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天津市滨海新区田家炳中学2023-2024学年高二下学期第一次月考生物试题（原卷版+解析版）
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本试卷分第Ⅰ卷（选择题）和第Ⅱ卷（非选择题）两部分。满分100分，考试时间60分钟。
第Ⅰ卷
一、选择题（本卷共30题，每题2分，共60分。在每题给出的四个选项中，只有一项最符合题目要求）
1. 在发酵过程中果醋、果酒、腐乳、泡菜所用菌种依次是（ ）
①木曲霉 ②黄曲霉 ③酵母菌 ④乳酸菌 ⑤毛霉⑥青霉 ⑦醋酸菌
A. ⑦③⑥④B. ⑦③④⑤C. ⑦③②④D. ⑦③⑤④
【答案】D
【解析】
【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。
2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。
3、参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型。
4、参与泡菜制作的微生物是乳酸菌，其新陈代谢类型是异养厌氧型。
【详解】果醋制作利用了醋酸菌的有氧呼吸，即⑦；果酒制作利用了酵母菌的无氧呼吸并且产生酒精，即③；腐乳制作利用了毛霉等真菌的有氧呼吸，即⑤；泡菜制作利用了乳酸菌的无氧呼吸，即④。综上分析，D正确，ABC错误。
故选D。
2. 桂林腐乳历史悠久，颇负盛名，是传统特产“桂林三宝”之一。桂林腐乳从磨浆、过滤到定型、压干、霉化都有一套流程，选材也很讲究。目前我国各地都有腐乳的生产，虽然配料不同、品种名称和口感不一，但制作原理大都相同。现代化生产流程如下：
下列关于传统发酵技术的说法，错误的是（ ）
A. 果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌属于兼性厌氧微生物，在有氧条件下大量繁殖
B. 制作果醋需要醋酸菌，它是一种严格厌氧的微生物，可将葡萄中的糖分解为醋酸
C. 多种微生物参与了腐乳的制作，如酵母菌、毛霉、曲霉等
D. 制作泡菜利用的乳酸菌是一种厌氧微生物，可以通过无氧呼吸产生乳酸
【答案】B
【解析】
【分析】1、在利用酵母菌发酵时最好是先通入足够的无菌空气在有氧环境下一段时间使其繁殖，再隔绝氧气进行发酵；酒精发酵的最佳温度是在18℃～25℃，pH最好是弱酸性。
2、醋酸菌好氧型细菌，当缺少糖源时和有氧条件下，可将乙醇（酒精）氧化成醋酸；当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；醋酸菌生长的最佳温度是在30℃～35℃。
3、泡菜的制作原理：起作用的乳酸菌，其代谢类型为异养厌氧型。
4、参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。
【详解】A、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌属于兼性厌氧生物，在有氧条件下进行有氧呼吸产生大量能量，能够大量繁殖，A正确；
B、制作果醋需要醋酸菌，它是一种好氧微生物，可将葡萄中的糖分解为醋酸，B错误；
C、多种微生物参与了腐乳的制作，如酵母菌、毛霉、曲霉等，C正确；
D、制作泡菜利用的乳酸菌是一种厌氧微生物，可以通过无氧呼吸产生乳酸，D正确。
故选B。
【点睛】
3. 某同学尝试自己制作酸菜，制作时向酸菜坛中加入了一些“陈酸菜水”，用质量百分比为5%的食盐水进行腌制，并在不同的腌制时间测定了酸菜中亚硝酸盐的含量。下列说法错误的是（ ）
A. 泡菜和酸菜都主要是利用乳酸菌制作而成的
B. 酸菜“咸而不酸”的原因是食盐加入过多所致
C. 制作酸菜时，乳酸会抑制其它微生物生长，故材料和工具可不做消毒处理
D. 不同的腌制时间，酸菜中亚硝酸盐的含量可能相同
【答案】C
【解析】
【分析】泡菜的制作所使用的微生物是乳酸菌，代谢类型是异养厌氧型，在无氧条件下乳酸菌能够将蔬菜中的葡萄糖氧化为乳酸。制作泡菜时，需要控制的主要因素有腌制时间、温度和食盐的用量等。温度过高，食盐用量过低、腌制时间过短，容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加。
【详解】A、泡菜和酸菜的制作所使用的微生物是乳酸菌，代谢类型是异养厌氧型，在无氧条件下乳酸菌能够将蔬菜中的葡萄糖氧化为乳酸，A正确；
B、腌的酸菜只有咸味没有酸味的原因是盐放得多了一点，因为盐放多了，醋酸菌活跃不起来，所以，只有咸味没有酸味，B正确；
C、制作酸菜时，乳酸会抑制其它微生物生长，但仍要重视材料和工具的消毒处理，避免更多的杂菌污染，C错误；
D、泡菜制作过程中亚硝酸盐是先增加，然后逐渐减低，最后稳定在较低水平，因此不同的腌制时间，酸菜中亚硝酸盐的含量可能相同，D正确。
故选C。
4. 若在固体培养基上用稀释涂布法培养细菌，看到的结果不可能是
A. B.
C. D.
【答案】D
【解析】
【分析】常用的微生物分离方法有平板划线法，稀释涂布法。
一、平板划线分离法：
由接种环从菌液中沾取少许待分离的材料，在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线，微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少，并逐步分散开来，如果划线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，可在平板表面得到单菌落。
二、稀释涂布平板法：
稀释平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞。
【详解】A、B、C选项的固体培养基上所形成的是一个个的单个菌落，是用稀释涂布法培养细菌得到的结果，D选项的固体培养基上所形成的不是单菌落，是平板划线分离得到的结果。
故选D
5. 不同培养基的具体配方不同，但一般都含( )
A. 碳源、磷酸盐和维生素B. 氮源和维生素
C. 水、碳源、氮源和无机盐D. 碳元素、氧元素、氢元素、氮元素
【答案】C
【解析】
【详解】培养基（Medium）是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料，一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）以及维生素和水等。答案C。
6. 采用干热灭菌、灼烧灭菌、高压蒸汽灭菌、紫外线照射等几种方法，可分别杀死哪些部位的杂菌（ ）
A. 接种环、吸管、培养基、接种室
B. 吸管、接种环、培养基、接种箱
C. 培养基、吸管、接种环、接种箱
D. 培养皿、吸管、培养基、双手
【答案】B
【解析】
【分析】
总结常见灭菌方法的应用：高压蒸汽灭菌适用于对一般培养基和玻璃器皿的灭菌；干热灭菌适用于需要保持干燥的空玻璃器皿的灭菌，凡带有橡胶的物品和培养基，都不能进行干热灭菌；无菌室缓冲间和接种箱常用紫外线灯作空气灭菌；微生物接种时的金属接种工具和试管口可以用灼烧灭菌。
【详解】接种环属于接种用的金属工具，需要用灼烧灭菌；吸管在使用前需保持干燥，需要用干热灭菌；培养基应该用高压蒸汽灭菌；接种室、接种箱需要用紫外线照射灭菌；双手可以用医用酒精消毒；综上所述，B符合题意，ACD不符合题意。
故选B。
7. 下列有关平板划线操作的描述，错误的是（ ）
A. 将接种环放在酒精灯火焰上灼烧，直到接种环烧红
B. 接种环在平板上划线的位置是随机的
C. 在挑取菌种前和接种完毕后均要将试管口通过酒精灯火焰
D. 最后一区的划线不能与第一区相连
【答案】B
【解析】
【分析】
平板划线法是指通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种，逐步稀释分散到培养基的表面，最后得到由单个细胞繁殖而来的菌落。
【详解】A、将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他的金属用具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，A正确；
B、接种环在平板上划线时，采用分区划线，每个区要画3-5条平行线，而不是随机划的，B错误；
C、在挑取菌种前和接种完毕后的试管口要通过火焰，以防止杂菌污染，C正确；
D、划线时要最后一区的划线不能与第一区线相连，D正确。
故选B。
8. 下列关于微生物实验操作的叙述，错误的是
A. 培养微生物的试剂和器具都要进行高压蒸汽灭菌
B. 接种前后，接种环都要在酒精灯火焰上进行灼烧
C. 接种后的培养皿要倒置，以防培养污染
D. 菌种分离和菌落计数都可以使用固体培养基
【答案】A
【解析】
【分析】无菌技术指通过一定的物理、化学的手段，防止实验室培养物被外来微生物污染，保持微生物的纯培养的技术，其中包括在微生物的分离、转接、保存等过程中防止其他微生物污染的手段。常见的方法：消毒和灭菌。
【详解】接种室、接种箱等常用紫外线消毒法处理，接种环等常用灼烧灭菌法处理，吸管、培养皿等常用干热灭菌法处理，培养基及多种器材用高压蒸汽灭菌法处理，A错误；为了防止杂菌污染，每次接种前后，接种环都要进行灼烧灭菌，B正确；接种后，培养皿需要倒置，以防皿盖上水珠落入培养基造成污染，C正确；分离菌种可以用平板划线法和稀释涂布平板法，后者还可以用于微生物的计数，所用培养基为固体培养基，D正确。故选A。
9. 分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是（ ）
①加尿素 ②不加尿素 ③加琼脂 ④不加琼脂
⑤加葡萄糖 ⑥不加葡萄糖 ⑦加硝酸盐 ⑧不加硝酸盐
A. ①③⑤⑦B. ②④⑥⑧C. ①③⑤⑧D. ①④⑥⑦
【答案】C
【解析】
【分析】
分离土壤中分解尿素的细菌的原理是在以尿素为唯一氮源的培养基上，只有能分解尿素的细菌才能以尿素为氮源生长繁殖，不能分解尿素的细菌因缺乏氮源而无法生长繁殖。
【详解】①②要分离分解尿素的细菌应以尿素为唯一氮源，①正确、②错误；
③④分离土壤中分解尿素的细菌用固体培养基需加入琼脂，③正确，④错误；
⑤⑥土壤中分解尿素的细菌为异氧型，故培养基中需要加碳源即葡萄糖，⑤正确，⑥错误；
⑦⑧培养基中不需要加除尿素以外的其它氮源，故不加硝酸盐，⑦错误，⑧正确；
故符合题意的有①③⑤⑧，即C正确，ABD错误。
故选C。
10. 高中生物学实验中，在接种时不进行严格无菌操作对实验结果影响最大的一项是
A. 将少许干酵母加入到新鲜的葡萄汁中
B. 将毛霉菌液接种在切成小块的鲜豆腐上
C. 将转基因植物叶片接种到无菌培养基上
D. 将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上
【答案】C
【解析】
【分析】作为植物组织培养，要求非常严格的无菌环境，如果灭菌不彻底，培养过程中存在污染，会造成培养的幼苗生长缓慢甚至培育失败。原理有以下几种：
（1）与幼苗竞争培养基中的营养，而因为细菌和真菌生殖比植物快得多，导致植株得不到营养。
（2）寄生于植物体内，利用植物细胞中的原料合成菌类自身的物质，导致幼苗死亡。
