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2024南阳六校高二下学期3月第一次联考试题生物含解析
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这是一份2024南阳六校高二下学期3月第一次联考试题生物含解析，共33页。试卷主要包含了 蔷薇等内容，欢迎下载使用。
（考试时间： 75 分钟 试卷满分： 100分）
注意事项：
1. 答题前，考生务必将自己的姓名、准考证号、考场号填写在答题卡上。
2. 回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其它答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上，写在本试卷上无效。
3. 考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。
一、单项选择题（本题共 13 小题，每小题2分，共26 分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。）
1. 人类利用微生物发酵制作果酒或其他食品，已经有几千年的历史。下列有关发酵说法正确的是（ ）
A. 腐乳鲜美味道的主要原因是曲霉分解蛋白质产生的小分子肽和氨基酸引起的
B. 泡菜装坛八成满是为了防止乳酸菌产生的二氧化碳使发酵液溢出
C. 果酒和果醋的发酵菌种不同，但代谢类型相同
D. 果酒发酵后可以接着进行果醋发酵，但是要将发酵温度升高一些
2. 《舌尖上的中国》栏目介绍了我国各地的美食，其中利用发酵技术制作的各类特色食品，如果醋、腐乳、泡菜等，很好的展现了广大人民群众的智慧。下列说法错误的是（ ）
A. 制苹果醋可以向捣碎的苹果汁中直接接种醋酸菌。经过一次发酵制成，在发酵过程中需要经常向发酵液中通入无菌空气
B. “王致和”腐乳是我国的著名品牌，制作腐乳时加盐腌制后需要加入卤汤，若卤汤中的酒精含量过高，则会导致腐乳成熟时间减短
C. 东北酸菜和四川泡菜都非常有名，它们的制作过程基本类似，都是利用乳酸菌发酵。向坛中注入盐水前，煮沸所用盐水的目的是杀菌
D. 在泡菜制作过程中，亚硝酸盐含量的变化情况是先增加后减少
3. 下列关于微生物的培养与应用的叙述，正确的是（ ）
A. 将分离纯化的菌种用接种环接种到斜面培养基上封口后，直接置于4℃冰箱中保存
B. 若要培养霉菌，可用添加蔗糖的豆芽汁制备培养基并调pH 偏碱性再灭菌
C. 配制尿素固体培养基时，将尿素用过滤灭菌的方法加入全营养培养基中
D. 水质检测时，经微生物培养和分离后可通过观察菌落特征初步鉴别菌种类型
4. 下图是研究人员从土壤中筛选降解石油的细菌（目的菌）流程图。下列叙述错误的是（ ）
A. ④中可采用平板划线法对筛选得到的目的菌进行纯化
B. 应选择②中培养瓶内“石油含量”显著降低的培养液继续③操作
C. 培养皿等用具在使用前后均需进行消毒处理
D. 若要研究目的菌生长规律，可用培养液培养目的菌并用细菌计数板计数，统计获得的菌落数往往多于实际活菌数，稀释涂布平板法统计时则相反
5. 下列有关植物细胞全能性的叙述，正确的是（ ）
A. 1902年，哈伯兰特通过实验验证了细胞全能性的理论
B. 在生物的发育过程中，所有的细胞都表现出全能性
C. 已分化了的植物细胞在结构和功能上都比较专一，失去了发育成完整植株的潜力
D. 土壤农杆菌 Ti 质粒的发现和应用，促进了植物细胞工程与分子生物学技术的紧密结合
6. 植物体细胞杂交，又称原生质体融合，是指将植物不同种、属，甚至科间的原生质体通过人工方法诱导融合，然后进行离体培养，使其再生杂种植株的技术。下列有关叙述正确的是（ ）
A. 聚乙二醇促进原生质体融合后，以叶绿体颜色等差异为标志可识别杂种细胞
B. 从动物消化道内提取蛋白酶，用于去除植物细胞壁
C. 检测原生质体活力时可用台盼蓝染液处理，活的原生质体被染色
D. 原生质体需在低渗溶液中长期保存，以防止过度失水而死亡
7. 蔷薇（基因型为 AaBb）的花药通过一系列过程形成试管苗，以下说法中正确的是（ ）
A. 在花药离体培养的过程中需要阳光、空气、水
B. 单倍体幼苗是通过有丝分裂和分化形成的，属于无性生殖
C. 培养基中应该有细胞分裂素和生长素
D. 试管苗基因型是AABB 或aabb或 AAbb或aaBB
8. 关于动物体细胞培养，下列叙述正确的是（ ）
A. 动物体细胞培养过程中细胞的遗传物质均发生改变
B. 加入胰蛋白酶的目的是去掉细胞膜，暴露出原生质体便于细胞融合
C. 动物细胞培养是从动物体获得相关组织，分散成单个细胞后，在适宜环境下让细胞生长和增殖的过程，是动物细胞工程的基础
D. 培养基中加入氧气是为了满足细胞代谢的需要，加入二氧化碳是为了创造无菌无毒的环境
9. 单克隆抗体技术在生物工程中占有重要的地位，下列有关单克隆抗体叙述错误的是（ ）
A. 利用抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体做成“早早孕诊断试剂”
B. 作为诊断试剂，具有准确、高效、快速、简易的优点，可定位诊断肿瘤、心血管畸形、白化病等疾病
C. 从临床试验来看，单克隆抗体主要用于癌症治疗，作用是定位而不是杀伤
D. 将某细菌的抗药基因导入小鼠细胞内不属于单克隆抗体在实践上的应用
10. 将蝌蚪体细胞中的细胞核移植到去核的蛙卵中，形成重建的“合子”。有些“合子”发育成正常的蝌蚪，而单独培养体细胞却不能发育成蝌蚪。下列叙述错误的是（ ）
A. “合子”第一次分裂后形成的细胞已失去全能性
B. 细胞核具有全能性是由于其含有该物种的全套基因
C. “合子”发育成正常蝌蚪过程中伴随着细胞分裂和细胞分化
D. 体细胞不能表达全能性是受某些物质的限制
11. 下列关于动物细胞工程和胚胎工程叙述正确的是（ ）
A. 胚胎分割技术提高了移植胚胎的成活率
B. 通常采用培养法或化学诱导法使精子获得能量后进行体外受精
C. 动物细胞培养是动物细胞工程的基础，在进行细胞培养时培养基中除了加入细胞所需的各种营养物质外，还需要加入琼脂
D. 克隆牛技术涉及体细胞核移植、动物细胞培养、胚胎移植等过程
12. 一位患有单基因显性遗传病的妇女（其父亲与丈夫表现型正常）想生育一个健康的孩子。医生建议对极体进行基因分析，筛选出不含该致病基因的卵细胞，采用试管婴儿技术辅助生育后代，技术流程示意图如下。下列叙述错误的是（ ）
A. 该致病基因可能位于 X染色体或者常染色体上
B. 过程③通常用显微注射的方法
C. 自然生育患该病子女的概率是25%
D. 可选择极体1或极体2用于基因分析
13. 细胞直接共培养是指将2种或2种以上的细胞接种在同一孔中进行培养，以达到模拟体内不同种类的细胞直接接触来探究它们信息交流方式的目的，具体操作如图。下列分析正确的是（ ）
A. 推测第二种细胞会贴壁到无细胞区，当两种细胞分裂生长到表面相互接触时还会继续分裂
B. 细胞培养过程需要对培养液进行灭菌，对所有培养用具进行消毒，以保证无菌无毒的培养环境
C. 成块的组织中细胞与细胞靠在一起，在培养之前无需先将组织块分散成单个细胞
D. 通过检测混合培养液中是否存在信息类物质可初步推测两种细胞间的信息交流方式
二、多项选择题（本题共5 小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有两个或两个以上选项符合题目要求。全部选对的得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。）
14. CD47 是一种细胞膜表面糖蛋白，可与巨噬细胞结合，从而抑制巨噬细胞的功能。为验证抗 CD47 的单克隆抗体能减弱 CD47 对巨噬细胞的抑制作用，某科研小组进行了实验，实验过程如图所示。下列叙述正确的是（ ）
A. 通常向肿瘤细胞共培养体系加入血清，可提供某些营养物质
B. 融合、筛选得到的杂交瘤细胞都能产生抗 CD47 的单克隆抗体
C. CD47 与巨噬细胞结合后会抑制后者的抗原处理、呈递功能
D. 预期实验结果为对照组的巨噬细胞的吞噬能力高于实验组的
15. 根据下图，错误的选项是（ ）
A. 子代动物遗传性状和受体动物完全一致
B. 过程①需要 MII 期去核卵母细胞
C. 过程②可以大幅改良动物性状
D. 胚胎移植的实质是在相同生理环境条件下早期胚胎空间位置的转移
16. 为了降低对国外奶牛种质的过度依赖，提高优良母牛的扩繁速度成为关键，而试管牛技术产业化则可以有效解决这一难题。如图是试管奶牛的生产流程示意图，下列有关叙述错误的是（ ）
A. ①是核移植技术，反映了动物细胞核具有全能性
B. 从优良母牛中采集卵母细胞，通常用冲洗子宫采卵方法
C. 激活后的重组细胞培养至原肠胚后进行胚胎移植
D. 进行过程②胚胎移植前，需取囊胚的滋养层细胞进行性别鉴定
17. 营养缺陷型菌株是突变后某些酶被破坏，导致代谢过程中某些合成反应不能进行菌株。下图是科研人员利用影印法（用无菌绒布轻盖在已长好菌落的原培养基上，然后不转动任何角度，“复印”至新的培养基上）初检某种氨基酸缺陷型菌株的过程。相关说法正确的是（ ）
A. ①过程接种方法为稀释涂布平板法，接种后的培养皿不能立即进行倒置培养
B. 紫外线处理的目的是提高菌种突变率且一定能产生目标菌
C. 进行②过程的顺序是先将丝绒布“复印”至完全培养基上，再“复印”至基本培养基上
D. 完全培养基上的菌落A在基本培养基对应位置不存在，说明其为氨基酸缺陷型菌落
18. 我国是酱油生产最早的国家。制曲是酱油生产的重要工序之一，其主要目的是给米曲霉创造最佳条件，使其生长繁殖并分泌和积累相应的酶，制曲设备示意图如下。下列叙述错误的是（ ）
A. 鼓风机应不断通入经过滤的新鲜空气
B. 将曲料摊铺在帘架上不利于控制微生物生长的温度
C. 酶及微生物的种类和数量是鉴定成曲质量的指标
D. 该制曲过程主要的发酵产物是葡萄糖、乙醇、乳酸等物质
三、非选择题（本题共5 小题，共59分。）
19. 科学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了番茄—马铃薯杂种植株，为了便于杂种细胞的筛选和鉴定，科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记番茄和马铃薯的原生质体膜上的蛋白质，其培育过程如图所示。据图回答下列问题：
（1）为获得原生质体，过程①需要利用________处理两种植物细胞。两种植物细胞的原生质体融合成功的依据是________。
（2）写出促进原生质体融合的方法________（写出两个）。
（3）过程③和④利用的植物细胞工程技术是________。该技术依据的生物学原理是植物细胞具有全能性，全能性是指________。
（4）细胞融合完成后，融合细胞的细胞膜表面的荧光颜色可能是________，细胞融合过程是否受温度的影响？________（填“是”或“否”）。
（5）已知番茄细胞内有12 对同源染色体，马铃薯细胞内共48 条染色体，则在“番茄—马铃薯”细胞分裂过程中最多可以观察到________条染色体。
（6）植物体细胞杂交技术的意义是________。
20. Ⅰ、培养胡萝卜根组织可获得试管苗，获得试管苗的过程如图1所示。
回答下列问题：
（1）步骤③切取的组织块中要带有形成层，原因是________。
（2）从步骤⑤到步骤⑥需要更换新的培养基的原因是： i.诱导愈伤组织形成和诱导愈伤组织分化形成试管苗所需的生长素和细胞分裂素的比例不同；ii.________。
（3）步骤⑥要进行照光培养，其作用是________。
（4）病毒在作物体内逐年积累，就会导致作物产量较低，品质变差。生产上，作物脱毒也用到了植物组织培养技术，选择茎尖为材料，原因是________。
Ⅱ、美西螈具有很强的再生能力。研究表明，美西螈的巨噬细胞在断肢再生的早期起重要作用。为研究巨噬细胞的作用机制，科研人员制备了抗巨噬细胞表面标志蛋白CD14 的单克隆抗体，具体方法如下。抗CD14 单克隆抗体的制备流程如图2所示。回答下列问题：
（5）步骤⑤向小鼠注射________。
（6）步骤②所用的SP2/0 细胞的生长特点是________。
（7）吸取③中的上清液到④的培养孔中，根据抗原—抗体杂交原理，需加入________进行专一抗体检测，检测过程发现有些杂交瘤细胞不能分泌抗 CD14 抗体，原因是________。
（8）步骤⑥从________中提取到大量的抗 CD14 抗体，用于检测巨噬细胞。
21. 表皮生长因子受体（EGFR）在某些癌细胞表面明显增多，针对EGFR 的靶向治疗越来越受到研究者的关注。
（1）研究者提取了癌细胞表面的EGFR，并注射到小鼠体内。一段时间后，取小鼠的脾脏组织，剪碎后用________使其分散成单个细胞。将得到的脾脏细胞与________细胞诱导融合后，依次通过________培养基筛选和抗体（阳性）检测，筛选得到所需的杂交瘤细胞，并从细胞培养液中获得待测单克隆抗体。
（2）研究者将抗原注射到动物体内进行免疫，制备出抗 EGFR 的单克隆抗体，然后将辣根过氧化物酶与该抗体结合，制备出酶标记抗体。将________结合到固相载体上，加入待测的单克隆抗体，再将酶标记抗体加入反应体系。然后向反应体系中加入白色底物（可被辣根过氧化物酶催化形成蓝色产物），反应体系中________可以反映出待测单克隆抗体的含量。
（3）抗体的结构如下图所示，它有两条H链和两条L链。同一物种C区氨基酸序列恒定，不同抗体的结合抗原的 V 区氨基酸序列有差异。
①抗体结构中的肽键数目为p，氨基酸数目为a，二者的关系式为________。
②取免疫后小鼠的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，经筛选得到杂交瘤细胞，获得具有________特点的杂交瘤细胞。将得到的杂交瘤细胞进行体内培养或放入________培养箱进行体外培养，从细胞培养液中提取出单克隆抗体。
③由于鼠源性抗体会使人产生免疫反应，导致该抗体失效，科学家制备了嵌合性单克隆抗体，初步解决了这一问题。推测嵌合性抗体应由鼠源性抗体的________区和人抗体的________区组合而成。
22. 啤酒是以大麦芽、啤酒花、水为主要原料，经酵母发酵作用酿制而成的饱含二氧化碳的低酒精度酒。啤酒中的低分子糖和氨基酸很容易被吸收利用，在体内产生大量的热量，被称为“液体面包”。图1是啤酒生产工艺流程简图。
（1）图中焙烤的目的是降低麦芽水分，并________（但不使淀粉酶失活），然后去根制成成品麦芽。将粉碎的麦芽等原料用温水分别在糊化罐、糖化罐中混合，调节温度以制造麦汁，破碎麦芽的目的是________。
（2）发酵罐内的发酵是发酵工程的中心环节。麦汁冷却的目的是________，冷却后再加入啤酒酵母使其发酵。在发酵过程中，要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度等，以了解发酵进程；还要严格控制________等发酵条件（至少写出3个），以获得所需的发酵产物。
（3）现代发酵工程使用的大型发酵罐均具有计算机控制系统，能使发酵全过程处于最佳状态，图2 为发酵罐示意简图。发酵过程有机物分解释放的能量会引起发酵罐温度升高，常用冷却水对发酵罐进行温度的调节，冷却水进入口和排出口分别是________（填图2中的标号，下同）。酵母菌酒精发酵过程中要“先通气后密封”，通过空气入口________来控制溶解氧。发酵还需要用排气管调节罐压，原因是________。
（4）为提高菌株 H 对蔗糖的耐受能力和利用效率，可在液体培养基中将蔗糖作为________，并不断提高其浓度，经多次传代培养（指培养一段时间后，将部分培养物转入新配的培养基中继续培养）以获得目标菌株。培养过程中定期取样并用________的方法进行接种，培养并统计菌落数，以评估菌株增殖状况。
（5）基于菌株H嗜盐、酸碱耐受能力强等特性，研究人员设计了一种不需要灭菌的发酵系统，其培养基盐浓度设为60g/L，pH 为10，菌株H 可正常持续发酵60d以上。该系统不需要灭菌的原因是________。（答出两点即可）
23. 某科研所对高产奶牛的繁殖进行研究，部分数据如下表所示。回答下列问题：
（1）超卵是超数排卵的简称，让供体达到该目的，则需要给供体注射________。
