2022-2023学年天津市宝坻区一中高二下学期第一次阶段性练习生物试题含解析

这是一份2022-2023学年天津市宝坻区一中高二下学期第一次阶段性练习生物试题含解析，共32页。试卷主要包含了单选题，综合题等内容，欢迎下载使用。
天津市宝坻区一中2022-2023学年高二下学期第一次阶段性练习生物试题
学校:___________姓名：___________班级：___________考号：___________

一、单选题
1．杨梅果实风味独特，酸甜适中，具有很高的营养价值和保健价值。下列是制作杨梅酒和杨梅醋的流程，制取发酵液；向杨梅汁中加入白砂糖，将糖的质量分数调至8%，灭菌冷却→酒精发酵；接种酵母菌，恒温发酵→果醋发酵，加入酒精，接种醋酸菌→取样检测；对发酵产物进行检测。下列叙述正确的是（　　）
A．杨梅酒和杨梅醋的制作过程是在严格无菌条件下进行的
B．用带盖瓶子制作杨梅酒时，拧松瓶盖间隔时间不一定相同
C．杨梅醋发酵液中，液面处的醋酸菌密度小于瓶底处的密度
D．在杨梅醋的发酵过程中所需温度低于杨梅酒的发酵温度
【答案】B
【分析】果酒制作的原理：在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。方程式：C₆H₁₂O₆→2C₂H₅OH+2CO₂
果醋制作的原理：当氧气、糖源充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
【详解】A、制作杨梅酒时，利用杨梅上附着的酵母菌进行发酵，制作杨梅醋时，可直接将醋酸菌接种在杨梅酒的发酵液中，二者不需要在严格无菌条件下进行，A错误；
B、酵母菌进行酒精发酵时会产生二氧化碳，因此用带盖瓶子制作杨梅酒时，需要拧松瓶盖放气，但由于不同发酵瓶中酵母菌的数量不一定相同，因此放气间隔时间不一定相同，B正确；
C、醋酸菌属于好氧菌，在杨梅醋发酵液中，液面处的醋酸菌更易接触到充足氧气，因此其密度大于瓶底处的密度，C错误；
D、杨梅酒发酵温度低于杨梅醋，D错误。
故选B。
2．传统发酵技术在我国应用广泛，某学生认为果酒制作的流程中存在一些问题，并提出了自己的改进方法。下列描述正确的有（    ）
①发酵容器要清洗干净并用70%的酒精消毒②葡萄要先除去枝梗再充分洗净③人为添加酵母菌种可以缩短发酵时间，实验更易成功④建议改用“泡菜坛”装置进行果酒的发酵⑤放气过程中可能会进入空气，造成污染⑥正午暴晒冲洗的葡萄，充分干燥后再酿制
A．①②③④ B．①②④⑥ C．①③④⑤ D．②③⑤⑥
【答案】C
【分析】果酒制作的原理是在无氧条件下，酵母菌利用葡萄糖进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳。
【详解】①为了避免杂菌污染，发酵容器要清洗干净并用70%的酒精消毒，①正确；
②葡萄清洗时，不能先除去枝梗，会导致杂菌污染、营养流失，而是应该先冲洗后去除枝梗，②错误；
③人为添加酵母菌菌种，酵母菌数量增多，可以缩短发酵时间，③正确；
④泡菜坛水槽注满水可以制造一个无氧环境，有利于酵母菌进行无氧呼吸，故可改用“泡菜坛”装置进行果酒的发酵，④正确；
⑤放气时有可能会进入空气，空气中的杂菌可能进入发酵瓶造成污染，⑤正确；
⑥冲洗后的葡萄不可在正午时进行暴晒，紫外线具有消毒杀菌的作用，会杀死葡萄皮上的酵母菌，影响发酵效果，⑥错误。

综上所述，①③④⑤正确。
故选C。
3．约9000年前，我们的祖先就会利用微生物将谷物、水果等发酵为含酒精的饮料，后来又通过固体发酵法制得其他食品，如酱油、醋、豆豉、腐乳等，从而形成了中华民族特有的饮食文化。下列与传统发酵技术相关的描述，正确的是（    ）
A．传统发酵技术是利用不同原核生物产生不同代谢物的原理，生产人们需要的产物
B．发酵是在适宜的条件下，将原料通过微生物的无氧呼吸转化为人类所需产物的过程
C．谷物、水果等原料可为微生物的生长提供各种营养物质，发酵前无需进行灭菌处理
D．与传统发酵技术相比，发酵工程要接种通过基因工程育种获得的优良菌种
【答案】C
【分析】发酵是利用微生物，在适宜的条件下，将原料经过特定的代谢途径转化为人类所需要的产物的过程。
【详解】A、传统发酵技术利用的微生物有原核生物（如乳酸菌），也有真核生物（如酵母菌），A错误；
B、发酵是在适宜的条件下，将原料通过微生物的代谢转化为人类所需产物的过程，并非都是通过微生物的无氧呼吸，B错误；
C、谷物、水果等原料可为微生物的生长提供各种营养物质，传统发酵技术一般利用的是原料中天然存在的微生物，因此发酵前无需进行灭菌处理，C正确；
D、发酵工程接种的优良菌种可以从自然界中筛选，也可以通过诱变育种或基因工程育种获得，D错误。
故选C。
4．幽门螺旋杆菌（Hp）能引起消化道疾病的发生，能分泌脲酶，医务工作者在胃病患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养。实验基本步骤如下；配制培养基→灭菌→倒平板→X→培养→观察。下列叙述错误的是（　　）
A．常见的灭菌方法有湿热灭菌、灼烧灭菌和干热灭菌
B．以尿素为唯一氮源的培养基可初步筛选出幽门螺旋杆菌
C．培养基灭菌冷却到50°C左右倒平板，平板冷凝后应将其倒置
D．题中X表示接种，尿酶分解尿素后会使培养基pH降低
【答案】D
【分析】 无菌技术：获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染。无菌技术围绕如何防止杂菌污染展开，包括消毒和灭菌。
【详解】A、常见的灭菌方法有湿热灭菌、灼烧灭菌和干热灭菌，A正确；
B、在以尿素为唯一氮源的培养基上只有能分泌脲酶的微生物可以生长，可初步筛选出幽门螺旋杆菌，B正确；
C、平板倒置的目的是防止培养皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染，C正确；
D、题中X表示接种，幽门螺旋杆菌能分泌脲酶，脲酶分解尿素产生氨，使培养基pH升高，D错误。
故选D。
5．鲜牛奶容易被金黄色葡萄球菌污染，该菌高度酎盐，可引起人类肺炎等疾病。在血平板（培养基添加适量血液）上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色，下图为检测鲜牛奶被金黄色葡萄球菌污染的操作流程，下列叙述错误的是（　　）