（3）已有报道，寄生菌可能导致植物内部的基因改变，当这个基因是对生长必要的基因时，就导致幼苗的死亡。此外，污染菌的基因可通过某种暂时未知细节的机制转入植物细胞内并表达，从而导致培养失败。
【详解】A、不进行严格的灭菌对葡萄酒制作的影响不大，因为多数微生物不能在缺氧、酸性和含糖较高的环境中生存，A错误；
B、不进行严格的灭菌对腐乳制作的影响不大，因为腐乳制作时还需在其中放入酒精、盐和香辛料等，这些都具有杀菌作用，B错误；
C、植物组织培养要求严格的无菌环境，如果灭菌不彻底，会造成培养的幼苗生长缓慢甚至培育失败，C正确。
D、选择培养基是根据要培养的微生物的代谢特点制备的，一般的杂菌在其上面也很难生存，D错误。
故选C。
【点睛】本题综合考查果酒、果醋、腐乳的制作，植物组织培养，微生物的培养过程中的无菌操作，属于对识记、理解层次的考查。
11. 关于发酵工程应用的说法错误的是（ ）
A. 发酵工程的产品可以是微生物的代谢产物
B. 通过发酵工程可以从微生物中提取一些酶
C. 通过发酵工程可以从微生物中提取单细胞蛋白
D. 发酵工程的产品可以是微生物的菌体
【答案】C
【解析】
【分析】1、发酵工程生产的产品有两类：一类是代谢产物，另一类是菌体本身；
2、产品不同，分离提纯的方法一般不同；
①如果产品是菌体，可采用过滤，沉淀等方法将菌体从培养液中分离出来；
②如果产品是代谢产物，可用萃取、蒸馏、离子交换等方法进行提取；
3、发酵过程中要严格控制温度、PH、溶氧、通气量与转速等发酵条件；
4、发酵过程一般来说都是在常温常压下进行，条件温和、反应安全，原料简单、污染小，反应专一性强，因而可以得到较为专一的产物。
【详解】A、根据分析，发酵工程的产品可以是微生物的代谢产物，也可以是微生物本身，A正确；
B、通过发酵工程可以从微生物中提取相应的酶，B正确；
C、单细胞蛋白本生就是一种微生物，并不是一种微生物细胞的提取物，C错误；
D、发酵工程的产品可以是微生物的菌体，D正确。
故选C。
12. 下列技术或方法与原理相符的是（ ）
A. 人参细胞的大量培养和动物细胞培养——细胞的全能性
B. 植物组织培养和单克隆抗体的制备——细胞的全能性
C. 人鼠细胞融合——细胞膜的流动性
D. 克隆羊多利的培育——有性生殖
【答案】C
【解析】
【分析】1、植物细胞工程的主要技术包括植物组织培养和植物体细胞杂交，其中植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性，植物体细胞杂交的原理是细胞膜的流动性和细胞的全能性。
2、动物细胞工程的主要技术包括动物细胞培养、动物细胞融合、核移植及单克隆抗体，其中动物细胞培养的原理是细胞增殖，动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性，核移植的原理是动物细胞的细胞核具有全能性，单克隆抗体制备的原理是细胞膜的流动性和细胞增殖。
【详解】A、人参细胞的大量培养和动物细胞培养原理都是细胞增殖，A错误；
B、植物组织培养原理是细胞的全能性，单克隆抗体的制备的原理是细胞膜的流动性和细胞增殖，B错误；
C、人鼠细胞融合的原理是细胞膜的流动性，C正确；
D、克隆羊多利的培育原理是动物细胞的细胞核具有全能性，属于无性繁殖，D错误。
故选C。
13. 下列关于微生物发酵过程的说法，正确的是（ ）
A. 菌种选育、扩大培养及配置培养基和灭菌是发酵工程的中心环节
B. 只要不断地向发酵罐中通入液体培养基，就能保证发酵的正常进行
C. 在发酵工程的发酵环节中，发酵条件会影响微生物的生长繁殖，也会影响微生物的代谢途径
D. 在发酵过程中，要严格控制温度、pH、溶氧、通气量与转速等发酵条件，不需添加营养组分
【答案】C
【解析】
【分析】1、发酵是利用微生物，在适宜的条件下，将原料经过特定的代谢途径转化为人类所需要的产物的过程。发酵过程：菌种选育→菌种的扩大培养→培养基的配制→灭菌和接种→发酵条件的控制→分离和提纯。
2、谷酸棒状杆菌是一种异养兼性厌氧细菌，谷氯酸棒状杆菌在扩大培养时，碳氛比应为4:1，而在发酵获得谷氨酸时碳氟比应为3:1。扩大培养应在有氧条件下进行，在无氧条件下，谷氨酸棒状杆菌能将葡萄糖和含氯物质(如尿素、硫酸铵、氨水)合成为谷氨酸。
【详解】A、发酵工程的内容包括菌种选育、培养基的配制、灭菌、扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面，其中发酵过程是发酵的中心阶段，A错误；
B、发酵过程中应随时检测培养液中的细菌数目、产物浓度等，同时应对发酵过程中的一些条件进行控制才能保证发酵的正常进行，B错误；
C、发酵过程中要严格控制温度、pH、溶氧、通气量与转速等发酵条件，这是因为环境条件的变化，不仅会影响菌种的生长繁殖，而且会影响菌种代谢产物的形成。例如，在谷氨酸发酵过程中，当pH呈酸性时，谷氨酸棒状杆菌就会生成乙酰谷氨酰胺；当溶氧不足时，生成的代谢产物就会是乳酸或琥珀酸，C正确；
D、发酵过程是发酵中心阶段，要严格控制温度、pH、溶氧、通气量与转速等发酵条件，还要及时添加必需的培养基组分，以满足菌种的营养需要，D错误。
故选C。
14. 在植物体内，茎的顶端分生组织的细胞具有细胞周期，但不能表现出全能性，是因为（ ）
A. 细胞核失去了全能性
B. 不同的细胞基因是不同的
C. 细胞中基因的表达有选择性
D. 细胞核中的基因发生了不同的变异
【答案】C
【解析】
【分析】
关于“细胞分化”，考生可以从以下几方面把握：（1）细胞分化是指在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态、结构和生理功能上发生稳定性差异的过程。（2）细胞分化的特点：普遍性、稳定性、不可逆性。（3）细胞分化的实质：基因的选择性表达。（4）细胞分化的结果：使细胞的种类增多，功能趋于专门化。
【详解】A、茎顶端分生组织的细胞，其细胞核没有失去全能性，A错误；
BD、同一个体的所有体细胞都是由同一个受精卵经分裂，分化形成的，都具有相同的遗传物质，BD错误；
C、在特定的时间和空间条件下，细胞中的基因会有选择性地表达出各种蛋白质，从而构成生物体的不同组织和器官，所以在生物生长发育过程中，茎顶端分生组织的细胞具有细胞周期，但不能表现出全能性，C正确。
故选C。
15. 植物细胞表现出全能性的必要条件和增殖方式分别是（ ）
A. 脱离母体后，在适宜的营养和外界条件下；减数分裂
B. 导入其他植物细胞的基因；有丝分裂
C. 将成熟筛管的细胞核移植到去核的卵母细胞内；减数分裂
D. 脱离母体后，在适宜的营养和外界条件下；有丝分裂
【答案】D
【解析】
【分析】植物细胞具有全能性，而表现出全能性需要一定的条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。植物细胞组织培养形成个体的过程中，细胞通过有丝分裂方式进行增殖。
【详解】植物组织细胞脱离母体后，①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）；植物细胞增殖方式为有丝分裂，综合以上分析，ABC错误，D正确。
故选D。
16. 下列关于单克隆抗体的说法，不正确的是（ ）
A. 单克隆抗体的制备原理是细胞膜具有选择透过性的特点
B. 单克隆抗体在多种疾病的诊断和病原体鉴定中发挥着重要的作用
C. 单克隆抗体能准确地识别各种抗原物质的细微差别，并跟一定抗原发生特异性结合
D. 单克隆抗体可以制成抗体——药物偶联物(ADC)
【答案】A
【解析】
【分析】单克隆抗体的制备时动物细胞融合技术的应用之一，此过程中需要先注射抗原，使生物体产生具有免疫能力的B淋巴细胞，再将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，并筛选出能产生特异性抗体和大量增殖的杂交瘤细胞，最后经过体内和体外培养获取单克隆抗体．单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高，并可能大量制备的优点。
【详解】A、单克隆抗体的制备过程涉及动物细胞融合，其原理是细胞膜具有一定的流动性，A错误；
B、单克隆抗体可作为诊断剂，在多种疾病的诊断和病原体鉴定中发挥着重要的作用，B正确；
C、单克隆抗体的应用主要有两个方面，一个是作为诊断试剂，能准确地识别各种抗原物质的细微差别，并跟一定抗原发生 特异性反应。另一方面可以用于治疗、预防疾病和运载药物，C正确；
D、单克隆抗体特异性强、灵敏度高，与抗癌药物结合可以制成“抗体—药物偶联物（ADC）”，减少药物对正常组织细胞的毒害作用，D正确。
故选A。
17. 下面是植物组织培养过程示意图，相关说法正确的是（ ）
A. 上述植物组织培养的过程依据的生物学原理是植物细胞具有全能性
B. 需要对外植体进行严格的灭菌处理，以防止杂菌污染
C. 外植体若是月季的花药，则图中的①过程需要光照
D. 外植体若是菊花的根尖组织，因细胞中没有叶绿体，故培养成的新植株叶片无色
【答案】A
【解析】
【分析】
1、据图分析，①是脱分化，②③表示再分化，④表示移栽过程。
2、植物组织培养的过程：离体的植物组织，器官或细胞（外植体）→愈伤组织→胚状体→植株。
【详解】A、植物组织培养依据的生物学原理为细胞的全能性，即已经分化的细胞仍然具有发育成完整植株的潜能，A正确；
B、外植体一般只消毒处理，不灭菌处理，以保持外植体的活性，B错误；
C、外植体若是月季的花药，则图中的①过程是脱分化，不需要光照，C错误；
D、外植体若是菊花的根尖组织，其细胞中虽然没有叶绿体，但其细胞中含有叶绿体形成的相关基因，故培养成的新植株叶片有叶绿体，因此有色，D错误。
故选A。
18. 如图为“番茄－马铃薯”的培育过程示意图，有关叙述中正确的是（ ）
A. 获得a、b细胞需要胰蛋白酶和果胶酶
B. 诱导a、b细胞融合的化学试剂一般是秋水仙素
C. a、b细胞融合为c细胞的原理是细胞膜具有流动性
D. d、e、f过程表示植物组织培养过程，e、f分别为脱分化和再分化
【答案】C
【解析】
【分析】1．植物体细胞杂交过程的工具酶是纤维素酶和果胶酶，动物细胞培养技术的工具酶是胰蛋白酶或胶原蛋白酶。
2．动物细胞融合与植物原生质体杂交的原理都是细胞膜的流动性。
3．诱导植物原生质体融合常用聚乙二醇，诱导染色体数目加倍常用秋水仙素。
【详解】分析图形可知，图中a、b是两种原生质体，获取原生质体需要纤维素酶和果胶酶，A错误；诱导原生质体融合的化学试剂一般用聚乙二醇，B错误；原生质体融合的原理是生物膜具有流动性，C正确；d、e、f过程表示植物的组织培养过程，e、f均为再分化，D错误。
19. 细胞的全能性是指（ ）
A. 细胞具有各项生理功能
B. 已分化的细胞能恢复到分化前的状态
C. 已分化的细胞全部能再进一步分化
D. 已分化的细胞仍具有发育成完整个体的潜能
【答案】D
【解析】
【分析】关于细胞的“全能性”，可以从以下几方面把握：（1）概念：细胞的全能性是指已经分化的细胞仍然具有发育成完整个体的潜能。（2）细胞具有全能性的原因是：细胞含有该生物全部的遗传物质。（3）细胞全能性大小不同，一般植物细胞的全能性大于动物细胞，所以植物细胞比动物细胞更容易发育成完整个体。（4）细胞表现出全能性的条件：离体、适宜的营养条件、适宜的环境条件。
