2022-2023学年江苏省镇江市丹阳市某校高二3月阶段检测生物试题含解析

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江苏省镇江市丹阳市某校2022-2023学年高二3月阶段检测生物试题
学校:___________姓名：___________班级：___________考号：___________

一、单选题
1．下列有关果酒、果醋和腐乳制作的叙述，错误的是（　　）
A．参与果酒发酵和果醋发酵的微生物都含有核糖体
B．果酒发酵过程中发酵液密度会逐渐减小
C．在腐乳制作过程中必须要有生产蛋白酶的微生物参与
D．制成的食品都需经高压蒸汽灭菌，目的是延长产品保质期
【答案】D
【分析】1、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。
2、果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。
【详解】A、参与果酒发酵和果醋发酵的微生物分别是酵母菌和醋酸菌，两者都是细胞生物，含有核糖体，A正确;
B、果酒发酵过程中，葡萄糖分解变成酒精和二氧化碳，因此发酵液密度会逐渐减小，B正确;
C、由于豆腐中的蛋白质含量较高，所以在腐乳制作过程中必须有能生产蛋白酶的微生物(如毛霉)参与，C正确；
D、传统发酵食品不能使用高压蒸汽灭菌，高压蒸汽灭菌会杀死菌种，从而会影响产品的口感和品质，D错误。
故选D。
2．白萝卜、红萝卜、小黄瓜等均可作为泡菜的原料，经发酵后在口感上比新鲜蔬菜更爽脆，既好吃，又助消化。下列关于泡菜制作的叙述，错误的是（    ）
A．热水短时处理原料可抑制果胶酶的活性，使成品泡菜口感较脆
B．腌制方法、时间长短和温度高低均会影响泡菜中亚硝酸盐的含量
C．利用水密封泡菜坛的目的是给泡菜坛内创造无氧环境
D．坛盖边沿的水槽“泡”中的气体由乳酸菌细胞呼吸产生
【答案】D
【分析】制作泡菜时要用到乳酸菌，乳酸菌是一种细菌，在无氧的条件下，乳酸菌发酵产生乳酸，使得菜呈现一种特殊的风味，还不改变菜的品质，故泡菜坛盖的周围要用水密封。
【详解】A、植物细胞壁的成分主要是纤维素和果胶，而果胶酶可以瓦解植物细胞壁，用萝卜等根菜类蔬菜制作泡菜，用热水短时处理，可抑制某些微生物产生果胶酶，从而使成品泡菜口感较脆，A正确；
B、亚硝酸盐的含量影响泡菜的质量，在泡菜腌制过程中，腌制方法、时间长短和温度高低等都会影响亚硝酸盐的含量，B正确；
C、泡菜制作时所需的菌种是乳酸菌，乳酸菌是严格厌氧微生物，制作泡菜时用水密封泡菜坛，其目的是保持无氧的环境，C正确；
D、乳酸菌是厌氧生物，其无氧呼吸的产物是乳酸，不含气体，D错误。
故选D。
3．下列有关微生物培养基及其配制的叙述，正确的是（　　）
A．对培养基常用的灭菌方法有干热灭菌、灼烧灭菌和煮沸灭菌等
B．家庭制作腐乳时，豆腐块就是毛霉、曲霉、酵母等的培养基
C．若需要调节pH，则应该在对培养基进行灭菌后进行调节
D．固体培养基一般都含有碳源、氮源、水、无机盐、琼脂等营养物质
【答案】B
【分析】 虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源（提供碳元素的物质）、氮源（提供氮元素的物质）和无机盐。
【详解】A、对培养基常用的灭菌方法是湿热灭菌（高压蒸汽灭菌），A错误；
B、家庭制作腐乳时，毛霉、曲霉、酵母等所需营养物质均来自豆腐块，因此豆腐块就是它们的培养基，B正确；
C、若需要调节pH，则应该在对培养基进行灭菌前进行调节，C错误；
D、固体培养基中添加的琼脂被用作凝固剂，不属于营养物质，D错误。
故选B。
4．如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示意图。据图分析错误的是（　　）

A．某一稀释度下至少涂3个平板，该实验方法统计得到的结果常会比实际活菌数目少
B．利用以尿素作为唯一氮源的选择培养基，可以从土壤中分离出分解尿素的细菌
C．5号试管的实验结果表明每克土样中能分解尿素的细菌数为17×108个
D．该实验需设置牛肉膏蛋白胨培养基作对照，用以判断选择培养基是否有选择作用
【答案】C
【分析】稀释涂布平板法：稀释涂布平板法除了可以用于分离微生物外，也常用来统计样品中活菌的数目。当样品的稀释度足够高时培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测样品大约含有多少活菌。
【详解】A、为了减小实验误差，某一稀释度下至少涂3个平板。稀释涂布平板得到的菌落可能存在两个或多个细菌细胞长成一个菌落，使该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要少，A正确；
B、培养基的唯一氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源，缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够分离出分解尿素的微生物，B正确；
C、5号试管的实验结果中，菌落的平均数为(168+175+167)÷3=170个，故每克土样中能分解尿素的细菌数为170÷0.1×106÷10=1.7×108个，C错误；
D、要判断选择培养基是否起到选择作用，需设置接种了的牛肉膏蛋白胨培养基作对照，若牛肉膏蛋白胨培养基培养基上的菌落种类数目多于选择培养基上的菌落类型，则说明起到了选择作用，D正确。
故选C。
5．研究者从温泉中筛选出高效产生耐高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如图1所示。将得到的菌悬液转接到同时含有葡萄糖和淀粉作碳源的固体培养基上培养，得到若干菌落后用碘液作显色处理，结果如图2所示。下列说法错误的是（　　）

