2022-2023学年江西省赣州市十六县（市）二十校高三下学期期中联考理综生物试题含答案

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江西省赣州市十六县（市）二十校2022-2023学年高三下学期期中联考理综生物试题学校:___________姓名：___________班级：___________考号：___________ 一、单选题1．新型冠状病毒在全球已经累计出现多种变异毒株，某些变异毒株如“奥密克戎”的传播风险大大增加。我国防疫工作要求，完成2剂次新型冠状病毒疫苗接种满6个月可加强接种第3剂次，进一步提高对新型冠状病毒的免疫力。下列有关叙述正确的是（    ）A．接种了新型冠状病毒疫苗的无症状感染者体内检测不到病毒核酸B．多次接种新型冠状病毒疫苗能直接强化刺激浆细胞产生大量抗体C．检查血液中相应抗体便可确定机体是否接种过新型冠状病毒疫苗D．接种了新型冠状病毒疫苗的有症状感染者体内病毒可能发生变异【答案】D【分析】当相同抗原再次入侵时，记忆细胞能迅速增殖分化，形成相应效应细胞，迅速高效地产生免疫反应。【详解】A、已接种疫苗的新型冠状病毒无症状感染者体内仍可以检测到病毒核酸，A错误；B、多次接种新型冠状病毒疫苗能直接强化刺激记忆细胞增殖分化，形成大量的浆细胞，进而产生大量的抗体，B错误；C、染过新型冠状病毒的机体内有相应的抗体，检查血液中的相应抗体不能确定机体是否接种过新型冠状病毒疫苗，C错误；D、接种了新型冠状病毒疫苗，说明机体内已有相关抗体，但有症状，说明感染者体内病毒可能发生变异，D正确。故选D。2．在光合作用过程中，水的光解过程中伴随着氢离子的产生。当某种环境因素X减弱时，氢离子浓度明显下降，从而导致催化氢离子产生的酶活性下降，但同时大多数酶活性并未受影响。当环境因素Y减弱时，催化氢离子产生的酶和绝大多数酶的活性均降低。因此，可以推断环境因素X、Y最可能分别是（    ）A．光照强度、CO2浓度 B．光照强度、温度C．CO2浓度、光照强度 D．CO2浓度、温度【答案】B【分析】光合作用过程分为光反应阶段和暗反应阶段，光反应阶段是水光解形成氧气和还原氢的过程，该过程中光能转变成活跃的化学能储存在ATP中；暗反应阶段包括二氧化碳的固定和三碳化合物的还原，二氧化碳固定是二氧化碳与1分子五碳化合物结合形成2分子三碳化合物的过程，三碳化合物还原是三碳化合物在光反应产生的还原氢和ATP的作用下形成有机物和五碳化合物的过程。【详解】当某种环境因素X减弱时，氢离子浓度明显下降，可见水光解速度下降，则X应该是光照强度下降，从而导致催化氢离子产生的酶活性下降，但同时大多数酶的活性并未受影响。当环境因素Y减弱时，催化氢离子产生的酶与绝大多数酶的活性均降低，可见环境因素Y应该为温度，因为温度会影响酶的活性。即该实验中因素X、Y最可能分别是光照强度和温度，B正确。故选B。3．有丝分裂和减数分裂是哺乳动物细胞分裂的两种形式。某动物的基因型为BB，若该动物的某细胞在染色体复制时发生差错，导致一对同源染色体中每条染色体的两条染色单体分别含有基因B和b，则通常情况下基因B和b一定同时进入同一细胞的时期是（    ）A．有丝分裂的后期 B．有丝分裂的末期C．减数第一次分裂末期 D．减数第二次分裂末期【答案】C【分析】由题意可知，每条染色体的两条染色单体分别含有基因B和b，有丝分裂的后期着丝粒分裂，移向每一极的染色体上携带的基因可能是BB或Bb或bb，所以有丝分裂形成的子细胞中不一定含有Bb；减数第一次分裂后期，同源染色体分离，B和b一定同时进入同一细胞；减数第二次分裂后期着丝点分裂，B和b分开进入不同的细胞中。