河北省张家口市尚义县第一中学等校2023-2024学年高二下学期3月月考生物试题（原卷版+解析版）

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注意事项：1.考试时间为75分钟，满分100分。
2.全部答案在答题卡上完成，答在本试卷上无效。
一、单项选择题：本题共13小题，每小题2分，共26分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。
1. 下列关于传统发酵技术和腐乳制作的叙述正确的是（ ）
A. 传统发酵技术一般直接利用原材料中天然的微生物
B. 传统发酵以单一菌种的液体发酵为主
C. 多种微生物参与腐乳的发酵，起主要作用的是酵母菌
D. 豆腐中的蛋白质被微生物产生的蛋白酶全部分解为氨基酸
【答案】A
【解析】
【分析】参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。
【详解】A、传统发酵技术是指直接利用原材料中天然存在的微生物，或利用前一次发酵保存下来的发酵物中的微生物进行发酵、制作食品的技术，A正确；
B、传统发酵以混合菌种的固体发酵和半固体发酵为主，B错误；
C、在制作腐乳的过程中，多种微生物参与了豆腐的发酵，比如毛霉、酵母菌等，其中起主要作用的是毛霉，C错误；
D、豆腐中的蛋白质被微生物产生的蛋白酶分解为多肽和氨基酸，D错误。
故选A。
2. 葡萄酒的制作离不开酵母菌。下列说法正确的是（ ）
A. 葡萄酒制作过程中，将容器密封可以促进酵母菌生长
B. 制作过程中随着发酵的进行发酵液中糖含量增加
C 发酵过程中，酒坛中无气泡产生
D. 应先用清水冲洗，再去除枝梗和腐烂的籽粒
【答案】D
【解析】
【分析】果酒制备的菌种是酵母菌，条件：温度18-25℃，先通气后密闭。通气阶段，酵母菌有氧呼吸获得能量大量繁殖，密闭阶段发酵产生酒精。
【详解】A．葡萄酒制作过程中，有氧条件下促进酵母菌的生长繁殖，A错误；
B．制作过程中随着发酵的进行发酵液中糖逐渐被分解，含量降低，B错误；
C．发酵过程中，酒坛中会产生二氧化碳，有气泡产生，C错误；
D．为避免杂菌污染，应先用清水冲洗，再去除枝梗和腐烂的籽粒，D正确。
故答案为：D。
3. 下列有关培养基的叙述错误的是（ ）
A. 培养细菌时，一般需要将pH调至中性或弱碱性
B. 筛选、培养硝化细菌的培养基中不能加入氮源
C. 尿素分解菌和纤维素分解菌的培养基中可能含有相同的无机盐
D. 在进行微生物的富集培养时常选用液体培养基
【答案】B
【解析】
【分析】1、大多数微生物最适生长pH值为5～9；大多数细菌的最适生长pH值为6.5～7.5；霉菌最适生长pH值为4.8～5.8；酵母菌最适生长pH值为3.5～6.0；
2、分解尿素的细菌的鉴定：细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌，若指示剂变红，可确定该种细菌能够分解尿素。
【详解】A．大多数细菌的最适生长pH值为6.5～7.5，培养细菌时，一般需要将pH调至中性或弱碱性，A正确；
B．硝化细菌属于化能合成型自养微生物，因此制备培养硝化细菌的培养基不需要添加碳源，但需要添加氮源，B错误;
C．培养基的组成成分包括碳源、氮源，水、无机盐，因此尿素分解菌和纤维素分解菌的培养基中可能含有相同的无机盐，C正确；
D．液体培养基可以增大菌体与培养基的接触面积，为菌株的生长和繁殖提供更多的营养和空间，所以在进行微生物的富集培养时常选用液体培养基，D正确。
故答案为：B。
4. 下列关于微生物实验操作的叙述，正确的是（ ）
A. 对培养基常用的灭菌方法有干热灭菌、灼烧灭菌和煮沸灭菌等
B. 涂布接种时，需将涂布器直接用酒精灯外焰灼烧，冷却后再使用
C. 用平板划线法和稀释涂布平板法都能在固体培养基上得到单菌落
D. 用灼烧冷却后的接种环取酵母菌纯培养物，连续划五个区后，再灼烧一次接种环
【答案】C
【解析】
【分析】1、微生物常见的接种的方法：（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
2、实验室常用的灭菌方法：①灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌。②干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌。③高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100kPa，温度为121℃的条件下，维持15～30min。
【详解】A．高压蒸汽灭菌适用于对一般培养基和玻璃器皿的灭菌；干热灭菌适用于需要保持干燥的空玻璃器皿的灭菌，凡带有橡胶的物品和培养基，都不能进行干热灭菌；煮沸灭菌通常不能彻底杀灭一些微生物的孢子和芽孢，一般适用于餐具或不耐高温的食品等的消毒，A错误；
B．涂布接种时，需将涂布器浸酒精后在酒精灯外焰上引燃，冷却后再使用，防止高温杀死菌种，B错误；
C．平板划线法和稀释涂布平板法是微生物常见的接种方法，都能在固体培养基上得到由单个细胞形成的单菌落，C正确；