A．饮用前的鲜牛奶或使用后的液体培养基均可用高温瞬时消毒法进行处理
B．肉汤培养基加入一定量NaCl的目的是维持微生物细胞的渗透压
C．振荡培养可以使微生物与营养物质充分接触，更有利于微生物的生长
D．血平板上的接种方法是平板划线法，血平板上出现周围透明的溶血圈
【答案】A
【分析】培养基的概念及营养构成
（1）概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质；
（2）营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求．例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件。
【详解】A、鲜牛奶用巴氏消毒法，使用后的液体培养基需要用高压蒸汽灭菌法灭菌后再丢弃，防止对环境造成污染，A错误；
B、NaCl属于无机盐，无机盐在培养基中具有调节和维持微生物细胞的渗透压的作用，B正确；
C、振荡培养的目的是使微生物与营养物质充分接触，增加O2浓度，更有利于微生物生长，C正确；
D、根据图示可知，利用接种环接种，接种方法是平板划线法，金黄色葡萄球菌可破坏菌落周围的红细胞，产生透明的溶血圈，D正确。
故选A。
6．炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患的传染病，对炭疽病疑似患者，可根据噬菌体的宿主专一性，通过实验确诊，具体过程是先通过采集疑似患者的样本，分离培养，获得可疑菌落，再进行细菌鉴定，实验流程如图所示。已知在该实验中噬菌体能够使炭疽杆菌死亡，增加实验组液体培养基的浑浊度。下列分析错误的是（    ）

A．实验中所用的液体培养基的碳源为有机碳源
B．在35°C条件下培养24h，液体培养基因杂菌污染而变浑浊
C．实验过程中，对照组试管中应加入等量生理盐水
D．若疑似患者已被炭疽杆菌感染，则实验组培养基的浑浊度比对照组的高
【答案】B
【分析】炭疽杆菌是原核生物，可作为噬菌体的宿主；炭疽杆菌是异养型生物，培养时需要有机物作为碳源。
【详解】A、炭疽杆菌是异养型的生物，需要以有机物作为碳源，液体培养基的碳源为有机碳源，A正确；
B、在35°C条件下培养24h，主要因为炭疽杆菌大量繁殖导致液体培养基变浑浊，B错误；
C、实验组加入的是生理盐水配制的澄清噬菌体液，为了排除生理盐水的影响，对照组试管中应加入等量生理盐水，C正确；
D、噬菌体的宿主具有专一性，患者被炭疽杆菌感染，实验组加入噬菌体就会侵染炭疽杆菌，炭疽杆菌就会裂解，已知在该实验中噬菌体能够使炭疽杆菌死亡，增加实验组液体培养基的浑浊度，故实验组培养基浑浊度高于对照组，D正确。
故选B。
7．酵母菌细胞壁的主要成分是几丁质。酿酒酵母产酒精能力强，但没有合成淀粉酶的能力；糖化酵母能合成淀粉酶，但酒精发酵能力弱。为了实现以谷物为原料高效生产酒精的目的，科研人员进行了下图所示改良酵母菌种实验。下列叙述正确的是（    ）

A．以谷物为原料用酿酒酵母酿酒时，不需对原料进行糖化处理
B．在酿酒酵母纯培养时，可以加入适量的青霉素
C．用PEG诱导之前需用纤维素酶去除两种酵母的细胞壁
D．以淀粉转化为还原糖的效率作为最终鉴定目的菌的指标
【答案】B
【分析】果酒制作的原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精和二氧化碳，酵母菌是兼性厌氧微生物，在缺氧条件下进行无氧呼吸，在氧气充足的条件下进行有氧呼吸；酵母菌具有核膜包被的细胞核，属于真核生物。
【详解】A、酿酒酵母没有合成淀粉酶的能力，因此以谷物为原料用酿酒酵母酿酒时，需对原料进行糖化处理，即将淀粉转变为葡萄糖，A错误；
B、青霉素抑制细菌生长，酵母菌属于真菌，加入适量的青霉素作为选择培养基可以抑制细菌繁殖，更容易获得酿酒酵母纯培养物，B正确；
C、酵母菌的细胞壁主要成分是几丁质，需要用几丁质酶处理，C错误；
D、为了实现以谷物为原料高效生产酒精的目的，目的菌最终的鉴定指标应该是产生酒精的能力，D错误。
故选B。
8．下列关于动物细胞培养及植物组织培养的说法，错误的是（    ）
A．选材时，一般都选分裂、分化能力强的组织
B．均在离体、无菌、无毒条件下进行
C．都能体现细胞的全能性，其原理相同
D．培养基成分的差异主要是动物细胞培养的培养基中含血清等天然成分，植物组织培养的培养基中含细胞分裂素、生长素等植物激素
【答案】C
【分析】1、植物组织培养的过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化（避光）形成愈伤组织；愈伤组织经过再分化（需光）过程形成胚状体，进一步发育形成植株。
2、动物细胞培养过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。
【详解】A、动物细胞培养及植物组织培养选材时，一般选择幼龄的器官或组织、或者幼嫩的组织，细胞分裂能力强(且分化程度低)，A正确；
B、为防止杂菌污染，导致培养失败，动物细胞培养及植物组织培养均需在离体、无菌、无毒条件下进行，B正确；
C、植物组织培养的结果是完整植株，体现了细胞的全能性；动物细胞培养的结果是细胞株、细胞系，原理是细胞增殖，不能体现细胞的全能性，C错误；
D、培养基成分的差异是动物细胞培养的培养基中含血清等天然成分，植物组织培养的培养基中含细胞分裂素、生长素两种植物激素，D正确。
故选C。
9．植物细胞工程在农业、医药工业等方面有着广泛的应用，相关叙述正确的是（　　）
A．细胞产物的工厂化生产主要是利用促进细胞生长的培养条件，提高单个细胞中次生代谢物的含量
B．植物顶端分生组织附近的病毒很少，甚至无病毒，因此人们为了获得抗病毒苗常常利用茎尖进行植物组织培养
C．利用花药离体培养获得玉米幼苗，直接从中选择出具有优良性状的个体，这样能够极大的缩短育种年限
D．快速繁殖花卉的过程中，诱导愈伤组织期间一般不需要光照，此时细胞代谢类型为异养需氧型
【答案】D
【分析】由于植物细胞的次生代谢物含量很低，从植物组织提取会大量破坏植物资源，有些产物又不能或难以通过化学合成途径得到，因此人们期望利用植物细胞培养来获得目标产物，这个过程就是细胞产物的工厂化生产；植物细胞培养是指在离体条件下对单个植物细胞或细胞团进行培养使其增殖的技术。
【详解】A、细胞产物的工厂化生产主要是利用植物细胞培养技术，通过促进细胞增殖，以从细胞中获得次生代谢物，A错误；
B、植物顶端分生区附近（如茎尖）的病毒极少，甚至无病毒，因此，切取一定大小的茎尖进行组织培养，再生的植株就有可能不带病毒，从而获得脱毒苗，B错误；
C、利用花药离体培养可获得玉米幼苗的单倍体，再经过诱导染色体数目加倍后，直接从中选择出具有优良性状的个体，这样能够极大的缩短育种年限，C错误；
D、快速繁殖花卉的过程中，诱导愈伤组织期间一般不需要光照，由于植物细胞不能进行光合作用合成有机物，故此时细胞代谢类型为异养需氧型，D正确。
故选D。
10．科学家采用体细胞杂交技术得到了“番茄一马铃薯”杂种植株。下列与植物体细胞杂交技术相关的叙述，错误的是（    ）
A．可以利用离心、电融合等物理方法诱导植物原生质体融合
B．可以利用高Ca2+一高pH融合法等化学方法诱导植物原生质体融合
C．利用两种不同植物体细胞杂交时，得到的细胞类型最多有3种
D．利用植物体细胞杂交技术，可以实现远缘杂交育种
【答案】C
【分析】植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。
【详解】AB、促进植物原生质体融合的方法有电融合法、离心法、高Ca2+-高pH融合法、PEG诱导融合法等，AB正确；