A．①②为稀释涂布平板法，实验使用的培养皿可使用干热灭菌法进行灭菌
B．丙中培养液可用细菌计数板在显微镜下计数，结果是活菌和死菌数的总和
C．利用蛋白质工程或基因工程也可培养得到产生耐高温淀粉酶的嗜热菌
D．图2培养皿要放在高温条件下培养，周围显蓝色的菌落含有所需要的嗜热菌
【答案】D
【分析】选择培养基是指一类根据特定微生物的特殊营养要求或其对某理化因素抗性的原理而设计的培养基，只允许特定的微生物生长，而同时抑制或阻止其他微生物生长。
【详解】A、I号培养基上菌落分布均匀，可知①②过程为稀释涂布平板法，实验使用的培养基应采用高压蒸汽灭菌，培养皿一般使用干热灭菌法进行灭菌，A正确；
B、丙中培养液可借助细菌计数板采用显微直接计数法进行计数，该方法统计的是活菌和死菌总数目，结果可能偏大，B正确；
C、蛋白质工程或基因工程的设计思路都是围绕人们的需要设计的，进而产生出人们需要的产品，因而利用蛋白质工程和基因工程也可能得到产生耐高温淀粉酶的嗜热菌，C正确；
D、图2中周围不显蓝色的菌落，说明其产生的淀粉酶可以在高温下分解淀粉，所以周围不显蓝色的菌落含有所需的嗜热菌，D错误。
故选D。
6．下列有关植物组织培养技术叙述正确的是（　　）
A．用70%的酒精对外植体消毒30min，然后要立即用无菌水清洗
B．以同一植株不同部位细胞为材料培育出的植株基因型都相同
C．植物组织培养时使用的MS培养基需要进行高压蒸气灭菌
D．利用组织培养技术培育脱毒苗，获得具有抗病毒的新品种
【答案】C
【分析】植物组织培养是指将离体的植物器官、组织或细胞等，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术。
【详解】A、用70%的酒精对外植体消毒30s，然后要立即用无菌水清洗，避免过度消毒对外植体造成伤害，A错误；
B、以同一植株不同部位细胞为材料培育出的植株基因型不一定都相同，比如花粉细胞培养形成的植株和体细胞培养形成的植株的基因型不同，B错误；
C、为避免杂菌污染，植物组织培养时使用的MS培养基需要进行高压蒸气灭菌，C正确；
D、因为分生组织病毒少，甚至没有病毒，所以将分生组织进行组织培养技术培育脱毒苗，不能获得具有抗病毒的新品种，D错误；
故选C。
7．现有甲、乙两物种 （均为二倍体纯种），其中甲种植株的光合作用能力高于乙种植株，但乙种植株很适宜在盐碱地种植。要利用甲、乙两种植株的各自优势，培育出高产耐盐的植株，有多种生物技术手段可以利用。下列所采用的技术手段中可行的是（　　）
A．利用植物体细胞杂交技术，可获得满足要求的四倍体目的植株
B．两种植株杂交后，得到的F1再连续自交可培育出纯种目的植株
C．两种植株杂交后，得到的F1再利用单倍体育种可较快获得纯种目的植株
D．诱导两种植株的花粉融合并培育成幼苗，可培育出二倍体目的植株
【答案】A
【分析】基因工程，是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
【详解】A、甲、乙两种植株均为二倍体纯种，利用植物体细胞杂交技术，可获得满足要求的四倍体杂种目的植株，A正确；
B、据题干：甲乙为两物种，即甲乙两植株之间存在生殖隔离，因此两者不能杂交，即使能杂交也不能产生可育后代，B错误；
C、结合B选项的分析，两种植株不能杂交，即使能杂交也不能产生可育后代，故也无法产生花粉用于单倍体育种，C错误；
D、诱导两种植株的花粉融合并培育成二倍体幼苗，该二倍体幼苗为异源二倍体，不可育，D错误。
故选A。
8．相较于其他模型动物（如小鼠和大鼠），兔的免疫系统可对更广泛的抗原产生应答且其较大的牌脏可产生更多抗体。除此之外，兔的单克隆抗体具有天然多样性、高亲和力和特异性、全新的表位识别、易于人源化（已成为将外源抗体转化为有效安全的治疗药物的重要方式）等优势。下列相关叙述正确的是（　　）
A．利用人源化兔单克隆抗体进行治疗时，机体将会发生细胞免疫
B．给兔子注射抗原后，兔子体内的抗体只有很少一部分是单克隆抗体
C．在特定的选择培养基上未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡
D．体外培养特异性杂交瘤细胞时，需要给予95%的氧气和5%的CO2
【答案】C
【分析】由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。
【详解】A、利用人源化兔单克隆抗体进行治疗时，机体不会发生细胞免疫，A错误；
B、给兔子注射抗原后，兔子体内的淋巴B细胞增殖分化形成浆细胞，产生相应的抗体，此时不存在单克隆抗体，B错误；
C、单克隆抗体制作的过程中会经过两次筛选，第一次筛选时用特定的选择培养基，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长，C正确；
D、体外培养特异性杂交瘤细胞时，需要给予95%的空气和5%的CO2，D错误。
故选C。
9．下列有关单克隆抗体制备的叙述，正确的是
A．先利用特定的抗原蛋白饲喂小鼠，再从小鼠脾脏中分离出B淋巴细胞
B．体外培养杂交瘤细胞需要在培养液中添加动物血清和一些抗生素
C．为避免病毒感染，需用聚乙二醇诱导骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合
D．单克隆抗体制备技术和植物体细胞杂交技术均依据细胞的全能性原理
【答案】B
【分析】细胞来源：B淋巴细胞：能产生特异性抗体，在体外不能无限繁殖；骨髓瘤细胞：不产生专一性抗体，体外能无限繁殖．诱导动物细胞融合的方法：物理法（离心）、化学法（聚乙二醇）、生物法（灭活病毒）．动物细胞培养的培养基中含有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质．两次筛选：筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）；筛选出能够产生特异性抗体的细胞群．
【详解】向小鼠注射特定的抗原蛋白，再从小鼠脾脏中分离B淋巴细胞，蛋白质饲喂小鼠，水解失去活性；A错误；由于培养液中缺乏天然培养基中某些无法替代的成分，则体外培养杂交瘤细胞需要在培养液中添加动物血清，添加抗生素防止细菌感染，B正确；诱导骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合的方法有离心、电刺激、聚乙二醇、灭活病毒等试剂诱导，C错误；细胞的全能性是指最后能获得完整个体，而单克隆抗体制备用到了动物细胞融合的原理，其结果是获得杂交细胞，未产生完整个体，D错误．
