高中生物人教版 (2019)选择性必修3一 微生物的基本培养技术课堂检测

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1．(2023·广东名校联考)下列有关微生物营养物质的叙述中，正确的是( )
A．是碳源的物质不可能同时是氮源
B．微生物培养所需的培养基都需要提供碳源、氮源、水、无机盐，缺一不可
C．牛肉膏蛋白胨培养基属于合成培养基，营养全面
D．微生物在固体培养基表面生长，可形成肉眼可见的菌落
【答案】D
【解析】是碳源的物质同时也可以是氮源，如牛肉膏和蛋白胨均可作为碳源和氮源，同时还提供维生素，A错误；并非所有微生物的培养基中都必须含有碳源、氮源，如自养的微生物不需要碳源，固氮微生物不需要氮源，B错误；牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的培养基，属于天然培养基，C错误；固体培养基可用于微生物的分离鉴定，微生物在固体培养基表面生长，可形成肉眼可见的菌落，D正确。
2．(2023·广东名校联考)下表为某培养基的配方，有关叙述正确的是( )
A．从物理性质看该培养基属于液体培养基
B．该培养基中属于碳源的物质有葡萄糖、牛肉膏，属于氮源的物质是牛肉膏
C．能在此培养基上生长的只有大肠杆菌
D．该培养基调节合适的pH后就可以接种使用
【答案】B
【解析】从物理性质看该培养基含有琼脂，属于固体培养基，A错误；培养基中属于碳源(为微生物提供碳元素)的物质有葡萄糖、牛肉膏，属于氮源(为微生物提供氮元素)的物质是牛肉膏，B正确；很多微生物都能利用葡萄糖，此培养基中能生长多种微生物，不仅仅只有大肠杆菌，C错误；该培养基调节合适的pH后要进行高压蒸汽灭菌操作，D错误。
3．据报道，在某餐馆就餐的多位客人均在餐后半小时出现恶心、呕吐、腹泻等症状。食品卫生监督管理局的工作人员接到群众举报后立即出动，在该餐馆采集样本，并对样本进行培养，检测鉴定，最终发现该餐馆使用的筷子未经严格消毒，大肠杆菌等多种细菌数量严重超标。据此判断，工作人员选用的培养基按功能分，应属于( )
A．选择培养基B．液体培养基
C．固体培养基D．鉴别培养基
【答案】D
【解析】由题干信息分析可知，食品卫生监督管理局的工作人员通过培养样本，发现样本中含有多种细菌，最后确定其中含有大肠杆菌等菌种，故该培养基按功能分，属于鉴别培养基。
题组二 无菌技术
4．(2023·广东广州期中)消毒和灭菌是微生物培养中常用的操作方法。下列说法正确的是( )
A．在100 ℃条件下煮沸5～6分钟属于灭菌方法，可杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢
B．无菌技术中，若处理对象为液体，则只能消毒，不能灭菌
C．实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触
D．高压蒸汽灭菌锅只有当压力表的压力降到一个标准大气压时，才能打开盖子
【答案】C
【解析】在100 ℃条件下煮沸5～6分钟属于煮沸消毒法，可杀死微生物的营养细胞，不能杀死芽孢，A错误；无菌技术中，若处理对象为液体，可以采用高压蒸汽灭菌法灭菌，B错误；实验操作时应避免已灭菌处理的材料用具与周围物品接触，以防止杂菌污染，C正确；高压蒸汽灭菌后需要待压力降至零位时，打开放气阀，待蒸汽完全放出后，打开容器，取出灭菌物品，D错误。
5．(2023·广东名校阶段练习)微生物培养过程中，要十分重视无菌操作，请分析下列操作，正确的项数是( )
①培养基、锥形瓶都要进行干热蒸汽灭菌 ②加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌 ③家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌 ④干热灭菌可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢 ⑤涂布平板时所用的涂布器需酒精浸泡后灼烧灭菌 ⑥家庭制作泡菜并无刻意的灭菌环节，发酵初期乳酸菌产生的乳酸可以抑制其他微生物的生长
A．一项B．二项
C．三项D．四项
【答案】B
【解析】培养基应进行高压蒸汽灭菌，①错误；加入培养基中的指示剂和染料需要灭菌，否则会感染杂菌，影响微生物的培养，②错误；家庭制作葡萄酒时将容器和葡萄进行消毒，不需要灭菌，③错误；煮沸消毒可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢，而灭菌，例如干热灭菌能杀灭环境中一切微生物，包括孢子和芽孢，④错误；涂布平板时所用的涂布器需70%酒精浸泡后在酒精灯火焰上进行灼烧灭菌，⑤正确；家庭制作泡菜时需要将容器进行清洗消毒，但不需要刻意灭菌，⑥正确。
题组三 微生物的纯培养
6．下列关于倒平板及对菌种纯化的说法，正确的是( )
A．倒平板时左手将灭过菌的培养皿盖完全打开，右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿(10～20 mL)，左手立即盖上培养皿盖
B．使用已灭菌的接种环及培养基之后不需要再灭菌
C．平板冷凝后要将平板倒置，以防皿盖上的冷凝水流入培养基
D．平板划线法是首先进行梯度稀释，然后将稀释的菌种通过接种环在固体培养基上连续划线，从而将聚集的菌种逐渐分散形成单个菌落
