2024版新教材高考生物复习特训卷模块清通关卷模块四生物技术与工程

这是一份2024版新教材高考生物复习特训卷模块清通关卷模块四生物技术与工程，共13页。试卷主要包含了选择题，非选择题等内容，欢迎下载使用。
一、选择题（共20个小题，每小题2分，共40分。每小题只有一个选项符合题目要求）
1．[2023·辽宁模拟]“踏浆发酵酿酒法”是唐朝的一种主流红酒酿造工艺。踏浆发酵即是碾碎葡萄，用葡萄汁单纯发酵。“十年味不败”说明唐朝红酒技术的优良之处。下列相关说法错误的是（ ）
A．在葡萄酒酿制的整个过程中需要先通气后密封
B．酒精生成过程合成ATP所需能量来自于葡萄糖中的化学能
C．“踏浆”有利于葡萄皮表面的酵母菌与葡萄汁液充分混合
D．“十年味不败”主要与酵母菌发酵生成的酒精的消毒作用有关
2．[2023·福建漳州一模]唐代苏敬的《新修本草》云：“凡作酒醴须曲，而蒲桃（即葡萄）、蜜等酒独不用曲”。葡萄不仅可以酿造果酒，还可以酿造果醋，制作过程如下图。下列分析正确的是（ ）
A．“蒲桃、蜜等酒独不用曲”说明葡萄酿制果酒不需要微生物
B．取新鲜葡萄制作果酒、果醋时应先去梗再冲洗
C．制作果酒、果醋的后期都需要密闭处理
D．图中①过程比②过程产生的气体多
3．[2023·东北高三模拟]屠宰场废弃血污不经过处理直接排放，会对环境造成污染。传统的处理方法有填埋法和焚烧法等。填埋法易造成地表环境、地下水资源污染。焚烧法处理也会造成大气污染，且废弃物中所含的蛋白资源不能得到有效利用。研究人员以屠宰场血污堆积土壤为分离基质，利用血平板培养基（添加了动物血液），分离出了高效降解血红蛋白的菌株，并初步用于降解废弃血液、生产氨基酸液态肥料。下列叙述正确的是（ ）
A．上述菌株分离纯化过程中用到了稀释涂布平板法和平板划线法
B．对分离纯化得到的菌株培养后进行计数，只能采用稀释涂布平板法
C．血平板培养基上透明水解圈小的菌落分泌的蛋白酶的活性往往较高
D．实验中废弃培养基因含有降解血污的微生物，可以直接填埋
4．[2023·湖北十堰市模拟]进行垃圾分类收集可以减少垃圾处理时间，降低处理成本。科研小组欲分离及培养若干种微生物用于对湿垃圾（包括剩菜剩饭、骨头、菜根菜叶、果皮等食品类废物）的处理。下列有关叙述正确的是（ ）
A．在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和操作者的双手进行灭菌
B．培养过程需要向培养基通入无菌空气并进行搅拌，目的是使菌体充分接触营养物质和溶解氧，促进细菌繁殖
C．科研小组若从生活垃圾中分离分解尿素的微生物，可在培养基中加入酚红指示剂，如果有尿素分解菌存在，则培养基中该菌落的周围会出现黑色
D．卫生纸类垃圾可采用焚烧的方式处理，有效减少对环境的污染
5．[2023·浙江模拟]对酵母菌活菌进行计数时，下列做法可导致统计的活菌数高于实际值的是（ ）
A．用同一只移液管配制一系列一定浓度梯度的稀释液
B．用直接计数法对台盼蓝染色后的活酵母菌进行计数
C．用稀释涂布平板法计数时，酵母菌的培养时间不足
D．用倒平板接种酵母菌时，培养基的温度过高
6．[2023·四川绵阳盐亭中学校考一模]利用微生物分解纤维素对废弃物污染的减轻和作物秸秆再利用具有重要意义。某兴趣小组从富含纤维素的土壤中取样，加入选择培养基中进行振荡培养，之后接种于鉴别培养基上进行培养，筛选出能够分解纤维素的微生物。下列叙述错误的是（ ）
A．选择培养的目的是促进纤维素分解菌生长，抑制其他微生物的生长
B．振荡培养可以增加溶氧量，促进微生物对营养物质的充分接触和利用
C．鉴别培养基上涂布接种时，将1 mL菌液滴到培养基表面再用涂布器涂布均匀
D．加入刚果红的鉴别培养基上出现透明圈的菌落，可能是能够分解纤维素的微生物
7．[2023·浙江模拟]下列关于植物细胞工程的说法错误的是（ ）
A．图中的“马铃薯番茄”目前没有什么生物技术可以成功获得，是人们处理图片伪造出来的
B．“马铃薯番茄”通过植物体细胞杂交技术获得了成功，但没有获得人们预期的性状
C．成功培养原生质体是植物体细胞杂交技术的基础
D．通过植物体细胞杂交技术，能克服远缘杂交不亲和的障碍，获得新品种
8．[2023·湖南郴州一模]科学家利用马铃薯和西红柿叶片分离原生质体并进行细胞杂交，最终获得了杂种植株，相关过程如图所示。有关分析正确的是（ ）
A．过程①应将叶片上表皮向上，置于含纤维素酶和果胶酶的等渗或略高渗溶液中
B.过程②中的原生质体由细胞膜、液泡膜及两层膜之间的细胞质构成
C．④过程常用灭活病毒诱导法，目的是促进原生质体融合
D．⑤进行脱分化和再分化过程，杂种植株一定具有马铃薯和西红柿的优良性状
