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内蒙古自治区赤峰市松山区赤峰新城红旗中学2023-2024学年高二下学期4月月考生物试题（原卷版+解析版）
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1. 我国早在9000年前就可以运用发酵技术获得产品，为生活增添丰富的色彩。下列说法正确的是（ ）
A. 制作果酒时，可通过控制发酵的温度、发酵液的pH等措施降低乳酸菌使果酒变质的概率
B. 利用酵母菌酒精发酵进行传统酿酒过程中，需一直保持无氧的条件
C. 泡菜坛装八成满可以防止发酵过程中酵母菌、乳酸菌等产生的CO2使发酵液溢出
D. 腐乳鲜美的味道主要由曲霉分解蛋白质产生的小分子肽和氨基酸引起
【答案】A
【解析】
【分析】1、制作泡菜的注意事项：（1）盐水煮沸，一是为了消除杂菌，二是为了除去水中的氧气，冷却再用是为了避免高温杀死坛中蔬菜表面的乳酸菌；（2）加水密封是为了阻止外面的空气再进入泡菜坛，为乳酸菌发酵制作泡菜创造无氧的环境条件。若此过程中进入大量氧气，可能导致乳酸菌死亡而好氧菌大量繁殖，使菜腐烂；（3）菜料只能装八成满的原因：初期会有气体产生；要往坛中加盐水没过菜料，所以不能加菜料太满。
2、制作果酒和果醋的注意事项： （1）发酵瓶和榨计机都要用体积分数为70%的酒精消毒；（2）葡萄要先冲洗再去枝梗，以免去枝梗时葡萄破碎，增加被杂菌污染的风险；（3）瓶中留有1/3空间为酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖提供氧气。果酒发酵过程中会产生大量CO2导致瓶内气压升高，需拧松瓶盖放气，但不要完全打开，否则可能会被杂菌污染。
【详解】A、制作果酒时，果酒中除了酵母菌，还有乳酸菌、醋酸菌等微生物；乳酸菌可能分解果酒中的糖、甘油、酒石酸等，从而使果酒变质；可通过控制发酵的温度、发酵液的pH等措施降低乳酸菌使果酒变质的概率，A正确；
B、利用酵母菌酿制果酒时，初始阶段可往装置中通入一定量空气，使酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖，后期再密封发酵使酵母菌进行无氧呼吸，产生酒精，B错误；
C、泡菜发酵时，发酵初期酵母菌等的活动会产生气体，使体积膨胀，故泡菜坛装八成满可防止发酵液溢出，乳酸菌只进行无氧呼吸（乳酸发酵）不产生二氧化碳，C错误；
D、多种微生物参与了豆腐的发酵，如酵母、曲霉和毛霉 等，其中起主要作用的是毛霉；腐乳发酵时，发挥主要作用是毛霉，毛霉通过分泌脂肪酶和蛋白酶（不是胰蛋白酶）将豆腐块中的大分子物质分解为易于被人体吸收的小分子物质，有些氨基酸具有特殊的气味而表现出腐乳的风味，D错误；
故选A。
2. 为了探究果酒发酵的最适温度，某研究性学习小组将制作的果汁加入果酒发酵罐中，向发酵罐中加入等量酵母菌，并分别设置不同温度，再将发酵罐与传感器相连，实时检测酒精含量变化，结果如图所示。相关叙述错误的是（ ）
A. 该实验中 28℃组是实验组，其余三组是对照组
B. 实验结果表明果酒发酵的最适温度是28℃左右
C. 将果汁装入发酵罐时不能装满，要留有一定的空间
D. 酒精产生量的多少与通气条件密切相关
【答案】A
【解析】
【分析】酵母菌是兼性厌氧微生物，在氧气充足的条件下进行有氧呼吸产生二氧化碳和水，释放大量能量，在无氧条件下进行无氧呼吸产生二氧化碳和酒精。
【详解】A、根据题干信息无法判断28℃组是实验组，A错误；
B、根据图示信息可知，28℃条件下气态酒精浓度比较高，表明果酒发酵的最适温度是28℃左右，B正确；
C、将果汁装入发酵罐时不能装满，要留有一定的空间，C正确；
D、酵母菌为兼性厌氧微生物，无氧呼吸产生酒精，所以酒精产生量的多少与通气条件密切相关，D正确。
故选A。
3. 古徽州有许多美食深受人们喜爱，如徽州毛豆腐、灵山酒酿、臭鳜鱼、徽州臭豆腐等。制作臭豆腐时需要将豆腐浸入含有乳酸菌和芽孢杆菌等微生物的卤汁中发酵，相关叙述正确的是（ ）
A. 卤汁中的乳酸菌和芽孢杆菌相互独立，没有种间关系
B. 制作臭豆腐时，豆腐相当于微生物生长的培养基
C. 微生物产生并分泌出单细胞蛋白，可以提取出来用作动物饲料
D. 乳酸菌发酵产生了乳酸和二氧化碳，需定期排气
【答案】B
【解析】
【分析】腐乳的制作原理：参与豆腐发酵的微生物有青霉、酵母、曲霉、毛霉等多种，其中起主要作用的是毛霉，其代谢类型为异养需氧型，适宜温度为15°C~18°C；毛霉能够产生蛋白酶和脂肪酶，将蛋白质和脂肪分别水解成小分子的肽和氨基酸、甘油和脂肪酸。
【详解】A、乳酸菌和芽孢杆菌生活在同一环境下会竞争营养物质和空间等，故卤汁中的乳酸菌和芽孢杆菌存在竞争关系，A错误；
B、制作臭豆腐时，豆腐相当于微生物生长的培养基，能够给微生物提供其生长所需的营养，B正确；
C、单细胞蛋白是微生物菌体，不是由微生物分泌的，C错误；
D、乳酸菌发酵产物是乳酸，不会产生二氧化碳，D错误。
故选B。
4. 工业上利用谷氨酸棒状杆菌生产谷氨酸。关于谷氨酸的工厂化生产，下列说法错误的是（ ）
A. 与传统发酵技术相比，工厂化生产谷氨酸所用的大多是单一菌种
B. 发酵结束后，采用过滤、沉淀等方法进行分离和干燥，即可得到产品
C. 发酵过程中，.中性或弱碱性的条件有利于谷氨酸的积累
D. 发酵罐内的发酵是工厂化生产谷氨酸的中心环节，需严格控制发酵条件
【答案】B
【解析】
【分析】发酵工程是指利用微生物的特定功能，通过现代工程技术，规模化生产对人类有用的产品，主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身。发酵工程一般包括菌种的选育，扩大培养，培养基的配置、火菌，接种，发酵、产品的分离、提纯等方面。发酵过程一般来说都是在常温常压下进行，条件温和、反应安全，原料简单、污染小，反应专一性强，因而可以得到较为专一的产物。
【详解】A、与传统发酵技术相比，工厂化生产谷氨酸所用的大多经过筛选获得的优质菌种，一般是单一菌种，获得的产物产量高更纯，A正确；
B、如果发酵产品是微生物细胞本身，可在发酵结束之后，采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥，即可得到产品，如果产品是代谢物，可根据产物的性质采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品，谷氨酸属于代谢物，B错误；