（2）由表格可知，并不是每个胚胎都可以使用，现分六组对不可用胚胎进行检查，以分析原因，则每组可获得的不可用胚胎数约为__________个，从中选择一个胚胎观察其染色体的数目，则最佳观察时期是________，观察后染色体数目是配子的三倍，这是多精入卵造成的，多精入卵的产生说明________失效。
（3）诱导小鼠细胞与去核的卵母细胞融合通常采用的方法是________，用物理化学方法激活重构胚的目的是________。
（4）若可用胚胎都能发育成个体，则后代为雌性的概率为________。为提高后代雌性概率，可对可用胚胎的滋养层细胞的DNA 进行 PCR，选择SRY 基因（该基因位于 Y 染色体上的性别决定基因）________（填“阳性”或“阴性”）的胚胎进行移植。
（5）代孕个体对移入子宫的重构胚________，这为胚胎在受体内的________提供了可能。
（6）胚胎分割可以增加胚胎数量，在对胚胎进行分割时要注意________。超排供体（头）
头均获胚胎（枚）
头均可用胚胎（枚）
1501
5.6
3.6
2024年春期六校第一次联考
高二年级生物试题
（考试时间： 75 分钟 试卷满分： 100分）
注意事项：
1. 答题前，考生务必将自己的姓名、准考证号、考场号填写在答题卡上。
2. 回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其它答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上，写在本试卷上无效。
3. 考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。
一、单项选择题（本题共 13 小题，每小题2分，共26 分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。）
1. 人类利用微生物发酵制作果酒或其他食品，已经有几千年的历史。下列有关发酵说法正确的是（ ）
A. 腐乳鲜美味道的主要原因是曲霉分解蛋白质产生的小分子肽和氨基酸引起的
B. 泡菜装坛八成满是为了防止乳酸菌产生的二氧化碳使发酵液溢出
C. 果酒和果醋的发酵菌种不同，但代谢类型相同
D. 果酒发酵后可以接着进行果醋发酵，但是要将发酵温度升高一些
【答案】D
【解析】
【分析】1、制作泡菜的注意事项：①盐水煮沸一是为了消除杂菌，二是为了除去水中的氧气，冷却再用是为了避免高温杀死坛中蔬菜表面的乳酸菌。②加水密封是为了阻止外面的空气再进入泡菜坛，为乳酸菌发酵制作泡菜创造无氧的环境条件。若此过程中进入大量氧气，可能导致乳酸菌死亡而好氧菌大量繁殖，使菜腐烂。③菜料只能装八成满的原因：初期会有气体产生；要往坛中加盐水没过菜料，所以不能加菜料太满。2、制作果酒和果醋的注意事项： ①发酵瓶和榨计机都要用体积分数为70%的酒精消毒。②葡萄要先冲洗再去枝梗，以免去枝梗时葡萄破碎，增加被杂菌污染的风险。③瓶中留有1/3空间为酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖提供氧气。果酒发酵过程中会产生大量CO2导致瓶内气压升高，需拧松瓶盖放气，但不要完全打开，否则可能会被杂菌污染。
【详解】A、 豆腐中的蛋白质被分解成小分子的肽和氨基酸， 味道鲜美， 易于消化吸收，而腐乳本身又便于保存。多种微生物参与了豆腐的发酵，如酵母、曲霉和毛霉，其中起主要作用的是毛霉， A错误；
B、泡菜发酵时，发酵初期酵母菌等的活动会产生气体， 使体积膨胀， 故发酵坛装八成满可防止发酵液溢出， 乳酸菌只进行无氧呼吸，不产生二氧化碳， B错误；
C、果酒的发酵菌种是酵母菌， 其新陈代谢类型是异养兼性厌氧型；果醋的发酵菌种是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型，二者不同， C错误；
D、果酒和果醋的制作可用同一装置， 但需控制不同的发酵条件， 果酒制作需要无氧环境，适宜温度为18~30℃，果醋制作需要有氧环境， 适宜温度为30~35℃， D正确。
故选D
2. 《舌尖上的中国》栏目介绍了我国各地的美食，其中利用发酵技术制作的各类特色食品，如果醋、腐乳、泡菜等，很好的展现了广大人民群众的智慧。下列说法错误的是（ ）
A. 制苹果醋可以向捣碎的苹果汁中直接接种醋酸菌。经过一次发酵制成，在发酵过程中需要经常向发酵液中通入无菌空气
B. “王致和”腐乳是我国的著名品牌，制作腐乳时加盐腌制后需要加入卤汤，若卤汤中的酒精含量过高，则会导致腐乳成熟时间减短
C. 东北酸菜和四川泡菜都非常有名，它们的制作过程基本类似，都是利用乳酸菌发酵。向坛中注入盐水前，煮沸所用盐水的目的是杀菌
D. 在泡菜制作过程中，亚硝酸盐含量变化情况是先增加后减少
【答案】B
【解析】
【分析】苹果醋的制作通常有两条途径： 一条途径是向苹果汁中直接接种醋酸菌， 经过一次发酵制成； 另一条途径需经过先后两次发酵获得， 即先接种酵母菌获得果酒， 再在果酒中接种醋酸菌进一步发酵获得果醋。豆腐发酵的原理是利用毛霉等真菌产生的脂肪酶、蛋白酶对豆腐中脂肪、蛋白质进行分解，产生甘油和脂肪酸、小分子肽和氨基酸等，再经后期腌制、加卤汤、密封发酵制成。
【详解】A、参与果醋制作的微生物是醋酸杆菌， 由于醋酸菌是需氧型微生物， 所以它在发酵过程中需要不断向发酵液中通入无菌空气， A 正确；
B、豆腐通过毛霉等微生物分泌的酶分解， 其中营养物质的种类会增多。制作腐乳时加盐腌制后需要加入卤汤，若卤汤中的酒精含量过高，会破坏霉菌产生的部分发酵酶，进而会导致腐乳成熟时间延长， B错误；
C、泡菜都是利用乳酸菌发酵制成。向泡菜坛中注入盐水前，煮沸所用盐水的目的主要是杀灭细菌，其次又除去部分溶解氧， C正确；
D、在泡菜制作过程中，亚硝酸盐含量的变化情况是先增加后减少， D正确。
故选B。
3. 下列关于微生物的培养与应用的叙述，正确的是（ ）
A. 将分离纯化的菌种用接种环接种到斜面培养基上封口后，直接置于4℃冰箱中保存
B. 若要培养霉菌，可用添加蔗糖的豆芽汁制备培养基并调pH 偏碱性再灭菌
C. 配制尿素固体培养基时，将尿素用过滤灭菌的方法加入全营养培养基中
D. 水质检测时，经微生物培养和分离后可通过观察菌落特征初步鉴别菌种类型
【答案】D
【解析】
【分析】虽然各种微生物培养基的配方不同， 但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等营养物质。在提供上述几种主要营养物质的基础上培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染。培养基及使用的培养器具均需要灭菌。
【详解】A、 将分离纯化的菌种用接种环接种到斜面培养基上封口后， 37℃培养一天后置于4℃冰箱保存， A错误；
B、 若要培养霉菌，可用添加蔗糖的豆芽汁制备培养基并调pH偏酸性再灭菌， B错误；
C、 配制尿素固体培养基时， 将尿素用过滤灭菌的方法加入无氮源的培养基中，用于分离土壤中以尿素为氮源的微生物，全营养培养基的目的是观察全营养条件下能生长的土壤微生物的种类和数目，以区分选择培养基是否有选择作用，C 错误；
D、不同微生物在培养基上繁殖形成的菌落在形状、大小、颜色、隆起程度、透明度上存在差异，故水质检测时，经微生物培养和分离后可通过观察菌落特征初步鉴别菌种类型， D 正确。
故选D。
4. 下图是研究人员从土壤中筛选降解石油的细菌（目的菌）流程图。下列叙述错误的是（ ）
A. ④中可采用平板划线法对筛选得到的目的菌进行纯化
B. 应选择②中培养瓶内“石油含量”显著降低的培养液继续③操作
C. 培养皿等用具在使用前后均需进行消毒处理
D. 若要研究目的菌生长规律，可用培养液培养目的菌并用细菌计数板计数，统计获得的菌落数往往多于实际活菌数，稀释涂布平板法统计时则相反
【答案】C
【解析】
【分析】分析题意，为了从石油污染的土壤中筛选高效降解石油的细菌， 在以石油为唯一碳源的培养基中，只有能降解石油的目的菌才能生长繁殖， 而其它不能利用石油为碳源的一般就不能生长和繁殖，因此可以通过该种选择培养基筛选目的菌。
【详解】A、分离纯化目的菌的方法可以是平板划线法， 也可以是稀释涂布平板法， A正确；
B、培养瓶内“石油含量”显著降低说明培养液中的菌降解石油能力强， 因此选择该培养瓶中的培养液继续③操作， B 正确；
C、培养皿等用具在使用前后均需在 160℃~170℃干热灭菌箱中灭菌， C错误；
D、用培养液培养目的菌并用细菌计数板计数可以研究目的菌生长规律，稀释涂布平板法计算获得的菌落数往往少于实际活菌数， 原因是当两个或多个细胞连在一起时，观察到的只是一个菌落； 而细菌计数板统计法获得的菌落数可能会大于实际活菌数，原因是细菌计数板统计出的菌体数目是活菌和死菌的数目之和， D 正确。
故选C。
5. 下列有关植物细胞全能性的叙述，正确的是（ ）
A. 1902年，哈伯兰特通过实验验证了细胞全能性的理论
B. 在生物的发育过程中，所有的细胞都表现出全能性
C. 已分化了的植物细胞在结构和功能上都比较专一，失去了发育成完整植株的潜力
D. 土壤农杆菌 Ti 质粒的发现和应用，促进了植物细胞工程与分子生物学技术的紧密结合
【答案】D
【解析】
【分析】植物细胞工程主要包括植物组织培养技术和植物体细胞杂交技术，植物组织培养技术的理论基础是细胞的全能性，包括脱分化和再分化过程。
【详解】A、1902年， 哈伯兰特提出了细胞全能性的理论， 但相关的实验尝试没有成功，A 错误；
B、 在生物的生长发育过程中， 并不是所有的细胞都表现出全能性， 如筛管细胞，没有细胞核，经离体培养不能表现出全能性， B 错误；
C、已经分化了的植物细胞在结构和功能上都比较专一， 但仍有发育成完整植株的潜力， C错误；
D、 教材中“科技探索之路”中提到1974年，土壤农杆菌的Ti质粒被发现。之后， 该质粒应用于植物分子生物学领域，促进了植物细胞工程与分子生物学技术的紧密结合， D正确。
故选D。
6. 植物体细胞杂交，又称原生质体融合，是指将植物不同种、属，甚至科间的原生质体通过人工方法诱导融合，然后进行离体培养，使其再生杂种植株的技术。下列有关叙述正确的是（ ）
A. 聚乙二醇促进原生质体融合后，以叶绿体颜色等差异为标志可识别杂种细胞
B. 从动物消化道内提取蛋白酶，用于去除植物细胞壁
C. 检测原生质体活力时可用台盼蓝染液处理，活的原生质体被染色
D. 原生质体需在低渗溶液中长期保存，以防止过度失水而死亡
【答案】A
【解析】
【分析】植物体细胞杂交是指将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。诱导原生质体融合的方法：物理法（离心、振动、电激等）和化学法（聚乙二醇等）。植物体细胞杂交的意义：克服远缘杂交不亲和的障碍，扩大亲本范围，培育作物新品种。
【详解】A、 聚乙二醇作为诱导剂可促进原生质体融合，对于杂种细胞可以叶绿体颜色等差异为标志来进行识别， A正确；
B、植物细胞壁的成分主要是纤维素和果胶，其中不含蛋白质成分， 所以用蛋白酶无法去除细胞壁， B 错误；
C、 检测原生质体活力时可用台盼蓝染液染色， 根据细胞膜控制物质进出的原理，活的原生质体不能被染色， 死细胞被染成蓝色，C错误；
D、 获得的原生质体应该在等渗溶液中， 在低渗溶液中会吸水涨破， D错误。
故选A。
7. 蔷薇（基因型为 AaBb）的花药通过一系列过程形成试管苗，以下说法中正确的是（ ）
A. 在花药离体培养的过程中需要阳光、空气、水
B. 单倍体幼苗是通过有丝分裂和分化形成的，属于无性生殖
C. 培养基中应该有细胞分裂素和生长素
D. 试管苗的基因型是AABB 或aabb或 AAbb或aaBB
【答案】C
【解析】
【分析】植物组织培养过程：离体的组织或器官经脱分化形成愈伤组织，愈伤组织在相关植物激素的作用下进行再分化形成具有根或芽分化的胚状体。
【详解】A、植物组织培养过程： 离体的组织或器官经脱分化形成愈伤组织，愈伤组织在相关植物激素的作用下进行再分化形成具有根或芽分化的胚状体，在脱分化整个培养过程中形成幼苗前不能进行光合作用， A 错误；
B、植物组织培养过程中，培养的细胞只进行有丝分裂，而不涉及减数分裂， 但是植物组织培养的生殖类型应根据其所用培养材料而定。如果所用培养材料是体细胞，如根尖、茎尖等，则属于无性生殖。如果是花药离体培养，则应属于有性生殖， B错误；
C、培养基中应该有细胞分裂素和生长素可以促进细胞分裂和生长，且两者的比例可决定不同的分化方向，C 正确；
D、花药离体培养形成的幼苗是单倍体， 故试管苗的基因型是AB或ab或Ab或aB，D错误。
故选C。
8. 关于动物体细胞培养，下列叙述正确的是（ ）
A. 动物体细胞培养过程中细胞的遗传物质均发生改变
B. 加入胰蛋白酶的目的是去掉细胞膜，暴露出原生质体便于细胞融合
C. 动物细胞培养是从动物体获得相关组织，分散成单个细胞后，在适宜环境下让细胞生长和增殖的过程，是动物细胞工程的基础
D. 培养基中加入氧气是为了满足细胞代谢的需要，加入二氧化碳是为了创造无菌无毒的环境
【答案】C
【解析】
【分析】动物细胞培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。
【详解】A、 随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现衰老甚至死亡的细胞，但极少数细胞可以连续增殖， 其中有的遗传物质会发生改变， A错误；
B、 加入胰蛋白酶的目的是将组织分散成单个细胞， B 错误；
C、细胞工程包括动物细胞融合、单克隆抗体制备等， 动物细胞培养是动物细胞工程的基础，是指是从动物体获得相关组织，分散成单个细胞后，在适宜环境下让细胞生长和增殖的过程， C 正确；
D、二氧化碳的作用是维持培养液的pH，而不是创造一个无菌、无毒的环境，D 错误。
故选C。
9. 单克隆抗体技术在生物工程中占有重要的地位，下列有关单克隆抗体叙述错误的是（ ）
A. 利用抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体做成“早早孕诊断试剂”
B. 作为诊断试剂，具有准确、高效、快速、简易的优点，可定位诊断肿瘤、心血管畸形、白化病等疾病
C. 从临床试验来看，单克隆抗体主要用于癌症治疗，作用是定位而不是杀伤
D. 将某细菌的抗药基因导入小鼠细胞内不属于单克隆抗体在实践上的应用
【答案】B
【解析】
【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
【详解】A、 利用抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体做成早早孕诊断试剂， 属于单克隆抗体在实践上应用， A正确；
B、 单克隆抗体在诊断的应用上，具有准确、高效、简易、快速的优点， 可定位诊断肿瘤、心血管畸形，白化病的表现型非常直观，不需要单克隆抗体定位诊断，B 错误；
C、临床试验中，单克隆抗体主要用于癌症治疗， 也有少量用于其他疾病的治疗， 在“生物导弹”中，单克隆抗体作为瞄准装置， 作用是定位，起杀伤作用的是与其相连接的药物， C正确；
D、 将某细菌的抗药基因导入小鼠细胞内属于基因工程的范畴，不属于单克隆抗体在实践上的应用， D正确。
故选B。
10. 将蝌蚪体细胞中的细胞核移植到去核的蛙卵中，形成重建的“合子”。有些“合子”发育成正常的蝌蚪，而单独培养体细胞却不能发育成蝌蚪。下列叙述错误的是（ ）
A. “合子”第一次分裂后形成的细胞已失去全能性
B. 细胞核具有全能性是由于其含有该物种的全套基因
C. “合子”发育成正常蝌蚪的过程中伴随着细胞分裂和细胞分化
D. 体细胞不能表达全能性是受某些物质的限制
【答案】A
【解析】
【分析】细胞的全能性是指细胞经分裂和分化后，仍然具有产生完整有机体或分化成其他各种细胞的潜能和特性，植物的体细胞具有全能性，动物的体细胞不表现出全能性， 但细胞核具有全能性。
【详解】A、“合子”第一次分裂、第二次分裂后形成的细胞仍具有全能性， A错误；
B、虽然细胞经过多次分裂失去了激发全能性的物质，但细胞核仍含有该物种的全套基因， 故动物细胞核具有全能性， B正确；
C、“合子”发育成正常蝌蚪个体的过程中， 需要通过细胞分裂增加细胞的数量， 通过细胞分化增加细胞的种类， C正确；
D、 动物细胞经过多次分裂后，细胞质的成分已经发生改变， 原本能激发细胞全能性的物质已经消失， 故体细胞不能表达全能性是受到了细胞内物质的限制， D 正确。
故选A。
11. 下列关于动物细胞工程和胚胎工程的叙述正确的是（ ）
A. 胚胎分割技术提高了移植胚胎的成活率