10．下列关于动物细胞工程和胚胎工程的叙述正确的是（    ）
A．通常采用培养法或化学诱导法使精子获得能量后进行体外受精
B．哺乳动物体外受精后的早期胚胎培养不需要额外提供营养物质
C．克隆牛技术涉及体细胞核移植、动物细胞培养、胚胎移植等过程
D．将小鼠桑葚胚分割成2等份获得同卵双胎的过程属于有性生殖
【答案】C
【分析】哺乳动物的体外受精主要包括卵母细胞的采集、精子的获取和受精等几个主要步骤。胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割成2等份、4等份或8等份等，经移植获得同卵双胎或多胎的技术。来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，因此，胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法之一。
【详解】A、精子获能是获得受精的能力，不是获得能量，A错误；
B、哺乳动物体外受精后的早期胚胎培养所需营养物质与体内基本相同，例如需要有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然成分，B错误；
C、克隆牛技术涉及体细胞核移植、动物细胞培养、胚胎移植等过程，C正确；
D、胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法，D错误。
故选C。
11．基因编辑技术是指能够对目标基因进行“编辑”，实现对特定DNA核酸片段的“敲除”和“插入”等操作。我国科学家利用该技术，获得一只生物节律核心基因BMAL1“敲除”的猕猴，取其成纤维细胞与去核的卵母细胞融合形成重构胚，发育形成的早期胚胎植入代孕雌猴，最终获得5只克隆猕猴，用于研究节律机制。下列叙述正确的是（　　）
A．可用DNA 酶“敲除”核心基因 BMAL1
B．采集卵母细胞前可用雌激素处理雌猴促其排卵
C．常用离心、电刺激等去除卵母细胞的细胞核
D．5只克隆猕猴遗传特性与供体基本一致且性别完全相同
【答案】D
【分析】动物细胞核移植是指将体细胞核移入去核的卵母细胞中，并使其发育成动物个体的过程。利用该技术培育出的动物称为克隆动物。
【详解】A、用DNA酶会将DNA水解为基本单位即4种游离的脱氧核糖核苷酸，无法“敲除”核心基因BMAL1，故不能用DNA酶“敲除”核心基因BMAL1，A错误；
B、采集卵母细胞前可用外源促性腺激素处理雌猴促其超数排卵，B错误；
C、常用显微操作法去除卵母细胞的细胞核，C错误；
D、上述过程主要采用核移植技术，该技术属于无性生殖，5只克隆猕猴遗传特性与供体基本一致且性别完全相同，D正确。
故选D。
12．用X酶切割DNA分子后，得到黏性末端①，用Y酶切割DNA分子后，得到黏性末端②，如下图所示，以下说法错误的是（　　）
①---G
  ---CGATC
②---A
  --- TGATC
A．X酶与Y酶的识别序列均为6个核苷酸
B．限制酶与DNA水解酶破坏的化学键相同
C．具有①②的两个DNA 片段可用T4DNA 接酶连接成重组的DNA子
D．使用X酶和Y酶同时切割目的基因和运载体可以防止目的基因反向连接
【答案】D
【分析】题图分析：结合图示可知，根据X酶切割后形成的黏性末端可知该酶识别的序列为GCTAGC，根据Y酶切割DNA分子后形成的黏性末端可推出其识别的序列为ACTAGT。
【详解】A、根据X与Y切割DNA分子后形成的黏性末端可推出，两种限制酶识别的序列不同，且识别的序列均为6个核苷酸，分别是GCTAGC和ACTAGT，A正确；
B、限制酶与DNA水解酶破坏的化学键相同，都是磷酸二酯键，B正确；
C、具有①②的两个DNA 片段能用T4DNA 连接酶连接成重组的DNA子，因为T4DNA 连接酶不仅能够连接相同的黏性末端，也能连接平末端，C正确；
D、由于X酶和Y酶切割DNA后形成的黏性末端相同，因此使用X酶和Y酶同时切割目的基因和运载体不能防止目的基因的反向连接，D错误。
故选D。
13．下列是通过基因工程对生物体遗传物质进行改造的实例，其中子代不会遗传获得该性状的是（    ）
A．将干扰素基因表达载体导入酵母菌，筛选获得的干扰素工程菌
B．将烟草花叶病毒外壳蛋白基因导入烟草体细胞，最终获得的转基因烟草
C．将抗凝血酶基因导入羊受精卵，培育出作乳腺生物反应器的奶羊
D．以修饰的腺病毒为载体，将治疗囊性纤维化病的正常基因导入患者肺组织中
【答案】D
【分析】用转基因动物生产药物，需要将药用蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，通过显微注射等方法，导入哺乳动物的受精卵中，然后将受精卵送入母体内，使其生长发育成转基因动物。转基因动物进入泌乳期后，可以通过分泌的乳汁来生产所需的药物。
【详解】A、将干扰素基因表达载体导入酵母菌，筛选获得的干扰素工程菌，由于遗传物质发生改变，子代能遗传获得该性状，A错误；
B、将烟草花叶病毒外壳蛋白基因导入烟草体细胞，最终获得的转基因烟草，由于遗传物质发生改变，子代能遗传获得该性状，B错误；
C、将抗凝血酶基因导入羊受精卵，培育出作乳腺生物反应器的奶羊，这是基因工程在医药生产上的应用，该过程中受精卵中的遗传物质发生改变，故可以遗传给后代，C错误；
D、以修饰的腺病毒为载体，将治疗囊性纤维化病的正常基因导入患者肺组织中，由于导入的是体细胞，不能遗传给子代，故子代不会遗传获得该性状，D正确。
故选D。
14．为了在大肠杆菌细胞中成功表达人胰岛素基因，首先需要提取细胞的mRNA，经反转录等过程来获取目的基因。下列相关叙述，错误的是（    ）
A．用于反转录的mRNA只能从胰岛B细胞中获取
B．反转录过程需要四种游离的核糖核苷酸作为原料
C．经反转录得到的目的基因不含启动子
D．反转录获取目的基因时遵循碱基互补配对原则
【答案】B
【分析】1、反转录是利用RNA链为模板，通过碱基互补配对原则，以四种游离的脱氧核糖核苷酸为原料合成DNA的过程；
2、细胞分化的本质是基因的选择性表达，胰岛素基因只在胰岛B细胞中表达，因此只有在胰岛B细胞中才能获取相关mRNA。
【详解】A、胰岛素基因只在胰岛B细胞中表达，因此用于反转录的mRNA只能从胰岛B细胞中获取，A正确；
B、反转录过程是以RNA为模板合成DNA的过程，以四种游离的脱氧核糖核苷酸为原料，B错误；
C、真核细胞的mRNA转录后通过加工剪切了内含子和启动子，因此反转录得到的基因不含启动子和内含子，C正确；
D、反转录获取目的基因是利用碱基互补配对原则获得DNA链，D正确。
故选B。