D．每次接种或划线前，都需要灼烧一次接种环，接种或划线完成后，再灼烧一次接种环，消除环上残留的细菌，避免细菌污染他处，D错误。
故答案为：C
5. 纸片扩散法是药敏试验中一种常用的方法。取少量大肠杆菌的培养液，均匀涂在培养皿内的培养基上，再放上4片含有链霉素（抗生素的一种）的圆形滤纸，然后在无菌适宜条件培养12~16h，滤纸片周围出现抑制大肠杆菌生长的环圈（简称抑菌圈，见下图）。下列相关叙述正确的是（ ）

A. 图1中的培养基需冷却至80℃左右时再倒平板
B. 图1和图2过程的操作均需要在酒精灯火焰旁完成
C. 图3中Ⅱ形成的抑菌圈较小，可能是病原微生物对该浓度的链霉素较敏感
D. 图3抑菌圈中的菌落可能是对链霉素具有抗性的突变株
【答案】D
【解析】
【分析】抑菌圈的大小可以反映测试菌对药物的敏感程度。抑菌圈越大，说明该菌对此药敏感性越大，反之越小，若无抑菌圈，则说明该菌对此药具有耐药性。透明圈直径大小与药物浓度、细菌浓度有直接关系。
【详解】A．对培养液进行灭菌后需冷却（至50℃左右）再倒平板，倒平板时应在酒精灯前进行，可以尽可能减少培养基污染，A错误；
B．图1是倒平板，需要在酒精灯旁完成， 图2中是培养基的放置方式，不需要在酒精灯旁完成，B错误；
C．抑菌圈越小说明抑菌效果越差，即大肠杆菌对该抗生素敏感性越弱，C错误；
D．图3的抑菌圈中出现了少数几个菌落说明这几个菌落出现了抗药性，抗药性的获得是由于这些细菌发生了基因突变，D正确。
故答案为：D。
6. 利用微生物分解纤维素的特点对废弃物污染的减轻和作物秸秆再利用具有重要意义。某兴趣小组从富含纤维素的土壤中取样，加入选择培养基中进行振荡培养，之后接种于鉴别培养基上进行培养，筛选出能够菌落高效分解纤维素的微生物。已知刚果红与纤维素能形成红色复合物，当纤维素被分解后，复合物无法形成，平板上会出现以菌落为中心的透明圈（如图）。下列叙述错误的是（ ）

A. 该过程中的选择培养基和鉴别培养基均需以纤维素为唯一碳源
B. 选择培养的目的是促进纤维素分解菌生长，抑制其他微生物的生长
C. 鉴别培养基上涂布接种时，将1mL菌液滴到培养基表面再用涂布器涂布均匀
D. 图中可根据菌落与透明圈的直径比来挑选优质菌落
【答案】C
【解析】
【分析】从土壤中分离纤维素分解菌的一般步骤是：土壤取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株；筛选纤维素分解菌需要用以纤维素为唯一碳源的选择培养基，纤维素分解菌可以用刚果红染液进行鉴别，在培养基中加入刚果红染液，在其菌落周围会出现透明圈。
【详解】A．纤维素分解菌选择培养基是选择会分解纤维素的细菌，淘汰其他细菌，而鉴定培养基是鉴定有没有种会分解纤维素的细菌，因此需以纤维素为唯一碳源，A正确；
B．B、选择培养的原理是人为提供有利于目的菌生长的条件，同时抑制或阻止其他微生物的生长，因此选择培养的目的是促进纤维素分解菌生长，抑制其他微生物的生长，B正确；
C．鉴别培养基上涂布接种时，将0.1mL菌液滴到培养基表面再用涂布器涂布均匀，C错误；
D．B、透明圈的大小反映了菌落利用此物质的能力。一般菌落直径越小，透明圈的直径越大，说明这种菌它分解这种物质的能力越强，因此可根据菌落与透明圈的直径比来挑选优质菌落，D正确。
故选C。
7. 下列对发酵工程及其应用的叙述正确的是（ ）
A. 用单细胞蛋白制成的微生物饲料，可通过发酵工程从微生物细胞中提取
B. 分离、提纯获得微生物细胞本身或其代谢产物是发酵工程的中心环节
C. 发酵过程中要随时检测培养液中的微生物数量
D. 啤酒酿造中发芽的大麦和啤酒花释放的淀粉酶可将淀粉进行糖化
【答案】C
【解析】
【分析】发酵工程生产的产品主要包括微生物的代谢产物、酶及菌体本身。产品不同，分离提纯的方法一般不同：（1）如果产品是菌体，可采用过滤，沉淀等方法将菌体从培养液中分离出来；（2）如果产品是代谢产物，可用萃取、蒸馏、离子交换等方法进行提取。
【详解】A、单细胞蛋白即微生物菌体，不需要从微生物细胞中提取，A错误；
B、发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节，B错误；
C、环境条件不仅会影响微生物的生长繁殖，而且会影响微生物代谢物的形成，因此，发酵过程中需要随时取样检测培养液中的微生物数目、产物浓度，C正确；
D、啤酒酿造中发芽的大麦释放的淀粉酶可将淀粉进行糖化，D错误。
故选C。
8. 工业上所说发酵是指微生物在有氧或无氧条件下通过分解与合成代谢将某些原料物质转化为特定产品的过程。使用发酵罐（如图）可进行啤酒的工业发酵。下列说法错误的是（ ）
A. 发酵工程的形成离不开微生物纯培养技术的建立及发酵罐等设备的成功设计
B. 发酵过程中需不断向发酵罐中添加菌种
C. 啤酒的工业化生产过程中，酒精的产生积累主要在主发酵阶段完成
D. 若该装置用于谷氨酸的发酵生产，则应将pH调节为中性或弱碱性
【答案】B
【解析】
【分析】发酵工程一般包括菌种的选育、扩大培养、培养基的配制、灭菌、接种、发酵、产品的分离、提纯等方面。
【详解】A、科学技术的应用离不开理论的支持和设备等工具的进步，因此发酵工程的形成离不开微生物纯培养技术的建立及发酵罐等设备的成功设计，A正确；
