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山东省烟台市招远市2023-2024学年高二下学期4月月考生物试题（原卷版+解析版）
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这是一份山东省烟台市招远市2023-2024学年高二下学期4月月考生物试题（原卷版+解析版），文件包含山东省烟台市招远市2023-2024学年高二下学期4月月考生物试题原卷版docx、山东省烟台市招远市2023-2024学年高二下学期4月月考生物试题解析版docx等2份试卷配套教学资源，其中试卷共34页， 欢迎下载使用。
注意事项：
1．答题前，考生务必将自己的姓名、考生号等填写在答题卡和试卷指定位置。
2．回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。
3．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。
一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。每小题只有一个选项符合题目要求。
1. 关于传统发酵技术的叙述错误的是（ ）
A. 在制作果醋时，如果条件适宜，醋酸菌可将葡萄汁中的糖分解成乙酸
B. 发酵工程的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身
C. 泡菜的制作前期需要通入氧气，后期应严格保持无氧条件
D. 在啤酒生产中，使用基因工程改造的啤酒酵母，可以加速发酵过程，缩短生产周期
2. 下列关于微生物的选择、纯化及计数的表述正确的是（ ）
A. 平板涂布时涂布器使用前必须进行消毒
B. 平板划线法要求多次划线，稀释涂布平板法中菌液要充分地稀释
C. 对细菌进行计数能采用稀释涂布平板法，也能用平板划线法
D. 刚果红可以与纤维素形成透明复合物，所以可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌
3. 以下是以泡菜坛为容器制作泡菜时的4个处理：①沸盐水冷却后再倒入坛中；②盖好坛盖后，向坛盖边沿的水槽中注满水；③盐水需要浸没全部菜料；④检测泡菜中亚硝酸盐的含量。下列说法错误的是（ ）
A. ①主要是为了防止菜料表面的乳酸杆菌被杀死
B. ②是为了使气体只能进入泡菜坛而不能排出
C. ③的主要目的是提供无氧环境
D. ④可检测到完整发酵过程中亚硝酸盐含量先升高后降低
4. 芘（C16H10）是一种高分子多环芳烃（PAH），普遍存在于污染的环境中，其分子结构是强致癌物质苯并芘的基础。研究人员从海洋湿地中分离了一株芘降解菌（DFA1），并研究其降解效率。已知含芘的培养基不透明，该培养基上形成的单菌落大小基本一致，下列叙述错误的是（ ）
A. 富集培养DFA1的培养基中应加入适量的芘和琼脂
B. DFA1降解芘能力的强弱可以用透明圈的大小来表示
C. 与显微镜直接计数法相比，稀释涂布平板法更适合统计活菌数
D. 应选择菌落数在30~300之间的平板对DFA1菌落计数
5. 花椰菜（2n=18）种植时容易遭受病菌侵害形成病斑，紫罗兰（2n=14）具有一定的抗病性。科研人员利用植物体细胞杂交技术培育具有抗病性状的花椰菜新品种如图1所示。通过蛋白质电泳技术分析了亲本及待测植株中某些特异性蛋白，结果图2所示。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 图1培育杂种植株所用的技术体现了植物细胞全能性和细胞膜流动性原理
B. 图1过程①是在无菌水中进行，过程②是在固体培养基中进行
C. 图2中属于杂种植株的是4和5，1可能是花椰菜
D. 病菌悬浮液均匀喷施于杂种植株叶片上，一段时间后，测定病斑面积占叶片总面积的百分比，可筛选抗病性强的杂种植株
6. 辣椒的辣椒素是食品调味料的重要成分之一，辣椒素可通过下图途径获得，下列叙述正确的是（ ）
A. ①过程需对外植体进行灭菌以防止后续培养过程中杂菌污染，且有利于获得脱毒苗
B. 图中所示愈伤组织是未分化的有固定形态的薄壁组织团块，具备较强的分裂分化能力
C. 若在细胞分离过程中使用盐酸进行解离，则植物细胞继续增殖前需再生细胞壁
D. 在脱分化过程中一般不需要光照，在再分化过程中光照可诱导植物形态建成
7. 中药藿香长期种植会出现种质退化、易感染病虫害等问题。为解决这些问题，研究者对组织培养过程中不同阶段的藿香进行了辐射处理（如图），以期获得性状优良的突变株。下列叙述正确的是（ ）
A 组织培养过程中细胞分裂旺盛，辐射处理易发生定向突变
B. 过程①在接种前，外植体常用无水乙醇和次氯酸钠溶液消毒