二、多选题
15．下图为啤酒生产过程的简要流程，其中糖化的目的是将麦芽中的淀粉等有机物水解为小分子物质。下列叙述错误的是（　　）

A．利用大麦作原料时，淀粉是酵母菌的主要碳源
B．过程②破碎有利于淀粉与α−淀粉酶充分接触，缩短糖化过程的时间
C．过程③的主发酵阶段要始终保持厌氧环境，以便完成酒精的生成
D．“精酿”啤酒不进行过滤和消毒，故发酵过程不需要在无菌条件下进行
【答案】ACD
【分析】参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。酵母菌可进行有氧呼吸获得大量能量，从而快速繁殖，又可以进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳。啤酒生产需经过制麦、糖化、发酵等主要环节。
【详解】A、利用大麦作原料时，淀粉需要在淀粉酶作用下水解成麦芽糖才能被酵母菌利用，A错误；
B、糖化的目的是将麦芽中的淀粉等有机物水解为小分子物质，故过程②破碎有利于淀粉与ɑ一淀粉酶的充分接触，缩短精化过程所用的时间，B正确；
C、为了提高菌种数量，缩短发酵时间过程③的主发酵初期应提供氧气，酵母菌在有氧条件下能快建繁殖，C错误；
D、精酿啤酒不进行过滤和消毒，但发酵过程必须在无菌条件下进行，防止杂菌繁殖对发酵过程产生影响，D错误。
故选ACD。
16．野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长，赖氨酸营养缺陷型突变菌由于发生基因突变只能在添加了赖氨酸的培养基上生长。下图为以野生型菌株为材料，诱变、纯化赖氨酸营养缺陷突变株的部分流程图，数字代表培养基，A、B、C表示操作步骤。下列有关说法错误是（　　）

