2022-2023学年山东省滨州市高二下学期3月联合考试生物试题B卷含解析

这是一份2022-2023学年山东省滨州市高二下学期3月联合考试生物试题B卷含解析，共27页。试卷主要包含了单选题，多选题，综合题等内容，欢迎下载使用。
山东省滨州市2022-2023学年高二下学期3月联合考试
生物试题B卷
学校:___________姓名：___________班级：___________考号：___________

一、单选题
1．绍兴是黄酒之乡“麦曲酶长，酵米复芳；白梅酒酿，伴淋寒香；压滤琼浆，煎煮陈藏”是对绍兴黄酒精致复杂酿造工艺的描述。在黄酒的主要发酵过程中，“开耙”（搅拌）是极为关键的一步。下列相关叙述错误的是（    ）
A．接种麦曲有利于淀粉水解为小分子糖，有利于“酒酿”菌种发酵
B．煎煮的目的是除去发酵产品中的酵母菌等微生物，利于储藏
C．发酵过程中“开耙”可适当提供O2，活化酵母
D．黄酒酿造过程中发酵液出现的气体都在酵母菌细胞质基质中产生
【答案】D
【分析】1、酵母菌是兼性厌氧微生物，在无氧条件下能进行酒精发酵（反应简式②），可用于酿酒、制作馒头和面包等。温度是影响酵母菌生长的重要因素，酿酒酵母的最适生长温度约为28 ℃。
2、二氧化碳不仅是酵母菌无氧呼吸的产物，而且也是酵母菌有氧呼吸的产物，因此不都是在酵母菌细胞质基质中经过无氧呼吸产生的，也有的是在线粒体中经过有氧呼吸第二阶段产生的。
【详解】A、淀粉属于生物大分子物质，水解为小分子糖有利于发酵过程中酵母菌对糖类的利用，A正确；
B、煎煮是进行消毒，除去发酵产品中的酵母菌等微生物，利于储藏，B正确；
C、“开耙”（搅摔）是为了让酵母菌进行有氧呼吸，增加酵母菌的数量，有利于活化酵母，C正确；
D、黄酒酿造过程中发酶液出现的气体是二氧化碳，二氧化碳不仅是酵母菌无氧呼吸的产物，而且也是酵母菌有氧呼吸的产物，因此不都是在酵母菌细胞质基质中经过无氧呼吸产生的，也有的是在线粒体中经过有氧呼吸第二阶段产生的，D错误。
故选D。
2．家庭制作泡菜并无刻意的灭菌环节，在发酵过程中，乳酸菌产生的乳酸就可以抑制其他微生物的生长。当环境中的乳酸积累到一定浓度时，又会抑制乳酸菌自身的增殖。下列有关叙述错误的是（　　）
A．在发酵的初期，乳酸菌的种内关系主要表现为种内互助
B．在发酵的中期，由于营养物质的消耗和代谢产物的积累，乳酸菌的种内竞争趋于激烈
C．密闭的发酵环境使乳酸菌在种间竞争中占据优势
D．在发酵的中期，泡菜坛内各种微生物大量繁殖
【答案】D
【分析】1、“在发酵过程中，乳酸菌产生的乳酸可以抑制其他微生物的生长”，其他微生物和乳酸菌之间属于种间关系，所以属于竞争；
2、“乳酸菌产生的乳酸”，属于乳酸菌之间的共同协作，产生乳酸抑制其他微生物的生长，所以属于种间互助；
3、根据“当环境中的乳酸积累到一定浓度时，又会抑制乳酸菌自身的增殖”，到了后期由于营养物质等资源的缺乏，导致种内发生斗争。
【详解】A、在发酵的初期，乳酸菌数目增加较快，其种内关系主要表现为种内互助、抑制其他微生物的生长，A正确；
B、在发酵的中期，随着营养物质的消耗和代谢产物的积累，乳酸菌的种内竞争趋于激烈，B正确；
C、由于乳酸对乳酸菌代谢活动的影响不大，所以在乳酸菌与其他微生物的生存斗争中乳酸占优势，C正确；
D、在发酵的中期，由于乳酸的大量积累，pH下降，抑制微生物的生长，泡菜坛内的微生物减少，D错误。
故选D。
3．野生型伤寒沙门氏菌（his+）可合成组氨酸，某种突变体丧失了这种能力，必须在添加组氨酸的培养基上才能生长，称为组氨酸营养缺陷型（his），现用两种接种方法接种，甲为平板划线法，乙为稀释涂布平板法。下列有关叙述错误的是（　　）
A．两种方法所用培养基均为固体培养基
B．甲接种方法可用于对微生物的分离和计数
C．甲、乙两种接种方法均可纯化微生物
D．his菌株接种在含有组氨酸的培养基上能长出菌落
【答案】B
【分析】微生物的接种方法：
(1)平板划线法：把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环在平板培养基，通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞，经培养后生长繁殖成单菌落，通常把这种单菌落当作待分离微生物的纯种。
(2稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。
【详解】A、甲是平板划线法，乙是稀释涂布平板法，两种方法都是在固体培养基上进行接种的操作，A正确；
B、平板划线法可用于对微生物的分离纯化，但不能计数；稀释涂布平板法可用于对微生物的分离和计数，B错误；
C、平板划线法和稀释涂布平板法都能在培养基表面形成单个菌落，都可以用于纯化微生物，C正确；
D、野生型伤寒沙门氏菌可合成组氨酸，his菌株突变体丧失了这种能力，必须在添加组氨酸的培养基上才能生长，故his菌株接种在含有组氨酸的培养基上才能长出菌落，D正确。
故选B。
4．2023年春节过后，新冠病毒感染的第一波高峰期已过，但正确佩戴口罩仍是预防二次感染的有效手段。某研究小组对非灭菌的一次性口罩中的微生物进行检测，通过分析微生物的种类和数量来确定口罩的合格性。部分操作如下：从口罩上剪取总量9cm2样品（体积近似1ml），剪碎后加入已灭菌的生理盐水中，定容至10mL，充分混匀，得到样液。下列说法正确的是（    ）
A．取4个经灭菌处理的培养皿，将冷却到40℃的培养基倒入培养皿，待培养基凝固后，将平板倒置
B．向前3个平板中分别加入1mL样液，用涂布器将样液涂布均匀
C．第4个平板不接种样液并与前3个平板共同培养，可用于检测是否有杂菌污染
D．若一段时间后，4个平板上长出的菌落数依次为31、42、35和0个，可计算出1cm2口罩样品中菌体数量为36个
【答案】C
【分析】培养基要冷却到50 ℃左右时开始倒平板。温度过高会烫手，过低培养基又会凝固。
培养未接种的固体培养基是为了作为对照组，排除培养基被杂菌污染的可能。
【详解】A、40℃时琼脂已经凝固，应在培养基冷却至50℃左右时倒平板，A错误；
B、用稀释涂布平板法统计细菌数量时，为避免培养基表面的菌液出现积液，导致菌体堆积，影响分离效果，滴加到培养基表面的菌悬液的量一般不超过0．1 mL，B错误；
C、不接种样液的空白平板可用于检验试验前的灭菌是否彻底，也可检测是否有杂菌污染，C正确；
