2023北京高考总复习生物 专题二十七 细胞工程(试题word)
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专题二十七 细胞工程高频考点考点一 植物细胞工程该考点训练内容为植物组织培养和植物体细胞杂交技术的原理和过程,分析植物细胞工程应用过程等。基础1.(2021北京东城二模,13)将兰花细胞培养成幼苗的过程中,下列不属于必需条件的是( )A.外植体处于未分化状态B.细胞处于离体状态C.细胞具有完整的细胞核D.营养物质和植物激素答案 A 2.(2020北京海淀一模,14)下列关于植物组织培养的叙述中,不正确的是( )A.培养基中添加蔗糖可为植物细胞提供营养、调节渗透压B.离体的植物幼叶、芽尖、花药等可作为组织培养的外植体C.只有生长素比例明显高于细胞分裂素时才能获得胚状体D.脱分化阶段不需要光照,再分化阶段需要弱光照射答案 C 3.(2019江苏,20,2分)为探究矮牵牛原生质体的培养条件和植株再生能力,某研究小组的实验过程如图。下列叙述正确的是( )A.过程①获得的原生质体需悬浮在30%蔗糖溶液中B.过程②需提高生长素的比例以促进芽的分化C.过程③需用秋水仙素处理诱导细胞壁再生D.原生质体虽无细胞壁但仍保持细胞的全能性答案 D 重难4.(2022北京丰台一模,12)为研究不同光质对草莓无菌苗叶片形成愈伤组织的影响,进行相关实验,结果如下表所示。以下分析正确的是( )处理最早出愈伤组织时间/天诱导率/%愈伤组织特征愈伤组织再分化趋势白光750.7浅绿色、紧实分化芽较多,长势较快红光561.0黄绿色、疏松分化早,幼芽徒长蓝光1239.3黄绿色、疏松分化晚,分化芽少,长势健壮红光∶蓝光=2∶1757.3浅绿色、紧实分化芽较多,长势快 A.形成愈伤组织过程中细胞结构和功能未发生变化B.愈伤组织培养基中含水、无机盐、蔗糖等营养物质C.蓝光处理促进愈伤组织的光合作用,进而提高诱导率D.与红光∶蓝光=2∶1处理相比,红光处理能更有效地提高愈伤组织再分化的效果答案 B 5.(2021北京海淀二模,13)非洲狼尾草光合效率高,为培育高光效的水稻新品种,研究人员将粳稻与非洲狼尾草的原生质体进行体细胞杂交,经植物组织培养获得几株杂种植株。在不同光照强度下测量了亲本及其中2株杂种植株的光合速率,结果如图所示。下列相关分析不正确的是( )A.制备的原生质体应高温灭菌后再进行细胞融合B.体细胞融合过程发生了染色体数目变异C.所测的两株杂种植株的光合速率均高于亲本粳稻D.所得其他杂种植株光合速率不一定都介于两亲本之间答案 A 综合6.(2022北京朝阳一模,12)花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病,野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。为培育抗黑腐病的杂种植株,研究者设计了如下流程。下列相关叙述正确的是( )A.过程①需要使用胰蛋白酶或者胶原蛋白酶来处理两种细胞B.过程②后,显微镜下观察到有叶绿体的细胞即为融合细胞C.过程③的培养基中需加入植物激素来诱导脱分化和再分化D.可借助PCR技术、黑腐病菌接种实验对杂种植株进行鉴定答案 D 7.(2022北京房山一模,7)玉米(2n=20)和水稻(2m=24)均为二倍体植物,某实验小组拟用体细胞杂交技术培育富含β-胡萝卜素的“黄金大米”植株,过程设计如图所示。下列说法错误的是( )A.过程①需使用纤维素酶和果胶酶处理细胞B.过程②中常用PEG诱导原生质体融合C.“黄金大米”植株染色体数目为22D.