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    2024届高考生物一轮复习第10单元第36课微生物的培养技术及应用课件

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    这是一份2024届高考生物一轮复习第10单元第36课微生物的培养技术及应用课件,共60页。PPT课件主要包含了营养物质,生长繁殖,固体培养基,鉴别培养基,无机盐,单一个体,纯培养物,配制培养基,平板划线,稀释涂布平板等内容,欢迎下载使用。

    1.通过分析培养基各成分在微生物培养中的作用,得出可以通过调整培养基的配方,有目的地培养某种微生物的结论。(科学思维)2.通过分析选择培养基的原理,理解适者生存的含义。(生命观念)3.通过微生物的相关实验,学会培养、分离微生物以及微生物计数的实验设计。(科学探究)
    层级一构建必备知识 培养关键能力
    考点一 微生物的基本培养技术
    考点二 微生物的选择培养和计数
    1.培养基(1)概念:人们按照微生物对________的不同需求,配制出供其________的营养基质。(2)种类①按物理状态可分为液体培养基和__________。②按功能可分为选择培养基和__________。(3)成分:各种培养基一般都含有水、____、氮源和______,此外还要满足微生物生长对____、特殊营养物质以及____的需求。
    2.无菌技术(1)含义:在培养微生物的操作中,所有防止杂菌污染的方法。(2)常用方法
    3.微生物的纯培养(1)概念:由________繁殖所获得的微生物群体是纯培养物,获得________的过程就是纯培养。(2)过程:包括__________、灭菌、接种、____和培养等步骤。(3)常用接种方法:________法和____________法。
    (4)实例——酵母菌的纯培养
    1.培养基只能用以培养、分离、鉴定、保存微生物,不能用以积累其代谢物。( )2.由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物。( )3.经高压蒸汽灭菌后的培养基,要冷却至50 ℃左右时,才能在酒精灯火焰附近倒平板。( )4.平板划线时要注意将最后一次的划线与第一次的划线相连。( )
    【教材细节命题】(选择性必修3 P12~13旁栏思考)(1)在未接种的培养基表面是否有菌落生长?____。如果有,说明了________________。(2)在接种酵母菌的培养基上,如果你观察到了不同形态的菌落,你能分析出可能是由什么引起的吗?______________________________________________________________________________。
    如果观察到了不同形态的菌落,可能是接种的菌种不纯或者无菌操作不规范等引起的
    1.常见物品的消毒或灭菌方法(1)消毒方法及适用对象(2)灭菌方法及适用对象
    2.平板划线操作的注意事项(1)灼烧接种环,待其冷却后才能伸入菌液,以免温度太高杀死菌种。(2)第二次及其以后的划线操作总是从上一次划线末端开始,能使微生物的数目随着划线次数的增加而逐渐减少,最终得到由单个细菌繁殖而来的菌落。(3)划线时最后一区不要与第一区相连。(4)划线时用力大小要适当,防止用力过大将培养基表面划破。
    (5)操作第一步即取菌种之前及每次划线之前都需要对接种环进行火焰灼烧灭菌,划线操作结束时,仍需灼烧接种环,每次灼烧的目的如下表:
    考向1| 培养基的成分与功能的分析1.下列有关培养基的叙述,正确的是(  )A.培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质B.培养基中都只含有碳源、氮源、水和无机盐C.固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基D.微生物在固体培养基表面生长,可形成肉眼可见的单个细菌繁殖而来的菌落
    A 解析:培养基是为微生物的生长繁殖提供碳源、氮源、水和无机盐等营养的基质,A正确;微生物培养基的主要营养物质有碳源、氮源、水和无机盐等,有的还需要生长因子等特殊的营养,固体和半固体培养基需要琼脂,液体培养基不需要琼脂,B错误;液体培养基中加入琼脂可制成固体培养基,C错误;微生物在固体培养基上生长时,可以形成肉眼可见的菌落,但不一定是单个细菌繁殖而来的,D错误。