C. ②③④过程添加的植物激素种类、浓度和比例均不相同
D. 筛选出目标突变株后可利用植物组织培养技术生产药用成分
8. 为了检测药物X、Y和Z的抗癌效果，采用细胞培养板添加溶于DMSO溶剂的三种药物培养肺癌细胞，培养过程及结果如图所示。下列说法正确的是（ ）
A. 细胞培养液中通常需要加入一定量的血清和抗生素，防止病毒污染
B. 对照组中应加入等体积的生理盐水在CO2培养箱中培养肺癌细胞
C. 起始肺癌细胞数量应保持一致，计数时应用胃蛋白酶处理贴壁细胞
D. 根据实验结果，药物X的抗癌效果比Y好，药物Z没有抗癌作用
9. 华蟾素注射液是我国经典抗肿瘤药物，研究人员为探寻华蟾素注射液抗肝癌HepG-2细胞的作用机理，用华蟾素注射液和肝癌HepG-2细胞进行了一系列实验，结果如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A. 为防止细胞培养过程发生污染，培养液中要加入抗生素
B. 每隔一段时间需更换1次培养液，目是防止代谢物积累对细胞自身造成危害
C. 据图甲可知，华蟾素能有效地抑制肝癌HepG-2细胞增殖，且只与浓度呈正相关
D. 图乙的结果进一步表明，华蟾素的作用机理可能是抑制肝癌HepG-2细胞的DNA分子复制
10. 2017年，我国科学家首次培育了体细胞克隆猴，这一成果在科学界引起了轰动。培育克隆猴的流程图如图所示。下列说法正确的是（ ）
A. 体细胞克隆猴的线粒体DNA都来自去核的卵母细胞
B. 体细胞克隆猴的培育成功体现了动物体细胞的全能性
C. 组蛋白的甲基化水平降低和乙酰化水平升高可提高重构胚的发育率
D. 图中采集的卵母细胞应在获能液中培养至减数分裂Ⅱ中期（ＭⅡ期）
11. 2022年3月，中科院宣布了一项重量级世界首创研究，将人的多能干细胞转化为全能性的8细胞期胚胎样细胞（8CLC），即相当于受精卵发育3天状态的全能干细胞。该研究成果可使个体化器官再生成为现实。下列叙述错误的是（ ）
A. 8CLC与胚胎卵裂期细胞发育状态相似，体外培养发育至囊胚期开始分化
B. 上述转化过程仅发生了细胞分化，但未表现出动物细胞的全能性
C. 8CLC能够分裂分化形成将来发育为胎盘和胎膜的滋养层细胞
D. 细胞具有全能性的根本原因是含有个体发育的全部或全套基因
12. 某实验室通过提高小鼠胚胎干细胞pSTAT3基因的表达水平，体外制备出桑葚胚样全潜能细胞。该细胞在分子水平及发育潜能上均具有自然胚胎桑葚期细胞特性，并在体外成功模拟了小鼠胚胎发育至原肠胚阶段。根据该研究，下列叙述错误的是（ ）
注：pSTAT3是调控胚胎发育的关键基因
A. 桑葚胚样细胞可诱导发育至囊胚期
B. 诱导桑葚胚样细胞时，基因的碱基序列和表达的情况都发生改变
C. 囊胚期细胞重置至桑葚样细胞的过程类似于脱分化
D. 据图推测，桑葚胚发育成囊胚的过程中，pSTAT3的表达下降
13. 通过生物技术与工程可以按照人们预先设计的生物蓝图改造或重新创造设计细胞的遗传物质，培育出新品种，以工业规模制造产品。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 在植物体细胞杂交中，可采用质壁分离实验检测制备的原生质体的活性情况
B. 在生产单克隆抗体的过程中，获得的杂交瘤细胞能产生多种针对同一抗原的抗体
C. 利用动物体细胞核移植的方法得到克隆动物是培育新物种的一种方式
D. 将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组生产低乳糖牛奶，涉及基因工程、胚胎工程技术
14. 下列关于生物工程和技术的表述正确的是（ ）
A. 杂交瘤细胞制备过程中，可用减毒的病毒诱导细胞融合
B. 胚胎移植中，供体和受体相当于双亲中的父本和母本
C. PCR的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定，需要加指示剂且要在紫外灯下观察
D. 用PCR技术扩增目的基因时，为保证准确复制需要提前知道基因的全部序列
15. CBF基因控制合成的转录因子能够特异性结合抗冻基因的启动子区，从而激活抗冻基因的表达，以提高植物的抗寒性。现需要将CBF基因与抗冻基因表达载体连接后导入植物细胞，已知Klenw酶具有DNA聚合酶活性，可以将黏性末端补平。CBF基因和抗冻基因表达载体上的酶切位点以及相关限制酶识别序列及切割位点如图所示，则在载体构建过程中需要的酶的种类至少有（ ）
A. 4种B. 5种C. 6种D. 7种
二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。每小题有一个或多个选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。