B. 通常采用培养法或化学诱导法使精子获得能量后进行体外受精
C. 动物细胞培养是动物细胞工程的基础，在进行细胞培养时培养基中除了加入细胞所需的各种营养物质外，还需要加入琼脂
D. 克隆牛技术涉及体细胞核移植、动物细胞培养、胚胎移植等过程
【答案】D
【解析】
【分析】动物细胞工程常用的技术手段有动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等，其中动物细胞培养技术是其他动物工程技术的基础。
【详解】A、 胚胎分割可以获得多个胚胎，分割次数越多，分割后胚胎成活的概率越小，A 错误；
B、精子获能是获得受精的能力，不是获得能量， B 错误；
C、 动物细胞培养是动物细胞工程的基础，在进行细胞培养时培养基中只加入细胞所需的各种营养物质； 在制作微生物的培养基的过程中， 可以通过添加琼脂作为凝固剂来将液体培养基转化为固体培养基或半固体培养基， C错误；
D、 克隆牛技术涉及体细胞核移植、动物细胞培养、胚胎移植等过程，D 正确。
故选D。
12. 一位患有单基因显性遗传病的妇女（其父亲与丈夫表现型正常）想生育一个健康的孩子。医生建议对极体进行基因分析，筛选出不含该致病基因的卵细胞，采用试管婴儿技术辅助生育后代，技术流程示意图如下。下列叙述错误的是（ ）
A. 该致病基因可能位于 X染色体或者常染色体上
B. 过程③通常用显微注射的方法
C. 自然生育患该病子女的概率是25%
D. 可选择极体1或极体2用于基因分析
【答案】C
【解析】
【分析】1、一位患有单基因显性遗传病的妇女，进行基因分析可筛选出不含该致病基因的卵细胞，说明该患病妇女为杂合子。
2、一个卵原细胞减数分裂产生三个第二极体和一个卵细胞，极体最终退化消失。
3、通常说的“卵子”指次级卵母细胞，精卵结合指的是成熟的精子与次级卵母细胞识别，在入卵的同时，次级卵母细胞完成减数第二次分裂产生卵细胞，最后完成精核与卵核的融合。
【详解】A、 由题意可知，患病妇女为杂合子， 该显性致病基因可以位于常染色体上，也可以位于X染色体上， A 正确；
B、 一般采用显微注射的方法对卵母细胞进行操作处理，B 正确；
C、若显性致病基因用A 表示，位于常染色体，则患病妇女基因型为Aa，丈夫正常，基因型为 aa， 自然生育患该病子女（Aa）的概率是1/2， 若显性致病基因位于X染色体上，则患病妇女基因型为XAXa，丈夫的基因型为XaY，自然生育患该病子女（XAXa， XAY）的概率是1/4+1/4=1/2， 50%， C错误；
D、 卵原细胞减数分裂Ⅰ中同源染色体分离， 其上基因也随之分离， 最终产生一个次级卵母细胞和一个第一极体， 二者基因互补，次级卵母细胞减数分裂Ⅱ着丝粒分裂，姐妹染色单体分离，其上基因也随之分离，最终产生一个卵细胞和一个第二极体，二者基因相同， 且卵细胞可用于受精，而极体最后退化消失，因此可选择极体1或极体2用于基因分析， D正确。
故选C。
13. 细胞直接共培养是指将2种或2种以上的细胞接种在同一孔中进行培养，以达到模拟体内不同种类的细胞直接接触来探究它们信息交流方式的目的，具体操作如图。下列分析正确的是（ ）
A. 推测第二种细胞会贴壁到无细胞区，当两种细胞分裂生长到表面相互接触时还会继续分裂
B. 细胞培养过程需要对培养液进行灭菌，对所有培养用具进行消毒，以保证无菌无毒的培养环境
C. 成块的组织中细胞与细胞靠在一起，在培养之前无需先将组织块分散成单个细胞
D. 通过检测混合培养液中是否存在信息类物质可初步推测两种细胞间的信息交流方式
【答案】D
【解析】
【分析】1、动物细胞培养过程： 取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。
2、动物细胞培养的条件： （1） 无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌； ②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液， 以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和 pH。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的 CO2（CO2的作用是维持培养液的PH）。
【详解】A、 动物细胞在培养过程中均会出现细胞贴壁和接触抑制的现象， 由此推测第二种细胞会贴壁到无细胞区，当两种细胞分裂生长到表面相互接触时停止分裂， A错误；
B、细胞培养过程需要对培养液、培养用具进行灭菌，细胞培养过程需要对培养液添加抗生素防止细菌污染，定期更换培养液以防止细胞代谢产物造成毒害， B错误；
C、成块的组织中细胞与细胞靠在一起，在培养前需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理将组织块成为单个细胞后才能进行培养， C错误；
D、细胞膜表面上可能存在接受邻近细胞信号的受体，以完成细胞间的信息交流，通过检测混合培养液中是否存在信息类物质可初步推测两种细胞间的信息交流方式，D正确。
故选D。
二、多项选择题（本题共5 小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有两个或两个以上选项符合题目要求。全部选对的得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。）
14. CD47 是一种细胞膜表面的糖蛋白，可与巨噬细胞结合，从而抑制巨噬细胞的功能。为验证抗 CD47 的单克隆抗体能减弱 CD47 对巨噬细胞的抑制作用，某科研小组进行了实验，实验过程如图所示。下列叙述正确的是（ ）
A. 通常向肿瘤细胞共培养体系加入血清，可提供某些营养物质
B. 融合、筛选得到的杂交瘤细胞都能产生抗 CD47 的单克隆抗体
C. CD47 与巨噬细胞结合后会抑制后者的抗原处理、呈递功能
D. 预期实验结果为对照组的巨噬细胞的吞噬能力高于实验组的
【答案】AC
【解析】
【分析】单克隆抗体制备流程： （1）对小鼠注射特定的抗原使小鼠产生免疫反应； （2）从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞； （3）将小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合，再用特定的选择培养基进行筛选； （4）在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡， 只有融合的杂种细胞才能生长； （5） 对上述杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选就可获得足量的能分泌所需抗体的细胞； （6） 最后，将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养，或注射到小鼠腹腔内增殖。这样从细胞培养液或小鼠腹水中， 就可以提取出大量的单克隆抗体。
【详解】A、动物细胞培养时通常会在培养液中加入一些天然成分， 肿瘤细胞共培养体系加入的血清可提供某些营养物质， A 正确；
B、融合、筛选得到的杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和抗体检测， 经过多次筛选， 才可以获得足够数量的能分泌抗 CD47 的单克隆抗体的细胞， B错误；
C、CD47与巨噬细胞结合后会抑制巨噬细胞的功能，巨噬细胞具有吞噬消化、抗原处理和呈递功能， C正确；
D、实验组中加入了单克隆抗体，抗体与肿瘤细胞表面的 CD47发生特异性结合，从而解除CD47对巨噬细胞的抑制作用， 而对照组中没有加入单克隆抗体，不能与肿瘤细胞表面的 CD47 结合，因而无法解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，因此， 预期实验结果为实验组中吞噬细胞的吞噬指数显著高于对照组， D 错误。
故选AC。
15. 根据下图，错误的选项是（ ）
A. 子代动物遗传性状和受体动物完全一致
B. 过程①需要 MII 期去核卵母细胞
C. 过程②可以大幅改良动物性状
D. 胚胎移植的实质是在相同生理环境条件下早期胚胎空间位置的转移
【答案】ABC
【解析】
【分析】动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中， 使其重组并发育成一个新的胚胎，这个胚胎最终发育为动物。
【详解】A、子代动物的遗传性状与供体基本一致，但与受体无关， A错误；
B、核移植过程中需要处于MII中期的去核卵母细胞， 而过程①是培育试管动物，需要培育到适宜时期（桑葚胚或囊胚等时期） 进行胚胎移植， B错误；
C、过程②得到的是克隆动物，是无性生殖的一种，不能大幅改良动物性状， C错误；
D、胚胎移植的实质是早期胚胎在相同的生理环境下空间位置的转移， 是胚胎工程的最后一道工序，D正确。
故选ABC。
16. 为了降低对国外奶牛种质的过度依赖，提高优良母牛的扩繁速度成为关键，而试管牛技术产业化则可以有效解决这一难题。如图是试管奶牛的生产流程示意图，下列有关叙述错误的是（ ）
A. ①是核移植技术，反映了动物细胞核具有全能性
B. 从优良母牛中采集卵母细胞，通常用冲洗子宫采卵方法
C. 激活后的重组细胞培养至原肠胚后进行胚胎移植
D. 进行过程②胚胎移植前，需取囊胚的滋养层细胞进行性别鉴定
【答案】ABC
【解析】
【分析】体外受精主要包括：卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精。2、胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理。选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体，供体和受体是同一物种。并用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理。②配种或人工授精。③对胚胎的收集、检查、培养或保存。配种或输精后第7天，用特制的冲卵装置，把供体母牛子宫内的胚胎冲洗出来（也叫冲卵）。对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段。直接向受体移植或放入-196℃的液氮中保存。④对胚胎进行移植。⑤移植后的检查。对受体母牛进行是否妊娠的检查。
【详解】A、由图可知，①是体外受精，精卵结合的过程， A错误；
B、卵母细胞是在卵巢中采集到的， B错误；
C、 激活后的重组细胞培养至囊胚或桑葚胚后移植， C错误；
D、在进行胚胎移植之前，需对早期胚胎进行性别鉴定，可取囊胚期的滋养层细胞进行DNA 分析，D 正确。
故选ABC
17. 营养缺陷型菌株是突变后某些酶被破坏，导致代谢过程中某些合成反应不能进行的菌株。下图是科研人员利用影印法（用无菌绒布轻盖在已长好菌落的原培养基上，然后不转动任何角度，“复印”至新的培养基上）初检某种氨基酸缺陷型菌株的过程。相关说法正确的是（ ）
A. ①过程接种方法为稀释涂布平板法，接种后的培养皿不能立即进行倒置培养
B. 紫外线处理的目的是提高菌种突变率且一定能产生目标菌
C. 进行②过程的顺序是先将丝绒布“复印”至完全培养基上，再“复印”至基本培养基上
D. 完全培养基上的菌落A在基本培养基对应位置不存在，说明其为氨基酸缺陷型菌落
【答案】AD
【解析】
【分析】分析图解：图中首先利用稀释涂布平板法分离细菌，然后运用“影印法”将菌种接种到两种培养基中：基本培养基、完全培养基，则在基本培养基中，氨基酸缺陷型菌株不能生长，而在完全培养基中能够生长，因此可以选择出氨基酸缺陷型菌株。
【详解】A、据图分析,接种后的菌落均匀分布，据此推测该过程接种的方法为稀释涂布平板法，接种后的培养皿不能立即进行倒置培养，A正确；
B、基因突变具有不定向性，紫外线处理的目的是提高菌种突变率但不一定能产生目标菌，B错误；
C、进行②过程培养时，为了防止将完全培养基中特定营养成分带入基本培养基，应先将丝绒布先转印至基本培养基上再“复印”至完全培养基上，C错误；
D、在基本培养基中氨基酸缺陷型菌株不能生长，而在完全培养基中能够生长，完全培养基上的菌落A在基本培养基对应位置不存在，说明其为氨基酸缺陷型菌落，D正确。
故选AD。
18. 我国是酱油生产最早的国家。制曲是酱油生产的重要工序之一，其主要目的是给米曲霉创造最佳条件，使其生长繁殖并分泌和积累相应的酶，制曲设备示意图如下。下列叙述错误的是（ ）
A. 鼓风机应不断通入经过滤的新鲜空气
B. 将曲料摊铺在帘架上不利于控制微生物生长的温度
C. 酶及微生物的种类和数量是鉴定成曲质量的指标
D. 该制曲过程主要的发酵产物是葡萄糖、乙醇、乳酸等物质
【答案】BD
【解析】
【分析】鼓风机应不断通入经过滤的新鲜空气，为米曲霉的生长提供足量的氧气， 为米曲霉生长创造条件， 以便其大量繁殖， 积累相应的酶。
【详解】A、 米曲霉的代谢类型是异养需氧型，因此鼓风机应不断通入经过滤的新鲜空气， A 正确；
B、 微生物的生长需要适宜的温度， 曲料摊铺在帘架上可以及时散热， 有利于控制微生物生长的温度， B 错误；
C、 发酵的主要目的是使米曲霉充分生长繁殖并分泌和积累相应的酶，所以酶及微生物的种类和数量是鉴定成曲质量的指标， C 正确；
D、 葡萄糖是发酵的底物， 不是产物， D错误。
故选BD。
三、非选择题（本题共5 小题，共59分。）
19. 科学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了番茄—马铃薯杂种植株，为了便于杂种细胞的筛选和鉴定，科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记番茄和马铃薯的原生质体膜上的蛋白质，其培育过程如图所示。据图回答下列问题：
（1）为获得原生质体，过程①需要利用________处理两种植物细胞。两种植物细胞的原生质体融合成功的依据是________。
（2）写出促进原生质体融合的方法________（写出两个）。
（3）过程③和④利用的植物细胞工程技术是________。该技术依据的生物学原理是植物细胞具有全能性，全能性是指________。
（4）细胞融合完成后，融合细胞的细胞膜表面的荧光颜色可能是________，细胞融合过程是否受温度的影响？________（填“是”或“否”）。
（5）已知番茄细胞内有12 对同源染色体，马铃薯细胞内共48 条染色体，则在“番茄—马铃薯”细胞分裂过程中最多可以观察到________条染色体。
（6）植物体细胞杂交技术的意义是________。
【答案】（1） ①. 纤维素酶和果胶酶 ②. 杂种细胞再生出新的细胞壁
（2）离心法、电融合法、聚乙二醇（PEG）融合法、高 Ca2+—高 pH融合法
（3） ①. 植物组织培养 ②. 细胞经分裂和分化后，仍然具有产生完整生物体（有机体） 或分化成其他各种细胞的潜能（和特性）
（4） ①. 红色荧光和绿色荧光、红色荧光、绿色荧光 ②. 是
（5）144 （6）打破生殖隔离；实现远缘杂交育种； 培育植物新品种
【解析】
【分析】分析题图： 图示为番茄—马铃薯杂种植株的培育过程， ①表示去壁过程，常用酶解法； ②表示融合的原生质体再生出细胞壁的过程； ③表示脱分化过程； ④表示再分化过程。
【小问1详解】
植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，因此根据酶的专一性原理，去除植物细胞壁常用纤维素酶和果胶酶； 细胞融合完成的标志是杂种细胞再生出新的细胞壁。
【小问2详解】
原生质体的融合方法包括物理法：离心法，电融合法和化学法： 聚乙二醇（PEG）融合法， 高 Ca2+—高 pH融合法。
【小问3详解】
③表示脱分化过程；④表示再分化过程，植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性，其过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化过程形成愈伤组织，愈伤组织经过再分化过程形成胚状体， 进一步发育成为植株， 因此， 过程③和④利用的是植物组织培养技术。全能性是指细胞经分裂和分化后，仍然具有产生完整生物体（有机体）或分化成其他各种细胞的潜能（和特性） 。
【小问4详解】
