越来越少，据此分析图乙的培养效果图可推知：图甲中的划线操作完成的顺序是d →c→b →a，A错误；
B、为了防止杂菌污染，划线前及每次划线后都要对接种环进行灼烧灭菌，图甲中进行了4次划线操作，至少需要对接种环灼烧5次，B正确；
C、图甲划线完成后，待菌液被培养基吸收，需要将接种后的平板倒置，在恒温培养箱中进行培养，C正确；
D、图乙中纯化的大肠杆菌，若需要长期保存，可采用甘油管藏法，D正确。
故选A。
24. 影印平板培养法是使在一系列培养基的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法。某学者利用此方法研究大肠杆菌抗链霉素性状产生的原因，先将原始菌种接种在1号培养基上，培养出菌落后，用灭菌绒布在1号上印模，绒布沾上菌落并进行转印，使绒布上的菌落按照原位接种到2号和3号培养基上、待3号上长出菌落后，在2号上找到对应的菌落，然后接种到不含链霉素的4号培养液中，培养后再接种到5号培养基上，并重复以上步骤。实验过程如图所示。下列相关叙述正确的是（　　）

A. 在大肠杆菌培养操作过程中，所用的实验器具和试剂都必须要高压蒸汽灭菌
B. 3、7、11接种的方法是涂布分离法
C. 与4号培养液相比，8号中的抗链霉素菌株的比例更大
D. 大肠杆菌抗链霉素性状的产生是由链霉素的选择作用引起的
【答案】C
【解析】
【分析】1、微生物实验室培养的核心是防止杂菌污染，常用的灭菌方法为：高压蒸汽灭菌法、灼烧灭菌、干热灭菌法等。接种环、涂布器常用灼烧灭菌法灭菌，培养基一般用高压蒸汽灭菌法灭菌，玻璃器皿常用干热灭菌法灭菌。该实验中含链霉素的培养基是选择培养基，能筛选出抗链霉素的大肠杆菌。
2、分析实验过程：先将原始菌种接种在1号培养基上，培养出菌落后，将灭菌绒布在1号上印模，绒布沾上菌落并进行转印，使绒布上的菌落按照原位接种到2号和3号培养基上。3号上长出的菌落为抗链霉素的菌落，在2号上找到对应的菌落，然后接种到不含链霉素的4号培养液中扩大培养，培养后再接种到5号培养基上，并重复以上步骤。可见通过影印平板培养法接种时，是筛选出抗链霉素的大肠杆菌继续培养。
【详解】A、在大肠杆菌培养操作过程中，并非所用的实验器具和试剂都要高压蒸汽灭菌，如涂布器用灼烧灭菌法灭菌，玻璃器皿常用干热灭菌法灭菌，A错误；
B、影印培养法是一种类似“盖章”的接种方法，使一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落，3、7、11接种方法是影印培养法的接种方法，B错误；
C、据题意，将2号平板上抗链霉素的大肠杆菌接种到4号培养液中，再将4号菌液接种到5号培养基，待5号长出菌落后通过影印平板培养法接种6号和7号，7号培养基长出的菌落是抗链霉素的，在6号培养基找到对应的菌落，接种到8号培养液，由于选择代数的增加，4号与8号培养液中，抗链霉素菌株的比例逐渐增大，C正确；
D、链霉素起到选择作用，不能决定大肠杆菌变异的方向，大肠杆菌抗链霉素的性状是基因突变的结果，而不是由链霉素的选择作用引起的，D错误。
故选C。
25. 下列关于土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验操作的叙述，错误的是（　　）
A. 利用稀释涂布平板法准确估计菌落数目的关键是有恰当的稀释度
B. 若要判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置未接种的牛肉膏蛋白胨培养基作为对照
C. 该实验每隔24h统计一次菌落数目，并以菌落数目稳定时的记录作为结果
D. 用以尿素为唯一氮源且添加了酸碱缓冲剂的培养基来培养该细菌后不会使酚红指示剂变红
【答案】B
【解析】
【分析】培养基选择分解尿素的微生物的原理：只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，故选择培养基应以尿素作为唯一氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。
【详解】A、利用稀释涂布平板法准确估计菌落数目的关键是恰当的稀释度，稀释倍数太低，菌落太多会长在一起，稀释倍数太高，平板上菌落数目过少，都不易进行计数，A正确；
B、若要判断选择培养基是否起到了选择作用，需设置接种了的没有选择作用的细菌通用的牛肉膏蛋白胨培养基作对照，B错误；
C、该实验每隔24h统计一次菌落数目，并以菌落数目稳定时的记录作为结果，C正确；
D、以尿素为唯一氮源且添加了酸碱缓冲剂的培养基来培养该细菌后，培养基的pH相对稳定，不会使酚红指示剂变红，D正确。
故选B。
26. 自然界中微生物无处不在，既能引起生物的病症也能为人类所用。下列有关叙述，正确的是（ ）
A. 微生物实验中，使用后的培养基在丢弃前一定要进行消毒处理，以免污染环境
B. 尿素分解菌产生的脲酶催化尿素分解产生的NH3、CO2，能为其提供氮源和碳源
C. 应用发酵工程生产青霉素过程中，青霉菌产生的青霉素酶往往使部分青霉素分解
D. 常用的、快速直接的显微镜直接计数法统计的结果一般是活菌数和死菌数的总和
【答案】D
【解析】
【分析】微生物培养过程中要进行无菌操作，关键就在于防止外来杂菌的入侵，其中消毒和灭菌是常用的防止杂菌入侵的方法。