【详解】A、有丝分裂的后期着丝粒分裂，姐妹染色单体分开形成染色体，并在纺锤体的牵引下移向细胞两极，A错误；B、有丝分裂末期移向每一极的染色体上携带的基因可能是BB或Bb或bb，B错误；C、减数第一次分裂后期，同源染色体分离，由于每条染色体的两条染色单体分别含有基因B和b ，因此B和b一定同时进入同一细胞，C正确；D、减数第二次分裂后期着丝粒分裂，B和b分开进入不同的细胞中，D错误。故选C。4．已知酶N是催化脱落酸（ABA）生物合成的关键酶，干旱可诱导植物体内ABA含量增加，ABA能降低气孔开度，以减少水分丧失，短肽C具有与ABA相同的效应。科研人员用干旱处理拟南芥的野生型和C基因缺失突变体植株，C基因缺失突变体中的N基因表达量和ABA含量较野生型低，且均远高于对照组。下列有关分析合理的是（    ）A．依据实验结果可推测出：C基因通过促进N基因表达进而促进ABA合成B．依据实验结果可推测出：N基因通过促进C基因表达进而促进ABA合成C．N基因和C基因均通过控制酶的合成控制代谢过程进而控制生物的性状D．短肽C和ABA是植物体细胞内相同部位合成的具有调节作用的信息分子【答案】A【分析】基因对性状的控制方式：①基因通过控制酶的合成来影响细胞代谢，进而间接控制生物的性状，如白化病、豌豆的粒形；②基因通过控制蛋白质分子结构来直接控制性状，如镰刀形细胞贫血症、囊性纤维病。【详解】AB、干旱处理条件下，C基因缺失突变体中的N基因表达量和ABA含量均显著低于野生型，可推测C可能通过促进N基因表达，进而促进ABA合成，A正确，B错误；C、C基因能控制短肽C的合成而控制生物的性状，通过控制蛋白质的合成直接控制生物的性状，C错误；D、短肽C是在植物细胞核糖体中合成的，而ABA不是，合成部位不相同，D错误。故选A。5．某一年生植物开两性花，花非常小，杂交育种时去雄困难。其花粉可育与不育由细胞核基因A/a（A、a基因仅在花粉中表达）和线粒体基因（N、S，每一植株只具有其中一种基因）共同控制，相关基因型的表示方法：线粒体基因写在括号外，细胞核基因写在括号内。花粉不育的机理如图所示（P蛋白的存在是S基因表达的必要条件）。下列分析不合理的是（    ）A．A、a和N、S的遗传不遵循基因的自由组合定律B．基因型为S（Aa）的植株自交，后代出现S（AA）的概率是1/2C．用纯合的植株作亲本培育出植株S（Aa）时，母本最好选用S（aa）D．能产生花粉不育的植株有2种，产生的花粉均可育的植株有5种【答案】D【分析】由图示可知，当有S蛋白时花粉不育，a基因控制合成的P蛋白可促进S基因表达产生S蛋白；细胞核基因—a基因控制不育，由于a基因表达的产物—P蛋白的存在是S基因表达的必要条件，故S（aa）产生花粉均不育，S（Aa）产生花粉有的不育、有的可育；N（AA）、N（Aa）、N（aa）、S（AA）产生的花粉均可育。【详解】A、进行有性生殖的，真核生物的非同源染色体上的非等位基因遵循基因的自由组合定律。根据题意“其花粉可育与不育由细胞核基因A/a（A、a基因仅在花粉中表达）和线粒体基因（N、S，每一植株只具有其中一种基因）共同控制”可知，A、a和N、S的遗传不遵循基因的自由组合定律，A正确；B、由图示可知，当有S蛋白时花粉不育，a基因控制合成的P蛋白可促进S基因表达产生S蛋白。细胞核基因—a基因控制不育，由于a基因表达的产物—P蛋白的存在是S基因表达的必要条件，故S（Aa）产生的花粉1/2不育、1/2可育。