【详解】全能性是指已分化的细胞仍具有产生完整有机体或分化成其他各种细胞的潜能和特性，其根本原因是细胞具有该生物生长发育的全套的遗传物质。
故选D。
20. 如图为某同学构建的细胞工程知识框架。以下相关说法正确的是（ ）
A. 图中②属于分子水平上的生物工程技术
B. 体外培养的动物细胞大多数都需要贴附于某些基质表面才能生长增殖
C. 动物细胞培养液不需要定期更换，只需要定期添加营养物
D. 植物组织培养和动物细胞培养依据的原理都是细胞的全能性
【答案】B
【解析】
【分析】分析题图：图示为细胞工程的概念图，其中①为植物体细胞杂交技术，②为核移植技术。
【详解】A、图中②为核移植，属于细胞水平上的生物工程技术，A错误；
B、体外培养的动物细胞一类能悬浮在培养液中生长增殖，另一类需要贴附于某些基质表面才能生长增殖，贴附生长的占多数，B正确；
C、动物细胞培养过程中需要定期更换培养液，为了清除代谢废物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害，C错误；
D、植物组织培养的原理是细胞的全能性，而动物细胞培养的原理是细胞增殖，D错误。
故选B。
21. 下列实验程序有错误的是（ ）
A. 原生质体 A +原生质体B杂交原生质体
B. 浆细胞 + 骨髓瘤细胞 产生特定抗体的杂交瘤细胞
C. 动物组织制备细胞悬液 → 原代培养 → 传代培养
D. 离体细胞消毒、接种愈伤组织试管苗
【答案】A
【解析】
【分析】1、单克隆抗体的制备过程：首先用特定抗原注射小鼠体内，使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞。利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，在经过三次筛选：①筛选能够产生单一抗体的B淋巴细胞②筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）③筛选出能够产生特异性抗体的细胞群。两次抗体检测：专一抗体检验阳性，获得能产生特异性抗体、又能大量增殖杂交瘤细胞。最后从培养液或小鼠腹水中提取单克隆抗体。
2、植物组织培养过程：离体的细胞、组织或器官脱分化形成愈伤组织再分化形成胚状体最后发育成植株。
【详解】A、原生质体A和原生质体B融合采用物理方法（离心、振动、电激）和化学方法（聚乙二醇），A错误；
B、浆细胞和骨髓瘤细胞融合，需要筛选两次，筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞），筛选出能够产生特异性抗体的细胞群，B正确；
C、胰蛋白酶能将组织细胞分散开来，进行原代培养，由于存在接触性抑制，再用胰蛋白酶能将组织细胞分散开来，进行传代培养，C正确；
D、离体细胞消毒、接种，然后脱分化形成愈伤组织，再分化形成试管苗，D正确。
故选A。
22. 某株名贵花卉用种子繁殖会发生性状分离。为了防止性状分离并快速繁殖，可以利用该植株的一部分器官或组织进行离体培养，发育出完整的植株，进行离体培养时不应采用该植株的
A. 茎尖B. 子房壁C. 叶片D. 花粉粒
【答案】D
【解析】
【分析】
【详解】无性生殖能保持亲本优良性状，植物组织培养就是无性生殖中的一种，但选择的材料不能是花粉粒，否则就为有性生殖中的单性生殖。花粉粒是经减数分裂形成的，在此过程中发生了基因重组，因而不一定能保持亲本的优良性状，故选D。
【点睛】
23. 在植物组织培养过程中，容易获得突变体的主要原因是（ ）
A. 培养的细胞一直处于不断的分生状态B. 培养基营养丰富，易于植物生长
C. 纺锤丝的形成容易受抑制D. DNA复制容易受抑制
【答案】A
【解析】
【分析】间期DNA复制时由于DNA解旋，使DNA稳定性降低，容易发生基因突变，所以基因突变一般发生在DNA复制时期。
【详解】在植物组织培养过程中，由于培养细胞一直处于不断的分生状态，容易受到培养条件和外界压力（如射线、化学物质等）的影响而产生突变，因此容易获得突变体。培养基营养丰富，易于植物生长，不能体现容易获得突变体，纺锤丝的形成容易受抑制，则细胞的分裂受抑制，不能体现容易获得突变体，DNA复制容易受抑制，细胞不容易发生突变，综上分析，A正确，BCD错误。
故选A。
24. 如图是四倍体兰花的叶片通过植物组织培养形成植株的示意图。下列相关叙述中正确的是( )
A. ②阶段会发生减数分裂过程
B. ①阶段需生长素，而③阶段需细胞分裂素
C. 此过程体现了植物细胞具有全能性
D. 此兰花花药经离体培养所得植株为二倍体
【答案】C
【解析】
【分析】分析题图：图示表示将四倍体兰花的叶片通过植物组织培养形成植株的过程，其中①阶段表示脱分化，该阶段能形成愈伤组织，其细胞分化程度低，全能性高；②阶段表示再分化过程，该阶段能形成胚状体，进一步发育形成植株。
【详解】A、②阶段细胞通过有丝分裂方式增殖，不能发生减数分裂，A错误；
B、①和③阶段都需要生长素和细胞分裂素，只是这两种激素的比例不同，B错误；
C、图解显示的是植物组织培养过程，其原理是植物细胞具有全能性，C正确；
D、此兰花的花药经离体培养所得植株为单倍体，D错误。
故选C。
25. 下列关于细胞产物的工厂化生产的叙述，错误的是（ ）
A. 细胞产物的工厂化生产是植物细胞工程的重要用途之一
B. 植物细胞产物包括蛋白质、脂肪、药物、香料、生物碱等
C. 利用细胞培养技术获得紫草素可实现细胞产物的工厂化生产
D. 培养的愈伤组织需要经过再分化产生特定的组织细胞后才能产生特定的细胞产物
【答案】D
【解析】
【分析】植物细胞工程技术的应用：植物繁殖新途径、作物新品种培育、细胞产物的工厂化生产。
【详解】A、植物细胞工程的重要用途包括植物繁殖新途径、作物新品种的培育和细胞产物的工厂化生产，故细胞产物的工厂化生产是植物细胞工程的重要用途之一，A正确；
B、植物细胞产物包括蛋白质、脂肪、药物、香料、生物碱等，这些都可以进行细胞产物的工厂化生产，B正确；
C、细胞培养技术耗资少，易于实现规模化生产，因此利用细胞培养技术获得紫草素可实现细胞产物的工厂化生产，C正确；
D、培养的愈伤组织不需要经过再分化产生特定的组织细胞就能产生特定的细胞产物，D错误。
故选D。
26. 马铃薯利用块茎进行无性生殖，种植的世代多了以后往往会感染病毒而减产，为此农户都希望得到无病毒的幼苗进行种植，获得无病毒幼苗的最佳办法是（ ）
A. 选择优良品种进行杂交B. 进行远缘植物体细胞杂交
C. 利用茎尖进行组织培养D. 人工诱导基因突变
【答案】C
【解析】
【分析】1、植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体．植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。
2、培育无病毒植株苗，应选择不含病毒部分培养，而植物体新生部位不含病毒，如根尖和茎尖。
【详解】进行植物微型繁殖时常采用茎尖或根尖作为外植体，原因是茎尖或根尖病毒极少，因此切取一定大小的茎尖或根尖进行组织培养，再生的植株就可能不带病毒，C正确，
故选C。
27. 下列关于动物细胞培养的叙述中正确的是（ ）
A. 动物细胞培养只是为获得大量的细胞分泌蛋白
B. 动物细胞培养前要用胰蛋白酶处理使细胞分散开
C. 动物细胞培养通常不出现接触抑制现象
D. 可通过细胞培养获得完整的动物个体
【答案】B
【解析】
【分析】动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。
【详解】A、动物细胞培养是动物细胞工程的基本技术，可以获取细胞产品、制作单克隆抗体、早期胚胎培养等，A错误；
B、动物细胞间质主要成分为蛋白质，故动物细胞培养前先用胰蛋白酶或胶原蛋白酶分散细胞，有利培养，B正确；
C、动物细胞生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，即出现接触抑制现象，C错误；
D、通过细胞培养技术获得克隆细胞群，不能获得完整的动物个体，D错误。
故选B。
【点睛】
28. 关于ES细胞和iPS细胞及其应用的说法，正确的是（ ）
A. ES细胞存在于早期胚胎中，能分化成各种功能细胞，不能形成生物个体
B. ES细胞存在于成体组织和器官内，能分化成特定的组织
C. iPS细胞存在于成体组织和器官内，能分化成特定的组织
D. iPS细胞是人工诱导产生的，也可诱导分化成为各种组织细胞
【答案】D
【解析】
【分析】胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的内细胞团），其特点是具有胚胎细胞的特性，体积较小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物任何一种组织细胞，另一方面，在体外培养条件下，ES细胞可不断增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可以进行某些遗传改造，iPS(诱导性多能干细胞)指通过导入特定的转录因子将终末分化的体细胞重编程为多能性干细胞细胞，分化成多种组织细胞，说明基因选择性表达，它与其他细胞含有相同的基因。
【详解】A、根据分析，ES细胞来源于早期胚胎细胞，在功能上，具有发育的全能性，能形成各种功能的细胞，在特定环境下能形成生物个体，A错误；
B、ES细胞存在于早期胚胎或原始性腺，不存在于成体组织内，B错误；
C、IPS细胞是人工诱导的多能干细胞，动物本身不具有，C错误；
D、iPS细胞是人工诱导产生的，能分化成多种组织细胞，D正确。
故选D。
29. 下列哪项条件不是动物细胞培养所需要的（ ）
A. 无菌、无毒的环境
B. 充足的营养物质
C. 适宜温度和pH
D. 95%的空气和5%的氧气
【答案】D
【解析】
【分析】
动物细胞的培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH：（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的PH）。
【详解】A、动物细胞培养也需要无菌、无毒的环境，A不符合题意；
B、用于动物细胞培养的合成培养基需加入糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等营养物质，还需加入血清、血浆等天然物质，B不符合题意；
C、动物细胞培养需要适宜的温度和PH，其中温度要与动物体温相近，C不符合题意；
D、动物细胞培养需要一定的气体环境，95%空气和5%的CO2，其中5%的CO2能调培养液的pH，D符合题意。
故选D。
30. 如图为克隆羊“多利”的培育过程示意图。下列各项有关表述不正确的是（ ）
A. 由于细胞核基因完全来自甲羊，所以克隆羊“多利”的性状与甲羊完全一致
B. 克隆羊“多利”的培育过程中采用的生物技术有核移植
C. 乙羊的去核卵细胞为重组细胞基因表达提供了细胞内的环境条件
D. 此过程说明高度分化的动物细胞核也具有全能性
【答案】A
【解析】
【分析】克隆动物和提供细胞核的动物不完全相同的原因是：受细胞质基因的影响；可能发生突变；受环境因素的影响。
【详解】A、由于细胞核基因来自甲羊，所以克隆羊“多利”的主要性状与甲羊一致，少数与细胞质基因控制的性状与甲羊不同，A错误；
