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2022-2023学年辽宁省六校联考高二下册期中生物模拟试卷（含解析）
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这是一份2022-2023学年辽宁省六校联考高二下册期中生物模拟试卷（含解析），共25页。试卷主要包含了单项选择题，不定项选择题，非选择题等内容，欢迎下载使用。
2022-2023学年辽宁省六校联考高二下册期中生物模拟试卷
一、单项选择题：（本题共15小题，）在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的
1. 人们利用某些微生物制作食品时，需要分析微生物的特点，控制微生物的发酵条件。下列与此有关的各项内容都正确的是（ ）
①
②
③
④
食品
果酒
果醋
腐乳
泡菜
主要微生物
酵母菌
醋酸菌
毛霉
醋酸菌
制作装置或
操作步骤
A. ④ B. ③ C. ② D. ①
2. 在微生物培养过程中，由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物。平板划线法和稀释涂布平板法是常用的获取纯培养物的方法。下列说法错误的是（ ）
A. 通常对接种室用紫外线照射30min后，再适量喷洒石炭酸等消毒液来增强消毒效果
B. 若要检测培养基是否被污染，可将未接种的培养基在相同条件下进行培养
C. 两种纯化方法的核心都是要防止杂菌污染，保证培养物的纯度
D. 接种环在划线前后都需要灼烧，涂布器在接种前也需要灼烧，但两种处理方法不同
3. 研究人员欲从土壤中筛选纤维素分解菌以用于农业秸秆废弃物的高效降解。下列说法正确的是（ ）
A. 在牛肉膏蛋白胨培养基中加入纤维素以制备选择培养基
B. 取回的土壤样品要进行灭菌后再用无菌水溶解后进行接种
C. 为验证培养基的灭菌效果，应使用不接种的牛肉膏蛋白胨培养基作对照
D. 对筛选出的纤维素分解菌可进行玉米秸秆降解实验以测定纤维素酶活性
4. 下列有关微生物培养的叙述错误的是（ ）
A. 欲获得能分解石油的微生物的菌落，所用培养基中需要添加琼脂
B. 筛选产果胶酶的微生物的培养基要以果胶为唯一碳源
C. 要从细菌与真菌混杂的菌群中将细菌纯化，培养基除碳源、氮源、水、无机盐、特殊营养物质外，最好添加抗生素制成选择培养基
D. 实验前对培养基的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法，培养皿一般用干热灭菌法灭菌
5. 下列有关“菊花组织培养”实验的叙述错误的是（ ）
A. 用酒精、次氯酸钠等对生理状况良好的嫩枝茎段进行表面消毒
B. 将外植体的1/3～1/2插入到诱导愈伤组织的培养基中，注意不要倒插
C. 接种外植体的锥形瓶应置于无菌、光照、18～22℃的培养箱中培养
D. 培养基中植物激素的浓度、比例等都会影响植物细胞的发育方向
6. 人造皮肤的构建需要使用动物细胞培养技术，下列相关叙述正确的是（ ）
A. 进行动物细胞培养时常用胃蛋白酶来分散细胞
B. 只要进行好消毒，动物细胞培养可以在恒温培养箱进行
C. 贴壁细胞在分裂生长到出现接触抑制后会分化为不同类型
D. 培养动物细胞所需的基本条件与细胞所处的内环境理化条件接近
7. 下列是制备单克隆抗体的各个环节，正确的顺序是（ ）
①用特定抗原对小鼠进行免疫
②从小鼠腹水获取单克隆抗体
③将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内
④对杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测
⑤用特定的培养基筛选杂交瘤细胞
⑥诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合
A. ⑤③②⑥①④ B. ③②①④⑥⑤
C. ①⑥⑤④③② D. ⑥⑤②①④③
8. 下列中学实验中有关NaCl使用的叙述，正确的是（ ）
A. 制作泡菜时，加入NaCl的目的是抑制细菌生长
B. 牛肉膏蛋白胨培养基中，加入高浓度NaCl可用于筛选耐盐细菌
C. 溶解有DNA的NaCl溶液中加入二苯胺试剂后，溶液就会呈现蓝色
D. 在DNA粗提取时，用2moL/L的NaCl可析出溶液中的DNA
9. 下列关于动物细胞核移植技术的叙述，错误的是（ ）
A. 非人灵长类动物的体细胞核移植难度较大
B. 动物体细胞核移植的难度低于胚胎细胞核移植
C. 从动物卵巢采集卵母细胞后，要将其在体外培养到MII期
D. 哺乳动物细胞核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植
10. 胚胎工程让人们大量繁殖优良家畜品种正成为现实，下列相关叙述错误的是（ ）
A. 胚胎工程的相关技术包括体外受精、胚胎移植和胚胎分割等
B. 动物自然受精和早期胚胎发育的规律是胚胎工程的理论基础
C. 精子与卵子结合前，精子要完成获能，卵子要成熟至合适的时期
D. 哺乳动物胚胎的早期发育依次经历了囊胚、桑葚胚和原肠胚阶段
11. 下列关于单克隆抗体的叙述，错误的是（ ）
A. 单克隆抗体在多种疾病的诊断和病原体鉴定中发挥重要作用
B. 通过应用抗体—药物偶联物，可实现对肿瘤细胞的选择性杀伤
C. 单克隆抗体只能应用于鉴定与诊断，其本身不能用于疾病治疗
D. 用荧光标记的单克隆抗体，可定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病
12. 为利用乳腺生物反应器进行制药，需先对胚胎的性别进行筛选后再进行移植。已知牛的雄性胚胎中存在特异性H－Y抗原，可与H－Y单克隆抗体发生特异性结合。下列叙述正确的是（ ）
A. H－Y单克隆抗体是由B淋巴细胞分泌的 B. H－Y单克隆抗体检测呈阳性的胚胎应剔除
C. 可对筛选出的桑葚胚内细胞团进行均等分割 D. 胚胎移植前要对受体母牛进行超数排卵处理
13. 下列哪项不是蛋白质工程的基本思路（ ）
A. 通过改造或合成基因获得所需要的蛋白质
B. 从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构
C. 根据所预期的蛋白质结构，推测相应的氨基酸序列
D. 根据推测的氨基酸序列，便能确定唯一对应的脱氧核苷酸序列
14. 利用 PCR 可以在体外进行 DNA 片段的扩增，下列叙述错误的是（ ）
A. Taq DNA 聚合酶能耐高温
B. 加入 PCR 反应体系中的引物一般有两种，在各循环中反复使用
C. PCR 反应体系中有模板、引物、脱氧核苷酸、耐高温的 DNA 聚合酶和缓冲液
D. 为避免外源 DNA 等的污染，微量离心管、枪头等在使用前都要经过灭菌处理
15. 下列关于转基因产品安全性的叙述，错误的是（ ）
A. 相关法规是规范基因科学研究和避免转基因技术滥用的有力武器
B. 我国已经逐步建立了与国际接轨，并适合我国国情的转基因安全评价体系
C. 关于转基因产品安全性的观点，在自媒体上传播越广的，其可信程度越高
D. 参与转基因产品安全性有关问题的讨论时，要依靠确凿的证据和严谨的逻辑
二、不定项选择题：本题共5小题，每小题有一个或多个选项符合题目要求。
16. 下列关于传统发酵技术的说法中，错误的是（ ）
A. 果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌属于兼性厌氧生物，在有氧条件下大量繁殖
B. 制作果醋需要醋酸菌，它是一种严格厌氧的微生物，可将葡萄中的糖分解为乙酸
C. 多种微生物参与了腐乳的制作，如酵母菌、毛霉、曲霉等
D. 制作泡菜利用的乳酸菌是一种厌氧微生物，可以通过无氧呼吸产生乳酸和二氧化碳
17. 发酵工程与农业、食品工业、医药工业及其他工业生产有着密切的联系。下列对发酵工程及其应用的叙述，正确的是（ ）
A. 啤酒的工业化生产过程中，酒精的产生积累主要在后发酵阶段完成
B. 食品添加剂虽能改善食品的口味、色泽和品质，但会降低食品的营养
C. 将乙肝病毒的抗原基因转入酵母菌，再结合发酵工程可生产乙肝疫苗
D. 利用放线菌产生的井冈霉素防止水稻枯纹病是生物防治的有效手段
18. 小鼠的某种上皮细胞与某种淋巴细胞体外培养时，细胞周期基本相同，但上皮细胞在培养时，呈现扁平不规则多角形，且粘附在培养瓶内壁上；而该淋巴细胞则常常悬浮在培养液中。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 使用合成培养基培养动物细胞通常不添加天然成分
B. 培养基内加入适量的抗生素可以形成无病毒的培养环境
C. 培养消化道上皮细胞更易观察判断细胞是否具有接触抑制现象
D. 相同次数分瓶培养所获得的两者细胞数目完全相同
19. 用DNA重组技术可以赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人类需要的生物产品。在此过程中需要使用多种工具和物质。下列叙述正确的是（ ）
A. E．coli DNA连接酶只能用来连接具有互补黏性末端的DNA片段
B. 用于将目的基因转入受体细胞的常用载体质粒只存在于原核细胞
C. 构建好的基因表达载体中必须在目的基因的下游包含启动子序列
D. 用于PCR的引物是一小段能与模板链特异性结合的双链DNA片段
20. 利用基因工程技术生产羧酸酯酶（CarE）制剂的流程如下图所示，有关叙述正确的是（ ）
A. 过程①需使用逆转录酶产生互补的DNA片段
B. 过程②利用PCR扩增CarE基因需使用解旋酶和耐高温的DNA聚合酶
C. 过程③可用NaCl溶液处理大肠杆菌，使之成为感受态细胞
D. 过程④可利用DNA分子杂交鉴定目的基因是否已插入受体细胞的染色体DNA上
三、非选择题：（5个小题）
21. 请回答下列与基因工程有关的问题。
（1）重组质粒上的抗生素抗性基因可作为______，其作用是有利于筛选出含有目的基因的细胞。
（2）利用基因工程方法制备某蛋白（目的蛋白）时，需使用DNA连接酶来构建基因表达载体。其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是______DNA连接酶，DNA连接酶催化形成的化学键是______。基因表达载体必须有RNA聚合酶识别和结合的部位，该部位称为______。
（3）利用PCR能获得和扩增目的基因，进行PCR时需要用到的酶是______，除了该酶、模板母链、原料外还需添加______。
22. 我国科兴及北京生物两款新冠灭活疫苗均使用Vero细胞（非洲绿猴肾细胞的传代细胞系）进行病毒扩增培养（见下图）。
（1）动物细胞工程常用的技术手段有多种，其中______是其他动物细胞工程技术的基础。Vero细胞的培养应在培养箱中进行，箱内的气体环境条件为______。
（2）Vero细胞的传代培养过程中需要使用______酶使细胞分散，并在合成培养基中加入______等天然成分。此外，在培养过程中，应定期更换培养液，目的是______。
（3）将已对新冠病毒发生免疫的B淋巴细胞和Vero细胞系获得杂交细胞，再经过______筛选、克隆化培养和______检测，获得产生特定抗体的______，用以生产单克隆抗体。单克隆抗体的优点是：______。
23. 如下图为经过体外受精和胚胎分割移植培育优质奶牛的过程，请回答下列问题
（1）A细胞是______，为了一次获得多个细胞A，需向供体内注射______。
（2）将优良公牛的精子收集后放在一定浓度的肝素溶液中进行培养，其目的是______。
（3）在体外培养细胞用于时，除了给予一定量的O2进行______外，还需要提供CO2体以______。
（4）①的是______。进行胚胎分割时，应选择发育到______时期的胚胎进行操作，在对上图的胚胎进行分割时，应注意______。
（5）移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是______。
（6）为了保证供、受体的生理状态相同，用相关激素进行______处理。
24. 野生马铃薯品种的植株具有较强的抗病、抗虫、抗盐碱、抗寒能力，但块茎不能食用。科学家用野生马铃薯与马铃薯的体细胞进行杂交，培育出了生活能力强、块茎能食用的杂交系马铃薯。据下图分析回答问题：