B、发酵过程中不需要不断向发酵罐中添加菌种，在接种环节已经完成，B错误；
C、啤酒的工业化生产过程中，发酵过程分为主发酵和后发酵两个阶段，酒精的产生和积累主要在主发酵阶段完成，C正确；
D、由于谷氨酸显酸性，随着它的积累pH变化趋势会下降，控制办法是加碱（或氨水)，以保持pH的相对稳定.谷氨酸发酵过程中当培养液呈中性或弱碱性时，会积累谷氨酸，D正确。
故选B。
9. 下图为烟草植物组织培养过程的流程图。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 对过程①获取的根组织块需用适宜浓度的乙醇和次氯酸钠的混合液消毒
B. 过程②全过程均需避光进行，过程③需置于光照条件下
C. 过程②获得愈伤组织的过程通常要使用生长素和细胞分裂素
D. 用同一植株体细胞离体培养获得的再生苗可能会出现不同变异
【答案】A
【解析】
【分析】1、离体的植物组织或细胞，在培养一段时间后，会通过细胞分裂形成愈伤组织。愈伤组织的细胞排列疏松而无规则，是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞。由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程，称为植物细胞的脱分化。脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官，这个过程叫做再分化。再分化形成的试管苗，移栽到地里，可以发育成完整的植株体。
2、植物组织培养中生长素和细胞分裂素使用比例对植物细胞发育的影响：生长素用量比细胞分裂素用量，比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低时，有利于芽的分化、抑制根的形成。比值适中时，促进愈伤组织的形成。
【详解】A、植物组织培养获得的植株外植体需用70%的酒精消毒处理，然后再用5%的次氯酸钠进行消毒处理，清洗时用无菌水，A错误；
B、植物组织培养过程②中愈伤组织的诱导往往需要暗培养，再分化需要有光照，B正确；
C、植物组织培养中生长素和细胞分裂素使用比例对植物细胞发育的影响，比值适中时，促进愈伤组织的形成，C正确；
D、用同一植株体细胞离体培养获得的再生苗会出现变异，如在愈伤组织的培养过程中可能发生基因突变等变异，D正确。
故选A。
10. 植物细胞工程在农业、医药等方面有着广泛的应用，并且取得了显著的社会效益和经济效益。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 对茎尖脱分化形成的愈伤组织需用射线处理后方可得到脱毒苗
B. 可采用诱变处理烟草愈伤组织的方法来获得烟草抗盐碱突变体
C. 玉米（2n=20）的花粉经植物组织培养可获得二倍体幼苗
D. 若培育的是耐盐植株，则可将获得的试管苗直接移栽于含高盐土壤中进行筛选后，再推广栽培
【答案】B
【解析】
【分析】1、植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（微型繁殖、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产；
2、脱毒苗的获取：植物顶端分生区附近（如茎尖）的病毒极少，甚至无病毒。因此，切取一定大小的茎尖进行组织培养，再生的植株就有可能不带病毒，从而获得脱毒苗。
【详解】A．脱毒苗不等同于抗病毒，培育脱毒苗时，一般选取茎尖（或芽尖或根尖）作为外植体，因为植物分生区附近（茎尖）病毒极少，甚至无病毒，再利用植物组织培养技术将外植体培育成幼苗，对茎尖脱分化形成的愈伤组织需用射线处理后不能得到脱毒苗，A错误；
B．愈伤组织细胞分裂能力强，易受外界环境条件影响，可采用诱变处理烟草愈伤组织并筛选得到烟草抗盐碱突变体，B正确；
C．玉米花粉粒经花药离体培养得到的植株属于单倍体，不是二倍体幼苗，C错误；
D．若培育的是耐盐植株，则可将获得的试管苗先移栽至适宜的培养液中培养一段时间再移栽于含高盐土壤中进行筛选后，再推广栽培，D错误。
故答案：B
11. 为了获得植物次生代谢产物，先用植物外植体获得愈伤组织，然后在液体培养基中进行细胞悬浮培养。多倍体愈伤组织细胞产生的次生代谢产物量常高于二倍体。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 次生代谢产物是植物基本生命活动所必需的，但其在植物细胞中含量很少
B. 愈伤组织是由高度分化的一团薄壁细胞组成，无特定形态
C. 经生长素诱导会使细胞中染色体数目加倍，进而获得高产的多倍体细胞
D. 通过植物细胞培养获得次生代谢产物的过程没有体现细胞的全能性
【答案】D
【解析】
【分析】1、植物组织培养就是在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株；
2、植物组织培养的条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。
【详解】A．次生代谢产物不是植物基本生命活动所必需的，A错误；
B．愈伤组织是无定型状态，具有高度液泡化的薄壁细胞，已失去分化的特征，B错误；
C．生长素并没有改变遗传物质的功能，因此生长素不会诱导使细胞中染色体数目加倍，C错误；