该技术体现了植物细胞具有全能性答案 C 8.(2019全国Ⅲ,38,15分)培养胡萝卜根组织可获得试管苗,获得试管苗的过程如图所示。回答下列问题。(1)利用胡萝卜根段进行组织培养可以形成试管苗。用分化的植物细胞可以培养成完整的植株,这是因为植物细胞具有 。 (2)步骤③切取的组织块中要带有形成层,原因是 。 (3)从步骤⑤到步骤⑥需要更换新的培养基,其原因是 。在新的培养基上愈伤组织通过细胞的 过程,最终可形成试管苗。 (4)步骤⑥要进行照光培养,其作用是 。 (5)经组织培养得到的植株,一般可保持原品种的 ,这种繁殖方式属于 繁殖。 答案 (1)全能性(或形成完整植株所需的全部基因) (2)形成层容易诱导形成愈伤组织 (3)诱导愈伤组织形成和诱导愈伤组织分化形成试管苗所需的生长素和细胞分裂素的比例不同 分化(或再分化) (4)诱导叶绿素的形成,使试管苗能够进行光合作用 (5)遗传特性 无性考点二 动物细胞工程该考点基础层级的训练内容多为动物细胞培养的条件和过程,重难及综合层级多结合具体情境考查动物细胞培养、融合及单克隆抗体的制备过程和应用等。 基础1.(2022湖北,7,2分)某兴趣小组开展小鼠原代神经元培养的研究,结果发现其培养的原代神经元生长缓慢,其原因不可能的是( )A.实验材料取自小鼠胚胎的脑组织 B.为了防止污染将培养瓶瓶口密封C.血清经过高温处理后加入培养基 D.所使用的培养基呈弱酸性答案 A 2.(2021北京石景山一模,14)为检测某药物X的抗癌活性,在细胞培养板的每个孔中加入相同数量的肝癌细胞,使其贴壁生长,实验组加入溶于二甲基亚矾的药物X,培养72小时后进行计数,比较实验组和对照组每个孔中细胞数目。下列有关叙述错误的是( )A.细胞培养液中通常需要加入血清等天然成分B.可用胰蛋白酶处理使肝癌细胞脱落下来并进行计数C.对照组中应加入等体积的无菌蒸馏水,其他条件一致D.若实验组细胞数远低于对照组,可初步判断此药物有抗癌效果答案 C 3.(2020山东,14,2分)经遗传改造的小鼠胚胎干细胞注入囊胚,通过胚胎工程的相关技术可以获得具有不同遗传特性的实验小鼠。下列说法错误的是( )A.用促性腺激素处理雌鼠可以获得更多的卵子B.体外受精前要对小鼠的精子进行获能处理C.胚胎移植前要检查胚胎质量并在囊胚或原肠胚阶段移植D.遗传改造的小鼠胚胎干细胞可以通过转基因等技术获得答案 C 重难4.(2022北京朝阳一模,14)哺乳动物的克隆和人工受精动物的培育均需要通过胚胎移植技术来实现,相关表述正确的是( )A.克隆动物与人工受精动物培育过程都涉及超数排卵B.核移植重组细胞或受精卵需移植到受体的子宫内C.培育克隆动物时,需将卵母细胞注入去核的体细胞D.胚胎移植受体需要与人工受精动物的基因型一致答案 A 5.(2021北京西城二模,13)微载体动物细胞培养是以悬浮在培养液中的微珠作为细胞贴附的载体,在轻度搅拌下进行动物细胞培养。下列相关叙述错误的是( )A.轻度搅拌有利于细胞的氧气供应B.培养液中需添加糖、氨基酸等营养物质C.该技术能提高单位体积培养液的细胞产率D.该技术不能应用于病毒疫苗的生产过程中答案 D 6.(2021北京海淀二模,15)猪瘟病毒(CSFV)蛋白质外壳上的E2蛋白对于病毒入侵细胞至关重要。研究人员利用E2蛋白来制备抗CSFV的单克隆抗体,过程如图所示。下列叙述不正确的是( )A.细胞①可从注射E2蛋白的小鼠脾脏中获得B.过程②可使用PEG或灭活的病毒C.细胞③均为既能无限增殖又能产生特异性抗体的细胞D.此过程生产的单克隆抗体可用于CSFV的检测答案 C 7.(2022湖北,15,2分)纳米氧化亚铜是一种纳米材料。