D、第4个平板没有菌落形成，说明没有杂菌污染，且前三个平板长出的菌落数均在30~300之间，说明操作中的稀释倍数（10倍）是合适的。若接种的样液是0．1 ml，则9 cm2口罩样品中菌体数量为（31+42+35）÷3÷0．1×10=3600个，则l cm2口罩样品中菌体数量为400个，D错误。
故选C。
5．棉花是一种重要的经济作物，但是棉花全株含有对动物生长繁殖存在潜在危害的有毒物质——棉酚，限制了以棉花秸秆为原料来生产青贮饲料的应用。研究人员试图以棉花田的土壤为分离基质，利用以棉酚为唯一碳源的培养基，分离出高效分解棉酚的菌株。下列叙述不正确的是（　　）
A．稀释涂布平板法或平板划线法均可用来分离纯化棉酚分解菌
B．分离过程中所用的以棉酚为唯一碳源的培养基属于选择培养基
C．分离过程中所用的接种工具、培养工具以及培养基都需要高压蒸汽灭菌
D．对分离纯化得到的菌株进行计数时可采用稀释涂布平板法或显微计数法
【答案】C
【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在线的开始部分，微生物往往连在一起生长， 随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】A、稀释涂布平板法或平板划线法均可用于接种纯化，故稀释涂布平板法或平板划线法均可用来分离纯化棉酚分解菌，A正确；
B、分离过程中所用的以棉酚为唯一碳源的培养基， 只有能分解棉酚的微生物能生长，故该培养基属于选择培养基，B正确；
C、分离过程中所用的接种工具、培养工具可以用灼烧灭菌等方法，C错误；
D、对分离纯化得到的菌株进行计数时可采用稀释涂布平板法(用于计数活菌)或显微计数法(计数时活菌和死菌一起被计数)，D正确。
故选C。
6．用啤酒酵母和麦芽汁发酵生产啤酒时，发酵过程分为主发酵和后发酵两个阶段。在主发酵阶段，液体表面先后出现低泡期、高泡期和落泡期。下列说法错误的是（    ）
A．主发酵前需对原麦芽汁蒸煮以破坏酶并灭菌
B．在落泡期酵母菌能快速、大量的繁殖
C．在高泡期应注意散热，防止发酵温度升高
D．后发酵应在低温、密闭的环境下进行
【答案】B
【分析】酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。
【详解】A、主发酵前需对原麦芽汁蒸煮，这样可以破坏酶的结构，避免酶进一步起作用，而且起到灭菌的作用，A正确；
B、在落泡期意味着此时主发酵过程即将结束，环境中代谢产物积累较多，且此时为无氧环境，因而酵母菌不会快速、大量的繁殖，B错误；
C、在高泡期主发酵进行旺盛，此时发酵罐中会产生大量的热量，为了避免发酵罐温度上升，应注意散热，C正确；
D、啤酒发酵的过程分为主发酵和后发酵两个阶段，但酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成，主发酵结束后在低温、密闭环境下储存一段时间属于后发酵，D正确。
故选B。
7．下列关于发酵工程及其应用的叙述，正确的是（　　）
A．分离、提纯获得微生物细胞本身或其代谢产物是发酵工程的中心环节
B．利用黑曲霉水解大豆中的蛋白质，经过淋洗、调制成酱油产品
C．发酵过程中不需要随时取样检测培养液中的微生物数目、产物浓度
D．利用放线菌产生的井冈霉素防治水稻枯纹病属于化学防治
【答案】B
【分析】发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节。在发酵过程中，要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度等，以了解发酵进程。还要及时添加必需的营养组分，要严格控制温度、pH和溶解氧等发酵条件。环境条件不仅会影响微生物的生长繁殖，而且会影响微生物代谢物的形成。
【详解】A、发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节，发酵罐培养的环境条件会影响微生物的生长繁殖，也会影响微生物代谢产物的形成，A错误；
B、以大豆为主要原料，利用产生黑曲霉将大豆原料中的蛋白质水解成小分子的肽和氨基酸，然后经淋洗、调制可以制成酱油产品，B正确；
C、发酵过程中只在最初添加一次菌种，中途需随时取样检测培养液中的细菌数目、产物浓度，以便了解发酵进程，同时还应严格控制温度、pH、溶氧、通气量与转速等条件，并及时添加必需的培养液组分以延长稳定期，增加产量，C错误；
D、利用放线菌通过发酵工程产生的井冈霉素可以用来防治水稻枯纹病，这种治理不会对环境造成影响，属于生物防治，D错误。
故选B。
8．研究者利用胡萝卜韧皮部细胞诱导形成愈伤组织，在培养基中分别添加DNA甲基化酶的抑制剂Aza和组蛋白去甲基化酶的抑制剂GSK，检测发现Aza组、对照组、GSK组形成的愈伤组织体积依次减小。据此分析错误的是（    ）
A．对外植体消毒时，要兼顾消毒的效果和外植体的耐受性
B．DNA甲基化和组蛋白去甲基化分别抑制、促进愈伤组织形成
C．诱导愈伤组织形成过程需无菌、避光、植物激素诱导等条件
D．表观遗传通过改变蛋白质的氨基酸序列进而影响愈伤组织的形成
【答案】D
【分析】表观遗传是指DNA序列不发生变化，但基因的表达却发生了可遗传的改变，即基因型未发生变化而表现型却发生了改变，如DNA的甲基化，甲基化的基因不能与RNA聚合酶结合，故无法进行转录产生mRNA，也就无法进行翻译，最终无法合成相应蛋白，从而抑制了基因的表达。
【详解】A、通常使用酒精和次氯酸钠溶液对外植体进行消毒处理，要兼顾消毒效果和植物的耐受性，避免过度消毒对外植体造成损伤，A正确；
B、分析题意，在培养基中分别添加DNA甲基化酶的抑制剂Aza和组蛋白去甲基化酶的抑制剂GSK，检测发现Aza组、对照组、GSK组形成的愈伤组织体积依次减小，即与对照组相比，加入DNA甲基化酶的抑制剂后愈伤组织体积增大，而加入组蛋白去甲基化酶的抑制剂后愈伤组织体积变小，说明DNA甲基化和组蛋白去甲基化分别抑制、促进愈伤组织形成，B正确；
C、诱导愈伤组织形成过程需无菌、避光（利于愈伤组织的形成）、植物激素（主要是生长素和细胞分裂素）诱导等条件，C正确；
D、表观遗传是指DNA序列不发生变化，但基因的表达却发生了可遗传的改变，基因控制控制蛋白质的合成，故表观遗传不改变蛋白质的氨基酸序列，D错误。
故选D。
9．从紫草细胞内提取得到的紫草宁具有抗炎、抗癌的作用。下图是获得紫草宁的2种工艺路线，下列叙述正确的是（    ）