    2.已知某种细菌以CO2为唯一碳源,下列相关叙述正确的是(  )A.可推测该细菌的代谢类型为自养需氧型B.无机盐是该细菌不可缺少的营养物质C.培养过程中碳源同时充当该细菌的能源物质D.培养该细菌的培养基中不需要添加氮源
    B 解析:该细菌以CO2为唯一碳源,可推测该细菌的代谢类型为自养型,但不能确定是不是需氧型,A错误;微生物生长一般需要水、碳源、氮源和无机盐等营养物质,B正确;CO2不能为微生物提供能量,C错误;氮源是微生物必需的营养物质,培养该细菌的培养基中需添加氮源,D错误。
    考向2| 无菌技术的辨析3.(2021·北京卷)人体皮肤表面存在着多种微生物,某同学拟从中分离出葡萄球菌。下述操作错误的是(  )A.对配制的培养基进行高压蒸汽灭菌B.使用无菌棉拭子从皮肤表面取样C.用取样后的棉拭子在固体培养基上涂布D.观察菌落的形态和颜色等进行初步判断
    C 解析:为避免杂菌污染干扰,需对配制的培养基进行高压蒸汽灭菌,A正确;葡萄球菌需从人体皮肤的微生物中分离,为避免杂菌污染,故需要使用无菌棉拭子从皮肤表面取样,B正确;棉拭子上的微生物需要用平板划线法在培养基上进行接种,C错误;根据微生物在固体平板培养基表面形成的菌落的形状、大小、隆起程度和颜色等特征进行鉴别,D正确。
    4.(2022·湖北卷改编)灭菌、消毒、无菌操作是生物学实验中常见的操作。下列叙述正确的是(  )A.动、植物细胞DNA的提取必须在无菌条件下进行B.微生物、动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染C.为防止蛋白质变性,不能用高压蒸汽灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌D.可用高压蒸汽灭菌法对实验中所使用的微量离心管、细胞培养瓶等进行灭菌
    D 解析:动、植物细胞DNA的提取不需要在无菌条件下进行,A错误;动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染,保证无菌环境,而微生物的培养不能加入抗生素,B错误;一般用高压蒸汽灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌,以防止杂菌污染,C错误;可用高压蒸汽灭菌法对实验中所使用的微量离心管、细胞培养瓶等进行灭菌,以防止杂菌污染,D正确。
    【易错提醒】把握选择无菌技术的原则(1)考虑无菌技术的效果:灭菌的效果比消毒要好。(2)考虑操作对象的承受能力:活体生物材料、操作者的手等只能消毒,而不能灭菌。
    考向3| 微生物的纯化方法及过程的分析5.下图为实验室培养和纯化大肠杆菌过程中的部分操作步骤,下列说法错误的是(  )A.①步骤使用的培养基是已经调节过pH并灭菌的培养基B.①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行C.③到④的过程中,接种环共灼烧了5次D.④步骤操作时,不能将第1次和第5次的划线相连
    C 解析:①步骤表示倒平板,在倒平板之前培养基已经调节过pH并灭过菌,A正确。①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行,防止杂菌污染,B正确。接种环在每次接种前和接种结束后都要通过灼烧来灭菌,所以③到④的过程中5次划线操作前都要灼烧灭菌,接种结束后还需灼烧灭菌1次,防止造成污染,由此可见,③到④的过程中共需灼烧接种环6次,C错误。④步骤操作时,不能将第1区和第5区的划线相连,D正确。
    【易错分析】培养物、纯培养物、纯培养的辨析
    1.微生物的选择培养(1)选择培养基:将允许特定种类的微生物生长,同时__________其他种类微生物生长的培养基。(2)稀释涂布平板法:将菌液进行一系列的梯度稀释后,将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基表面,进行培养。
    ①系列稀释操作系列稀释:移液管需要经过灭菌。操作时,试管口和移液管应离火焰1~2 cm。操作过程如下:
    ③培养:待涂布的菌液被培养基吸收后,将平板____,放入30~37 ℃的__________中培养1~2 d。
    2.微生物的数量测定(1)稀释涂布平板法①计数原理:当样品的____________时,培养基表面生长的一个______,来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的______,就能推测出样品中大约含有多少活菌。②计数标准:为了保证结果准确,一般选择菌落数为________的平板进行计数。