D．细胞的全能性是指细胞经分裂和分化后，仍具有产生完整有机体或分化成其他各种细胞的潜能和特性，而通过植物细胞培养获得次生代谢产物的过程没有体现细胞的全能性，D正确。
故答案为：D
12. 植物体细胞杂交育种的一个重要应用是将具有生殖隔离的栽培品种（二倍体）与相关的野生资源（二倍体）作为亲本，经过原生质体融合、选择与再生，使栽培品种获得野生型的抗性特征。下列说法正确的是（ ）
A. 该过程需要考虑栽培品种和野生资源亲缘关系的远近
B. 由亲本体细胞杂交可获得可育的异源四倍体
C. 由杂种细胞→杂种植株，该过程的原理是细胞膜的流动性
D. 两种植物杂交后，得到的F1再利用单倍体育种，也可较快获得所需植株
【答案】A
【解析】
【分析】植物体细胞杂交技术将来自两个不同植物的体细胞融合成一个杂种细胞（植物体细胞杂交技术），把杂种细胞培育成植株（植物组织培养技术）。其原理是植物细胞具有全能性和细胞膜具有流动性。杂种细胞再生出新的细胞壁是体细胞融合完成的标志，细胞壁的形成与细胞内高尔基体有重要的关系。植物体细胞杂交技术可以克服远源杂交不亲和的障碍、培育作物新品种方面所取得的重大突破。
【详解】A、体细胞杂交虽然能克服远缘杂交不亲和的障碍，但该过程也需要考虑栽培品种和野生资源亲缘关系的远近，A正确；
B、由亲本体细胞杂交可获得可育的同源四倍体，B错误；
C、由杂种细胞→杂种植株，该过程的原理是植物细胞的全能性，C错误；
D、两种植物杂交后得到的F1表现为不可育，不能产生正常的配子，因而不能利用单倍体育种的操作手段较快获得所需植株，D错误。
故选A。
13. 以四倍体（基因型为AAaa）植株的花药为外植体经植物组织培养获得植株的过程如下图所示，下列相关叙述错误的是（ ）
A. 在离体条件下，花粉经过脱分化和细胞分裂形成不定形的愈伤组织
B. 若用植株根尖进行植物组织培养，有望获得脱毒苗
C. 图示过程获得的试管苗，均为单倍体
D. 利用花药经植物组织培养技术获得植株的育种方法称为单倍体育种
【答案】D
【解析】
【分析】离体的植物组织或细胞，在培养一段时间后，会通过细胞分裂形成愈伤组织。愈伤组织的细胞排列疏松而无规则，是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞。由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程，称为植物细胞的脱分化。脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官，这个过程叫做再分化。再分化形成的试管苗，移栽到地里，可以发育成完整的植株体。
【详解】A、在离体条件下，花粉经过脱分化转变成为具有分生能力的薄壁细胞，进而形成植物的愈伤组织，A正确；
B、根尖几乎不含病毒，因此利用茎尖组织进行植物组织培养可得到脱毒苗，B正确；
C、此过程为花药离体培养的过程，AAaa产生的花粉有3种，即AA、aa和Aa，均为单倍体，C正确；
D、利用花药经植物组织培养技术获得单倍体幼苗，然后人工诱导染色体数目加倍获得正常纯合子，该过程为单倍体育种，D错误。
故选D。
二、多项选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有两个或两个以上选项符合要求，全部选对的得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。
14. 新鲜蔬菜不易保存，人们将其制成泡菜，既改变口味又增加了储存时间。《中馈录》中记载：“泡盐菜法，定要覆水坛。此坛有一外沿如暖帽式，四周内可盛水；坛口覆一盖，浸于水中，…则所泡之菜不坏矣。”下列说法不正确的是（ ）
A. 在泡菜发酵过程中，坛中无氧环境的创设仅依靠盐水浸没蔬菜就能实现
B. 在发酵的中期，泡菜坛内各种微生物大量繁殖
C. 若制作的泡菜咸而不酸，可能的原因是加入食盐过多，抑制了乳酸菌发酵
D. 腌制过程中乳酸和亚硝酸盐的含量会先增加后减少再趋于稳定
【答案】AB
【解析】
【分析】1、泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸；
2、泡菜的制作过程：将盐、水煮沸冷却。将经过预处理的新鲜蔬菜混合均匀，装入泡莱坛内，装至半坛时，放入蒜瓣、生姜及其他香辛料，继续装至八成满，再徐徐注入配制好的盐水，使盐水没过全部菜料，盖好坛盖。向坛盖边沿的水槽中注满水，以保证坛内乳酸菌发酵所需的无氧环境。在发酵过程中要注意经常向水槽中补充水。发酵时间长短受室内温度的影响。
【详解】A．在泡菜发酵过程中，坛中无氧环境的创设，不仅依靠盐水浸没蔬菜，还要在坛盖边沿的水槽中注满水，以保证坛内的无氧环境，A错误；
B．发酵中期，无氧状态形成，乳酸菌开始活跃，并产生大量乳酸，pH下降，大肠杆菌、酵母菌等杂菌的活动受到抑制，由于氧气耗尽，需氧型微生物的活动也受到抑制，因此其它微生物的数量下降，B错误；
C．若泡菜咸而不酸，可能是食盐过多，抑制了乳酸菌的发酵，产生的乳酸含量较少，C正确；