16. 小米具有丰富的营养价值，某工厂的技术人员欲利用乳酸菌和酵母菌进行发酵，开发一款特殊风味的饮品。下图为不同温度及不同乳酸菌与酵母菌比例下发酵实验测得的相关结果。下列叙述正确的是（ ）
A. 通过图1测得的酒精含量变化，可推测发酵过程中酵母菌的种群数量先升高后降低
B. 将发酵温度控制在34℃可缩短生产周期，乳酸菌和酵母菌在该温度繁殖速度均较快
C. 生产上可将乳酸菌和酵母菌按照2∶1比例接种，可溶性固形物含量较低、口感较好
D. 两种菌的细胞结构有较大差异，代谢类型也不同，发酵过程中需持续通入无菌空气
17. 苏云金杆菌是杀灭玉米螟的重要生物，灭蚊球孢菌具有杀灭蚊子的效能，某人将这两种菌的原生质体融合获得既能杀蚊又能杀螟的新菌株，过程见下图。微生物原生质体的获得等过程和植物的类似。下列叙述错误的是（ ）
A. ①试管中加入PEG目的是诱导A、B原生质体融合及细胞壁再生
B. 图中过程与植物体细胞杂交过程相比，去壁方法、诱导融合的方法、所依据的原理均完全相同
C. 离心洗涤后向培养液中加入的酶可能是溶菌酶，目的是溶解细菌的细胞壁以获得原生质体
D. 图中的甲实验和乙实验是指灭蚊实验和杀灭玉米螟实验，获得的融合株染色体数目加倍
18. 中国科学院团队在猪体内培育人源中期肾脏，人源细胞高达70%，验证动物体内再造人体器官可行性。该过程通过构建的高分化潜能、强增殖及抗凋亡能力的多能干细胞移植到肾脏缺陷猪模型中，最终成功在嵌合体猪体内再生了人源中肾（如图所示）。下列说法错误的是（ ）
A. 过程①中，需提高MYCN和BCL2的表达量
B. 过程②需要将抗凋亡的人源iPS细胞植入囊胚并放在充满CO2的培养箱中培养
C. 移植后胚胎的发育受母体激素影响，但不会影响母体激素分泌
D. 最终获得的嵌合体猪各体细胞的基因型一般不相同
19. 为了制备鹅细小病毒VP2蛋白特异性单克隆抗体，科研人员构建了含有融合基因（VP2基因与一段引导序列NES）的大肠杆菌表达载体，受体细胞经过诱导后能表达VP2蛋白并将其分泌到细胞外。利用纯化的VP2蛋白兔疫小鼠，采用杂交瘤技术制备了3株可稳定分泌VP2蛋白的单克隆抗体（VP2单抗）的杂交瘤细胞株。下列叙述错误的是（ ）
A. 引导序列NES的作用可能是介导VP2蛋白分泌到细胞外
B. VP2单抗的制备利用了重组DNA技术、细胞融合等技术
C. 体外培养该免疫小鼠的单个B淋巴细胞也能得到VP2单抗
D. VP2单抗可用于鹅细小病毒病的诊断和治疗
20. 为了获得抗蚜虫棉花新品种，研究人员将雪花莲凝集素基因（GNA）和尾穗苋凝集素基因（ACA）与载体（pBI121）结合，然后导入棉花细胞。下列操作与实验目的相符的是（ ）
A. 用限制酶BsaB I和DNA连接酶处理两种基因可获得GNA—ACA融合基因
B. 与只用Kpn I相比，Kpn I和Xh I处理融合基因和载体可保证基因转录方向正确
C. 将棉花细胞接种在含氨苄青霉素的培养基上可筛选出转基因细胞
D. 用PCR技术可检测GNA和ACA基因是否导入棉花细胞中
三、非选择题：本题共5小题，共55分。
21. 科研人员按照如图所示流程从盐湖土壤中分离筛选出了一株高产α-淀粉酶的耐盐性菌株NWU-8，并通过He-Ne激光照射提高该菌株产α-淀粉酶的能力，实验中需要a、b两种培养基，a的组分为牛肉膏、蛋白胨、高浓度NaCl、水，相比培养基a，培养基b的组分增加了可溶性淀粉。回答下列问题。
（1）配制好的培养基通常采用的灭菌方法是____________。实验小组为获得耐盐纯培养物，使用的培养基应是____________（选填“普通培养基”或“选择培养基”），使用的接种方法是____________。
（2）为获得纯培养物的耐盐基因X，实验小组应用纯培养物提取了DNA，检测DNA所用的试剂及原理是____________。获得PCR产物后，用琼脂糖凝胶电泳对PCR产物进行鉴定，影响DNA分子迁移速率的主要因素有______________（答出两点即可）。
（3）要在培养基上形成菌落，a、b培养基中均还应加入____________，挑取a培养基平板上的菌落进一步划线纯化时，下列图示中正确的操作示意图为____________。
（4）培养基a的作用是_____________，b培养基平板滴加碘液后，部分菌落周围出现透明圈，根据菌落直径和透明圈大小，____________的菌落初步判断为产酶能力较高的菌株。
（5）He-Ne激光照射诱导后的菌种需要对耐盐性和产酶能力等进行检测和筛选，因为He-Ne激光照射引起的变异具有不定向的特征。最后获得的纯净高产菌种进行液体摇瓶发酵，摇瓶培养的目的是_____________，发酵过程中可通过____________法检测活菌的数量。