    ③计数方法:通常选用一定稀释范围的样品液进行培养,以保证获得菌落数为_________、适于计数的平板。在__________下,至少应对3个平板进行重复计数,然后求出______。④统计的菌落数往往比活菌的实际数目少,这是因为当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落,因此统计结果一般用______表示。
    (2)显微镜直接计数法①计数原理:利用特定的__________或____________,在显微镜下观察、计数,然后再计算一定体积的样品中微生物的数量。②优点:是一种常用的、________的测定微生物数量的方法。③缺点:统计的结果一般是死菌数和活菌数的总和。
    3.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
    1.利用稀释涂布平板法和平板划线法均可实现细菌的分离和计数。( )2.培养分解尿素的细菌,培养基的pH会增大。( )3.筛选分解尿素的细菌的培养基以尿素为唯一氮源,且为液体培养基。( )4.利用稀释涂布平板法统计菌落数目时,统计的菌落数就是活菌的实际数。( )5.统计菌落数目时为保证结果准确,一般选择菌落数目最多的平板进行统计。( )6.利用显微镜直接计数法统计的细菌数量就是活菌的数量。( )
    【教材细节命题】1.(选择性必修3 P16思考·讨论)(1)如果让你配制一种培养基,将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来,培养基的配方该如何设计?__________________________________________________________。(2)该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点?______________________________________________________________________。
    设计一种选择培养基,用尿素作为唯一氮源,可以将分解尿素的细菌分离出来
    与普通培养基相比,这种培养基只是用尿素作为唯一氮源,培养基的其他营养成分基本相同
    2.(选择性必修3P16思考·讨论)结合对照组,分析培养物中是否有杂菌污染以及选择培养基是否筛选出一些菌落。_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。
    如果没有接种的培养基上没有菌落生长,说明培养基没有被杂菌污染。如果接种后的完全培养基上的菌落数明显多于选择培养基上的菌落数,说明选择培养基筛选出了一些尿素分解菌
    1.常见选择培养基的设计原理与应用实例
    2.平板划线法和稀释涂布平板法的比较
    3.两种微生物计数方法的比较
    4.微生物的筛选与鉴别方法(1)微生物的筛选方法
    (2)微生物的鉴别方法
    5.对土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验的结果分析与评价
    考向1| 选择培养基成分与功能的分析1.下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是(  )A.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂、蒸馏水B.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、琼脂、蒸馏水C.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、尿素、琼脂、蒸馏水D.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、蒸馏水
    A 解析:在A项的培养基中既有尿素作为唯一氮源,又有其他各种成分,可以选择出分解尿素的细菌;而B项中无尿素作氮源,C项中缺少碳源,D项中有牛肉膏、蛋白胨可提供氮源的成分。
    2.物质W是一种含氮有机物,W在培养基中达到一定量时培养基表现为不透明。某小组欲从土壤中筛选出能降解W的细菌,结果如下图。下列说法错误的是(  ) A.透明圈的形成是因为W物质被分解B.所用的选择培养基应该是以物质W为唯一氮源C.甲菌落中的细菌可能是利用空气中的氮气作为氮源D.乙菌落中的细菌都能降解W,不需要进一步纯化