A．为防止培养过程中出现病毒污染，常选择紫草的叶片作为外植体
B．经消毒处理的外植体需用自来水多次冲洗，以防止消毒剂对细胞的毒害
C．诱导外植体形成愈伤组织的过程中需要一定比例的2，4—D和萘乙酸的作用
D．可用射线照射以获得高产细胞株，需经多次传代培养以确定高产性状是否稳定遗传
【答案】D
【分析】植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。在生长素存在的情况下，细胞分裂素的作用呈现加强的趋势。
【详解】A、植物的根尖、茎尖、芽尖分裂旺盛，感染病毒的几率小，常作为外植体，A错误；
B、经消毒处理的外植体需用无菌水多次冲洗，B错误；
C、诱导外植体脱分化获得愈伤组织的过程中通常需要一定比例的生长素和细胞分裂素调节，C错误；
D、用射线照射利用诱变育种以获得高产细胞株，需经多次传代培养以确定高产性状是否稳定遗传，D正确。
故选D。
10．2020年诺贝尔生理学或医学奖授予发现丙肝病毒的三位科学家。丙肝病毒引起的丙型肝炎可导致肝脏慢性炎症坏死和纤维化，部分患者可发展为肝硬化甚至肝癌。下图为利用小鼠甲为实验材料研制丙肝病毒的单克隆抗体的实验流程。下列叙述错误的是（    ）

A．在动物细胞培养时，培养液中除营养物质外还要添加一定量的血清
B．动物细胞培养时通常采用培养皿或松盖培养瓶，并将其置于含有95%O2加5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养
C．图中筛选1的目的是获得杂交瘤细胞
D．若B淋巴细胞的基因型为HH，骨髓癌细胞的基因型为SS，在两两融合后基因型可能有HHSS、HHHH、SSSS
【答案】B
【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞，诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，进行克隆化培养和抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞，注入小鼠腹腔中培养或者体外培养，最后从小鼠腹水或者培养液中获取单克隆抗体。单克隆抗体制备过程中至少涉及两次筛选，第一次是利用选择性培养基进行初步筛选出杂交瘤细胞，第二次是利用克隆化培养和抗体检测的方法筛选出既能大量增殖，又能产生所需抗体的杂交瘤细胞。
【详解】A、为了更好地促进动物细胞的培养，尽可能模拟细胞在体内的生活环境，培养液中除营养物质外还要添加一定量的血清、血浆，A正确；
B、动物细胞培养时通常采用培养皿或松盖培养瓶，并将其置于含有95%空气加5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养，CO2的主要作用是维持培养液的pH，B错误；
C、融合后的体系中含有多种细胞，未融合的同种细胞，融合的具有同种核的细胞，还有杂交瘤细胞，筛选1的目的是为了获得杂交瘤细胞，C正确；
D、二者的融合细胞的种类可能有B淋巴细胞+B淋巴细胞、骨髓瘤细胞+骨髓瘤细胞、骨髓瘤细胞+B淋巴细胞，基因型可能是HHHH、SSSS、HHSS，D正确。
故选B。
11．灭活疫苗是将培养扩增的活病毒通过物理或化学手段灭活后，经过系列纯化制备的生物制剂。国产新冠灭活疫苗的大致生产流程如下，将抗原性强的病毒接种到Vero细胞中培养，再使病毒经过β-丙内酯灭活等过程制备成疫苗。下列相关说法错误的是（　　）
A．Vero细胞的细胞膜上存在新冠病毒能够特异性识别的受体
B．培养Vero细胞时，需要对培养液和所有培养用具进行灭菌，以保证无毒的环境
C．培养时，需将Vero细胞置于含95%空气和5%CO2的气体环境中
D．β-丙内酯灭活会使新冠病毒失去感染能力但不会破坏其抗原结构
【答案】B
【分析】动物细胞培养的条件：
1、营养物质：无机物(无机盐、微量元素等)，有机物(糖、氨基酸、促生长因子等) 。通常需要加入血清。
2、温度、pH和渗透压。
3、无菌、无毒的环境：对培养液和所有培养用具进行无菌处理，通常还要在培养液中加入一定量的的抗生素，以防被污染。此外应定期更换培养液，以便清除代谢产物防止细胞代谢产物累积对细胞自身产生危害。
4、气体环境(95%的空气+5%CO2的混合气体) ，其中5%CO2气体是为维持培养液的pH稳定 。
【详解】A、题干中用Vero细胞培养新冠病毒，因此Vero细胞的细胞膜上需存在新冠病毒能够特异性识别的受体，便于病毒识别，A正确；
B、培养Vero细胞时，需要对培养液和所有培养用具进行灭菌，以保证无菌的环境；培养液需要定期更换，及时清除代谢产物，以保证细胞培养的无毒的环境，B错误；
C、需将Vero细胞置于含95%空气和5% CO2混合气体的培养箱中进行培养，O2是细胞代谢所必需的，CO2主要作用是维持培养液的pH，C正确；
D、β-丙内醋灭活会使新冠病毒失去感染能力，但不会破坏其表面的蛋白结构，保留其抗原性，D正确。
故选B。
12．如下图为诱导多能干细胞（iPS细胞）用于治疗糖尿病的示意图，下列相关叙述错误的是（　　）