【答案】C
【解析】倒平板时用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，而不是直接将盖完全打开，A错误；使用灭过菌的接种环及培养基之后仍需进行灭菌处理，以免污染环境或感染操作者，B错误；平板冷凝后要倒置放置，防止皿盖上的冷凝水珠落入培养基，C正确；平板划线法不需要梯度稀释，直接通过接种环在固体培养基上连续划线，从而将聚集的菌种逐渐稀释、分散，形成单个菌落，D错误。
7．下列有关微生物的分离与培养的叙述中，不正确的是( )
A．获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染
B．倒置平板可防止培养皿盖上的冷凝水滴落造成污染
C．倒平板时将培养皿的盖拿开，以便于将锥形瓶中的培养基倒入培养皿
D．检验培养基是否被杂菌污染的最有效方法是将未接种的培养基放在恒温箱中培养
【答案】C
【解析】微生物培养中获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染，A正确；倒平板后需要将培养皿倒置，目的是防止培养皿盖上的冷凝水滴落，造成污染，B正确；倒平板时左手拿起一套培养皿，用中指、无名指和小指托住培养皿底部，用食指和大拇指夹住皿盖并开启一缝，恰好能让三角瓶伸入，随后倒出培养基，C错误；检验培养基是否被杂菌污染的最有效方法是将未接种的培养基放在恒温箱中培养，一段时间后若有菌落，说明培养基被污染，若无菌落，说明培养基没有被污染，D正确。
8．有关纯化酵母菌实验操作的叙述，错误的是( )
A．在第二区域内划线时，接种环上的菌种直接来源于菌液
B．第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物
C．每次划线前，灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种
D．划线结束后，灼烧接种环能及时杀死接种环上的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者
【答案】A
【解析】在第二区域内划线时，接种环上的菌种直接来源于第一区域的划线末端，A错误；为避免杂菌的污染，第一步操作时需要灼烧接种环，B正确；每次划线前，灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种，C正确；为避免细菌污染环境和感染操作者，划线结束后，灼烧接种环能及时杀死接种环上的菌种，D正确。
9．(2023·广东惠州期中)为纯化某菌种，某小组在鉴别培养基上划线接种了该种细菌，培养结果如图所示。下列叙述正确的是( )
A．图中的菌落均由同种微生物形成
B．该过程中接种环至少灼烧3次
C．该培养基使用完之后，无需再进行灭菌处理
D．从3区菌落挑取后进行培养可获得纯培养物
【答案】D
【解析】同种微生物形成的菌落大小、形状、颜色等特征较为稳定，而图中菌落特征不一定完全相同，且实验是在鉴别培养基上进行的菌种纯化，故图中的菌落不一定由同种微生物形成，A错误；接种时，需要在第一次接种前以及每一次接种后灼烧接种环，因此接种过程中接种环共需4次灼烧处理，B错误；该培养基使用完之后，需要进行灭菌处理才能丢弃，避免造成污染，C错误；由图可知，3区存在单菌落，挑取一个单个菌落进行纯培养，可获得纯培养物，D正确。
[能力提升]
10．(2023·广东名校阶段练习)大肠杆菌是人和动物肠道寄生菌，在一定条件下会引起胃肠道等局部组织感染。检验水样中大肠杆菌数目是否符合生活饮用水卫生标准，常用滤膜法测定，其操作流程如下图所示。大肠杆菌的代谢物能与伊红亚甲蓝(EMB培养基的指示剂)反应，菌落呈深紫色。下列对该实验操作的分析，错误的是( )
A．测定前，滤杯、滤膜和滤瓶均可用干热灭菌法灭菌处理
B．注意避免已灭菌处理的材料用具与周围用品接触
C．将过滤完的滤膜紧贴在EMB培养基上，完成大肠杆菌的接种操作
D．EMB培养基属于选择培养基，只有大肠杆菌能正常生长并形成深紫色菌落
【答案】D
【解析】干热灭菌法适用于滤杯、滤膜和滤瓶的灭菌，防止杂菌的污染，A正确；已灭菌处理的材料用具需要避免与周围用品接触，否则会被重新感染，导致灭菌失败，B正确；由于过滤完后细菌黏附在滤膜上，将滤膜紧贴在EMB培养基上可以将黏附在滤膜上的菌种接种在培养基上，C正确；EMB培养基属于鉴别培养基，D错误。
11．(2023·广东佛山期中)将没有吃完的西瓜盖上保鲜膜后放入冰箱，是很多人日常储藏西瓜的办法。近年来网络上有一种观点认为盖上保鲜膜储藏的西瓜中细菌种类和数目反而比没用保鲜膜的多，某生物研究小组针对上述说法进行探究，他们将盖保鲜膜保存了三天的西瓜的瓜瓤制备成浸出液，再将浸出液接种到培养基平板上进行观察，下列说法正确的是( )
A．因为接种的浸出液中含氮，所以培养基可不加氮源
B．只需要设置未接种瓜浸出液的空白平板作对照
C．培养一段时间后应统计培养基上菌落的种类和数量
D．平板中长出的菌落是由一个细胞增殖而成的子细胞群体
【答案】C