22. 苜蓿是广泛应用的豆科牧草，其叶片中的水溶性蛋白质会导致反刍动物患臌胀病。百脉根的叶片富含单宁，能防止反刍动物臓胀病的发生。科研人员用紫花苜蓿和百脉根培育抗臌胀病的新型牧草，育种流程如图所示。已知R-6G 可阻止线粒体的功能，IOA能抑制细胞分裂。回答下列问题：
（1）为获得原生质体，常用__________处理植物细胞以去除细胞壁。获得的两种原生质体要在_________(填“清水”或“等渗溶液”)中进行融合。
（2）获得的原生质体分别用IOA 和R 6G 处理后进行融合，培养后，只有__________细胞才能生长出愈伤组织，原因是__________。
（3）过程①可用_________法诱导植物原生质体融合。过程②③使用的培养基的区别主要是植物激素中__________不同。
（4）由杂种细胞团经过过程②③的培育得到幼苗，依据的生物学原理是__________。图示培育新型牧草所运用的生物技术的主要优点是__________。
23. 2018年1月25日报道，两只克隆猕猴“中中”和“华华”在中国诞生，突破了现有技术无法克隆灵长类动物的世界难题，将为阿尔茨海默症、自闭症等脑疾病带来前所未有的光明前景，图为过程流程图，请回答下列有关问题：
（1）动物细胞培养一般分为_____________和传代培养两个阶段过程。在前一阶段，贴壁的细胞会出现_____________象，所以要进行传代培养。
（2）①表示去除细胞核，该过程一般要在卵母细胞培养至______________时期再进行，目前使用的去核方法是_____________。②表示______________。
（3）回答下列关于利用单克隆抗体技术制备单克隆抗体的相关问题：
①B淋巴细胞不能直接用于抗体的大规模生产，原因是_____________，将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞混合；通过______________（答三种）等方式诱导细胞融合，可以获得杂交瘤细胞。
②体外培养杂交瘤细胞时，除了无菌、营养条件、适宜的温度和pH，还需要保证气体环境，其中需要的气体主要有O2和CO2，培养箱中CO2浓度为5%其作用是_____________。
（4）常见的病毒疫苗有灭活疫苗、蛋白疫苗和重组疫苗等。已知某种病毒的特异性蛋白S（具有抗原性）的编码序列（目的基因）。为了制备蛋白疫苗，可以通过基因工程技术获得大量蛋白S。该基因工程的基本操作流程是_____________。
24. 青岛业大学科研人员从一只成年雌性森林猫皮肤组织中分离培养得到成纤维细胞，将该细胞的细胞核移入中华田园猫卵子，经人工激活后获得多枚体细胞克隆胚胎。将克隆胚胎移植到受体母猫中，经过62天孕育，成功得到一只森林猫体细胞克隆后代。请回答下列相关问题：
（1）从成年雌性森林猫皮肤组织中分离成纤维细胞，需在皮肤组织中添加_____________酶。作为细胞核受体的卵子应是_______________，去核的“核”实质上是_______________，用显微注射法将供体细胞核导入该细胞后形成重组细胞，由此培育成的森林猫体细胞克隆后代的性别是______________。哺乳动物体细胞核移植的难度大于胚胎细胞核移植，原因是_____________。
（2）猫泛白细胞减少症也叫猫瘟热，该病是由猫泛白细胞减少症病毒引起的猫（特别是幼龄猫）的一种发热性高度接触性、致死性传染病，而抗猫泛白细胞减少症病毒单克隆抗体的应用会大大降低该病毒引起的死亡率。下图为用小鼠制备该单克隆抗体的简图，若甲细胞为小鼠骨髓瘤细胞，则乙细胞为_______________。与植物细胞融合相比，图示甲、乙细胞融合的过程中特有的诱导剂是_______________。①②筛选的目的分别是_____________。
25. 下图表示获得抗除草剂转基因玉米的技术路线，其中含有内含子的报告基因只能在真核生物中正确表达，其产物能使某种能被细胞吸收的无色物质K呈现蓝色。回答下列问题：
（1）基因工程的核心是____________，该步骤中通常选用两种不同的限制酶，其优点是___________。
（2）图示过程中选用农杆菌，是因其Ti质粒上有一段包含报告基因的T-DNA序列，该片段能进入植物细胞并_____________，从而使其携带的目的基因的遗传遵循孟德尔遗传定律。
（3）农杆菌转化愈伤组织的过程中，常残留在愈伤组织表面，可能会导致未转化的愈伤组织在含除草剂的培养基中生长。因此，进行筛选2时，应在培养基中添加____________，并挑选___________的愈伤组织细胞，用于植物组织培养。