【详解】A、使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理，不能直接丢弃，以免污染环境，A错误；
B、尿素分解菌属于异养型微生物，其碳源为有机碳源，CO2不能作为其碳源，B错误；
C、在青霉素生产过程中如果污染了杂菌，某些杂菌会分泌青霉素酶将青霉素分解掉，C错误；
D、微生物的计数方法主要包括两种：菌落计数法和显微镜直接计数法，其中后者是一种常用的、快速直观的测定微生物数量的方法，该方法统计的结果一般是活菌数和死菌数的总和，D正确。
故选D。
27. 固氮微生物能将大气中的分子氮还原成氨，而其他微生物不能。为了从土壤中分离自生固氮菌，某课题小组的A同学从稀释了106倍的无氮培养基中筛选出大约150个菌落。但是，其他同学在同样的稀释度下只筛选出大约50个菌落。为确定A同学的结果是否有问题，该小组同学不必做的是（ ）
A. 观察A同学培养基上长出的菌落是否具有固氮菌的特征
B. 其他同学用A同学的土壤样液再做一次同样的实验
C. 将A同学得到的菌落接种到新的选择培养基上，观察菌落能否存活
D. 其他同学将A同学的培养基分离提纯以确定是否含氮
【答案】D
【解析】
【分析】稀释涂布平板计数法的原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。统计平板上的菌落数，就能推测样品中大约含有多少活菌。其计算公式：每克样品中的菌株数=（C÷V）×M（C代表某一稀释度下平板生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积，M代表稀释倍数）。选择培养基是指允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。
【详解】A、A同学筛选出来的菌落数明显多于其他同学，原因可能是A同学的培养基受到污染，混入了其他含氮的化合物，导致其他不能固氮的微生物也能在其上生长。由于自生固氮菌的菌落特征与其他微生物不同，所以其他同学可以通过观察A同学的培养基上长出的菌落特征来确定A同学的结果是否有问题，A不符合题意；
B、由于土壤取样可能存在差异，所以其他同学可以用A同学的土壤样液再做一次同样的实验，统计菌落数，然后与A同学的结果进行比较，B不符合题意；
C、将A同学得到的菌落转移到新的选择培养基上，观察菌落的生长情况，若是固氮菌则能正常生长，若不能正常生长，则说明A同学的培养基上有杂菌，C不符合题意；
D、由于自生固氮菌在生长过程中会分泌含氮化合物，所以将A同学的培养基分离提纯无法确定A同学的结果是否有问题，D符合题意。
故选D。
28. 在“分离土壤中分解尿素的细菌”实验中，为判断是否起到了分离效果，提高实验结果的可信度，需要精心设置对照。对照组的设置方式为（　　）
A. 牛肉膏蛋白胨培养基上接种相同土壤样液
B. 牛肉膏蛋白胨培养基上接种无菌水
C. 筛选分解尿素细菌的选择培养基不接种
D. 筛选分解尿素细菌的选择培养基上接种无菌水
【答案】A
【解析】
【分析】对照实验：在探究某种条件对研究对象的影响时，对研究对象进行的除了该条件不同以外，其他条件都相同的实验。根据变量设置一组对照实验，使实验结果具有说服力。一般来说，对实验变量进行处理的，就是实验组，没有处理是的就是对照组。
【详解】A、本实验中，目的是为了判断选择培养基是否起到了分离效果，故应用牛肉膏蛋白胨培养基作为对照，接种相同土壤样液观察菌落的多少，通过两种培养基上菌落的多少，可判断选择培养基是否起到了分离效果，A正确；
B、牛肉膏蛋白胨培养基上接种无菌水可用于检测培养基是否合格，与题意不符，B错误；
C、筛选分解尿素细菌的选择培养基是实验组，应该接种，否则无法达到筛选的目的，C错误；
D、筛选分解尿素细菌的选择培养是为了增加细菌的数量，保证筛选的成功，不是对照组，故应接种适量适宜浓度的土壤样液，D错误。
故选A。
29. 下列关于细菌分离、培养的叙述中，正确的是（ ）
A. 不同种类细菌的生长均需要相同碳源
B. 用含有机磷农药为唯一碳源的培养基可分离出降解有机磷农药的细菌
C. 常用液体培养基分离获得细菌单菌落
D. 用含尿素的培养基可选择分离出能分解利用尿素的细菌
【答案】B
【解析】
【分析】实验室中微生物的筛选，应用的原理是：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。
【详解】A、不同种类细菌的生长需要不同碳源，A错误;
B、用含有机磷农药为唯一碳源的培养基可分离出降解有机磷农药的细菌，B正确;
C、常用固体或半固体培养基分离获得细菌单菌落，C错误;
D、用只含尿素作为氮源的培养基可选择分离出能分解利用尿素的细菌，D错误。
故选B。
30. 幽门螺杆菌（能分泌脲酶）感染是急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素，严重者则发展为胃癌。我国的共餐制是导致幽门螺杆菌高发的重要原因。在患者体内采集样本并制成菌液后进行培养。下列叙述正确的是（ ）
A. 对幽门螺杆菌进行分离和计数可采用平板划线法进行接种
B. 若空白对照组长出了菌落，则应将实验组的菌落数减去空白对照组的菌落数
C. 幽门螺杆菌可能通过分解尿素产生氨以适应胃部的酸性环境