A．干细胞存在于多种组织和器官中，包括胚胎干细胞和成体干细胞等
B．诱导iPS细胞分化的实质是动物细胞核具有发育的全能性
C．除图中的成纤维细胞，已分化的T细胞和B细胞等均能被诱导为iPS细胞
D．将分化得到的胰岛细胞移植回病人体内治疗，理论上可避免免疫排斥反应
【答案】B
【分析】动物和人体内少数具有分裂和分化能力的细胞称为干细胞，干细胞存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中，包括胚胎干细胞和成体干细胞等。
【详解】A、动物和人体内少数具有分裂和分化能力的细胞称为干细胞，存在于多种组织和器官中，包括胚胎干细胞和成体干细胞等，A正确；
B、诱导iPS细胞分化的实质是基因选择性表达的结果，B错误；
C、iPS细胞最初是由成纤维细胞转化而来，后来发现已分化的T细胞和B细胞等均能被诱导为iPS细胞，C正确；
D、用患者自己的体细胞通过体外诱导成胰岛细胞，并将胰岛细胞细胞移植回病人体内，由于移植的细胞是由病人自身细胞得到的，理论上可以避免免疫排斥反应，D正确。
故选B。
13．试管婴儿技术是目前最常见的一种辅助生殖技术，下图为试管婴儿的培育过程示意图。下列相关分析正确的是（    ）
  
A．试管婴儿和克隆动物的培育原理、操作步骤都基本一致
B．图中，精子获能、受精作用等都是在生物体外完成的
C．囊胚的三个胚层进一步分化，将成为各种器官的原基
D．若胚胎移植到供卵的女性子宫内，则会引起免疫排斥反应
【答案】B
【分析】试管婴儿是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术，属于有性生殖。
【详解】A、“试管婴儿”属于有性生殖，“克隆动物”属于无性繁殖，原理不一样，操作步骤也不相同，A错误；
B、试管婴儿技术中精子获能（在获能液中进行）、受精作用等都是在生物体外完成的，B正确；
C、囊胚分化出内细胞团和滋养层，没有三个胚层，原肠胚才有三个胚层，C错误；
D、由于经过同期发情等处理过，若胚胎移植到供卵的女性子宫内，不会引起免疫排斥反应，D错误。
故选B。
14．随着三胎政策的落地，辅助生殖技术也逐渐被越来越多的人所熟知，下图是试管婴儿技术的主要操作流程示意图，下列叙述正确的是（    ）

A．采集到的精子和卵母细胞可直接用于体外受精
B．在取卵前可让女方口服性激素诱发其超数排卵
C．①、②、③分别表示体外受精、早期胚胎培养、胚胎移植
D．胚胎移植前可从内细胞团取样做基因检测进行遗传病的筛查
【答案】C
【分析】体外受精联合胚胎移植技术：又称试管婴儿，是指分别将卵子与精子取出后，置于试管内使其受精，再将胚胎前体即受精卵移植回母体子宫内发育成胎儿。试管婴儿是用人工方法让卵子和精子在体外受精并进行早期胚胎发育，然后移植到母体子宫内发育而诞生的婴儿。
【详解】A、采集到的精子和卵母细胞不能直接用于体外受精，参与体外受精的精子要进行获能处理，卵母细胞也需要培养至减Ⅱ中期才能进行受精作用，A错误；
B、在取卵前可让女方注射促性腺激素可诱发其超数排卵，B错误；
C、图中①、②、③分别表示体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植过程，这是试管婴儿培育过程的三个重要环节，C正确；
D、胚胎移植前可从滋养层细胞取样做基因检测进行遗传病的筛查，不能选择内细胞团细胞做检测，因为内细胞团受到破坏会影响胚胎的发育，D错误。
故选C。
15．研究发现，无机盐离子的特殊配比可促使犬早期胚胎的基因组激活，而添加新鲜的维生素、组织液提取物等物质则可帮助犬早期胚胎维持正常的形态和细胞分化。下列有关胚胎工程的叙述，错误的是（　　）
A．可对犬注射一定量的促性腺激素使其超数排卵来获得多个犬卵母细胞
B．可选择桑葚胚、囊胚和原肠胚时期的胚胎进行胚胎分割以获得多个胚胎
C．早期胚胎的体外培养液中还要注意气体条件且应该加入血清等成分
D．囊胚期胚胎细胞开始分化出现了内细胞团和滋养层细胞
【答案】B
【分析】胚胎的早期培养：
（1）培养目的：精子与卵子在体外受精后，应将受精卵移入发育培养液中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力。
（2）培养液成分：除一些无机盐和有机盐外，还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及血清等物质。
（3）当胚胎发育到适宜的阶段时，可将其取出向受体移植或冷冻保存。不同动物胚胎移植的时间不同（牛、羊一般要培育到桑葚胚或囊胚阶段才能进行移植，小鼠、家兔等实验动物可在更早的阶段移植，人的体外受精胚胎可在4个细胞阶段移植）。
【详解】A、为获得多个犬卵母细胞，可对犬注射一定量的促性腺激素使其超数排卵，A正确；
B、进行胚胎分割时，应选择囊胚或之前的桑葚胚进行，B错误；
C、早期胚胎的体外培养液中还应该加入有机盐和血清等成分并需控制好温度和气体条件，C正确；
D、早期胚胎包括桑葚胚、囊胚和原肠胚等，囊胚期开始出现细胞分化，出现了内细胞团和滋养层细胞，D正确。
故选B。