C、若只考虑细胞的两两融合，理论上融合的细胞有3种类型，还存在没有融合的细胞，C错误；
D、植物体细胞杂交技术最大的优点就是克服生物远缘杂交不亲和的障碍，D正确。
故选C。
11．植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术或方法与原理不完全相符的是（    ）
A．植物组织培养获得幼苗和单克隆抗体技术制备抗体-细胞的全能性
B．酶解法处理植物细胞壁获得原生质体-酶的专一性
C．原生质体融合和动物细胞融合获得杂交细胞-细胞膜的流动性
D．紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养获得相应产品-细胞增殖
【答案】A
【分析】植物组织培养的原理是细胞的全能性，植物体细胞杂交的原理是细胞膜的流动性和全能性，动物细胞培养的原理是细胞增殖，动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性。
【详解】A、植物组织培养的原理是细胞的全能性，单克隆抗体的制备的原理是细胞膜的流动性和细胞的增殖，A错误；
B、植物细胞壁的成分是纤维素和果胶，用纤维素酶、果胶酶去除细胞壁制备原生质体，利用了酶的专一性，B正确；
C、用物理法或者化学法使得原生质体融合和动物细胞融合，利用了细胞膜具有一定的流动性的特点，C正确；
D、紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养目的是获得更多细胞或细胞产物，其原理只涉及细胞增殖，D正确。
故选A。
12．和牛肉多汁细嫩，肉用价值极高，在日本被视为“国宝”。我国科研人员利用细胞工程等技术成功培育出优良和牛品种，下列说法错误的是（    ）
A．用促性腺激素处理母牛，可以获得更多的卵子
B．精子接触卵细胞膜时，会引发卵细胞膜反应
C．对移植前的胚胎进行性别鉴定，宜取囊胚期的滋养层细胞
D．胚胎移植只能在同种生物的不同个体间进行
【答案】B
【分析】1、胚胎移植的基本程序主要包括:
①对供、受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体。用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）;
②配种或人工授精;
③对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段)﹔
④对胚胎进行移植;
⑤移植后的检查。
【详解】A、促性腺激素可以使雌牛超数排卵，获得更多的卵子，A正确;
B、精子的头部在进入卵细胞后发生卵细胞膜反应，B错误;
C、囊胚期细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘，因此对移植前的胚胎进行性别鉴定时，宜取囊胚期的滋养层细胞进行鉴定，C正确；
D、胚胎移植只能在同种生物不同个体之间进行，胚胎移植实质是早期胚胎在相同生理条件下的空间位置的转移，D正确。
故选B。
13．正常小鼠是二倍体。研究发现，小鼠四倍体胚胎具有发育缺陷，只能发育成胎盘等胚胎以外的结构。ES细胞能够诱导分化形成所有的细胞类型，但很难分化形成胎盘。四倍体胚胎与ES细胞的嵌合体则会使二者的发育潜能相互补偿，可得到ES小鼠，其中的四倍体胚胎只能发育成胚外组织。下列叙述正确的是（　　）
A．嵌合体发育形成的ES小鼠基因型与供体ES细胞的基因型不同
B．嵌合体中的ES具有自我更新能力并只能分化为胎盘等胚外组织
C．嵌合体胚胎发育至原肠胚时需移植入与之生理状态相同的小鼠子宫内才可发育
D．将正常小鼠2细胞期胚胎用灭活病毒诱导法使2细胞融合，可得到四倍体胚胎
【答案】D
【分析】胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术。包括体外受精、胚胎移植、胚胎分割移植、胚胎干细胞培养等技术。胚胎工程的许多技术，实际是在体外条件下，对动物自然受精和早期胚胎发育条件进行的模拟操作。嵌合体-遗传学上用以指不同遗传性状嵌合或混杂表现的个体。
【详解】A、四倍体胚胎与ES细胞的嵌合体则会使二者的发育潜能相互补偿，可得到ES小鼠，其中的四倍体胚胎只能发育成胚外组织，所以嵌合体发育形成的ES小鼠基因型与供体ES细胞的基因型相同，A错误；
B、嵌合体中的ES具有自我更新能力，很难分化形成胎盘，可分化为处胎盘以外的所有细胞类型，B错误；
C、嵌合体胚胎发育至桑椹（桑葚）胚或囊胚期再移植入与之生理状态相同的小鼠子宫内才可以进一步发育，C错误；
D、正常小鼠是二倍体，所以两个2细胞期胚胎用灭活病毒等诱导法使细胞融合，可得到一个含四个染色体组的细胞，再经胚胎的早期培养可得到四倍体胚胎，D正确。
故选D。
14．细胞融合技术在生物育种和免疫学中有着广泛应用，下图为细胞融合的简略过程，据下图分析，下列说法错误的是（　　）