细胞融合完成后， 融合细胞的细胞膜有3种情况，①融合的番茄原生质体（红色荧光标记）、②融合的马铃薯原生质体（绿色荧光标记）、③杂种细胞即融合的番茄原生质体和马铃薯原生质体（红色荧光和绿色荧光标记） 。温度能影响细胞膜的流动速度，因此细胞融合过程受温度的影响。
【小问5详解】
若番茄细胞内有24条染色体（12对同源染色体）， 马铃薯细胞内有48条染色体，则在“番茄—马铃薯”细胞染色体数目为72， 在有丝分裂后期着丝粒分裂，染色体数目加倍， 因而可以观察到144条染色体。
【小问6详解】
植物体细胞杂交技术的意义是打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培育植物新品种。
20. Ⅰ、培养胡萝卜根组织可获得试管苗，获得试管苗的过程如图1所示。
回答下列问题：
（1）步骤③切取的组织块中要带有形成层，原因是________。
（2）从步骤⑤到步骤⑥需要更换新的培养基的原因是： i.诱导愈伤组织形成和诱导愈伤组织分化形成试管苗所需的生长素和细胞分裂素的比例不同；ii.________。
（3）步骤⑥要进行照光培养，其作用是________。
（4）病毒在作物体内逐年积累，就会导致作物产量较低，品质变差。生产上，作物脱毒也用到了植物组织培养技术，选择茎尖为材料，原因是________。
Ⅱ、美西螈具有很强的再生能力。研究表明，美西螈的巨噬细胞在断肢再生的早期起重要作用。为研究巨噬细胞的作用机制，科研人员制备了抗巨噬细胞表面标志蛋白CD14 的单克隆抗体，具体方法如下。抗CD14 单克隆抗体的制备流程如图2所示。回答下列问题：
（5）步骤⑤向小鼠注射________。
（6）步骤②所用的SP2/0 细胞的生长特点是________。
（7）吸取③中的上清液到④的培养孔中，根据抗原—抗体杂交原理，需加入________进行专一抗体检测，检测过程发现有些杂交瘤细胞不能分泌抗 CD14 抗体，原因是________。
（8）步骤⑥从________中提取到大量的抗 CD14 抗体，用于检测巨噬细胞。
【答案】（1）形成层分化程度低，易于诱导形成愈伤组织
（2）随培养时间的增加，培养基中营养物质不断减少，有害代谢产物逐渐积累，会抑制植物的生长
（3）诱导叶绿素的形成，使试管苗能够进行光合作用
（4）茎尖（顶端分生区）的病毒极少， 甚至无病毒。切取一定大小的茎尖进行组织培养，再生的植物就有可能不带病毒，从而获得脱毒苗
（5）分泌抗CD14抗体的杂交瘤细胞
（6）能在体外无限增殖
（7） ①. CD14蛋白/CD14抗原 ②. 参与形成杂交瘤细胞的 B淋巴细胞种类多， 有的不能分泌抗 CD14抗体
（8）小鼠腹水
【解析】
【分析】1、题图分析： ①→④表示处理外植体材料， ④→⑤表示脱分化，⑤→⑥表示再分化。
2、培养条件： ①在无菌条件下进行人工操作。②保证水、无机盐、碳源（常用蔗糖）、氮源（含氮有机物）、生长因子（维生素） 等营养物质的供应。③需要添加一些植物生长调节物质，主要是生长素和细胞分裂素。④愈伤组织再分化到一定阶段， 形成叶绿体，能进行光合作用，故需光照。
【小问1详解】
形成层细胞分化程度低，容易诱导形成愈伤组织， 因此步骤③切取的组织块中要带有形成层。
【小问2详解】
步骤⑤为诱导形成愈伤组织， 步骤⑥为诱导愈伤组织形成试管苗，形成不同组织、器官所需的植物激素的比例不同， 且随培养时间的增加，培养基中营养物质不断减少，有害代谢产物逐渐积累， 会抑制植物的生长， 因此需要更换培养基。
【小问3详解】
形成试管苗后，叶片的形成使植物具备了进行光合作用的条件， 而叶片中叶绿素的形成需要光， 因此要将试管苗在光下培养。
【小问4详解】
茎尖（顶端分生区）的病毒极少， 甚至无病毒，切取一定大小的茎尖进行组织培养，再生的植物就有可能不带病毒， 从而获得脱毒苗。
【小问5详解】
步骤⑤是将分泌抗CD14抗体的杂交瘤细胞注入小鼠体内培养，以获得大量单克隆抗体。
【小问6详解】
步骤②所用的 SP2/0细胞是骨髓瘤细胞， 特点是能在体外无限增殖。
【小问7详解】
根据抗原—抗体杂交原理，应该用CD14蛋白检测其中是否含抗CD14蛋白的抗体。因为形成杂交瘤细胞的B淋巴细胞种类很多，因此有些杂交瘤细胞不能分泌抗CD14抗体。
【小问8详解】
从制备单克隆抗体的流程可知，将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔后， 最终要从小鼠的腹水中提取抗CD14抗体。
21. 表皮生长因子受体（EGFR）在某些癌细胞表面明显增多，针对EGFR 的靶向治疗越来越受到研究者的关注。
（1）研究者提取了癌细胞表面的EGFR，并注射到小鼠体内。一段时间后，取小鼠的脾脏组织，剪碎后用________使其分散成单个细胞。将得到的脾脏细胞与________细胞诱导融合后，依次通过________培养基筛选和抗体（阳性）检测，筛选得到所需的杂交瘤细胞，并从细胞培养液中获得待测单克隆抗体。
（2）研究者将抗原注射到动物体内进行免疫，制备出抗 EGFR 的单克隆抗体，然后将辣根过氧化物酶与该抗体结合，制备出酶标记抗体。将________结合到固相载体上，加入待测的单克隆抗体，再将酶标记抗体加入反应体系。然后向反应体系中加入白色底物（可被辣根过氧化物酶催化形成蓝色产物），反应体系中________可以反映出待测单克隆抗体的含量。
（3）抗体结构如下图所示，它有两条H链和两条L链。同一物种C区氨基酸序列恒定，不同抗体的结合抗原的 V 区氨基酸序列有差异。
①抗体结构中的肽键数目为p，氨基酸数目为a，二者的关系式为________。
②取免疫后小鼠的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，经筛选得到杂交瘤细胞，获得具有________特点的杂交瘤细胞。将得到的杂交瘤细胞进行体内培养或放入________培养箱进行体外培养，从细胞培养液中提取出单克隆抗体。
③由于鼠源性抗体会使人产生免疫反应，导致该抗体失效，科学家制备了嵌合性单克隆抗体，初步解决了这一问题。推测嵌合性抗体应由鼠源性抗体的________区和人抗体的________区组合而成。
【答案】（1） ①. 胰蛋白酶/胶原蛋白酶/机械的方法 ②. 骨髓瘤 ③. 选择（性）
（2） ①. EGFR ②. 蓝色的深浅
（3） ①. p=a-4（或“a=p+4”） ②. 能无限增殖并产生专一（特定） 抗体 ③. CO2（恒温） ④. V ⑤. C
【解析】
【分析】在单克隆抗体的制备过程中，需要用浆细胞与骨髓瘤细胞融合；诱导动物细胞融合时，使用聚乙二醇或灭活的病毒作为诱导剂；动物细胞融合后，经过筛选获得的杂交瘤细胞具有既能无限增殖又能分泌单一抗体的特点。
【小问1详解】
研究者提取了癌细胞表面的EGFR，并注射到小鼠体内。一段时间后，取小鼠的脾脏组织，剪碎后用胰蛋白酶或胶原蛋白酶或机械的方法处理使其分散成单个细胞。将得到的脾脏细胞与骨髓瘤细胞经灭活的病毒诱导融合后，先通过选择培养基筛选出杂交瘤细胞，然后通过专一抗体阳性检测，筛选得到所需的能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，并从细胞培养液中获得待测单克隆抗体。
小问2详解】
将待测单克隆抗体作为抗原注射到异种动物体内进行免疫，可制备出抗EGFR单克隆抗体的抗体，然后将辣根过氧化物酶与该抗体结合，制备出酶标记抗体。将EGFR结合到固相载体上，加入待测的单克隆抗体，再将酶标记抗体加入反应体系。然后向反应体系中加入白色底物，由于白色底物可被辣根过氧化物酶催化形成蓝色产物，所以反应体系中蓝色的深浅可以反映出待测单克隆抗体的含量高低。
【小问3详解】
根据图示信息可知，抗体含有4条肽链组成，所以抗体分子结构中的肽键数目p与氨基酸数目a的关系式为 p=a-4（或“a=p+4”）。
取免疫后小鼠的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，经筛选得到杂交瘤细胞．将得到的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测以获得具有能无限增殖并产生专一（特定）抗体特点的杂交瘤细胞。
将得到的杂交瘤细胞进行体内培养或放入CO2（恒温）培养箱进行体外培养，从细胞培养液中提取出单克隆抗体。
由于鼠源性抗体会使人产生免疫反应，导致该抗体失效，根据题干的信息“同一物种C区氨基酸序列恒定，不同抗体结合抗原的V区氨基酸序列有差异”，推测嵌合性抗体应由鼠源性抗体的V区和人抗体的 C区组合而成。
22. 啤酒是以大麦芽、啤酒花、水为主要原料，经酵母发酵作用酿制而成的饱含二氧化碳的低酒精度酒。啤酒中的低分子糖和氨基酸很容易被吸收利用，在体内产生大量的热量，被称为“液体面包”。图1是啤酒生产工艺流程简图。
（1）图中焙烤的目的是降低麦芽水分，并________（但不使淀粉酶失活），然后去根制成成品麦芽。将粉碎的麦芽等原料用温水分别在糊化罐、糖化罐中混合，调节温度以制造麦汁，破碎麦芽的目的是________。
（2）发酵罐内的发酵是发酵工程的中心环节。麦汁冷却的目的是________，冷却后再加入啤酒酵母使其发酵。在发酵过程中，要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度等，以了解发酵进程；还要严格控制________等发酵条件（至少写出3个），以获得所需的发酵产物。
（3）现代发酵工程使用的大型发酵罐均具有计算机控制系统，能使发酵全过程处于最佳状态，图2 为发酵罐示意简图。发酵过程有机物分解释放的能量会引起发酵罐温度升高，常用冷却水对发酵罐进行温度的调节，冷却水进入口和排出口分别是________（填图2中的标号，下同）。酵母菌酒精发酵过程中要“先通气后密封”，通过空气入口________来控制溶解氧。发酵还需要用排气管调节罐压，原因是________。
（4）为提高菌株 H 对蔗糖的耐受能力和利用效率，可在液体培养基中将蔗糖作为________，并不断提高其浓度，经多次传代培养（指培养一段时间后，将部分培养物转入新配的培养基中继续培养）以获得目标菌株。培养过程中定期取样并用________的方法进行接种，培养并统计菌落数，以评估菌株增殖状况。
（5）基于菌株H嗜盐、酸碱耐受能力强等特性，研究人员设计了一种不需要灭菌的发酵系统，其培养基盐浓度设为60g/L，pH 为10，菌株H 可正常持续发酵60d以上。该系统不需要灭菌的原因是________。（答出两点即可）
【答案】（1） ①. 加热杀死大麦种子胚 ②. 有利于淀粉酶与淀粉充分接触， 提升反应速率
（2） ①. 防止接种时酵母菌被杀死 ②. 温度、pH、溶解氧、通气量与搅拌
（3） ①. ③④ ②. ⑤ ③. 防止酵母菌无氧呼吸产生的 CO2气体将发酵罐中的液体培养基溢出，防止罐体气压过高引起爆裂
（4） ①. 唯一碳源 ②. 稀释涂布平板法
（5）盐浓度为60g/L 的条件下，其他杂菌因失水过多而死亡；pH为10的条件下， 其他杂菌的酶变性失活， 生长繁殖受抑制
【解析】
【分析】1、实验室中微生物的筛选原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养. 温度、pH等) ，同时抑制或阻止其他微生物生长。
2、微生物常见的接种方法：稀释涂布平板法和平板划线法，前者可以对菌落数进行计数，后者不可计数。
【小问1详解】
大麦发芽后焙烤，焙烤温度较高， 除了可以降低麦芽水分， 还可以杀死大麦种子胚阻止其进一步萌发，同时还可以保留淀粉酶活性， 以便后续进行糖化操作。进行糖化之前，对麦芽进行粉碎，因为麦芽破碎后，更有利于淀粉酶与其中淀粉充分接触， 加速酶促反应速率， 提高糖化效率。
【小问2详解】
糖化后获得的麦汁组要冷却降温才能加入啤酒酵母， 否则温度过高容易杀死菌种。温度、pH、溶解氧、通气量等均会影响发酵的进程，因此除了补充必需的营养物质组分外， 还要严格控制温度、pH、溶解氧、通气量、搅拌等发酵条件。
【小问3详解】
用冷却水对发酵罐进行温度的调节， 下口进水，上口出水，遵循逆流原理， 冷凝效果更好，因此冷却水进入口和排出口分别是③④。酒精发酵前期通气，利于酵母菌繁殖，后期密封，利于酒精发酵， 因此需要通过空气入口⑤来控制溶解氧。酒精发酵过程中产生 CO₂，若不利用排气管调节罐压，则可能导致发酵罐内气压过大，液体培养基溢出，甚至可能引起爆炸。
【小问4详解】
根据题意分析，该实验的目的是提高菌株H对蔗糖的耐受能力和利用效率，结合微生物的代谢需求， 其液体培养基应该以蔗糖作为唯一碳源。稀释涂布平板法可以通过系列稀释和涂布平板最终获得由单个细胞繁殖来的菌落， 因此培养过程中可定期取样并用稀释涂布平板法将菌液接种到固体培养基上，待形成菌落后进行菌落计数，评估菌株增殖状况。
【小问5详解】
已知菌株H具有嗜盐、酸碱耐受能力强等特性，因此当培养基盐浓度为60g/L， pH为10时， 菌株H可正常持续发酵60d以上，而盐浓度为60g/L 的条件下， 其他杂菌因失水过多而死亡；pH为 10的条件下， 其他杂菌的酶变性失活， 生长繁殖受抑制， 故该系统不需要灭菌。
23. 某科研所对高产奶牛的繁殖进行研究，部分数据如下表所示。回答下列问题：
（1）超卵是超数排卵的简称，让供体达到该目的，则需要给供体注射________。
（2）由表格可知，并不是每个胚胎都可以使用，现分六组对不可用胚胎进行检查，以分析原因，则每组可获得的不可用胚胎数约为__________个，从中选择一个胚胎观察其染色体的数目，则最佳观察时期是________，观察后染色体数目是配子的三倍，这是多精入卵造成的，多精入卵的产生说明________失效。
（3）诱导小鼠细胞与去核的卵母细胞融合通常采用的方法是________，用物理化学方法激活重构胚的目的是________。
（4）若可用胚胎都能发育成个体，则后代为雌性的概率为________。为提高后代雌性概率，可对可用胚胎的滋养层细胞的DNA 进行 PCR，选择SRY 基因（该基因位于 Y 染色体上的性别决定基因）________（填“阳性”或“阴性”）的胚胎进行移植。
（5）代孕个体对移入子宫的重构胚________，这为胚胎在受体内的________提供了可能。
（6）胚胎分割可以增加胚胎数量，在对胚胎进行分割时要注意________。
【答案】23. 促性腺激素
24. ①. 500 ②. 有丝分裂的中期 ③. 透明带反应/卵细胞膜反应
25. ①. 电融合法 ②. 使其完成细胞分裂和发育进程
26. ①. 1/2 ②. 阴性
27. ①. 不发生免疫排斥反应 ②. 存活
28. 将内细胞团均等分割；注意分割次数，分割次数越多， 胚胎成活率越小
【解析】
【解析】胚胎移植的基本程序主要包括： ①对供、受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体。用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查， 此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段）；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。
【详解】（1） 用促性腺激素处理供体可使供体超数排卵。
（2）由表格数据可知，将不可用胚胎分成六组， 每组可获得的不可用胚胎数约为1501×（5.6-3.6）÷6=500个。观察胚胎细胞染色体数目的最佳时期是有丝分裂中期， 此时染色体形态稳定，数目清晰。透明带反应和卵细胞膜反应都能防止多精入卵， 若胚胎细胞染色体数目是配子的三倍， 说明透明带反应和卵细胞膜反应失效。
（3）常用电融合法诱导小鼠细胞与去核的卵母细胞进行融合， 供体核进入卵母细胞， 形成重构胚。用物理化学方法激活重构胚，可以使其完成细胞分裂和发育进程。
（4）若可用胚胎都能发育成个体，由于亲代雄性个体能产生的配子中X：Y=1：1， 与卵细胞结合后， 后代为雌性的概率为1/2.根据题意， SRY 基因是位于Y 染色体上的性别决定基因， SRY基因阴性的胚胎意味着胚胎中不含 SRY基因， 即不含Y 染色体，故为提高后代雌性概率， 应该选择SRY 基因阴性的胚胎进行移植。
（5）代孕个体对移入子宫的重构胚不发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能。
（6）分割囊胚时要将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。胚胎分割次数越多， 胚胎成活率越小。