9．[2023·浙江一模]用愈伤组织中的胚性细胞获得转基因植株的流程如下图所示，其中①、②、③表示过程。下列叙述错误的是（ ）
eq \a\vs4\al(胚性,细胞) eq \(――→,\s\up7(①)) eq \a\vs4\al(原生,质体) eq \(――→,\s\up7(②)) eq \a\vs4\al(含目的,基因的,原生质体) eq \(――→,\s\up7(③)) eq \a\vs4\al(转基因,植株)
A．①过程去除细胞壁可提高②过程中目的基因导入的成功率
B．相比①过程，③过程需降低培养基的渗透压
C．除了上图所示途径，植物体细胞杂交也可打破远缘杂交不亲和的障碍
D．原生质体无细胞壁呈球形，③过程中胞质分裂的方式与动物细胞相同
10．[2023·山东泰安模拟]马铃薯块茎含有大量的淀粉，能为人体提供丰富的热量，且富含蛋白质、氨基酸及多种维生素、矿物质，尤其是其维生素含量是所有粮食作物中最全的，因此成为全球第四大重要粮食作物。马铃薯普通栽培种是同源四倍体，这使得马铃薯的杂交育种变得十分困难。若要通过二倍体马铃薯杂交来改良品种，则必须破解马铃薯单倍体、二倍体和四倍体的基因组，实现难度同样很大。但植物细胞工程技术为马铃薯育种提供了可行的育种方案。下列相关植物细胞工程的说法，不合理的是（ ）
A．利用植物组织培养可以高效、快速地实现种苗的大量繁殖
B．利用茎尖分生组织培养脱毒苗，使植株具备抗病毒的能力，产品质量得到提高
C．利用原生质体融合实现体细胞杂交，可以克服杂交不亲和的障碍，充分利用遗传资源
D．利用培养的愈伤组织进行诱变育种，可以显著提高变异频率，获得有用的突变体
11．[2022·湖北卷]某兴趣小组开展小鼠原代神经元培养的研究，结果发现其培养的原代神经元生长缓慢，其原因不可能的是（ ）
A.实验材料取自小鼠胚胎的脑组织
B．为了防止污染将培养瓶瓶口密封
C．血清经过高温处理后加入培养基
D．所使用的培养基呈弱酸性
12．[2022·山东卷]如图所示，将由2种不同的抗原分别制备的单克隆抗体分子，在体外解偶联后重新偶联可制备双特异性抗体，简称双抗。下列说法错误的是（ ）
A．双抗可同时与2种抗原结合
B．利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞
C．筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的2种抗原
D．同时注射2种抗原可刺激B细胞分化为产双抗的浆细胞
13．[2023·山东烟台市模拟]单基因遗传病可以通过核酸杂交技术进行早期诊断。有一对夫妇被检测出均为镰状细胞贫血基因的携带者，为了能生下健康的孩子，每次妊娠早期都进行产前诊断。下图为其产前核酸分子杂交诊断和结果示意图，有关叙述不正确的是（ ）
A．根据凝胶电泳带谱分析，这对夫妇4次妊娠的胎儿中需要停止妊娠的是Ⅱ1和Ⅱ4
B．将正常的血红蛋白基因导入患者的骨髓造血干细胞中，可以达到治疗的目的
C．检测突变基因的RNA分子探针的核糖核苷酸序列为—UGCACAA—
D．正常人群中镰状细胞贫血基因携带者占1/10 000，Ⅰ2若与一正常女性再婚，生出患病儿子的概率为1/80 000
14．[2023·山东青岛一模]我国大陆首例由试管婴儿分娩的“试管婴儿二代宝宝”在北京大学第三医院诞生，他的母亲是我国大陆首例试管婴儿。试管婴儿技术的不断进步，为许多不孕不育患者实现了做父母的心愿。下列相关叙述错误的是（ ）
A．试管婴儿技术所获得的胚胎必须通过胚胎移植给受体才能获得后代
B．胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移
C．精子接触透明带时，卵细胞膜会发生反应阻止多精子入卵细胞
D．采集的卵母细胞和精子都要进行相应的处理才能完成体外受精过程
15．[2023·江苏扬州校考模拟]胚胎工程中各种胚胎操作技术如图所示。下列分析正确的是（ ）
A．从良种公牛体内获得的精子可以直接与获能的卵细胞结合受精
B．早期囊胚a、b、c基因型相同，但发育得到的个体表型不一定相同
C．d可直接移植给受体，得到小牛的途径属于有性生殖
D．胚胎移植时因代孕牛几乎对胚胎无免疫排斥，因此无需使用免疫抑制剂
16．[2023·河北廊坊市第一中学校考一模]大多数哺乳动物的早期胚胎具有调节发育的功能，去掉早期胚胎的一半，仍可以发育成一个完整的胎儿，调节能力随发育进程逐渐减弱甚至消失。晚期桑葚胚分割后分离的卵裂球仍具有调整发育的能力，重新致密化使卵裂球重新分布而发育至囊胚。下列说法不正确的是（ ）
A．桑葚胚前的每一个细胞都具有发育成完整胚胎的潜能
B．囊胚期不同部位的细胞致密化程度不同
C．胚胎分割属于无性繁殖或克隆的范畴