基因型为S（Aa）的植株自交，其花粉的基因型为S（A），卵细胞的基因型为1/2S（A）、1/2S（a），则后代出现S（AA）的概率是1/2，B正确；C、用纯合的植株S（AA）和S（aa）作亲本培育出植株S（Aa）时，母本最好选用S（aa），因为若使S（aa）作为父本，其花粉均不育，C正确；D、根据B选项的详解可知，该植物的基因型有N（AA）、N（Aa）、N（aa）、S（AA）、S（Aa）、S（aa），其中S（Aa）产生花粉有的不育、有的可育，S（aa）产生花粉均不育；N（AA）、N（Aa）、N（aa）、S（AA）产生的花粉均可育。故能产生花粉不育的植株有2种，产生的花粉均可育的植株有4种，D错误。故选D。6．几十年来，由于过度放牧及高温干旱等异常气候因素，内蒙古草原蝗虫大面积暴发成灾。下列有关蝗虫的叙述，错误的是（    ）A．用样方法调查蝗虫产卵数量时，要考虑样方大小和数量B．引入天敌进行生物防治比化学防治效果好，因为时间持久C．若种群的年龄结构为增长型，则蝗虫的数量一定会增加D．过度放牧及高温干旱等因素，都可导致草原演替为荒漠【答案】C【分析】样方法适用于调查植物或活动能力弱、活动范围小的动物的种群密度；防治蝗虫可采用生物防治的方法，生物防治具有成本低、减少化学农药用量、对环境安全且效果持久等的优点。【详解】A、样方法适用于调查植物或活动能力弱、活动范围小的动物的种群密度。可采用样方法调查蝗虫产卵数量，但要考虑样方大小和数量，A正确；B、利用捕食关系，引入蝗虫的天敌进行生物防治比化学防治的效果好，因为成本低，减少了化学农药用量，对环境安全且效果持久，B正确；C、蝗虫的种群数量的变化受多种因素的影响，若种群的年龄结构为增长型，则蝗虫的数量不一定会增加，C错误；D、过度放牧（使得草原的植被减少）及高温干旱等因素，都可导致草原演替为荒漠，D正确。故选C。 二、实验题7．当土壤不能提供植物生长发育所需营养时，需要通过施肥和灌溉补充土壤的营养，利于植物的生长，但是过度施肥和灌溉也会给植物生长造成一定影响。回答下列问题：(1)过度灌溉容易造成植物生长时出现烂根现象，原因是________。(2)施肥给植物提供无机盐，无机盐在细胞中具有非常重要的作用。许多无机盐对于维持细胞和生物体的生命活动有非常重要的作用；此外一部分无机盐还是________。(3)有资料介绍：缺钾会引起植物叶片边缘出现枯黄色。某同学发现在家里种植的盆景幼苗一段时间后叶片的边缘出现枯黄色。该同学提出质疑：是不是植物缺钾都会出现“焦边”现象呢﹖该同学在学校的生物实验室里用黄瓜幼苗为材料进行实验探究。实验方案如下：取品种相同、生长状态良好、大小一致的黄瓜幼苗随机分为A、B两组，每组各50株，分别种植于培养瓶中进行液体培养。该同学所用培养液主要成分的配方如下表所示：组别培养液类别培养液所含主要成分（mg/L）KNO3CaCl2·2H2OMgSO4·7H2O（NH4）2SO4A组完全培养液2500150250134B组缺素培养液0150250134据此配方，你认为该实验设计存在什么问题？在A、B两组实验的基础上，应该如何完善？_______【答案】(1)过度灌溉使土壤的透气性降低，根细胞进行无氧呼吸产生的酒精对根细胞产生毒害，引起烂根(2)细胞内复杂化合物的重要组成成分(3)该同学所用的完全培养基中使用了硝酸钾，加入钾离子的同时，也加入了硝酸根。无法排除硝酸根离子对于植物生长的影响。所以，应该补加2组对照实验：①补加其他硝酸盐的对照实验②补加其它钾盐的对照实验。 【分析】无机盐主要以离子的形式存在，其生理作用有：（1）细胞中某些复杂化合物的重要组成成分，如Fe2+是血红蛋白的主要成分；Mg2+是叶绿素的必要成分。