    D 解析:W在培养基中达到一定量时培养基表现为不透明,因此透明圈的形成是因为W物质被分解,A正确;要筛选出能降解W的细菌,所用的选择培养基应该是以物质W为唯一氮源,B正确;该培养基以W物质为唯一氮源,而甲菌落周围未出现透明圈,因此甲菌落中的细菌可能是利用空气中的氮气作为氮源,C正确;乙菌落中的细菌不一定都能降解W,因此仍需要进一步纯化,D错误。
    【易错提醒】能够在选择培养基上生长的不一定都是目的菌株原则上选择培养基只能允许特定种类的微生物生长,但实际上,微生物的培养是一个非常复杂的问题,有些微生物可以利用其他微生物的代谢产物生长繁殖,因此,能够在选择培养基上生长的不一定都是目的菌株。
    考向2| 微生物选择培养方法的辨析3.(2022·江苏卷)下列是某同学分离高产脲酶菌的实验设计,不合理的是(  )A.选择农田或公园土壤作为样品分离目的菌株B.在选择培养基中需添加尿素作为唯一氮源C.适当稀释样品是为了在平板上形成单菌落D.可分解酚红指示剂使其褪色的菌株是产脲酶菌
    D 解析:农田或公园土壤中含有较多的含脲酶的微生物,A正确;为了筛选可分解尿素的细菌,配制的培养基应选择尿素作为唯一氮源,含脲酶的微生物在该培养基上能生长,B正确;当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌,C正确;在细菌分解尿素的化学反应中,细菌合成的脲酶将尿素分解成氨,氨会使培养基的pH升高,酚红指示剂将变红,因此在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,能对分离的菌种做进一步鉴定,D错误。
    4.(2022·全国乙卷)化合物S被广泛应用于医药、食品和化工工业。用菌株C可生产S,S的产量与菌株C培养所利用的碳源关系密切。为此,某小组通过实验比较不同碳源对菌体生长和S产量的影响,结果见表。
    回答下列问题:(1)通常在实验室培养微生物时,需要对所需的玻璃器皿进行灭菌,灭菌的方法有__________________________________________________________________________________________________________________________________________________(答出2点即可)。 (2)由实验结果可知,菌株C生长的最适碳源是______________;用菌株C生产S的最适碳源是____________。菌株C的生长除需要碳源外,还需要____________________(答出2点即可)等营养物质。
    (3)由实验结果可知,碳源为淀粉时菌株C不能生长,其原因是_____________________________________________________________。 (4)若以制糖废液作为碳源,为进一步确定生产S的最适碳源浓度,某同学进行了相关实验。请简要写出实验思路:_________________________________________________________________________________________________________________________________。(5)利用制糖废液生产S可以实现废物利用,其意义是__________(答出1点即可)。
    解析:(1)通常在实验室培养微生物时,为防止实验用的玻璃器皿等物品中原有的微生物污染培养物,需要使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子,即对所需的玻璃器皿进行灭菌,玻璃器皿常用的灭菌方法有干热灭菌、高压蒸汽灭菌等。(2)由实验结果可知,以葡萄糖为碳源时菌株C的细胞干重最大,说明最适于菌株C生长的碳源是葡萄糖;而以制糖废液为碳源时,用菌株C生产S的产量高于以葡萄糖为碳源时的产量,说明最适于生产S的碳源是制糖废液。微生物的生长一般都需要水、碳源、氮源和无机盐,还需要满足微生物生长对pH、氧气以及特殊营养物质的要求,故菌株C的生长除需要碳源外,还需要氮源、无机盐、水等营养物质
    (3)分析题中表格可以看出,在以淀粉为碳源的培养基中,菌株C不能生长,原因可能是菌株C中缺少分解淀粉的酶,不能利用淀粉。(4)若以制糖废液作为碳源,为进一步确定生产S的最适碳源浓度,实验自变量为制糖废液的浓度,可分别配制一系列不同浓度梯度的以制糖废液为唯一碳源的培养基,培养菌株C,其他条件相同且适宜,一段时间后,测定并比较不同浓度制糖废液中S的产量,S产量最高时对应的制糖废液浓度,即为生产S的最适碳源浓度。(5)利用制糖废液生产S可以实现废物利用,既有利于减少污染、节省原料,又能降低生产成本。