D. 分离纯化幽门螺杆菌时应使用以铵盐为唯一氮源的选择培养基
【答案】C
【解析】
【分析】分离纯化细菌的方法包括平板划线法和稀释涂布平板法；脲酶可以将尿素分解成二氧化碳和氨气。
【详解】A、稀释涂布平板法可用于微生物计数而平板划线法不能计数，A错误；
B、若空白对照组长出了菌落，则说明培养基遭到杂菌污染，应重新配制培养基，B错误；
C、幽门螺杆菌可以合成脲酶，可以将尿素分解成氨气，呈碱性，能中和胃部的酸以适应胃部的酸性环境，C正确；
D、幽门螺杆菌可以合成脲酶，可以利用尿素，所以分离纯化幽]螺杆菌时应使用以尿素为唯一氮源的培养基，D错误。
故选C。
31. 关于“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验的叙述，错误的是（ ）
A. 测定土壤中细菌数量，一般选用102、103、104倍的稀释液
B. 在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红溶液可初步鉴定产生脲酶的细菌
C. 计数时选取菌落数目稳定时的记录作为结果
D. 该培养基中必须含有水、无机盐、碳源和氮源四种成分
【答案】A
【解析】
【分析】培养基的概念及营养构成
（1）概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质。
（2）营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求．例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件。
【详解】A、测定土壤中细菌数量时，一般选用104、105、106倍的稀释液进行平板培养，测定土壤中真菌的数量，一般选用102、103、104倍的稀释液进行涂布培养，A错误；
B、要鉴定分解尿素的细菌，可以在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌，若指示剂变红，可确定该种细菌能够分解尿素，B正确；
C、计数时选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样不会导致计数是遗漏菌落，C正确；
D、培养微生物的培养基中一般包含的营养物质有水、无机盐、碳源和氮源四种成分等，该培养基中也不例外，D正确。
故选A。
32. 下图所示为分离某种以尿素为氮源的细菌实验过程，下列叙述错误的是（ ）

A. 土样从有哺乳动物尿液的地方取，获得目的菌种的概率很高
B. 为验证尿素固体培养基具有选择作用，可用牛肉膏蛋白胨固体培养基做对照
C. 若从D试管取样后涂布平板菌落平均值为56，则每克图样中含有此种菌5.6×107个
D. 在尿素固体培养基上生长的细菌都是以尿素为氮源的细菌
【答案】D
【解析】
【分析】分离某种以尿素为氮源的细菌实验过程：土壤取样→样品的稀释→将稀释液涂布到以尿素为唯一氮源的培养基上→挑选能生长的菌落→鉴定。
【详解】A、在含哺乳动物排泄物的土壤中有较多能合成脲酶的细菌，因此土样从有哺乳动物尿液的地方取，获得目的菌种的几率很高，A正确；
B、取不同稀释倍数的土壤稀释液各0.1mL，分别涂布于牛肉膏蛋白胨固体培养基、尿素固体培养基上，其中牛肉膏蛋白胨固体培养基是对照，用以说明尿素固体培养基是否有选择作用，B正确；
C、D试管取样后涂布平板菌落平均值为56，则1g土壤样本中约有分解尿素的细菌56÷0.1×105=5.6×107个，C正确；
D、在尿素固体培养基上生长细菌大多数是以尿素为氮源的细菌，还有一些利用空气中氮的微生物也能生长，D错误。
故选D。
33. 下列有关微生物实验室培养的说法正确的有（ ）
A. 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序为计算、称量、溶化、消毒、倒平板
B. 分离分解纤维素的细菌的培养基中纤维素是唯一的碳源
C. 配制培养霉菌的培养基时要将pH调至中性或微碱性
D. 显微镜直接计数法、稀释涂布平板法都可以统计待测菌液中的活菌数目
【答案】B
【解析】
【分析】1、微生物培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。例如，培养乳酸菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时需要将培养基pH调至酸性，培养细菌时需要将培养基pH调至中性或微碱性，培养厌氧微生物时需要提供无氧条件。
2、微生物常见的接种的方法①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。（该方法可用于微生物的计数）
【详解】A、制备固体培养基的操作顺序为计算、称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板，A错误；
B、分离能分解纤维素的细菌时要以纤维素作为培养基中唯一的碳源，从而达到选择的目的，B正确；
C、不同的微生物培养需要的pH是不同的，如培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，C错误；