B、克隆羊多利的培育过程中采用的生物技术有核移植、动物细胞培养和胚胎移植技术，B正确；
C、由于卵母细胞的细胞质中含有促成熟因子，能调控细胞核的发育，所以乙羊的去核卵细胞为重组细胞基因表达提供了细胞内的环境条件，C正确；
D、此过程说明高度分化的动物细胞的细胞核具有全能性，D正确。
故选A
第Ⅱ卷
二、非选择题（共40分）
31. 在农业生产研究上，常需要进行微生物的分离和计数。
（1）下表为两种微生物的培养基配方：
A组：
B组
注：上述两种培养基中的物质溶解后，均用蒸馏水定容至1000mL。
①从功能上来看，A培养基属于_____培养基。
②如果要对土壤中分解尿素的细菌进行分离，则需要选择_____（填“A”或“B”）培养。该培养基中的碳源是_____。
（2）如图是某同学采用的接种微生物的方法，请回答下列问题：
①本实验采用的接种微生物的方法是_____法，把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，为达到这一目的，操作上应注意：每次划线前要_____接种环；接种环冷却后从_____开始划线
②除了图示方法外，还有一种方法也可以获得单菌落，这种方法得到的数值一般比实际值_____，原因是：_____。
③三位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数量，在对应稀释倍数为106的培养液中各取0．1ml涂布平板，得到以下统计结果：
甲同学涂布了2个平板，统计的菌落数是236和260，取平均值248；乙同学涂布了3个平板，统计的菌落数是210、240和250，取平均值233；丙同学涂布了3个平板，统计的菌落数是21、212和256，取平均值163．在三位同学的统计结果中，_____同学的统计结果是最正确的，每毫升的活菌数是_____。
【答案】31. ①. 选择 ②. A ③. 葡萄糖
32. ①. 平板划线 ②. 灼烧 ③. 上次划线的末端 ④. 小 ⑤. 当两个或者多个菌落生长在一起时，观察到的往往按照一个菌落计算 ⑥. 乙 ⑦. 2.33109
【解析】
【分析】培养基的基本组成成分：碳源（提供碳元素的物质）、氮源（提供氮元素的物质）、水、无机盐（保持渗透压、调节pH）等。根据功能分类，培养基可以分为选择培养基和鉴定培养基。选择培养机的概念：在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长成长的培养基，称为选择培养基。
【小问1详解】
根据功能分类，培养基可以分为选择培养基和鉴定培养基。选择培养机的概念：在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长成长的培养基，称为选择培养基。A培养基尿素作为唯一氮源，因此可以利用尿素的微生物可以在培养基上成长，不能利用尿素的微生物就不能生长，因此A培养基是选择培养基。如果要对土壤中分解尿素的细菌进行分离，则需要选择尿素作为唯一氮源的培养基，因此选择A培养基。A培养基中碳源是提供碳元素的物质，因此碳源是葡萄糖。
【小问2详解】
微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。因此从图中可知，本实验采用的接种微生物的方法是平板画线法。通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，经数次划线后培养，可以分离获得单菌落，其具体操作为：灼烧接种环后，将其冷却后，从第一次划线的末端开始第二次划线，重复以上操作。做第三、四、五次划线，注意不要将最后一次的划线与第一次的划线相连。除了图示方法外，稀释涂布平板法也可以用于分离微生物以外，也可用来统计样品中活菌的数目。当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的每一个单菌落来源于样品稀释中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品大约含有多少活菌。值得注意的是，统计的菌落往往比活菌的实际数目少。这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个群落。为了保证结果准确，一般选择菌落数为30~300的平板进行计数。在同一稀释度下，应至少对3个平板进行重复计数，然后求出平均值。因此乙同学统计的结果是最正确的。每毫升的活菌数=（CV）M=平板上菌落数的平均值体积稀释倍数=2330.1106=2.33×109。
32. 选取A、B植株的细胞进行如下图操作，请回答问题：
（1）实现图中的①过程最常用的方法是_____。
（2）②过程的发生，诱导方法有_____法。
（3）③表示融合后的原生质体在产生新的细胞壁，新细胞壁的产生与细胞内_____（细胞器）有密切关系。
（4）如果细胞A内含a个染色体，细胞B内含b个染色体，则“杂种细胞”内含_____个染色体：体细胞杂交的优点是_____。
（5）④⑤过程是一个_____和_____的过程。
（6）如果原生质体A为小鼠的浆细胞，原生质体B为小鼠的骨髓瘤细胞，诱导二者融合时，如果只考虑两两融合，有_____种可能。
【答案】（1）酶解法（纤维素酶和果胶酶）
（2）物理法（离心、电激、振动等）和化学法（聚乙二醇）
（3）高尔基体 （4） ①. a+b ②. 克服远缘杂交不亲合的障碍
（5） ①. 脱分化 ②. 再分化
（6）3 ##三
【解析】
【分析】分析题图：图示表示植物体细胞杂交过程，其中①表示制备原生质体，②表示诱导原生质体的融合，③表示再生出新的细胞壁，④表示脱分化过程，⑤表示再分化过程。
【小问1详解】
图中①表示获取原生质体，该过程常采用酶解法（纤维素酶和果胶酶）去除细胞壁。
【小问2详解】
②表示诱导原生质体融合的过程，诱导方法包括物理法（离心、电激等）和化学法（聚乙二醇等）。
【小问3详解】
③表示融合后的原生质体在产生新的细胞壁，植物细胞中，高尔基体与细胞壁的形成有关。
【小问4详解】
若细胞A内含a个染色体，细胞B内含b个染色体，则“杂种细胞”内含有双亲的遗传物质，即含a+b个染色体；与传统的育种方法相比，体细胞杂交方法的优点是克服远缘杂交不亲合的障碍。
【小问5详解】
杂种细胞通过④脱分化、⑤再分化过程形成杂种植物。
【小问6详解】
诱导小鼠浆细胞和骨髓瘤细胞融合时，如果只考虑两两融合，有三种可能，两个浆细胞融合、两个骨髓瘤细胞融合，和浆细胞与骨髓瘤细胞的融合细胞。
33. 埃博拉病毒（EBV）呈纤维状，EBV衣壳外有包膜，包膜上有5种蛋白棘突（VP系列蛋白和GP蛋白），其中GP蛋白最为关键，能被宿主细胞强烈识别。人感染埃博拉病毒后会引起出血热。治疗疾病的有效方法是注射疫苗或者抗体。如图为制备埃博拉病毒的单克隆抗体的过程，据图回答问题：
（1）B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合的过程体现了细胞膜具有__________________的结构特点。在体外融合时需要诱导，与诱导植物原生质体融合不同的是：图中还可用__________________诱导融合。筛选后的所需细胞群应具备的特点是________________________________________。
（2）在体外进行动物细胞培养时需要在合成培养基的基础上添加__________________等天然成分。同时，为了维持培养液的pH需要提供的气体是__________________。
（3）选出特定的杂交瘤细胞可以在体外或小鼠腹腔内培养，最终从________________________中获取大量的单克隆抗体。
【答案】（1） ①. （一定的）流动性 ②. 灭活的病毒 ③. 既能无限增殖又能产生抗体
（2） ①. 血清 ②. 二氧化碳
（3）培养液或小鼠腹水
【解析】
【分析】动物细胞培养所需气体主要有O2和CO2。O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。在进行细胞培养时，通常采用培养皿或松盖培养瓶，并将它们置于含有95%空气和5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养。
【小问1详解】
B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合的过程体现了细胞膜具有一定的流动性的结构特点。诱导细胞融合的因素有聚乙二醇、电激等，与诱导植物原生质体融合不同的是图中还可用灭活的病毒融合。将融合后的细胞经过第一次筛选后可得到杂交瘤细胞，再经过克隆化培养和抗体检测，可筛选出既能迅速大量增殖又能产生专一抗体的杂交瘤细胞。故图中所需细胞群应具备的特点是：既能迅速大量增殖又能产生专一的抗体。
【小问2详解】
在体外进行动物细胞培养时需要在合成培养基的基础上添加血清、血浆等天然成分。同时为了维持培养液的 pH值，需要提供 95%空气和5%的二氧化碳的气体环境。
【小问3详解】
筛选后的杂交瘤细胞既可以在体外培养，也可以注射到小鼠的腹腔内增殖，所以获得的单克隆抗体最终可以从培养液或小鼠腹水中提取。
34. 科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛，如果要加速转基因奶牛的繁育，可以对此转基因奶牛进行克隆（如图所示）。请结合图示回答下列相关问题：
（1）在进行细胞培养之前，要对取自转基因奶牛的组织细胞进行分离，形成单个细胞，这个过程中需要利用胶原蛋白酶或_____酶处理。
（2）在进行原代培养时，细胞增殖的方式是_____，此外，细胞增殖还表现出_____和接触抑制等特点。
（3）利用体细胞进行核移植的难度明显_____（填“大于”或“小于”）胚胎细胞的核移植。
（4）从动物卵巢中采集的卵母细胞，一般要在体外培养到_____期才能去核用于实验。
【答案】（1）胰蛋白 （2） ①. 有丝分裂 ②. 贴壁生长
（3）大于 （4）减数分裂Ⅱ中期
【解析】
【分析】哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植。由于动物胚胎细胞分化程度低，表现全能性相对容易，而动物体细胞分化程度高，表现全能性十分困难，因此动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植。而在动物体细胞核移植中，非人灵长类动物的体细胞核移植非常困难。
【小问1详解】
动物细胞之间的连接物质主要是蛋白质，动物细胞培养时，常用胶原蛋白酶和胰蛋白酶处理动物组织以分散成单个细胞。
【小问2详解】
动物细胞培养的原代、传代培养都是进行有丝分裂，原代培养的细胞增殖还表现出贴壁生长和接触抑制等特点。
【小问3详解】
体细胞核的全能性低于胚胎细胞细胞核的全能性，分裂能力也低于胚胎细胞，体细胞核移植的难度明显大于胚胎细胞核移植。
【小问4详解】
当卵母细胞处于减数第二次分裂中期才能受精，从动物卵巢中采集的卵母细胞，一般要在体外培养到减数第二次分裂中期。KH2PO4
Na2HPO4
MgSO4·7H2O
葡萄糖
尿素
琼脂
1.4g
2.1g
0.2g
10.0g
1.0g
15.0g
纤维素粉
NaNO3
Na2HPO4·7H2O
KH2PO4
MgSO4·7H2O