D．胚胎发育到原肠胚阶段，可将其取出向受体移植
17．[2023·江苏无锡一模]基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，以便于重组和筛选。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是 eq \a\vs4\al( ↓,,－GATC－) ，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是 eq \a\vs4\al( ↓,,－GGATCC－) 。根据图示判断下列操作正确的是（ ）
A．目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割
B．目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割
C．质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割
D．质粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割
18．SOD是一种广泛分布于各种细胞中的抗氧化酶，它能催化超氧阴离子自由基形成H2O2，增强植物的抗逆性。下图为培育能够产生SOD农作物新品种的一种方式，有关叙述正确的是（ ）
eq \(\s\up7(植物细胞),\s\d5(（二倍体）)) eq \(――→,\s\up7(\(\s\up7(SOD基因)),\s\d5(\s\d5(↓)),①)) 新细胞 eq \(――→,\s\up7( ),\s\d5(②)) eq \(\s\up7(愈伤),\s\d5(组织)) eq \(――→,\s\up7( ),\s\d5(③)) 胚状体―→新品种
A．①过程中最常用的方法是采用显微注射技术将SOD基因导入植物细胞
B．②、③分别表示脱分化、再分化过程，无需严格的无菌操作
C．该育种方式利用了细胞工程和基因工程，能体现细胞的全能性
D．利用植物组织培养生产SOD时，需要将外植体培养到胚状体
19．[2023·浙江模拟]蛋白质工程是当前的新兴分子生物学技术，通过改造或合成基因，来改造现有的蛋白质或制造新的蛋白质，以满足人类生产、生活的需求。下列关于蛋白质工程的说法错误的是（ ）
A．蛋白质工程技术会改变组成蛋白质的氨基酸的种类、数目和排列顺序
B．蛋白质工程获得的蛋白质都是自然界已存在的蛋白质（天然蛋白质）
C．蛋白质工程不直接改造蛋白质的原因是改造基因易于操作且改造后可遗传
D．蛋白质工程生产出来的蛋白质的活性与天然蛋白质相似，而且稳定性更高
20．基因工程是一种DNA操作技术，其表达载体的构建和检测筛选是两个重要步骤。下图1为某种质粒简图，箭头所指分别为限制酶EcRⅠ、BamHⅠ的酶切位点。已知目的基因X的两端分别有包括EcRⅠ、BamHⅠ在内的多种酶的酶切位点。图2表示运用影印培养法（指在一系列平板培养基的相同位置上接种并培养出相同菌落的一种微生物培养方法）检测表达载体是否导入大肠杆菌。下列有关叙述错误的是（ ）
A．同时使用EcRⅠ和BamHⅠ 切割质粒，可避免酶切后质粒的自身环化
B．转化方法是将质粒表达载体溶于缓冲液后与经 Ca2＋处理的大肠杆菌混合
C．培养基 A 和培养基 B分别含有四环素和青霉素
D．从筛选结果分析，含目的基因X的菌落是4、6
二、非选择题（共5小题，共60分）
21．（12分）葡萄酒是葡萄汁经酵母菌发酵而成的。酿制葡萄酒的两个简易装置如图所示。
回答下列问题：
（1）试管中的X溶液有助于维持甲装置的瓶中气压相对稳定，与乙装置相比，用甲装置酿制葡萄酒的优点是________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________（答出两点即可）。
（2）葡萄汁装入甲装置时，要留有约1/3的空间，这种做法的目的是________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
（答出两点即可）。
（3）某同学若用乙装置进行发酵，并设置两个不同处理组（乙A和乙B），乙A装置中保留一定量的氧气，乙B装置中没有氧气。在其他条件相同且适宜的情况下，测得一段时间内乙A和乙B中酒精含量的变化趋势及乙A中氧气含量的变化趋势如曲线图所示。图中曲线①、②、③依次表示 、 、 含量的变化趋势。
（4）从异化作用的类型看，酵母菌属于 生物；从同化作用的类型看，酵母菌属于 （填“自养型”或“异养型”）生物。