C、谷氨酸棒状杆菌是谷氨酸发酵的主要菌种，属于细菌，发酵过程中，中性或弱碱性的条件有利于谷氨酸棒状杆菌的繁殖，有利于谷氨酸的积累，C正确；
D、发酵条件能影响产品的品质和产量，发酵罐内的发酵是工厂化生产谷氨酸的中心环节，需严格控制发酵条件，D正确。
故选B。
5. 微生物流行性和爆发性病害相继发生，会严重制约海水养殖业的健康发展。某种细菌是引起海参幼体烂边，溃烂病等病症的主要病原体。为选出最佳杀菌效果的抗生素，研究者将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片a、b、c、d置于布满该种细菌的平板上，培养一段时间后，四种抗生素的滤纸片周围均出现抑菌圈，结果如图所示。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 为提高实验结果的可靠性，可增加一组清水处理的滤纸片
B. 该种致病细菌对这四种抗生素均具有一定的敏感性
C. 该实验表明，临床上疗效最佳的是抗生素D
D. b周围菌落出现的原因有可能是杂菌污染，也有可能是抗生素诱发致病细菌产生了抗性突变
【答案】B
【解析】
【分析】抑菌圈越大，说明该菌对此药敏感性越大，反之越小，若无抑菌圈，则说明该菌对此药具有耐药性。
【详解】A、为提高实验结果的可靠性，可增加一组无菌水处理的滤纸片，以排除滤纸片对实验结果的影响，A错误；
B、由图可知．四种抗生素的滤纸片周围均出现抑菌圈，说明该种致病细菌对这四种抗生素均具有敏感性，B正确；
C、由于含抗生素A的滤纸片a周围抑菌圈最大，因此临床上疗效最佳的是抗生素A，C错误；
D、滤纸片b周围抑菌圈中出现菌落，可能是该菌发生了基因突变，对抗生素B产生抗性，是抗生素B筛选的结果，抗生素不是诱变因素不会诱发基因突变，D错误。
故选B。
6. 下列关于培养基的配制及其应用的说法中，正确的是（ ）
A. 同一种物质可能既作为碳源又作为氮源，所有碳源都能提供能量
B. 是否含水是区别固体培养基和液体培养基的主要依据
C. 培养硝化细菌时，培养基中需要加氮源，无需加入碳源
D. 分离分解尿素的细菌时，尿素是培养基中唯一的碳源和氮源
【答案】C
【解析】
【分析】1、培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物种和氧气的要求。
2、琼脂是一种从红藻中提取的多糖，常作为固体培养基中的凝固剂。
3、选择培养基的概念是：在微生物学中，将允许特定微生物种类生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基，由于分解尿素的细菌都能合成脲酶，脲酶能催化尿素水解，因此在以尿素为唯一氮源的培养基上，分解尿素的菌能以尿素为氮源生长，而不能分解尿素的菌因缺乏氮源而无法生长。
【详解】A、同一种物质可能既作为碳源又作为氮源，如：牛肉膏和蛋白胨，但并不是所有碳源都能提供能量，如：自养型微生物的碳源是二氧化碳，二氧化碳不能提供能量，A错误；
B、琼脂是常用的凝固剂，是否含琼脂是区别固体培养基与液体培养基的主要依据，B错误；
C、培养硝化细菌时，需先配制合适的培养基。应选用以铵盐为唯一氮源的培养基进行培养，由于硝化细菌是自养型细菌，能制造有机物，故该培养基中不需要加碳源，C正确；
D、要获得分解尿素的细菌，需在以尿素为唯一的氮源培养基中培养，碳源主要是糖类，D错误。
故选C。
7. 细菌气溶胶是由悬浮于大气或附着于颗粒物表面的细菌形成的。利用空气微生物采样器对某市人员密集型公共场所采样并检测细菌气溶胶的浓度（菌落数/m³）。下列叙述错误的是（ ）
A. 采样前需对空气微生物采样器进行无菌处理
B. 细菌气溶胶样品恒温培养时需将平板倒置
C. 同一稀释度下至少对3个平板计数并取平均值
D. 稀释涂布平板法检测的细菌气溶胶浓度比实际值高
【答案】D
【解析】
【分析】稀释涂布平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞。计数时，首先将待测样品制成均匀的系列稀释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在（否则一个菌落就不只是代表一个细胞），再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。经培养后，由单个细胞生长繁殖形成菌落，统计菌落数目，即可计算出样品中的含菌数。
【详解】A、为防止杂菌感染，接种前需要对培养基、培养皿、微生物采样器进行灭菌，对实验操作者的双手进行消毒，A正确；
B、纯化培养时，为防止污染培养基和水分蒸发，培养皿应倒置放在恒温培养箱内培养，B正确；
C、微生物计数时在同一稀释度下，应至少需要对3个菌落数目在30～300的平板进行计数，以确保实验的准确性，C正确；
D、使用稀释涂布平板法对微生物计数，数值往往偏小，原因是两个或多个细胞连在一起时，在平板上只能观察到一个菌落，D错误。
故选D。
8. 啤酒发酵流程一般都包含发芽、焙烤、碾磨、糖化、蒸煮、发酵、消毒、终止等。按酿造工艺可分为艾尔（上发酵）和拉格（下发酵）两类。艾尔啤酒酵母在发酵罐顶端工作，温度在10～20℃；拉格啤酒酵母在发酵罐底部工作，温度在10℃以下。下列叙述错误的是（ ）
A. 焙烤是通过加热杀死种子胚但不使淀粉酶失活
B. 蒸煮可以使淀粉分解，形成糖浆，并对糖浆灭菌
C. 酵母菌繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成
D. 发酵的温度和发酵的时间随啤酒品种和口味的要求不同而有所差异
【答案】B
【解析】
【分析】现代工业酿酒分为主发酵和后发酵，主发酵是主要的生产过程，主发酵后还要通过后发酵来促酒成熟、澄清。
【详解】A、焙烤是加热杀死种子的胚，但不使淀粉酶失活，A正确；
B、蒸煮过程中高温使淀粉酶失活，可以终止淀粉酶的进一步作用，并对糖浆灭菌，B错误；
C、酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都是在主发酵阶段完成，C正确；
D、发酵温度和发酵时间随着啤酒品种和口味要求的不同而有所差异，D正确。