（2）维持细胞的生命活动，如钙可调节肌肉收缩和血液凝固，血钙过高会造成肌无力，血钙过低会引起抽搐。（3）维持细胞的酸碱平衡和细胞的形态。【详解】（1）经常松土，可以使土壤疏松，土壤缝隙中的空气增多，有利于根的呼吸，促进根的生长，过度灌溉会使土壤的透气性降低，根细胞进行无氧呼吸产生的酒精对根细胞产生毒害，引起烂根。（2）生物体内的无机盐主要以离子的形式存在，有些无机盐是细胞内某些复杂化合物的组成成分，许多无机盐对于维持细胞和生物体的生命活动具有重要作用，有些无机盐对于维持酸碱平衡和渗透压具有重要功能。（3）实验设计过程中应遵循等量原则、单一变量原则等，该实验的目的是探究缺钾是否会引起植物的焦边现象，实验的自变量是钾离子的有无，其余均为无关变量，该同学所用的完全培养基中使用了硝酸钾，加入钾离子的同时，也加入了硝酸根，无法排除硝酸根离子对于植物生长的影响。为排除钾离子和硝酸根离子对于植物生长的影响，应该补加2组对照实验：①补加其他硝酸盐的对照实验，②补加其它钾盐的对照实验。 三、综合题8．模型动物在科学研究中有广泛的应用。研究人员选择生理状况良好的同种大鼠若干，将部分大鼠腹腔注射链脲佐菌素溶液后制成糖尿病模型鼠，进行了相关的实验。回答下列问题：(1)高盐饮食导致大鼠尿量减少是神经─体液调节的结果。请用文字和箭头描述高盐饮食引起渴觉的过程：________。(2)链脲佐菌素在动物体内往往作用于专一细胞，注射链脲佐菌素溶液后制成糖尿病模型鼠，链脲佐菌素的作用可能是________。糖尿病模型鼠具有多尿症状，原因是________。(3)为探讨不同浓度大豆膳食纤维降血糖的效果，进行了分组对照实验（各组灌胃给药体积均1mL，每日给药1次，连续灌胃42天，同时检测血糖变化情况。大鼠均以标准饲料饲喂，自由饮水），部分实验方案如下：现提供：正常大鼠，糖尿病模型大鼠，0.9%生理盐水，10mg/kg格列本脲（治疗糖尿病的降糖药物），1.35g/kg、2.70g/kg、5.40g/kg大豆膳食纤维溶液。组1：正常大鼠，0.9%生理盐水。组2：___________。组3：_________。组4：糖尿病模型大鼠，1.35g/kg大豆膳食纤维溶液。组5：糖尿病模型大鼠，2.70g/kg大豆膳食纤维溶液。组6：糖尿病模型大鼠，5.40g/kg大豆膳食纤维溶液。请参照上述实验方案，完善组2、组3实验方案。【答案】(1)高盐饮食→细胞外液渗透压升高→下丘脑渗透压感受器兴奋→大脑皮层产生渴觉（合理即可）(2)     破坏胰岛B细胞     糖尿病模型鼠血糖浓度高，原尿中葡萄糖浓度高，肾小管集合管重吸收水分少，一部分水随葡萄糖排出，导致有多尿症状。(3)     糖尿病模型大鼠，0.9%生理盐水     糖尿病模型大鼠，10mg/kg格列本脲 【分析】完整的反射弧为：感受器、传入神经、神经中枢、传出神经、效应器；感觉的产生在大脑皮层。【详解】（1）高盐饮食会导致细胞外液渗透压升高，渗透压感受器位于下丘脑，渴觉于大脑皮层形成，故高盐饮食引起渴觉的过程为：高盐饮食→细胞外液渗透压升高→下丘脑渗透压感受器兴奋→大脑皮层产生渴觉。（2）结合题干“注射链脲佐菌素溶液后制成糖尿病模型鼠”，结合糖尿病是因为血糖升高引起的，血糖不能正常降低，可能与胰岛素的含量减少有关，而胰岛素由胰岛B细胞分泌，故推测链脲佐菌素的作用可能是破坏胰岛B细胞；糖尿病模型鼠具有多尿症状，原因是：糖尿病模型鼠血糖浓度高，原尿中葡萄糖浓度高，肾小管集合管重吸收水分少，一部分水随葡萄糖排出，导致有多尿症状。