（4）通过PCR技术扩增G基因，需要以____________为原料，扩增6次需要两种引物各____________个。为了将获得的C基因准确连接至质粒上，需要在两种引物的________（填“5′”或“3′”）端分别添加相应限制酶的识别序列；同时G基因必须正确插入到____________和___________之间，其中后者是位于基因前端的片段，其作用是___________。
注意事项：
1．答题前，考生务必将自己的姓名、考生号等填写在答题卡和试卷指定位置。
2．回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。
3．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。
一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。每小题只有一个选项符合题目要求。
1. 关于传统发酵技术的叙述错误的是（ ）
A. 在制作果醋时，如果条件适宜，醋酸菌可将葡萄汁中的糖分解成乙酸
B. 发酵工程的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身
C. 泡菜的制作前期需要通入氧气，后期应严格保持无氧条件
D. 在啤酒生产中，使用基因工程改造的啤酒酵母，可以加速发酵过程，缩短生产周期
2. 下列关于微生物的选择、纯化及计数的表述正确的是（ ）
A. 平板涂布时涂布器使用前必须进行消毒
B. 平板划线法要求多次划线，稀释涂布平板法中菌液要充分地稀释
C. 对细菌进行计数能采用稀释涂布平板法，也能用平板划线法
D. 刚果红可以与纤维素形成透明复合物，所以可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌
3. 以下是以泡菜坛为容器制作泡菜时的4个处理：①沸盐水冷却后再倒入坛中；②盖好坛盖后，向坛盖边沿的水槽中注满水；③盐水需要浸没全部菜料；④检测泡菜中亚硝酸盐的含量。下列说法错误的是（ ）
A. ①主要是为了防止菜料表面的乳酸杆菌被杀死
B. ②是为了使气体只能进入泡菜坛而不能排出
C. ③的主要目的是提供无氧环境
D. ④可检测到完整发酵过程中亚硝酸盐含量先升高后降低
4. 芘（C16H10）是一种高分子多环芳烃（PAH），普遍存在于污染的环境中，其分子结构是强致癌物质苯并芘的基础。研究人员从海洋湿地中分离了一株芘降解菌（DFA1），并研究其降解效率。已知含芘的培养基不透明，该培养基上形成的单菌落大小基本一致，下列叙述错误的是（ ）
A. 富集培养DFA1的培养基中应加入适量的芘和琼脂
B. DFA1降解芘能力的强弱可以用透明圈的大小来表示
C. 与显微镜直接计数法相比，稀释涂布平板法更适合统计活菌数
D. 应选择菌落数在30~300之间的平板对DFA1菌落计数
5. 花椰菜（2n=18）种植时容易遭受病菌侵害形成病斑，紫罗兰（2n=14）具有一定的抗病性。科研人员利用植物体细胞杂交技术培育具有抗病性状的花椰菜新品种如图1所示。通过蛋白质电泳技术分析了亲本及待测植株中某些特异性蛋白，结果图2所示。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 图1培育杂种植株所用的技术体现了植物细胞全能性和细胞膜流动性原理
B. 图1过程①是在无菌水中进行，过程②是在固体培养基中进行
C. 图2中属于杂种植株的是4和5，1可能是花椰菜
D. 病菌悬浮液均匀喷施于杂种植株叶片上，一段时间后，测定病斑面积占叶片总面积的百分比，可筛选抗病性强的杂种植株
6. 辣椒的辣椒素是食品调味料的重要成分之一，辣椒素可通过下图途径获得，下列叙述正确的是（ ）
A. ①过程需对外植体进行灭菌以防止后续培养过程中杂菌污染，且有利于获得脱毒苗
B. 图中所示愈伤组织是未分化的有固定形态的薄壁组织团块，具备较强的分裂分化能力
C. 若在细胞分离过程中使用盐酸进行解离，则植物细胞继续增殖前需再生细胞壁
D. 在脱分化过程中一般不需要光照，在再分化过程中光照可诱导植物形态建成
7. 中药藿香长期种植会出现种质退化、易感染病虫害等问题。为解决这些问题，研究者对组织培养过程中不同阶段的藿香进行了辐射处理（如图），以期获得性状优良的突变株。下列叙述正确的是（ ）
A 组织培养过程中细胞分裂旺盛，辐射处理易发生定向突变
B. 过程①在接种前，外植体常用无水乙醇和次氯酸钠溶液消毒
C. ②③④过程添加的植物激素种类、浓度和比例均不相同
D. 筛选出目标突变株后可利用植物组织培养技术生产药用成分
8. 为了检测药物X、Y和Z的抗癌效果，采用细胞培养板添加溶于DMSO溶剂的三种药物培养肺癌细胞，培养过程及结果如图所示。下列说法正确的是（ ）
A. 细胞培养液中通常需要加入一定量的血清和抗生素，防止病毒污染