故选B。
9. 红豆杉（2n=24）生长缓慢且紫杉醇（可制作抗癌药物）含量非常低。红豆杉和柴胡（2n=12）的亲缘关系较远，研究人员尝试运用体细胞杂交技术培育产生紫杉醇的柴胡。先用一定剂量的紫外线照射红豆杉原生质体，破坏部分染色体，再将其与未经紫外线照射的柴胡原生质体融合，得到两两融合的细胞，然后筛选杂种细胞，杂种细胞中两种植物细胞的染色体间排斥较为明显。下列说法错误的是（ ）
A. 融合前需将红豆杉细胞和柴胡细胞用纤维素酶和果胶酶处理
B. 可以用化学诱导剂PEG诱导红豆杉原生质体与柴胡原生质体融合
C. 融合细胞中染色体数为13～23的为杂种细胞，24条的可能不是杂种细胞
D. 应在能合成紫杉醇的杂交细胞中选择红豆杉染色体数较少的细胞进行培养
【答案】C
【解析】
【分析】导原生质体融合的方法基本可以分为两大类--物理法和化学法。物理法包括电融合法、离心法等;化学法包括聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2+-高pH融合法等。
【详解】A、植物细胞有细胞壁，所以在两种植物细胞融合前，需要用纤维素酶和果胶酶处理，A正确；
B、诱导植物细胞原生质体融合的方法：电融合法、PEG融合法，B正确；
C、先用一定剂量的紫外线照射红豆杉原生质体，破坏部分染色体，所以红豆杉染色体<24条，融合细胞中染色体数为两种植物细胞染色体数目的加和：13～36的为杂种细胞，24条的可能是杂种细胞，C错误；
D、杂种细胞中两种植物细胞的染色体间排斥较为明显，所以应在能合成紫杉醇的杂交细胞中选择红豆杉染色体数较少的细胞进行培养，这样染色体间的排斥较弱，D正确。
故选C。
10. 获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，研究人员对于无菌技术则围绕着如何避免杂菌污染展开讨论。下列操作中错误的是（ ）
A. 倒平板后，对空白培养基进行培养，可检测培养基是否被污染
B. 若培养皿盖和培养皿底之间溅有培养基，则不宜用此培养皿培养大肠杆菌
C. 高压蒸汽灭菌时的灭菌条件通常是121℃，15~30min
D. 在接种箱或超净工作台的使用过程中，可用紫外线照射30min来进行消毒
【答案】D
【解析】
【分析】实验室常用的灭菌方法：①灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌；②干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌；③高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100kPa,温度为121℃的条件下，维持15～30min。
【详解】A、实验室中检测培养基是否被污染，一般在倒平板后，对空白培养基进行培养，A正确；
B、空气中的微生物可能在皿盖和皿底之间的培养基上滋生，因此若培养皿盖和皿底之间溅有培养基，则不宜用此培养基培养大肠杆菌，B正确；
C、高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100kPa,温度为121℃的条件下，维持15～30min，C正确；
D、接种箱或超净工作台在使用前，可用紫外线照射30min,进行消毒，D错误。
故选D。
11. 辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域。辣椒素的获得途径如图。下列叙述正确的是（ ）
A. 需要先后用酒精和次氯酸钠对外植体进行灭菌，并均立即用无菌水冲洗
B. 外植体的形态学上、下端都可以插入培养基，不需要考虑方向
C. 获得脱毒苗可以选择的外植体有茎尖等，脱毒苗不具有更强的抗病毒能力
D. 愈伤组织是已分化的有固定形态的薄壁组织团块，具备分裂分化能力
【答案】C
【解析】
【分析】植物组织培养技术是指将离体的植物器官、组织或细胞等，在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术。其具体流程为：接种外植体→诱导愈伤组织→诱导生芽→诱导生根→移栽成活。在一定的激素和营养等条件的诱导下，外植体可脱分化形成愈伤组织。愈伤组织能重新分化成芽、根等器官，该过程称为再分化。
【详解】A、要先后用酒精和次氯酸钠对外植体进行消毒，并均立即用无菌水冲洗，A错误；
B、外植体的形态学下端插入培养基，方向不可反，B错误；
C、获得脱毒苗可以选择的外植体有茎尖等含病毒极少甚至无病毒的组织，脱毒苗不具有更强的抗病毒能力，C正确；
D、愈伤组织是外植体经脱分化形成的排列疏松而无规则的一种不定形态的薄壁组织团块，D错误。
故选C。
12. 《本草纲目》记载，樱桃具有利脾、止泻的功效。樱桃中的槲皮素等酚类化合物具有抗氧化活性。我国已经利用组织培养技术繁育樱桃优良品种，满足人们食用和药用需要。下列叙述错误的是（ ）
A. 应用微型繁殖技术可获得大量樱桃脱毒苗
B. 可以选用樱桃幼嫩的芽原基和叶原基作外植体
C. 富含色氨酸的培养基有利于樱桃幼嫩的芽合成生长素
D. 应用樱桃细胞培养可工厂化生产初生代谢产物槲皮素
【答案】D
【解析】
【分析】植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（微型繁殖、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。
【详解】A、应用微型繁殖技术采用茎尖作为外植体可获得大量樱桃脱毒苗，A正确；
B、由于芽原基和叶原基分裂能力旺盛，因而可以选用樱桃幼嫩的芽原基和叶原基作外植体，B正确；
C、生长素是由色氨酸经过一系列转变产生的，因此，用富含色氨酸的培养基有利于樱桃幼嫩的芽合成生长素，C正确；
D、应用樱桃细胞培养可工厂化生产次生代谢产物槲皮素，D错误。
故选D。
13. 小鼠的某种上皮细胞与某种淋巴细胞体外培养时，细胞周期基本相同，但上皮细胞在培养时，呈现扁平不规则多角形，且黏附在培养瓶内壁上；而淋巴细胞则常常悬浮在培养液中。下列叙述错误的是（ ）
A. 培养上皮细胞比淋巴细胞更容易观察及判断细胞是否具有接触抑制
B. 培养液中通常含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清