    答案:(1)高压蒸汽灭菌、干热灭菌 (2)葡萄糖 制糖废液 氮源、无机盐、水 (3)不能合成淀粉酶 (4)配制等量的一系列不同浓度的制糖废液分别接种等量的菌株C,其他条件相同且适宜,培养一段时间后,测定不同浓度制糖废液中S产量,S产量最高时对应的制糖废液浓度为生产S的最适碳源浓度 (5)减少污染、节省原料、降低生产成本
    考向3| 微生物数量测定的方法5.土壤中有丰富的微生物,若利用其中某种微生物,则需要进行菌种的分离和纯化,过程如下图。下列相关叙述错误的是(  )
    A.若目的是筛选分解尿素[CO(NH2)2]的细菌,则尿素可以作为该菌的氮源和碳源B.3号试管的稀释倍数为1×104,理论上3号试管的活菌数应是4号试管的10倍C.4号试管的结果表明每克土壤中的活菌数约为1.1×108个D.该种方法统计的菌落数比活菌的实际数目少
    A 解析:若目的是筛选分解尿素[CO(NH2)2]的细菌,则尿素可以作为该菌的氮源,不能作为碳源,A错误;由样品稀释示意图分析可知,3号试管的稀释倍数为1×104倍,3号试管中的活菌数应是4号试管的10倍,B正确;4号试管进行稀释涂布平板法计数的结果表明每克土壤中的菌株数为(110+108+112)÷3×10×105=1.1×108(个),C正确;稀释涂布平板得到的菌落可能是由两个或多个细菌细胞长成的,故该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要低,D正确。
    6.(2023·广东汕头一模)热纤梭菌是一种能高效降解纤维素的嗜热厌氧细菌,可分泌一种多酶复合体将纤维素水解为可溶性糖,在农林废弃物的转化利用中具有应用价值。下图是筛选该菌的过程,相关叙述错误的是(  )
    A.从牛粪堆的深层取样比从表层取样更加合理B.甲、丙都是以纤维素为唯一碳源的选择培养基C.用平板乙统计菌落数可准确反映该菌的真实数量D.丙中纤维素的残留量可反映该菌降解纤维素的能力
    C 解析:热纤梭菌是一种嗜热厌氧细菌,牛粪堆的深层比表层氧气含量更低,温度更高,更适合热纤梭菌生存,因此从牛粪堆的深层取样比从表层取样更加合理,A正确;题图是筛选能高效降解纤维素的嗜热厌氧细菌,因此甲、丙都是以纤维素为唯一碳源的选择培养基,B正确;根据图乙中平板上菌落分布均匀可知,其为稀释涂布平板法接种的菌种,由于当两个或多个菌体连在一起时,平板上观察到的只有一个菌落,因此用该方法统计的菌体数量会比活菌的实际数量少,C错误;热纤梭菌可分泌一种多酶复合体将纤维素水解为可溶性糖,因此丙中纤维素的残留量可反映该菌降解纤维素的能力,D正确。
    层级二凝练学科素养 探析高考命题
    【命题动态】针对人类生产或生活的某一需求,或结合生活或生产实例,考查微生物的营养要求,微生物的消毒与灭菌技术、微生物的选择培养、微生物分离与计数的原理及操作过程的分析。呈现形式一般以选择题为主,难度中档。
    1.(2021·山东卷)解脂菌能利用分泌的脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸收利用。脂肪酸会使醇溶青琼脂平板变为深蓝色。将不能直接吸收脂肪的甲、乙两种菌分别等量接种在醇溶青琼脂平板上培养。甲菌菌落周围呈现深蓝色,乙菌菌落周围不变色。下列说法错误的是(  )A.甲菌属于解脂菌B.实验中所用培养基以脂肪为唯一碳源C.可将两种菌分别接种在同一平板的不同区域进行对比D.该平板可用来比较解脂菌分泌脂肪酶的能力
    B 解析:根据题干信息“甲菌菌落周围呈现深蓝色”,说明甲菌可以分泌脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸,脂肪酸会使醇溶青琼脂平板变为深蓝色,因此甲菌属于解脂菌,A正确;乙菌菌落周围没有出现深蓝色,说明乙菌不能产生脂肪酶,不能利用脂肪为其供能,但乙菌也可以在培养基上生存,说明该培养基不是以脂肪为唯一碳源,B错误;可将两种菌分别接种在同一平板的不同区域进行对比,更加直观,C正确;可以根据平板中菌落周围深蓝色的面积大小来比较解脂菌分泌脂肪酶的能力,D正确。
    [技法总结]选择培养基与鉴别培养基的比较
    2.(2022·广东卷)研究深海独特的生态环境对于开发海洋资源具有重要意义。近期在“科学号”考察船对南中国海科考中,中国科学家采集了某海域1146米深海冷泉附近沉积物样品,分离、鉴定得到新的微生物菌株并进一步研究了其生物学特性。