超排供体（头）
头均获胚胎（枚）
头均可用胚胎（枚）
1501
5.6
3.6
（考试时间： 75 分钟 试卷满分： 100分）
注意事项：
1. 答题前，考生务必将自己的姓名、准考证号、考场号填写在答题卡上。
2. 回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其它答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上，写在本试卷上无效。
3. 考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。
一、单项选择题（本题共 13 小题，每小题2分，共26 分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。）
1. 人类利用微生物发酵制作果酒或其他食品，已经有几千年的历史。下列有关发酵说法正确的是（ ）
A. 腐乳鲜美味道的主要原因是曲霉分解蛋白质产生的小分子肽和氨基酸引起的
B. 泡菜装坛八成满是为了防止乳酸菌产生的二氧化碳使发酵液溢出
C. 果酒和果醋的发酵菌种不同，但代谢类型相同
D. 果酒发酵后可以接着进行果醋发酵，但是要将发酵温度升高一些
2. 《舌尖上的中国》栏目介绍了我国各地的美食，其中利用发酵技术制作的各类特色食品，如果醋、腐乳、泡菜等，很好的展现了广大人民群众的智慧。下列说法错误的是（ ）
A. 制苹果醋可以向捣碎的苹果汁中直接接种醋酸菌。经过一次发酵制成，在发酵过程中需要经常向发酵液中通入无菌空气
B. “王致和”腐乳是我国的著名品牌，制作腐乳时加盐腌制后需要加入卤汤，若卤汤中的酒精含量过高，则会导致腐乳成熟时间减短
C. 东北酸菜和四川泡菜都非常有名，它们的制作过程基本类似，都是利用乳酸菌发酵。向坛中注入盐水前，煮沸所用盐水的目的是杀菌
D. 在泡菜制作过程中，亚硝酸盐含量的变化情况是先增加后减少
3. 下列关于微生物的培养与应用的叙述，正确的是（ ）
A. 将分离纯化的菌种用接种环接种到斜面培养基上封口后，直接置于4℃冰箱中保存
B. 若要培养霉菌，可用添加蔗糖的豆芽汁制备培养基并调pH 偏碱性再灭菌
C. 配制尿素固体培养基时，将尿素用过滤灭菌的方法加入全营养培养基中
D. 水质检测时，经微生物培养和分离后可通过观察菌落特征初步鉴别菌种类型
4. 下图是研究人员从土壤中筛选降解石油的细菌（目的菌）流程图。下列叙述错误的是（ ）
A. ④中可采用平板划线法对筛选得到的目的菌进行纯化
B. 应选择②中培养瓶内“石油含量”显著降低的培养液继续③操作
C. 培养皿等用具在使用前后均需进行消毒处理
D. 若要研究目的菌生长规律，可用培养液培养目的菌并用细菌计数板计数，统计获得的菌落数往往多于实际活菌数，稀释涂布平板法统计时则相反
5. 下列有关植物细胞全能性的叙述，正确的是（ ）
A. 1902年，哈伯兰特通过实验验证了细胞全能性的理论
B. 在生物的发育过程中，所有的细胞都表现出全能性
C. 已分化了的植物细胞在结构和功能上都比较专一，失去了发育成完整植株的潜力
D. 土壤农杆菌 Ti 质粒的发现和应用，促进了植物细胞工程与分子生物学技术的紧密结合
6. 植物体细胞杂交，又称原生质体融合，是指将植物不同种、属，甚至科间的原生质体通过人工方法诱导融合，然后进行离体培养，使其再生杂种植株的技术。下列有关叙述正确的是（ ）
A. 聚乙二醇促进原生质体融合后，以叶绿体颜色等差异为标志可识别杂种细胞
B. 从动物消化道内提取蛋白酶，用于去除植物细胞壁
C. 检测原生质体活力时可用台盼蓝染液处理，活的原生质体被染色
D. 原生质体需在低渗溶液中长期保存，以防止过度失水而死亡
7. 蔷薇（基因型为 AaBb）的花药通过一系列过程形成试管苗，以下说法中正确的是（ ）
A. 在花药离体培养的过程中需要阳光、空气、水
B. 单倍体幼苗是通过有丝分裂和分化形成的，属于无性生殖
C. 培养基中应该有细胞分裂素和生长素
D. 试管苗基因型是AABB 或aabb或 AAbb或aaBB
8. 关于动物体细胞培养，下列叙述正确的是（ ）
A. 动物体细胞培养过程中细胞的遗传物质均发生改变
B. 加入胰蛋白酶的目的是去掉细胞膜，暴露出原生质体便于细胞融合
C. 动物细胞培养是从动物体获得相关组织，分散成单个细胞后，在适宜环境下让细胞生长和增殖的过程，是动物细胞工程的基础
D. 培养基中加入氧气是为了满足细胞代谢的需要，加入二氧化碳是为了创造无菌无毒的环境
9. 单克隆抗体技术在生物工程中占有重要的地位，下列有关单克隆抗体叙述错误的是（ ）
A. 利用抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体做成“早早孕诊断试剂”
B. 作为诊断试剂，具有准确、高效、快速、简易的优点，可定位诊断肿瘤、心血管畸形、白化病等疾病
C. 从临床试验来看，单克隆抗体主要用于癌症治疗，作用是定位而不是杀伤
D. 将某细菌的抗药基因导入小鼠细胞内不属于单克隆抗体在实践上的应用
10. 将蝌蚪体细胞中的细胞核移植到去核的蛙卵中，形成重建的“合子”。有些“合子”发育成正常的蝌蚪，而单独培养体细胞却不能发育成蝌蚪。下列叙述错误的是（ ）
A. “合子”第一次分裂后形成的细胞已失去全能性
B. 细胞核具有全能性是由于其含有该物种的全套基因
C. “合子”发育成正常蝌蚪过程中伴随着细胞分裂和细胞分化
D. 体细胞不能表达全能性是受某些物质的限制
11. 下列关于动物细胞工程和胚胎工程叙述正确的是（ ）
A. 胚胎分割技术提高了移植胚胎的成活率
B. 通常采用培养法或化学诱导法使精子获得能量后进行体外受精
C. 动物细胞培养是动物细胞工程的基础，在进行细胞培养时培养基中除了加入细胞所需的各种营养物质外，还需要加入琼脂
D. 克隆牛技术涉及体细胞核移植、动物细胞培养、胚胎移植等过程
12. 一位患有单基因显性遗传病的妇女（其父亲与丈夫表现型正常）想生育一个健康的孩子。医生建议对极体进行基因分析，筛选出不含该致病基因的卵细胞，采用试管婴儿技术辅助生育后代，技术流程示意图如下。下列叙述错误的是（ ）
A. 该致病基因可能位于 X染色体或者常染色体上
B. 过程③通常用显微注射的方法
C. 自然生育患该病子女的概率是25%
D. 可选择极体1或极体2用于基因分析
13. 细胞直接共培养是指将2种或2种以上的细胞接种在同一孔中进行培养，以达到模拟体内不同种类的细胞直接接触来探究它们信息交流方式的目的，具体操作如图。下列分析正确的是（ ）
A. 推测第二种细胞会贴壁到无细胞区，当两种细胞分裂生长到表面相互接触时还会继续分裂
B. 细胞培养过程需要对培养液进行灭菌，对所有培养用具进行消毒，以保证无菌无毒的培养环境
C. 成块的组织中细胞与细胞靠在一起，在培养之前无需先将组织块分散成单个细胞
D. 通过检测混合培养液中是否存在信息类物质可初步推测两种细胞间的信息交流方式
二、多项选择题（本题共5 小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有两个或两个以上选项符合题目要求。全部选对的得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。）
14. CD47 是一种细胞膜表面糖蛋白，可与巨噬细胞结合，从而抑制巨噬细胞的功能。为验证抗 CD47 的单克隆抗体能减弱 CD47 对巨噬细胞的抑制作用，某科研小组进行了实验，实验过程如图所示。下列叙述正确的是（ ）
A. 通常向肿瘤细胞共培养体系加入血清，可提供某些营养物质
B. 融合、筛选得到的杂交瘤细胞都能产生抗 CD47 的单克隆抗体
C. CD47 与巨噬细胞结合后会抑制后者的抗原处理、呈递功能
D. 预期实验结果为对照组的巨噬细胞的吞噬能力高于实验组的
15. 根据下图，错误的选项是（ ）
A. 子代动物遗传性状和受体动物完全一致
B. 过程①需要 MII 期去核卵母细胞
C. 过程②可以大幅改良动物性状
D. 胚胎移植的实质是在相同生理环境条件下早期胚胎空间位置的转移
16. 为了降低对国外奶牛种质的过度依赖，提高优良母牛的扩繁速度成为关键，而试管牛技术产业化则可以有效解决这一难题。如图是试管奶牛的生产流程示意图，下列有关叙述错误的是（ ）
A. ①是核移植技术，反映了动物细胞核具有全能性
B. 从优良母牛中采集卵母细胞，通常用冲洗子宫采卵方法
C. 激活后的重组细胞培养至原肠胚后进行胚胎移植
D. 进行过程②胚胎移植前，需取囊胚的滋养层细胞进行性别鉴定
17. 营养缺陷型菌株是突变后某些酶被破坏，导致代谢过程中某些合成反应不能进行菌株。下图是科研人员利用影印法（用无菌绒布轻盖在已长好菌落的原培养基上，然后不转动任何角度，“复印”至新的培养基上）初检某种氨基酸缺陷型菌株的过程。相关说法正确的是（ ）
A. ①过程接种方法为稀释涂布平板法，接种后的培养皿不能立即进行倒置培养
B. 紫外线处理的目的是提高菌种突变率且一定能产生目标菌
C. 进行②过程的顺序是先将丝绒布“复印”至完全培养基上，再“复印”至基本培养基上
D. 完全培养基上的菌落A在基本培养基对应位置不存在，说明其为氨基酸缺陷型菌落
18. 我国是酱油生产最早的国家。制曲是酱油生产的重要工序之一，其主要目的是给米曲霉创造最佳条件，使其生长繁殖并分泌和积累相应的酶，制曲设备示意图如下。下列叙述错误的是（ ）
A. 鼓风机应不断通入经过滤的新鲜空气
B. 将曲料摊铺在帘架上不利于控制微生物生长的温度
C. 酶及微生物的种类和数量是鉴定成曲质量的指标
D. 该制曲过程主要的发酵产物是葡萄糖、乙醇、乳酸等物质
三、非选择题（本题共5 小题，共59分。）
19. 科学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了番茄—马铃薯杂种植株，为了便于杂种细胞的筛选和鉴定，科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记番茄和马铃薯的原生质体膜上的蛋白质，其培育过程如图所示。据图回答下列问题：
（1）为获得原生质体，过程①需要利用________处理两种植物细胞。两种植物细胞的原生质体融合成功的依据是________。
（2）写出促进原生质体融合的方法________（写出两个）。
（3）过程③和④利用的植物细胞工程技术是________。该技术依据的生物学原理是植物细胞具有全能性，全能性是指________。
（4）细胞融合完成后，融合细胞的细胞膜表面的荧光颜色可能是________，细胞融合过程是否受温度的影响？________（填“是”或“否”）。
（5）已知番茄细胞内有12 对同源染色体，马铃薯细胞内共48 条染色体，则在“番茄—马铃薯”细胞分裂过程中最多可以观察到________条染色体。
（6）植物体细胞杂交技术的意义是________。
20. Ⅰ、培养胡萝卜根组织可获得试管苗，获得试管苗的过程如图1所示。
回答下列问题：
（1）步骤③切取的组织块中要带有形成层，原因是________。
（2）从步骤⑤到步骤⑥需要更换新的培养基的原因是： i.诱导愈伤组织形成和诱导愈伤组织分化形成试管苗所需的生长素和细胞分裂素的比例不同；ii.________。
（3）步骤⑥要进行照光培养，其作用是________。
（4）病毒在作物体内逐年积累，就会导致作物产量较低，品质变差。生产上，作物脱毒也用到了植物组织培养技术，选择茎尖为材料，原因是________。
Ⅱ、美西螈具有很强的再生能力。研究表明，美西螈的巨噬细胞在断肢再生的早期起重要作用。为研究巨噬细胞的作用机制，科研人员制备了抗巨噬细胞表面标志蛋白CD14 的单克隆抗体，具体方法如下。抗CD14 单克隆抗体的制备流程如图2所示。回答下列问题：
（5）步骤⑤向小鼠注射________。
（6）步骤②所用的SP2/0 细胞的生长特点是________。
（7）吸取③中的上清液到④的培养孔中，根据抗原—抗体杂交原理，需加入________进行专一抗体检测，检测过程发现有些杂交瘤细胞不能分泌抗 CD14 抗体，原因是________。
（8）步骤⑥从________中提取到大量的抗 CD14 抗体，用于检测巨噬细胞。
21. 表皮生长因子受体（EGFR）在某些癌细胞表面明显增多，针对EGFR 的靶向治疗越来越受到研究者的关注。
（1）研究者提取了癌细胞表面的EGFR，并注射到小鼠体内。一段时间后，取小鼠的脾脏组织，剪碎后用________使其分散成单个细胞。将得到的脾脏细胞与________细胞诱导融合后，依次通过________培养基筛选和抗体（阳性）检测，筛选得到所需的杂交瘤细胞，并从细胞培养液中获得待测单克隆抗体。
（2）研究者将抗原注射到动物体内进行免疫，制备出抗 EGFR 的单克隆抗体，然后将辣根过氧化物酶与该抗体结合，制备出酶标记抗体。将________结合到固相载体上，加入待测的单克隆抗体，再将酶标记抗体加入反应体系。然后向反应体系中加入白色底物（可被辣根过氧化物酶催化形成蓝色产物），反应体系中________可以反映出待测单克隆抗体的含量。
（3）抗体的结构如下图所示，它有两条H链和两条L链。同一物种C区氨基酸序列恒定，不同抗体的结合抗原的 V 区氨基酸序列有差异。
①抗体结构中的肽键数目为p，氨基酸数目为a，二者的关系式为________。
②取免疫后小鼠的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，经筛选得到杂交瘤细胞，获得具有________特点的杂交瘤细胞。将得到的杂交瘤细胞进行体内培养或放入________培养箱进行体外培养，从细胞培养液中提取出单克隆抗体。
③由于鼠源性抗体会使人产生免疫反应，导致该抗体失效，科学家制备了嵌合性单克隆抗体，初步解决了这一问题。推测嵌合性抗体应由鼠源性抗体的________区和人抗体的________区组合而成。
22. 啤酒是以大麦芽、啤酒花、水为主要原料，经酵母发酵作用酿制而成的饱含二氧化碳的低酒精度酒。啤酒中的低分子糖和氨基酸很容易被吸收利用，在体内产生大量的热量，被称为“液体面包”。图1是啤酒生产工艺流程简图。
（1）图中焙烤的目的是降低麦芽水分，并________（但不使淀粉酶失活），然后去根制成成品麦芽。将粉碎的麦芽等原料用温水分别在糊化罐、糖化罐中混合，调节温度以制造麦汁，破碎麦芽的目的是________。
（2）发酵罐内的发酵是发酵工程的中心环节。麦汁冷却的目的是________，冷却后再加入啤酒酵母使其发酵。在发酵过程中，要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度等，以了解发酵进程；还要严格控制________等发酵条件（至少写出3个），以获得所需的发酵产物。
（3）现代发酵工程使用的大型发酵罐均具有计算机控制系统，能使发酵全过程处于最佳状态，图2 为发酵罐示意简图。发酵过程有机物分解释放的能量会引起发酵罐温度升高，常用冷却水对发酵罐进行温度的调节，冷却水进入口和排出口分别是________（填图2中的标号，下同）。酵母菌酒精发酵过程中要“先通气后密封”，通过空气入口________来控制溶解氧。发酵还需要用排气管调节罐压，原因是________。
（4）为提高菌株 H 对蔗糖的耐受能力和利用效率，可在液体培养基中将蔗糖作为________，并不断提高其浓度，经多次传代培养（指培养一段时间后，将部分培养物转入新配的培养基中继续培养）以获得目标菌株。培养过程中定期取样并用________的方法进行接种，培养并统计菌落数，以评估菌株增殖状况。
（5）基于菌株H嗜盐、酸碱耐受能力强等特性，研究人员设计了一种不需要灭菌的发酵系统，其培养基盐浓度设为60g/L，pH 为10，菌株H 可正常持续发酵60d以上。该系统不需要灭菌的原因是________。（答出两点即可）
23. 某科研所对高产奶牛的繁殖进行研究，部分数据如下表所示。回答下列问题：
（1）超卵是超数排卵的简称，让供体达到该目的，则需要给供体注射________。
（2）由表格可知，并不是每个胚胎都可以使用，现分六组对不可用胚胎进行检查，以分析原因，则每组可获得的不可用胚胎数约为__________个，从中选择一个胚胎观察其染色体的数目，则最佳观察时期是________，观察后染色体数目是配子的三倍，这是多精入卵造成的，多精入卵的产生说明________失效。
（3）诱导小鼠细胞与去核的卵母细胞融合通常采用的方法是________，用物理化学方法激活重构胚的目的是________。