C. 恒温培养箱中的CO2浓度维持在5%左右，主要作用是维持培养液的pH值
D. 上皮细胞和淋巴细胞传代培养时，都可直接用离心法收集，然后分瓶培养
【答案】D
【解析】
【分析】动物细胞培养过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。
【详解】A、上皮细胞在培养时，呈现扁平不规则多角形，且粘附在培养瓶内壁上，而淋巴细胞则常常悬浮在培养液中，因此培养上皮细胞更易观察判断细胞是否具有接触抑制现象，A正确；
B、培养液中通常含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清（含有促进细胞增殖和生长的物质），B正确；
C、细胞培养应在含CO2恒温培养箱中进行，恒温培养箱中的CO2浓度维持在5%左右，以维持培养液的pH值，C正确；
D、上皮细胞属于贴壁细胞，需要重新用胰蛋白酶分散成单个细胞后再用离心法收集来传代培养，D错误。
故选D。
14. 研究发现，在失重条件下，心肌细胞培养96h后凋亡率显著增加。为探究其机制，科学家检测了模拟失重条件下培养96h的心肌细胞中相关基因的表达情况，结果如图所示。下列说法错误的是（ ）
A. 在进行心肌细胞培养时，为保证无毒的环境，需要定期更换培养液，清除代谢物
B. 体外培养心肌细胞所需的合成培养基中通常需要添加血清等一些天然成分
C. 动物细胞进行体外培养时，大多数种类细胞是悬浮在培养液中生长增殖的
D. 据图推测c~myc基因和CATA—4基因相对表达量的变化与失重条件下心肌细胞凋亡率增加密切相关
【答案】C
【解析】
【分析】动物细胞培养是指从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。
【详解】A、动物细胞培养的条件是无菌无毒、适宜的温度和pH、营养物质，相应的气体环境，为保证无毒的环境，需要定期更换培养液，清除代谢物，A正确；
B、由于人们对细胞所需营养物质尚未全部研究清楚，因此使用合成培养基时，通常需要加入血清等一些天然成分，B正确；
C、体外培养的动物细胞可以分为两类：一类细胞能够悬浮在培养液中生长增殖，另一类则需要贴附于某些基质表面才能生长增殖，大多数细胞属于这种类型，C错误；
D、在失重条件下，心肌细胞培养96h后凋亡率显著增加，据图可知c~myc基因和CATA-4基因相对表达量在失重条件下发生明显变化，可推测c~myc基因和CATA-4基因相对表达量的变化与失重条件下心肌细胞凋亡率增加密切相关，D正确。
故选C。
15. 2017年，某国批准了首例使用细胞核移植技术培育“三亲婴儿”的申请。其培育过程可选用如下技术路线。据图分析下列叙述错误的是（ ）
A. 该技术避免了母亲的细胞质遗传病基因传递给后代
B. 卵母细胞捐献者携带的红绿色盲基因能够遗传给“三亲婴儿”
C. 该技术涉及动物细胞培养、细胞核移植等操作
D. “三亲婴儿”同时拥有自己父亲、母亲及卵母细胞捐献者的部分基因
【答案】B
【解析】
【分析】分析题图：图示表示三亲婴儿的培育过程，由图可知，三亲婴儿的培育采用了动物细胞核移植技术、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术等。
【详解】A、母亲为“三亲婴儿”提供的是卵母细胞的细胞核，后代的线粒体基因来自捐献者的卵母细胞，故该技术可避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代，A正确；
B、捐献者携带的红绿色盲基因位于其细胞核内，而捐献者给三亲婴儿提供的是卵母细胞的细胞质，故捐献者携带的红绿色盲基因不能遗传给“三亲婴儿”，B错误；
C、由题图可知，该技术涉及动物细胞培养、动物细胞核移植、体外受精等操作，C正确；
D、“三亲婴儿”的细胞核基因一半来自母亲，一半来自父亲，线粒体基因来自于卵母细胞捐献者，D正确。
故选B。
二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有一项或多项符合题目要求。全部选对得3分，选对但不全得1分，有选错得0分。
16. 酱油起源于我国，至今已有数千年历史。大豆、小麦中的蛋白质、淀粉等有机物在米曲霉、酵母菌和乳酸菌等微生物及其酶系的作用下，被分解形成具有特殊色泽和风味的酱油。利用发酵工程生产酱油的流程如图。下列叙述正确的是（ ）
A. 可以用平板划线法对酵母菌进行分离和计数
B. 与传统发酵相比，利用发酵工程生产酱油可以提高产量和质量
C. 大豆中的蛋白质可为米曲霉的生长提供碳源和氮源
D. 发酵池发酵阶段使用食盐灭菌以保证酱油质量
【答案】BC
【解析】
【分析】由题图信息分析可知，制作酱油的过程中利用的微生物主要有米曲霉、酵母菌和乳酸菌等，其中米曲霉能够产生蛋白酶和脂肪酶，将蛋白质和脂肪分别水解成小分子的肽和氨基酸、甘油和脂肪酸。
【详解】A、平板划线法可以对微生物进行分离，但不能计数，A错误；
B、淀粉等有机物在米曲霉、酵母菌和乳酸菌等微生物及其酶系的作用下，利用发酵工程生产酱油可以提高产量和质量，B正确；
C、大豆中的蛋白质可为米曲霉的生长提供氮源、碳源等，C正确；
D、抑制杂菌污染和繁殖是保证酱油质量的重要因素，在发酵池中酵母菌产生的酒精能抑制杂菌的生长,乳酸菌产生的乳酸使发酵液呈酸性也能抑制杂菌的生长，同时往发酵池中添加的食盐也能抑制杂菌的生长，D错误。
故选BC。
17. 以苹果的幼茎为外植体，探究激素对愈伤组织诱导及愈伤组织褐变（褐变会使愈伤组织失去分裂和分化能力，甚至导致死亡）的影响，结果如下表。下列分析正确的是（ ）
A. 苹果幼茎愈伤组织褐变率与两种激素的浓度及其配比均有关
B. 苹果幼茎愈伤组织诱导率与两种激素的配比有关，与浓度无关
C. 高浓度的2，4-D容易导致苹果幼茎愈伤组织发生褐变
D. 上述组合中诱导脱分化的最佳激素组合为2，4-D +6-BA（2.0+0.5）mg/L
【答案】ACD
【解析】
【分析】结合题干分析表格数据可知，本实验探究不同浓度组合的2，4-D和6-BA对愈伤组织诱导及愈伤组织褐变的影响，实验自变量为2，4-D和6-BA的不同浓度组合，因变量为愈伤组织诱导率和褐变率，共设置了6组。