为了探究纳米氧化亚铜对贴壁生长细胞活性的影响,研究者在培养基中添加一定量的纳米氧化亚铜,8小时后观察到细胞萎缩,体积变小,细胞核变大,细胞膜内侧出现纳米氧化亚铜富集现象,培养瓶中大量贴壁细胞脱落,出现细胞悬浮。根据该实验现象,能得出的正确结论是( )A.纳米氧化亚铜改变了细胞的贴壁生长习性B.纳米氧化亚铜对该细胞生长有抑制作用C.纳米氧化亚铜能通过自由扩散进入细胞D.纳米氧化亚铜不影响细胞的新陈代谢答案 A 综合8.(2021北京门头沟一模,14)酿酒酵母产酒精能力强,但没有合成淀粉酶的能力;糖化酵母能合成淀粉酶,但酒精发酵能力弱。科研人员通过两种途径改良酵母菌种,达到以淀粉为底物高效生产酒精的目的。下列叙述正确的是( )A.途径Ⅰ需用胰蛋白酶处理酵母菌,再利用PEG诱导融合B.途径Ⅱ需要以淀粉酶基因作为目的基因构建表达载体C.途径Ⅰ和途径Ⅱ最终获得的目的酵母菌染色体数目相同D.以淀粉转化为还原糖的效率作为最终鉴定目的菌的指标答案 B 9.(2022海南,20,13分)以我国科学家为主的科研团队将OSNL(即4个基因Oct4/Sox2/Nanog/Lin28A的缩写)导入黑羽鸡胚成纤维细胞(CEFs),诱导其重编程为诱导多能干细胞(iPS),再诱导iPS分化为诱导原始生殖细胞(iPGCs),然后将iPGCs注射到孵化2.5天的白羽鸡胚血管中,最终获得具有黑羽鸡遗传特性的后代,实验流程如图。回答下列问题。(1)CEFs是从孵化9天的黑羽鸡胚中分离获得的,为了获得单细胞悬液,鸡胚组织剪碎后需用 处理。动物细胞培养通常需要在合成培养基中添加 等天然成分,以满足细胞对某些细胞因子的需求。 (2)体外获取OSNL的方法有 (答出1种即可)。若要在CEFs中表达外源基因的蛋白,需构建基因表达载体,载体中除含有目的基因和标记基因外,还须有启动子和 等。启动子是 识别和结合的部位,有了它才能驱动 。 (3)iPS细胞和iPGCs细胞的形态、结构和功能不同的根本原因是 。 (4)诱导iPS细胞的技术与体细胞核移植技术的主要区别是 。 (5)该实验流程中用到的生物技术有 (答出2点即可)。 答案 (1)胰蛋白酶、胶原蛋白酶等 血清 (2)基因文库法、PCR技术、人工合成法(任答1种) 终止子 RNA聚合酶 目的基因转录出mRNA,最终表达出所需要的蛋白质 (3)基因的选择性表达 (4)诱导iPS细胞的技术是将已分化的细胞诱导为类似胚胎干细胞的一种细胞(iPS),再诱导iPS分化为诱导原始生殖细胞(iPGCs)的技术;体细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中,使这个重新组合的细胞发育成新胚胎,继而发育成动物个体的技术 (5)基因工程、动物细胞培养考点三 胚胎工程该考点基础层级训练内容为体外受精、胚胎移植、胚胎分割的操作步骤等,重难及综合层级主要考查胚胎工程的主要技术及原理和在生产实践中的应用等。基础1.(2022北京丰台一模,13)下列生物工程技术中,不需要用到胚胎移植技术的是( )A.利用乳腺生物反应器生产药物蛋白B.利用本地黄牛克隆繁殖优质高产奶牛C.利用试管婴儿技术辅助有生育困难的夫妇D.利用细胞培养技术获得人造皮肤移植给烧伤患者答案 D 2.(2018江苏,10,2分)下列关于采用胚胎工程技术实现某良种肉用牛快速繁殖的叙述,正确的是( )A.采取激素注射等方法对良种母牛作超数排卵处理B.体外培养发育到原肠胚期的胚胎即可进行移植C.使用免疫抑制剂以避免代孕牛对植入胚胎的排斥反应D.利用胚胎分割技术,同卵多胎较同卵双胎成功率更高答案 A 重难3.