（1）①过程使用了______酶，以获得植物原生质体。
（2）②过程需要用到促融剂______，目的是诱导______间的融合。
（3）请用文字和箭头表示出④⑤技术过程的实验流程______。由此过程可以看出植物细胞有形成再生植株的可能性，实现这种可能性需要运用的技术及其原理是______，需要______等外界条件。
（4）植物体细胞杂交的研究在______方面，取得了巨大突破，其育种的原理是______。
（5）微型繁殖是植物繁殖的一种途径。与常规的种子繁殖方法相比，这种微型繁殖技术不受季节气候等环境因素的限制，繁殖速度______，且能______。
25. 自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯，然后进行数量的测定。下表是两种培养基配方及有关土壤中分解尿素的细菌分离和计数的实验过程，请回答有关问题。
表1：A培养基配方
KH2PO4
Na2HPO4
MgSO4·7H2O
葡萄糖
尿素
琼脂
H2O
1.4g
2.1g
0.2g
10.0g
1.0g
15.0g
1000mL
表2：B培养基配方
纤维素粉
Na2NO3
Na2HPO4·7H2O
KH2PO4
MgSO4·7H2O
KCl
酵母浸膏
H2O
5g
1g
1.2g
0.9g
0.5g
0.5g
0.5g
1000mL
（1）如果要分离土壤中能分解尿素的细菌，应选择上述______（A、B）配方的培养基，在该培养基中加入______指示剂，可初步鉴定出该种细菌能否分解尿素。据B培养基的成分，所培养微生物的同化作用类型是______。
（2）在制备固体培养基的倒平板操作时，平板冷凝后，应将平板倒置，目的是______。
（3）若取土样6g，应加入______m的无菌水配制成稀释10倍的土壤溶液。因土壤中细菌密度很大，需要不断加以稀释，配制成101～107不同稀释倍数的土壤溶液。将103～107倍稀释的稀释液分别吸取0.2mL加入固体培养基上，用涂布器将菌液铺平，每个稀释度下至少涂布3个平板，这种接种方法称为______。将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24～48h，观察并统计菌落数，结果如表，其中______倍的稀释比较合适，由此计算出每克土壤中的菌落数为______个。这种方法测定的菌落数往往比活菌的实际数目______（填“低”或“高”），因为______。
稀释倍数
103
104
105
106
107
菌落数/个
1号平板
478
367
277
26
5
2号平板
496
354
261
20
8
3号平板
509
332
254
29
3
（4）若研究尿素分解菌的群体生长规律，可采用平板划线法分离土壤中的尿素分解菌。操作时，接种环通过灼烧灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线，这样做的目的是____________。将分离纯化后的单个菌落进行液体培养，可采用定期取样的方法进行计数。若以一个大方格（体积为0.1mm3）有25个中方格的计数板为例进行计算，设5个中方格中总菌数为45，菌液稀释倍数为102，那么原菌液的菌群密度为______个/mL。
答案
一、单项选择题：（本题共15小题，）在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的
1. C
【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。在有氧的情况下酵母菌生长繁殖速度快，把糖分解成二氧化碳和水。在无氧的环境中酵母菌把糖分解成酒精和二氧化碳。
2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
3、参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型。毛霉等微生物产生的蛋白酶可以将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可以将脂肪水解成甘油和脂肪酸。
4、参与泡菜制作的微生物是乳酸菌，其新陈代谢类型是异养厌氧型。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。
【详解】A、④装置中，制作泡菜的原理是乳酸菌发酵而非醋酸菌，乳酸菌是厌氧型生物，所以在坛口加水，可以制造无氧环境，有利于乳酸菌增殖， A错误；
B、③装置中，腐乳制作过程的主要微生物是毛霉，先让毛霉生长，后加盐腌制，否则盐会抑制毛霉生长，B错误；
C、②装置中，醋酸菌是好氧菌，通入氧气有利于醋酸菌发酵，C正确；
D、①装置中液体太满，发酵液会从导管溢出；排气管不能插入到液体中，否则发酵液会从导管溢出，且发酵瓶中不需要插入温度计，D错误。
故选C。
2. A
【分析】1、接种微生物常用的两种方法：
(1)平板划线法通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
(2)稀释涂布平板法则是菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。
2、无菌技术
(1)关键：防止外来杂菌的入侵。
(2)具体操作①对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。
【详解】A、通常对接种室用紫外线照射30min，照射前可适量喷洒石炭酸等消毒液来增强消毒效果，A错误；
B、若要检测培养基是否被污染，可增加空白对照，将未接种的培养基在相同条件下进行培养，B正确；
C、获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，因此两种纯化方法的核心都是要防止杂菌污染，保证培养物的纯度，C正确；
D、接种环可用灼烧灭菌，涂布器要沾少量酒精在火焰上引燃进行灭菌，D正确。
故选A。
3. D
【分析】培养基一般含有水、碳源、氮源、无机盐。培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。如培养乳酸杆菌时需添加维生素，培养霉菌时需将pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或微碱性。选择培养基是指允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。
【详解】A、在牛肉膏蛋白胨培养基中加入纤维素，牛肉膏蛋白胨培养基是完全培养基，不是选择培养基，A错误；
B、取回的土壤样品如进行灭菌将杀死所有微生物，B错误；
C、为验证培养基的灭菌效果，应使用不接种的以纤维素为唯一碳源的培养基作对照，C错误；
D、对筛选出的纤维素分解菌可进行玉米秸秆降解实验，测定秸秆的分解速率，以测定纤维素酶活性，D正确。
故选D。
4. C
【分析】菌落：是指由单个微生物细胞或一堆同种细胞在适宜固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度，形成以母细胞为中心的一团肉眼可见的、有一定形态、构造等特征的子细胞集团。各种微生物在一定条件下形成的菌落特征，如大小、形状、边缘、表面、质地、颜色等，具有一定的稳定性，是衡量菌种纯度、辨认和鉴定菌种的重要依据。
【详解】A、菌落时在固体培养基上获得的子细胞群体，因此要获得能分解石油的微生物的菌落，需要在培养基中需要添加琼脂，A正确；
B、筛选产果胶酶的微生物的培养基要以果胶为唯一碳源，因为这样才能保证在该培养基上长出的是分解果胶的微生物，B正确；
C、要从细菌与真菌混杂的菌群中将细菌纯化，培养基除碳源、氮源、水、无机盐、特殊营养物质外，最好将培养基的pH调成中性或微碱性，以抑制真菌的生长，而添加抗生素会抑制细菌的生长，C错误；
D、实验时，通常用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌，能耐高温的玻璃器皿如培养皿和金属用具，且需要干燥的物品，一般用干热灭菌法灭菌，D正确。
故选C。
5. C
【分析】在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中，需要的条件：①消毒灭菌；②一定浓度的植物激素；③适宜的温度；④充足的养料。
【详解】A、进行菊花的组织培养时，可用70%乙醇和次氯酸钠对茎段进行消毒，A正确；
B、在酒精灯火焰旁（防止杂菌污染）将外植体的1/3-1/2插入诱导愈伤组织的培养基中，注意不要倒插（目的是保证生长素的极性运输，保证成活率），B正确；
C、诱导愈伤组织期间一般不需要光照，在后续的培养过程中，每日需要给予适当时间和强度的光照，C错误；D、培养基中植物激素的浓度、比例等都会影响植物细胞的发育方向，如生长素和细胞分裂素比例高时，可以促进生根，D正确。
故选C。
6. D
【分析】动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。
【详解】A、胃蛋白酶的最适pH为强酸性，进行动物细胞培养时常用胰蛋白酶来分散细胞，不能用胃蛋白酶，A错误；
B、动物细胞培养要保证无菌、无毒的环境，而消毒只能部分杀死微生物，B错误；
C、贴壁细胞在分裂生长到出现接触抑制后既不能分裂，也不能分化，C错误；
D、动物细胞培养所需要的条件应类似于细胞所处内环境的理化条件，D正确。
故选D。
7. C
【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
【详解】由分析可知，制备单克隆抗体的过程为①用特定抗原对小鼠进行免疫→⑥诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合→⑤用特定的培养基筛选杂交瘤细胞→④对杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测→③将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内→②从小鼠腹水获取单克隆抗体。综上所述，C正确，ABD错误。
故选C。
8. B
【分析】1、泡菜的制作：
①将新鲜蔬菜预先处理成条状或片状；
②泡菜盐水按清水和盐为4：1质量比配制煮沸冷却备用；
③预处理的新鲜蔬菜装至半坛时放入蒜瓣、生姜、香辛料等佐料，并继续装至八成满；
④倒入配制好的盐水，使盐水浸没全部菜料；
⑤盖上泡菜坛盖子，并用水密封发酵，发酵时间受到温度影响。
2、选择性培养基：根据某微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基，具有使混合菌样中的劣势菌变成优势菌的功能，广泛用于菌种筛选等领域。
【详解】A、制作泡菜时，用煮沸过的质量分数为10%的NaCl溶液的作用是调味和抑制杂菌生长的作用，A错误；
B、牛肉膏蛋白胨培养基中，加入高浓度NaCl，高浓度的氯化钠可以抑制多种细菌的生长，但不会影响金黄色葡萄球菌的生长，因此可以将耐盐的细菌筛选出来，B正确；
C、溶解有DNA的NaCl溶液中加入二苯胺试剂后，需沸水浴加热，溶液才会呈现蓝色，C错误；
D、在DNA粗提取时，用2mol/L的NaCl溶液可以溶解DNA，用0.14mol/L的NaCl溶液析出溶液中的DNA，D错误。
故选B。
9. B
【分析】
1、体外受精主要包括：卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精。
2、非人灵长类核移植主要难在三个方面：以猕猴为例：一是猴细胞核不易识别，去核难度大；二是猴的卵母细胞容易提前激活。操作稍一不小心，卵母细胞就可能被激活，然后它就会先开始自主卵裂，体细胞就跟不上了，最后导致这个卵无法发育；三是猴的体细胞克隆胚胎发育差，培养囊胚效率低，优质囊胚比例低。