B. 对照组中应加入等体积的生理盐水在CO2培养箱中培养肺癌细胞
C. 起始肺癌细胞数量应保持一致，计数时应用胃蛋白酶处理贴壁细胞
D. 根据实验结果，药物X的抗癌效果比Y好，药物Z没有抗癌作用
9. 华蟾素注射液是我国经典抗肿瘤药物，研究人员为探寻华蟾素注射液抗肝癌HepG-2细胞的作用机理，用华蟾素注射液和肝癌HepG-2细胞进行了一系列实验，结果如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A. 为防止细胞培养过程发生污染，培养液中要加入抗生素
B. 每隔一段时间需更换1次培养液，目是防止代谢物积累对细胞自身造成危害
C. 据图甲可知，华蟾素能有效地抑制肝癌HepG-2细胞增殖，且只与浓度呈正相关
D. 图乙的结果进一步表明，华蟾素的作用机理可能是抑制肝癌HepG-2细胞的DNA分子复制
10. 2017年，我国科学家首次培育了体细胞克隆猴，这一成果在科学界引起了轰动。培育克隆猴的流程图如图所示。下列说法正确的是（ ）
A. 体细胞克隆猴的线粒体DNA都来自去核的卵母细胞
B. 体细胞克隆猴的培育成功体现了动物体细胞的全能性
C. 组蛋白的甲基化水平降低和乙酰化水平升高可提高重构胚的发育率
D. 图中采集的卵母细胞应在获能液中培养至减数分裂Ⅱ中期（ＭⅡ期）
11. 2022年3月，中科院宣布了一项重量级世界首创研究，将人的多能干细胞转化为全能性的8细胞期胚胎样细胞（8CLC），即相当于受精卵发育3天状态的全能干细胞。该研究成果可使个体化器官再生成为现实。下列叙述错误的是（ ）
A. 8CLC与胚胎卵裂期细胞发育状态相似，体外培养发育至囊胚期开始分化
B. 上述转化过程仅发生了细胞分化，但未表现出动物细胞的全能性
C. 8CLC能够分裂分化形成将来发育为胎盘和胎膜的滋养层细胞
D. 细胞具有全能性的根本原因是含有个体发育的全部或全套基因
12. 某实验室通过提高小鼠胚胎干细胞pSTAT3基因的表达水平，体外制备出桑葚胚样全潜能细胞。该细胞在分子水平及发育潜能上均具有自然胚胎桑葚期细胞特性，并在体外成功模拟了小鼠胚胎发育至原肠胚阶段。根据该研究，下列叙述错误的是（ ）
注：pSTAT3是调控胚胎发育的关键基因
A. 桑葚胚样细胞可诱导发育至囊胚期
B. 诱导桑葚胚样细胞时，基因的碱基序列和表达的情况都发生改变
C. 囊胚期细胞重置至桑葚样细胞的过程类似于脱分化
D. 据图推测，桑葚胚发育成囊胚的过程中，pSTAT3的表达下降
13. 通过生物技术与工程可以按照人们预先设计的生物蓝图改造或重新创造设计细胞的遗传物质，培育出新品种，以工业规模制造产品。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 在植物体细胞杂交中，可采用质壁分离实验检测制备的原生质体的活性情况
B. 在生产单克隆抗体的过程中，获得的杂交瘤细胞能产生多种针对同一抗原的抗体
C. 利用动物体细胞核移植的方法得到克隆动物是培育新物种的一种方式
D. 将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组生产低乳糖牛奶，涉及基因工程、胚胎工程技术
14. 下列关于生物工程和技术的表述正确的是（ ）
A. 杂交瘤细胞制备过程中，可用减毒的病毒诱导细胞融合
B. 胚胎移植中，供体和受体相当于双亲中的父本和母本
C. PCR的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定，需要加指示剂且要在紫外灯下观察
D. 用PCR技术扩增目的基因时，为保证准确复制需要提前知道基因的全部序列
15. CBF基因控制合成的转录因子能够特异性结合抗冻基因的启动子区，从而激活抗冻基因的表达，以提高植物的抗寒性。现需要将CBF基因与抗冻基因表达载体连接后导入植物细胞，已知Klenw酶具有DNA聚合酶活性，可以将黏性末端补平。CBF基因和抗冻基因表达载体上的酶切位点以及相关限制酶识别序列及切割位点如图所示，则在载体构建过程中需要的酶的种类至少有（ ）
A. 4种B. 5种C. 6种D. 7种
二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。每小题有一个或多个选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。
16. 小米具有丰富的营养价值，某工厂的技术人员欲利用乳酸菌和酵母菌进行发酵，开发一款特殊风味的饮品。下图为不同温度及不同乳酸菌与酵母菌比例下发酵实验测得的相关结果。下列叙述正确的是（ ）
A. 通过图1测得的酒精含量变化，可推测发酵过程中酵母菌的种群数量先升高后降低
B. 将发酵温度控制在34℃可缩短生产周期，乳酸菌和酵母菌在该温度繁殖速度均较快