KCl
酵母膏
水解酪素
5g
1g
1.2g
0.9g
0.5g
0.5g
0.5g
0.5g
本试卷分第Ⅰ卷（选择题）和第Ⅱ卷（非选择题）两部分。满分100分，考试时间60分钟。
第Ⅰ卷
一、选择题（本卷共30题，每题2分，共60分。在每题给出的四个选项中，只有一项最符合题目要求）
1. 在发酵过程中果醋、果酒、腐乳、泡菜所用菌种依次是（ ）
①木曲霉 ②黄曲霉 ③酵母菌 ④乳酸菌 ⑤毛霉⑥青霉 ⑦醋酸菌
A. ⑦③⑥④B. ⑦③④⑤C. ⑦③②④D. ⑦③⑤④
【答案】D
【解析】
【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。
2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。
3、参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型。
4、参与泡菜制作的微生物是乳酸菌，其新陈代谢类型是异养厌氧型。
【详解】果醋制作利用了醋酸菌的有氧呼吸，即⑦；果酒制作利用了酵母菌的无氧呼吸并且产生酒精，即③；腐乳制作利用了毛霉等真菌的有氧呼吸，即⑤；泡菜制作利用了乳酸菌的无氧呼吸，即④。综上分析，D正确，ABC错误。
故选D。
2. 桂林腐乳历史悠久，颇负盛名，是传统特产“桂林三宝”之一。桂林腐乳从磨浆、过滤到定型、压干、霉化都有一套流程，选材也很讲究。目前我国各地都有腐乳的生产，虽然配料不同、品种名称和口感不一，但制作原理大都相同。现代化生产流程如下：
下列关于传统发酵技术的说法，错误的是（ ）
A. 果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌属于兼性厌氧微生物，在有氧条件下大量繁殖
B. 制作果醋需要醋酸菌，它是一种严格厌氧的微生物，可将葡萄中的糖分解为醋酸
C. 多种微生物参与了腐乳的制作，如酵母菌、毛霉、曲霉等
D. 制作泡菜利用的乳酸菌是一种厌氧微生物，可以通过无氧呼吸产生乳酸
【答案】B
【解析】
【分析】1、在利用酵母菌发酵时最好是先通入足够的无菌空气在有氧环境下一段时间使其繁殖，再隔绝氧气进行发酵；酒精发酵的最佳温度是在18℃～25℃，pH最好是弱酸性。
2、醋酸菌好氧型细菌，当缺少糖源时和有氧条件下，可将乙醇（酒精）氧化成醋酸；当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；醋酸菌生长的最佳温度是在30℃～35℃。
3、泡菜的制作原理：起作用的乳酸菌，其代谢类型为异养厌氧型。
4、参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。
【详解】A、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌属于兼性厌氧生物，在有氧条件下进行有氧呼吸产生大量能量，能够大量繁殖，A正确；
B、制作果醋需要醋酸菌，它是一种好氧微生物，可将葡萄中的糖分解为醋酸，B错误；
C、多种微生物参与了腐乳的制作，如酵母菌、毛霉、曲霉等，C正确；
D、制作泡菜利用的乳酸菌是一种厌氧微生物，可以通过无氧呼吸产生乳酸，D正确。
故选B。
【点睛】
3. 某同学尝试自己制作酸菜，制作时向酸菜坛中加入了一些“陈酸菜水”，用质量百分比为5%的食盐水进行腌制，并在不同的腌制时间测定了酸菜中亚硝酸盐的含量。下列说法错误的是（ ）
A. 泡菜和酸菜都主要是利用乳酸菌制作而成的
B. 酸菜“咸而不酸”的原因是食盐加入过多所致
C. 制作酸菜时，乳酸会抑制其它微生物生长，故材料和工具可不做消毒处理
D. 不同的腌制时间，酸菜中亚硝酸盐的含量可能相同
【答案】C
【解析】
【分析】泡菜的制作所使用的微生物是乳酸菌，代谢类型是异养厌氧型，在无氧条件下乳酸菌能够将蔬菜中的葡萄糖氧化为乳酸。制作泡菜时，需要控制的主要因素有腌制时间、温度和食盐的用量等。温度过高，食盐用量过低、腌制时间过短，容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加。
【详解】A、泡菜和酸菜的制作所使用的微生物是乳酸菌，代谢类型是异养厌氧型，在无氧条件下乳酸菌能够将蔬菜中的葡萄糖氧化为乳酸，A正确；
B、腌的酸菜只有咸味没有酸味的原因是盐放得多了一点，因为盐放多了，醋酸菌活跃不起来，所以，只有咸味没有酸味，B正确；
C、制作酸菜时，乳酸会抑制其它微生物生长，但仍要重视材料和工具的消毒处理，避免更多的杂菌污染，C错误；
D、泡菜制作过程中亚硝酸盐是先增加，然后逐渐减低，最后稳定在较低水平，因此不同的腌制时间，酸菜中亚硝酸盐的含量可能相同，D正确。
故选C。
4. 若在固体培养基上用稀释涂布法培养细菌，看到的结果不可能是
A. B.
C. D.
【答案】D
【解析】
【分析】常用的微生物分离方法有平板划线法，稀释涂布法。
一、平板划线分离法：
由接种环从菌液中沾取少许待分离的材料，在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线，微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少，并逐步分散开来，如果划线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，可在平板表面得到单菌落。
二、稀释涂布平板法：
稀释平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞。
【详解】A、B、C选项的固体培养基上所形成的是一个个的单个菌落，是用稀释涂布法培养细菌得到的结果，D选项的固体培养基上所形成的不是单菌落，是平板划线分离得到的结果。
故选D
5. 不同培养基的具体配方不同，但一般都含( )
A. 碳源、磷酸盐和维生素B. 氮源和维生素
C. 水、碳源、氮源和无机盐D. 碳元素、氧元素、氢元素、氮元素
【答案】C
【解析】
【详解】培养基（Medium）是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料，一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）以及维生素和水等。答案C。
6. 采用干热灭菌、灼烧灭菌、高压蒸汽灭菌、紫外线照射等几种方法，可分别杀死哪些部位的杂菌（ ）
A. 接种环、吸管、培养基、接种室
B. 吸管、接种环、培养基、接种箱
C. 培养基、吸管、接种环、接种箱
D. 培养皿、吸管、培养基、双手
【答案】B
【解析】
【分析】
总结常见灭菌方法的应用：高压蒸汽灭菌适用于对一般培养基和玻璃器皿的灭菌；干热灭菌适用于需要保持干燥的空玻璃器皿的灭菌，凡带有橡胶的物品和培养基，都不能进行干热灭菌；无菌室缓冲间和接种箱常用紫外线灯作空气灭菌；微生物接种时的金属接种工具和试管口可以用灼烧灭菌。
【详解】接种环属于接种用的金属工具，需要用灼烧灭菌；吸管在使用前需保持干燥，需要用干热灭菌；培养基应该用高压蒸汽灭菌；接种室、接种箱需要用紫外线照射灭菌；双手可以用医用酒精消毒；综上所述，B符合题意，ACD不符合题意。
故选B。
7. 下列有关平板划线操作的描述，错误的是（ ）
A. 将接种环放在酒精灯火焰上灼烧，直到接种环烧红
B. 接种环在平板上划线的位置是随机的
C. 在挑取菌种前和接种完毕后均要将试管口通过酒精灯火焰
D. 最后一区的划线不能与第一区相连
【答案】B
【解析】
【分析】
平板划线法是指通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种，逐步稀释分散到培养基的表面，最后得到由单个细胞繁殖而来的菌落。
【详解】A、将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他的金属用具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，A正确；
B、接种环在平板上划线时，采用分区划线，每个区要画3-5条平行线，而不是随机划的，B错误；
C、在挑取菌种前和接种完毕后的试管口要通过火焰，以防止杂菌污染，C正确；
D、划线时要最后一区的划线不能与第一区线相连，D正确。
故选B。
8. 下列关于微生物实验操作的叙述，错误的是
A. 培养微生物的试剂和器具都要进行高压蒸汽灭菌
B. 接种前后，接种环都要在酒精灯火焰上进行灼烧
C. 接种后的培养皿要倒置，以防培养污染
D. 菌种分离和菌落计数都可以使用固体培养基
【答案】A
【解析】
【分析】无菌技术指通过一定的物理、化学的手段，防止实验室培养物被外来微生物污染，保持微生物的纯培养的技术，其中包括在微生物的分离、转接、保存等过程中防止其他微生物污染的手段。常见的方法：消毒和灭菌。
【详解】接种室、接种箱等常用紫外线消毒法处理，接种环等常用灼烧灭菌法处理，吸管、培养皿等常用干热灭菌法处理，培养基及多种器材用高压蒸汽灭菌法处理，A错误；为了防止杂菌污染，每次接种前后，接种环都要进行灼烧灭菌，B正确；接种后，培养皿需要倒置，以防皿盖上水珠落入培养基造成污染，C正确；分离菌种可以用平板划线法和稀释涂布平板法，后者还可以用于微生物的计数，所用培养基为固体培养基，D正确。故选A。
9. 分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是（ ）
①加尿素 ②不加尿素 ③加琼脂 ④不加琼脂
⑤加葡萄糖 ⑥不加葡萄糖 ⑦加硝酸盐 ⑧不加硝酸盐
A. ①③⑤⑦B. ②④⑥⑧C. ①③⑤⑧D. ①④⑥⑦
【答案】C
【解析】
【分析】
分离土壤中分解尿素的细菌的原理是在以尿素为唯一氮源的培养基上，只有能分解尿素的细菌才能以尿素为氮源生长繁殖，不能分解尿素的细菌因缺乏氮源而无法生长繁殖。
【详解】①②要分离分解尿素的细菌应以尿素为唯一氮源，①正确、②错误；
③④分离土壤中分解尿素的细菌用固体培养基需加入琼脂，③正确，④错误；
⑤⑥土壤中分解尿素的细菌为异氧型，故培养基中需要加碳源即葡萄糖，⑤正确，⑥错误；
⑦⑧培养基中不需要加除尿素以外的其它氮源，故不加硝酸盐，⑦错误，⑧正确；
故符合题意的有①③⑤⑧，即C正确，ABD错误。
故选C。
10. 高中生物学实验中，在接种时不进行严格无菌操作对实验结果影响最大的一项是
A. 将少许干酵母加入到新鲜的葡萄汁中
B. 将毛霉菌液接种在切成小块的鲜豆腐上
C. 将转基因植物叶片接种到无菌培养基上
D. 将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上
【答案】C
【解析】
【分析】作为植物组织培养，要求非常严格的无菌环境，如果灭菌不彻底，培养过程中存在污染，会造成培养的幼苗生长缓慢甚至培育失败。原理有以下几种：
（1）与幼苗竞争培养基中的营养，而因为细菌和真菌生殖比植物快得多，导致植株得不到营养。
（2）寄生于植物体内，利用植物细胞中的原料合成菌类自身的物质，导致幼苗死亡。
（3）已有报道，寄生菌可能导致植物内部的基因改变，当这个基因是对生长必要的基因时，就导致幼苗的死亡。此外，污染菌的基因可通过某种暂时未知细节的机制转入植物细胞内并表达，从而导致培养失败。