D．泡菜制作过程中，在初期亚硝酸盐含量很低，随硝酸还原菌的繁殖，促进硝酸盐还原为亚硝酸盐，含量会随天数增多逐渐升高；但随腌制时间延长，乳酸菌大量繁殖产生的乳酸，抑制了硝酸盐还原菌的繁殖，亚硝酸盐的含量逐渐降低，同时乳酸菌活动也受到抑制，因此制作泡菜过程中，乳酸和亚硝酸盐的含量变化趋势为先增加后减少再趋于稳定，D正确。
故答案为：AB
15. 为探究校内植物园土壤中的细菌种类，某兴趣小组采集园内土壤样本并开展相关实验。下图甲、乙为培养土壤细菌时两种不同的接种方法。下列有关叙述错误的是（ ）

A. 用图甲方法进行微生物计数时，结果往往比实际值低
B. 图甲、乙均为固体培养基，其中的琼脂能为微生物生长提供碳源
C. 土壤溶液稀释倍数越低，越容易得到单菌落
D. 鉴定细菌种类时，除形态学鉴定外，还可借助生物化学的方法
【答案】ABC
【解析】
【分析】1、培养基的营养构成:各种培养基一般都含有水、碳源、氨源、无机盐，此外还要满足微生物生长对 pH、特殊营养物质以及氧气的要求；
2、统计菌落数目的方法:(1)稀释涂布平板法(间接):①当样品的稀释皮足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌;②通过统计平板上的菌落数来推测样品中大约含有的活菌数。 (2)利用显微镜直接计数。
【详解】A．图甲为平板划线法，不能用于微生物的计数，A错误；
B．固体培养基中需要加入琼脂作凝固剂，琼脂不能为微生物生长提供碳源，B错误；
C．土壤溶液稀释倍数足够高时，才能将聚集的细菌分散开，有助于在培养基表面形成单菌落，C错误；
D．不同种类细菌的理化特性一般不同，鉴定细菌种类时，除根据菌落特征进行形态学鉴定外，还可以借助生物化学的方法进行鉴定，D正确。
故答案为：ABC。
16. 如图是研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素细菌的过程示意图，有关叙述错误的是（ ）
A. 获得高效分解尿素细菌纯培养物的关键是防止杂菌污染，故应对红棕壤、培养基及用具进行灭菌
B. 步骤③采用涂布平板法接种，并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素
C. 若要判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置未接种的牛肉膏蛋白胨培养基作为对照
D. 步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种，分解尿素能力高的会产生更多得NH3，溶液pH更高
【答案】ABC
【解析】
【分析】1、培养基的概念、种类及营养构成：（1）概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质。（2）种类：固体培养基和液体培养基。（3）营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求；
2、微生物常见的接种的方法：
（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种、划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；
（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】A、红棕壤中筛选微生物，不能对其灭菌，A错误；
B、步骤③筛选分解尿素的细菌，培养基中应以尿素为唯一氮源，不能加入牛肉膏蛋白胨，B错误；
C、若要判断选择培养基是否起到了选择作用，应该用接种了的全营养培养基作对照，即接种了的牛肉膏蛋白胨培养基来培养细菌，C错误；
D、步骤④鉴定细菌分解尿素的能力时，挑取③中不同种的菌落分别接种，比较细菌分解尿素的能力，分解尿素能力高的会产生更多得NH3，溶液pH更高，D正确。
故答案为：ABC。
17. 利用某种微生物发酵生产DHA油脂，可获取DHA（一种不饱和脂肪酸）。下图为发酵过程中物质含量变化曲线。下列叙述正确的是（ ）
A. 发酵工程大多使用单一菌种进行发酵，所以生产过程不需要进行无菌操作
B. 性状优良的菌种既可以从自然界中筛选出来，也可以经过人为改造获得
C. 84h后DHA油脂含量上升缓慢主要原因是蛋白胨含量不足
D. 发酵过程中，葡萄糖既可作为碳源，又可作为能源物质
【答案】BD
【解析】
【分析】1、发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节，在发酵过程中，要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度等，以了解发酵进程，还要及时添加必需的营养组分，要严格控制温度、PH和溶解氧等发酵条件；
2、题图分析：横坐标为发酵时间，纵坐标为发酵过程各种相关物质的含量及生物量。从图可知，随着发酵的进行，葡萄糖逐渐减少，发酵到96h左右减少至0；蛋白胨在0~12h间快速减少，然后缓慢减少，发酵到96小时左右减少至0；生物量和DHA油脂的产量随着发酵进程逐渐上升。
【详解】A、发酵工程大多使用单一菌种进行发酵，但生产过程仍需要进行无菌操作，防止杂菌污染，A错误；
B、性状优良的菌种既可以从自然界中筛选出来，也可以经过人为改造获得，B正确；