3、哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植。由于动物胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性相对容易，而动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难，因此，动物体细胞核移植的难度也就明显高于胚胎细胞核移植。
【详解】A、非人灵长类动物的体细胞核移植难度较大，如细胞核不易识别，去核难度大及卵母细胞容易提前激活等，A正确；
B、由于动物胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性相对容易，而动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难，因此，动物体细胞核移植的难度也就明显高于胚胎细胞核移植，B错误；
C、直接从活体动物卵巢中吸取采集的卵母细胞，需要在体外经人工培养至MII中期，C正确；
D、哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植，体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植，D正确。
故选B。
10. D
【分析】
1、胚胎工程指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术，如体外受精、胚胎移植、胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术。经过处理后获得的胚胎，还需移植到雌性动物体内产生后代，以满足人类的各种需求。
2、受精过程为：顶体反应→穿越放射冠→穿越透明带（透明带反应）→卵细胞膜反应（卵黄膜封闭作用）→卵子完成减数第二次分裂并释放第二极体→雌雄原核的形成、核膜消失，雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂开始。
3、胚胎发育过程：
（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加；
（2）桑椹胚：32个细胞左右的胚胎（之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能属全能细胞）；
（3）囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔；
（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。
【详解】A、胚胎工程指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术，包括体外受精、胚胎移植和胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术，A正确；
B、哺乳动物在自然条件下，减数分裂（精子和卵子的发生）、受精作用和早期胚胎的发育规律是胚胎工程的理论基础，B正确；
C、精子与卵子结合前，受精过程若想顺利进行必须满足两个条件：来自父方的精子要进行精子获能；来自母方的卵子要培养至培养至减数第二次分裂中期，C正确；
D、胚胎发育的过程为受精卵→桑椹胚→囊胚→原肠胚→幼体，所以哺乳动物胚胎的早期发育依次经历桑葚胚、囊胚、原肠胚等不同发育阶段，D错误。
故选D。
11. C
【分析】1、单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
2、单克隆抗体的作用：①作为诊断试剂：（最广泛的用途）具有准确、高效、简易、快速的优点。②用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗癌症，可制成“生物精确制导武器”。
【详解】A、单克隆抗体可用作为诊断试剂，在多种疾病的诊断和病原体鉴定中发挥重要作用，A正确；
B、通过应用抗体—药物偶联物可制成“生物精确制导武器”，可实现对肿瘤细胞的选择性杀伤，主要用于治疗癌症，B正确；
C、单克隆抗体可应用于鉴定与诊断，其本身可与抗原结合，也能用于疾病治疗，C错误；
D、利用单克隆抗体的特异性，在临床上用荧光标记的单克隆抗体，可定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病，D正确。
故选C。
12. B
【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
【详解】A、H-Y单克隆抗体是杂交瘤细胞的分泌物，所以H-Y单克隆抗体是由杂交瘤细胞分泌的，A错误；
B、H-Y单克隆抗体具有特异性，H-Y抗原只存在于雄性胚胎中，因此，H-Y单克隆抗体检测阳性的胚胎一定是雄性，而乳腺生物反应器需要雌性个体，因此筛选检测阳性的个体应剔除，B正确；
C、桑葚胚没有内细胞团，可对筛选出的囊胚期的内细胞团进行均等分割，C错误；
D、胚胎移植前要对受体母牛进激素处理，使供受体处于相同的生理状态，不是让受体超数排卵，D错误。
故选B。
13. D
【分析】蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。
【详解】A、蛋白质工程通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，A不符合题意；
BC、蛋白质工程的基本途径是：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列（基因），BC不符合题意；
D、由于有的氨基酸可能由多个密码子编码，因此根据氨基酸序列推测的脱氧核苷酸序列可能不唯一，D符合题意。
故选D。
14.B
【分析】PCR原理：在高温作用下，打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4种游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。
【详解】A、TaqDNA聚合酶能耐高温，可催化DNA子链的合成，A正确；
B、引物会参与到子链中，不会被反复使用，B错误；
C、PCR反应中，需要在一定的添加Mg2+的缓冲液中才能进行，需提供模板DNA、分别与两条模板链结合的引物、4种脱氧核苷酸和耐高温的DNA聚合酶等，C正确；
D、PCR是进行DNA的扩增，为避免外源DNA等的污染，PCR实验中使用的相关器具如微量离心管、枪头、缓冲液和蒸馏水等应提前高压蒸汽灭菌，D正确。故选B。
15. C
【分析】转基因生物的安全性问题:食物安全(滞后效应、过敏源、营养成分改变)、 生物安全(对生物多样性的影响)、 环境安全(对生态系统稳定性的影响)。转基因食品、 产品上都要标注原料来自转基因生物，如“转基因xx、转基因xx加工品(制成品)”等。对于转基因食物潜在隐患要进行开展风险评估、预警跟踪等措施多环节、严谨的安全性评价,保障了现代生物技术的安全性。
【详解】A、相关法规是规范基因科学研究和避免转基因技术滥用的有力武器，A正确；
B、为了保障转基因产品安全性，需要开展风险评估、预警跟踪等措施，所以针对转基因技术，我国已经逐步建立了与国际接轨，并适合我国国情的转基因安全评价体系，B正确；
C、转基因作为一项技术本身是中性的，所以只要有证据表明产品有害，就应该禁止该产品的使用，关于转基因产品安全性的观点，媒体传播需要谨慎，不能盲目放大，传播越广的，其可信程度不一定越高，C错误；
D、转基因技术是一把双刃剑，要理性的看待转基因技术，因此参与转基因产品安全性有关问题的讨论时，要依靠确凿的证据和严谨的逻辑，D正确。
故选C。
16. BD
【分析】参与豆腐发酵的微生物有青霉、酵母、曲霉、毛霉等多种，其中起主要作用的是毛霉。毛霉是一种丝状真菌，常见于土壤、水果、蔬菜、谷物上，具有发达的白色菌丝。毛酶等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。
【详解】A、果酒的制作原理是酵母菌的无氧呼吸产生酒精，酵母菌属于兼性厌氧生物，在有氧条件下大量繁殖，A正确；
B、制作果醋需要醋酸菌，它是一种好氧的微生物，可将葡萄中的糖（或乙醇）分解为乙酸，B错误；
C、多种微生物参与了腐乳的制作，如酵母菌、毛霉、曲霉等，其中起主要作用的是毛霉，C正确；
D、制作泡菜利用的乳酸菌是一种厌氧微生物，可以通过无氧呼吸产生乳酸，D错误。
故选BD。
17. CD
【分析】发酵工程的基本环节：选育菌种：性状优良的菌种可以从自然界中筛选出来，也可以通过诱变育种或基因工程育种获得。发酵罐内发酵：这是发酵工程的中心环节。在发酵过程中，要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度等，以了解发酵进程。还要及时添加必需的营养组分，要严格控制温度、pH和溶解氧等发酵条件。分离、提纯产物：如果是发酵产品是微生物细胞本身，可在发酵结束之后，采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥，即可得到产品。如果产品是代谢物，可根据产物的性质采取恰当的提取、分离和纯化措施来获得产品。
【详解】A、啤酒发酵过程分为主发酵和后发酵两个阶段。酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都是在主发酵阶段完成，因此啤酒的工业化生产过程中，酒精的产生积累主要在主发酵阶段完成，A错误；
B、食品添加剂能改善食品的口味、色泽和品质，可以增加食品的营养，B错误；
C、通过基因工程技术，将乙肝病毒的抗原基因转入酵母菌，再结合发酵工程可生产乙肝疫苗，C正确；
D、利用放线菌产生的井冈霉素防止水稻枯纹病，不会对环境造成污染，是生物防治的有效手段，D正确。
故选CD。
18. ABD
【分析】细胞培养是指在体外模拟体内环境（无菌、适宜温度、酸碱度和一定营养条件等），使之生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能的一种方法。细胞培养也叫细胞克隆技术，在生物学中的正规名词为细胞培养技术。
【详解】A、动物细胞培养应在无毒、无菌的环境下进行，由合成培养基提供各种营养成分，但通常还需要添加血清、血浆等天然成分，A错误；
B、抗生素具有抑菌或杀菌作用，但对病毒无用，培养基内加入适量的抗生素不能形成无病毒的培养环境，B错误；
C、消化道上皮细胞是单层柱状上皮细胞，培养消化道上皮细胞更易观察判断细胞是否具有接触抑制现象，C正确；
D、细胞培养时会出现贴壁生长和接触抑制现象，如果要传代培养，就应该用胰蛋白酶处理分散成单个细胞后分瓶培养，相同次数分瓶培养所获得的两者细胞数目不一定相同，D错误。
故选ABD。
19. A
【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定。
【详解】A、DNA连接酶根据功能可以分为E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶，E.coliDNA连接酶只能用来连接具有互补黏性末端的DNA片段，A正确；
B、质粒主要存在于细菌、酵母菌等生物体内，酵母菌属于真核生物，B错误；
C、构建好的基因表达载体中必须在目的基因的上游包含启动子序列，便于启动基因的转录，C错误；
D、用于PCR的引物是一小段能与模板链特异性结合的单链DNA片段或单链RNA，D错误。
故选A。
20. A
【分析】根据题意和图示分析可知：图中过程①表示通过反转录法合成相应的DNA；过程②表示利用PCR技术对目的基因进行扩增；过程③表示将目的基因导入受体细胞；过程④表示通过筛选获得工程菌。
【详解】A、过程①表示通过反转录法合成目的基因，该过程需要逆转录酶，A正确；
B、过程②表示利用PCR技术对目的基因进行扩增，该过程中解旋是通过高温解链实现的，不需要解旋酶，B错误；
C、感受态细胞可用的CaCl2溶液制备，C错误；
D、过程④筛选获得工程菌可用DNA分子杂交的方法鉴定，但该基因工程中受体细胞为大肠杆菌，无染色体，D错误。
故选A。
解答此题要求考生能够识记基因工程的操作步骤，通过操作步骤确定图中各标号表示的生理过程；识记PCR技术中不需要解旋酶；识记目的基因导入微生物的方法等，并能结合选项分析作答。
21.