（4）若可用胚胎都能发育成个体，则后代为雌性的概率为________。为提高后代雌性概率，可对可用胚胎的滋养层细胞的DNA 进行 PCR，选择SRY 基因（该基因位于 Y 染色体上的性别决定基因）________（填“阳性”或“阴性”）的胚胎进行移植。
（5）代孕个体对移入子宫的重构胚________，这为胚胎在受体内的________提供了可能。
（6）胚胎分割可以增加胚胎数量，在对胚胎进行分割时要注意________。超排供体（头）
头均获胚胎（枚）
头均可用胚胎（枚）
1501
5.6
3.6
2024年春期六校第一次联考
高二年级生物试题
（考试时间： 75 分钟 试卷满分： 100分）
注意事项：
1. 答题前，考生务必将自己的姓名、准考证号、考场号填写在答题卡上。
2. 回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其它答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上，写在本试卷上无效。
3. 考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。
一、单项选择题（本题共 13 小题，每小题2分，共26 分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。）
1. 人类利用微生物发酵制作果酒或其他食品，已经有几千年的历史。下列有关发酵说法正确的是（ ）
A. 腐乳鲜美味道的主要原因是曲霉分解蛋白质产生的小分子肽和氨基酸引起的
B. 泡菜装坛八成满是为了防止乳酸菌产生的二氧化碳使发酵液溢出
C. 果酒和果醋的发酵菌种不同，但代谢类型相同
D. 果酒发酵后可以接着进行果醋发酵，但是要将发酵温度升高一些
【答案】D
【解析】
【分析】1、制作泡菜的注意事项：①盐水煮沸一是为了消除杂菌，二是为了除去水中的氧气，冷却再用是为了避免高温杀死坛中蔬菜表面的乳酸菌。②加水密封是为了阻止外面的空气再进入泡菜坛，为乳酸菌发酵制作泡菜创造无氧的环境条件。若此过程中进入大量氧气，可能导致乳酸菌死亡而好氧菌大量繁殖，使菜腐烂。③菜料只能装八成满的原因：初期会有气体产生；要往坛中加盐水没过菜料，所以不能加菜料太满。2、制作果酒和果醋的注意事项： ①发酵瓶和榨计机都要用体积分数为70%的酒精消毒。②葡萄要先冲洗再去枝梗，以免去枝梗时葡萄破碎，增加被杂菌污染的风险。③瓶中留有1/3空间为酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖提供氧气。果酒发酵过程中会产生大量CO2导致瓶内气压升高，需拧松瓶盖放气，但不要完全打开，否则可能会被杂菌污染。
【详解】A、 豆腐中的蛋白质被分解成小分子的肽和氨基酸， 味道鲜美， 易于消化吸收，而腐乳本身又便于保存。多种微生物参与了豆腐的发酵，如酵母、曲霉和毛霉，其中起主要作用的是毛霉， A错误；
B、泡菜发酵时，发酵初期酵母菌等的活动会产生气体， 使体积膨胀， 故发酵坛装八成满可防止发酵液溢出， 乳酸菌只进行无氧呼吸，不产生二氧化碳， B错误；
C、果酒的发酵菌种是酵母菌， 其新陈代谢类型是异养兼性厌氧型；果醋的发酵菌种是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型，二者不同， C错误；
D、果酒和果醋的制作可用同一装置， 但需控制不同的发酵条件， 果酒制作需要无氧环境，适宜温度为18~30℃，果醋制作需要有氧环境， 适宜温度为30~35℃， D正确。
故选D
2. 《舌尖上的中国》栏目介绍了我国各地的美食，其中利用发酵技术制作的各类特色食品，如果醋、腐乳、泡菜等，很好的展现了广大人民群众的智慧。下列说法错误的是（ ）
A. 制苹果醋可以向捣碎的苹果汁中直接接种醋酸菌。经过一次发酵制成，在发酵过程中需要经常向发酵液中通入无菌空气
B. “王致和”腐乳是我国的著名品牌，制作腐乳时加盐腌制后需要加入卤汤，若卤汤中的酒精含量过高，则会导致腐乳成熟时间减短
C. 东北酸菜和四川泡菜都非常有名，它们的制作过程基本类似，都是利用乳酸菌发酵。向坛中注入盐水前，煮沸所用盐水的目的是杀菌
D. 在泡菜制作过程中，亚硝酸盐含量变化情况是先增加后减少
【答案】B
【解析】
【分析】苹果醋的制作通常有两条途径： 一条途径是向苹果汁中直接接种醋酸菌， 经过一次发酵制成； 另一条途径需经过先后两次发酵获得， 即先接种酵母菌获得果酒， 再在果酒中接种醋酸菌进一步发酵获得果醋。豆腐发酵的原理是利用毛霉等真菌产生的脂肪酶、蛋白酶对豆腐中脂肪、蛋白质进行分解，产生甘油和脂肪酸、小分子肽和氨基酸等，再经后期腌制、加卤汤、密封发酵制成。
【详解】A、参与果醋制作的微生物是醋酸杆菌， 由于醋酸菌是需氧型微生物， 所以它在发酵过程中需要不断向发酵液中通入无菌空气， A 正确；
B、豆腐通过毛霉等微生物分泌的酶分解， 其中营养物质的种类会增多。制作腐乳时加盐腌制后需要加入卤汤，若卤汤中的酒精含量过高，会破坏霉菌产生的部分发酵酶，进而会导致腐乳成熟时间延长， B错误；
C、泡菜都是利用乳酸菌发酵制成。向泡菜坛中注入盐水前，煮沸所用盐水的目的主要是杀灭细菌，其次又除去部分溶解氧， C正确；
D、在泡菜制作过程中，亚硝酸盐含量的变化情况是先增加后减少， D正确。
故选B。
3. 下列关于微生物的培养与应用的叙述，正确的是（ ）
A. 将分离纯化的菌种用接种环接种到斜面培养基上封口后，直接置于4℃冰箱中保存
B. 若要培养霉菌，可用添加蔗糖的豆芽汁制备培养基并调pH 偏碱性再灭菌
C. 配制尿素固体培养基时，将尿素用过滤灭菌的方法加入全营养培养基中
D. 水质检测时，经微生物培养和分离后可通过观察菌落特征初步鉴别菌种类型
【答案】D
【解析】
【分析】虽然各种微生物培养基的配方不同， 但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等营养物质。在提供上述几种主要营养物质的基础上培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染。培养基及使用的培养器具均需要灭菌。
【详解】A、 将分离纯化的菌种用接种环接种到斜面培养基上封口后， 37℃培养一天后置于4℃冰箱保存， A错误；
B、 若要培养霉菌，可用添加蔗糖的豆芽汁制备培养基并调pH偏酸性再灭菌， B错误；
C、 配制尿素固体培养基时， 将尿素用过滤灭菌的方法加入无氮源的培养基中，用于分离土壤中以尿素为氮源的微生物，全营养培养基的目的是观察全营养条件下能生长的土壤微生物的种类和数目，以区分选择培养基是否有选择作用，C 错误；
D、不同微生物在培养基上繁殖形成的菌落在形状、大小、颜色、隆起程度、透明度上存在差异，故水质检测时，经微生物培养和分离后可通过观察菌落特征初步鉴别菌种类型， D 正确。
故选D。
4. 下图是研究人员从土壤中筛选降解石油的细菌（目的菌）流程图。下列叙述错误的是（ ）
A. ④中可采用平板划线法对筛选得到的目的菌进行纯化
B. 应选择②中培养瓶内“石油含量”显著降低的培养液继续③操作
C. 培养皿等用具在使用前后均需进行消毒处理
D. 若要研究目的菌生长规律，可用培养液培养目的菌并用细菌计数板计数，统计获得的菌落数往往多于实际活菌数，稀释涂布平板法统计时则相反
【答案】C
【解析】
【分析】分析题意，为了从石油污染的土壤中筛选高效降解石油的细菌， 在以石油为唯一碳源的培养基中，只有能降解石油的目的菌才能生长繁殖， 而其它不能利用石油为碳源的一般就不能生长和繁殖，因此可以通过该种选择培养基筛选目的菌。
【详解】A、分离纯化目的菌的方法可以是平板划线法， 也可以是稀释涂布平板法， A正确；
B、培养瓶内“石油含量”显著降低说明培养液中的菌降解石油能力强， 因此选择该培养瓶中的培养液继续③操作， B 正确；
C、培养皿等用具在使用前后均需在 160℃~170℃干热灭菌箱中灭菌， C错误；
D、用培养液培养目的菌并用细菌计数板计数可以研究目的菌生长规律，稀释涂布平板法计算获得的菌落数往往少于实际活菌数， 原因是当两个或多个细胞连在一起时，观察到的只是一个菌落； 而细菌计数板统计法获得的菌落数可能会大于实际活菌数，原因是细菌计数板统计出的菌体数目是活菌和死菌的数目之和， D 正确。
故选C。
5. 下列有关植物细胞全能性的叙述，正确的是（ ）
A. 1902年，哈伯兰特通过实验验证了细胞全能性的理论
B. 在生物的发育过程中，所有的细胞都表现出全能性
C. 已分化了的植物细胞在结构和功能上都比较专一，失去了发育成完整植株的潜力
D. 土壤农杆菌 Ti 质粒的发现和应用，促进了植物细胞工程与分子生物学技术的紧密结合
【答案】D
【解析】
【分析】植物细胞工程主要包括植物组织培养技术和植物体细胞杂交技术，植物组织培养技术的理论基础是细胞的全能性，包括脱分化和再分化过程。
【详解】A、1902年， 哈伯兰特提出了细胞全能性的理论， 但相关的实验尝试没有成功，A 错误；
B、 在生物的生长发育过程中， 并不是所有的细胞都表现出全能性， 如筛管细胞，没有细胞核，经离体培养不能表现出全能性， B 错误；
C、已经分化了的植物细胞在结构和功能上都比较专一， 但仍有发育成完整植株的潜力， C错误；
D、 教材中“科技探索之路”中提到1974年，土壤农杆菌的Ti质粒被发现。之后， 该质粒应用于植物分子生物学领域，促进了植物细胞工程与分子生物学技术的紧密结合， D正确。
故选D。
6. 植物体细胞杂交，又称原生质体融合，是指将植物不同种、属，甚至科间的原生质体通过人工方法诱导融合，然后进行离体培养，使其再生杂种植株的技术。下列有关叙述正确的是（ ）
A. 聚乙二醇促进原生质体融合后，以叶绿体颜色等差异为标志可识别杂种细胞
B. 从动物消化道内提取蛋白酶，用于去除植物细胞壁
C. 检测原生质体活力时可用台盼蓝染液处理，活的原生质体被染色
D. 原生质体需在低渗溶液中长期保存，以防止过度失水而死亡
【答案】A
【解析】
【分析】植物体细胞杂交是指将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。诱导原生质体融合的方法：物理法（离心、振动、电激等）和化学法（聚乙二醇等）。植物体细胞杂交的意义：克服远缘杂交不亲和的障碍，扩大亲本范围，培育作物新品种。
【详解】A、 聚乙二醇作为诱导剂可促进原生质体融合，对于杂种细胞可以叶绿体颜色等差异为标志来进行识别， A正确；
B、植物细胞壁的成分主要是纤维素和果胶，其中不含蛋白质成分， 所以用蛋白酶无法去除细胞壁， B 错误；
C、 检测原生质体活力时可用台盼蓝染液染色， 根据细胞膜控制物质进出的原理，活的原生质体不能被染色， 死细胞被染成蓝色，C错误；
D、 获得的原生质体应该在等渗溶液中， 在低渗溶液中会吸水涨破， D错误。
故选A。
7. 蔷薇（基因型为 AaBb）的花药通过一系列过程形成试管苗，以下说法中正确的是（ ）
A. 在花药离体培养的过程中需要阳光、空气、水
B. 单倍体幼苗是通过有丝分裂和分化形成的，属于无性生殖
C. 培养基中应该有细胞分裂素和生长素
D. 试管苗的基因型是AABB 或aabb或 AAbb或aaBB
【答案】C
【解析】
【分析】植物组织培养过程：离体的组织或器官经脱分化形成愈伤组织，愈伤组织在相关植物激素的作用下进行再分化形成具有根或芽分化的胚状体。
【详解】A、植物组织培养过程： 离体的组织或器官经脱分化形成愈伤组织，愈伤组织在相关植物激素的作用下进行再分化形成具有根或芽分化的胚状体，在脱分化整个培养过程中形成幼苗前不能进行光合作用， A 错误；
B、植物组织培养过程中，培养的细胞只进行有丝分裂，而不涉及减数分裂， 但是植物组织培养的生殖类型应根据其所用培养材料而定。如果所用培养材料是体细胞，如根尖、茎尖等，则属于无性生殖。如果是花药离体培养，则应属于有性生殖， B错误；
C、培养基中应该有细胞分裂素和生长素可以促进细胞分裂和生长，且两者的比例可决定不同的分化方向，C 正确；
D、花药离体培养形成的幼苗是单倍体， 故试管苗的基因型是AB或ab或Ab或aB，D错误。
故选C。
8. 关于动物体细胞培养，下列叙述正确的是（ ）
A. 动物体细胞培养过程中细胞的遗传物质均发生改变
B. 加入胰蛋白酶的目的是去掉细胞膜，暴露出原生质体便于细胞融合
C. 动物细胞培养是从动物体获得相关组织，分散成单个细胞后，在适宜环境下让细胞生长和增殖的过程，是动物细胞工程的基础
D. 培养基中加入氧气是为了满足细胞代谢的需要，加入二氧化碳是为了创造无菌无毒的环境
【答案】C
【解析】
【分析】动物细胞培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。
【详解】A、 随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现衰老甚至死亡的细胞，但极少数细胞可以连续增殖， 其中有的遗传物质会发生改变， A错误；
B、 加入胰蛋白酶的目的是将组织分散成单个细胞， B 错误；
C、细胞工程包括动物细胞融合、单克隆抗体制备等， 动物细胞培养是动物细胞工程的基础，是指是从动物体获得相关组织，分散成单个细胞后，在适宜环境下让细胞生长和增殖的过程， C 正确；
D、二氧化碳的作用是维持培养液的pH，而不是创造一个无菌、无毒的环境，D 错误。
故选C。
9. 单克隆抗体技术在生物工程中占有重要的地位，下列有关单克隆抗体叙述错误的是（ ）
A. 利用抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体做成“早早孕诊断试剂”
B. 作为诊断试剂，具有准确、高效、快速、简易的优点，可定位诊断肿瘤、心血管畸形、白化病等疾病
C. 从临床试验来看，单克隆抗体主要用于癌症治疗，作用是定位而不是杀伤
D. 将某细菌的抗药基因导入小鼠细胞内不属于单克隆抗体在实践上的应用
【答案】B
【解析】
【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
【详解】A、 利用抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体做成早早孕诊断试剂， 属于单克隆抗体在实践上应用， A正确；
B、 单克隆抗体在诊断的应用上，具有准确、高效、简易、快速的优点， 可定位诊断肿瘤、心血管畸形，白化病的表现型非常直观，不需要单克隆抗体定位诊断，B 错误；
C、临床试验中，单克隆抗体主要用于癌症治疗， 也有少量用于其他疾病的治疗， 在“生物导弹”中，单克隆抗体作为瞄准装置， 作用是定位，起杀伤作用的是与其相连接的药物， C正确；
D、 将某细菌的抗药基因导入小鼠细胞内属于基因工程的范畴，不属于单克隆抗体在实践上的应用， D正确。
故选B。
10. 将蝌蚪体细胞中的细胞核移植到去核的蛙卵中，形成重建的“合子”。有些“合子”发育成正常的蝌蚪，而单独培养体细胞却不能发育成蝌蚪。下列叙述错误的是（ ）
A. “合子”第一次分裂后形成的细胞已失去全能性
B. 细胞核具有全能性是由于其含有该物种的全套基因
C. “合子”发育成正常蝌蚪的过程中伴随着细胞分裂和细胞分化
D. 体细胞不能表达全能性是受某些物质的限制
【答案】A
【解析】
【分析】细胞的全能性是指细胞经分裂和分化后，仍然具有产生完整有机体或分化成其他各种细胞的潜能和特性，植物的体细胞具有全能性，动物的体细胞不表现出全能性， 但细胞核具有全能性。
【详解】A、“合子”第一次分裂、第二次分裂后形成的细胞仍具有全能性， A错误；
B、虽然细胞经过多次分裂失去了激发全能性的物质，但细胞核仍含有该物种的全套基因， 故动物细胞核具有全能性， B正确；
C、“合子”发育成正常蝌蚪个体的过程中， 需要通过细胞分裂增加细胞的数量， 通过细胞分化增加细胞的种类， C正确；
D、 动物细胞经过多次分裂后，细胞质的成分已经发生改变， 原本能激发细胞全能性的物质已经消失， 故体细胞不能表达全能性是受到了细胞内物质的限制， D 正确。
故选A。
11. 下列关于动物细胞工程和胚胎工程的叙述正确的是（ ）
A. 胚胎分割技术提高了移植胚胎的成活率
B. 通常采用培养法或化学诱导法使精子获得能量后进行体外受精
C. 动物细胞培养是动物细胞工程的基础，在进行细胞培养时培养基中除了加入细胞所需的各种营养物质外，还需要加入琼脂
D. 克隆牛技术涉及体细胞核移植、动物细胞培养、胚胎移植等过程
【答案】D
【解析】