C、DHA油脂是一种不饱和脂肪酸，含C、H、O不含N，84h后DHA油脂含量上升缓慢主要原因是葡萄糖含量不足，C错误；
D、发酵液中葡萄糖被微生物吸收用于呼吸作用产生能量，供其合成DHA油脂，所以发酵过程中，葡萄糖既可作为碳源，又可作为能源物质，D正确。
故选BD。
18. 甲品种青花菜具有由核基因控制的多种优良性状，另一远缘植物乙的细胞质中存在抗除草剂基因，欲将乙细胞质中的抗性基因引入甲中。相关叙述正确的是（ ）

A. 过程A获得的原生质体需悬浮在30%蔗糖溶液中
B. 过程B两两融合的原生质体可能有3种
C. 过程C中只有融合的杂种细胞具有完整的细胞结构，可以正常生长
D. 最终获得的植株与植株甲存在生殖隔离
【答案】ABCD
【解析】
【分析】分析题图：该图为植物体细胞杂交过程，其中A为去除细胞壁，制备原生质体，可用酶解法；B为诱导原生质体融合，可以用聚乙二醇处理；C为培养筛选出所需的杂种细胞；D为脱分化。
【详解】A．过程A获得的原生质体悬浮在30%蔗糖溶液中可以保持原生质体正常的形态、结构和功能，A正确；
B．过程B是原生质体融合，两两融合的原生质体可能有甲-甲型、乙-乙型、甲乙型3种，B正确；
C．过程C中融合细胞的细胞核内含有多种优良性状基因，细胞质内含有抗除草剂基因，具有完整的细胞结构，可以正常生长，C正确；
D．最终获得的植株具有甲乙两种植物的遗传物质，与植株甲存在生殖隔离，D正确。
故答案为：ABCD。
三、非选择题：本题共5小题，共59分。
19. 传说杜康的儿子墨塔在一次酿酒时发酵过头，直至第21天开缸时，发现酒液已变酸但香气扑鼻，酸甜可口，于是他把“廿一日”加“酉”字，给这种酸水起名为“醋”，请回答下列关于果酒果醋制作的相关问题：
（1）温度是影响酒精发酵的重要因素，酿酒酵母的最适生长温度约为______，醋酸菌在缺少______时，可以酒精作为原料将酒制作成醋，工业生产中酿酒转为酿醋时环境条件需要改变为______和______。
（2）第21天开缸时，酒液已变酸的原因可能是__________，相应的化学反应式为__________________。
（3）酿酒时糖类未耗尽，酵母菌的发酵也会停止，原因可能是___________。（写出两点）
【答案】19. ①. 28℃ ②. 糖源 ③. 温度升高到30℃～35℃ ④. 适时充气，以保证有氧条件
20. ①. 发酵装置密封不严、发酵装置没有清洗干净 ②.
21. pH降低、酒精含量增多
【解析】
【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。果酒制作的原理：（1）在有氧条件下，反应式如下：；
（2）在无氧条件下，反应式如下：。
2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸；
3、在利用酵母菌发酵时最好是先通入足够的无菌空气在有氧环境下一段时间使其繁殖，再隔绝氧气进行发酵；酒精发酵的最佳温度是在18℃～25℃，pH最好是弱酸性;醋酸菌好氧性细菌，当缺少糖源时和有氧条件下，可将乙醇（酒精）氧化成醋酸；当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；醋酸菌生长的最佳温度是在30℃～35℃。
【小问1详解】
酿酒酵母的最适生长温度约为28℃，醋酸菌在缺少糖源时，可以酒精作为原料将酒制作成醋；果酒制作通常在缺氧且温度为18℃～25℃的环境中进行，而果醋制作则需要在有氧且温度为30℃～35℃的环境中进行。因此，当发酵装置由果酒酿造转为果醋酿造时，需要提高发酵温度至30℃～35℃；果酒发酵是在缺氧条件下进行的，而果醋发酵需要充足的氧气供应。因此，在果醋制作过程中，需要通过充气口适时充气，以保证有氧条件；
【小问2详解】
发酵装置密封不严、发酵装置没有清洗干净，都会导致墨塔酿酒反成醋。墨塔酿的酒变酸是醋酸菌发酵的结果，相应的化学反应式为：
【小问3详解】
在酿酒的过程中，糖类即使未耗尽，酵母菌的发酵过程也会停止，原因可能是pH降低和酒精含量增多，对发酵起抑制作用，导致酵母菌发酵停止。
20. 啤酒是以麦芽、水为主要原料，加啤酒花（包括啤酒花制品），经酵母菌发酵酿制而成的、含有二氧化碳并可形成泡沫的发酵酒，以大麦芽、啤酒花和水为主要原料发酵生产啤酒的流程如下，回答下列问题：
（1）发酵工程一般包括菌种的选育、______、培养基的配制、灭菌、接种、发酵、产品的分离、提纯等方面。
（2）利用______处理大麦，可以使大麦种子无须发芽就可以产生淀粉酶。加啤酒花后进行蒸煮的目的是_________。
（3）酵母菌的代谢类型是______。酵母菌的繁殖、大部分糖的分解都在____________阶段完成。发酵过程中，杂菌可产生微量副产物是啤酒“上头”的原因之一，可采用______法获得纯净的酿酒微生物，同时对活菌进行计数。
（4）随着发酵技术的发展，啤酒种类逐渐增多，桑葚玫瑰酒是以桑葚汁和玫瑰为材料进行发酵而来，具有了桑葚和玫瑰的果香、花香，营养价值丰富。下图为桑葚汁与玫瑰质量比对酒精度和感官评分（感官评分越高，品质越好）的影响。由图可知，桑葚汁与玫瑰质量比对酒精度的影响____________，应选择桑葚汁与玫瑰质量比为____________时进行酿制。