（1）标记基因
（2） ①. T4 ②. 磷酸二酯键 ③. 启动子
（3） ①. 耐高温的DNA聚合酶 ②. 引物
【分析】基因工程的核心步骤：
(1)目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
(3)将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样，将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法:将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法:将目的基因导入微生物细胞的方法是钙离子处理法。
【小问1详解】
标记基因是一种已知功能或已知序列的基因，能够起着特异性标记的作用。在基因工程意义上来说，它是重组DNA载体的重要标记，通常用来检验转化成功与否；在基因定位意义上来说，它是对目的基因进行标志的工具，通常用来检测目的基因在细胞中的定位，重组质粒上的抗生素抗性基因就可以作为标记基因。
【小问2详解】
T4 DNA连接酶，可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5'-P末端和3'-OH末端之间以磷酸二酯键结合，该催化反应需ATP作为辅助因子。同时T4 DNA连接酶可以修补双链DNA、双链RNA或DNA/RNA杂合物上的单链缺刻。启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，是基因表达载体的开始。
【小问3详解】
PCR技术需要用到耐高温的DNA聚合酶，模板母链，原料以及引物。
22.
（1） ①. 动物细胞培养 ②. 5%CO2、95%空气
（2） ①. 胰蛋白酶（或胶原蛋白酶） ②. 血清 ③. 清除代谢废物；防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害
（3） ①. （特定的）选择培养基 ②. 专一抗体 ③. 杂交瘤细胞 ④. 能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合、并且可以大量制备
【分析】动物细胞培养的条件营养：将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配置而成的培养基，称为合成培养基。（通常需要加入血清等一些天然成分）无菌、无毒的环境：添加抗生素温度、pH和渗透压：36.5±0.5℃ 7.2～7.4气体环境：O2是细胞代谢所需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。置于含有95%空气和5%CO2混合气体的CO2培养箱进行培养。
【小问1详解】
动物细胞工程常用的技术包括动物细胞培养、动物细胞融合和动物细胞核移植等，其中动物细胞培养是动物细胞工程的基础。Vero细胞的培养应置于含有95%空气和5%CO2混合气体的CO2培养箱进行培养。
【小问2详解】
Vero细胞的传代培养过程中需要使用胰蛋白酶、胶原蛋白酶使细胞分散。将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养基，称为合成培养基。由于人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚，因此在使用合成培养基时，通常需要加入血清等一些天然成分。为了清除代谢废物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害，在培养过程中，应定期更换培养液。
【小问3详解】
将已对新冠病毒发生免疫的B淋巴细胞和Vero细胞系获得杂交细胞，再经过选择培养基筛选、筛选出杂交瘤细胞，接着对选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养和专一抗体检测，获得产生特定抗体的杂交瘤细胞，用以生产单克隆抗体。单克隆抗体能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合、并且可以大量制备。
23.
（1） ①. （次级）卵母细胞 ②. 促性腺激素
（2）诱导精子获能 （3） ①. 细胞代谢 ②. 维持培养液的pH
（4） ①. 内细胞团 ②. 桑葚胚或囊胚 ③. 将内细胞团均等分割
（5）受体子宫对外来胚胎不发生排斥反应
（6）同期发情
【分析】分析题图：图示为经过体外受精和胚胎分割移植培育优质奶牛的过程，其中A是卵母细胞，可与获能的精子受精形成受精卵；①是囊胚中的内细胞团；②是囊胚腔。
【小问1详解】
据图可知，A可与精子结合为受精卵，故A为减数第二次分裂中期的卵母细胞，即次级卵母细胞；为了一次获得多个细胞A，需向供体内注射促性腺激素，然后培养到MII期才能受精。
【小问2详解】
精子获能后才具备受精能力，将优良公牛的精子收集后放在一定浓度的肝素溶液中进行培养，其目的是诱导精子获能。
【小问3详解】
动物细胞培养时，提供氧气的目的是保证细胞正常代谢；提供二氧化碳气体的目的是维持培养液的pH。
【小问4详解】
①指的是内细胞团；进行胚胎分割时，应选择发育到桑葚胚或囊胚时期的胚胎进行操作；对囊胚进行胚胎分割时，应注意将内细胞团均等分割。
【小问5详解】
因为胚胎与母体只是建立生理和组织上的联系，移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是受体子宫对外来胚胎不发生排斥反应。
【小问6详解】
为了保证供、受体的生理状态相同，可用相关激素进行同期发情处理，更有利于移植胚胎的存活。
24.
（1）纤维素酶和果胶
（2） ①. 聚乙二醇##PEG ②. 原生质体
（3） ①. 杂种细胞愈伤组织幼苗 ②. 植物组织培养技术、植物细胞具有全能性 ③. 无菌操作、离体状态、一定的营养物质和激素、温度与pH适宜等
（4） ①. 打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培育植物新品种等 ②. 染色体（数目）变异
（5） ①. 快 ②. 保持植物原有的遗传特性
【分析】分析题图：①过程为去除细胞壁的过程，②为原生质体的融合，③为杂种细胞再生出细胞壁的过程，④为植物组织培养的脱分化过程，⑤为再分化过程。
【小问1详解】
①是去除细胞壁的过程，由于植物细胞壁的成分主要是纤维素和果胶，故该过程需要用纤维素酶和果胶酶处理，以获得植物原生质体。
【小问2详解】
②为原生质体的融合，该过程需要用到促融剂聚乙二醇（PEG），目的是诱导马铃薯的原生质体进行融合。
【小问3详解】
④和⑤属于植物组织培养过程中的脱分化和再分化过程，该过程的实验流程是：杂种细胞 愈伤组织 幼苗；植物细胞有形成再生植株的可能性，实现这种可能性需要运用的技术是植物组织培养技术，该技术所依据的原理是植物细胞的全能性；植物组织培养过程中需要满足的条件有：无菌操作、离体状态、一定的营养物质和激素、温度与pH适宜等。
【小问4详解】
植物体细胞杂交可以克服远缘杂交不亲和的障碍，该研究在打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培育植物新品种等取得了巨大突破；植物体细胞杂交实现了不同物种的融合，育种的原理是染色体变异。
【小问5详解】
与常规的种子繁殖方法相比，微型繁殖技术不受季节气候等环境因素的限制，繁殖速度快，且因为其是无性繁殖，能够保持植物原有的遗传特性。
25.