22．（12分）[2023·天津市高三三模]绿水青山就是金山银山，污水治理是生态文明建设的一项重要任务，利用微生物降解是水污染治理的有效手段之一。聚乙烯醇（PVA）是存在于化工污水中的一种难以降解的大分子有机物，PVA分解菌能产生PVA酶分解PVA，PVA与碘作用时能产生蓝绿色复合物，当PVA被分解时蓝绿色复合物消失，形成白色透明斑。请回答下列问题：
（1）表中是筛选出能高效分解PVA的细菌的培养基配方，表中X物质最可能为 。
（2）若图中污水取样是从聚乙烯醇（PVA）污染的水体中采集，通过图示过程分离出分解聚乙烯醇（PVA）的菌落，则进行过程1的作用是________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
（3）若将100 mL含有PVA分解菌的土壤样品溶液稀释104倍后，取0.1 mL稀释液均匀涂布在选择培养基表面，测得菌落数的平均值为160个，空白对照组平板上未出现菌落，则100 mL原菌液中有PVA分解菌 个，该接种方法是 ，通过该方法测量的菌落数值与实际值相比一般会 （填“偏大”“偏小”或“相等”）。
（4）要鉴定分离出的细菌是否为PVA分解菌，培养PVA分解菌的培养基中除了加入必需的营养物质外还需要加入 用于鉴别PVA分解菌，若菌落周围 ，则该菌为PVA分解菌。
23．（12分）W是一种具有特定功能的人体蛋白质。某研究小组拟仿照制备乳腺生物反应器的研究思路，制备一种膀胱生物反应器来获得W，基本过程如图所示。
回答下列问题：
（1）步骤①中需要使用的工具酶有 。步骤②和③所代表的操作分别是 和 。步骤④称为________________________________________________________________________。
（2）与乳腺生物反应器相比，用膀胱生物反应器生产W的优势在于不受转基因动物的 （答出2点即可）的限制。
（3）一般来说，在同一动物个体中，乳腺上皮细胞与膀胱上皮细胞的细胞核中染色体DNA所含的遗传信息 （填“相同”或“不同”），原因是 。
（4）从上述流程可知，制备生物反应器涉及胚胎工程，胚胎工程中所用到的主要技术有 （答出2点即可）。
24．（12分）[2022·辽宁卷]某抗膜蛋白治疗性抗体药物研发过程中，需要表达N蛋白胞外段，制备相应的单克隆抗体，增加其对N蛋白胞外段特异性结合的能力。
Ⅰ.N蛋白胞外段抗原制备，流程如图1
eq \x(\a\al(N蛋白胞外,段基因重组,慢病毒质粒)) eq \(――→,\s\up7(脂质体),\s\d5(导入)) eq \x(\a\al(病毒包,装细胞)) eq \(――→,\s\up7(组装),\s\d5(释放)) eq \x(\a\al(收集,病毒)) eq \(――→,\s\up7(\a\vs4\al(感染海,拉细胞)),\s\d5( )) eq \x(\a\al(N蛋白胞外,段表达、纯化))
图1
（1）构建重组慢病毒质粒时，选用氨苄青霉素抗性基因作为标记基因，目的是 。用脂质体将重组慢病毒质粒与辅助质粒导入病毒包装细胞，质粒被包在脂质体 （填“双分子层中”或“两层磷脂分子之间”）。
（2）质粒在包装细胞内组装出由 组成的慢病毒，用慢病毒感染海拉细胞进而表达并分离、纯化N蛋白胞外段。
Ⅱ.N蛋白胞外段单克隆抗体制备，流程如图2
eq \x(\a\al(N蛋白,胞外段)) eq \(――→,\s\up7(免疫小鼠),\s\d5(取脾组织)) eq \x(\a\al(B淋巴细,胞悬液)) eq \(――→,\s\up7(骨髓瘤细胞),\s\d5(融合)) eq \x(多种杂交细胞)
选择性培养基
eq \x(\a\al(N蛋白胞,外段抗体)) eq \(――→,\s\up7(扩大培养)) eq \x(\a\al(单克隆杂交,瘤细胞株)) eq \(――→,\s\up7(96孔板)) eq \x(杂交瘤细胞)
图2
（3）用N蛋白胞外段作为抗原对小鼠进行免疫后，取小鼠脾组织用 酶处理，制成细胞悬液，置于含有混合气体的 中培养，离心收集小鼠的B淋巴细胞，与骨髓瘤细胞进行融合。
（4）用选择性培养基对融合后的细胞进行筛选，获得杂交瘤细胞，将其接种到96孔板，进行 培养。用 技术检测每孔中的抗体，筛选既能产生N蛋白胞外段抗体，又能大量增殖的单克隆杂交瘤细胞株，经体外扩大培养，收集 ，提取单克隆抗体。
（5）利用N蛋白胞外段抗体与药物结合，形成 ，实现特异性治疗。
25．（12分）[2023·湖北黄冈市模拟]丙肝病毒（HCV）是一种 RNA 病毒，人们将得到的 HCV 的多个抗原基因首尾相连，连接在同一调控元件下，可构成融合基因。对 HCV 感染的诊断步骤是：首先进行抗 HCV 抗体检测，若检测结果呈阳性则还需要进行 HCV 核酸检测。HCV 融合抗原可用于制作第三代 HCV 抗体检测试剂。请回答下列问题：