二、多选题
16．研究人员拟从土壤样品中分离出高效降解甲醇的酵母并进行大量培养。操作流程如下，相关叙述正确的是（    ）

A．为保证无菌操作，培养基、接种环等使用前都必须干热灭菌
B．平板浇注分离法适宜于厌氧型或兼性厌氧型的微生物的分离和计数
C．挑取菌落时，应挑取多个菌落，分别测定酵母细胞中甲醇的含量
D．扩大培养时，可以通过监测发酵过程中残余糖的浓度来决定何时终止发酵
【答案】BD
【分析】酵母菌是兼性厌氧菌，为从土壤样品中分离出高效降解甲醇的酵母，需保证全程的无菌操作，要对培养基、接种环等器具进行灭菌处理。
【详解】A、为从土壤样品中分离出高效降解甲醇的酵母，要保证全程无菌操作，对培养基、接种环等进行灭菌处理，其中培养基使用高压蒸汽灭菌，而接种环使用灼烧灭菌，A错误；
B、平板浇注分离法适宜于厌氧型或兼性厌氧型的微生物的分离和计数，涂布法适用于好氧微生物的培养，B正确；
C、挑取菌落时，应挑取多个菌落，分别测定培养液中甲醇的含量，C错误；
D、发酵液中残留糖的浓度可指示发酵的进程，随着发酵的进行，当发酵液中糖的浓度降到较低水平时，酵母代谢减慢，此时可终止发酵，D正确。
故选BD。
17．培养胡萝卜根组织可获得试管苗，获得试管苗的过程如图所示。

有关叙述正确的是（    ）
A．消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害
B．步骤③切取的组织块中要带有形成层，因为形成层容易诱导形成愈伤组织
C．从步骤⑤到步骤⑥需要更换新的培养基主要是因为有害代谢产物积累
D．步骤⑥要进行照光培养，诱导叶绿素的形成，使试管苗能够进行光合作用
【答案】ABD
【分析】植物组织培养过程：离体的植物器官、组织或细胞→愈伤组织→胚状体→植物体。常用的植物激素生长素和细胞分裂素。
【详解】A、图中对根段进行消毒，消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，防止培养过程中杂菌污染，又减少消毒剂对细胞的伤害，A正确；
B、步骤③切取的组织块中要带有形成层，形成层的细胞保持分裂和分化能力，全能性相对容易表现出来，形成层容易诱导形成愈伤组织，B正确；
C、从步骤⑤到步骤⑥需要更换新的培养基主要是因为诱导愈伤组织形成的植物激素和诱导愈伤组织分化的植物激素的种类和比例不同，C错误；
D、步骤⑥要进行照光培养，诱导叶绿素的形成，因为叶绿素的形成需要光照，使试管苗能够进行光合作用，D正确。
故选ABD。

三、单选题
18．下列关于“酵母菌的纯培养”（实验Ⅰ）和“菊花的组织培养”（实验Ⅱ）的叙述，正确的是（    ）
A．实验Ⅰ可通过平板划线达到分离纯化酵母菌的目的
B．实验Ⅱ前期需要持续光照，后期需要遮光处理
C．均应在培养基中加入相关的激素以促进细胞分裂
D．均需通入95%的空气和5%CO2以维持培养基的pH
【答案】A
【分析】平板划线的操作流程：接种环灼烧灭菌，接种环蘸取菌种，平板划线，待菌液被培养基吸收，再倒置培养。
【详解】A、酵母菌的纯培养，即实验I中可通过平板划线法获得单个细胞形成的菌落，进而可达到分离纯化酵母菌的目的，A正确；
B、“菊花的组织培养”(实验Ⅱ)前期不需要光照，在后期需要适当照光，有利于芽的形成，进而可进行光合作用，B错误；
C、“菊花的组织培养”，即实验Ⅱ中应在培养基中加入相关的激素以促进细胞分裂，而在实验Ⅰ中不需要加入相关激素，C错误；
D、在动物细胞培养过程中需通入95%的空气和 5% CO2以维持培养液的 pH，而本题中的两个实验不需要该操作，D错误。
故选A。