C. 生产上可将乳酸菌和酵母菌按照2∶1比例接种，可溶性固形物含量较低、口感较好
D. 两种菌的细胞结构有较大差异，代谢类型也不同，发酵过程中需持续通入无菌空气
17. 苏云金杆菌是杀灭玉米螟的重要生物，灭蚊球孢菌具有杀灭蚊子的效能，某人将这两种菌的原生质体融合获得既能杀蚊又能杀螟的新菌株，过程见下图。微生物原生质体的获得等过程和植物的类似。下列叙述错误的是（ ）
A. ①试管中加入PEG目的是诱导A、B原生质体融合及细胞壁再生
B. 图中过程与植物体细胞杂交过程相比，去壁方法、诱导融合的方法、所依据的原理均完全相同
C. 离心洗涤后向培养液中加入的酶可能是溶菌酶，目的是溶解细菌的细胞壁以获得原生质体
D. 图中的甲实验和乙实验是指灭蚊实验和杀灭玉米螟实验，获得的融合株染色体数目加倍
18. 中国科学院团队在猪体内培育人源中期肾脏，人源细胞高达70%，验证动物体内再造人体器官可行性。该过程通过构建的高分化潜能、强增殖及抗凋亡能力的多能干细胞移植到肾脏缺陷猪模型中，最终成功在嵌合体猪体内再生了人源中肾（如图所示）。下列说法错误的是（ ）
A. 过程①中，需提高MYCN和BCL2的表达量
B. 过程②需要将抗凋亡的人源iPS细胞植入囊胚并放在充满CO2的培养箱中培养
C. 移植后胚胎的发育受母体激素影响，但不会影响母体激素分泌
D. 最终获得的嵌合体猪各体细胞的基因型一般不相同
19. 为了制备鹅细小病毒VP2蛋白特异性单克隆抗体，科研人员构建了含有融合基因（VP2基因与一段引导序列NES）的大肠杆菌表达载体，受体细胞经过诱导后能表达VP2蛋白并将其分泌到细胞外。利用纯化的VP2蛋白兔疫小鼠，采用杂交瘤技术制备了3株可稳定分泌VP2蛋白的单克隆抗体（VP2单抗）的杂交瘤细胞株。下列叙述错误的是（ ）
A. 引导序列NES的作用可能是介导VP2蛋白分泌到细胞外
B. VP2单抗的制备利用了重组DNA技术、细胞融合等技术
C. 体外培养该免疫小鼠的单个B淋巴细胞也能得到VP2单抗
D. VP2单抗可用于鹅细小病毒病的诊断和治疗
20. 为了获得抗蚜虫棉花新品种，研究人员将雪花莲凝集素基因（GNA）和尾穗苋凝集素基因（ACA）与载体（pBI121）结合，然后导入棉花细胞。下列操作与实验目的相符的是（ ）
A. 用限制酶BsaB I和DNA连接酶处理两种基因可获得GNA—ACA融合基因
B. 与只用Kpn I相比，Kpn I和Xh I处理融合基因和载体可保证基因转录方向正确
C. 将棉花细胞接种在含氨苄青霉素的培养基上可筛选出转基因细胞
D. 用PCR技术可检测GNA和ACA基因是否导入棉花细胞中
三、非选择题：本题共5小题，共55分。
21. 科研人员按照如图所示流程从盐湖土壤中分离筛选出了一株高产α-淀粉酶的耐盐性菌株NWU-8，并通过He-Ne激光照射提高该菌株产α-淀粉酶的能力，实验中需要a、b两种培养基，a的组分为牛肉膏、蛋白胨、高浓度NaCl、水，相比培养基a，培养基b的组分增加了可溶性淀粉。回答下列问题。
（1）配制好的培养基通常采用的灭菌方法是____________。实验小组为获得耐盐纯培养物，使用的培养基应是____________（选填“普通培养基”或“选择培养基”），使用的接种方法是____________。
（2）为获得纯培养物的耐盐基因X，实验小组应用纯培养物提取了DNA，检测DNA所用的试剂及原理是____________。获得PCR产物后，用琼脂糖凝胶电泳对PCR产物进行鉴定，影响DNA分子迁移速率的主要因素有______________（答出两点即可）。
（3）要在培养基上形成菌落，a、b培养基中均还应加入____________，挑取a培养基平板上的菌落进一步划线纯化时，下列图示中正确的操作示意图为____________。
（4）培养基a的作用是_____________，b培养基平板滴加碘液后，部分菌落周围出现透明圈，根据菌落直径和透明圈大小，____________的菌落初步判断为产酶能力较高的菌株。
（5）He-Ne激光照射诱导后的菌种需要对耐盐性和产酶能力等进行检测和筛选，因为He-Ne激光照射引起的变异具有不定向的特征。最后获得的纯净高产菌种进行液体摇瓶发酵，摇瓶培养的目的是_____________，发酵过程中可通过____________法检测活菌的数量。
22. 苜蓿是广泛应用的豆科牧草，其叶片中的水溶性蛋白质会导致反刍动物患臌胀病。百脉根的叶片富含单宁，能防止反刍动物臓胀病的发生。科研人员用紫花苜蓿和百脉根培育抗臌胀病的新型牧草，育种流程如图所示。已知R-6G 可阻止线粒体的功能，IOA能抑制细胞分裂。回答下列问题：
（1）为获得原生质体，常用__________处理植物细胞以去除细胞壁。获得的两种原生质体要在_________(填“清水”或“等渗溶液”)中进行融合。