(2021北京顺义二模,14)我国科研人员利用大鼠、小鼠两个远亲物种创造出世界首例异种杂合二倍体胚胎干细胞(AdESCs),过程如图所示。该细胞可分化成各种杂种体细胞,为研究不同物种性状差异的分子机制提供了模型。相关叙述不正确的是( )A.单倍体囊胚1最可能由小鼠的卵细胞经体外诱导培养获得B.体外培养AdESCs需向培养液中添加动物血清等天然成分C.该项技术突破生殖隔离,获得了哺乳动物远亲物种的杂种细胞D.AdESCs的染色体组数与大鼠—小鼠体细胞融合的杂种细胞相同答案 D 综合4.(2021北京海淀一模,15)我国科学家利用基因编辑技术,获得一只生物节律核心基因BMAL1敲除的猕猴。取其成纤维细胞与去核的卵母细胞融合,将发育形成的早期胚胎植入代孕雌猴,获得5只克隆猴,用于研究节律机制。以下叙述不正确的是 ( )A.克隆猴基因组成差异小,作为实验动物便于研究B.可用灭活的病毒诱导去核卵母细胞和成纤维细胞融合C.受精卵经基因编辑后形成的胚胎可发育为克隆猴D.克隆猴的获得体现了动物体细胞的细胞核具有全能性答案 C 5.(2021北京丰台一模,16)A型流感病毒会引起肺的炎性损伤,为研究中药二氢丹参酮(DHTI)对上述损伤的治疗作用,科研人员进行了如下实验:(1)检测DHTI的细胞毒性:科研人员将犬肾细胞置于含水、无机盐、葡萄糖、氨基酸、 的细胞培养液,培养在37 ℃、含5% CO2的培养箱中。将DHTI药物用DMSO溶解,按预定的浓度梯度依次分组,加入培养的细胞中处理24 h,检测结果如图所示,DHTI在浓度为 时无细胞毒性。 (2)将培养的细胞依次分为正常组、接种流感病毒组和DHTI治疗组,检测方法为提取各组总RNA,逆转录为 ,设计特异性 ,用PCR的方法检测三组流感病毒基因M与NP的表达量及几种细胞炎性因子的表达量。若DHTI有疗效,则实验结果应为 。 (3)科研人员建立小鼠体内流感病毒感染模型,测定肺损伤程度,结果显示DHTI对流感病毒感染小鼠的肺损伤有一定治疗作用,但效果不如预期。为达到对肺损伤更好的治疗作用,科研人员制备了抗PA-X蛋白(A型流感病毒复制需要的一种蛋白)的单克隆抗体,然后展开DHTI与PA-X单抗联合应用研究:①制备PA-X单抗时,可用 免疫的小鼠的B淋巴细胞与 融合,继而筛选出相应的杂交瘤细胞,大量培养获得相应抗体。 ②DHTI与PA-X单抗联合应用治疗肺损伤,实验结果说明DHTI与PA-X单抗联合应用比各自单独使用,能更好地治疗流感病毒引起的肺损伤。选出实验的分组处理 。 a.正常鼠 b.模型鼠c.正常鼠+DHTI d.模型鼠+DHTIe.正常鼠+PA-X单抗 f.模型鼠+PA-X单抗g.正常鼠+DHTI与PA-X单抗联合h.模型鼠+DHTI与PA-X单抗联合答案 (1)血清 10 μM (2)cDNA 引物 流感病毒组(流感病毒基因M与NP的表达量及几种细胞炎性因子的表达量)大于DHTI治疗组,大于正常组 (3)①PA-X蛋白 骨髓瘤细胞 ②abdfh6.(2022全国甲,38,15分)某牧场引进一只产肉性能优异的良种公羊,为了在短时间内获得具有该公羊优良性状的大量后代,该牧场利用胚胎工程技术进行了相关操作。回答下列问题。(1)为了实现体外受精需要采集良种公羊的精液,精液保存的方法是 。在体外受精前要对精子进行获能处理,其原因是 ;精子体外获能可采用化学诱导法,诱导精子获能的药物是 (答出1点即可)。利用该公羊的精子进行体外受精需要发育到一定时期的卵母细胞,因为卵母细胞达到 时才具备与精子受精的能力。 (2)体外受精获得的受精卵发育成囊胚需要在特定的培养液中进行,该培养液的成分除无机盐、激素、血清外,还含的营养成分有 (答出3点即可)等。