（1）首先需要获得融合基因。即通过相关的 RNA 合成 cDNA 然后拼接起来，这个过程主要需要 酶和 DNA 连接酶等。其次要利用 PCR技术扩增融合基因。即先根据融合基因的核苷酸序列，设计并合成引物，若该融合基因的序列为（虚线处省略了部分核苷酸序列），则 PCR 设计应选用的两种引物（部分）序列应分别为：①5′－AACTAT－3′，② 。引物能与变性的融合基因单链结合，在 催化作用下延伸，如此循环多次。
（2）构建融合基因表达载体。如图所示，表达载体上除了标注的 DNA 片段外，在融合基因上游还必须拥有的 DNA 片段（箭头所示）是 ，其作用是
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
（3）用融合基因表达载体转化大肠杆菌感受态细胞。用含硫酸卡那霉素的培养基筛选出能生长的菌落，从而得到能产生HCV融合抗原的工程菌，原非感受态受体大肠杆菌细胞内应 （填“含有”或“不含有”）硫酸卡那霉素抗性基因。
（4）某人体内 HCV 抗体检测结果呈阳性，但进行 HCV 核酸检测时结果呈阴性，最可能的原因是________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
模块清通关卷 模块四 生物技术与工程
1．D 在利用酵母菌发酵时最好是先通入足够的无菌空气，在有氧环境下使其繁殖，再隔绝氧气进行发酵，A正确；酒精生成过程只在第一阶段能合成ATP，故合成ATP所需能量来自葡萄糖中的化学能，B正确；踏浆发酵即是碾碎葡萄，有利于酵母菌与葡萄汁液充分混合，充分发酵，C正确；发酵过程中产生的酒精对其他微生物的生长有一定抑制作用，但主要在于葡萄酒制成后，在缺氧、呈酸性的发酵液中，绝大多数微生物无法适应这一环境而受到抑制，故“十年味不败”，D错误。
2．D 葡萄酿制果酒需要葡萄果皮上的野生酵母菌，A错误；冲洗葡萄时，果皮难免会有破损，果肉会被水中的微生物污染，增加发酵失败可能。因此取新鲜葡萄制作果酒、果醋时应先冲洗再去梗，B错误；制作果酒是利用酵母菌发酵，后期密闭处理、利于酵母菌无氧呼吸产生酒精；制作果醋是利用醋酸菌发酵，醋酸菌是好氧菌，不需要密闭处理，C错误；图中①过程表示酒精发酵，酵母菌无氧呼吸产生CO2，图中②过程表示醋酸菌利用乙醇转化为乙醛，再将乙醛转化为醋酸和水，不产生气体，D正确。
3．A 由图中两个培养基中菌落的分布可知，上述菌株分离纯化过程中用到了稀释涂布平板法和平板划线法，A正确；对分离纯化得到的菌株培养后进行计数，可以采用稀释涂布平板法，也可以采用显微镜计数法，B错误；血平板培养基上透明水解圈大的菌落分泌的蛋白酶的活性往往较高，C错误；实验中废弃培养基因含有降解血污的微生物，需要进行灭菌处理后再填埋，避免污染环境，D错误。
4．B 在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行灭菌，常用高压蒸汽灭菌法；操作者的双手需要进行清洗和消毒，避免操作者受到伤害，A错误；进行培养的微生物大多为需氧型，在培养过程中向培养基通入无菌空气并搅拌，可以增加溶氧量并使菌体充分接触营养物质，以促进细菌生长繁殖，B正确；鉴别尿素分解菌时，可在培养基中加入酚红指示剂，尿素分解菌代谢会产生氨，使pH升高，菌落周围会出现红色，C错误；卫生纸类垃圾不可回收且富含纤维素，可采用卫生填埋的方法，利用环境中的纤维素分解菌将其降解，可有效减少对环境的污染，D错误。
5．A 若用同一只移液管配制一系列一定浓度梯度的稀释液，由于每次吸液后移液管中都有菌液残留，这种做法会导致统计的活菌数高于实际值，A符合题意；直接计数法计数酵母菌活菌数量时，可用台盼蓝对酵母菌进行染色，能被染色的是死酵母菌，不能被染色的是活酵母菌，不会导致统计结果高于实际值，B不符合题意；用稀释涂布平板法计数时，通常计数的结果都会比实际值低，若酵母菌的培养时间不足，统计的活菌数会比实际值更低，C不符合题意；用倒平板接种酵母菌时，酵母菌最适宜生长繁殖的温度约为28 ℃，若培养基的温度过高，会杀死酵母菌，导致统计的活菌数低于实际值，D不符合题意。
6．C 选择培养的原理是人为提供有利于目的菌生长的条件，同时抑制或阻止其他微生物的生长，因此选择培养的目的是促进纤维素分解菌生长，抑制其他微生物的生长，A正确；振荡培养可以增加溶氧量，促进微生物对营养物质和氧气的充分接触和利用，B正确；鉴别培养基上涂布接种时，将0.1 mL菌液滴到培养基表面再用涂布器涂布均匀，C错误；加入刚果红的培养基上所出现的有透明圈的菌落，可能是分解纤维素的细菌或依赖刚果红而生存的真菌繁殖而成，D正确。