（2）获得的原生质体分别用IOA 和R 6G 处理后进行融合，培养后，只有__________细胞才能生长出愈伤组织，原因是__________。
（3）过程①可用_________法诱导植物原生质体融合。过程②③使用的培养基的区别主要是植物激素中__________不同。
（4）由杂种细胞团经过过程②③的培育得到幼苗，依据的生物学原理是__________。图示培育新型牧草所运用的生物技术的主要优点是__________。
23. 2018年1月25日报道，两只克隆猕猴“中中”和“华华”在中国诞生，突破了现有技术无法克隆灵长类动物的世界难题，将为阿尔茨海默症、自闭症等脑疾病带来前所未有的光明前景，图为过程流程图，请回答下列有关问题：
（1）动物细胞培养一般分为_____________和传代培养两个阶段过程。在前一阶段，贴壁的细胞会出现_____________象，所以要进行传代培养。
（2）①表示去除细胞核，该过程一般要在卵母细胞培养至______________时期再进行，目前使用的去核方法是_____________。②表示______________。
（3）回答下列关于利用单克隆抗体技术制备单克隆抗体的相关问题：
①B淋巴细胞不能直接用于抗体的大规模生产，原因是_____________，将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞混合；通过______________（答三种）等方式诱导细胞融合，可以获得杂交瘤细胞。
②体外培养杂交瘤细胞时，除了无菌、营养条件、适宜的温度和pH，还需要保证气体环境，其中需要的气体主要有O2和CO2，培养箱中CO2浓度为5%其作用是_____________。
（4）常见的病毒疫苗有灭活疫苗、蛋白疫苗和重组疫苗等。已知某种病毒的特异性蛋白S（具有抗原性）的编码序列（目的基因）。为了制备蛋白疫苗，可以通过基因工程技术获得大量蛋白S。该基因工程的基本操作流程是_____________。
24. 青岛业大学科研人员从一只成年雌性森林猫皮肤组织中分离培养得到成纤维细胞，将该细胞的细胞核移入中华田园猫卵子，经人工激活后获得多枚体细胞克隆胚胎。将克隆胚胎移植到受体母猫中，经过62天孕育，成功得到一只森林猫体细胞克隆后代。请回答下列相关问题：
（1）从成年雌性森林猫皮肤组织中分离成纤维细胞，需在皮肤组织中添加_____________酶。作为细胞核受体的卵子应是_______________，去核的“核”实质上是_______________，用显微注射法将供体细胞核导入该细胞后形成重组细胞，由此培育成的森林猫体细胞克隆后代的性别是______________。哺乳动物体细胞核移植的难度大于胚胎细胞核移植，原因是_____________。
（2）猫泛白细胞减少症也叫猫瘟热，该病是由猫泛白细胞减少症病毒引起的猫（特别是幼龄猫）的一种发热性高度接触性、致死性传染病，而抗猫泛白细胞减少症病毒单克隆抗体的应用会大大降低该病毒引起的死亡率。下图为用小鼠制备该单克隆抗体的简图，若甲细胞为小鼠骨髓瘤细胞，则乙细胞为_______________。与植物细胞融合相比，图示甲、乙细胞融合的过程中特有的诱导剂是_______________。①②筛选的目的分别是_____________。
25. 下图表示获得抗除草剂转基因玉米的技术路线，其中含有内含子的报告基因只能在真核生物中正确表达，其产物能使某种能被细胞吸收的无色物质K呈现蓝色。回答下列问题：
（1）基因工程的核心是____________，该步骤中通常选用两种不同的限制酶，其优点是___________。
（2）图示过程中选用农杆菌，是因其Ti质粒上有一段包含报告基因的T-DNA序列，该片段能进入植物细胞并_____________，从而使其携带的目的基因的遗传遵循孟德尔遗传定律。
（3）农杆菌转化愈伤组织的过程中，常残留在愈伤组织表面，可能会导致未转化的愈伤组织在含除草剂的培养基中生长。因此，进行筛选2时，应在培养基中添加____________，并挑选___________的愈伤组织细胞，用于植物组织培养。
（4）通过PCR技术扩增G基因，需要以____________为原料，扩增6次需要两种引物各____________个。为了将获得的C基因准确连接至质粒上，需要在两种引物的________（填“5′”或“3′”）端分别添加相应限制酶的识别序列；同时G基因必须正确插入到____________和___________之间，其中后者是位于基因前端的片段，其作用是___________。
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