【详解】A、不进行严格的灭菌对葡萄酒制作的影响不大，因为多数微生物不能在缺氧、酸性和含糖较高的环境中生存，A错误；
B、不进行严格的灭菌对腐乳制作的影响不大，因为腐乳制作时还需在其中放入酒精、盐和香辛料等，这些都具有杀菌作用，B错误；
C、植物组织培养要求严格的无菌环境，如果灭菌不彻底，会造成培养的幼苗生长缓慢甚至培育失败，C正确。
D、选择培养基是根据要培养的微生物的代谢特点制备的，一般的杂菌在其上面也很难生存，D错误。
故选C。
【点睛】本题综合考查果酒、果醋、腐乳的制作，植物组织培养，微生物的培养过程中的无菌操作，属于对识记、理解层次的考查。
11. 关于发酵工程应用的说法错误的是（ ）
A. 发酵工程的产品可以是微生物的代谢产物
B. 通过发酵工程可以从微生物中提取一些酶
C. 通过发酵工程可以从微生物中提取单细胞蛋白
D. 发酵工程的产品可以是微生物的菌体
【答案】C
【解析】
【分析】1、发酵工程生产的产品有两类：一类是代谢产物，另一类是菌体本身；
2、产品不同，分离提纯的方法一般不同；
①如果产品是菌体，可采用过滤，沉淀等方法将菌体从培养液中分离出来；
②如果产品是代谢产物，可用萃取、蒸馏、离子交换等方法进行提取；
3、发酵过程中要严格控制温度、PH、溶氧、通气量与转速等发酵条件；
4、发酵过程一般来说都是在常温常压下进行，条件温和、反应安全，原料简单、污染小，反应专一性强，因而可以得到较为专一的产物。
【详解】A、根据分析，发酵工程的产品可以是微生物的代谢产物，也可以是微生物本身，A正确；
B、通过发酵工程可以从微生物中提取相应的酶，B正确；
C、单细胞蛋白本生就是一种微生物，并不是一种微生物细胞的提取物，C错误；
D、发酵工程的产品可以是微生物的菌体，D正确。
故选C。
12. 下列技术或方法与原理相符的是（ ）
A. 人参细胞的大量培养和动物细胞培养——细胞的全能性
B. 植物组织培养和单克隆抗体的制备——细胞的全能性
C. 人鼠细胞融合——细胞膜的流动性
D. 克隆羊多利的培育——有性生殖
【答案】C
【解析】
【分析】1、植物细胞工程的主要技术包括植物组织培养和植物体细胞杂交，其中植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性，植物体细胞杂交的原理是细胞膜的流动性和细胞的全能性。
2、动物细胞工程的主要技术包括动物细胞培养、动物细胞融合、核移植及单克隆抗体，其中动物细胞培养的原理是细胞增殖，动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性，核移植的原理是动物细胞的细胞核具有全能性，单克隆抗体制备的原理是细胞膜的流动性和细胞增殖。
【详解】A、人参细胞的大量培养和动物细胞培养原理都是细胞增殖，A错误；
B、植物组织培养原理是细胞的全能性，单克隆抗体的制备的原理是细胞膜的流动性和细胞增殖，B错误；
C、人鼠细胞融合的原理是细胞膜的流动性，C正确；
D、克隆羊多利的培育原理是动物细胞的细胞核具有全能性，属于无性繁殖，D错误。
故选C。
13. 下列关于微生物发酵过程的说法，正确的是（ ）
A. 菌种选育、扩大培养及配置培养基和灭菌是发酵工程的中心环节
B. 只要不断地向发酵罐中通入液体培养基，就能保证发酵的正常进行
C. 在发酵工程的发酵环节中，发酵条件会影响微生物的生长繁殖，也会影响微生物的代谢途径
D. 在发酵过程中，要严格控制温度、pH、溶氧、通气量与转速等发酵条件，不需添加营养组分
【答案】C
【解析】
【分析】1、发酵是利用微生物，在适宜的条件下，将原料经过特定的代谢途径转化为人类所需要的产物的过程。发酵过程：菌种选育→菌种的扩大培养→培养基的配制→灭菌和接种→发酵条件的控制→分离和提纯。
2、谷酸棒状杆菌是一种异养兼性厌氧细菌，谷氯酸棒状杆菌在扩大培养时，碳氛比应为4:1，而在发酵获得谷氨酸时碳氟比应为3:1。扩大培养应在有氧条件下进行，在无氧条件下，谷氨酸棒状杆菌能将葡萄糖和含氯物质(如尿素、硫酸铵、氨水)合成为谷氨酸。
【详解】A、发酵工程的内容包括菌种选育、培养基的配制、灭菌、扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面，其中发酵过程是发酵的中心阶段，A错误；
B、发酵过程中应随时检测培养液中的细菌数目、产物浓度等，同时应对发酵过程中的一些条件进行控制才能保证发酵的正常进行，B错误；
C、发酵过程中要严格控制温度、pH、溶氧、通气量与转速等发酵条件，这是因为环境条件的变化，不仅会影响菌种的生长繁殖，而且会影响菌种代谢产物的形成。例如，在谷氨酸发酵过程中，当pH呈酸性时，谷氨酸棒状杆菌就会生成乙酰谷氨酰胺；当溶氧不足时，生成的代谢产物就会是乳酸或琥珀酸，C正确；
D、发酵过程是发酵中心阶段，要严格控制温度、pH、溶氧、通气量与转速等发酵条件，还要及时添加必需的培养基组分，以满足菌种的营养需要，D错误。
故选C。
14. 在植物体内，茎的顶端分生组织的细胞具有细胞周期，但不能表现出全能性，是因为（ ）
A. 细胞核失去了全能性
B. 不同的细胞基因是不同的
C. 细胞中基因的表达有选择性
D. 细胞核中的基因发生了不同的变异
【答案】C
【解析】
【分析】
关于“细胞分化”，考生可以从以下几方面把握：（1）细胞分化是指在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态、结构和生理功能上发生稳定性差异的过程。（2）细胞分化的特点：普遍性、稳定性、不可逆性。（3）细胞分化的实质：基因的选择性表达。（4）细胞分化的结果：使细胞的种类增多，功能趋于专门化。
【详解】A、茎顶端分生组织的细胞，其细胞核没有失去全能性，A错误；
BD、同一个体的所有体细胞都是由同一个受精卵经分裂，分化形成的，都具有相同的遗传物质，BD错误；
C、在特定的时间和空间条件下，细胞中的基因会有选择性地表达出各种蛋白质，从而构成生物体的不同组织和器官，所以在生物生长发育过程中，茎顶端分生组织的细胞具有细胞周期，但不能表现出全能性，C正确。
故选C。
15. 植物细胞表现出全能性的必要条件和增殖方式分别是（ ）
A. 脱离母体后，在适宜的营养和外界条件下；减数分裂
B. 导入其他植物细胞的基因；有丝分裂
C. 将成熟筛管的细胞核移植到去核的卵母细胞内；减数分裂
D. 脱离母体后，在适宜的营养和外界条件下；有丝分裂
【答案】D
【解析】
【分析】植物细胞具有全能性，而表现出全能性需要一定的条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。植物细胞组织培养形成个体的过程中，细胞通过有丝分裂方式进行增殖。
【详解】植物组织细胞脱离母体后，①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）；植物细胞增殖方式为有丝分裂，综合以上分析，ABC错误，D正确。
故选D。
16. 下列关于单克隆抗体的说法，不正确的是（ ）
A. 单克隆抗体的制备原理是细胞膜具有选择透过性的特点
B. 单克隆抗体在多种疾病的诊断和病原体鉴定中发挥着重要的作用
C. 单克隆抗体能准确地识别各种抗原物质的细微差别，并跟一定抗原发生特异性结合
D. 单克隆抗体可以制成抗体——药物偶联物(ADC)
【答案】A
【解析】
【分析】单克隆抗体的制备时动物细胞融合技术的应用之一，此过程中需要先注射抗原，使生物体产生具有免疫能力的B淋巴细胞，再将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，并筛选出能产生特异性抗体和大量增殖的杂交瘤细胞，最后经过体内和体外培养获取单克隆抗体．单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高，并可能大量制备的优点。
【详解】A、单克隆抗体的制备过程涉及动物细胞融合，其原理是细胞膜具有一定的流动性，A错误；
B、单克隆抗体可作为诊断剂，在多种疾病的诊断和病原体鉴定中发挥着重要的作用，B正确；
C、单克隆抗体的应用主要有两个方面，一个是作为诊断试剂，能准确地识别各种抗原物质的细微差别，并跟一定抗原发生 特异性反应。另一方面可以用于治疗、预防疾病和运载药物，C正确；
D、单克隆抗体特异性强、灵敏度高，与抗癌药物结合可以制成“抗体—药物偶联物（ADC）”，减少药物对正常组织细胞的毒害作用，D正确。
故选A。
17. 下面是植物组织培养过程示意图，相关说法正确的是（ ）
A. 上述植物组织培养的过程依据的生物学原理是植物细胞具有全能性
B. 需要对外植体进行严格的灭菌处理，以防止杂菌污染
C. 外植体若是月季的花药，则图中的①过程需要光照
D. 外植体若是菊花的根尖组织，因细胞中没有叶绿体，故培养成的新植株叶片无色
【答案】A
【解析】
【分析】
1、据图分析，①是脱分化，②③表示再分化，④表示移栽过程。
2、植物组织培养的过程：离体的植物组织，器官或细胞（外植体）→愈伤组织→胚状体→植株。
【详解】A、植物组织培养依据的生物学原理为细胞的全能性，即已经分化的细胞仍然具有发育成完整植株的潜能，A正确；
B、外植体一般只消毒处理，不灭菌处理，以保持外植体的活性，B错误；
C、外植体若是月季的花药，则图中的①过程是脱分化，不需要光照，C错误；
D、外植体若是菊花的根尖组织，其细胞中虽然没有叶绿体，但其细胞中含有叶绿体形成的相关基因，故培养成的新植株叶片有叶绿体，因此有色，D错误。
故选A。
18. 如图为“番茄－马铃薯”的培育过程示意图，有关叙述中正确的是（ ）
A. 获得a、b细胞需要胰蛋白酶和果胶酶
B. 诱导a、b细胞融合的化学试剂一般是秋水仙素
C. a、b细胞融合为c细胞的原理是细胞膜具有流动性
D. d、e、f过程表示植物组织培养过程，e、f分别为脱分化和再分化
【答案】C
【解析】
【分析】1．植物体细胞杂交过程的工具酶是纤维素酶和果胶酶，动物细胞培养技术的工具酶是胰蛋白酶或胶原蛋白酶。
2．动物细胞融合与植物原生质体杂交的原理都是细胞膜的流动性。
3．诱导植物原生质体融合常用聚乙二醇，诱导染色体数目加倍常用秋水仙素。
【详解】分析图形可知，图中a、b是两种原生质体，获取原生质体需要纤维素酶和果胶酶，A错误；诱导原生质体融合的化学试剂一般用聚乙二醇，B错误；原生质体融合的原理是生物膜具有流动性，C正确；d、e、f过程表示植物的组织培养过程，e、f均为再分化，D错误。
19. 细胞的全能性是指（ ）
A. 细胞具有各项生理功能
B. 已分化的细胞能恢复到分化前的状态
C. 已分化的细胞全部能再进一步分化
D. 已分化的细胞仍具有发育成完整个体的潜能
【答案】D
【解析】
【分析】关于细胞的“全能性”，可以从以下几方面把握：（1）概念：细胞的全能性是指已经分化的细胞仍然具有发育成完整个体的潜能。（2）细胞具有全能性的原因是：细胞含有该生物全部的遗传物质。（3）细胞全能性大小不同，一般植物细胞的全能性大于动物细胞，所以植物细胞比动物细胞更容易发育成完整个体。（4）细胞表现出全能性的条件：离体、适宜的营养条件、适宜的环境条件。
【详解】全能性是指已分化的细胞仍具有产生完整有机体或分化成其他各种细胞的潜能和特性，其根本原因是细胞具有该生物生长发育的全套的遗传物质。
故选D。
20. 如图为某同学构建的细胞工程知识框架。以下相关说法正确的是（ ）
A. 图中②属于分子水平上的生物工程技术