A．①②④培养基中需添加赖氨酸，而③培养基中不能添加赖氨酸
B．野生型大肠杆菌能够合成所需的全部氨基酸，因此培养基中无需提供氮源
C．需将①中的菌液适当稀释后，用接种环蘸取菌液在②上进行涂布接种
D．从④培养基中挑取甲菌落进行纯化培养即可获得所需突变株
【答案】BC
【分析】微生物的诱变育种常常需要使用理化因子对微生物进行处理，微生物会发生基因突变。
培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，是进行微生物培养的物质基础。培养基种类•培养基按照物理性质可分为液体培养基、半固体培养基和固体培养基。微生物的接种方法：平板划线法和稀释涂布平板法。①平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。②稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。
【详解】A、紫外线照射菌液，使大肠杆菌产生基因突变，便于筛选赖氨酸营养缺陷突变株，由于基因突变频率较低，且不定向，因此发生突变的菌种不多，因此需要在①中添加赖氨酸来增大该突变株浓度，以便进行稀释涂布操作，②④中添加赖氨酸目的是使赖氨酸营养缺陷突变株能够在该培养基上生长，③不添加赖氨酸，赖氨酸营养缺陷突变株不能在其上繁殖形成菌落，通过③④对比，选择能在④中生长但是不能在③中生长的菌落即为赖氨酸营养缺陷突变株，故①②④培养基中需添加赖氨酸，而③培养基中不能添加赖氨酸，A正确；
B、野生型大肠杆菌不能够合成所需的全部氨基酸，并且还有别的有机物需要氮元素，因此培养基中需要提供氮源，B错误；
C、需将①中的菌液适当稀释后，用微量移液器吸取少量菌液，用涂布器在②上进行涂布接种，C错误；
D、③中未添加赖氨酸，④中添加赖氨酸，经③④对比，④上的甲菌落为赖氨酸营养缺陷突变株形成的菌落，因此从④培养基中挑取甲菌落进行纯化培养即可获得所需突变株，D正确。
故选BC。
17．下图为烟草植物组织培养过程的流程图。下列有关叙述错误的是（　　）

A．对过程①获取的根组织块应该做彻底的灭菌处理
B．过程②表示脱分化，细胞的形态和结构并未发生变化
C．过程③表示再分化，此培养基中需要加入有机营养物质
D．过程④经紫外线照射得到的X细胞为单倍体细胞
【答案】ABD
【分析】分析题图：图示表示烟草植物组织培养过程的流程图，其中①表示获取外植体，②表示脱分化，③表示再分化，④表示从愈伤组织中获取细胞X，⑤表示进一步发育形成幼苗。
【详解】A、对过程①获取的根组织块应进行消毒处理，如果采用灭菌技术，会使根组织块失去活力，无法进行组织培养，A错误；
B、过程②为脱分化的过程，形成的愈伤组织细胞为无定形状态，所以经过②，细胞的形态和结构发生了变化，B错误；
C、过程③表示再分化，在具有叶片分化之前植物细胞不能进行光合作用，所以植物组织培养的培养基中需要加入有机营养物质，C正确；
D、过程④经紫外线照射得到的X细胞为突变体细胞，不是单倍体细胞，D错误。
故选ABD。
18．如图表示生物工程中常用的部分技术流程图，据图分析错误的是（　　）

A．若图表示植物体细胞杂交部分流程，1和2通常要用相同方法处理
B．若图中1表示目的基因，2表示质粒，构建3中需要用到3种工具酶
C．若图表示哺乳动物体外受精过程，1、2中的细胞均已完成减数分裂
D．若图表示动物细胞核移植部分流程，3的各种性状由供体核来决定
【答案】BCD
【分析】植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞，进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。其中去细胞壁的方法：酶解法，即在温和的条件下用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁。
【详解】A、若图表示植物体细胞杂交部分流程，1和2表示不同的植物细胞，通常要用纤维素酶和果胶酶处理获得原生质体，A正确；
B、若图中1表示目的基因，2表示质粒，构建2中需要用到2种工具酶（限制性内切酶和DNA连接酶），B错误；
C、在哺乳动物体外受精过程，1或2中的卵子未完成减数分裂，C错误；
D、若图表示动物细胞核移植部分流程，生物性状由供体核和受体质共同决定，D错误。
故选BCD。
19．实时荧光 RT-PCR用于RNA病毒的核酸检测，其原理是：在PCR性过程中探针和引物一起与模板结合，探针两侧分别带有荧光基团和抑制荧光发出的淬灭基团，新链延伸过程中，DNA聚合酶会破坏探针，导致荧光基团与淬灭基团分离而发出荧光，如图所示。下列有关叙述正确的有（　　）

A．与细胞内DNA 制相比，该技术用的DNA聚合酶最适温度较高
B．通过温度变化的控制为变性、复性和延伸等过程提供能量
C．该过程中消耗引物的量与发出的荧光强度之间呈负相关
D．与抗体检测相比，核酸检测能更早发现患者并及时治疗
【答案】AD
【分析】PCR技术的条件：模板DNA、四种游离的脱氧核苷酸，一对引物，热稳定DNA聚合酶。
【详解】A、酶作用的发挥需要适宜的条件，实时荧光RT-PCR过程温度要高于体温，所以与细胞内DNA复制相比，该技术用的DNA聚合酶最适温度较高，A正确；
B、温度不能为变性、复性和延伸等过程提供能量，B错误；
C、复性过程中探针和引物一起与模板结合，故消耗引物的量与发出的荧光强度之间呈正相关，C错误；
D、从感染到病毒到抗体产生，需要一定的免疫时间，所以与抗体检测相比，核酸检测能更早发现患者并及时治疗，D正确。
故选AD。

三、实验题
20．酵母的蛋白质含量可达自身干重的一半，可作为饲料蛋白的来源。有些酵母可以利用工业废甲醇作为碳源进行培养，这样既可减少污染又可降低生产成本。研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母，并进行大量培养。下图所示为操作流程，请回答下列问题：