D、显微镜直接计数法不能区分死菌与活菌，稀释涂布平板法可用于统计待测菌液中的活菌数目，D错误。
故选B。
34. 为筛选对金黄色葡萄球菌有最佳疗效的抗生素，研究者分别将含等剂量抗生素A、B、C、D的四张大小相同的滤纸片a、b、c、d置于金黄色葡萄球菌均匀分布的平板培养基上，在适宜条件下培养48h，结果如图所示。下列相关叙述正确的是（　　）

A. 为获得金黄色葡萄球菌均匀分布的平板，需要使用图中工具①②④
B. 上述培养基需要添加碳源、氮源、琼脂等营养物质
C. 四种抗生素中，抑菌效果最佳的是抗生素A、最差的是抗生素D
D. 滤纸片b周围透明圈中出现一个菌落的原因可能是该菌落发生了染色体变异
【答案】C
【解析】
【分析】分析题图：图示表示分别将含等剂量抗生素A、B、C、D四张大小相同的滤纸片a、b、c、d置于金黄色葡萄球菌均匀分布的平板培养基上，抑菌圈越大，说明该抗生素的抑菌效果越好。
【详解】A、为获得金黄色葡萄球菌均匀分布的平板，需要使用图中工具①酒精灯②涂布器和③固体培养基，不用④接种针，A错误；
B、述培养基需要添加碳源、氮源、水、无机盐和琼脂等营养物质，B错误；
C、抑菌圈越大，说明抗生素的抑菌效果越好，因此A、B、C、D四种抗生素，抑菌效果最佳的是抗生素A，最差的是抗生素D，C正确；
D、滤纸片b周围透明圈中出现一菌落，可能是该菌落发生了基因突变，产生抗性，D错误。
故选C。
35. 聚羟基脂肪酸酯（PHA）是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯，它具有类似于合成塑料的理化特性，且废弃后易被生物降解，可用于制造无污染的“绿色塑料”。如图为科学家从某咸水湖中寻找生产PHA菌种的流程图。下列相关叙述正确的是（　　）

A. 步骤②可用平板划线法接种到含合成塑料的选择培养基上进行筛选
B. 如用稀释涂布平板法接种，需用涂布器蘸取少量菌液并均匀地涂布在培养基的表面
C. 挑取菌落时，应挑取多个菌落并分别测定嗜盐细菌的PHA含量
D. 步骤④扩大培养时，需要将接种后的培养基进行倒置培养
【答案】C
【解析】
【分析】由题意分析可知，聚羟基脂肪酸酯（PHA）是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯，故不能直接在以合成塑料为碳源的选择培养基上筛选出产聚羟基脂肪酸酯（PHA）的嗜盐细菌。
【详解】A、步骤②可用平板划线法接种到含盐量较高的选择培养基上，筛选嗜盐细菌，后经过扩大培养，检测菌的数目和PHA产量来获得目标菌株，A错误；
B、如用稀释涂布平板法接种，需用移液器将菌液滴加在培养基表面，再用灭菌后的涂布器将菌液均匀的涂布在培养基表面，B错误；
C、经步骤②筛选出的嗜盐细菌，其PHA产量可能有差异，甚至有的嗜盐细菌不产PHA，故挑取菌落时，应挑取多个菌落并分别测定嗜盐细菌的PHA含量，以获得目标菌株，C正确；
D、步骤④扩大培养时使用液体培养基，不进行倒置培养，D错误。
故选C。
36. 下列有关微生物实验室培养的说法不正确的有(　　)项。
①制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序：计算、称量、熔化、消毒、倒平板
②根据对生存环境的要求，在对应环境中寻找，就一定能寻找到目的菌株
③稀释涂布平板法是需将不同稀释浓度的菌液分别涂布到固体培养基表面
④灭菌是指杀灭物体内外一切微生物的细胞，不包括芽孢和孢子
⑤平板划线操作第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物感染操作者
⑥分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的氮源；
⑦平板划线在第二区域内划线时，接种环上的菌种直接来自第一次划线末端
A. 1项 B. 2项 C. 3项 D. 4项
【答案】D
【解析】
【分析】1、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的方法：计算、称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板。
2、微生物常见的接种的方法①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在划线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】①制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序：计算、称量、熔化、灭菌、倒平板，①错误；
②根据对生存环境的要求，在对应环境中寻找，可能能寻找到目的菌株，②错误；
③稀释涂布平板法是需将不同稀释浓度的菌液分别涂布到固体培养基表面，③正确；
④灭菌是指杀灭物体内外一切微生物的细胞，包括芽孢和孢子，④错误；
⑤平板划线操作第一步灼烧接种环是为了防止杂菌污染，⑤错误；
⑥只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，在分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的氮源，⑥正确；