【解析】浸出液虽然含有氮，但由于接种时取用的浸出液少，因此培养基上氮含量少，故培养基要加入氮源，A错误；探究盖上保鲜膜储藏的西瓜中细菌的种类和数目是否比没用保鲜膜的多，除了需要设置未接种瓜瓤浸出液的空白平板作对照外，还需要设置接种没用保鲜膜盖上的瓜瓤浸出液的平板作对照，B错误；由题意可推知，该实验的因变量是菌落的种类和数量，所以培养一段时间后，应统计培养基上菌落的种类和数量，C正确；平板中长出的菌落是可能由一个或多个细胞增殖而成的子细胞群体，D错误。
12．请回答下列与大肠杆菌有关的问题。
(1)下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。
该培养基属于______(填“固体”或“液体”)培养基，该培养基中的氮源是________ ____________________。
(2)在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行________(填“消毒”或“灭菌”)；操作者的双手需要进行清洗和________。
(3)将配制好的培养基分装到试管中，加棉塞后若干支试管扎成一捆，包上牛皮纸并用皮筋勒紧放入________________中灭菌，温度为121 ℃，时间为15～30 min。灭菌完毕拔掉电源，待锅内压力自然降到零，同时温度到达70 ℃以下时，再慢慢打开排气阀以排除余气，将试管取出。
(4)从一支试管向另一支试管接种时应注意，接种环要在酒精灯________________(填“火焰的不充分燃烧层”或“火焰的充分燃烧层”)灭菌，并且待接种环________后蘸取菌种。
【答案】(1)固体 蛋白胨 (2)灭菌 消毒
(3)高压蒸汽灭菌锅 (4)火焰的充分燃烧层 冷却
13．某化工厂的污水池中含有一种有害的、难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌)。实验的主要步骤如图所示。请分析并回答下列问题。
(1)培养基中加入化合物A的目的是____________，这种培养基属于________培养基。
(2)目的菌生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的________。实验需要振荡几次进行培养，由此推测目的菌的代谢类型是______________________。
(3)转为固体培养基时，常采用平板划线的方法进行接种，在进行下一区域划线前要将接种环__________________。
(4)研究人员统计污水池中“目的菌”的总数，选用1×10-4、1×10-5、1×10-6倍稀释液进行涂布平板，每种稀释液都设置了3个培养皿。从设计实验的角度看，还应设置的一组对照实验是____________________________，
设置此对照实验的目的是___________________________________________。
(5)研究人员采用平板划线法纯化水样中分离出的细菌。操作时，在第二次及以后的划线，总是从上一次划线的末端开始划线，这样做的目的是______________________________________。划线的某个平板培养后，第一划线区域的平行线上都不间断地长满了菌落，第二划线区域所划的第一条平行线上无菌落，其他平行线上有菌落。造成第一条平行线无菌落可能的操作失误有____________________________。
(6)在示意图A和图B中，________表示的是用平板划线法接种培养后得到的结果。
eq \(\s\up7(),\s\d5(A)) eq \(\s\up7(),\s\d5(B))
【答案】(1)筛选目的菌 选择
(2)化合物A 异养需氧型
(3)灼烧并冷却
(4)不接种的空白培养基 检验培养基制备过程中是否被杂菌污染
(5)将聚集的菌种逐步稀释以便获得单个菌落 接种环灼烧后未冷却或划线未从第一划线区域末端开始
(6)A
【解析】(1)培养基中加入化合物A是为分解化合物A的微生物提供碳源和氮源，分离出能分解化合物A的微生物；这种培养基从功能上分属于选择培养基。(2)分析培养基的配方可知，该培养基由化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制而成，因此化合物A为目的菌提供了碳源和氮源；目的菌是需氧微生物，因此在培养过程中应该振荡培养，增加培养液中的溶氧量，满足微生物对氧气的需求。(3)平板划线操作的工具是接种环，对于接种环的灭菌方法应该是灼烧灭菌。(4)实验设计过程应遵循对照原则，该实验还应增设一组不接种的空白培养基作为对照，以证明培养基制备是否被杂菌污染。(5)对接种环常用的灭菌方法是灼烧灭菌；在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，其目的是将聚集的菌种逐渐稀释分散以便获得由单个细胞繁殖而来的菌落。接种环在使用前和每一次划线后要进行灼烧灭菌，造成划线无菌落可能的操作失误是接种环灼烧后未冷却而烫死菌种或划线未从第一区域末端开始。(6)分析题图可知，A培养皿采用的接种方法是平板划线法。成分
牛肉膏
葡萄糖
K2HPO4
琼脂
蒸馏水
含量
10 g
10 g
2 g
适量
定容至1 000 mL
成分
蛋白胨
乳糖
蔗糖
K2HPO4
显色剂
琼脂
含量/g
10.0
5.0
5.0
2.0
0.2
12.0
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容至1 000 mL