7．A 图中的“马铃薯番茄”目前可以通过无性繁殖嫁接技术获得成功，A错误；“马铃薯番茄”通过植物体细胞杂交技术获得了成功，但没有获得人们预期的性状，这与基因的相互作用及杂交细胞容易丢失染色体有关，B正确；细胞融合需要去除细胞壁，因此成功培养原生质体是植物体细胞杂交技术的基础，C正确；植物体细胞杂交能克服远缘杂交不亲和的障碍，获得新品种，D正确。
8．A 过程①应将叶片下表皮的一面朝下（能与溶液接触），置于含有纤维素酶和果胶酶的溶液中去除细胞壁，原生质体没有细胞壁，为避免原生质体吸水涨破，将叶片置于等渗或略高渗溶液中，A正确；原生质层是由细胞膜、液泡膜以及这两层膜之间的细胞质组成，而原生质体是指植物细胞去除细胞壁后的剩余部分，B错误；诱导原生质体融合的化学法包括聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2＋－高pH融合法等，灭活病毒是用于诱导动物细胞融合的方法，C错误；由于基因的选择性表达，获得的杂种植株不一定能够表现亲本的优良性状，如番茄－马铃薯杂种植物，地上没有结番茄，地下也没有长马铃薯，D错误。
9．D 原生质体没有细胞壁，①过程去除细胞壁可提高②过程中目的基因导入的成功率，A正确；由于①过程去除细胞壁，需提高培养基渗透压，避免原生质体吸水涨破，③过程已长出细胞壁，可降低渗透压，B正确；植物体细胞杂交是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术，可以打破远缘杂交不亲和的障碍，C正确；原生质体无细胞壁而呈球形，融合后的原生质体具有生物活性，但不具有细胞壁，无法表现优良的性状，需要再生出细胞壁后才能进行分裂，因此③过程细胞分裂时会形成细胞板，进而形成细胞壁，与动物细胞的细胞膜向内凹陷的分裂方式不同，D错误。
10．B 利用植物组织培养技术的优点之一是可以高效、快速地实现种苗的大量繁殖，A正确；利用茎尖分生组织培育脱毒苗是因为茎尖分生组织细胞中不含病毒，而不是因为其含有抗病毒基因，所以，此方法不一定能使植株具备抗病毒的能力，B错误；利用原生质体融合实现体细胞杂交，可以克服远缘杂交不亲和，扩大亲本范围，充分利用遗传资源，C正确；愈伤组织具有分裂旺盛的优点，适于诱变育种的取材，能提高突变频率，D正确。
11．A 小鼠胚胎脑组织中含有丰富的原代神经元，细胞增殖能力强，不会造成生长缓慢，A符合题意；培养瓶瓶口密封会使培养液中缺氧，影响细胞有氧呼吸，造成供能不足，可能使细胞生长缓慢，B不符合题意；血清经过高温处理后，其中活性成分变性，失去原有功能，细胞生存环境严重恶化，可能使细胞生长缓慢，C不符合题意；小鼠内环境为弱碱性，所使用的培养基呈弱酸性，使细胞生存环境恶劣，可能造成细胞生长缓慢，D不符合题意。
12．D 根据题意，双抗具有双特异性，即可同时与2种抗原发生特异性结合，A正确；根据抗体与抗原特异性结合的原理，利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞，从而使药物作用于特定的靶细胞，B正确；双抗是由2种不同的抗原分别制备的单克隆抗体分子经过解偶联后重新偶联形成的，故而筛选时需要使用制备单克隆抗体时所使用的2种抗原来进行抗原—抗体检测，从而筛选出具有双特异性的抗体，C正确；同时注射2种抗原会刺激B细胞分化形成不同的浆细胞，进而产生两种抗体，一种浆细胞只能产生一种抗体，并不能产生双抗，D错误。
13．A 根据电泳条带分析，假设患病基因用b表示，则夫妇基因型均为Bb，四个胎儿基因型分别依次是BB、bb、Bb、BB，应该终止妊娠的是2号胎儿，A错误；镰状细胞贫血是由基因突变导致的，属于遗传病，将正常血红蛋白的基因导入患者的骨髓造血干细胞中可达到治疗目的，B正确；据图可知，突变基因的核苷酸序列－ACGTGTT－，按照碱基互补配对的原则，则作为探针的核糖核苷酸序列为－UGCACAA－，C正确；男性基因型为Bb，若与正常女子Bb（正常人群中镰状细胞贫血基因携带者占1/10 000）再婚，则生出患病儿子的概率为1/10 000×1/4×1/2＝1/80 000，D正确。
14．C 核移植、转基因或体外受精等技术获得的胚胎均需通过胚胎移植给受体才能获得后代，A正确；胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移，B正确；在精子触及卵细胞膜的瞬间，会产生阻止后来的精子进入透明带的生理反应，这个反应称作透明带反应，C错误；体外受精之前，要对精子进行获能处理，采集的卵母细胞，都要在体外经人工培养成熟后，才能与获能的精子受精，D正确。