【分析】动物细胞工程常用的技术手段有动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等，其中动物细胞培养技术是其他动物工程技术的基础。
【详解】A、 胚胎分割可以获得多个胚胎，分割次数越多，分割后胚胎成活的概率越小，A 错误；
B、精子获能是获得受精的能力，不是获得能量， B 错误；
C、 动物细胞培养是动物细胞工程的基础，在进行细胞培养时培养基中只加入细胞所需的各种营养物质； 在制作微生物的培养基的过程中， 可以通过添加琼脂作为凝固剂来将液体培养基转化为固体培养基或半固体培养基， C错误；
D、 克隆牛技术涉及体细胞核移植、动物细胞培养、胚胎移植等过程，D 正确。
故选D。
12. 一位患有单基因显性遗传病的妇女（其父亲与丈夫表现型正常）想生育一个健康的孩子。医生建议对极体进行基因分析，筛选出不含该致病基因的卵细胞，采用试管婴儿技术辅助生育后代，技术流程示意图如下。下列叙述错误的是（ ）
A. 该致病基因可能位于 X染色体或者常染色体上
B. 过程③通常用显微注射的方法
C. 自然生育患该病子女的概率是25%
D. 可选择极体1或极体2用于基因分析
【答案】C
【解析】
【分析】1、一位患有单基因显性遗传病的妇女，进行基因分析可筛选出不含该致病基因的卵细胞，说明该患病妇女为杂合子。
2、一个卵原细胞减数分裂产生三个第二极体和一个卵细胞，极体最终退化消失。
3、通常说的“卵子”指次级卵母细胞，精卵结合指的是成熟的精子与次级卵母细胞识别，在入卵的同时，次级卵母细胞完成减数第二次分裂产生卵细胞，最后完成精核与卵核的融合。
【详解】A、 由题意可知，患病妇女为杂合子， 该显性致病基因可以位于常染色体上，也可以位于X染色体上， A 正确；
B、 一般采用显微注射的方法对卵母细胞进行操作处理，B 正确；
C、若显性致病基因用A 表示，位于常染色体，则患病妇女基因型为Aa，丈夫正常，基因型为 aa， 自然生育患该病子女（Aa）的概率是1/2， 若显性致病基因位于X染色体上，则患病妇女基因型为XAXa，丈夫的基因型为XaY，自然生育患该病子女（XAXa， XAY）的概率是1/4+1/4=1/2， 50%， C错误；
D、 卵原细胞减数分裂Ⅰ中同源染色体分离， 其上基因也随之分离， 最终产生一个次级卵母细胞和一个第一极体， 二者基因互补，次级卵母细胞减数分裂Ⅱ着丝粒分裂，姐妹染色单体分离，其上基因也随之分离，最终产生一个卵细胞和一个第二极体，二者基因相同， 且卵细胞可用于受精，而极体最后退化消失，因此可选择极体1或极体2用于基因分析， D正确。
故选C。
13. 细胞直接共培养是指将2种或2种以上的细胞接种在同一孔中进行培养，以达到模拟体内不同种类的细胞直接接触来探究它们信息交流方式的目的，具体操作如图。下列分析正确的是（ ）
A. 推测第二种细胞会贴壁到无细胞区，当两种细胞分裂生长到表面相互接触时还会继续分裂
B. 细胞培养过程需要对培养液进行灭菌，对所有培养用具进行消毒，以保证无菌无毒的培养环境
C. 成块的组织中细胞与细胞靠在一起，在培养之前无需先将组织块分散成单个细胞
D. 通过检测混合培养液中是否存在信息类物质可初步推测两种细胞间的信息交流方式
【答案】D
【解析】
【分析】1、动物细胞培养过程： 取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。
2、动物细胞培养的条件： （1） 无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌； ②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液， 以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和 pH。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的 CO2（CO2的作用是维持培养液的PH）。
【详解】A、 动物细胞在培养过程中均会出现细胞贴壁和接触抑制的现象， 由此推测第二种细胞会贴壁到无细胞区，当两种细胞分裂生长到表面相互接触时停止分裂， A错误；
B、细胞培养过程需要对培养液、培养用具进行灭菌，细胞培养过程需要对培养液添加抗生素防止细菌污染，定期更换培养液以防止细胞代谢产物造成毒害， B错误；
C、成块的组织中细胞与细胞靠在一起，在培养前需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理将组织块成为单个细胞后才能进行培养， C错误；
D、细胞膜表面上可能存在接受邻近细胞信号的受体，以完成细胞间的信息交流，通过检测混合培养液中是否存在信息类物质可初步推测两种细胞间的信息交流方式，D正确。
故选D。
二、多项选择题（本题共5 小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有两个或两个以上选项符合题目要求。全部选对的得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。）
14. CD47 是一种细胞膜表面的糖蛋白，可与巨噬细胞结合，从而抑制巨噬细胞的功能。为验证抗 CD47 的单克隆抗体能减弱 CD47 对巨噬细胞的抑制作用，某科研小组进行了实验，实验过程如图所示。下列叙述正确的是（ ）
A. 通常向肿瘤细胞共培养体系加入血清，可提供某些营养物质
B. 融合、筛选得到的杂交瘤细胞都能产生抗 CD47 的单克隆抗体
C. CD47 与巨噬细胞结合后会抑制后者的抗原处理、呈递功能
D. 预期实验结果为对照组的巨噬细胞的吞噬能力高于实验组的
【答案】AC
【解析】
【分析】单克隆抗体制备流程： （1）对小鼠注射特定的抗原使小鼠产生免疫反应； （2）从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞； （3）将小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合，再用特定的选择培养基进行筛选； （4）在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡， 只有融合的杂种细胞才能生长； （5） 对上述杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选就可获得足量的能分泌所需抗体的细胞； （6） 最后，将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养，或注射到小鼠腹腔内增殖。这样从细胞培养液或小鼠腹水中， 就可以提取出大量的单克隆抗体。
【详解】A、动物细胞培养时通常会在培养液中加入一些天然成分， 肿瘤细胞共培养体系加入的血清可提供某些营养物质， A 正确；
B、融合、筛选得到的杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和抗体检测， 经过多次筛选， 才可以获得足够数量的能分泌抗 CD47 的单克隆抗体的细胞， B错误；
C、CD47与巨噬细胞结合后会抑制巨噬细胞的功能，巨噬细胞具有吞噬消化、抗原处理和呈递功能， C正确；
D、实验组中加入了单克隆抗体，抗体与肿瘤细胞表面的 CD47发生特异性结合，从而解除CD47对巨噬细胞的抑制作用， 而对照组中没有加入单克隆抗体，不能与肿瘤细胞表面的 CD47 结合，因而无法解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，因此， 预期实验结果为实验组中吞噬细胞的吞噬指数显著高于对照组， D 错误。
故选AC。
15. 根据下图，错误的选项是（ ）
A. 子代动物遗传性状和受体动物完全一致
B. 过程①需要 MII 期去核卵母细胞
C. 过程②可以大幅改良动物性状
D. 胚胎移植的实质是在相同生理环境条件下早期胚胎空间位置的转移
【答案】ABC
【解析】
【分析】动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中， 使其重组并发育成一个新的胚胎，这个胚胎最终发育为动物。
【详解】A、子代动物的遗传性状与供体基本一致，但与受体无关， A错误；
B、核移植过程中需要处于MII中期的去核卵母细胞， 而过程①是培育试管动物，需要培育到适宜时期（桑葚胚或囊胚等时期） 进行胚胎移植， B错误；
C、过程②得到的是克隆动物，是无性生殖的一种，不能大幅改良动物性状， C错误；
D、胚胎移植的实质是早期胚胎在相同的生理环境下空间位置的转移， 是胚胎工程的最后一道工序，D正确。
故选ABC。
16. 为了降低对国外奶牛种质的过度依赖，提高优良母牛的扩繁速度成为关键，而试管牛技术产业化则可以有效解决这一难题。如图是试管奶牛的生产流程示意图，下列有关叙述错误的是（ ）
A. ①是核移植技术，反映了动物细胞核具有全能性
B. 从优良母牛中采集卵母细胞，通常用冲洗子宫采卵方法
C. 激活后的重组细胞培养至原肠胚后进行胚胎移植
D. 进行过程②胚胎移植前，需取囊胚的滋养层细胞进行性别鉴定
【答案】ABC
【解析】
【分析】体外受精主要包括：卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精。2、胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理。选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体，供体和受体是同一物种。并用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理。②配种或人工授精。③对胚胎的收集、检查、培养或保存。配种或输精后第7天，用特制的冲卵装置，把供体母牛子宫内的胚胎冲洗出来（也叫冲卵）。对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段。直接向受体移植或放入-196℃的液氮中保存。④对胚胎进行移植。⑤移植后的检查。对受体母牛进行是否妊娠的检查。
【详解】A、由图可知，①是体外受精，精卵结合的过程， A错误；
B、卵母细胞是在卵巢中采集到的， B错误；
C、 激活后的重组细胞培养至囊胚或桑葚胚后移植， C错误；
D、在进行胚胎移植之前，需对早期胚胎进行性别鉴定，可取囊胚期的滋养层细胞进行DNA 分析，D 正确。
故选ABC
17. 营养缺陷型菌株是突变后某些酶被破坏，导致代谢过程中某些合成反应不能进行的菌株。下图是科研人员利用影印法（用无菌绒布轻盖在已长好菌落的原培养基上，然后不转动任何角度，“复印”至新的培养基上）初检某种氨基酸缺陷型菌株的过程。相关说法正确的是（ ）
A. ①过程接种方法为稀释涂布平板法，接种后的培养皿不能立即进行倒置培养
B. 紫外线处理的目的是提高菌种突变率且一定能产生目标菌
C. 进行②过程的顺序是先将丝绒布“复印”至完全培养基上，再“复印”至基本培养基上
D. 完全培养基上的菌落A在基本培养基对应位置不存在，说明其为氨基酸缺陷型菌落
【答案】AD
【解析】
【分析】分析图解：图中首先利用稀释涂布平板法分离细菌，然后运用“影印法”将菌种接种到两种培养基中：基本培养基、完全培养基，则在基本培养基中，氨基酸缺陷型菌株不能生长，而在完全培养基中能够生长，因此可以选择出氨基酸缺陷型菌株。
【详解】A、据图分析,接种后的菌落均匀分布，据此推测该过程接种的方法为稀释涂布平板法，接种后的培养皿不能立即进行倒置培养，A正确；
B、基因突变具有不定向性，紫外线处理的目的是提高菌种突变率但不一定能产生目标菌，B错误；
C、进行②过程培养时，为了防止将完全培养基中特定营养成分带入基本培养基，应先将丝绒布先转印至基本培养基上再“复印”至完全培养基上，C错误；
D、在基本培养基中氨基酸缺陷型菌株不能生长，而在完全培养基中能够生长，完全培养基上的菌落A在基本培养基对应位置不存在，说明其为氨基酸缺陷型菌落，D正确。
故选AD。
18. 我国是酱油生产最早的国家。制曲是酱油生产的重要工序之一，其主要目的是给米曲霉创造最佳条件，使其生长繁殖并分泌和积累相应的酶，制曲设备示意图如下。下列叙述错误的是（ ）
A. 鼓风机应不断通入经过滤的新鲜空气
B. 将曲料摊铺在帘架上不利于控制微生物生长的温度
C. 酶及微生物的种类和数量是鉴定成曲质量的指标
D. 该制曲过程主要的发酵产物是葡萄糖、乙醇、乳酸等物质
【答案】BD
【解析】
【分析】鼓风机应不断通入经过滤的新鲜空气，为米曲霉的生长提供足量的氧气， 为米曲霉生长创造条件， 以便其大量繁殖， 积累相应的酶。
【详解】A、 米曲霉的代谢类型是异养需氧型，因此鼓风机应不断通入经过滤的新鲜空气， A 正确；
B、 微生物的生长需要适宜的温度， 曲料摊铺在帘架上可以及时散热， 有利于控制微生物生长的温度， B 错误；
C、 发酵的主要目的是使米曲霉充分生长繁殖并分泌和积累相应的酶，所以酶及微生物的种类和数量是鉴定成曲质量的指标， C 正确；
D、 葡萄糖是发酵的底物， 不是产物， D错误。
故选BD。
三、非选择题（本题共5 小题，共59分。）
19. 科学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了番茄—马铃薯杂种植株，为了便于杂种细胞的筛选和鉴定，科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记番茄和马铃薯的原生质体膜上的蛋白质，其培育过程如图所示。据图回答下列问题：
（1）为获得原生质体，过程①需要利用________处理两种植物细胞。两种植物细胞的原生质体融合成功的依据是________。
（2）写出促进原生质体融合的方法________（写出两个）。
（3）过程③和④利用的植物细胞工程技术是________。该技术依据的生物学原理是植物细胞具有全能性，全能性是指________。
（4）细胞融合完成后，融合细胞的细胞膜表面的荧光颜色可能是________，细胞融合过程是否受温度的影响？________（填“是”或“否”）。
（5）已知番茄细胞内有12 对同源染色体，马铃薯细胞内共48 条染色体，则在“番茄—马铃薯”细胞分裂过程中最多可以观察到________条染色体。
（6）植物体细胞杂交技术的意义是________。
【答案】（1） ①. 纤维素酶和果胶酶 ②. 杂种细胞再生出新的细胞壁
（2）离心法、电融合法、聚乙二醇（PEG）融合法、高 Ca2+—高 pH融合法
（3） ①. 植物组织培养 ②. 细胞经分裂和分化后，仍然具有产生完整生物体（有机体） 或分化成其他各种细胞的潜能（和特性）
（4） ①. 红色荧光和绿色荧光、红色荧光、绿色荧光 ②. 是
（5）144 （6）打破生殖隔离；实现远缘杂交育种； 培育植物新品种
【解析】
【分析】分析题图： 图示为番茄—马铃薯杂种植株的培育过程， ①表示去壁过程，常用酶解法； ②表示融合的原生质体再生出细胞壁的过程； ③表示脱分化过程； ④表示再分化过程。
【小问1详解】
植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，因此根据酶的专一性原理，去除植物细胞壁常用纤维素酶和果胶酶； 细胞融合完成的标志是杂种细胞再生出新的细胞壁。
【小问2详解】
原生质体的融合方法包括物理法：离心法，电融合法和化学法： 聚乙二醇（PEG）融合法， 高 Ca2+—高 pH融合法。
【小问3详解】
③表示脱分化过程；④表示再分化过程，植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性，其过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化过程形成愈伤组织，愈伤组织经过再分化过程形成胚状体， 进一步发育成为植株， 因此， 过程③和④利用的是植物组织培养技术。全能性是指细胞经分裂和分化后，仍然具有产生完整生物体（有机体）或分化成其他各种细胞的潜能（和特性） 。
【小问4详解】
细胞融合完成后， 融合细胞的细胞膜有3种情况，①融合的番茄原生质体（红色荧光标记）、②融合的马铃薯原生质体（绿色荧光标记）、③杂种细胞即融合的番茄原生质体和马铃薯原生质体（红色荧光和绿色荧光标记） 。温度能影响细胞膜的流动速度，因此细胞融合过程受温度的影响。
【小问5详解】