(1)配制培养基时，按照培养基配方准确称量各组分，将其溶解、定容后，及时对培养基进行分装，并进行__________________________灭菌。
(2)取步骤②中不同梯度的稀释液加入在培养皿的_____________上做好标记的无菌培养皿中，在步骤③中将温度约为_____________的培养基倒入培养皿混匀，冷凝后_____________培养。
(3)挑取分离平板中长出的单菌落，按步骤④所示进行划线。操作时，在第二次及以后的划线，总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是_____________________ 。下列关于相关操作叙述合理的有________。
a.为保证无菌操作，接种针、接种环使用前都必须灭菌
b.划线时应避免划破培养基表面，以免不能形成正常菌落
c.挑取菌落时，应挑取多个菌落，分别测定酵母细胞中甲醇的含量
d.可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓度，获得甲醇高耐受株供应。
(4)步骤⑤中，为使酵母数量迅速增加，培养过程中需保证充足的营养和__________供应。为监测酵母的活细胞密度，将发酵液稀释1000倍后，经等体积台盼蓝染液染色，用25×16型血细胞的计数板计数5个中格中的细胞数，理论上_________色细胞的个数应不少于____________才能达到每毫升5×109个活细胞的预期密度。
【答案】(1)高压蒸汽灭菌/湿热灭菌法
(2) 皿底 50℃ 倒置
(3) 随着划线次数的增加使细菌的数量逐渐减少，最终能得到由单个细菌繁殖形成的菌落 a、b、d
(4) 氧气 无 50

【分析】配置培养基的基本操作步骤为：称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板。获得纯净的微生物培养物是发酵工程的基础。 因此，无菌技术是发酵工程的重要技术之一，是指在操作过程中，保持物品与操作区域的无菌状态并不被微生物污染的技术，其核心是灭菌。常见的灭菌方法有干热灭菌法、湿热灭菌法（高压蒸汽灭菌）。
【详解】（1）对于培养基进行灭菌常采用高压蒸汽灭菌法（湿热灭菌法）。所以配制培养基时，按照培养基配方准确称量各组分，将其溶解、定容后，及时对培养基进行分装，并进行高压蒸汽灭菌。
（2）对培养皿进行标记时要标记在培养皿的皿底上，步骤③是倒平板，倒平板时温度控制50℃左右，在步骤③中将温度约为50℃的培养基倒入培养皿混匀，冷凝后倒置培养，倒置培养主要为了防止皿盖上的冷凝水落入培养基。
（3）操作时，在第二次及以后的划线，总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是随着划线次数的增加使细菌的数量逐渐减少，最终能得到由单个细菌繁殖形成的菌落。相关操作合理的有：a、b、d。a.为保证无菌操作，接种针、接种环使用前都必须灭菌，以防杂菌污染，a正确；b.划线时应避免划破培养基表面，以免不能形成正常菌落，若培养基表面划破会导致菌落聚集，b正确；c.挑取菌落时，应挑取单个菌落，分别测定酵母细胞中甲醇的含量，c错误；d.培养基中甲醇浓度越高，能够生存下来的酵母菌利用甲醇的能力越强，所以可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓度，获得甲醇高耐受株供应，d正确。
（4）步骤⑤中，为使酵母数量迅速增加，培养过程中需保证充足的营养和氧气供应，在有氧条件下酵母菌能大量的繁殖。台盼蓝染液染的死细胞，正常活细胞都是无色的，已知血细胞的计数板25×16型：每毫升菌液中待测样本总数=80个小方格内总数/80×400×104×稀释倍数。发酵液稀释1000倍后，台盼蓝等体积加入，所以实际稀释倍数是2000倍。带入可得：5×109=80个小方格内总数/80×400×104×2000，理论上无色细胞的个数应不少50个。

四、综合题
21．人参皂甙具有抗肿瘤等作用。科研人员设计如图1所示流程制备人参皂甙Rg3，并研究了过程③生物反应器中人参细胞产量、人参皂甙Rg3产量随培养时间的变化，结果如图2所示。请回答：

(1)过程②通常需用______________酶处理将愈伤组织分散成单个细胞。过程③通常采用振荡培养，除有利于增加溶解氧外，还能防止________________________。
(2)由图2可知，生物反应器中人参细胞的数量呈________增长，影响人参皂甙Rg3产量的因素有_________和 __________ 。
(3)科研人员研究了人参皂甙Rg3、 LeY 单克隆抗体（LeY是一种肿瘤相关抗原）以及两者联合使用（联合组）对人子宫内膜移行上皮癌细胞数量增长的影响，结果如图3所示。

①药物抑制癌细胞数量增长的途径可能有_____________________________、_______________________等。
②计算细胞数量增长抑制率需测定空白对照组培养相同时间后的细胞数。假设对照组细胞数为m，实验组细胞数为n，请写出计算细胞数量增长抑制率的公式：_________________________________。
③根据图3结果，可得出的结论是_______________________________________________。
【答案】(1) 纤维素酶（和果胶酶） 细胞聚集
(2) S型 人参细胞数量
培养时间