15．D 从良种公牛体内获得的精子在体外获能后才可以与培养到MⅡ期的卵母细胞结合受精，A错误；据图可知，三种早期囊胚由不同受精卵发育而来，故a、b、c细胞核中的遗传物质不一定相同，B错误；d是经过胚胎分割形成的两个健康的胚胎，可直接移植给受体，该过程属于无性生殖，C错误；受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，不需要注射免疫抑制剂，D正确。
16．D 桑葚胚前的每一个细胞都具有发育成完整胚胎的潜能，因为都含有相同的一套遗传物质，A正确；囊胚期不同部位的细胞数目不同，其致密化程度不同，B正确；胚胎分割后形成的胚胎是相同的，属于无性繁殖或克隆的范畴，C正确；胚胎发育到桑葚胚或囊胚阶段，可将其取出向受体移植，D错误。
17．C 限制酶Ⅰ的识别序列和切点是 eq \a\vs4\al( ↓,,－GATC－) ，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是 eq \a\vs4\al( ↓,,－GGATCC－) ，可知限制酶Ⅰ能够识别和切割限制酶Ⅱ切割后的黏性末端；目的基因的右端限制酶Ⅰ的识别序列和切点是 eq \a\vs4\al( ↓,,－GATC－) ，目的基因左端是限制酶Ⅱ的识别序列和切点是 eq \a\vs4\al( ↓,,－GGATCC－) ，只有用限制酶Ⅰ才能同时将目的基因切割下来；质粒上有GeneⅠ和GeneⅡ两种标记基因，分别有限制酶Ⅰ的识别序列和限制酶Ⅱ的识别序列；如果用限制酶Ⅰ切割，则GeneⅠ和GeneⅡ都被破坏，造成重组质粒无标记基因；用限制酶Ⅱ切割，则破坏GeneⅡ，保留GeneⅠ，其黏性末端和切割目的基因所在DNA的黏性末端相同，可以连接形成重组DNA。
18．C ①过程中最常用的方法是采用农杆菌转化法将SOD基因导入植物细胞，A错误；②、③分别表示脱分化、再分化过程，均需要在严格的无菌条件下完成，B错误；该育种方式利用了细胞工程和基因工程，从植物细胞培育成植物个体，能体现细胞的全能性，C正确；利用植物组织培养生产SOD时，只需要将外植体培养到愈伤组织即可，D错误。
19．B 蛋白质工程技术是根据人们对蛋白质功能的特定需求，对蛋白质的结构进行设计改造，会改变组成蛋白质的氨基酸的种类、数目和排列顺序，A正确；基因工程获得的蛋白质都是自然界已存在的蛋白质（天然蛋白质），而蛋白质工程是根据人们的需求获得的蛋白质，所以都是非天然的蛋白质，B错误；由于基因决定蛋白质，因此要对蛋白质的结构进行设计改造，最终还必须通过改造或合成基因来完成，故蛋白质工程不直接改造蛋白质的原因是改造基因易于操作且改造后可遗传，C正确；蛋白质工程生产出来的蛋白质在天然蛋白质的基础上经过改造，品质更加优良，活性与天然蛋白质相似，而且稳定性更高，D正确。
20．C 为避免酶切后质粒的自身环化，可同时使用EcRⅠ和BamHⅠ切割质粒，A正确；转化方法是将质粒表达载体溶于缓冲液后与经Ca2＋处理的大肠杆菌混合，B正确；用EcRⅠ和BamHⅠ两种限制酶对质粒进行切割时，会破坏四环素抗性基因，但不会破坏青霉素抗性基因，因此导入重组质粒的大肠杆菌能在含有青霉素的培养基上生存，但不能在含有四环素培养基上生存，所以培养基A和培养基B分别含有青霉素、四环素，含目的基因X的菌落是4和6，C错误、D正确。
21．答案：（1）不需要开盖放气；避免了因开盖引起的杂菌污染 （2）为酵母菌大量繁殖提供适量的氧气；防止发酵旺盛时汁液溢出 （3）乙A中的氧气 乙B中的酒精 乙A中的酒精 （4）兼性厌氧型 异养
解析：（1）试管中的X溶液有助于维持甲装置的瓶中气压相对稳定，与乙装置相比，用甲装置酿制葡萄酒的优点是不需要开盖放气；避免了因开盖引起的杂菌污染。（2）葡萄汁装入甲装置时，要留有约1/3的空间，这种做法的目的是为酵母菌大量繁殖提供适量的氧气；防止发酵旺盛时汁液溢出。（3）分析题意可知，图中曲线①、②、③依次表示乙A中的氧气、乙B中的酒精、乙A中的酒精含量的变化趋势。（4）从异化作用的类型看，酵母菌属于兼性厌氧型生物；从同化作用的类型看，酵母菌属于异养型生物。
22．答案：（1）聚乙烯醇（或PVA） （2）通过选择培养增加PVA分解菌的数量 （3）1.6×109 稀释涂布平板法 偏小 （4）碘 出现白色透明斑