【详解】AB、当6-BA浓度不变，2，4-D升高时，诱导率、褐变率在升高；当两种激素配比升高时，诱导率和褐变率也在升高说明红豆杉幼茎愈伤组织褐变率与两种激素浓度比值、浓度高低均有关，A正确，B错误；
C、比较第1～3组，或第4～6组，在6-BA浓度一定的情况下，褐变率随2，4-D浓度的增大而增大，说明高浓度的2，4-D容易导致红豆杉幼茎愈伤组织发生褐变，C正确；
D、在6种组合中，第3组（2.0+0.5）愈伤组织诱导率为70%，且褐变率较低，为诱导脱分化的最佳激素组合，D正确。
故选ACD。
18. 下图为实验室培养和纯化大肠杆菌过程中部分操作步骤，下列说法正确的是（ ）
A. 制备①步骤使用的培养基的过程是先灭菌再调pH
B. ②③④步骤操作时只需要在接种前和划线结束后灼烧灭菌
C. 操作③到④的过程中，接种环共灼烧处理了6次
D. 接种结束后，将④倒置培养，皿底上标注菌种及接种日期等信息
【答案】CD
【解析】
【分析】由图可知，①是倒平板，②是用接种环沾取菌液，③是进行平板划线，④是培养。制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的基本过程为计算、称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板五个步骤。
【详解】A、①步骤表示倒平板，倒平板的培养基需要先调节pH后灭菌，A错误；
B、除了在接种前和划线结束后灼烧灭菌，在每次划线之间也需要灼烧灭菌，B错误；
C、接种环在每次接种前和接种结束后都要通过灼烧来灭菌，所以完成步骤④中5次划线操作前都要灼烧灭菌，接种结束后还需灼烧灭菌1次，防止造成污染，由此可见，完成步骤④共需灼烧接种环6次，C正确；
D、接种结束后，将④倒置培养，皿底上标注菌种及接种日期等信息，D正确。
故选CD。
19. 2023年1月，中国药监局批准单抗联合紫杉醇治疗晚期肺癌的方案。将特定的药物与单克隆抗体结合在一起，可特异性地杀死患者体内的癌细胞。下图为制备过程，据图分析，下列相关叙述正确的是（ ）
A. ①过程需要在小鼠的骨髓中获得细胞甲
B. ③和④的选择方法和原理相同
C. 过程⑤既可以在小鼠腹腔内进行，也可以在体外培养液中进行
D. 抗体的靶向作用使⑥过程具有高度的特异性
【答案】CD
【解析】
【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养:最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
【详解】A、细胞甲是B淋巴细胞，从小鼠的脾脏中获取，A错误；
B、③是用选择培养基选择，④是用抗体进行检测，B错误；
C、过程⑤既可以在小鼠腹腔内进行，也可以在体外培养液中进行，C正确；
D、抗体具有特异性，所以抗体的靶向作用使⑥过程具有高度的特异性D正确。
故选CD。
20. 科学家将0ct3、Sx2、c—Mye和Klf4基因通过逆转录病毒转入小鼠成纤维细胞中，然后在培养胚胎干细胞（ES细胞）的培养基上培养这些细胞。2~3周后，这些细胞显示出ES细胞的形态，具有活跃的分裂能力，称为iPS细胞，这一研究成果有望为人类某些疾病的治疗带来福音。下列有关该实验的分析错误的是（ ）
A. 理论上可以利用病人体内的iPS细胞诱导形成心脏，这样可以避免免疫排斥
B. 小鼠成纤维细胞和小鼠iPS细胞中的DNA相同，蛋白质完全不相同
C. 将小鼠成纤维细胞在培养基上培养作为对照，可排除ips细胞的产生不是培养基的作用
D. 用iPS进行人类某些疾病治疗可能存在风险
【答案】AB
【解析】
【分析】iPS为诱导多能干细胞，是指通过基因转染技术将某些转录因子导入动物或人的体细胞，使体细胞直接重构称为胚胎干细胞细胞样的多潜能细胞。iPS细胞建立的过程主要包括: ①分离和培养宿主细胞；②通过病毒或质粒载体将若干个多能性相关的基因导入宿主细胞；③将病毒感染后的细胞种植于饲养层细胞上，并于ES 细胞专用培养体系中培养， 同时在培养液中根据需要加入相应的小分子物质以促进重编程； ④出现ES样克隆后进行iPS 细胞的鉴定(细胞形态、表观遗传学、体外分化潜能等方面)。
【详解】A、iPS细胞是将0ct3、Sx2、c-Mye和Klf4基因通过逆转录病毒转入小鼠成纤维细胞中在体外培养基上形成的，不是体内本身存在的细胞，但若利用病人体内体细胞诱导形成iPS细胞，然后再诱导形成心脏，这样可以避免免疫排斥，A错误；
B、由题意可知，小鼠成纤维细胞转入逆转录病毒后在培养胚胎干细胞（ES细胞）的培养基上培养后得到了小鼠iPS细胞，因此细胞中的DNA相同，由于基因选择性表达，所以二者细胞中蛋白质不完全相同，B错误；
C、对照组可以排除干扰因素，所以要排除iPS细胞的产生不是由培养基作用的结果需将小鼠成纤维细胞直接在培养基上培养作为对照，C正确；
D、由于iPS细胞具有活跃的分裂能力，若不受控制可能转化为癌细胞，所以用它进行治疗时可能存在安全风险，D正确。
故选AB。
三、非选择题：本题共5小题，共55分。
21. 图1所示装置既可用于生产果酒，又可用于生产果醋;图2为腐乳的制作流程图;图3为某兴趣小组为了制作泡菜而查阅资料得到的相关指标变化示意图。回答下列相关问题:
（1）制备果醋时，原料可以是葡萄糖，也可以是酵母菌产生的____。若用图1所示的装置制备果醋，则开关1和开关2的控制操作是________________，原因是________________。
（2）图2中豆腐发酵的过程①主要长出______，经过该微生物的发酵，豆腐中的蛋白质被水解成______，所以腐乳味道鲜美并易于消化和吸收。
（3）据图3可知，在制作泡菜的过程中，亚硝酸盐含量的变化规律是_____________，pH下降的主要原因是_______________。制作泡菜时，需要经常向泡菜坛的水槽补充水，目的是______________。
【答案】（1） ①. 酒精##乙醇 ②. 开关1和开关2都需要打开 ③. 醋酸菌属于好氧菌，只能进行有氧呼吸，打开开关1可以向发酵瓶中充气，其余的气体需要通过开关2排出
（2） ①. 毛霉 ②. 小分子肽和氨基酸
（3） ①. 先增加后减少，最终维持在较低的水平 ②. 乳酸菌发酵过程中产生了乳酸 ③. 给泡菜坛内提供无氧的环境
【解析】