⑦平板划线在第二区域内划线时，接种环上的菌种直接来自第一次划线末端，⑦正确。
故选D。
37. 关于微生物培养，叙述错误的是
A. 细菌一般在30﹣37℃下培养1﹣2天
B. 不同种类微生物，一般需要相同培养温度和时间
C. 霉菌一般在25﹣28度下培养3﹣4天
D. 放线菌一般在25﹣28度下，培养5﹣7天
【答案】B
【解析】
【详解】ACD、细菌一般在30～37℃的温度下培养l～2d，放线菌一般在25～28℃的温度下培养5～7d，霉菌一般在25～28℃的温度下培养3～4d，ACD正确；
B、不同种类的微生物，一般需要不同的培养温度和培养时间，B错误。
故选B。
38. 下列关于四种生物的能源、C源、N源和代谢类型的描述，其中正确的一组是

硝化细菌
乳酸菌
根瘤菌
衣藻
能源
氧化NH3
分解乳酸
固定N2
利用光能
C源
CO2
糖类
糖类
CO2
N源
NH3
N2
N2

代谢类型
自养需氧型
异养需氧型
异养需氧型
自养需氧型

A. 硝化细菌、乳酸菌 B. 乳酸菌、根瘤菌
C. 根瘤菌、衣藻 D. 硝化细菌、衣藻
【答案】D
【解析】
【详解】硝化细菌属于细菌，能氧化NH3，属于自养需氧型生物，描述正确；
乳酸菌不是自养型生物，其能源应是有机碳源，描述错误；
根瘤菌不是自养型生物，能源应是糖类等有机物，而不是乳酸，描述错误；
衣藻属于真核生物，能进行光合作用，描述正确。
综合上述的分析，四种生物的能源、C源、N源和代谢类型的描述均正确的一组为硝化细菌和衣藻，D正确。
故选D。
39. 下列关于微生物的叙述，错误的是（　　）
A. 硝化细菌能以NH3作为氮源和能源物质
B. 培养分解尿素的细菌只需加入尿素而不需加其他能源物质
C. 维生素是某些细菌生长过程中需要额外补充的营养物质
D. 含伊红和美蓝试剂的培养基可用来鉴别牛奶中的大肠杆菌
【答案】B
【解析】
【分析】培养基的营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。培养基的分类：
①按物理性质分，分为液体培养基和固体培养基，固体培养基中含有凝固剂，一般是琼脂。
②按化学成分分，分为天然培养基和合成培养。两者的区别是天然培养基成分不确定，合成培养基成分的含量是确定的。
③按用途分，分为选择培养基和鉴别培养基。选择培养基主要是培养、分离特定的微生物，培养酵母菌可在培养基中加入青霉素；鉴别培养基可以鉴定不同的微生物，比如鉴别饮用水中是否含有大肠杆菌，可以用伊红-美蓝培养基，如果菌落呈深紫色，并带有金属光泽，说明有大肠杆菌。
【详解】A、硝化细菌可以利用氧化氨释放的能量用来合成有机物，同时氨含有氮元素可以提供氮源，即硝化细菌能以NH3作为氮源和能源物质，A正确；
B、培养分解尿素的细菌应以尿素为唯一氮源，而还需加碳源、水、无机盐等，B错误；
C、生长因子是一类对微生物正常代谢必不可少且不能用简单的碳源或氮源自行合成的有机物，它的需要量一般很少，维生素就是某些细菌生长过程中需要额外补充的营养物质，C正确；
D、含伊红和美蓝试剂的培养基可以用来鉴别牛奶中的大肠杆菌，如果菌落呈深紫色，并带有金属光泽，说明有大肠杆菌，D正确。
故选B。
40. 利用微生物分解纤维素对废弃物污染的减轻和作物秸秆再利用具有重要意义。某兴趣小组从富含纤维素的土壤中取样，加入选择培养基中进行振荡培养，之后接种于鉴别培养基上进行培养，筛选出能够分解纤维素的微生物。下列叙述错误的是（　　）
A. 选择培养的目的是促进纤维素分解菌生长，抑制其他微生物的生长
B. 振荡培养可以增加溶解氧量，促进微生物对营养物质的充分接触和利用
C. 鉴别培养基上涂布接种时，将1mL菌液滴到培养基表面再用涂布器涂布均匀
D. 加入刚果红的鉴别培养基上出现透明圈的菌落，可能是能够分解纤维素的微生物
【答案】C
【解析】
【分析】从土壤中分离纤维素分解菌的一般步骤是：土壤取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株；筛选纤维素分解菌需要用以纤维素为唯一碳源的选择培养基，纤维素分解菌可以用刚果红染液进行鉴别，在培养基中加入刚果红染液，在其菌落周围会出现透明圈。
【详解】A、选择培养的原理是人为提供有利于目的菌生长的条件，同时抑制或阻止其他微生物的生长，因此选择培养的目的是促进纤维素分解菌生长，抑制其他微生物的生长，A正确；
B、振荡培养可以增加溶解氧量，促进微生物对营养物质和氧气的充分接触和利用，B正确；
C、鉴别培养基上涂布接种时，将0.1mL菌液滴到培养基表面再用涂布器涂布均匀，C错误；
D、加入刚果红的培养基上所出现的有透明圈的菌落，可能是分解纤维素的细菌或依赖刚果红而生存的真菌繁殖而成，D正确。
故选C。
二、综合题
41. 苹果醋富含果胶、维生素以及多种矿物质等营养成分，具有开胃护肝、排毒养颜、减肥降脂等多种功效，是近年来的流行饮品。图甲和图乙分别表示苹果醋的简易制作装置和制作流程，据图回答下列问题：

（1）若先用图甲所示的装置来生产苹果酒，则在果酒发酵的生产过程中，气阀a、b应保持的状态是_____，其中气阀b保持此状态的原因是______。
（2）若继续用图甲所示装置制作苹果醋，除打开气阀a、b以外，还需要改变的条件是①_____；②______。
（3）醋酸菌可将糖分解成乙酸，反应式：_______。