四、多选题
19．如图是单克隆抗体制备过程示意图，1～3代表相关过程，a～e代表相关细胞，其中c是两两融合的细胞。以下叙述错误的是（    ）

A．过程1是给小鼠注射特定抗原蛋白，可刺激小鼠产生特异性免疫反应
B．过程2的促融合方法可采用电融合技术
C．c细胞有三种，每种细胞染色体组数不相等，e细胞是杂交瘤细胞
D．过程3是进行抗体检测，并克隆产生阳性细胞的过程
【答案】BC
【分析】单克隆抗体的制备涉及细胞融合、细胞培养和细胞筛选，从题干信息图可看出，过程1代表的是注射特异性抗原使小鼠免疫，从而获得能产生相应抗体的B淋巴细胞；过程2是将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的过程；过程3是克隆培养筛选后的阳性细胞，一共需要进行两次，最终获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，此后在培养基或小鼠腹腔中培养。
【详解】A、图中过程1是通过注射抗原或抗原蛋白来获得产生相应抗体的B淋巴细胞，A正确；
B、过程2是促进细胞融合的过程，其中电融合技术是用低压电流击穿细胞膜促使细胞融合，B错误；
C、c细胞为杂交细胞，有三种，分别是骨髓瘤细胞-骨髓瘤细胞、骨髓瘤细胞-B淋巴细胞、B淋巴细胞-B淋巴细胞，其中骨髓瘤细胞和B淋巴细胞都有两个染色体组，融合后的细胞都含有4个染色体组，其中e细胞是杂交瘤细胞，C错误；
D、过程3是专一抗体检测及克隆培养筛选后获得阳性细胞，该过程需要多次进行，D正确。
故选BC。
20．我国科研人员利用大鼠、小鼠两个远亲物种创造出世界首例异源二倍体胚胎干细胞(AdESCs)，具体流程如下图。下列有关叙述错误的是  （    ）    
      ..
A．该项技术说明大鼠和小鼠之间不存在生殖隔离
B．AdESCs获得涉及动物细胞融合技术和早期胚胎培养技术等
C．AdESCs的染色体数目与大鼠—小鼠体细胞融合的杂种细胞的不同
D．图中囊胚中的细胞不存在同源染色体，AdESCs细胞含有同源染色体
【答案】AD
【分析】分析题图：小鼠的卵母细胞体外培养到囊胚时期，取内细胞团细胞培养成孤雌单倍体胚胎干细胞，取大鼠的精子体外培养到囊胚时期，取内细胞团细胞培养成孤雄单倍体胚胎干细胞，两种胚胎融合成异种杂合二倍体胚胎干细胞（AdESCs）。
【详解】A、图示是将大鼠、小鼠的单倍体胚胎干细胞诱导融合形成AdESCs，由于该项技术能突破生殖隔离，因此不能说明大鼠和小鼠之间不存在生殖隔离，A错误；
B、图示将生殖细胞培养为单倍体囊胚利用了早期胚胎培养技术，将大鼠、小鼠的单倍体胚胎干细胞诱导融合形成AdESCs，利用了动物细胞融合技术，B正确；
C、AdESCs的染色体是由大鼠、小鼠体细胞中各一半的染色体数组成的，而大鼠—小鼠体细胞融合的杂种细胞内的染色体是由大鼠、小鼠的体细胞内染色体数之和构成的，因此AdESCs的染色体数目与大鼠—小鼠体细胞融合的杂种细胞的不相同，C正确；
D、根据题意“利用大鼠、小鼠两个远亲物种创造出世界首例异源二倍体胚胎干细胞(AdESCs)”，说明大鼠、小鼠的单倍体胚胎干细胞都只含一个染色体组，因此图中囊胚中的所有细胞都不存在同源染色体，由于大鼠、小鼠是两个远亲物种，因此AdESCs细胞也不含有同源染色体，D错误。
故选AD。

五、综合题
21．青梅果肉营养丰富，成熟的青梅果实易腐烂，不易运输保存。进行青梅果酒研究，既可提高青梅资源利用率，又可提高产品附加值。图1为制作青梅果酒的简易装置图；由于青梅果肉含糖量低，往往在青梅果浆中加入白砂糖后再进行酿制，图2为在青梅果浆中添加白砂糖对酒精度和果酒感官评分的影响（感官评分越高，果酒的品质越高）。

(1)在青梅果酒发酵过程中，图1装置中的充气口应处于______状态，排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接，目的是______。可在酸性条件下，用______（填试剂名称）检测有无果酒产生。
(2)生产酒和醋都需要严格筛选菌种和控制温度条件。在酒精发酵时，使用的菌种为______；在醋酸发酵时，使用的菌种为______。从图2可看出，青梅果酒酿制时果浆中初始糖浓度为______时效果最佳，在此浓度之前，果酒酒精度随初始糖浓度的增加而增加，原因是______。（答出2点）在青梅果酒酿制过程中，若发酵时间过长，产酒率不再增加，但会增加被杂菌污染的风险，若被醋酸菌污染，______（填“会”或“不会”）经发酵产生大量醋酸，理由是______。（答出2点）
【答案】(1) 关闭 避免空气中其他微生物进入发酵装置（或防止空气中的微生物污染） 重铬酸钾溶液
(2) 酵母菌 醋酸菌 20% 糖类是主要的能源物质，可为酵母菌的生长、繁殖提供能源物质，还可作为酒精发酵的原料 不会 酒精发酵是无氧环境，而醋酸发酵需要氧气，且酒精发酵与醋酸发酵的温度不同