A．甲中a和b在体外受精前，需在体外进行卵子的成熟培养和精子获能处理
B．形成乙所依赖的生物学原理为细胞膜的流动性和植物细胞的全能性
C．对于已融合形成的细胞d，还需利用选择培养基筛选出产生特定抗体的杂交瘤细胞才可大规模生产单克隆抗体丙
D．若a和b分别为基因型AaBB、aaBb个体所产生的花粉细胞，则c（只考虑两两融合）有6种基因型
【答案】C
【分析】集到的卵母细胞和精子，要分别对它们进行成熟培养和获能处理，然后才能用于体外受精。
乙表示植物体细胞杂交植株，要得到乙，先要进行植物细胞的融合(利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，得到原生质体，用电击等方法诱导原生质体融合），该过程依赖的生物学原理为细胞膜的流动性，获得杂交细胞后，再利用植物组织培养技术将杂交细胞培养成杂交植株，该过程所依赖的生物学原理是植物细胞的全能性。
【详解】A、采集到的卵母细胞和精子，要分别对它们进行成熟培养和获能处理，然后才能用于体外受精，A正确；
B、乙表示植物体细胞杂交植株，要得到乙，先要进行植物细胞的融合(利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，得到原生质体，用电击等方法诱导原生质体融合），该过程依赖的生物学原理为细胞膜的流动性，获得杂交细胞后，再利用植物组织培养技术将杂交细胞培养成杂交植株，该过程所依赖的生物学原理是植物细胞的全能性，B正确；
C、对于已融合形成的细胞d，利用选择培养基筛选出的只是杂交瘤细胞，而要获得产生特定抗体的杂交瘤细胞还需要进行专一性抗体检测之后才可大规模生产单克隆抗体丙，C错误；
D、若a和b分别为基因型AaBB、aaBb个体所产生的花粉细胞，AaBB能产生AB、aB这两种花粉，aaBb能产生aB、ab这两种花粉，去壁两两融合可得到：AABB、aaBB、AaBB、AaBb、aaBb、aabb这6种基因型，D正确。
故选C。
15．下列有关哺乳动物早期胚胎发育的叙述错误的是（　　）
A．在桑葚胚阶段胚胎的内部开始出现含有液体的腔
B．胚胎干细胞是一类未分化的细胞，可以从早期胚胎中分离获得
C．桑葚胚之前细胞一般都具有全能性，囊胚的细胞逐渐分化
D．受精卵早期分裂时，胚胎中细胞数目不断增加，但胚胎的总体积并不增加
【答案】A
【分析】胚胎发育过程：
（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加；
（2）桑葚胚：32个细胞左右的胚胎，之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能属全能细胞；
（3）囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔。注：囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化；
（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。
【详解】A、在桑葚胚阶段，32个细胞左右的胚胎，胚胎的内部无含有液体的腔，A错误；
B、胚胎干细胞是一类未分化的细胞，可以从早期胚胎或原始性腺中分离获得，B正确；
C、桑葚胚的细胞一般都具有全能性，囊胚的细胞逐渐分化，C正确；
D、受精卵早期分裂时，胚胎中细胞数目不断增加，但胚胎的总体积并不增加，甚至略微缩小，D正确。
故选A。
16．下列关于人体造血干细胞的叙述，错误的是（　　）
A．造血干细胞比胚胎干细胞的分化程度高
B．造血干细胞属于成体干细胞，但不具有组织特异性
C．造血干细胞可不断增殖和分化，适当捐献造血干细胞不影响人体健康
D．造血干细胞移植是治疗白血病的有效手段
【答案】B
【分析】动物和人体内仍保留着少数具有分裂和分化能力的细胞，这些细胞叫做干细胞。哺乳动物的胚胎干细胞是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞。在功能上具有发育的全能性，即可以分化为成年动物体内任何一种组织细胞。人的骨髓中有许多的造血干细胞，它们能够增殖和分化，不断产生红细胞、白细胞和血小板，补充到血液中去。
【详解】A、造血干细胞可以分化成红细胞、白细胞和血小板，胚胎干细胞可以分化为任何一种组织细胞，所以造血干细胞分化程度更高，A正确；
B、成体干细胞是成体组织或器官内的干细胞，具有组织特异性，只能分化为特定的细胞或组织，B错误；
C、骨髓中的造血干细胞可不断增殖和分化，不断产生红细胞、白细胞和血小板，补充到血液中去，所以捐献造血干细胞不影响人体健康，C正确；
D、造血干细胞移植可以取代白血病患者病变的造血干细胞，是治疗白血病的有效手段，D正确。
故选B。
17．大肠杆菌经溶菌酶和洗涤剂处理后，拟核DNA就会缠绕在细胞壁碎片上，静置一段时间，质粒分布在上清液中，利用上述原理可初步获得质粒DNA。用三种限制酶处理提取的产物，电泳结果如图所示。下列关于质粒的粗提取和鉴定的叙述不正确的是（    ）

A．提取DNA时可加入酒精，使溶于酒精的蛋白质等物质溶解
B．将提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后；可用二苯胺试剂进行鉴定
C．电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着它所带电荷相反的电极移动的原理
D．根据电泳结果，质粒上一定没有限制酶I和II的切割位点，而有限制酶III的切割位点
【答案】D
【分析】DNA的粗提取和鉴定：利用DNA不溶于酒精，某些蛋白质溶于酒精，以及DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，可以将DNA与蛋白质分离开；在一定温度下，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色，因此二苯胺试剂可以作为鉴定DNA的试剂。
【详解】A、DNA在冷酒精中溶解度很低，提取DNA时加入酒精，是为了让DNA析出，蛋白质等物质溶解，A正确；
B、将提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后，可用二苯胺试剂在沸水条件进行鉴定，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色，B正确；
C、DNA带负电，电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着它所带电荷相反的电极移动的原理，C正确；
D、因为质粒的本质是环状的DNA，限制酶Ⅰ和Ⅱ处理后电泳只有一条条带，可能是该质粒上有一个切割位点，也可能没有切割位点，D错误。
故选D。
18．为使玉米获得抗除草剂性状，科研人员进行了相关操作(如图所示)。含有内含子的报告基因不能在原核生物中正确表达，其正确表达产物能催化无色物质K呈现蓝色。转化过程中愈伤组织表面常残留农杆菌，会导致未转化的愈伤组织可能在含除草剂的培养基中生长。下列叙述错误的是