    回答下列问题:(1)研究者先制备富集培养基,然后采用________________法灭菌,冷却后再接入沉积物样品,28 ℃厌氧培养一段时间后,获得了含拟杆菌的混合培养物,为了获得纯种培养,除了稀释涂布平板法,还可采用________________法。据图分析,拟杆菌新菌株在以__________为碳源时生长状况最好。
    (2)研究发现,将采集的样品置于各种培养基中培养,仍有很多微生物不能被分离筛选出来,推测其原因可能是_______________________________________(答一点即可)。(3)藻类细胞解体后的难降解多糖物质,通常会聚集形成碎屑沉降到深海底部。从生态系统组成成分的角度考虑,拟杆菌对深海生态系统碳循环的作用可能是________________________________________________________________________________________________。
    (4)深海冷泉环境特殊,推测此环境下生存的拟杆菌所分泌的各种多糖降解酶,除具有酶的一般共性外,其特性可能还有____________________________________________________________________。
    解析:(1)培养基通常采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。可以采用稀释涂布平板法或平板划线法,将单个微生物分散在固体培养基上,经过培养得到单菌落,从而获得纯净培养物。分析题图可知,在以纤维素为碳源的培养基中,细胞数量最多,可推知拟杆菌新菌株在以纤维素为碳源时生长状况最好。(2)深海冷泉中可能存在某些微生物,只有利用冷泉中的特有物质才能生存(或需要在深海冷泉的特定环境中才能存活),故将采集的样品置于各种培养基中培养,仍可能有很多微生物不能被分离筛选出来。
    (3)拟杆菌为异养生物,作为该生态系统的分解者,能将沉降到深海底部的难降解多糖物质分解为无机物,归还到无机环境中,有利于碳循环的顺利进行。(4)深海冷泉温度和氧含量均较低,故生活在其中的拟杆菌所分泌的各种多糖降解酶,应具有耐低温、耐低氧的特性,才能高效降解多糖,保证拟杆菌在极端环境条件下进行正常生命活动。
    答案:(1)高压蒸汽灭菌 平板划线 纤维素 (2)某些微生物只有利用深海冷泉中的特有物质才能生存(或需要在深海冷泉的特定环境中才能存活) (3)拟杆菌作为分解者,将沉降到深海底部的难降解多糖物质分解为无机物,归还到无机环境中,有利于碳循环的顺利进行 (4)耐低温、耐低氧等(极端环境耐受性)
    1.(科学实验和探究情境)为了分离和纯化高效分解石油的细菌,科研人员用被石油污染过的土壤进行如图A所示的实验。同学甲进行过程④的操作,其中一个平板经培养后的菌落分布如图B所示。下列叙述错误的是(  )
    A.步骤③与步骤②中培养基成分的最大区别是步骤③的培养基中石油是唯一碳源B.步骤⑤振荡培养的目的是提高培养液溶氧量,同时使菌体与培养液充分接触C.图B培养基的结果可能是由于涂布不均匀造成的D.步骤⑤后取样测定石油含量的目的是筛选出能分解石油的细菌
    D 解析:该实验的目的是为了分离和纯化高效分解石油的细菌,因此步骤③与步骤②中培养基成分相比,最大的区别是石油是唯一碳源,A正确;步骤⑤需要振荡培养,原因是提高培养液中(溶解)氧的含量,通过振荡可使菌体与培养液充分接触,提高营养物质的利用率,B正确;图B采用的接种方法是稀释涂布平板法,出现图B结果(菌落分布不均匀)可能的操作是涂布不均匀,C正确;步骤⑤后取样测定石油含量的目的是筛选出分解石油能力最强的细菌,D错误。
    2.(生活、学习和实践情境)塑料(聚乙烯)在自然界中很难降解,俗称“白色污染”,某大学教授偶然发现装米的塑料袋上有许多孔洞,还有黄粉虫幼虫和成虫爬出。带着这些疑问,他对黄粉虫幼虫消化道的微生物进行分离,在幼虫肠道中成功分离出塑料降解菌——微小杆菌YT2。下列有关叙述错误的是(  )A.要观察塑料降解菌的菌落,需用固体培养基进行选择培养B.实验室分离塑料降解菌时应在培养基中加入葡萄糖作为碳源C.采用平板划线法分离微小杆菌YT2时,划线时总是从上一次划线的末端开始划线D.若杀死微小杆菌YT2,黄粉虫无法消化塑料,推测该菌和黄粉虫幼虫的种间关系是互利共生
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