（4）若果汁中含有醋酸菌，在酒精发酵旺盛时，醋酸菌不能将果汁中的葡萄糖发酵为醋酸，说明原因_______。
【答案】（1） ①. 气阀a关闭，气阀b定期开放 ②. 将酵母菌（等微生物）产生的CO2及时排出
（2） ①. 气阀a处不断通入无菌空气/O2 ②. 将温度调整为30~35℃
（3）C6H12O6+2O2→酶→2CH3COOH+2H2O+2CO2+能量
（4）醋酸菌的发酵需要充足的氧气，而酒精发酵时的缺氧环境能抑制醋酸菌生长
【解析】
【分析】果酒制作菌种是酵母菌，代谢类型是异养兼性厌氧型，属于真核细胞，条件是18~25℃、前期需氧，后期不需氧。分析题图: 图示表示苹果醋的制作流程图，其中①表示果酒发酵，②表示果醋发酵。
【小问1详解】
由图甲观察可知，气阀a是进气阀，气阀b是排气阀，若先用图甲所示的装置来生产苹果酒，由于酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵，发酵过程中会产生二氧化碳，因此在果酒发酵的生产过程中，应给发酵罐保持无氧环境、同时定时排出酵母菌产生的二氧化碳，以平衡瓶内气压，即气阀a关闭，气阀b定期开放。
【小问2详解】
制作果醋利用的是醋酸菌，醋酸菌是好氧菌，其最适生长温度为30~35℃，若继续用图甲所示装置制作苹果醋，则需要改变的条件是①打开气阀a，不断通入无菌空气（氧气）；②将温度调整为30~35℃。
【小问3详解】
在O2和糖源都充足时醋酸菌能通过复杂的化学反应将糖分解为乙酸，反应式为： 。

【小问4详解】
醋酸菌的代谢类型是异养需氧型，醋酸菌的发酵需要充足的氧气。在酒精发酵旺盛时，缺氧环境不利于醋酸菌生长，醋酸菌不能将果汁中的葡萄糖发酵为醋酸。

42. 纤维素分解菌可分泌纤维素酶。某兴趣小组同学从富含纤维素的土壤中筛选并获得降解纤维素能力较强的纤维素分解菌，实验所用的培养基配方如下。
培养基Ⅰ：纤维素粉、NaNO3、Na2HPO4·7H2O、KH2PO4、MgSO4·7H2O、KCl、酵母膏、水解酪素
培养基Ⅱ：CMC-Na（水溶性羧甲基纤维素）、KH2PO4、酵母膏、刚果红、琼脂。兴趣小组在培养和筛选纤维素分解菌时得到如下图所示的平板。回答下列问题：

（1）从土壤取样后往往需对所配制的土壤样液进行选择培养，选择培养的目的是_____，请设计对照实验证明选择培养基具有选择作用：_____。
（2）在分离与计数纤维素分解菌时，某同学用_____法接种获得如图1、图2所示的结果，图2菌落分布与图1不同的原因是_____。
（3）另一同学将菌液接种在_____（填“培养基Ⅰ”或“培养基Ⅱ”）上获得如图3所示的菌落。如果要得到高效纤维素分解菌，应从图3中选择_____菌落进一步纯化。
（4）若将图3中的甲、乙两种菌落的细菌接种在培养基Ⅰ中培养一段时间后，甲、乙菌数量占比的变化情况是_____，其原因是_____。
【答案】（1） ①. 增加纤维素分解菌的浓度，以确保能从样品中分离得到所需的微生物 ②. 将等量的土壤样液接种于牛肉膏蛋白胨培养基，相同且适宜条件下培养，牛肉膏蛋白陈培养基的菌落数目明显大于选择培养基的数目，说明选择培养基具有选择作用
（2） ①. 稀释涂布平板 ②. 图①涂布均匀，图②涂布不均匀
（3） ①. 培养基Ⅱ ②. 乙
（4） ①. 甲菌的数量占比变小，乙菌的数量占比变大 ②. 甲菌因不能降解纤维素或降解能力弱而影响增殖，乙菌降解纤维素能力强而快速增殖
【解析】
【分析】培养基对微生物具有选择作用。配置培养基时根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求，加入某些物质或出去某些营养物质，一直其他微生物的生长，也可以根据某些微生物对一些物理、化学因素的抗性，在培养基中加入某种化学物质，从而筛选出待定的微生物。这种培养基叫做选择培养基。
【小问1详解】
本实验目的是从富含纤维素的土壤中筛选并获得降解纤维素能力较强的纤维素分解菌，选择培养是为了定向获得某种类型的微生物，从土壤取样后往往需对所配制的土壤样液进行选择培养，该选择培养的目的是增加纤维素分解菌的浓度，以确保能从样品中分离得到所需的微生物。证明选择培养基具有选择作用自变量为培养基的种类，实验组用选择培养基，对照组用没有选择作用的普通培养基，因此对照组为将等量的土壤样液接种于牛肉膏蛋白胨培养基，相同且适宜条件下培养，牛肉膏蛋白陈培养基的菌落数目明显大于选择培养基的数目，说明选择培养基具有选择作用。
【小问2详解】
据题意可知，培养基中的菌落分布相对均匀，因此接种方法为稀释涂布平板法。图1中菌落分布更加均匀，图2中左侧菌落较多，右侧较少，推测图2中菌落分布可能是涂布不均匀引起的。
【小问3详解】
培养基Ⅰ没有琼脂，属于液体培养基，培养基Ⅱ含有琼脂，属于固体培养基， 固体培养基广泛用于微生物的分离、鉴定、保藏、计数及菌落特征的观察等，图3中出现了菌落，推测应该是接种在培养基Ⅱ（固体培养基）上。刚果红是一种染料，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应，因此如果是高效纤维素分解菌，能分解培养基中的纤维素，进而形成透明圈，而乙中出现透明圈，即应从图3中选择乙菌落进一步纯化。
【小问4详解】