A．T-DNA可将基因G转移并整合到愈伤组织细胞的染色体DNA上
B．利用物质K和抗生素进行筛选1，可获得农杆菌的蓝色菌落
C．利用物质K和除草剂进行筛选2，更易于获得抗除草剂的转基因植株
D．愈伤组织重新分化为芽、根等器官的过程中，需要添加植物激素
【答案】B
【分析】1、农杆菌转化法的具体过程：
（1）利用土壤的Ti质粒构建基因表达载体，即将目的基因整合到土壤农杆菌的Ti质粒上。
（2）将整合了目的基因的Ti质粒导入土壤农杆菌细胞内。
（3）利用土壤农杆菌感染植物细胞，该过程实际上是将含有目的基因的土壤农杆菌Ti质粒导入植物细胞内。
（4）含有目的基因的土壤农杆菌Ti质粒进入植物细胞后，可以把自己的一段基因整合到细胞核中的染色体上，这段基因中包含了目的基因。
2、原理：农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上。根据农杆菌的这一特点，如果将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上。
3、农杆菌特点：易感染双子叶植物和裸子植物，对单子叶植物没有感染力；Ti质粒的T-DNA可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体上。
4、转化：目的基因插入Ti质粒的T-DNA上 农杆菌→导入植物细胞→目的基因整合到植物细胞染色体上→目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。
【详解】A、农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上，根据农杆菌的这一特点，将目的基因（基因G）插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因（基因G）整合到愈伤组织细胞的染色体DNA上，A正确；
B、农杆菌属于原核生物，含有内含子的报告基因不能在原核生物中正确表达，故不会出现农杆菌的蓝色菌落，B错误；
C、根据题意可知，报告基因的产物能催化无色物质K呈现蓝色，而愈伤组织表面残留的农杆菌会导致未转化的愈伤组织能在含除草剂的培养基中生长，因此利用物质K和除草剂进行筛选2，更易于获得抗除草剂的转基因植株，C正确；
D、愈伤组织重新分化为芽、根等器官的过程中，需要添加植物激素，如生长素和细胞分裂素，D正确。
故选B。
19．作为基因工程的运输工具——载体，必须具备的条件及理由对应不正确的是（    ）
A．能够在宿主细胞中稳定保存并大量复制，以便提供大量的目的基因
B．具有多个限制酶切割位点，以便于目的基因的插入
C．具有某些标记基因，以便目的基因能够准确定位与其结合
D．对宿主细胞无伤害，以不影响宿主细胞的正常生命活动
【答案】C
【分析】为运载体必须具备的条件：①要具有限制酶的切割位点，以便于目的基因的插入； ②要有标记基因（如抗性基因），以便于重组后重组子的筛选；③能在宿主细胞中稳定存在并复制；④是安全的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来。
【详解】A、作为运载体必须具备的条件之一是能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量复制，以便提供大量的目的基因，A正确；
B、作为运载体必须具备的条件之一是具有多个限制酶切点，以便于目的基因的插入，B正确；
C、作为运载体必须具备的条件之一是具有某些标记基因，以便于重组后进行重组DNA分子的筛选，C错误；
D、携带外源DNA片段的质粒进入受体细胞后，停留在细胞中进行自我复制，或整合到染色体DNA上，随着染色体DNA进行同步复制，同时运载体对宿主细胞无伤害，以使目的基因在宿主细胞中复制并稳定保存，D正确。
故选C。
20．膀胱癌是泌尿系统最常见的肿瘤，研究者以膀胱癌细胞特异性表达的UBC蛋白作为靶蛋白，设计出多种基因，将其分别转入不同噬菌体DNA上，并在子代噬菌体表面表达出可与UBC特异性结合的多肽，再根据图1、2的操作进行筛选，其中第二次洗脱时加入含UBC单抗的洗脱液，以便获取能与膀胱癌细胞特异性结合的小分子多肽。下列叙述正确的是（    ）


A．噬菌体与膀胱细胞共有的结构是核糖体
B．第一次洗脱的目的是除去多余的噬菌体
C．两次洗脱时均需进行搅拌以使噬菌体与UBC分离
D．所获得的小分子多肽也能与膀胱细胞特异性结合
【答案】B
【分析】单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体。UBC单抗与UBC的亲和力高，可以作为结合力的条件对照。
【详解】A、噬菌体属于病毒，病毒无细胞结构，不含核糖体，A错误；
BC、分析题意，要检测哪个噬菌体能表达出与UBC特异性结合的多肽，需要将UBC与噬菌体混合，第一次洗脱掉的是洗脱洗去不能与UBC结合，没有特异性多肽的游离在培养液中的噬菌体，第二次洗脱加入UBC单抗，替换下含特异性多肽的噬菌体，需要搅拌使噬菌体与UBC分开，B正确，C错误；
D、抗原与抗体的结合具有特异性，与细胞膜表面的糖蛋白密切相关，所获得的小分子多肽能与膀胱癌细胞特异性结合，但不能与膀胱细胞特异性结合，D错误。
故选B。
21．用X酶切割DNA分子后，得到黏性末端①，用Y酶切割DNA分子后，得到黏性末端②，如下图所示，以下说法不正确的是（    ）

A．X与Y通常是不同的限制酶
B．限制酶与DNA水解酶破坏的化学键相同
C．具有①②的两个DNA片段可连接成重组分子，重组后可以被X或Y切割
D．使用X和Y同时切割目的基因和载体不可以防止目的基因反向链接
【答案】C
【分析】限制酶主要从原核生物中分离纯化出来。特异性：能够识别双链 DNA 分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，形成黏性末端和平末端两种。
【详解】A 、由图可知， X 与 Y 识别的核苷酸序列不同，因此 X 与 Y 是不同的限制酶， A 正确；
B 、限制酶与 DNA 水解酶破坏的化学键相同，都是磷酸二酯键， B 正确；
C 、具有①②的两个 DNA 片段可连接成重组分子，核苷酸序列发生了改变，先前能识别的核苷酸序列发生了改变，所以重组后不可以被 X 或 Y 切割，C错误；
D、使用 X 和 Y 同时切割目的基因和载体可以防止自身环化，但不可以防止目的基因反向链接（因为两种酶切割形成的黏性末端的碱基序列能互补），D正确。
故选C。
22．为了获得抗蚜虫棉花新品种，研究人员将雪花莲凝集素基因（GNA）和尾穗苋凝集素基因（ACA）与载体（pBI121）结合，然后导入棉花细胞。下列叙述正确的是（    ）