(3) 抑制癌细胞增殖 促进癌细胞凋亡 (m－n)/m×100%
人参皂甙Rg3、LeY单克隆抗体均能抑制癌细胞数量的增长，两者联合使用效果更佳。

【分析】图1所示流程制备人参皂甙Rg3的过程，其中①分别表示脱分化，②表示愈伤组织分散为单细胞悬液，③大量培养提取人参皂甙Rg3。图3表示人参皂甙Rg3、LeY单克隆抗体(LeY是一种肿瘤相关抗原)以及两者联合使用(联合组)对人子宫内膜移行上皮癌细胞数量增长的影响，其中联合组抑制效果最显著，人参皂甙Rg3组最差。
【详解】（1）人参外植体在一定的营养和激素存在条件下脱分化形成愈伤组织，然后通常需用纤维素酶（和果胶酶）处理愈伤组织分散成单个细胞。过程③通常采用液体培养基并振荡培养，除有利于增加溶解氧外，还有利于细胞与营养物质充分接触，还能防止细胞聚集，从而有利于细胞获得更多的营养，从而很好的生长。
（2）由图2可知，生物反应器中人参细胞的数量首先快速增加，然后增加缓慢，最后进入稳定期，故呈S型增长，结合图示分析可知影响人参皂甙Rg3产量的因素有人参细胞数量和培养时间，一定时间内，随着培养间的延长，人参细胞数量越多，人参皂甙Rg3产量越高。
（3）①由图3分析可知，药物抑制癌细胞数量增长的途径可能有抑制癌细胞增殖或者促进癌细胞凋亡等，两者都可以引起细胞数目减少。
②图3曲线特点，则计算细胞数量增长抑制率的公式=(对照组细胞数-实验组细胞数)/对照组细胞数×100%=(m－n)/m×100%。
③根据图3结果，相同时间内，联合组细胞数量增长抑制率最高，其次是LeY单抗组，可得出的结论是人参皂甙Rg3、LeY单克隆抗体均能抑制癌细胞数量的增长，但两者联合使用抑制癌细胞增长效果更佳。
【点睛】本题主要考查植物组织培养的过程和其在获得细胞的代谢产物方面的应用，需要考生具备一定的图文转换能力和综合分析能力。
22．人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白。如图是制备抗HCG单克隆抗体流程示意图，回答下列问题：

(1)制备单克隆抗体过程中要用到______________和____________技术。制备单克隆抗体过程中，给小鼠注射的HCG相当于_________，使小鼠产生能分泌相应抗体的浆细胞。
(2)步骤③需对选择培养的杂交瘤细胞进行_____________和____________，该过程一般在多孔细胞培养板上进行。先将细胞悬浮液稀释到7∽10个细胞/mL，再在每个培养孔中滴入0.1mL细胞稀释液，其目的是使每个孔内不多于一个细胞，达到____________的目的。
(3)在细胞内DNA合成一般有两条途径。主要途径是在细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸，进而合成DNA，而氨基喋呤可以阻断此途径。另一辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下，经酶催化合成DNA，而骨髓瘤细胞的DNA合成没有此辅助途径。根据此原理，向经诱导后的浆细胞与骨髓瘤细胞混合培养液中添加氨基喋呤，___________（填“能”或“不能”）筛选出杂交瘤细胞。原因是浆细胞不能__________、骨髓瘤细胞因__________________________而不能增殖、杂交瘤细胞可通过___________________能够增殖。
(4)用抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体做成的“早早孕诊断试剂盒”，在妊娠第8天就可以做出诊断，而且检测的准确率在90%以上，主要是因为该抗体具有_______________和__________________________的优点。
【答案】(1) 动物细胞培养 动物细胞融合技术 抗原
(2) 克隆化培养 抗体检测 使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的
(3) 能 增殖 DNA合成途径被阻断不能增殖 辅助途径合成DNA
(4) 灵敏度高 特异性强

【分析】单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原，从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞，最后获取单克隆抗体。
【详解】（1）制备单克隆抗体过程中要用到动物细胞培养和动物细胞融合技术。制备单克隆抗体时，需先将抗原物质注入小鼠体内，引发免疫反应，使小鼠产生能分泌相应抗体的浆细胞。所以给小鼠注射的HCG相当于抗原。
（2）由图可知，步骤③需对选择培养的杂交瘤细胞在多孔细胞培养板上进行克隆化培养及抗体检测，经过多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。为了使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的，需先稀释细胞悬液，再在每个培养孔中滴入0.1mL细胞稀释液。
（3）氨基蝶呤可以阻断细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸，进而合成DNA的途径，又因为骨髓瘤细胞的DNA合成没有辅助途径。若向经诱导后的浆细胞与骨髓瘤细胞混合培养液中添加氨基蝶呤能筛选杂交瘤细胞，因为浆细胞不能增殖，骨髓瘤细胞中的DNA合成途径被阻断不能增殖，杂交瘤细胞可通过辅助途径合成DNA，能够增殖。
（4）单克隆抗体：由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体。具有特异性强、灵敏度高，并可能大量制备的特点。
23．我国中科院的研究团队利用细胞工程和基因编辑技术，成功培育出世界上首例只有双母亲来源的孤雌小鼠和双父亲来源的孤雄小鼠，实现了哺乳动物的同性繁殖。实验流程如图所示，请回答下列问题：

(1)卵细胞转化成phFSC相当于植物组织培养中的____________过程，该过程___________（填“存在”或“不存在”）基因的选择性表达。
(2)要培育孤雄小鼠需要将精子和具卵细胞细胞核特点的ahESC同时注入去核的卵母细胞形成重构胚，在对卵母细胞进行去核时，除了显微操作外还可以采用____________、紫外线短时间照射、化学物质处理等方法处理，得到的重构胚通常需要发育到__________阶段才能进行胚胎移植。
孤雄小鼠性染
(3)不考虑致死情况，得到的孤雌小鼠性染色体组成为______________，孤雄小鼠性染色体组成为__________。
(4)在分割囊胚阶段的胚胎时，要注意将_____________，否则会影响胚胎的进一步恢复和发育。利用胚胎分割的方法对乙进行处理得到了多只孤雄小鼠，利用这些孤雄小鼠作为实验材料进行用于医学研究的优点是______________________________________________。
【答案】(1) 脱分化 存在
(2) 梯度离心 桑葚胚或囊胚
(3) XX XX，XY或YY
(4) 内细胞团均等分割 可以基本排除由基因不同造成的个体差异，同时可利用这些遗传背景相同的动物通过它们之间的对比来分析致病基因。