【分析】1、果酒工艺生产流程：选料一冲洗一压榨过滤一灭菌一接种一发酵一过滤一果酒。
2、果酒制作过程中温度控制在18-25℃，先通气后密封，发酵10-12d；果醋制作过程中温度控制在30-35℃，全程通气，发7-8d。
【详解】（1）果酒发酵是在无氧环境中进行的，因此在青梅果酒发酵时，图1装置中的充气口应关闭，排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接，目的是避免空气中其他微生物进入发酵装置(或防止空气中的微生物污染)。酒精可用酸性重铬酸钾来检测，颜色由橙色变成灰绿色，因此，可在酸性条件下，用重铬酸钾溶液与发酵液反应检测有无果酒产生。
（2）酒精发酵的菌种是酵母菌，醋酸发酵的菌种是醋酸菌。从图2曲线可看出，当初始糖浓度为20%时，酒精度及果酒感官评分均最高，效果最佳。糖类是主要的能源物质，在果汁中加入糖可为酵母菌的生长繁殖提供能源物质，另外，糖是发酵的原料，加入的糖可作为酒精发酵的原料，所以在初始糖度低于20%时果酒酒精度随初始糖度的增加而增加。果酒发酵后期若被醋酸菌污染，仍不会经发酵产生醋酸，因为酒精发酵是无氧环境，而醋酸菌是需氧型生物，醋酸发酵需要氧气，且酒精发酵与醋酸发酵的温度不同，果酒制作过程中温度比果醋制作的温度低。
22．氮素污染物是造成水体污染和富营养化的主要原因之一，水体中氮素的去除对清洁水体有重要意义、异养硝化细菌能降解硝酸铵产生氨，科研工作者从污水中筛选出异养硝化细菌ZW2和ZW5菌株，并研究其去氮能力。回答下列问题：
(1)进行ZW2和ZW5菌株初步筛选时，通常采用______法或______法进行接种。初步筛选时，样品中含有多种微生物，培养后，一般依据______来区分不同的微生物。
(2)从污水中分离ZW2和ZW5菌株时，培养基中需要加入硝酸铵等营养物质、琼脂和酚红指示剂。培养后，这两种细菌都能生长并形成菌落，结果如图所示。______（填“ZW2”或“ZW5”）菌株的去氮能力更强，判断依据是______。
(3)在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为106的样品液0.1mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为168、171、165、178和168。则每毫升样品中的细菌数量______个、与此方法相比，用血细胞计数板计数法统计得到的细菌数量______。

(4)上图培养基从物理性质分应属于______，接种用到的工具是______。
【答案】(1) 稀释涂布平板 平板划线 菌落特征（或菌落的形状、大小、隆起程度和颜色等）
(2) ZW5 ZW5菌落周围的红色圈面积大，其降解硝酸铵产生氨的能力更强
(3) 1.7×109 多
(4) 固体培养基 涂布器

【分析】分离微生物常用的方法：
1、平板划线法： 通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。
2、稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基的表面，进行培养。稀释涂布平板法还可以用于对微生物进行计数。
【详解】（1）进行ZW2和ZW5菌株初步筛选时，通常采用平板划线法或稀释涂布平板法进行接种。一般来说，在相同的培养条件下，同种微生物表现出稳定的菌落特征。故初步筛选时，可根据菌落的形状、大小、隆起程度和颜色等方面的菌落特征区别不同微生物。
（2）由图分析可知，ZW5菌落周围的红色圈面积大，说明其降解硝酸较产生氨的能力更强，故如果要得到目标菌，应该选择ZW5。
（3）结合题干实验过程可知，该过程采取了稀释涂布平板法，为了保证结果准确，一般选择菌落数在30-300的平板进行计数。在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为106的溶液0.1mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为168、171、165、178和168，菌落平均数=(168+171+165+178+168)÷5=170，所以每克土样品中的细菌数量=170÷0.1×106=1.7×109个。若要测定培养液中选定菌种的数量，也可以在显微镜下用血细胞计数板直接计数，包括培养液中的死亡的细胞，所以统计得到的细菌数量多。
（4）上图是稀释涂布平板法得到的菌落，培养基从物理性质分应属于固体培养基，接种用到的工具是涂布器。
23． 将基因型为AaBb的水稻（具有24条染色体）的叶肉细胞通过无菌操作接入含有营养成分全面的培养基的试管中，在一定条件下培养形成试管幼苗，其过程如图所示：

(1)图中水稻的叶肉细胞要经过消毒处理后才能进行培养。其中［1］过程中，细胞的分化程度会______填“升高”“降低”或“不变”）。愈伤组织经过［2］过程重新分化成根和芽的过程叫_______________。常用的培养基有脱分化培养基、生根培养基和生芽培养基，这三种培养基的主要差异是_____________________________。
(2)在形成愈伤组织的过程中，细胞必须不断地从培养基中获得_______________和小分子有机物等营养物质。
(3)如果［4］是脱毒植株，则“水稻的某种细胞”应选用___________________细胞，这种繁殖方式实际上是______________，培养成的植株的基因型为______________。
(4)如果“某种细胞”选用的是花粉细胞，则［4］称为_________________植株，该植株的特点是___________，需用____________________处理，使其恢复正常体细胞染色体数。
【答案】(1) 降低 再分化 生长素/细胞分裂素的比例不同
(2)水分、无机盐
(3) 根尖或茎尖 无性繁殖 AaBb
(4) 单倍体 高度不育 秋水仙素

【分析】愈伤组织是指原植物体的局部受到创伤刺激后，在伤口表面新生的组织。它由活的薄壁细胞组成，可起源于植物体任何器官内各种组织的活细胞。
【详解】（1）［1］过程为脱分化处理，高度分化的植物细胞形成愈伤组织，细胞的分化程度降低；［2］过程为愈伤组织的再分化过程；植物在不同阶段需要的营养不同，脱分化培养基、生根培养基和生芽培养基目的不同，因此生长素/细胞分裂素的比例不同。
（2）愈伤组织不能进行光合作用，在形成愈伤组织的过程中，细胞需要从外界获得水分、无机盐和小分子有机物如氨基酸、葡萄糖等营养物质。
（3）根尖或茎尖处细胞分裂旺盛、感染病毒的概率小，常作为脱毒苗的首选；这种繁殖方式不经过两性细胞的结合，为无性繁殖；培养成的植株的基因型与原植株相同，为AaBb。
（4）花粉为雄配子，配子发育来的为单倍体；水稻具有2个染色体组，该植株只有1个染色体组，无同源染色体，减数分裂异常，因此高度不育；秋水仙素抑制纺锤体的形成，会使染色体数目加倍，因此可使单倍体恢复为正常体细胞染色体数。
24．埃博拉病毒（EBoV）呈纤维状，EBoV衣壳外有包膜，包膜上有5种蛋白棘突（VP系列蛋白和GP蛋白），其中GP蛋白最为关键，能被宿主细胞强烈识别。人感染埃博拉病毒后会引起出血热。治疗疾病的有效方法是注射疫苗或者抗体。如图为制备埃博拉病毒的单克隆抗体的过程，据图回答问题：
  