【答案】20. 扩大培养
21. ①. 赤霉素 ②. 杀死体表和部分体内微生物
22. ①. 异养兼性厌氧型 ②. 主发酵 ③. 稀释涂布平板
23. ①. 不大 ②. 4:1
【解析】
【分析】1、发酵工程的基本环节：菌种的选育,扩大培养,培养基的配制、灭菌,接种,发酵罐内发酵,产品分离、提纯等方面；
2、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。果酒制作的原理： (1) 在有氧条件下，酵母菌进行 有氧呼吸大量繁殖；(2) 在无氧条件下，酵母菌进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳。
【小问1详解】
发酵工程的基本环节：菌种的选育、扩大培养、培养基的配制、灭菌、接种、发酵罐内发酵、产品分离、提纯等方面；
【小问2详解】
赤霉素可以促进种子中淀粉酶的合成，进而促进淀粉水解来促进种子萌发，因此利用赤霉素处理大麦，可以使大麦种子无须发芽就可以产生淀粉酶；啤酒制作时要使用酵母菌，加入酵母菌之前，加啤酒花后需要煮沸，其目的是杀灭其他杂菌；
【小问3详解】
酵母菌的代谢类型是异养兼性厌氧型；酵母菌的繁殖、大部分糖的分解都在主发酵阶段完成；发酵过程中，杂菌可产生微量副产物是啤 酒“上头”的原因之一，可采用稀释涂布平板法获得纯净的酵母菌，同时对活菌进行计数。
【小问4详解】
根据题意和图示分析可知:桑葚汁与玫瑰质量比对酒精度的影响不大，但对感官评分的影响较大，应选择桑葚汁与玫瑰质量比为4:1时 进行发酵。
21. DDT的化学式为C14H9Cl5，是20世纪上半叶曾在世界范围内被广泛使用的农药。但由于其对环境污染过于严重，已被我国禁止使用多年，但土壤中仍有DDT残留。研究发现，DDT能被土壤中的某些微生物降解。分离降解DDT的菌株的实验过程如图所示。回答下列问题：
（1）实验时，盛有水或培养基的摇瓶通常采用______的方法进行灭菌。需用______培养基（按用途划分）筛选降解DDT的细菌，配制该培养基时的注意事项是________________________。
（2）图中划线纯化所用的接种工具是______，在接种前需对其进行______灭菌处理。某同学采用平板划线法进一步纯化该菌株，接种培养一段时间后，发现第②划线区不间断长满菌落，第③划线区上几乎无菌落，产生无菌落的原因可能是________________________。
（3）实验过程中科研人员称取10g土壤样品，转入90mL的______中，制备成菌悬液，依次进行______后，获得密度不同的菌悬液。取102倍稀释的菌悬液0.1mL分别涂布在4个固体培养基上，一段时间后，4个平板上长出的菌落数依次为28、42、36和0个。则该样本中每克土壤约含降解DDT的菌株______个。单个细菌在平板上会形成菌落，研究人员通常可根据菌落的形状、大小、颜色等特征来初步区分不同种的微生物，原因是________________________。
【答案】（1） ①. 高压蒸汽灭菌 ②. 选择 ③. 以DDT为唯一碳源
（2） ①. 接种环 ②. 灼烧 ③. 土壤样品中能降解DDT的细菌数量少
（3） ①. 无菌水 ②. 密度梯度稀释 ③. 3.6×105 ④. 不同种微生物会表现出各自稳定的菌落特征
【解析】
【分析】1、灭菌指用强烈的物理或化学方法杀灭所有微生物，包括致病的和非致病的，以及细菌的芽孢。常用灭菌方法：灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌法。高压蒸汽灭菌适用于对一般培养基和玻璃器皿的灭菌，干热灭菌适用于空玻璃器皿的灭菌，微生物接种时的金属接种工具和试管口可以用灼烧灭菌。
2、稀释平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法， 即一个菌落代表个单细胞。将菌液进行系列的梯度稀释， 然后将不同稀释程度的菌液分别涂布到固体培养基的表面，使其均匀分布于平板中的培养基内，经培养后，由单个细胞生长繁殖形成菌落，统计菌落数目，即可计算出样品中的含菌数。
【小问1详解】
实验时，盛有水或培养基的摇瓶通常采用高压蒸汽灭菌的方法进行灭菌。实验过程的目的是分离降解DDT的菌株，因此配制该培养基时应以DDT为唯一碳源，在这种培养基中，只有能降解DDT的细菌才能生存，不能降解的细菌则无法存活，这种培养基称为选择培养基。
【小问2详解】
划线纯化所用的接种工具是接种环，在接种前需对其进行灼烧灭菌处理。由于土壤样品中能降解DDT的细菌数量少，所以接种培养一段时间后，发现第②划线区不间断长满菌落，第③划线区上几乎无菌落。
【小问3详解】
土壤样品需要使用无菌水制备成菌悬液，再依次进行密度梯度稀释后，获得密度不同的菌悬液。据题意可知，每升土壤溶液中的活菌数为（28+42+36）/3×100（稀释100倍）×102（接种0.1mL稀释液，求1g土壤的活菌数）=3.6×105。
由于不同种微生物会表现出各自稳定的菌落特征，因此通常可根据菌落的形状、大小、颜色等特征来初步区分不同种的微生物。
22. 下图是培养耐盐植株的实验流程，回答下列问题。