若番茄细胞内有24条染色体（12对同源染色体）， 马铃薯细胞内有48条染色体，则在“番茄—马铃薯”细胞染色体数目为72， 在有丝分裂后期着丝粒分裂，染色体数目加倍， 因而可以观察到144条染色体。
【小问6详解】
植物体细胞杂交技术的意义是打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培育植物新品种。
20. Ⅰ、培养胡萝卜根组织可获得试管苗，获得试管苗的过程如图1所示。
回答下列问题：
（1）步骤③切取的组织块中要带有形成层，原因是________。
（2）从步骤⑤到步骤⑥需要更换新的培养基的原因是： i.诱导愈伤组织形成和诱导愈伤组织分化形成试管苗所需的生长素和细胞分裂素的比例不同；ii.________。
（3）步骤⑥要进行照光培养，其作用是________。
（4）病毒在作物体内逐年积累，就会导致作物产量较低，品质变差。生产上，作物脱毒也用到了植物组织培养技术，选择茎尖为材料，原因是________。
Ⅱ、美西螈具有很强的再生能力。研究表明，美西螈的巨噬细胞在断肢再生的早期起重要作用。为研究巨噬细胞的作用机制，科研人员制备了抗巨噬细胞表面标志蛋白CD14 的单克隆抗体，具体方法如下。抗CD14 单克隆抗体的制备流程如图2所示。回答下列问题：
（5）步骤⑤向小鼠注射________。
（6）步骤②所用的SP2/0 细胞的生长特点是________。
（7）吸取③中的上清液到④的培养孔中，根据抗原—抗体杂交原理，需加入________进行专一抗体检测，检测过程发现有些杂交瘤细胞不能分泌抗 CD14 抗体，原因是________。
（8）步骤⑥从________中提取到大量的抗 CD14 抗体，用于检测巨噬细胞。
【答案】（1）形成层分化程度低，易于诱导形成愈伤组织
（2）随培养时间的增加，培养基中营养物质不断减少，有害代谢产物逐渐积累，会抑制植物的生长
（3）诱导叶绿素的形成，使试管苗能够进行光合作用
（4）茎尖（顶端分生区）的病毒极少， 甚至无病毒。切取一定大小的茎尖进行组织培养，再生的植物就有可能不带病毒，从而获得脱毒苗
（5）分泌抗CD14抗体的杂交瘤细胞
（6）能在体外无限增殖
（7） ①. CD14蛋白/CD14抗原 ②. 参与形成杂交瘤细胞的 B淋巴细胞种类多， 有的不能分泌抗 CD14抗体
（8）小鼠腹水
【解析】
【分析】1、题图分析： ①→④表示处理外植体材料， ④→⑤表示脱分化，⑤→⑥表示再分化。
2、培养条件： ①在无菌条件下进行人工操作。②保证水、无机盐、碳源（常用蔗糖）、氮源（含氮有机物）、生长因子（维生素） 等营养物质的供应。③需要添加一些植物生长调节物质，主要是生长素和细胞分裂素。④愈伤组织再分化到一定阶段， 形成叶绿体，能进行光合作用，故需光照。
【小问1详解】
形成层细胞分化程度低，容易诱导形成愈伤组织， 因此步骤③切取的组织块中要带有形成层。
【小问2详解】
步骤⑤为诱导形成愈伤组织， 步骤⑥为诱导愈伤组织形成试管苗，形成不同组织、器官所需的植物激素的比例不同， 且随培养时间的增加，培养基中营养物质不断减少，有害代谢产物逐渐积累， 会抑制植物的生长， 因此需要更换培养基。
【小问3详解】
形成试管苗后，叶片的形成使植物具备了进行光合作用的条件， 而叶片中叶绿素的形成需要光， 因此要将试管苗在光下培养。
【小问4详解】
茎尖（顶端分生区）的病毒极少， 甚至无病毒，切取一定大小的茎尖进行组织培养，再生的植物就有可能不带病毒， 从而获得脱毒苗。
【小问5详解】
步骤⑤是将分泌抗CD14抗体的杂交瘤细胞注入小鼠体内培养，以获得大量单克隆抗体。
【小问6详解】
步骤②所用的 SP2/0细胞是骨髓瘤细胞， 特点是能在体外无限增殖。
【小问7详解】
根据抗原—抗体杂交原理，应该用CD14蛋白检测其中是否含抗CD14蛋白的抗体。因为形成杂交瘤细胞的B淋巴细胞种类很多，因此有些杂交瘤细胞不能分泌抗CD14抗体。
【小问8详解】
从制备单克隆抗体的流程可知，将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔后， 最终要从小鼠的腹水中提取抗CD14抗体。
21. 表皮生长因子受体（EGFR）在某些癌细胞表面明显增多，针对EGFR 的靶向治疗越来越受到研究者的关注。
（1）研究者提取了癌细胞表面的EGFR，并注射到小鼠体内。一段时间后，取小鼠的脾脏组织，剪碎后用________使其分散成单个细胞。将得到的脾脏细胞与________细胞诱导融合后，依次通过________培养基筛选和抗体（阳性）检测，筛选得到所需的杂交瘤细胞，并从细胞培养液中获得待测单克隆抗体。
（2）研究者将抗原注射到动物体内进行免疫，制备出抗 EGFR 的单克隆抗体，然后将辣根过氧化物酶与该抗体结合，制备出酶标记抗体。将________结合到固相载体上，加入待测的单克隆抗体，再将酶标记抗体加入反应体系。然后向反应体系中加入白色底物（可被辣根过氧化物酶催化形成蓝色产物），反应体系中________可以反映出待测单克隆抗体的含量。
（3）抗体结构如下图所示，它有两条H链和两条L链。同一物种C区氨基酸序列恒定，不同抗体的结合抗原的 V 区氨基酸序列有差异。
①抗体结构中的肽键数目为p，氨基酸数目为a，二者的关系式为________。
②取免疫后小鼠的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，经筛选得到杂交瘤细胞，获得具有________特点的杂交瘤细胞。将得到的杂交瘤细胞进行体内培养或放入________培养箱进行体外培养，从细胞培养液中提取出单克隆抗体。
③由于鼠源性抗体会使人产生免疫反应，导致该抗体失效，科学家制备了嵌合性单克隆抗体，初步解决了这一问题。推测嵌合性抗体应由鼠源性抗体的________区和人抗体的________区组合而成。
【答案】（1） ①. 胰蛋白酶/胶原蛋白酶/机械的方法 ②. 骨髓瘤 ③. 选择（性）
（2） ①. EGFR ②. 蓝色的深浅
（3） ①. p=a-4（或“a=p+4”） ②. 能无限增殖并产生专一（特定） 抗体 ③. CO2（恒温） ④. V ⑤. C
【解析】
【分析】在单克隆抗体的制备过程中，需要用浆细胞与骨髓瘤细胞融合；诱导动物细胞融合时，使用聚乙二醇或灭活的病毒作为诱导剂；动物细胞融合后，经过筛选获得的杂交瘤细胞具有既能无限增殖又能分泌单一抗体的特点。
【小问1详解】
研究者提取了癌细胞表面的EGFR，并注射到小鼠体内。一段时间后，取小鼠的脾脏组织，剪碎后用胰蛋白酶或胶原蛋白酶或机械的方法处理使其分散成单个细胞。将得到的脾脏细胞与骨髓瘤细胞经灭活的病毒诱导融合后，先通过选择培养基筛选出杂交瘤细胞，然后通过专一抗体阳性检测，筛选得到所需的能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，并从细胞培养液中获得待测单克隆抗体。
小问2详解】
将待测单克隆抗体作为抗原注射到异种动物体内进行免疫，可制备出抗EGFR单克隆抗体的抗体，然后将辣根过氧化物酶与该抗体结合，制备出酶标记抗体。将EGFR结合到固相载体上，加入待测的单克隆抗体，再将酶标记抗体加入反应体系。然后向反应体系中加入白色底物，由于白色底物可被辣根过氧化物酶催化形成蓝色产物，所以反应体系中蓝色的深浅可以反映出待测单克隆抗体的含量高低。
【小问3详解】
根据图示信息可知，抗体含有4条肽链组成，所以抗体分子结构中的肽键数目p与氨基酸数目a的关系式为 p=a-4（或“a=p+4”）。
取免疫后小鼠的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，经筛选得到杂交瘤细胞．将得到的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测以获得具有能无限增殖并产生专一（特定）抗体特点的杂交瘤细胞。
将得到的杂交瘤细胞进行体内培养或放入CO2（恒温）培养箱进行体外培养，从细胞培养液中提取出单克隆抗体。
由于鼠源性抗体会使人产生免疫反应，导致该抗体失效，根据题干的信息“同一物种C区氨基酸序列恒定，不同抗体结合抗原的V区氨基酸序列有差异”，推测嵌合性抗体应由鼠源性抗体的V区和人抗体的 C区组合而成。
22. 啤酒是以大麦芽、啤酒花、水为主要原料，经酵母发酵作用酿制而成的饱含二氧化碳的低酒精度酒。啤酒中的低分子糖和氨基酸很容易被吸收利用，在体内产生大量的热量，被称为“液体面包”。图1是啤酒生产工艺流程简图。
（1）图中焙烤的目的是降低麦芽水分，并________（但不使淀粉酶失活），然后去根制成成品麦芽。将粉碎的麦芽等原料用温水分别在糊化罐、糖化罐中混合，调节温度以制造麦汁，破碎麦芽的目的是________。
（2）发酵罐内的发酵是发酵工程的中心环节。麦汁冷却的目的是________，冷却后再加入啤酒酵母使其发酵。在发酵过程中，要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度等，以了解发酵进程；还要严格控制________等发酵条件（至少写出3个），以获得所需的发酵产物。
（3）现代发酵工程使用的大型发酵罐均具有计算机控制系统，能使发酵全过程处于最佳状态，图2 为发酵罐示意简图。发酵过程有机物分解释放的能量会引起发酵罐温度升高，常用冷却水对发酵罐进行温度的调节，冷却水进入口和排出口分别是________（填图2中的标号，下同）。酵母菌酒精发酵过程中要“先通气后密封”，通过空气入口________来控制溶解氧。发酵还需要用排气管调节罐压，原因是________。
（4）为提高菌株 H 对蔗糖的耐受能力和利用效率，可在液体培养基中将蔗糖作为________，并不断提高其浓度，经多次传代培养（指培养一段时间后，将部分培养物转入新配的培养基中继续培养）以获得目标菌株。培养过程中定期取样并用________的方法进行接种，培养并统计菌落数，以评估菌株增殖状况。
（5）基于菌株H嗜盐、酸碱耐受能力强等特性，研究人员设计了一种不需要灭菌的发酵系统，其培养基盐浓度设为60g/L，pH 为10，菌株H 可正常持续发酵60d以上。该系统不需要灭菌的原因是________。（答出两点即可）
【答案】（1） ①. 加热杀死大麦种子胚 ②. 有利于淀粉酶与淀粉充分接触， 提升反应速率
（2） ①. 防止接种时酵母菌被杀死 ②. 温度、pH、溶解氧、通气量与搅拌
（3） ①. ③④ ②. ⑤ ③. 防止酵母菌无氧呼吸产生的 CO2气体将发酵罐中的液体培养基溢出，防止罐体气压过高引起爆裂
（4） ①. 唯一碳源 ②. 稀释涂布平板法
（5）盐浓度为60g/L 的条件下，其他杂菌因失水过多而死亡；pH为10的条件下， 其他杂菌的酶变性失活， 生长繁殖受抑制
【解析】
【分析】1、实验室中微生物的筛选原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养. 温度、pH等) ，同时抑制或阻止其他微生物生长。
2、微生物常见的接种方法：稀释涂布平板法和平板划线法，前者可以对菌落数进行计数，后者不可计数。
【小问1详解】
大麦发芽后焙烤，焙烤温度较高， 除了可以降低麦芽水分， 还可以杀死大麦种子胚阻止其进一步萌发，同时还可以保留淀粉酶活性， 以便后续进行糖化操作。进行糖化之前，对麦芽进行粉碎，因为麦芽破碎后，更有利于淀粉酶与其中淀粉充分接触， 加速酶促反应速率， 提高糖化效率。
【小问2详解】
糖化后获得的麦汁组要冷却降温才能加入啤酒酵母， 否则温度过高容易杀死菌种。温度、pH、溶解氧、通气量等均会影响发酵的进程，因此除了补充必需的营养物质组分外， 还要严格控制温度、pH、溶解氧、通气量、搅拌等发酵条件。
【小问3详解】
用冷却水对发酵罐进行温度的调节， 下口进水，上口出水，遵循逆流原理， 冷凝效果更好，因此冷却水进入口和排出口分别是③④。酒精发酵前期通气，利于酵母菌繁殖，后期密封，利于酒精发酵， 因此需要通过空气入口⑤来控制溶解氧。酒精发酵过程中产生 CO₂，若不利用排气管调节罐压，则可能导致发酵罐内气压过大，液体培养基溢出，甚至可能引起爆炸。
【小问4详解】
根据题意分析，该实验的目的是提高菌株H对蔗糖的耐受能力和利用效率，结合微生物的代谢需求， 其液体培养基应该以蔗糖作为唯一碳源。稀释涂布平板法可以通过系列稀释和涂布平板最终获得由单个细胞繁殖来的菌落， 因此培养过程中可定期取样并用稀释涂布平板法将菌液接种到固体培养基上，待形成菌落后进行菌落计数，评估菌株增殖状况。
【小问5详解】
已知菌株H具有嗜盐、酸碱耐受能力强等特性，因此当培养基盐浓度为60g/L， pH为10时， 菌株H可正常持续发酵60d以上，而盐浓度为60g/L 的条件下， 其他杂菌因失水过多而死亡；pH为 10的条件下， 其他杂菌的酶变性失活， 生长繁殖受抑制， 故该系统不需要灭菌。
23. 某科研所对高产奶牛的繁殖进行研究，部分数据如下表所示。回答下列问题：
（1）超卵是超数排卵的简称，让供体达到该目的，则需要给供体注射________。
（2）由表格可知，并不是每个胚胎都可以使用，现分六组对不可用胚胎进行检查，以分析原因，则每组可获得的不可用胚胎数约为__________个，从中选择一个胚胎观察其染色体的数目，则最佳观察时期是________，观察后染色体数目是配子的三倍，这是多精入卵造成的，多精入卵的产生说明________失效。
（3）诱导小鼠细胞与去核的卵母细胞融合通常采用的方法是________，用物理化学方法激活重构胚的目的是________。
（4）若可用胚胎都能发育成个体，则后代为雌性的概率为________。为提高后代雌性概率，可对可用胚胎的滋养层细胞的DNA 进行 PCR，选择SRY 基因（该基因位于 Y 染色体上的性别决定基因）________（填“阳性”或“阴性”）的胚胎进行移植。
（5）代孕个体对移入子宫的重构胚________，这为胚胎在受体内的________提供了可能。
（6）胚胎分割可以增加胚胎数量，在对胚胎进行分割时要注意________。
【答案】23. 促性腺激素
24. ①. 500 ②. 有丝分裂的中期 ③. 透明带反应/卵细胞膜反应
25. ①. 电融合法 ②. 使其完成细胞分裂和发育进程
26. ①. 1/2 ②. 阴性
27. ①. 不发生免疫排斥反应 ②. 存活
28. 将内细胞团均等分割；注意分割次数，分割次数越多， 胚胎成活率越小
【解析】
【解析】胚胎移植的基本程序主要包括： ①对供、受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体。用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查， 此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段）；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。
【详解】（1） 用促性腺激素处理供体可使供体超数排卵。
（2）由表格数据可知，将不可用胚胎分成六组， 每组可获得的不可用胚胎数约为1501×（5.6-3.6）÷6=500个。观察胚胎细胞染色体数目的最佳时期是有丝分裂中期， 此时染色体形态稳定，数目清晰。透明带反应和卵细胞膜反应都能防止多精入卵， 若胚胎细胞染色体数目是配子的三倍， 说明透明带反应和卵细胞膜反应失效。
（3）常用电融合法诱导小鼠细胞与去核的卵母细胞进行融合， 供体核进入卵母细胞， 形成重构胚。用物理化学方法激活重构胚，可以使其完成细胞分裂和发育进程。
（4）若可用胚胎都能发育成个体，由于亲代雄性个体能产生的配子中X：Y=1：1， 与卵细胞结合后， 后代为雌性的概率为1/2.根据题意， SRY 基因是位于Y 染色体上的性别决定基因， SRY基因阴性的胚胎意味着胚胎中不含 SRY基因， 即不含Y 染色体，故为提高后代雌性概率， 应该选择SRY 基因阴性的胚胎进行移植。
（5）代孕个体对移入子宫的重构胚不发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能。
（6）分割囊胚时要将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。胚胎分割次数越多， 胚胎成活率越小。
超排供体（头）
头均获胚胎（枚）
头均可用胚胎（枚）
1501
5.6
3.6
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