【分析】1、腐乳制作的基本原理就是控制毛霉的生长，即先创造适宜的条件让毛霉生长，利用毛霉进行前期发酵，当发酵到一定程度时，再加盐抑制毛霉的生长，毛霉等微生物产生的蛋白酶将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶将脂肪水解为甘油和脂肪酸，使腐乳相比豆腐含有更多的有机物种类，营养丰富，鲜香可口。
2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。最适温度为 30～35℃ 。
【小问1详解】
制备果醋时，原料可以是葡萄糖，也可以是酵母菌产生的酒精(或乙醇)，醋酸菌可将酒精(或乙醇)变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。果醋是严格的好氧菌，只能进行有氧呼吸，需要通入氧气，打开开关1可以向发酵瓶中充气，剩余的空气需要通过开关2排出，因此开关1和开关2都需要打开。
【小问2详解】
腐乳发酵的主要微生物是毛霉，图2中豆腐发酵的过程①主要长出毛霉。毛霉可以分泌蛋白酶，将蛋白质分解为小分子的肽和氨基酸，使腐乳具有一定的风味且易于消化和吸收。
【小问3详解】
据图3可知，亚硝酸盐先增加后减少，最终维持在较低的水平。由于乳酸菌发酵过程中产生了乳酸，使pH下降。泡菜发酵的主要微生物是乳酸菌，乳酸菌是厌氧菌，因此制作泡菜时，需要经常向泡菜坛的水槽补充水，目的是给泡菜坛内提供无氧的环境。
【点睛】本题结合图解，主要考查果醋发酵、腐乳的制作和泡菜制作的相关知识点，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构的能力。
22. 有机磷农药使用不当有时会造成瓜果蔬菜等食品农药残留超标，危害人类健康。某生物兴趣小组同学提出：土壤中可能存在高效降解有机磷农药的微生物。请回答下列问题：
（1）在制备固体培养基时需加入的常用凝固剂是___________。若培养基需要调节pH，则应在灭菌之___________（填“前”或“后”）调节。为了获得能降解有机磷农药的微生物菌种，可在被有机磷农药污染的土壤中取样，并在培养基中添加适量的___________进行选择培养。
（2）该小组在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板在适宜条件下先培养一段时间，这样做的目的是___________。
（3）如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，图B接种方法是____________。利用图A的方法在5个平板上各接种稀释倍数为103的菌液样品（涂布体积为0.2mL），培养一段时间后，平板上的菌落数分别为96个、100个、108个、112个、430个，则每升原菌液样品中的细菌数为___________个，用这种方法测定菌体密度时，实际活菌数量要比测得的数量多，原因是___________。
（4）将获得3种待选微生物菌种甲、乙、丙分别接种在1L含20mg有机磷农药的相同培养液中培养（培养液中其他营养物质充裕、条件适宜），观察从实验开始到微生物停止生长所用的时间，甲、乙、丙分别为32小时、45小时、16小时，则应选择微生物____________（填“甲”“乙”或“丙”）作为菌种进行后续培养。
【答案】（1） ①. 琼脂 ②. 前 ③. 有机磷农药
（2）检测培养基平板灭菌是否合格（或观察培养一段时间后的未接种的空白平板是否有菌落形成）
（3） ①. 平板划线法 ②. 5.2× 108 ③. 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落
（4）丙
【解析】
【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养，在线的开始部分微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【小问1详解】
在制备固体培养基时需加入的常用凝固剂是琼脂；制备培养基过程中，为了避免杂菌污染，应该先调节pH后灭菌； 因为要获得能降解有机磷农药的微生物菌种，所以要在添加了适量的有机磷农药的培养基上进行选择培养；
【小问2详解】
检测培养基平板灭菌是否合格的方法：将未接种的空白培养基在适宜条件下培养一段时间后观察，无菌落形成说明该培养基灭菌合格，有菌落形成就不合格；
【小问3详解】
图A菌落分布较均匀，说明接种方法是稀释涂布平板法，图B菌落集中呈线状，说明接种方法是平板划线法；为了保证结果准确，一般选择菌落数为30~300的平板进行计数，根据题意可知，每升原菌液样品中细菌数为（96+100+108+112）÷4÷0.2×1000×103=5.2 × 108个；当样品的稀释度足够高时，培养基表面一个活菌就生长为一个菌落，故用这种方法测定菌体密度时，由于存在少数两个或多个活菌细胞连在一起的现象，而平板上观察到的只是一个菌落，所以实际活菌数量要比测得的数量多；
【小问4详解】
微生物停止生长，说明有机磷农药被分解完，丙分解等量有机磷所用时间比甲、乙少，说明丙分解有机磷农药的能力比甲、乙强，因此应选择微生物丙作为菌种进行后续培养。
23. 同源四倍体的紫花苜被誉为“牧草之王”，但易造成家畜胀病；二倍体的百脉根因富含缩合单宁，饲喂时可防止家畜胀病的发生。某研究人员设计了下列技术路线，以期获得抗胀病的新型苜蓿。（注：IOA可抑制植物细胞呼吸第一阶段，R-6G可阻止线粒体的呼吸作用，二者有效抑制不同植物细胞正常代谢的临界浓度不同）
（1）据图可知，本研究主要利用的生物技术的原理是______。在实验前需通过预实验来探究R-6G或IOA使原生质体失去再生愈伤组织能力的临界浓度，设计思路是______。
（2）步骤①可采用化学法进行诱导，化学法除聚乙二醇融合法外，还有______法等。原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是_______。融合后的原生质体经过。______再生形成杂种细胞，进而经过②脱分化形成愈伤组织。
（3）步骤③先将生长良好的愈伤组织转接到诱导生芽培养基上，通常应在培养基中加入两类植物激素，其中起主要作用的是______。长出芽后，再将其转接到诱导生根培养基上，最终得到杂种植株。请判断：得到的杂种植株，理论上是否可育？并简要阐述理由：______