（1） ①. A ②. 酚红 ③. 异养型
（2）防止培养皿盖上冷凝的水滴入培养基造成污染，避免培养基水分过快蒸发
（3） ①. 54 ②. 稀释涂布平板法 ③. 105 ④. 1.32×108 ⑤. 低 ⑥. 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落
（4） ①. 将聚集的菌种逐步稀释分散以便获得（不连续）单个菌落 ②. 2.25×108
【分析】接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法，接种的目的是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，并在培养基表面形成单个细菌繁殖而成的子细胞群体—菌落。
【小问1详解】
如果要分离土壤中能分解尿素的细菌，应以尿素为唯一的氮源，应选择上述A配方的培养基，尿素分解菌能够将尿素分解成氨，PH升高，可以用酚红指示剂进行鉴定出该种细菌能否分解尿素。B培养基含有纤维素粉，所培养微生物的同化作用类型是异养型。
【小问2详解】
在制备固体培养基的倒平板操作时，平板冷凝后，应将平板倒置，目的是防止培养皿盖上冷凝的水滴入培养基造成污染，避免培养基水分过快蒸发。
【小问3详解】
若取土样6g，应加入54ml的无菌水配制成稀释10倍土壤溶液，样品的稀释程度直接影响平板上生长的菌落的数目，选用一定稀释范围的样品进行培养，将103-107倍的稀释液分别吸取0.2mL加入到固体培养基上，用稀释涂布平板法将菌液用涂布器涂布到固体培养基上。105倍的稀释菌落数在30～300之间，比较合适。由此计算出每克土壤中的菌落数为：（277+261+254）÷3÷0.2×105=1.32×108。这种方法测定的菌落数往往比活菌的实际数目低，因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。
【小问4详解】
平板划线法分离土壤中的尿素分解菌时第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线，这样做的目的是将聚集的菌种逐步稀释分散以便获得（不连续）单个菌落。原菌液的菌群密度为(45÷5)/(0.1÷25)×102×103=2.25×108个/mL。
2022-2023学年辽宁省六校联考高二下册期中生物模拟试卷
一、单项选择题：（本题共15小题，）在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的
1. 人们利用某些微生物制作食品时，需要分析微生物的特点，控制微生物的发酵条件。下列与此有关的各项内容都正确的是（ ）
①
②
③
④
食品
果酒
果醋
腐乳
泡菜
主要微生物
酵母菌
醋酸菌
毛霉
醋酸菌
制作装置或
操作步骤
A. ④ B. ③ C. ② D. ①
2. 在微生物培养过程中，由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物。平板划线法和稀释涂布平板法是常用的获取纯培养物的方法。下列说法错误的是（ ）
A. 通常对接种室用紫外线照射30min后，再适量喷洒石炭酸等消毒液来增强消毒效果
B. 若要检测培养基是否被污染，可将未接种的培养基在相同条件下进行培养
C. 两种纯化方法的核心都是要防止杂菌污染，保证培养物的纯度
D. 接种环在划线前后都需要灼烧，涂布器在接种前也需要灼烧，但两种处理方法不同
3. 研究人员欲从土壤中筛选纤维素分解菌以用于农业秸秆废弃物的高效降解。下列说法正确的是（ ）
A. 在牛肉膏蛋白胨培养基中加入纤维素以制备选择培养基
B. 取回的土壤样品要进行灭菌后再用无菌水溶解后进行接种
C. 为验证培养基的灭菌效果，应使用不接种的牛肉膏蛋白胨培养基作对照
D. 对筛选出的纤维素分解菌可进行玉米秸秆降解实验以测定纤维素酶活性
4. 下列有关微生物培养的叙述错误的是（ ）
A. 欲获得能分解石油的微生物的菌落，所用培养基中需要添加琼脂
B. 筛选产果胶酶的微生物的培养基要以果胶为唯一碳源
C. 要从细菌与真菌混杂的菌群中将细菌纯化，培养基除碳源、氮源、水、无机盐、特殊营养物质外，最好添加抗生素制成选择培养基
D. 实验前对培养基的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法，培养皿一般用干热灭菌法灭菌
5. 下列有关“菊花组织培养”实验的叙述错误的是（ ）
A. 用酒精、次氯酸钠等对生理状况良好的嫩枝茎段进行表面消毒
B. 将外植体的1/3～1/2插入到诱导愈伤组织的培养基中，注意不要倒插
C. 接种外植体的锥形瓶应置于无菌、光照、18～22℃的培养箱中培养
D. 培养基中植物激素的浓度、比例等都会影响植物细胞的发育方向
6. 人造皮肤的构建需要使用动物细胞培养技术，下列相关叙述正确的是（ ）
A. 进行动物细胞培养时常用胃蛋白酶来分散细胞
B. 只要进行好消毒，动物细胞培养可以在恒温培养箱进行
C. 贴壁细胞在分裂生长到出现接触抑制后会分化为不同类型
D. 培养动物细胞所需的基本条件与细胞所处的内环境理化条件接近
7. 下列是制备单克隆抗体的各个环节，正确的顺序是（ ）
①用特定抗原对小鼠进行免疫
②从小鼠腹水获取单克隆抗体
③将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内
④对杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测
⑤用特定的培养基筛选杂交瘤细胞
⑥诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合
A. ⑤③②⑥①④ B. ③②①④⑥⑤
C. ①⑥⑤④③② D. ⑥⑤②①④③
8. 下列中学实验中有关NaCl使用的叙述，正确的是（ ）
A. 制作泡菜时，加入NaCl的目的是抑制细菌生长
B. 牛肉膏蛋白胨培养基中，加入高浓度NaCl可用于筛选耐盐细菌
C. 溶解有DNA的NaCl溶液中加入二苯胺试剂后，溶液就会呈现蓝色
D. 在DNA粗提取时，用2moL/L的NaCl可析出溶液中的DNA
9. 下列关于动物细胞核移植技术的叙述，错误的是（ ）
A. 非人灵长类动物的体细胞核移植难度较大
B. 动物体细胞核移植的难度低于胚胎细胞核移植
C. 从动物卵巢采集卵母细胞后，要将其在体外培养到MII期
D. 哺乳动物细胞核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植
10. 胚胎工程让人们大量繁殖优良家畜品种正成为现实，下列相关叙述错误的是（ ）
A. 胚胎工程的相关技术包括体外受精、胚胎移植和胚胎分割等
B. 动物自然受精和早期胚胎发育的规律是胚胎工程的理论基础
C. 精子与卵子结合前，精子要完成获能，卵子要成熟至合适的时期
D. 哺乳动物胚胎的早期发育依次经历了囊胚、桑葚胚和原肠胚阶段
11. 下列关于单克隆抗体的叙述，错误的是（ ）
A. 单克隆抗体在多种疾病的诊断和病原体鉴定中发挥重要作用
B. 通过应用抗体—药物偶联物，可实现对肿瘤细胞的选择性杀伤
C. 单克隆抗体只能应用于鉴定与诊断，其本身不能用于疾病治疗
D. 用荧光标记的单克隆抗体，可定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病
12. 为利用乳腺生物反应器进行制药，需先对胚胎的性别进行筛选后再进行移植。已知牛的雄性胚胎中存在特异性H－Y抗原，可与H－Y单克隆抗体发生特异性结合。下列叙述正确的是（ ）
A. H－Y单克隆抗体是由B淋巴细胞分泌的 B. H－Y单克隆抗体检测呈阳性的胚胎应剔除
C. 可对筛选出的桑葚胚内细胞团进行均等分割 D. 胚胎移植前要对受体母牛进行超数排卵处理
13. 下列哪项不是蛋白质工程的基本思路（ ）
A. 通过改造或合成基因获得所需要的蛋白质
B. 从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构
C. 根据所预期的蛋白质结构，推测相应的氨基酸序列
D. 根据推测的氨基酸序列，便能确定唯一对应的脱氧核苷酸序列
14. 利用 PCR 可以在体外进行 DNA 片段的扩增，下列叙述错误的是（ ）
A. Taq DNA 聚合酶能耐高温
B. 加入 PCR 反应体系中的引物一般有两种，在各循环中反复使用
C. PCR 反应体系中有模板、引物、脱氧核苷酸、耐高温的 DNA 聚合酶和缓冲液
D. 为避免外源 DNA 等的污染，微量离心管、枪头等在使用前都要经过灭菌处理
15. 下列关于转基因产品安全性的叙述，错误的是（ ）
A. 相关法规是规范基因科学研究和避免转基因技术滥用的有力武器
B. 我国已经逐步建立了与国际接轨，并适合我国国情的转基因安全评价体系
C. 关于转基因产品安全性的观点，在自媒体上传播越广的，其可信程度越高
D. 参与转基因产品安全性有关问题的讨论时，要依靠确凿的证据和严谨的逻辑
二、不定项选择题：本题共5小题，每小题有一个或多个选项符合题目要求。
16. 下列关于传统发酵技术的说法中，错误的是（ ）
A. 果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌属于兼性厌氧生物，在有氧条件下大量繁殖
B. 制作果醋需要醋酸菌，它是一种严格厌氧的微生物，可将葡萄中的糖分解为乙酸
C. 多种微生物参与了腐乳的制作，如酵母菌、毛霉、曲霉等
D. 制作泡菜利用的乳酸菌是一种厌氧微生物，可以通过无氧呼吸产生乳酸和二氧化碳
17. 发酵工程与农业、食品工业、医药工业及其他工业生产有着密切的联系。下列对发酵工程及其应用的叙述，正确的是（ ）
A. 啤酒的工业化生产过程中，酒精的产生积累主要在后发酵阶段完成
B. 食品添加剂虽能改善食品的口味、色泽和品质，但会降低食品的营养
C. 将乙肝病毒的抗原基因转入酵母菌，再结合发酵工程可生产乙肝疫苗
D. 利用放线菌产生的井冈霉素防止水稻枯纹病是生物防治的有效手段
18. 小鼠的某种上皮细胞与某种淋巴细胞体外培养时，细胞周期基本相同，但上皮细胞在培养时，呈现扁平不规则多角形，且粘附在培养瓶内壁上；而该淋巴细胞则常常悬浮在培养液中。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 使用合成培养基培养动物细胞通常不添加天然成分
B. 培养基内加入适量的抗生素可以形成无病毒的培养环境
C. 培养消化道上皮细胞更易观察判断细胞是否具有接触抑制现象
D. 相同次数分瓶培养所获得的两者细胞数目完全相同
19. 用DNA重组技术可以赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人类需要的生物产品。在此过程中需要使用多种工具和物质。下列叙述正确的是（ ）
A. E．coli DNA连接酶只能用来连接具有互补黏性末端的DNA片段
B. 用于将目的基因转入受体细胞的常用载体质粒只存在于原核细胞
C. 构建好的基因表达载体中必须在目的基因的下游包含启动子序列
D. 用于PCR的引物是一小段能与模板链特异性结合的双链DNA片段
20. 利用基因工程技术生产羧酸酯酶（CarE）制剂的流程如下图所示，有关叙述正确的是（ ）
A. 过程①需使用逆转录酶产生互补的DNA片段
B. 过程②利用PCR扩增CarE基因需使用解旋酶和耐高温的DNA聚合酶
C. 过程③可用NaCl溶液处理大肠杆菌，使之成为感受态细胞
D. 过程④可利用DNA分子杂交鉴定目的基因是否已插入受体细胞的染色体DNA上
三、非选择题：（5个小题）
21. 请回答下列与基因工程有关的问题。
（1）重组质粒上的抗生素抗性基因可作为______，其作用是有利于筛选出含有目的基因的细胞。
（2）利用基因工程方法制备某蛋白（目的蛋白）时，需使用DNA连接酶来构建基因表达载体。其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是______DNA连接酶，DNA连接酶催化形成的化学键是______。基因表达载体必须有RNA聚合酶识别和结合的部位，该部位称为______。
（3）利用PCR能获得和扩增目的基因，进行PCR时需要用到的酶是______，除了该酶、模板母链、原料外还需添加______。
22. 我国科兴及北京生物两款新冠灭活疫苗均使用Vero细胞（非洲绿猴肾细胞的传代细胞系）进行病毒扩增培养（见下图）。
（1）动物细胞工程常用的技术手段有多种，其中______是其他动物细胞工程技术的基础。Vero细胞的培养应在培养箱中进行，箱内的气体环境条件为______。
（2）Vero细胞的传代培养过程中需要使用______酶使细胞分散，并在合成培养基中加入______等天然成分。此外，在培养过程中，应定期更换培养液，目的是______。