（1）用Ƴ射线处理时，选择愈伤组织作为实验材料的原因是________，处理2中添加的物质X为______。
（2）经植物组织培养得到的植株，一般可保持原品种的______，这种繁殖方式属于______繁殖。
（3）愈伤组织经______过程可获得耐盐植株，研究发现，愈伤组织的中层细胞是根或芽再生的源头干细胞，其在不同条件下，通过基因的特异性表达调控生长素、细胞分裂素的作用，表现出不同的效应（见下表）。
分析表格推测WOX5的作用是__________，WOX5+PLT可能有利于愈伤组织中______（填激素名称）的积累。ARR5的作用可能是______（增强/抑制）细胞对细胞分裂素的敏感性。
【答案】22. ①. 愈伤组织细胞分裂能力强，易诱发突变 ②. NaCl
23. ①. 遗传特性 ②. 无性
24. ①. 再分化 ②. 维持未分化状态，使植物细胞保持分裂能力强、较大的全能性 ③. 生长素 ④. 抑制
【解析】
【分析】植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性，其过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化过程形成愈伤组织，愈伤组织经过再分化过程形成胚状体，进一步发育成为植株。
【小问1详解】
愈伤组织细胞分裂能力强，易诱发突变，因此生产中常用γ射线处理愈伤组织；该技术最终培育柑桔耐盐植株，因此处理2中添加的物质X为氯化钠，起选择作用，具有能适应一定浓度盐的愈伤组织才可以生长，不适应的愈伤组织死亡。
【小问2详解】
通过植物组织培养获得植株的可以保持原品种的遗传特性，这种繁殖方式属于无性繁殖；
【小问3详解】
愈伤组织能重新分化成芽、根等器官，该过程称为再分化；根据表格信息可知，WOX5能维持未分化状态，使植物细胞保持分裂能力强、较大的全能性，若WOX5失活后，中层细胞会丧失干细胞分裂能力强、分化程度低的特性；由题干信息“生长素的生理作用大于细胞分裂素时有利于根的再生”，再结合表格信息，WOX5+PLT可能诱导出根，可推测WOX5+PLT可能有利于愈伤组织中生长素的积累；由题意可知，生长素的生理作用小于细胞分裂素时有利于芽的再生，而抑制ARR5能诱导出芽，可知ARR5被抑制时细胞分裂素较多，故可推测ARR5抑制细胞分裂素积累或降低细胞对细胞分裂素的敏感性。
23. 猕猴桃含有丰富的维生素C和多种抗氧化物质，可以提高身体的免疫力。猕猴桃具有很多品种，其中“中华猕猴桃”不耐涝，长期积水会导致萎蔫枯死；“美味猕猴桃”在抗性方面，特别是抗冻抗高温方面表现较差。我国研究人员利用“中华猕猴桃”和“美味猕猴桃”两个不同种培育出了更加优良的品种，其过程如下图所示。请分析并回答下列问题：
（1）过程②通常使用______处理植物细胞。过程③诱导植物原生质体融合常用______（化学法），细胞融合完成的标志是______。
（2）植物体细胞杂交技术依据生物学原理有__________________。
（3）该项技术的优点是可以实现______。若中华猕猴桃体细胞内含m条染色体，美味猕猴桃体细胞内含n条染色体，则杂种植株的体细胞内含______条染色体；若由杂种细胞培育成的植株H为四倍体，则此杂种植株的花粉经离体培养得到的植株为______倍体。
（4）如果形成F的原生质体B、D来源于同一株猕猴桃植株，那么更常用且有效地得到猕猴桃植株H的处理方法是_______。
【答案】（1） ①. 纤维素酶和果胶酶 ②. 聚乙二醇融合法 ③. 杂种细胞再生出新的细胞壁
（2）细胞膜的流动性、植物细胞的全能性
（3） ①. 远缘杂交育种 ②. m+n ③. 单
（4）用适宜浓度的秋水仙素处理萌发的猕猴桃种子或幼苗
【解析】
【分析】分析题图：过程②是通过酶解法去除细胞壁获得原生质体B和D，过程③通过物理或化学方法诱导原生质体融合成E，过程④是再生细胞壁形成杂种细胞F，过程⑤是脱分化过程形成愈伤组织G，过程⑥是再分化生成完整植株。
【小问1详解】
植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，根据酶的专一性原理，过程②可使用纤维素酶和果胶酶处理细胞以除去细胞壁，得到原生质体。植物原生质体融合过程常利用化学试剂聚乙二醇（或PEG），当杂种细胞长出新的细胞壁即代表融合完成。
【小问2详解】
植物体细胞杂交是指将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。该技术包括植物体细胞杂交和植物组织培养两个部分，依据的生物学原理有细胞膜的流动性、植物细胞的全能性。
【小问3详解】
植物体细胞杂交可以克服远缘杂交不亲和的障碍，实现远缘杂交育种。生通过植物体细胞杂交技术获得的杂种植株中既含有中华猕猴桃染色体，也含有美味猕猴桃体的染色体，即含有m+n条染色体。由为花粉经离体培养得到的植株为单倍体植株。
【小问4详解】
如果形成F的原生质体B、D来源于同一株猕猴桃植株，那么该过程形成的是四倍体猕猴桃，而得到四倍体猕猴桃更简单的处理方法是用适宜浓度的秋水仙素处理萌发的猕猴桃的种子或幼苗。基因表达产物和相互作用
效应
WOX5
维持未分化状态
WOX5+PLT
诱导出根
WOX5+ARR2，抑制ARR5
诱导出芽