图3中甲菌落没有透明圈，应该是不含纤维素分解菌，乙菌落含有纤维素分解菌，培养基Ⅰ中含有纤维素粉，纤维素分解菌能在此培养基上生存，其他微生物不能，将甲、乙两种菌落的细菌接种在培养基Ⅰ中培养一段时间后，甲菌因不能降解纤维素或降解能力弱而影响增殖，乙菌降解纤维素能力强而快速增殖，因此甲菌的数量占比变小，乙菌的数量占比变大。
43. 以淀粉或纤维素的水解液、制糖工业的废液等为原料，通过发酵能获得单细胞蛋白。单细胞蛋白含有丰富的蛋白质、糖类、脂质和维生素等物质，可以用作食品添加剂。某兴趣小组通过实验分离出能分解纤维素的微生物。回答下列相关问题：
（1）实验小组尝试从收割后的小麦田里分离出分解纤维素的微生物，应该配制以_____为唯一碳源的培养基。配制的培养基用_____法灭菌，灭菌的作用是_____。
（2）若要对培养的细菌计数，则需要用稀释涂布平板法进行接种，当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的是单菌落，运用这种方法统计的结果往往比实际值偏小，理由是_____。
（3）能够分解纤维素的微生物体内能够合成纤维素酶，纤维素酶将纤维素水解为_____，若需要检测分离的微生物中是否含有目的菌株，应在培养基中加入_____染料。
【答案】（1） ①. 纤维素 ②. 高压蒸汽灭菌 ③. 杀死培养基中的所有微生物，包括芽孢和孢子
（2）当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落

（3） ①. 纤维二糖、葡萄糖
②. 刚果红

【解析】
【分析】 分离分解纤维素的微生物的实验流程：土壤取样→选择培养（此步是否需要，应根据样品中目的菌株数量的多少来确定）→梯度稀释→将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生透明圈的菌落。
【小问1详解】
在以纤维素为唯一碳源的培养基中，纤维素分解菌能利用纤维素作为碳源，从而很好地生长，其他微生物缺少碳源则不能正常生长，从而起到筛选作用；对培养基灭菌常用高压蒸汽灭菌法。
【小问2详解】
用涂布平板法接种，对细菌进行计数的原理是：“稀释度足够高时，培养基表面生长的单菌落认为是由一个细菌繁殖而来，即一个菌落等于一个细菌”，但当两个或多个细菌连在一起时，在平板上共同繁殖为一个菌落，我们统计的结果为一个菌落，即一个细菌，但实际是两个或多个细菌，这就会使统计的结果比实值小。
【小问3详解】
纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，葡萄糖苷酶将纤维二糖分解成葡萄糖，所以纤维素酶可将纤维素分解为纤维二糖、葡萄糖；刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物，纤维素分解菌将纤维素分解，红色复合物消失，即在菌落周围出现透明圈，从而达到鉴定目的。
44. 近年来，纪录片《舌尖上的中国》引发全民关注美食的热潮，其中多次讲述了利用不同微生物的发酵作用制作的美味食品。请分析回答下列问题：
（1）在果醋制作时，运用醋酸菌在供应______和糖源充足时，将果糖分解成醋酸；在糖源不充足时，也可以利用酒精生成醋酸，请写出该过程的反应式：_______。
（2）腐乳生产过程有多种微生物的参与，其中起主要作用的是______。腐乳制备过程中，加盐可以___，使豆腐块变硬。腐乳制作的流程是：让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制。用盐腌制时，应注意控制______；配制卤汤时，要使卤汤中酒的含量控制在______%左右。
（3）制作泡菜的原理是______。
【答案】（1） ①. 氧气 ②. C2H5OH+O2→CH3COOH+H2O
（2） ①. 毛霉 ②. 析出豆腐中的水分 ③. 盐的用量 ④. 12
（3）乳酸菌在无氧的环境下大量繁殖，将葡萄糖分解成乳酸
【解析】
【分析】1、果酒制作的原理：酵母菌是兼性厌氧菌，在无氧的环境中酵母菌把糖分解成酒精和二氧化碳，在有氧的情况下酵母菌生长繁殖速度快，把糖分解成二氧化碳和水。
2、腐乳制作过程中加酒的注意问题：加酒的目的之一是杀死微生物。如果过少，达不到杀死微生物的目的，导致豆腐腐败；若过多，不但杀死了微生物，而且会因酒精度过高抑制了酶的活性，从而影响腐乳的成熟，同时还会因酒精含量过高而影响腐乳的风味，一般应控制在12%左右。
【小问1详解】
在果醋制作时，用到的醋酸菌为好氧菌，在供应氧气和糖源充足时，将糖分解成醋酸；在糖源不充足时，也可以利用酒精和氧气生成醋酸，反应式为：C2H5OH+O2CH3COOH+H2O。
【小问2详解】
腐乳生产过程有多种微生物的参与，其中起主要作用的是毛霉；腐乳制作过程中，加盐可以提高渗透压，使豆腐中的水分析出，使豆腐块变硬；所以用盐腌制时，应注意控制盐的用量；配制卤汤时，要使卤汤中酒的含量控制在12%左右，若酒精浓度过高会抑制蛋白酶、脂肪酶等酶的活性，导致则腐乳的成熟时间将会延长，酒精含量过低，不足以抑制微生物生长，可能导致豆腐腐败。
【小问3详解】
制作泡菜的原理是利用乳酸菌在无氧的环境下大量繁殖，将葡萄糖分解成乳酸，从而使泡菜酸爽可口。