B. 体外培养的动物细胞大多数都需要贴附于某些基质表面才能生长增殖
C. 动物细胞培养液不需要定期更换，只需要定期添加营养物
D. 植物组织培养和动物细胞培养依据的原理都是细胞的全能性
【答案】B
【解析】
【分析】分析题图：图示为细胞工程的概念图，其中①为植物体细胞杂交技术，②为核移植技术。
【详解】A、图中②为核移植，属于细胞水平上的生物工程技术，A错误；
B、体外培养的动物细胞一类能悬浮在培养液中生长增殖，另一类需要贴附于某些基质表面才能生长增殖，贴附生长的占多数，B正确；
C、动物细胞培养过程中需要定期更换培养液，为了清除代谢废物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害，C错误；
D、植物组织培养的原理是细胞的全能性，而动物细胞培养的原理是细胞增殖，D错误。
故选B。
21. 下列实验程序有错误的是（ ）
A. 原生质体 A +原生质体B杂交原生质体
B. 浆细胞 + 骨髓瘤细胞 产生特定抗体的杂交瘤细胞
C. 动物组织制备细胞悬液 → 原代培养 → 传代培养
D. 离体细胞消毒、接种愈伤组织试管苗
【答案】A
【解析】
【分析】1、单克隆抗体的制备过程：首先用特定抗原注射小鼠体内，使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞。利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，在经过三次筛选：①筛选能够产生单一抗体的B淋巴细胞②筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）③筛选出能够产生特异性抗体的细胞群。两次抗体检测：专一抗体检验阳性，获得能产生特异性抗体、又能大量增殖杂交瘤细胞。最后从培养液或小鼠腹水中提取单克隆抗体。
2、植物组织培养过程：离体的细胞、组织或器官脱分化形成愈伤组织再分化形成胚状体最后发育成植株。
【详解】A、原生质体A和原生质体B融合采用物理方法（离心、振动、电激）和化学方法（聚乙二醇），A错误；
B、浆细胞和骨髓瘤细胞融合，需要筛选两次，筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞），筛选出能够产生特异性抗体的细胞群，B正确；
C、胰蛋白酶能将组织细胞分散开来，进行原代培养，由于存在接触性抑制，再用胰蛋白酶能将组织细胞分散开来，进行传代培养，C正确；
D、离体细胞消毒、接种，然后脱分化形成愈伤组织，再分化形成试管苗，D正确。
故选A。
22. 某株名贵花卉用种子繁殖会发生性状分离。为了防止性状分离并快速繁殖，可以利用该植株的一部分器官或组织进行离体培养，发育出完整的植株，进行离体培养时不应采用该植株的
A. 茎尖B. 子房壁C. 叶片D. 花粉粒
【答案】D
【解析】
【分析】
【详解】无性生殖能保持亲本优良性状，植物组织培养就是无性生殖中的一种，但选择的材料不能是花粉粒，否则就为有性生殖中的单性生殖。花粉粒是经减数分裂形成的，在此过程中发生了基因重组，因而不一定能保持亲本的优良性状，故选D。
【点睛】
23. 在植物组织培养过程中，容易获得突变体的主要原因是（ ）
A. 培养的细胞一直处于不断的分生状态B. 培养基营养丰富，易于植物生长
C. 纺锤丝的形成容易受抑制D. DNA复制容易受抑制
【答案】A
【解析】
【分析】间期DNA复制时由于DNA解旋，使DNA稳定性降低，容易发生基因突变，所以基因突变一般发生在DNA复制时期。
【详解】在植物组织培养过程中，由于培养细胞一直处于不断的分生状态，容易受到培养条件和外界压力（如射线、化学物质等）的影响而产生突变，因此容易获得突变体。培养基营养丰富，易于植物生长，不能体现容易获得突变体，纺锤丝的形成容易受抑制，则细胞的分裂受抑制，不能体现容易获得突变体，DNA复制容易受抑制，细胞不容易发生突变，综上分析，A正确，BCD错误。
故选A。
24. 如图是四倍体兰花的叶片通过植物组织培养形成植株的示意图。下列相关叙述中正确的是( )
A. ②阶段会发生减数分裂过程
B. ①阶段需生长素，而③阶段需细胞分裂素
C. 此过程体现了植物细胞具有全能性
D. 此兰花花药经离体培养所得植株为二倍体
【答案】C
【解析】
【分析】分析题图：图示表示将四倍体兰花的叶片通过植物组织培养形成植株的过程，其中①阶段表示脱分化，该阶段能形成愈伤组织，其细胞分化程度低，全能性高；②阶段表示再分化过程，该阶段能形成胚状体，进一步发育形成植株。
【详解】A、②阶段细胞通过有丝分裂方式增殖，不能发生减数分裂，A错误；
B、①和③阶段都需要生长素和细胞分裂素，只是这两种激素的比例不同，B错误；
C、图解显示的是植物组织培养过程，其原理是植物细胞具有全能性，C正确；
D、此兰花的花药经离体培养所得植株为单倍体，D错误。
故选C。
25. 下列关于细胞产物的工厂化生产的叙述，错误的是（ ）
A. 细胞产物的工厂化生产是植物细胞工程的重要用途之一
B. 植物细胞产物包括蛋白质、脂肪、药物、香料、生物碱等
C. 利用细胞培养技术获得紫草素可实现细胞产物的工厂化生产
D. 培养的愈伤组织需要经过再分化产生特定的组织细胞后才能产生特定的细胞产物
【答案】D
【解析】
【分析】植物细胞工程技术的应用：植物繁殖新途径、作物新品种培育、细胞产物的工厂化生产。
【详解】A、植物细胞工程的重要用途包括植物繁殖新途径、作物新品种的培育和细胞产物的工厂化生产，故细胞产物的工厂化生产是植物细胞工程的重要用途之一，A正确；
B、植物细胞产物包括蛋白质、脂肪、药物、香料、生物碱等，这些都可以进行细胞产物的工厂化生产，B正确；
C、细胞培养技术耗资少，易于实现规模化生产，因此利用细胞培养技术获得紫草素可实现细胞产物的工厂化生产，C正确；
D、培养的愈伤组织不需要经过再分化产生特定的组织细胞就能产生特定的细胞产物，D错误。
故选D。
26. 马铃薯利用块茎进行无性生殖，种植的世代多了以后往往会感染病毒而减产，为此农户都希望得到无病毒的幼苗进行种植，获得无病毒幼苗的最佳办法是（ ）
A. 选择优良品种进行杂交B. 进行远缘植物体细胞杂交
C. 利用茎尖进行组织培养D. 人工诱导基因突变
【答案】C
【解析】
【分析】1、植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体．植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。
2、培育无病毒植株苗，应选择不含病毒部分培养，而植物体新生部位不含病毒，如根尖和茎尖。
【详解】进行植物微型繁殖时常采用茎尖或根尖作为外植体，原因是茎尖或根尖病毒极少，因此切取一定大小的茎尖或根尖进行组织培养，再生的植株就可能不带病毒，C正确，
故选C。
27. 下列关于动物细胞培养的叙述中正确的是（ ）
A. 动物细胞培养只是为获得大量的细胞分泌蛋白
B. 动物细胞培养前要用胰蛋白酶处理使细胞分散开
C. 动物细胞培养通常不出现接触抑制现象
D. 可通过细胞培养获得完整的动物个体
【答案】B
【解析】
【分析】动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。
【详解】A、动物细胞培养是动物细胞工程的基本技术，可以获取细胞产品、制作单克隆抗体、早期胚胎培养等，A错误；
B、动物细胞间质主要成分为蛋白质，故动物细胞培养前先用胰蛋白酶或胶原蛋白酶分散细胞，有利培养，B正确；
C、动物细胞生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，即出现接触抑制现象，C错误；
D、通过细胞培养技术获得克隆细胞群，不能获得完整的动物个体，D错误。
故选B。
【点睛】
28. 关于ES细胞和iPS细胞及其应用的说法，正确的是（ ）
A. ES细胞存在于早期胚胎中，能分化成各种功能细胞，不能形成生物个体
B. ES细胞存在于成体组织和器官内，能分化成特定的组织
C. iPS细胞存在于成体组织和器官内，能分化成特定的组织
D. iPS细胞是人工诱导产生的，也可诱导分化成为各种组织细胞
【答案】D
【解析】
【分析】胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的内细胞团），其特点是具有胚胎细胞的特性，体积较小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物任何一种组织细胞，另一方面，在体外培养条件下，ES细胞可不断增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可以进行某些遗传改造，iPS(诱导性多能干细胞)指通过导入特定的转录因子将终末分化的体细胞重编程为多能性干细胞细胞，分化成多种组织细胞，说明基因选择性表达，它与其他细胞含有相同的基因。
【详解】A、根据分析，ES细胞来源于早期胚胎细胞，在功能上，具有发育的全能性，能形成各种功能的细胞，在特定环境下能形成生物个体，A错误；
B、ES细胞存在于早期胚胎或原始性腺，不存在于成体组织内，B错误；
C、IPS细胞是人工诱导的多能干细胞，动物本身不具有，C错误；
D、iPS细胞是人工诱导产生的，能分化成多种组织细胞，D正确。
故选D。
29. 下列哪项条件不是动物细胞培养所需要的（ ）
A. 无菌、无毒的环境
B. 充足的营养物质
C. 适宜温度和pH
D. 95%的空气和5%的氧气
【答案】D
【解析】
【分析】
动物细胞的培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH：（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的PH）。
【详解】A、动物细胞培养也需要无菌、无毒的环境，A不符合题意；
B、用于动物细胞培养的合成培养基需加入糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等营养物质，还需加入血清、血浆等天然物质，B不符合题意；
C、动物细胞培养需要适宜的温度和PH，其中温度要与动物体温相近，C不符合题意；
D、动物细胞培养需要一定的气体环境，95%空气和5%的CO2，其中5%的CO2能调培养液的pH，D符合题意。
故选D。
30. 如图为克隆羊“多利”的培育过程示意图。下列各项有关表述不正确的是（ ）
A. 由于细胞核基因完全来自甲羊，所以克隆羊“多利”的性状与甲羊完全一致
B. 克隆羊“多利”的培育过程中采用的生物技术有核移植
C. 乙羊的去核卵细胞为重组细胞基因表达提供了细胞内的环境条件
D. 此过程说明高度分化的动物细胞核也具有全能性
【答案】A
【解析】
【分析】克隆动物和提供细胞核的动物不完全相同的原因是：受细胞质基因的影响；可能发生突变；受环境因素的影响。
【详解】A、由于细胞核基因来自甲羊，所以克隆羊“多利”的主要性状与甲羊一致，少数与细胞质基因控制的性状与甲羊不同，A错误；
B、克隆羊多利的培育过程中采用的生物技术有核移植、动物细胞培养和胚胎移植技术，B正确；
C、由于卵母细胞的细胞质中含有促成熟因子，能调控细胞核的发育，所以乙羊的去核卵细胞为重组细胞基因表达提供了细胞内的环境条件，C正确；