将培养好的良种囊胚保存备用。 (3)请以保存的囊胚和相应数量的非繁殖期受体母羊为材料进行操作,以获得具有该公羊优良性状的后代。主要的操作步骤是 。 答案 (1)低温冷冻保存(-196 ℃液氮中保存) 精子不能直接与卵子受精,必须经获能处理后才能获得受精能力 肝素、Ca2+载体 MⅡ期 (2)有机盐、维生素、氨基酸、核苷酸 (3)对非繁殖期受体母羊注射雌激素使其发情;取保存的囊胚,用分割针处理获得滋养层细胞,对其进行DNA分析和性别鉴定,获得状态良好的雄性囊胚;将筛选得到的胚胎移植入受体母羊子宫内易混易错易混1.原生质体与原生质层(2021北京朝阳期中,14)植物体细胞杂交需要分离出有活力的原生质体,研究者通过实验研究了酶解时间对原生质体产量和活力的影响,结果如下。相关叙述错误的是( )注:原生质体活力=(有活力的原生质体数/原生质体总数)×100%。A.利用纤维素酶和果胶酶去壁后可分离得到原生质体B.随酶解时间延长,两种原生质体产量均先增加后减少C.适宜两植物细胞的最佳酶解时间分别为10 h和12 hD.原生质体活力可通过质壁分离与复原实验进行验证答案 D 易错2.植物激素在植物组织培养中的作用(2021北京朝阳二模,14)中华猕猴桃原产我国长江中下游,抗寒能力弱;狗枣猕猴桃原产俄罗斯,耐低温,但果实小。将两种猕猴桃原生质体进行融合,得到果大且抗寒的杂种植株。以下分析错误的是( )A.此项技术体现了植物细胞具有全能性B.使用的植物激素浓度和比例应保持不变C.可用PEG促进两个亲本的原生质体融合D.杂种植株和两个亲本可能存在生殖隔离答案 B 疑难3.制备单克隆抗体过程中的2次筛选(2021北京东城一模,13)CD47是一种跨膜糖蛋白。它可与巨噬细胞表面的信号调节蛋白结合,从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。肺癌、结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1.6~5倍,导致巨噬细胞对肿瘤细胞的清除效果减弱。为证明抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用,科学家按照如下流程进行了实验。相关叙述不正确的是( )A.多次进行步骤①的目的是获得更多分泌抗CD47抗体的浆细胞B.步骤②中可以利用聚乙二醇或灭活的病毒诱导完成细胞融合C.经筛选可得到既能产生抗CD47抗体又能无限增殖的杂交瘤细胞D.对照组应在巨噬细胞+正常细胞共培养体系中加入单克隆抗体答案 D 情境应用简单情境 1.植物体细胞杂交的应用(2022北京东城一模,14)青枯病是一种严重危害马铃薯的病害,茄子对青枯病具有一定抗病性。尝试通过植物体细胞杂交技术培育抗青枯病的马铃薯新品种,在获得的90个杂种植株中,有6个具有明显的青枯病抗性。下列相关叙述错误的是( )A.通过灭活病毒诱导马铃薯细胞与茄子细胞融合,进一步筛选出杂种细胞B.杂种细胞中来自茄子的染色体随机丢失可以解释并非所有杂种植株均抗病C.利用PCR技术可以检测杂种植株中是否具有来自茄子的青枯病抗性基因D.茄子和马铃薯之间存在生殖隔离,不宜采用杂交育种培育抗病马铃薯答案 A 2.世界首例体细胞克隆猴——“中中”和“华华”诞生(2022北京西城一模,13)如图是中国科学家首次用体细胞核移植技术克隆出两只猕猴的简单流程,相关叙述错误的是( )A.培养供体体细胞的培养液中常需添加动物血清B.卵母细胞去核和体细胞注射常在显微镜下操作C.克隆猴的诞生利用了体外受精和胚胎移植技术D.克隆后代的遗传物质与供体体细胞不完全一致答案 C 3.