A．用限制酶BsaBI和DNA聚合酶处理两种基因可获得GNA-ACA融合基因
B．与只用KpnI相比，KpnI和XhoI处理融合基因和载体可保证基因转录方向正确
C．在含卡那霉素的培养基上能存活的植物细胞即为成功转入目的基因的细胞
D．用PCR技术检测GNA和ACA基因成功导入棉花细胞后，棉花就一定表现抗蚜虫性状
【答案】B
【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2） 基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子、复制原点和标记基因等。（3） 将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。 将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4)）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因：DNA分子杂交技术和PCR技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA：分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质：抗原-抗体杂交技术。 个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
【详解】A、由图可知，GNA、ACA都含有限制酶BsaBI的酶切位点，故用限制酶BsaBI和DNA连接酶处理两种基因可获得GNA-ACA融合基因，DNA聚合酶是催化单个核苷酸连接，而DNA连接酶是催化DNA片段连接，A错误；
B、图中质粒与ACA-GNA上都含有KpnI和XhoI的酶切位点，与只用KpnI相比，KpnI和XhoI处理融合基因和载体可保证基因转录方向正确，避免反向连接，B正确；
C、由于载体上含有卡那霉素抗性基因，在含卡那霉素的培养基上能存活的植物细胞为成功转入目的基因的细胞或含有普通质粒的细胞，C错误；
D、PCR技术可用于基因探针的制备，可用来检测目的基因是否导入受体细胞，基因GNA和ACA导入棉花细胞后不一定正常表达，所以不一定具有抗虫性状，D错误。
故选B。


23．下列关于DNA片断扩增及其鉴定的说法错误的是（    ）
A．在凝胶中DNA分子的迁移速率主要和DNA分子的大小、构象等有关
B．凝胶中DNA分子通过染色，可以在波长300nm的紫外灯下被检测出来
C．该实验用到的缓冲液和酶，从冰箱取出直接水浴加热
D．电泳技术可以用于人类亲子鉴定、生物间亲缘关系的鉴定
【答案】C
【分析】DNA分子具有可解离的基团，在一定的PH下，这些基团可以带上正电荷或负电荷。在电场的作用下，这些带电分子会向着与它所带电荷相反方向的电极移动，这个过程就是电泳。PCR的产物一般通过琼脂凝胶电泳来鉴定。
【详解】A、在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶浓度、DNA分子的大小和构象等有关，A正确；
B、凝胶中的DNA分子通过染色、可以在波长为300nm的紫外线下被检测出来，B正确；
C、该实验所需材料可以直接从公司购买，缓冲液和酶应分装成小份，并在-20℃储存。使用前，将所需试剂从冰箱拿出，放在冰块上缓慢融化，C错误；
D、电泳技术可以用于人类亲子鉴定、生物间亲缘关系的鉴定，D正确。
故选C。
24．研究发现，人溶菌酶（hLZ）是天然抗生素替代品。科学家将该蛋白基因导入山羊体内使其能够在山羊乳腺细胞中表达，从而从山羊乳汁中提取人溶菌酶。图1表示被限制酶切割后的该蛋白基因，图2表示培育流程。下列叙述正确的是（    ）

A．切割该蛋白基因的限制酶有2种，识别的序列可分别为GATCCAT和AGCTTCC
B．①过程是基因工程的核心步骤，需要的工具酶有限制酶、DNA连接酶和质粒
C．②过程常采用显微注射的方法，受体细胞应选择受精卵而一般不选择体细胞
D．③过程应将山羊受精卵培育到原肠胚进行移植，移植后需进行是否妊娠的检测
【答案】C
【分析】图2中①为构建基因表达载体或重组质粒，②为将重组质粒导入受体细胞，③为胚胎移植。
【详解】A、根据目的基因切割后产生的黏性末端不同，可确定切割该基因的限制酶有2种，一种酶识别的序列可为GGATCC，在G和G之间进行切割，另一种酶识别的序列可为AAGCTT，在A和A之间切割，A错误；
B、①过程是基因工程的核心步骤，需要的工具酶有限制酶、DNA连接酶，质粒不属于工具酶，B错误；
C、②过程为将重组质粒导入受体细胞，常采用显微注射的方法，受体细胞可以选择受精卵（全能性高），一般不选择体细胞，C正确；
D、③过程应将山羊受精卵培育到桑椹胚或囊胚再进行移植，且移植后还需对受体是否发生妊娠反应进行检测，D错误。
故选C。
25．原位PCR技术是利用原位PCR仪，在组织或细胞中靶DNA所在的位置上进行的PCR循环扩增，通过掺入标记基团直接显色或结合原位杂交进行检测的方法。进行扩增时，反应体系中的反应成分需渗透到组织或细胞的靶DNA处才能进行扩增。PCR反应体系中需要添加一定浓度的Mg2+，而组织细胞间的物质会吸附Mg2+，使进入细胞的Mg2+减少。下列说法正确的是（　　）
A．原位PCR技术可用于人类β-地中海贫血致病基因的检测
B．原位PCR反应体系中使用的Mg2+浓度要比常规PCR低
C．反应体系中引物的G、C碱基含量越高，其结合的特异性越强
D．反应体系中NTP作为扩增的原料，会依次连接到子链的5'端
【答案】A
【分析】PCR技术:
1、概念:PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。
2、原理:DNA复制。
3、条件:模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶(Taq酶)。
4、过程:高温变性、低温复性、中温延伸。
【详解】A、分析题干可知，原位PCR技术是通过掺入标记基团直接显色或结合原位杂交进行检测的方法，故推测原位PCR技术可用于人类β-地中海贫血致病基因的检测，A正确；
B、因为组织细胞间的物质会吸附Mg2+，故原位PCR反应体系中使用的Mg2+浓度要比常规PCR高，B错误；
C、在一定范围内，反应体系中引物的G、C碱基含量越高，其结合的特异性越强，但G、C过高，不利用退火，从而阻碍目标DNA的扩增，C错误；
D、dNTP作为扩增的原料会依次连接到3'端，D错误。
故选A。