（3）将已对新冠病毒发生免疫的B淋巴细胞和Vero细胞系获得杂交细胞，再经过______筛选、克隆化培养和______检测，获得产生特定抗体的______，用以生产单克隆抗体。单克隆抗体的优点是：______。
23. 如下图为经过体外受精和胚胎分割移植培育优质奶牛的过程，请回答下列问题
（1）A细胞是______，为了一次获得多个细胞A，需向供体内注射______。
（2）将优良公牛的精子收集后放在一定浓度的肝素溶液中进行培养，其目的是______。
（3）在体外培养细胞用于时，除了给予一定量的O2进行______外，还需要提供CO2体以______。
（4）①的是______。进行胚胎分割时，应选择发育到______时期的胚胎进行操作，在对上图的胚胎进行分割时，应注意______。
（5）移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是______。
（6）为了保证供、受体的生理状态相同，用相关激素进行______处理。
24. 野生马铃薯品种的植株具有较强的抗病、抗虫、抗盐碱、抗寒能力，但块茎不能食用。科学家用野生马铃薯与马铃薯的体细胞进行杂交，培育出了生活能力强、块茎能食用的杂交系马铃薯。据下图分析回答问题：
（1）①过程使用了______酶，以获得植物原生质体。
（2）②过程需要用到促融剂______，目的是诱导______间的融合。
（3）请用文字和箭头表示出④⑤技术过程的实验流程______。由此过程可以看出植物细胞有形成再生植株的可能性，实现这种可能性需要运用的技术及其原理是______，需要______等外界条件。
（4）植物体细胞杂交的研究在______方面，取得了巨大突破，其育种的原理是______。
（5）微型繁殖是植物繁殖的一种途径。与常规的种子繁殖方法相比，这种微型繁殖技术不受季节气候等环境因素的限制，繁殖速度______，且能______。
25. 自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯，然后进行数量的测定。下表是两种培养基配方及有关土壤中分解尿素的细菌分离和计数的实验过程，请回答有关问题。
表1：A培养基配方
KH2PO4
Na2HPO4
MgSO4·7H2O
葡萄糖
尿素
琼脂
H2O
1.4g
2.1g
0.2g
10.0g
1.0g
15.0g
1000mL
表2：B培养基配方
纤维素粉
Na2NO3
Na2HPO4·7H2O
KH2PO4
MgSO4·7H2O
KCl
酵母浸膏
H2O
5g
1g
1.2g
0.9g
0.5g
0.5g
0.5g
1000mL
（1）如果要分离土壤中能分解尿素的细菌，应选择上述______（A、B）配方的培养基，在该培养基中加入______指示剂，可初步鉴定出该种细菌能否分解尿素。据B培养基的成分，所培养微生物的同化作用类型是______。
（2）在制备固体培养基的倒平板操作时，平板冷凝后，应将平板倒置，目的是______。
（3）若取土样6g，应加入______m的无菌水配制成稀释10倍的土壤溶液。因土壤中细菌密度很大，需要不断加以稀释，配制成101～107不同稀释倍数的土壤溶液。将103～107倍稀释的稀释液分别吸取0.2mL加入固体培养基上，用涂布器将菌液铺平，每个稀释度下至少涂布3个平板，这种接种方法称为______。将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24～48h，观察并统计菌落数，结果如表，其中______倍的稀释比较合适，由此计算出每克土壤中的菌落数为______个。这种方法测定的菌落数往往比活菌的实际数目______（填“低”或“高”），因为______。
稀释倍数
103
104
105
106
107
菌落数/个
1号平板
478
367
277
26
5
2号平板
496
354
261
20
8
3号平板
509
332
254
29
3
（4）若研究尿素分解菌的群体生长规律，可采用平板划线法分离土壤中的尿素分解菌。操作时，接种环通过灼烧灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线，这样做的目的是____________。将分离纯化后的单个菌落进行液体培养，可采用定期取样的方法进行计数。若以一个大方格（体积为0.1mm3）有25个中方格的计数板为例进行计算，设5个中方格中总菌数为45，菌液稀释倍数为102，那么原菌液的菌群密度为______个/mL。
答案
一、单项选择题：（本题共15小题，）在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的
1. C
【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。在有氧的情况下酵母菌生长繁殖速度快，把糖分解成二氧化碳和水。在无氧的环境中酵母菌把糖分解成酒精和二氧化碳。
2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
3、参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型。毛霉等微生物产生的蛋白酶可以将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可以将脂肪水解成甘油和脂肪酸。
4、参与泡菜制作的微生物是乳酸菌，其新陈代谢类型是异养厌氧型。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。
【详解】A、④装置中，制作泡菜的原理是乳酸菌发酵而非醋酸菌，乳酸菌是厌氧型生物，所以在坛口加水，可以制造无氧环境，有利于乳酸菌增殖， A错误；
B、③装置中，腐乳制作过程的主要微生物是毛霉，先让毛霉生长，后加盐腌制，否则盐会抑制毛霉生长，B错误；
C、②装置中，醋酸菌是好氧菌，通入氧气有利于醋酸菌发酵，C正确；
D、①装置中液体太满，发酵液会从导管溢出；排气管不能插入到液体中，否则发酵液会从导管溢出，且发酵瓶中不需要插入温度计，D错误。
故选C。
2. A
【分析】1、接种微生物常用的两种方法：
(1)平板划线法通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
(2)稀释涂布平板法则是菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。
2、无菌技术
(1)关键：防止外来杂菌的入侵。
(2)具体操作①对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。
【详解】A、通常对接种室用紫外线照射30min，照射前可适量喷洒石炭酸等消毒液来增强消毒效果，A错误；
B、若要检测培养基是否被污染，可增加空白对照，将未接种的培养基在相同条件下进行培养，B正确；
C、获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，因此两种纯化方法的核心都是要防止杂菌污染，保证培养物的纯度，C正确；
D、接种环可用灼烧灭菌，涂布器要沾少量酒精在火焰上引燃进行灭菌，D正确。
故选A。
3. D
【分析】培养基一般含有水、碳源、氮源、无机盐。培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。如培养乳酸杆菌时需添加维生素，培养霉菌时需将pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或微碱性。选择培养基是指允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。
【详解】A、在牛肉膏蛋白胨培养基中加入纤维素，牛肉膏蛋白胨培养基是完全培养基，不是选择培养基，A错误；
B、取回的土壤样品如进行灭菌将杀死所有微生物，B错误；
C、为验证培养基的灭菌效果，应使用不接种的以纤维素为唯一碳源的培养基作对照，C错误；
D、对筛选出的纤维素分解菌可进行玉米秸秆降解实验，测定秸秆的分解速率，以测定纤维素酶活性，D正确。
故选D。
4. C
【分析】菌落：是指由单个微生物细胞或一堆同种细胞在适宜固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度，形成以母细胞为中心的一团肉眼可见的、有一定形态、构造等特征的子细胞集团。各种微生物在一定条件下形成的菌落特征，如大小、形状、边缘、表面、质地、颜色等，具有一定的稳定性，是衡量菌种纯度、辨认和鉴定菌种的重要依据。
【详解】A、菌落时在固体培养基上获得的子细胞群体，因此要获得能分解石油的微生物的菌落，需要在培养基中需要添加琼脂，A正确；
B、筛选产果胶酶的微生物的培养基要以果胶为唯一碳源，因为这样才能保证在该培养基上长出的是分解果胶的微生物，B正确；
C、要从细菌与真菌混杂的菌群中将细菌纯化，培养基除碳源、氮源、水、无机盐、特殊营养物质外，最好将培养基的pH调成中性或微碱性，以抑制真菌的生长，而添加抗生素会抑制细菌的生长，C错误；
D、实验时，通常用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌，能耐高温的玻璃器皿如培养皿和金属用具，且需要干燥的物品，一般用干热灭菌法灭菌，D正确。
故选C。
5. C
【分析】在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中，需要的条件：①消毒灭菌；②一定浓度的植物激素；③适宜的温度；④充足的养料。
【详解】A、进行菊花的组织培养时，可用70%乙醇和次氯酸钠对茎段进行消毒，A正确；
B、在酒精灯火焰旁（防止杂菌污染）将外植体的1/3-1/2插入诱导愈伤组织的培养基中，注意不要倒插（目的是保证生长素的极性运输，保证成活率），B正确；
C、诱导愈伤组织期间一般不需要光照，在后续的培养过程中，每日需要给予适当时间和强度的光照，C错误；D、培养基中植物激素的浓度、比例等都会影响植物细胞的发育方向，如生长素和细胞分裂素比例高时，可以促进生根，D正确。
故选C。
6. D
【分析】动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。
【详解】A、胃蛋白酶的最适pH为强酸性，进行动物细胞培养时常用胰蛋白酶来分散细胞，不能用胃蛋白酶，A错误；
B、动物细胞培养要保证无菌、无毒的环境，而消毒只能部分杀死微生物，B错误；
C、贴壁细胞在分裂生长到出现接触抑制后既不能分裂，也不能分化，C错误；
D、动物细胞培养所需要的条件应类似于细胞所处内环境的理化条件，D正确。
故选D。
7. C
【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
【详解】由分析可知，制备单克隆抗体的过程为①用特定抗原对小鼠进行免疫→⑥诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合→⑤用特定的培养基筛选杂交瘤细胞→④对杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测→③将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内→②从小鼠腹水获取单克隆抗体。综上所述，C正确，ABD错误。
故选C。
8. B
【分析】1、泡菜的制作：
①将新鲜蔬菜预先处理成条状或片状；
②泡菜盐水按清水和盐为4：1质量比配制煮沸冷却备用；
③预处理的新鲜蔬菜装至半坛时放入蒜瓣、生姜、香辛料等佐料，并继续装至八成满；
④倒入配制好的盐水，使盐水浸没全部菜料；
⑤盖上泡菜坛盖子，并用水密封发酵，发酵时间受到温度影响。
2、选择性培养基：根据某微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基，具有使混合菌样中的劣势菌变成优势菌的功能，广泛用于菌种筛选等领域。
【详解】A、制作泡菜时，用煮沸过的质量分数为10%的NaCl溶液的作用是调味和抑制杂菌生长的作用，A错误；
B、牛肉膏蛋白胨培养基中，加入高浓度NaCl，高浓度的氯化钠可以抑制多种细菌的生长，但不会影响金黄色葡萄球菌的生长，因此可以将耐盐的细菌筛选出来，B正确；
C、溶解有DNA的NaCl溶液中加入二苯胺试剂后，需沸水浴加热，溶液才会呈现蓝色，C错误；
D、在DNA粗提取时，用2mol/L的NaCl溶液可以溶解DNA，用0.14mol/L的NaCl溶液析出溶液中的DNA，D错误。
故选B。
9. B
【分析】
1、体外受精主要包括：卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精。