动物体细胞核移植——克隆羊多莉(2022北京海淀二模,13)科研人员用电融合的方法诱导母羊的乳腺上皮细胞与另一只羊的去核卵细胞融合,然后将重构胚移植到代孕母羊的体内,最终培育出了克隆羊多莉。下表是科学家获得的部分实验数据,下列相关叙述,不合理的是( )实验组别序号①②核供体细胞6岁母羊的乳腺上皮细胞发育到第9天的早期胚胎细胞融合成功细胞数277385早期发育成功胚胎数2990移植后成功怀孕母羊数/代孕母羊数1/1314/27出生并成活羔羊数1(多莉)4A.两组羔羊性状主要与核供体母羊相同B.②组比①组成功率高,可能因为胚胎细胞分化程度低C.本实验涉及细胞培养、核移植和胚胎分割技术D.克隆技术应用于人类,可能存在一定的伦理风险答案 C 复杂情境4.自体移植(2022北京海淀二模,19)自体移植离我们还远吗?2022年3月,我国科学家通过两个关键因子,诱导DNA 去甲基化,将人类多能性干细胞转化为8细胞阶段全能性胚胎样细胞(简称8CL细胞)。这是目前全球通过无转基因、快速和可控的方法,获得的体外培养的“最年轻”的人类细胞。相比于诱导多能干细胞(简称iPS细胞),这些细胞不仅能分化成胎盘组织,还有潜力发育成更成熟的器官。该研究成果,让我们相信自体移植离我们不再遥远。人体许多疾病或意外伤害,都是由组织或器官受到损伤而引起的。器官移植是治疗此类疾病的有效方法之一,但器官移植患者需服用药物降低自身免疫系统的功能,这会增加被病原体感染的概率,甚至出现恶性肿瘤的风险。随着干细胞技术的发展,科研人员探索利用自体器官移植解决上述问题。胚胎干细胞(简称ES细胞)存在于早期胚胎中,具有分化形成机体的所有组织、器官甚至个体的潜能。由于ES细胞的来源有限,限制了它在医学上的应用。2006年,科学家利用病毒将原癌基因(c-Myc)、抑癌基因(KIf4)、Sox2和Oct4等转入高度分化的小鼠成纤维细胞中,获得iPS细胞。在探索肌萎缩侧索硬化(ALS,俗称“渐冻症”)的治疗中,科研人员利用iPS细胞诱导分化成异常的运动神经元建立ALS疾病模型,用于进行大规模药物筛选及药效机制研究。在1型糖尿病的治疗中,iPS细胞定向分化为胰岛B细胞,将其输入患者体内,替代被破坏的胰岛B细胞,显著改善了患者的血糖控制。从ES细胞到iPS细胞,再到8CL细胞的技术突破,都为早期胚胎发育的基础研究提供了一种新的体外研究系统,有助于我们了解早期胚胎发育和疾病发生之间的关系,以及研究和治疗出生缺陷和各种发育疾病,也使个体化器官再生最终有可能成为现实。(1)ES细胞和8CL细胞具有 性,其分化过程从分子水平上看是 的结果。 (2)利用成纤维细胞获得iPS细胞的过程中,转入c-Myc、KIf4、Sox2和Oct4等的作用是 。 (3)结合文中信息,下列可以应用iPS细胞实现的有 。 A.利用iPS细胞研究完整的哺乳动物胚胎发育过程B.利用iPS细胞分化获得神经元,用于治疗阿尔茨海默病C.利用iPS细胞诱导形成疾病模型细胞,对药物的安全性和有效性进行检测D.诱导人的 iPS 细胞形成囊胚并植入子宫,使其进一步发育成新个体(4)与异体器官移植相比,自体器官移植的优势是 。 (5)相较于ES细胞和iPS细胞,我国科学家研究获得的8CL细胞的优势: 。 答案 (1)全能 基因选择性表达 (2)诱导已分化细胞转变为未分化细胞 (3)BC (4)可避免免疫排斥 (5)8CL细胞比ES细胞和iPS细胞的全能性更高/8CL细胞比ES细胞和iPS细胞“更年轻”/8CL细胞来源更多,可以规避伦理问题
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