二、综合题
26．在农业生产研究上，常需要进行微生物的分离和计数。
(1)下表为两种微生物的培养基配方：
A组：



葡萄糖
尿素
琼脂
1.4g
2.1g
0.2g
10.0g
1.0g
15.0g
B组
纤维素粉




KCl
酵母膏
水解酪素
5g
1g
1.2g
0.9g
0.5g
0.5g
0.5g
0.5g
注：上述两种培养基中的物质溶解后，均用蒸馏水定容至1000mL。
①从功能上来看，上述两种培养基均属于_______培养基。
②如果要对土壤中分解尿素的细菌进行分离，则需要选择_______(填“A”或“B”)培养，该培养基中的碳源是_______。③在分离尿素分解菌所用的培养基中可加入_______指示剂，根据指示剂的颜色可鉴定某种细菌能否分解尿素。
(2)如图是某同学采用的接种微生物的方法，请回答下列问题：

①本实验采用的接种微生物的方法是_______法，把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，为达到这一目的，操作上应注意：每次划线前要_______接种环；接种环冷却后从_______开始划线，划线结束的要求是：_______。除了图示方法外，还有一种方法也可以获得单菌落，这种方法得到的数值一般比实际值_______，原因是：_______。
②三位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数量，在对应稀释倍数为106的培养液中各取0.1ml涂布平板，得到以下统计结果：
甲同学涂布了2个平板，统计的菌落数是236和260，取平均值248；
乙同学涂布了3个平板，统计的菌落数是210、240和250，取平均值233；
丙同学涂布了3个平板，统计的菌落数是21、212和256，取平均值163。
在三位同学的统计结果中，_______同学的统计结果是最正确的，每毫升的活菌数是_______。
【答案】(1) 选择 A 葡萄糖 酚红
(2) 平板划线 灼烧 上一次划线的末端 第一次划线的区域和最后一个区域不要相连 小 当两个或者多个菌落生长在一起的时候，观察到的往往按照一个菌落计算 乙 个

【分析】微生物常见的接种的方法：
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】（1）据题表中的培养基的配方分析可知，A组培养基中的氮源为尿素，是筛选尿素分解菌的选择培养基。B组培养基中的碳源是纤维素，是筛选纤维素分解菌的选择培养基。对土壤中分解尿素的细菌进行分离时，需要使用以尿素为唯一氮源的选择培养基，故应当选择A组培养基，该培养基中的碳源是葡萄糖。尿素分解菌可以用酚红指示剂进行鉴定。尿素分解菌产生的脲酶能够将尿素分解为氨而使培养基pH升高，使酚红指示剂呈红色。
（2）①据图分析，使用了接种环，图示表示平板划线法接种，每次划线前接种环要灼烧，冷却后从上一次划线的末端开始划线；划线结束的要求是：第一次划线的区域和最后一个区域不要相连。稀释涂布平板法亦可以用来分离单菌落，同时可以用来计数，当两个或者多个菌落生长在一起的时候，观察到的往往按照一个菌落计算，故这种方法得到的数值一般比实际值偏小。
②在进行平板菌落计数时，应选择落数在30 ～300之间的平板进行计数，同时为避免误差应选择至少3个或3个以上的平板进行计数并取平均值，因此乙同学的统计结果是正确的。菌落平均数是（210+212+256）÷3=233，每毫升的活菌数是=(C÷V)×M=平板上菌落数的平均值÷体积×稀释倍数=233÷0.1×106=2.33x109个。
【点睛】本题考查微生物的分离和培养等知识，要求学生识记微生物的分离和鉴定的相关知识，意在强化学生对实验室的微生物的培养的相关知识的理解与掌握。
27．“白菜一甘蓝”与普通白菜相比，具有生长期短、耐热性强和易于储藏等优点。下图是利用白菜（2n=20）和甘蓝（2n=18）通过细胞工程育种的方法获得“白菜一甘蓝”的杂交过程示意图，回答以下问题：

(1)可用___酶来处理白菜细胞和甘蓝细胞得到原生质体A、B。
(2)诱导原生质体融合的方法有多种，常用的物理方法是___（答3种），融合完成的标志是___。
(3)通过植物体细胞杂交技术获得的“白菜一甘蓝”体细胞中染色体组数为___；“白菜一甘蓝”___（填“能”或“不能”）进行有性生殖。通常情况下，白菜和甘蓝有性杂交是不能成功的，原因是___。
(4)植物体细胞杂交技术和传统杂交技术相比的优点是___。
【答案】(1)纤维素酶和果胶
(2) 离心、振动、电激 再生出新的细胞壁
(3) 4/四 能 存在生殖隔离
(4)克服远缘杂交不亲和的障碍，培育作物新品种

【分析】原生质体是指除去细胞壁后的植物细胞部分，包括细胞膜以内的部分，可以进行原生质体融合。植物体细胞杂交，又称原生质体融合是指将植物不同种、属，甚至科间的原生质体通过人工方法诱导融合，然后进行离体培养，使其再生杂种植株的技术。植物细胞具有细胞壁，未脱壁的两个细胞是很难融合的，植物细胞只有在脱去细胞壁成为原生质体后才能融合，所以植物的细胞融合也称为原生质体融合。
【详解】（1）植物的细胞壁由纤维素和果胶组成。可用纤维素酶和果胶酶来处理白菜细胞和甘蓝细胞得到原生质体A、B。
（2）诱导原生质体融合的方法有多种，常用的物理方法是离心、振动、电激，融合完成的标志是再生出新的细胞壁。
（3）白菜和甘蓝都是二倍体，都含有2个染色体组，通过植物体细胞杂交技术获得的“白菜一甘蓝”体细胞中染色体组数为4；“白菜一甘蓝”含有成对的染色体组，能进行减数分裂，能进行有性生殖。通常情况下，白菜和甘蓝是不同的物种，存在生殖隔离，有性杂交是不能成功的。
（4）植物体细胞杂交技术利用原生质体融合的原理，和传统杂交技术相比的优点是克服远缘杂交不亲和的障碍，培育作物新品种。
28．如图为制备单克隆抗体和多克隆抗体的示意图。据图回答下列问题：