（3）实验遵循单一变量和对照原则，分析实验已列出步骤：组1为正常大鼠，0.9%生理盐水，起到空白对照作用，不施加任何药物，而实验探究的是“不同浓度大豆膳食纤维降血糖的效果”可知还需要一组空白对照实验即：组2为糖尿病模型大鼠，0.9%生理盐水；组别4、5、6分别加入了不同浓度的大豆膳食纤维溶液，还需要一组加入已知可以降低血糖的药物组作为对照，故组3为糖尿病模型大鼠，10mg/kg格列本脲。9．集团内捕食是指不同天敌共享同一猎物，其中一种天敌还捕食另一种天敌。某棉田生态系统中瓢虫与短翅蚜小蜂，蚜虫三者之间存在集团内捕食现象，其中短翅蚜小蜂既是猎物又是捕食者，仅蚜虫在食物链中属于第二营养级。回答下列问题：(1)依据题中信息，画出棉田中的食物网_________。(2)若移走短翅蚜小蜂，瓢虫的数量可能会_________（填“增加”或“减少”或“不变”），理由是________。(3)瓢虫、短翅蚜小蜂和蚜虫之间的信息传递是________（填“单向的”或“双向的”），在自然生态系统中，集团内捕食现象比较常见，形成了错综复杂的食物，这是生态系统________的重要条件。【答案】(1)(2)     增加     若移走短翅蚜小蜂，则瓢虫所占的营养级会降低，能量流动过程中损耗的能量减少，获得的能量可能会增加，故瓢虫的数量可能会增加。(3)     双向的     保持相对稳定 【分析】1、食物链：生态系统中各种生物之间由于食物关系形成的一种联系。食物链彼此交错连接成的复杂营养关系，就是食物网。2、生态系统的组成成分多少及营养结构（即食物链食物网）的复杂程度影响生态系统的稳定性。【详解】（1）根据题干信息，某棉田生态系统中瓢虫与短翅蚜小蜂，蚜虫三者之间存在集团内捕食现象，其中短翅蚜小蜂既是猎物又是捕食者，仅蚜虫在食物链中属于第二营养级，可以画出2条食物链，即棉→蚜虫→短翅蚜小蜂→瓢虫，棉→蚜虫→瓢虫，这两条食物链组成的食物网如下：（2）结合食物网分析，若移走短翅蚜小蜂，瓢虫只能取食蚜虫，其营养级降低，能量流动过程中损耗的能量减少，获得的能量可能会增加，故瓢虫的数量可能会增加。（3）瓢虫、短翅蚜小蜂和蚜虫处于食物链上，食物链中各营养级之间的信息传递是双向的，生态系统保持相对稳定的重要条件之一就是生物之间通过捕食关系形成错综复杂的食物链（网），一般认为，食物网越复杂，生态系统抵抗外界干扰的能力就越强。10．产前诊断是预防遗传病的最有效的方法之一。有一对正常的夫妇，妻子怀孕后在医院进行了以下检查：①进行超声波等检查，观察胎儿的五官以及脏器、骨骼结构等发育是否良好；②通过技术手段获得胎儿细胞，并进行染色体检查、DNA分析、某些酶的活性或代谢产物测定。回答以下问题：(1)检查中，对胎儿细胞进行染色体检查、DNA分析、某些酶活性或代谢产物测定的目的分别是什么？ ________。(2)DNA高通量测序法（一种DNA测序法，可以测定各个染色体DNA含量的比值）是否可以检测出胎儿发生染色体倒位这种结构变异？ ________，原因是________。(3)染色体结构变异的结果为________，而导致生物性状变异。染色体变异能为生物进化提供原材料，依据现代生物进化理论，自然选择在生物进化中的作用是________。【答案】(1)检查胎儿的染色体数目和结构是否异常、判断胎儿是否携带某种遗传病的致病基因（基因异常）、判断胎儿细胞中是否有某些致病基因的表达(2)     不能     发生倒位时，一般不会导致孕妇或胎儿相应染色体的DNA含量比值发生变化。