【分析】题图分析，卵细胞被激活转化成phFSC，通过基因编辑技术获得具精子细胞核特点的phESC，获得甲，从而得到孤雌小鼠；精子激活转化成ahFSC，通过基因编辑技术获得具卵细胞细胞核特点的ahESC，获得乙，从而得到孤雄小鼠。
【详解】（1）卵细胞是高度分化的细胞，转化为孤雌胚胎干细胞phFSC相当于植物组织培养中的脱分化阶段，这个过程也存在某些基因的表达和某些基因的关闭，所以存在基因的选择性表达。
（2）要培育孤雄小鼠需要将精子和具卵细胞细胞核特点的ahESC同时注入去核的卵母细胞形成重构胚，在对卵母细胞进行去核时，除了显微操作外，还可以采用梯度离心、紫外线短时间照射、化学物质处理等方法处理，得到的重构胚通常需要发育到桑葚胚或囊胚阶段才能进行胚胎移植，因为此时的胚胎易操作，且处于游离状态。
（3）不考虑致死，孤雌小鼠具有双母亲来源，因此其染色体组成为XX，而孤雄小鼠的染色体来源于两只雄鼠产生的精子，精子的性染色体为X或Y，所以其性染色体可能是XX、XY或YY。
（4）在分割囊胚阶段的胚胎时，要注意将内细胞团均等分割，否则会影响胚胎的进一步恢复和发育。利用胚胎分割的方法对乙进行处理得到了多只孤雄小鼠，这些小鼠遗传物质相同，所以作为实验材料可以排除由基因的差异造成的个体差异，进而可以通过这些遗传背景相同的个体来对比来分析致病基因。
24．土壤盐渍化影响水稻生长发育。科研人员将水稻耐盐基因0sMYB56导入不耐盐碱水稻品种吉粳88中，培育出了4株耐盐碱水稻新品种。其操作流程及相关限制酶识别序列和切割位点如下图，图中Ⅰ～Ⅲ为限制酶的酶切位点，bar抗除草剂基因， Kan为卡那霉素抗性基因。请分析回答：

限制酶
EcoRI
BamHI
HindIII
SacI
识别序列和切制位点
GAATTC
G'GATCC
A'AGCTT
GAGCT'C
(1)过程①需要________________催化。过程③需要用___________处理根瘤农杆菌，使其成为感受态细胞。
(2)过程①所用的一对引物如下，则过程②使用的限制酶是_________和_____________。
5’—CGCGGATCCATGAGAAAGGGCCCGTGG—3’
5’—CGAGCTCCTATCCCCAGAGAGGTAGCGA—3”
(3)花椰菜病毒启动子含有___________________________的核苷酸序列，本研究中设计两个相同启动子分别连接bar和目的基因，其目的是________________________________________。
(4)科研人员采用特定的方法大量提取成功转化的4株植株叶片的基因组DNA（目的基因中不含 AAGCTT），用HindIII全酶切，将产物经电泳、转膜后与目的基因的探针杂交，其杂交带结果如图所示（图中数字标号代表转化成功的植株）。下列有关分析正确的有___________________。

①还有不含目的基因的DNA条带在图中没有显示
②杂交带位置不同说明经HindIII切后形成的DNA 段长度不同
③相同位置上杂交带对应DNA片段的脱氧核苷酸序列相同
④目的基因插入到受体细胞核DNA的位置和数量都是随机的
(5)过程④选择愈伤组织细胞来转化的主要原因是__________________________________，图中⑤属于组织培养中的______________过程。
【答案】(1) Taq酶（耐高温的DNA聚合酶） Ca2+（或CaCl2）
(2) BamHI SacI
(3) RNA聚合酶识别、结合 依据bar表达推测目的基因同时表达
(4)①②④
(5) 愈伤组织分裂旺盛，全能性高 再分化

【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因、检测目的基因是否转录出了mRNA--PCR技术；②检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术--个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
【详解】（1）过程①属于PCR技术扩展，需要耐高温的DNA聚合酶（Taq酶）的催化。过程③属于感受态细胞法导入受体细胞，故需要用Ca2+（或CaCl2）处理根瘤农杆菌，使其成为能吸收外源DNA的状态，即感受态细胞。
（2）观察一对引物5'段会发现BamHI的识别序列GATCC和SacI的识别序列GAGCTC，故过程②使用的限制酶是BamHI和SacI。
（3）启动子又叫RNA聚合酶结合位点，故其含有RNA聚合酶识别、结合的核苷酸序列，本研究中设计两个相同启动子分别连接bar和目的基因，其目的是依据bar表达推测目的基因同时表达。
（4）①消化产物经电泳、转膜后与目的基因的探针杂交，不含目的基因的DNA条带在图中没有显示，①正确；②杂交带位置不同说明HindIII消化形成的DNA片段长度不同，②正确；③相同位置上杂交带对应DNA片段长度相同，脱氧核苷酸序列不一定相同，③错误；④目的基因插入到受体细胞核DNA的位置和数量都是随机的，所以不同植株的实验结果中杂交带数目不同，④正确。综上①②④正确，故选①②④。
（5）过程④是转化，选择愈伤组织细胞来转化的主要原因水稻愈伤组织分裂旺盛，全能性高，通过植物组织培养可以获得转基因植株，图中⑤属于组织培养中的愈伤组织再分化的过程。