(1)图中向小鼠注射抗原后，所获得的免疫抗血清实际上是含_____________（填写抗体的名称；2分）的混合物，这种方法制备的抗体不仅产量低，而且纯度低。与其相比，单克隆抗体突出的优点在于它能准确识别___________的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并能大量制备。
(2)图中选用B细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交细胞，如果仅考虑细胞的两两融合，其融合细胞有________种类型。已免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合的过程体现了细胞膜具有_________的结构特点。在体外融合时需要诱导，与诱导植物原生质体融合不同的是图中还可用__________诱导融合。
(3)在体外进行动物细胞培养时需要在合成加培养基的基础上添加_________等等天然成分。同时为了维持培养液的pH，需要提供的气体环境是___________。
(4)图中两次筛选的目的不同，其中筛选①的目的是筛选出_____________，筛选②的目的是筛选出__________，筛选②的方法是__________和____________。
(5)由图中可看出，单克隆抗体的制备过程中，运用了动物细胞工程中的________和_________两大技术。
【答案】(1) Ab1、Ab2、Ab3、Ab4 不同抗原
(2) 3 流动性 灭活的病毒
(3) 血清 95%空气和5%CO2
(4) 杂交瘤细胞 能产生所需抗体的杂交瘤细胞 克隆化培养 抗体检测
(5) 动物细胞融合 动物细胞培养

【分析】1、单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
2、两次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）；②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群。
3、杂交瘤细胞的特点：既能大量增殖，又能产生特异性抗体。
4、诱导动物细胞融合的方法有：物理法（离心、振动）、化学法（聚乙二醇）、生物法（灭活的病毒）。
5、单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优势在于特异性强，灵敏度高，可大量制备。
6、生物导弹：单克隆抗体+放射性同位素、化学药物或细胞毒素，借助单克隆抗体的定位导向作用将药物定向带到癌细胞，在原位杀死癌细胞。疗效高，副作用小，位置准确。
【详解】（1）据图可知，向小鼠注射包含多种抗原决定簇的抗原后，所获得的免疫抗血清实际上是含有Ab1、Ab2、Ab3、Ab4的混合物，这种方法制备的多克隆抗体不仅产量低、而且纯度低。与多克隆抗体相比，单克隆抗体突出的优点是特异性强、灵敏度高（准确识别抗原），并能大量制备。
（2）B细胞和骨髓瘤细胞融合体现了细胞膜的结构特性-流动性；如果仅考虑细胞的两两融合，其融合细胞有3种类型（B细胞和B细胞融合、B细胞和杂交瘤细胞融合、杂交瘤细胞和杂交瘤细胞融合）。动物细胞融合时还可以用灭活的病毒诱导融合。
（3）动物细胞培养时，在合成培养基中还需要添加血清，以供应动物细胞生长的某些物质。培养时的气体环境是95%空气和5%CO2，CO2能维持培养液的pH。
（4）图中两次筛选的目的不同，其中筛选①的目的是筛选出杂交瘤细胞，筛选②的目的是筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞。单克隆抗体制备第二次筛选的方法是克隆化培养和抗体检测。
（5）由图中可看出，单克隆抗体的制备过程中，运用了动物细胞工程中的动物细胞融合和动物细胞培养两大技术；其中动物细胞融合的意义是突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。
29．研究人员将抗盐基因转入普通烟草培育出抗盐烟草，该过程所用的质粒与含的抗盐基因的DNA上相关限制酶的酶切位点分别如图1，图2所示。限制性核酸内切酶BamHI，BeI，Sau3Al，HindⅢ，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为G↓GATCC、T↓GATCA、↓CATC，A↓AGCTT。图3表示该过程中利用含目的基因的农杆菌进行转化作用的示意图。

(1)用图中质粒和目的基因构建基因表达载体时，为了使目的基因准确与质粒链接并防止自身环化，可以用限制酶____________切割质粒和目的基因。限制酶切断的是DNA分子中特定部位的两个脱氧核苷酸之间的__________；构建基因表达载体时还需要__________酶参与。
(2)将上述切开的质粒与目的基因混合并胞连接后，导入受体细胞（不考虑基因突变），受体细胞的类型包含_______。
A．抗X，抗Y B．抗X、不抗Y
C．不抗X、抗Y D．不抗X、不抗Y
(3)图3过程__________（填序号）中发生了基因重组，过程②，③所用的培养基中，通常要调控好_______和_______两类激素的比例。
(4)从个体水平是鉴定抗盐转基因烟草是否抗盐的方法是______________
(5)鉴定目的基因是否在烟草细胞出中转录出mRNA的方法是_____________。
【答案】(1) BamHⅠ、Sau3AⅠ 磷酸二酯键 DNA连接酶
(2)ABD
(3) ① 生长素 细胞分裂素
(4)用一定浓度盐水浇灌转基因幼苗或将其移栽到盐碱地中观察其生长状态
(5)分子杂交技术

【分析】基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子、复制原点和标记基因等。载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存，②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入，③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。
（3）将目的基因导入受体细胞：将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
（4）目的基因的检测与鉴定。
【详解】（1）目的基因应位于启动子和终止子之间，根据图中箭头可知，为了防止目的基因和运载体的任意连接，应该不采用同种限制酶，因此应选用限制酶BamHI和Sau3AⅠ切割质粒和含目的基因的DNA片段。限制酶切割的是DNA分子中特定部位的两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键，然后再用DNA连接酶将质粒和目的基因连接，构建形成基因表达载体。
（2）将上述切开的质粒与目的基因混合，加入DNA连接酶连接后，导入受体细胞的可能有重组质粒或质粒，重组质粒含有X抗生素抗性基因而不含Y抗生素抗性基因，所以受体细胞可能抗X而对Y敏感；也可能抗X和抗Y；如果不含有质粒，受体细胞两种抗性都没有。
故选ABD。
（3）在人为条件下，基因工程的原理也属于基因重组，故基因重组发生在图3中①过程 ；图3过程②、③表示的是植物组织培养过程，该过程中需要调控好生长素和细胞分裂素的比例，两者用量的比例影响植物细胞的发育方向。
（4）从个体水平鉴定抗盐转基因烟草是否培育成功，可以用一定浓度盐水浇灌转基因幼苗或将其移栽到盐碱地中，观察其生长状态。
（5）检测基因是否表达采用抗原抗体杂交法，可用相应的抗体与提取的蛋白质杂交；检测目的基因是否转录出mRNA的方法是分子杂交技术。