(3)     使排列在染色体上的基因数目或排列顺序发生改变     使种群的基因频率发生定向改变而决定生物进化方向 【分析】染色体变异包括染色体数目变异和染色体结构变异，染色体结构变异包括倒位、易位、缺失、重复，染色体数目变异包括细胞内个别染色体数目的增加或减少和以一套非同源染色体的形式成倍增加或减少。产前诊断包括：B超检查、孕妇血细胞检查、羊水检查、基因检测4种方法。自然选择导致种群基因频率定向改变，自然选择决定生物进化方向。【详解】（1）对胎儿细胞进行染色体检查的目的是检查胎儿的染色体数目和结构是否异常；对胎儿细胞DNA分析的目的是判断胎儿是否携带某种遗传病的致病基因（基因异常）；对胎儿细胞进行某些酶活性或代谢产物测定的目的是判断胎儿细胞中是否有某些致病基因的表达（即出现某些特殊种类蛋白质）。（2）染色体倒位一般不会引起染色体上碱基对数目的变化，即不会导致相应染色体的DNA含量比值发生变化，因此用DNA高通量测序法不能检测出胎儿发生染色体倒位这种结构变异。（3）染色体结构变异包括倒位、易位、缺失、重复，其结果往往使得排列在染色体上的基因数目或排列顺序发生改变。自然选择能够通过对个体表现型进行选择，进而改变种群基因频率，从而导致生物进化。因此自然选择决定生物进化方向。11．聚羟基脂肪酸酯（PHA）是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯，它具有类似于合成塑料的理化特性，且废弃后易被生物降解，可用于制造无污染的“绿色塑料”。科学家从某咸水湖中寻找生产PHA菌种的流程图如下。回答下列问题：(1)若从土壤中寻找生产PHA的菌种，从土壤取样后，在进行步骤②之前需要进行的操作有________。(2)步骤②通常采用________进行接种，对接种工具的灭菌方法通常有________（写出2种）。步骤③所用的培养其中营养物质浓度越高，对嗜盐细菌的生长反而越不利，原因是________。(3)步骤④使用固体培养基，其目的是________，要筛选高产PHA的嗜盐菌，应注意的操作是________。(4)为了进一步提高嗜盐菌生产PHA能力，对分离所得的菌株，采用的育种方法是_________。【答案】(1)制备土壤浸出液并进行（梯度）稀释(2)     稀释涂布平板法     灼烧灭菌、干热灭菌     培养基浓度过高，会导致菌体失水死亡，不利于嗜盐细菌的生长(3)     以便获得单菌落并纯化菌株     应挑取多个菌落并分别测定嗜盐细菌的PHA含量，最后进行比较(4)诱变育种 【分析】筛选分离目的微生物的一般步骤是：样品取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株，筛选分离生产PHA菌种需要用稀释涂布平板法或平板划线法接种分离。【详解】（1）若从土壤中寻找生产PHA的菌种，从土壤取样后，在进行步骤②之前需要制备土壤浸出液并进行（梯度）稀释，从而获得单菌落，获取目的菌。（2）步骤②通常采用稀释涂布平板法进行接种，该接种方法中接种工具是涂布器，其灭菌的方法是灼烧灭菌、干热灭菌。步骤③所用的培养基中营养物质浓度越高，对嗜盐细菌的生长反而越不利，这是因为培养基浓度过高，会导致菌体失水死亡，不利于嗜盐细菌的生长，从而导致实验失败。　（3）步骤④使用固体培养基，因为在固体培养基上才能获得菌落，便于鉴定，因而这样操作可获得单菌落并纯化菌株，要筛选高产PHA的嗜盐菌，还应进行的操作是挑取多个菌落并分别测定嗜盐细菌培养液中PHA含量，最后进行比较，选择出培养液中PHA含量最低的菌株作为目的菌。（4）为了进一步提高嗜盐菌生产PHA能力，对分离所得的菌株，采用诱变育种的方法获得高分解能力的菌株，因为诱变能够提高突变频率，进而可从中筛选目标类型。