(1)埃博拉病毒（EBoV）侵入人体时，在细胞中以RNA为模板，在_______________酶的作用下，合成相应的DNA并指导蛋白质合成，进行增殖。冻干剂型埃博拉病毒疫苗于2017年10月在我国研制成功。以GP蛋白作为疫苗比较安全，其原因是GP蛋白自身没有感染能力，但保留有_______________。
(2)B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合的过程均体现了细胞膜具有___________________的结构特点。在体外融合时需要诱导，与诱导植物原生质体融合不同的是图中还可用____________________诱导融合。筛选后的所需细胞群应具备的特点是_______________。
(3)在体外进行动物细胞培养时需要在合成培养基的基础上添加___________________等天然成分。同时为了维持培养液的pH和供细胞代谢利用，需要提供的气体环境是___________________。
(4)获得的单克隆抗体最终可以从___________________中提取。“生物导弹”中，抗体的靶向作用是利用了其具有___________________的特点。
【答案】(1) 逆转录 抗原性
(2) （一定的）流动性 灭活的病毒 既能无限增殖又能产生单一抗体
(3) 血清 95%的空气和5%的二氧化碳
(4) 小鼠腹水或培养液 特异性

【分析】单克隆抗体制备的过程：对小动物注射抗原，从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞（体内培养和体外培养），最后获取单克隆抗体。
【详解】（1）埃博拉病毒侵入人体时，在细胞中以RNA为模板，在逆转录酶的作用下，合成相应的DNA并指导蛋白质合成，进行增殖。GP蛋白作为疫苗比较安全，是因为GP蛋白自身没有感染能力，但保留有抗原性，可以刺激机体产生特异性免疫反应。
（2）B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合的过程均体现了细胞膜具有一定的流动性。在体外融合时需要诱导，动物细胞融合可以用电融合法、PEG融合法、灭活病毒诱导法；植物原生质体融合可以用电融合法、PEG融合法，不能用灭活病毒诱导法，故与诱导植物原生质体融合不同的是图中还可用灭活的病毒诱导融合。筛选后的所需细胞群即杂交瘤细胞，其既能无限增殖又能产生单一抗体。
（3）在体外进行动物细胞培养时需要在合成培养基的基础上添加血清等天然成分。同时要提供相应的气体环境，即95%的空气和5%的二氧化碳，其中氧气用于细胞代谢，二氧化碳可以维持培养液的pH。
（4）杂交瘤细胞可以在培养液中培养，也可以在小鼠的腹腔中培养，故可以从培养液或小鼠腹水中提取单克隆抗体。“生物导弹”可以借助单克隆抗体的导向作用，将药物定向带到癌细胞所在位置，抗体的靶向作用是利用了其特异性。
25．下图表示克隆短尾猴的流程。我国科学家通过调控组蛋白的甲基化和乙酰化修饰，调节重构胚相关基因的表达，解决了体细胞克隆猴胚胎的发育率和妊娠率低这一技术难点。回答下列问题：

(1)采集的卵母细胞要在体外培养到_____；普遍使用_____法去核。
(2)除病毒诱导外，还可以采用_____法诱导成纤维细胞与去核卵母细胞融合。
(3)图中的化学方法包括用曲古抑菌素A外理和注入Kdm4d的mRNA，结果极大地提高了胚胎的发育率和妊娠率。已知曲古抑菌素A是组蛋白去乙酰化酶抑制剂，Kdm4d是去甲基化酶，能去除组蛋白甲基化位点H3K9me3中的甲基。据此分析，图中的化学方法能提高胚胎发育率和妊娠率的机制分别是_____。
(4)胚胎移植前，需要对代孕母猴进行_____处理，为即将移入的胚胎提供合适的生理环境。克隆猴的成功培育，说明重构胚具有_____的能力；克隆小猴的性别与图中_____的相同。
【答案】(1) 减数分裂Ⅱ中期 显微操作
(2)电融合
(3)曲古抑菌素A通过提高组蛋白的乙酰化水平，调节重构胚相关基因的表达，Kdm4d的mRNA表达Kdm4d，降低组蛋白的甲基化水平，调节重构胚相关基因的表达，进而提高胚胎发育率和妊娠率
(4) 同期发情 发育成完整个体 胎儿猴

【分析】核移植技术指的是将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体；用核移植的方法得到的动物称为克隆动物，原理是动物细胞核的全能性；动物细胞核移植可分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植。
【详解】（1）从母猴卵巢采集的卵母细胞需在体外培养至减数第二次分裂中期再进行去核操作，目前动物细胞核移植技术普遍使用的去核方法是显微操作法。
（2）诱导成纤维细胞与去核卵母细胞融合的方法有病毒诱导和电融合法等。
（3）分析题意，曲古抑菌素A是组蛋白去乙酰化酶抑制剂，Kdm4d是去甲基化酶，能去除组蛋白甲基化位点H3K9me3中的甲基，结合题图可知，图中的化学方法能提高胚胎发育率和妊娠率的机制分别是：曲古抑菌素A通过提高组蛋白的乙酰化水平，调节重构胚相关基因的表达，Kdm4d的mRNA表达Kdm4d，降低组蛋白的甲基化水平，调节重构胚相关基因的表达，进而提高胚胎发育率和妊娠率。
（4）胚胎移植前，为避免发生免疫排斥，为即将移入的胚胎提供合适的生理环境，需要对代孕母猴进行同期发情处理；克隆猴的成功培育，说明重构胚具有发育成完整个体的能力；克隆小猴的性别与提供细胞核的个体性别相同，即与图中的胎儿猴相同。