解析：（1）表格是筛选出能高效分解PVA的细菌的培养基配方，即该培养基属于选择培养基，该培养基的配制过程中应该以PVA为唯一碳源，因此表中X物质最可能为聚乙烯醇（或PVA）。（2）若图中污水取样是从聚乙烯醇（PVA）污染的水体中采集，通过图示过程分离出分解聚乙烯醇（PVA）的菌落，则进行的过程1为选择培养，其作用是增加PVA分解菌的数量。（3）要测定土壤稀释液中微生物的数目，可在显微镜下用血细胞（血球）计数板直接计数。若将100 mL含有PVA分解菌的土壤样品溶液稀释104倍后，取0.1 mL稀释液均匀涂布在选择培养基表面，测得菌落数的平均值为160个，空白对照组平板上未出现菌落（说明制备的平板合格，且实验操作可靠），则100 mL原菌液中有PVA分解菌＝160÷0.1×104×100＝1.6×109个；这种接种方法为稀释涂布平板法，由于在涂布过程中会出现两个或多个细菌聚集在一起只能产生一个菌落的情况，则会导致该方法的测量值与实际值相比一般会偏小的情况。（4）根据题意可知，“PVA与碘作用时能产生蓝绿色复合物，当PVA被分解时蓝绿色复合物消失，形成白色透明斑”，因此要鉴定分离出的细菌是否为PVA分解菌，培养PVA分解菌的培养基中还需要加入碘与PVA作用形成蓝绿色复合物，用于鉴别PVA分解菌，随着PVA被降解，白色透明斑出现，因此，若菌落周围出现白色透明斑，则该菌为PVA分解菌。
23．答案：（1）限制性内切核酸酶、DNA连接酶 显微注射 体外培养 胚胎移植 （2）性别、年龄 （3）相同 两种上皮细胞都是体细胞，且来源于同一个受精卵 （4）体外受精、胚胎移植
解析：（1）在基因表达载体的构建过程中需要使用限制性内切核酸酶切割W基因和载体，同时需要DNA连接酶进行连接。将重组表达载体导入受精卵常用显微注射法，从受精卵到早期胚胎需要进行体外培养，将获得的早期胚胎通过胚胎移植移至代孕母体体内。（2）乳腺生物反应器和膀胱生物反应器都属于动物反应器。前者受动物性别（只能是雌性）和年龄（哺乳期）限制，后者不受动物性别和年龄限制。（3）题述两种上皮细胞都是体细胞，且来源于同一个受精卵，所以其细胞核中染色体DNA所含遗传信息相同。（4）胚胎工程中所用到的技术主要有体外受精、胚胎移植。
24．答案：（1）检测目的基因是否成功导入受体细胞 双分子层中 （2）蛋白质外壳和含N蛋白胞外段基因的核酸 （3）胰蛋白酶或胶原蛋白 CO2培养箱 （4）克隆化 抗原—抗体杂交 细胞培养液 （5）抗体—药物偶联物（ADC）
解析：（1）构建重组慢病毒质粒时，为检测目的基因是否成功导入受体细胞，常选用氨苄青霉素抗性基因作为标记基因。重组慢病毒质粒与辅助质粒导入病毒包装细胞需要依赖膜融合，故质粒被包在脂质体双分子层中（即磷脂双分子层）。（2）由于目的基因为N蛋白胞外段基因，在包装细胞内组装出由蛋白质外壳和含有N蛋白胞外段基因的核酸组成的慢病毒，用慢病毒感染海拉细胞进而表达并分离、纯化N蛋白胞外段。（3）进行动物细胞培养时，需要取小鼠脾组织用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，制成细胞悬液，置于含有95%空气和5%的CO2混合气体的CO2培养箱中培养。（4）用选择性培养基对融合后的细胞进行筛选，获得杂交瘤细胞，将其接种到96孔板，进行克隆化培养和抗体检测。用抗原—抗体杂交技术检测每孔中的抗体，筛选既能产生N蛋白胞外段抗体，又能大量增殖的单克隆杂交瘤细胞株，经体外扩大培养，收集细胞培养液，提取单克隆抗体。（5）利用N蛋白胞外段抗体与药物结合，形成抗体—药物偶联物ADC，实现特异性治疗。
25．答案：（1）逆转录 3′－CGGAGA－5′ Taq 酶 （2）启动子 RNA 聚合酶的识别和结合的位点，驱动融合基因转录出mRNA （3）不含有 （4）其感染HCV后通过免疫反应已将HCV清除，但体内存在抗HCV抗体
解析：（1） 以RNA为模板合成cDNA的过程需要逆转录酶，拼接需要DNA 连接酶；PCR过程中DNA合成的方向只能从5′到3′，根据融合基因的序列，两种引物分别为5′－AACTAT－3′和3′－CGGAGA－5′，PCR过程中需要的酶为Taq 酶。（2）基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。其中箭头所示为启动子，其作用是RNA 聚合酶的识别和结合的位点，驱动融合基因转录出 mRNA。（3）感受态细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，非感受态受体大肠杆菌不能吸收周围环境中DNA分子，因此细胞内不含有融合基因表达载体，即不含有硫酸卡那霉素抗性基因。（4）某人体内HCV抗体检测结果呈阳性，但进行HCV核酸检测时结果呈阴性，原因是其感染HCV后通过免疫反应已将HCV清除，但体内存在抗HCV的抗体。
成分
MgSO4
蛋白质
X物质
水
琼脂
用量
5 g
10 g
7 g
1 000 mL
20 g