2、非人灵长类核移植主要难在三个方面：以猕猴为例：一是猴细胞核不易识别，去核难度大；二是猴的卵母细胞容易提前激活。操作稍一不小心，卵母细胞就可能被激活，然后它就会先开始自主卵裂，体细胞就跟不上了，最后导致这个卵无法发育；三是猴的体细胞克隆胚胎发育差，培养囊胚效率低，优质囊胚比例低。
3、哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植。由于动物胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性相对容易，而动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难，因此，动物体细胞核移植的难度也就明显高于胚胎细胞核移植。
【详解】A、非人灵长类动物的体细胞核移植难度较大，如细胞核不易识别，去核难度大及卵母细胞容易提前激活等，A正确；
B、由于动物胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性相对容易，而动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难，因此，动物体细胞核移植的难度也就明显高于胚胎细胞核移植，B错误；
C、直接从活体动物卵巢中吸取采集的卵母细胞，需要在体外经人工培养至MII中期，C正确；
D、哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植，体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植，D正确。
故选B。
10. D
【分析】
1、胚胎工程指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术，如体外受精、胚胎移植、胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术。经过处理后获得的胚胎，还需移植到雌性动物体内产生后代，以满足人类的各种需求。
2、受精过程为：顶体反应→穿越放射冠→穿越透明带（透明带反应）→卵细胞膜反应（卵黄膜封闭作用）→卵子完成减数第二次分裂并释放第二极体→雌雄原核的形成、核膜消失，雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂开始。
3、胚胎发育过程：
（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加；
（2）桑椹胚：32个细胞左右的胚胎（之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能属全能细胞）；
（3）囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔；
（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。
【详解】A、胚胎工程指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术，包括体外受精、胚胎移植和胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术，A正确；
B、哺乳动物在自然条件下，减数分裂（精子和卵子的发生）、受精作用和早期胚胎的发育规律是胚胎工程的理论基础，B正确；
C、精子与卵子结合前，受精过程若想顺利进行必须满足两个条件：来自父方的精子要进行精子获能；来自母方的卵子要培养至培养至减数第二次分裂中期，C正确；
D、胚胎发育的过程为受精卵→桑椹胚→囊胚→原肠胚→幼体，所以哺乳动物胚胎的早期发育依次经历桑葚胚、囊胚、原肠胚等不同发育阶段，D错误。
故选D。
11. C
【分析】1、单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
2、单克隆抗体的作用：①作为诊断试剂：（最广泛的用途）具有准确、高效、简易、快速的优点。②用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗癌症，可制成“生物精确制导武器”。
【详解】A、单克隆抗体可用作为诊断试剂，在多种疾病的诊断和病原体鉴定中发挥重要作用，A正确；
B、通过应用抗体—药物偶联物可制成“生物精确制导武器”，可实现对肿瘤细胞的选择性杀伤，主要用于治疗癌症，B正确；
C、单克隆抗体可应用于鉴定与诊断，其本身可与抗原结合，也能用于疾病治疗，C错误；
D、利用单克隆抗体的特异性，在临床上用荧光标记的单克隆抗体，可定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病，D正确。
故选C。
12. B
【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
【详解】A、H-Y单克隆抗体是杂交瘤细胞的分泌物，所以H-Y单克隆抗体是由杂交瘤细胞分泌的，A错误；
B、H-Y单克隆抗体具有特异性，H-Y抗原只存在于雄性胚胎中，因此，H-Y单克隆抗体检测阳性的胚胎一定是雄性，而乳腺生物反应器需要雌性个体，因此筛选检测阳性的个体应剔除，B正确；
C、桑葚胚没有内细胞团，可对筛选出的囊胚期的内细胞团进行均等分割，C错误；
D、胚胎移植前要对受体母牛进激素处理，使供受体处于相同的生理状态，不是让受体超数排卵，D错误。
故选B。
13. D
【分析】蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。
【详解】A、蛋白质工程通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，A不符合题意；
BC、蛋白质工程的基本途径是：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列（基因），BC不符合题意；
D、由于有的氨基酸可能由多个密码子编码，因此根据氨基酸序列推测的脱氧核苷酸序列可能不唯一，D符合题意。
故选D。
14.B
【分析】PCR原理：在高温作用下，打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4种游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。
【详解】A、TaqDNA聚合酶能耐高温，可催化DNA子链的合成，A正确；
B、引物会参与到子链中，不会被反复使用，B错误；
C、PCR反应中，需要在一定的添加Mg2+的缓冲液中才能进行，需提供模板DNA、分别与两条模板链结合的引物、4种脱氧核苷酸和耐高温的DNA聚合酶等，C正确；
D、PCR是进行DNA的扩增，为避免外源DNA等的污染，PCR实验中使用的相关器具如微量离心管、枪头、缓冲液和蒸馏水等应提前高压蒸汽灭菌，D正确。故选B。
15. C
【分析】转基因生物的安全性问题:食物安全(滞后效应、过敏源、营养成分改变)、 生物安全(对生物多样性的影响)、 环境安全(对生态系统稳定性的影响)。转基因食品、 产品上都要标注原料来自转基因生物，如“转基因xx、转基因xx加工品(制成品)”等。对于转基因食物潜在隐患要进行开展风险评估、预警跟踪等措施多环节、严谨的安全性评价,保障了现代生物技术的安全性。
【详解】A、相关法规是规范基因科学研究和避免转基因技术滥用的有力武器，A正确；
B、为了保障转基因产品安全性，需要开展风险评估、预警跟踪等措施，所以针对转基因技术，我国已经逐步建立了与国际接轨，并适合我国国情的转基因安全评价体系，B正确；
C、转基因作为一项技术本身是中性的，所以只要有证据表明产品有害，就应该禁止该产品的使用，关于转基因产品安全性的观点，媒体传播需要谨慎，不能盲目放大，传播越广的，其可信程度不一定越高，C错误；
D、转基因技术是一把双刃剑，要理性的看待转基因技术，因此参与转基因产品安全性有关问题的讨论时，要依靠确凿的证据和严谨的逻辑，D正确。
故选C。
16. BD
【分析】参与豆腐发酵的微生物有青霉、酵母、曲霉、毛霉等多种，其中起主要作用的是毛霉。毛霉是一种丝状真菌，常见于土壤、水果、蔬菜、谷物上，具有发达的白色菌丝。毛酶等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。
【详解】A、果酒的制作原理是酵母菌的无氧呼吸产生酒精，酵母菌属于兼性厌氧生物，在有氧条件下大量繁殖，A正确；
B、制作果醋需要醋酸菌，它是一种好氧的微生物，可将葡萄中的糖（或乙醇）分解为乙酸，B错误；
C、多种微生物参与了腐乳的制作，如酵母菌、毛霉、曲霉等，其中起主要作用的是毛霉，C正确；
D、制作泡菜利用的乳酸菌是一种厌氧微生物，可以通过无氧呼吸产生乳酸，D错误。
故选BD。
17. CD
【分析】发酵工程的基本环节：选育菌种：性状优良的菌种可以从自然界中筛选出来，也可以通过诱变育种或基因工程育种获得。发酵罐内发酵：这是发酵工程的中心环节。在发酵过程中，要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度等，以了解发酵进程。还要及时添加必需的营养组分，要严格控制温度、pH和溶解氧等发酵条件。分离、提纯产物：如果是发酵产品是微生物细胞本身，可在发酵结束之后，采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥，即可得到产品。如果产品是代谢物，可根据产物的性质采取恰当的提取、分离和纯化措施来获得产品。
【详解】A、啤酒发酵过程分为主发酵和后发酵两个阶段。酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都是在主发酵阶段完成，因此啤酒的工业化生产过程中，酒精的产生积累主要在主发酵阶段完成，A错误；
B、食品添加剂能改善食品的口味、色泽和品质，可以增加食品的营养，B错误；
C、通过基因工程技术，将乙肝病毒的抗原基因转入酵母菌，再结合发酵工程可生产乙肝疫苗，C正确；
D、利用放线菌产生的井冈霉素防止水稻枯纹病，不会对环境造成污染，是生物防治的有效手段，D正确。
故选CD。
18. ABD
【分析】细胞培养是指在体外模拟体内环境（无菌、适宜温度、酸碱度和一定营养条件等），使之生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能的一种方法。细胞培养也叫细胞克隆技术，在生物学中的正规名词为细胞培养技术。
【详解】A、动物细胞培养应在无毒、无菌的环境下进行，由合成培养基提供各种营养成分，但通常还需要添加血清、血浆等天然成分，A错误；
B、抗生素具有抑菌或杀菌作用，但对病毒无用，培养基内加入适量的抗生素不能形成无病毒的培养环境，B错误；
C、消化道上皮细胞是单层柱状上皮细胞，培养消化道上皮细胞更易观察判断细胞是否具有接触抑制现象，C正确；
D、细胞培养时会出现贴壁生长和接触抑制现象，如果要传代培养，就应该用胰蛋白酶处理分散成单个细胞后分瓶培养，相同次数分瓶培养所获得的两者细胞数目不一定相同，D错误。
故选ABD。
19. A
【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定。
【详解】A、DNA连接酶根据功能可以分为E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶，E.coliDNA连接酶只能用来连接具有互补黏性末端的DNA片段，A正确；
B、质粒主要存在于细菌、酵母菌等生物体内，酵母菌属于真核生物，B错误；
C、构建好的基因表达载体中必须在目的基因的上游包含启动子序列，便于启动基因的转录，C错误；
D、用于PCR的引物是一小段能与模板链特异性结合的单链DNA片段或单链RNA，D错误。
故选A。
20. A
【分析】根据题意和图示分析可知：图中过程①表示通过反转录法合成相应的DNA；过程②表示利用PCR技术对目的基因进行扩增；过程③表示将目的基因导入受体细胞；过程④表示通过筛选获得工程菌。
【详解】A、过程①表示通过反转录法合成目的基因，该过程需要逆转录酶，A正确；
B、过程②表示利用PCR技术对目的基因进行扩增，该过程中解旋是通过高温解链实现的，不需要解旋酶，B错误；
C、感受态细胞可用的CaCl2溶液制备，C错误；
D、过程④筛选获得工程菌可用DNA分子杂交的方法鉴定，但该基因工程中受体细胞为大肠杆菌，无染色体，D错误。
故选A。
解答此题要求考生能够识记基因工程的操作步骤，通过操作步骤确定图中各标号表示的生理过程；识记PCR技术中不需要解旋酶；识记目的基因导入微生物的方法等，并能结合选项分析作答。
21.