【答案】（1） ①. 细胞膜的流动性和植物细胞的全能性 ②. 将获取的原生质体分别放置在不同浓度的R-6G或IOA溶液中，培养一段时间后，观察原生质体再生情况
（2） ①. 高Ca2+-高pH融合 ②. 保持原生质体完整性 ③. 细胞壁
（3） ①. 细胞分裂素 ②. 可育，杂种植株细胞中含有成对的同源染色体
【解析】
【分析】植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞，进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。植物体细胞杂交依据的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。
【小问1详解】
由图可知，新型苜蓿的培育过程采用的是植物体细胞杂交技术，该生物技术的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性；在实验前需通过预实验来探究R-6G或IOA使原生质体失去再生愈伤组织能力的临界浓度，由于需要获得 具体的浓度，因此需要将获取的原生质体分别放置在不同浓度的R-6G或IOA溶液中，培养一段时间后，观察原生质体再生情况，根据再生情况获得各自的临界值。
【小问2详解】
步骤①可采用化学法进行诱导，其中化学方法除了聚乙二醇（PEG）融合法，还有高Ca2+—高pH融合法等。原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，保持原生质体完整性，防止原生质体吸水涨破。融合后的原生质体再生出新的细胞壁说明形成杂种细胞，即杂种细胞形成的标志是再生出细胞壁，进而经过②脱分化形成愈伤组织。
【小问3详解】
步骤③先将生长良好的愈伤组织转接到诱导生芽培养基上，通常应在培养基中加入两类植物激素，分别是生长素和细胞分裂素，其中起主要作用的是细胞分裂素。长出芽后，再将其转接到诱导生根培养基上，最终得到杂种植株。紫花苜蓿是同源四倍体，体细胞含有4个染色体组，百脉根是二倍体，体细胞含有2个染色体组，融合后得到的杂种细胞含有4+2=6个染色体组，可见，杂种植株细胞中含有成对的同源染色体，因而能进行正常的减数分裂过程，因而表现为可育。
24. 下科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛，如果要加速转基因奶牛的繁育，可以对此转基因奶牛进行克隆（如图所示）。请结合图示回答下列相关问题：
（1）在进行细胞培养之前，要对取自转基因奶牛的组织细胞进行分散处理，形成单个细胞，这个过程中需要利用________酶处理。
（2）在进行原代培养时，细胞增殖的方式是________。动物细胞的体外培养需要满足营养物质的供应，适宜的温度、pH和渗透压，________的环境以及气体环境。细胞培养所需气体主要有______。
（3）在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面________时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的________。此时，瓶壁上形成的是________层细胞。
（4）将进行培养的供体细胞注入去核的卵母细胞中，需要去除卵母细胞的细胞核，目的是_____。
（5）将重组细胞在培养液中培养成的重构胚移入受体母牛后，该母牛就会生出与供体奶牛遗传物质基本相同的犊牛，但也不是100%的复制，原因可能是_____。
（6）上述过程中涉及的动物细胞工程技术有________。
【答案】（1）胰蛋白(或胶原蛋白)
（2） ①. 有丝分裂 ②. 无菌、无毒 ③. 95％空气和5％CO2
（3） ①. 相互接触 ②. 接触抑制 ③. 单
（4）使克隆出的动物个体的遗传物质几乎全部来自供体细胞
（5）生物的性状受细胞核基因和细胞质基因共同控制；生物的性状还受环境因素的影响
（6）动物细胞核移植、动物细胞培养
【解析】
【分析】图示为转基因克隆奶牛的培育过程，该过程采用了动物细胞培养技术、动物体核移植技术、早期胚胎培养技术、胚胎移植技术。
【小问1详解】
常用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理动物组织细胞使其分散开来。
【小问2详解】
在进行原代培养时，细胞增殖的方式是有丝分裂。动物细胞的体外培养需要满足营养物质的供应，适宜的温度、pH和渗透压，无菌、无毒的环境以及气体环境。细胞培养所需气体主要有95％空气和5％CO2（二氧化碳的目的是维持培养液的PH）。
【小问3详解】
在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。此时，瓶壁上形成的是单层细胞。
【小问4详解】
去除卵母细胞的细胞核是因为使克隆出的动物个体的遗传物质几乎全部来自供体细胞。
【小问5详解】
生物的性状是由细胞核基因和细胞质基因共同作用的结果，同时，生物的性状还受环境的影响，因此，克隆动物不可能是供体奶牛100%的复制品。
【小问6详解】
图示为转基因克隆奶牛的培育过程，该过程采用了动物细胞培养技术、动物体核移植技术、早期胚胎培养技术、胚胎移植技术，而该克隆动物的培育过程中涉及的动物细胞工程技术有：动物细胞核移植、动物细胞培养技术。
25. 使用细胞毒素类药物治疗乳腺癌可以有效杀死癌细胞，但是对正常细胞同样有杀伤作用。为降低细胞毒素类药物的副作用，研究人员通过单克隆抗体生产抗体—药物偶联物（ADC），实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。ADC的生产过程如图1所示，ADC对乳腺癌细胞和正常细胞的作用如图2所示。回答下列问题：
（1）根据题图信息分析，向小鼠注射的特定抗原来自________细胞，注射该抗原的目的是________。
（2）图1中①过程可使用的不同于植物细胞融合时的方法是________，产生的细胞用特定培养基进行筛选，在该培养基上能够生长的是________细胞，该种细胞的特点是________。
（3）ADC能降低细胞毒素类药物的副作用，是因为________能精确定位乳腺癌细胞，该过程依赖的原理是________。当ADC进入乳腺癌细胞后，细胞中的________会将其水解，释放的细胞毒素作用于细胞核，进而诱导基因的表达，使癌细胞死亡。