45. 乳酸菌在细胞代谢过程中会分泌细菌素、有机酸等物质，细菌素对多种食品中常见的致病菌具有广谱的抑菌活性。实验小组为了检测细菌素的抗菌活性，将富集培养后的乳酸菌菌株分离纯化，并接种到MRS液体培养基中。回答下列问题：
（1）纯化乳酸菌可以用平板划线法，该方法所用的接种工具是__________，对该工具进行灭菌的方法是___________。
（2）利用平板划线法纯化乳酸菌时，第二次及其后划线都要从上一次划线的________开始，目的是_________。平板划线法不能用于微生物的计数，其原因是______。
（3）用打孔法测定乳酸菌分泌的细菌素对指示菌的抑菌效果时，应该先吸取稀释的_______菌液涂布到平板中，再使用5mm直径的打孔器打孔，每孔分别注入离心后的50μLMRS液体培养基的_____（填“上清液”或“沉淀物”）。培养24h后测定抑菌圈的直径，当抑菌圈的直径至少大于________才能判断为具有抑菌活性。
（4）实验小组用经乳酸调节pH至3.5（与发酵48h后发酵液的pH相同）的MRS液体培养基作为空白对照组，观察其抑菌情况。设置该组实验的目的是__________。
【答案】（1） ①. 接种环 ②. 灼烧灭菌
（2） ①. 末端 ②. 使细菌数目随着划线次数的增加而逐步减少，便于获得单菌落 ③. 平板划线法只在划线末端出现单菌落，不能统计出单菌落数
（3） ①. 指示菌 ②. 上清液 ③. 5mm
（4）排除有机酸对细菌的抑制作用
【解析】
【分析】1、无菌技术的主要内容：①对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌；③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。
2、微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【小问1详解】
平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落，该方法所用的接种工具是接种环；灭菌方法有：湿热灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌，对接种环进行灭菌的常用方法为灼烧灭菌。
【小问2详解】
利用平板划线法纯化乳酸菌时，第二次及其后的划线都要从上一次划线的末端开始，从而使细菌数目随着划线次数的增加而逐步减少，便于获得单菌落，起到分离菌落的作用；但是平板划线法不能用于微生物的计数，因为平板划线法只在划线末端出现单菌落，而不能统计出单菌落数。
【小问3详解】
要研究的是乳酸菌分泌的细菌素对指示菌的抑菌效果，应该先吸取稀释的指示菌菌液涂布到平板中进行培养；在提取抑菌有效成分时，只需要获取细菌素这一物质即可，乳酸菌菌体主要分布在离心后的液体培养基的沉淀物中，其分泌物细菌素位于上清液，故需要吸取离心后液体培养基的上清液菌液涂布到平板中；
抑菌圈是指固体培养基表面与试样接触的边界处无菌繁殖的环带区域，利用待测次生代谢产物在琼脂平板扩散使其周围的细菌生长受到抑制形成的抑菌圈大小，而本实验用的是5mm直径的打孔器打孔，故注入相应物质后，培养24h后测定抑菌圈的直径，当抑菌圈的直径至少大于5mm才能判断为具有抑菌活性。
【小问4详解】
细菌的生命活动会受到环境理化性质的影响，实验小组用经乳酸调节pH至3.5（与发酵48h后发酵液的pH相同）的MRS液体培养基作为空白对照组，观察其抑菌情况，设置该组实验的目的是排除有机酸对细菌的抑制作用。
46. 研究发现，土壤中某种微生物能降解石油，分离降解石油的菌株和探索其降解机制的实验过程如图所示。回答下列问题：

（1）该实验所用的振荡培养的培养基只能以石油作为唯一碳源，其原因是_______。
（2）振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液中________的含量，同时可使菌体与培养液充分接触提高_______的利用率。
（3）为探究石油的降解机制，将该菌种的培养液过滤离心，取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是_______。
【答案】（1）只有能利用石油的微生物才能正常生长繁殖
（2） ①. 溶解氧 ②. 营养物质
（3）目的菌株能分泌降解石油的蛋白质
【解析】
【分析】微生物生长繁殖所需的主要营养物质有水、碳源、氮源和无机盐四类；选择培养基只允许特定种类的微生物生长，又要抑制或阻止其他种类微生物的生长。
【小问1详解】
该实验所用的振荡培养的培养基为选择培养基，只允许特定种类的微生物生长，又要抑制或阻止其他种类微生物生长，因而要筛选能降解石油的微生物，应该用以石油为唯一碳源的培养基，在该培养基上只有能利用石油的微生物能正常生长繁殖。
【小问2详解】
振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快，原因是振荡培养能提高培养液中溶解氧的含量，有利于细菌有氧呼吸供能；同时可使菌体与培养液充分接触，加快物质进出细胞的速度，以提高营养物质的利用率。
【小问3详解】
为探究石油的降解机制，将该菌种的培养液过滤离心，取上清液（含有可降解石油的物质）并在上清液中添加蛋白酶溶液（能水解蛋白质）做图乙所示实验，故实验的假设是目的菌株能分泌降解石油的蛋白质。