（1）标记基因
（2） ①. T4 ②. 磷酸二酯键 ③. 启动子
（3） ①. 耐高温的DNA聚合酶 ②. 引物
【分析】基因工程的核心步骤：
(1)目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
(3)将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样，将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法:将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法:将目的基因导入微生物细胞的方法是钙离子处理法。
【小问1详解】
标记基因是一种已知功能或已知序列的基因，能够起着特异性标记的作用。在基因工程意义上来说，它是重组DNA载体的重要标记，通常用来检验转化成功与否；在基因定位意义上来说，它是对目的基因进行标志的工具，通常用来检测目的基因在细胞中的定位，重组质粒上的抗生素抗性基因就可以作为标记基因。
【小问2详解】
T4 DNA连接酶，可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5'-P末端和3'-OH末端之间以磷酸二酯键结合，该催化反应需ATP作为辅助因子。同时T4 DNA连接酶可以修补双链DNA、双链RNA或DNA/RNA杂合物上的单链缺刻。启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，是基因表达载体的开始。
【小问3详解】
PCR技术需要用到耐高温的DNA聚合酶，模板母链，原料以及引物。
22.
（1） ①. 动物细胞培养 ②. 5%CO2、95%空气
（2） ①. 胰蛋白酶（或胶原蛋白酶） ②. 血清 ③. 清除代谢废物；防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害
（3） ①. （特定的）选择培养基 ②. 专一抗体 ③. 杂交瘤细胞 ④. 能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合、并且可以大量制备
【分析】动物细胞培养的条件营养：将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配置而成的培养基，称为合成培养基。（通常需要加入血清等一些天然成分）无菌、无毒的环境：添加抗生素温度、pH和渗透压：36.5±0.5℃ 7.2～7.4气体环境：O2是细胞代谢所需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。置于含有95%空气和5%CO2混合气体的CO2培养箱进行培养。
【小问1详解】
动物细胞工程常用的技术包括动物细胞培养、动物细胞融合和动物细胞核移植等，其中动物细胞培养是动物细胞工程的基础。Vero细胞的培养应置于含有95%空气和5%CO2混合气体的CO2培养箱进行培养。
【小问2详解】
Vero细胞的传代培养过程中需要使用胰蛋白酶、胶原蛋白酶使细胞分散。将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养基，称为合成培养基。由于人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚，因此在使用合成培养基时，通常需要加入血清等一些天然成分。为了清除代谢废物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害，在培养过程中，应定期更换培养液。
【小问3详解】
将已对新冠病毒发生免疫的B淋巴细胞和Vero细胞系获得杂交细胞，再经过选择培养基筛选、筛选出杂交瘤细胞，接着对选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养和专一抗体检测，获得产生特定抗体的杂交瘤细胞，用以生产单克隆抗体。单克隆抗体能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合、并且可以大量制备。
23.
（1） ①. （次级）卵母细胞 ②. 促性腺激素
（2）诱导精子获能 （3） ①. 细胞代谢 ②. 维持培养液的pH
（4） ①. 内细胞团 ②. 桑葚胚或囊胚 ③. 将内细胞团均等分割
（5）受体子宫对外来胚胎不发生排斥反应
（6）同期发情
【分析】分析题图：图示为经过体外受精和胚胎分割移植培育优质奶牛的过程，其中A是卵母细胞，可与获能的精子受精形成受精卵；①是囊胚中的内细胞团；②是囊胚腔。
【小问1详解】
据图可知，A可与精子结合为受精卵，故A为减数第二次分裂中期的卵母细胞，即次级卵母细胞；为了一次获得多个细胞A，需向供体内注射促性腺激素，然后培养到MII期才能受精。
【小问2详解】
精子获能后才具备受精能力，将优良公牛的精子收集后放在一定浓度的肝素溶液中进行培养，其目的是诱导精子获能。
【小问3详解】
动物细胞培养时，提供氧气的目的是保证细胞正常代谢；提供二氧化碳气体的目的是维持培养液的pH。
【小问4详解】
①指的是内细胞团；进行胚胎分割时，应选择发育到桑葚胚或囊胚时期的胚胎进行操作；对囊胚进行胚胎分割时，应注意将内细胞团均等分割。
【小问5详解】
因为胚胎与母体只是建立生理和组织上的联系，移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是受体子宫对外来胚胎不发生排斥反应。
【小问6详解】
为了保证供、受体的生理状态相同，可用相关激素进行同期发情处理，更有利于移植胚胎的存活。
24.
（1）纤维素酶和果胶
（2） ①. 聚乙二醇##PEG ②. 原生质体
（3） ①. 杂种细胞愈伤组织幼苗 ②. 植物组织培养技术、植物细胞具有全能性 ③. 无菌操作、离体状态、一定的营养物质和激素、温度与pH适宜等
（4） ①. 打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培育植物新品种等 ②. 染色体（数目）变异
（5） ①. 快 ②. 保持植物原有的遗传特性
【分析】分析题图：①过程为去除细胞壁的过程，②为原生质体的融合，③为杂种细胞再生出细胞壁的过程，④为植物组织培养的脱分化过程，⑤为再分化过程。
【小问1详解】
①是去除细胞壁的过程，由于植物细胞壁的成分主要是纤维素和果胶，故该过程需要用纤维素酶和果胶酶处理，以获得植物原生质体。
【小问2详解】
②为原生质体的融合，该过程需要用到促融剂聚乙二醇（PEG），目的是诱导马铃薯的原生质体进行融合。
【小问3详解】
④和⑤属于植物组织培养过程中的脱分化和再分化过程，该过程的实验流程是：杂种细胞 愈伤组织 幼苗；植物细胞有形成再生植株的可能性，实现这种可能性需要运用的技术是植物组织培养技术，该技术所依据的原理是植物细胞的全能性；植物组织培养过程中需要满足的条件有：无菌操作、离体状态、一定的营养物质和激素、温度与pH适宜等。
【小问4详解】
植物体细胞杂交可以克服远缘杂交不亲和的障碍，该研究在打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培育植物新品种等取得了巨大突破；植物体细胞杂交实现了不同物种的融合，育种的原理是染色体变异。
【小问5详解】
与常规的种子繁殖方法相比，微型繁殖技术不受季节气候等环境因素的限制，繁殖速度快，且因为其是无性繁殖，能够保持植物原有的遗传特性。
25.
（1） ①. A ②. 酚红 ③. 异养型
（2）防止培养皿盖上冷凝的水滴入培养基造成污染，避免培养基水分过快蒸发
（3） ①. 54 ②. 稀释涂布平板法 ③. 105 ④. 1.32×108 ⑤. 低 ⑥. 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落
（4） ①. 将聚集的菌种逐步稀释分散以便获得（不连续）单个菌落 ②. 2.25×108
【分析】接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法，接种的目的是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，并在培养基表面形成单个细菌繁殖而成的子细胞群体—菌落。
【小问1详解】
如果要分离土壤中能分解尿素的细菌，应以尿素为唯一的氮源，应选择上述A配方的培养基，尿素分解菌能够将尿素分解成氨，PH升高，可以用酚红指示剂进行鉴定出该种细菌能否分解尿素。B培养基含有纤维素粉，所培养微生物的同化作用类型是异养型。
【小问2详解】
在制备固体培养基的倒平板操作时，平板冷凝后，应将平板倒置，目的是防止培养皿盖上冷凝的水滴入培养基造成污染，避免培养基水分过快蒸发。
【小问3详解】
若取土样6g，应加入54ml的无菌水配制成稀释10倍土壤溶液，样品的稀释程度直接影响平板上生长的菌落的数目，选用一定稀释范围的样品进行培养，将103-107倍的稀释液分别吸取0.2mL加入到固体培养基上，用稀释涂布平板法将菌液用涂布器涂布到固体培养基上。105倍的稀释菌落数在30～300之间，比较合适。由此计算出每克土壤中的菌落数为：（277+261+254）÷3÷0.2×105=1.32×108。这种方法测定的菌落数往往比活菌的实际数目低，因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。
【小问4详解】
平板划线法分离土壤中的尿素分解菌时第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线，这样做的目的是将聚集的菌种逐步稀释分散以便获得（不连续）单个菌落。原菌液的菌群密度为(45÷5)/(0.1÷25)×102×103=2.25×108个/mL。
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