12．胰蛋白酶抑制剂能干扰昆虫的代谢，引起昆虫死亡，但对人体无害。科学家将马铃薯胰蛋白酶抑制剂基因（Pin－Ⅱ）通过农杆菌导入杨树细胞，培育成了抗虫杨树。注：左图表示含目的基因的DNA分子，下图表示质粒，图中Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Neor表示新霉素抗性基因，复制原点是质粒DNA复制的起点。箭头表示识别序列完全不同的4种限制酶的酶切位点。回答下列问题：(1)要获得大量的目的基因，通常采用PCR扩增技术，在PCR扩增仪中已加入了一定的缓冲溶液、含目的基因的DNA分子、Mg2＋，还需要加入的物质有_________。通过PCR技术扩增Pin－Ⅱ基因片段，反应过程一般由95℃热变性、55～60℃引物和模板配对、72℃延伸三个步骤，经过多次循环完成。延伸阶段选用72℃而非95℃综合考虑了两个因素，这两个因素是________和________。(2)图中的质粒在基因工程操作中通常用作载体，能在受体细胞内稳定存在，除含有Ampr，Neor和多个限制酶切位点外，质粒还具有的主要特点是________。(3)依据图中信息，写出高效构建含Pin－Ⅱ基因片段的重组质粒的简要操作方法：_________。(4)用转基因杨树叶片喂养某种杨树害虫，发现害虫死亡率显著增加，与非转基因的杨树细胞相比较，此转基因杨树的叶片细胞中，可以检测到的物质有_____、____、____。（写3项）【答案】(1)     分别与两条模板链结合的2种引物、4种脱氧核苷酸（dNTP）和耐高温的DNA聚合酶（Taq酶）     防止DNA变性     保持Taq酶活性所需温度条件(2)对受体细胞无害、具有自我复制的能力(3)将含目的基因的DNA分子和质粒混合，加入EcoRⅠ和PstⅠ，再加入DNA连接酶，即可构建重组质粒(4)     胰蛋白酶抑制剂基因     胰蛋白酶抑制剂基因的mRNA     胰蛋白酶抑制剂蛋白 【分析】质粒在基因工程操作中通常用作载体，一般需要满足四个要求：有一至多个限制酶切割位点，便于目的基因插入；具有自我复制的能力，在受体细胞中稳定存在；有标记基因，便于重组细胞的筛选；安全，对受体细胞无害。【详解】（1）PCR扩增技术，也称多聚酶链式反应，原理为DNA双链复制，PCR技术需要用到的物质有：一定的缓冲溶液、含目的基因的DNA分子、Mg2＋、分别与两条模板链结合的2种引物、4种脱氧核苷酸（dNTP）和耐高温的DNA聚合酶（Taq酶）；延伸是指在taq酶的作用下，聚合脱氧核苷酸，合成子链的过程，延伸阶段选用72℃而非95℃综合考虑了两个因素，这两个因素是防止DNA变性和保持Taq酶活性所需温度条件。（2）质粒在基因工程操作中通常用作载体，一般需要满足四个要求：有一至多个限制酶切割位点，便于目的基因插入；具有自我复制的能力，在受体细胞中稳定存在；有标记基因，便于重组细胞的筛选；安全，对受体细胞无害。（3）目的基因与质粒的重组需要用到的工具酶为限制酶和DNA连接酶，而对于所选限制酶，不能破坏目的基因、至少保留一个标记基因，最好用不同的限制酶切切割，故构建含Pin－Ⅱ基因片段的重组质粒的简要操作方法为：将含目的基因的DNA分子和质粒混合，加入EcoRⅠ和PstⅠ，再加入DNA连接酶，即可构建重组质粒。（4）结合题干“发现害虫死亡率显著增加”说明基因成功导入并表达，从而发挥相应作用，故与非转基因的杨树细胞相比较，此转基因杨树的叶片细胞中，可以检测到的物质有：胰蛋白酶抑制剂基因、胰蛋白酶抑制剂基因的mRNA、胰蛋白酶抑制剂蛋白。