D、此过程说明高度分化的动物细胞的细胞核具有全能性，D正确。
故选A
第Ⅱ卷
二、非选择题（共40分）
31. 在农业生产研究上，常需要进行微生物的分离和计数。
（1）下表为两种微生物的培养基配方：
A组：
B组
注：上述两种培养基中的物质溶解后，均用蒸馏水定容至1000mL。
①从功能上来看，A培养基属于_____培养基。
②如果要对土壤中分解尿素的细菌进行分离，则需要选择_____（填“A”或“B”）培养。该培养基中的碳源是_____。
（2）如图是某同学采用的接种微生物的方法，请回答下列问题：
①本实验采用的接种微生物的方法是_____法，把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，为达到这一目的，操作上应注意：每次划线前要_____接种环；接种环冷却后从_____开始划线
②除了图示方法外，还有一种方法也可以获得单菌落，这种方法得到的数值一般比实际值_____，原因是：_____。
③三位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数量，在对应稀释倍数为106的培养液中各取0．1ml涂布平板，得到以下统计结果：
甲同学涂布了2个平板，统计的菌落数是236和260，取平均值248；乙同学涂布了3个平板，统计的菌落数是210、240和250，取平均值233；丙同学涂布了3个平板，统计的菌落数是21、212和256，取平均值163．在三位同学的统计结果中，_____同学的统计结果是最正确的，每毫升的活菌数是_____。
【答案】31. ①. 选择 ②. A ③. 葡萄糖
32. ①. 平板划线 ②. 灼烧 ③. 上次划线的末端 ④. 小 ⑤. 当两个或者多个菌落生长在一起时，观察到的往往按照一个菌落计算 ⑥. 乙 ⑦. 2.33109
【解析】
【分析】培养基的基本组成成分：碳源（提供碳元素的物质）、氮源（提供氮元素的物质）、水、无机盐（保持渗透压、调节pH）等。根据功能分类，培养基可以分为选择培养基和鉴定培养基。选择培养机的概念：在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长成长的培养基，称为选择培养基。
【小问1详解】
根据功能分类，培养基可以分为选择培养基和鉴定培养基。选择培养机的概念：在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长成长的培养基，称为选择培养基。A培养基尿素作为唯一氮源，因此可以利用尿素的微生物可以在培养基上成长，不能利用尿素的微生物就不能生长，因此A培养基是选择培养基。如果要对土壤中分解尿素的细菌进行分离，则需要选择尿素作为唯一氮源的培养基，因此选择A培养基。A培养基中碳源是提供碳元素的物质，因此碳源是葡萄糖。
【小问2详解】
微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。因此从图中可知，本实验采用的接种微生物的方法是平板画线法。通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，经数次划线后培养，可以分离获得单菌落，其具体操作为：灼烧接种环后，将其冷却后，从第一次划线的末端开始第二次划线，重复以上操作。做第三、四、五次划线，注意不要将最后一次的划线与第一次的划线相连。除了图示方法外，稀释涂布平板法也可以用于分离微生物以外，也可用来统计样品中活菌的数目。当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的每一个单菌落来源于样品稀释中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品大约含有多少活菌。值得注意的是，统计的菌落往往比活菌的实际数目少。这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个群落。为了保证结果准确，一般选择菌落数为30~300的平板进行计数。在同一稀释度下，应至少对3个平板进行重复计数，然后求出平均值。因此乙同学统计的结果是最正确的。每毫升的活菌数=（CV）M=平板上菌落数的平均值体积稀释倍数=2330.1106=2.33×109。
32. 选取A、B植株的细胞进行如下图操作，请回答问题：
（1）实现图中的①过程最常用的方法是_____。
（2）②过程的发生，诱导方法有_____法。
（3）③表示融合后的原生质体在产生新的细胞壁，新细胞壁的产生与细胞内_____（细胞器）有密切关系。
（4）如果细胞A内含a个染色体，细胞B内含b个染色体，则“杂种细胞”内含_____个染色体：体细胞杂交的优点是_____。
（5）④⑤过程是一个_____和_____的过程。
（6）如果原生质体A为小鼠的浆细胞，原生质体B为小鼠的骨髓瘤细胞，诱导二者融合时，如果只考虑两两融合，有_____种可能。
【答案】（1）酶解法（纤维素酶和果胶酶）
（2）物理法（离心、电激、振动等）和化学法（聚乙二醇）
（3）高尔基体 （4） ①. a+b ②. 克服远缘杂交不亲合的障碍
（5） ①. 脱分化 ②. 再分化
（6）3 ##三
【解析】
【分析】分析题图：图示表示植物体细胞杂交过程，其中①表示制备原生质体，②表示诱导原生质体的融合，③表示再生出新的细胞壁，④表示脱分化过程，⑤表示再分化过程。
【小问1详解】
图中①表示获取原生质体，该过程常采用酶解法（纤维素酶和果胶酶）去除细胞壁。
【小问2详解】
②表示诱导原生质体融合的过程，诱导方法包括物理法（离心、电激等）和化学法（聚乙二醇等）。
【小问3详解】
③表示融合后的原生质体在产生新的细胞壁，植物细胞中，高尔基体与细胞壁的形成有关。
【小问4详解】
若细胞A内含a个染色体，细胞B内含b个染色体，则“杂种细胞”内含有双亲的遗传物质，即含a+b个染色体；与传统的育种方法相比，体细胞杂交方法的优点是克服远缘杂交不亲合的障碍。
【小问5详解】
杂种细胞通过④脱分化、⑤再分化过程形成杂种植物。
【小问6详解】
诱导小鼠浆细胞和骨髓瘤细胞融合时，如果只考虑两两融合，有三种可能，两个浆细胞融合、两个骨髓瘤细胞融合，和浆细胞与骨髓瘤细胞的融合细胞。
33. 埃博拉病毒（EBV）呈纤维状，EBV衣壳外有包膜，包膜上有5种蛋白棘突（VP系列蛋白和GP蛋白），其中GP蛋白最为关键，能被宿主细胞强烈识别。人感染埃博拉病毒后会引起出血热。治疗疾病的有效方法是注射疫苗或者抗体。如图为制备埃博拉病毒的单克隆抗体的过程，据图回答问题：
（1）B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合的过程体现了细胞膜具有__________________的结构特点。在体外融合时需要诱导，与诱导植物原生质体融合不同的是：图中还可用__________________诱导融合。筛选后的所需细胞群应具备的特点是________________________________________。
（2）在体外进行动物细胞培养时需要在合成培养基的基础上添加__________________等天然成分。同时，为了维持培养液的pH需要提供的气体是__________________。
（3）选出特定的杂交瘤细胞可以在体外或小鼠腹腔内培养，最终从________________________中获取大量的单克隆抗体。
【答案】（1） ①. （一定的）流动性 ②. 灭活的病毒 ③. 既能无限增殖又能产生抗体
（2） ①. 血清 ②. 二氧化碳
（3）培养液或小鼠腹水
【解析】
【分析】动物细胞培养所需气体主要有O2和CO2。O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。在进行细胞培养时，通常采用培养皿或松盖培养瓶，并将它们置于含有95%空气和5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养。
【小问1详解】
B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合的过程体现了细胞膜具有一定的流动性的结构特点。诱导细胞融合的因素有聚乙二醇、电激等，与诱导植物原生质体融合不同的是图中还可用灭活的病毒融合。将融合后的细胞经过第一次筛选后可得到杂交瘤细胞，再经过克隆化培养和抗体检测，可筛选出既能迅速大量增殖又能产生专一抗体的杂交瘤细胞。故图中所需细胞群应具备的特点是：既能迅速大量增殖又能产生专一的抗体。
【小问2详解】
在体外进行动物细胞培养时需要在合成培养基的基础上添加血清、血浆等天然成分。同时为了维持培养液的 pH值，需要提供 95%空气和5%的二氧化碳的气体环境。
【小问3详解】
筛选后的杂交瘤细胞既可以在体外培养，也可以注射到小鼠的腹腔内增殖，所以获得的单克隆抗体最终可以从培养液或小鼠腹水中提取。
34. 科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛，如果要加速转基因奶牛的繁育，可以对此转基因奶牛进行克隆（如图所示）。请结合图示回答下列相关问题：
（1）在进行细胞培养之前，要对取自转基因奶牛的组织细胞进行分离，形成单个细胞，这个过程中需要利用胶原蛋白酶或_____酶处理。
（2）在进行原代培养时，细胞增殖的方式是_____，此外，细胞增殖还表现出_____和接触抑制等特点。
（3）利用体细胞进行核移植的难度明显_____（填“大于”或“小于”）胚胎细胞的核移植。
（4）从动物卵巢中采集的卵母细胞，一般要在体外培养到_____期才能去核用于实验。
【答案】（1）胰蛋白 （2） ①. 有丝分裂 ②. 贴壁生长
（3）大于 （4）减数分裂Ⅱ中期
【解析】
【分析】哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植。由于动物胚胎细胞分化程度低，表现全能性相对容易，而动物体细胞分化程度高，表现全能性十分困难，因此动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植。而在动物体细胞核移植中，非人灵长类动物的体细胞核移植非常困难。
【小问1详解】
动物细胞之间的连接物质主要是蛋白质，动物细胞培养时，常用胶原蛋白酶和胰蛋白酶处理动物组织以分散成单个细胞。
【小问2详解】
动物细胞培养的原代、传代培养都是进行有丝分裂，原代培养的细胞增殖还表现出贴壁生长和接触抑制等特点。
【小问3详解】
体细胞核的全能性低于胚胎细胞细胞核的全能性，分裂能力也低于胚胎细胞，体细胞核移植的难度明显大于胚胎细胞核移植。
【小问4详解】
当卵母细胞处于减数第二次分裂中期才能受精，从动物卵巢中采集的卵母细胞，一般要在体外培养到减数第二次分裂中期。KH2PO4
Na2HPO4
MgSO4·7H2O
葡萄糖
尿素
琼脂
1.4g
2.1g
0.2g
10.0g
1.0g
15.0g
纤维素粉
NaNO3
Na2HPO4·7H2O
KH2PO4
MgSO4·7H2O
KCl
酵母膏
水解酪素
5g
1g
1.2g
0.9g
0.5g
0.5g
0.5g
0.5g
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