人教版 (2019)选择性必修3二 动物细胞融合技术与单克隆抗体公开课课件ppt
展开从传统发酵技术到发酵工程
目录 /CONTENTS
意义:打破生殖隔离,实现远缘杂交育种,培育植物新品种。
实验:人——鼠细胞荧光标记融合实验
使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。
形成具有原来两个或多个细胞的遗传信息的杂交细胞
细胞膜具有一定的流动性
与植物原生质体融合的方法相同
灭活病毒诱导细胞融合的原理
灭活:指用物理或化学手段使病毒失去感染能力(不感染细胞), 但是并不破坏病毒的抗原结构(诱导细胞融合)。
突破了有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能。
至今,种间、属间、科间,甚至动物和植物之间的细胞融合都已获得成功。研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段。为制造单克隆抗体开辟了新途径。
比较动物细胞融合与植物体细胞杂交
细胞膜的流动性和植物细胞的全能性
酶解法去掉细胞壁后,诱导原生质体融合,形成杂种体细胞,再经过植物组织培养形成杂种植株
分散成单个细胞后诱导细胞融合
物理方法、化学方法、灭活病毒
克服远缘杂交不亲和障碍
1.定义:机体受抗原刺激后产生的,能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。
2.抗体的分布:1)血清(主要)2)组织液及外分泌液(如乳汁中)
1)每个B淋巴细胞只分泌一种特异性的抗体2)体内产生的特异性抗体种类多达百万种以上
缺陷:产量低、纯度低,特异性差。
1、传统抗体制备方法及缺陷
骨髓瘤细胞 (能无限增殖)
一种B淋巴细胞(只分泌一种特异性抗体)
既能迅速大量增殖,又能产生专一抗体
2、单克隆抗体的制备过程
(抗原-抗体杂交技术)
能分泌所需抗体的杂交瘤细胞
【培养杂交瘤细胞的方法比较】
易于控制培养条件(如无需提供无菌环境等),操作简单,成本较低
可大规模培养,大量生产
需要人为控制培养条件,成本相对较高
克隆化培养,专一抗体检验
体外培养或小鼠腹腔内增殖
特异性强灵敏度高可大量制备
既能大量繁殖又能产生专一抗体
知识拓展:第一次筛选获得杂交瘤细胞
①细胞合成DNA有D和S两条途径,其中D途径能被氨基喋呤阻断。②人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径,但不能分裂增殖。 ③鼠骨髓瘤细胞中只有D途径,没有S途径,但能不断分裂增殖。
筛选出杂交瘤细胞方法?
B淋巴细胞及同型融合细胞
骨髓瘤细胞及同型融合细胞
二、单克隆抗体及其应用
抗体检测的方法——抗原-抗体杂交法
在单克隆抗体制备过程中,两次筛选的目的和方法是不相同的。
将杂交瘤细胞群稀释,约每孔1个细胞进行培养(克隆化培养)
上清液可与特定抗原结合的培养孔为阳性孔
1、诊断试剂——最广泛应用
在妊娠第8天就可以作出诊断,比原来诊断方法提前了10d左右,准确率在90﹪以上。
具有准确、高效、简易、快速特点
优点:位置准确、疗效高、副作用小
单克隆抗体+药物 =“生物导弹”
单克隆抗体+同位素(荧光标记)
在特定组织中成像的技术,可定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病。
医药领域,单抗类药物占用重要地位
一、概念检测1.下列有关动物细胞融合与植物体细胞杂交比较的叙述,错误的是( )A.它们的原理都涉及细胞膜的流动性B.都可以用电融合法或PEG融合法诱导融合C.融合前都需用纤维素酶或果胶酶处理细胞D.前者主要是为了获得细胞产品,后者主要是为了获得杂种植株2.科学家以SARS病毒的核衣壳蛋白为抗原,制备出了单克隆抗体。下列相关叙述正确的是( )A. 利用该单克隆抗体可以诊断是否感染SARS病毒B.体外培养单个B淋巴细胞可以获得针对SARS病毒的单克隆抗体C.将等量B淋巴细胞和骨髓瘤细胞混合,经诱导后融合的细胞即为杂交瘤细胞D.将纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内,从小鼠血清中分离出的抗体为单克隆抗体
二、拓展应用 假如你掌握了动物细胞融合技术,你想用这种技术来解决哪些问题?解决这些问题的大致思路是怎样的?这样做会有什么风险?请查阅相关资料,完善自己的思路,并形成文字报告,与同学交流。
提示:可以利用动物细胞融合技术培育多倍体胚胎,研究其发育机制,甚至可能培育出新的物种。但是,目前相关技术还不成熟,存在融合率低、胚胎死亡率高等问题,并且还可能带来一些伦理方面的问题。
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