【答案】（1） ①. 乳腺癌 ②. 诱导小鼠产生能够分泌抗乳腺癌细胞抗体的B淋巴细胞
（2） ①. 灭活病毒诱导法 ②. 杂交瘤 ③. 既能大量增殖，又能产生特定抗体
（3） ①. 抗乳腺癌细胞的单克隆抗体 ②. 抗原和抗体的特异性识别并结合 ③. 溶酶体
【解析】
【分析】单克隆抗体制备过程：用特定抗原免疫，从小鼠的脾中得到能产生特定抗体的B淋巴细胞→诱导与培养好的骨髓瘤细胞融合→用特定的选择培养基进行筛选：在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长→对选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞→将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞在体外大规模培养或者注射小鼠腹腔中增殖→从细胞培养液或小鼠腹水中获取大量的单克隆抗体。
由图可知，①表示动物细胞的融合，②表示筛选杂交瘤细胞，③表示克隆化培养和专一抗体检测，④表示将单克隆抗体和治疗乳腺癌的药物结合形成ADC。
【小问1详解】
本实验要生产乳腺癌的单克隆抗体，应该选择乳腺癌细胞作为抗原对小鼠进行免疫处理，注射乳腺癌细胞作为抗原能够诱导小鼠产生能够分泌抗乳腺癌细胞抗体的B淋巴细胞。
【小问2详解】
①表示动物细胞的融合，需要将小鼠B淋巴细胞与鼠的骨髓瘤细胞融合，该过程可以使用灭活病毒诱导法，而诱导植物原生质体融合时，不能使用灭活病毒诱导法。产生的细胞用特定培养基进行筛选，在该培养基上，未融合的细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞能正常生长，杂交瘤细胞既能大量增殖，又能产生特定抗体。
【小问3详解】
抗体——药物偶联物（ADC）通过抗乳腺癌细胞的单克隆抗体精确定位乳腺癌细胞，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤，从而降低细胞毒素类药物的副作用，该过程依赖的原理是抗原和抗体的特异性识别并结合。ADC进入乳腺癌细胞后，细胞中的溶酶体可将其水解，释放出的药物作用于细胞核，最终可导致该细胞凋亡。2，4-D（mg/L）+6-BA（mg/L）
1.0+0.5
2.0+0.5
3.0+0.5
1.0+1.0
2.0+1.0
3.0+1.0
诱导率（%）
0
70
100
0
70
100
褐变率（%）
0
62.5
100
0
87.5
100
1. 我国早在9000年前就可以运用发酵技术获得产品，为生活增添丰富的色彩。下列说法正确的是（ ）
A. 制作果酒时，可通过控制发酵的温度、发酵液的pH等措施降低乳酸菌使果酒变质的概率
B. 利用酵母菌酒精发酵进行传统酿酒过程中，需一直保持无氧的条件
C. 泡菜坛装八成满可以防止发酵过程中酵母菌、乳酸菌等产生的CO2使发酵液溢出
D. 腐乳鲜美的味道主要由曲霉分解蛋白质产生的小分子肽和氨基酸引起
【答案】A
【解析】
【分析】1、制作泡菜的注意事项：（1）盐水煮沸，一是为了消除杂菌，二是为了除去水中的氧气，冷却再用是为了避免高温杀死坛中蔬菜表面的乳酸菌；（2）加水密封是为了阻止外面的空气再进入泡菜坛，为乳酸菌发酵制作泡菜创造无氧的环境条件。若此过程中进入大量氧气，可能导致乳酸菌死亡而好氧菌大量繁殖，使菜腐烂；（3）菜料只能装八成满的原因：初期会有气体产生；要往坛中加盐水没过菜料，所以不能加菜料太满。
2、制作果酒和果醋的注意事项： （1）发酵瓶和榨计机都要用体积分数为70%的酒精消毒；（2）葡萄要先冲洗再去枝梗，以免去枝梗时葡萄破碎，增加被杂菌污染的风险；（3）瓶中留有1/3空间为酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖提供氧气。果酒发酵过程中会产生大量CO2导致瓶内气压升高，需拧松瓶盖放气，但不要完全打开，否则可能会被杂菌污染。
【详解】A、制作果酒时，果酒中除了酵母菌，还有乳酸菌、醋酸菌等微生物；乳酸菌可能分解果酒中的糖、甘油、酒石酸等，从而使果酒变质；可通过控制发酵的温度、发酵液的pH等措施降低乳酸菌使果酒变质的概率，A正确；
B、利用酵母菌酿制果酒时，初始阶段可往装置中通入一定量空气，使酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖，后期再密封发酵使酵母菌进行无氧呼吸，产生酒精，B错误；
C、泡菜发酵时，发酵初期酵母菌等的活动会产生气体，使体积膨胀，故泡菜坛装八成满可防止发酵液溢出，乳酸菌只进行无氧呼吸（乳酸发酵）不产生二氧化碳，C错误；
D、多种微生物参与了豆腐的发酵，如酵母、曲霉和毛霉 等，其中起主要作用的是毛霉；腐乳发酵时，发挥主要作用是毛霉，毛霉通过分泌脂肪酶和蛋白酶（不是胰蛋白酶）将豆腐块中的大分子物质分解为易于被人体吸收的小分子物质，有些氨基酸具有特殊的气味而表现出腐乳的风味，D错误；
故选A。
2. 为了探究果酒发酵的最适温度，某研究性学习小组将制作的果汁加入果酒发酵罐中，向发酵罐中加入等量酵母菌，并分别设置不同温度，再将发酵罐与传感器相连，实时检测酒精含量变化，结果如图所示。相关叙述错误的是（ ）
A. 该实验中 28℃组是实验组，其余三组是对照组
B. 实验结果表明果酒发酵的最适温度是28℃左右
C. 将果汁装入发酵罐时不能装满，要留有一定的空间
D. 酒精产生量的多少与通气条件密切相关
【答案】A
【解析】
【分析】酵母菌是兼性厌氧微生物，在氧气充足的条件下进行有氧呼吸产生二氧化碳和水，释放大量能量，在无氧条件下进行无氧呼吸产生二氧化碳和酒精。
【详解】A、根据题干信息无法判断28℃组是实验组，A错误；
B、根据图示信息可知，28℃条件下气态酒精浓度比较高，表明果酒发酵的最适温度是28℃左右，B正确；
C、将果汁装入发酵罐时不能装满，要留有一定的空间，C正确；
D、酵母菌为兼性厌氧微生物，无氧呼吸产生酒精，所以酒精产生量的多少与通气条件密切相关，D正确。
故选A。
3. 古徽州有许多美食深受人们喜爱，如徽州毛豆腐、灵山酒酿、臭鳜鱼、徽州臭豆腐等。制作臭豆腐时需要将豆腐浸入含有乳酸菌和芽孢杆菌等微生物的卤汁中发酵，相关叙述正确的是（ ）
A. 卤汁中的乳酸菌和芽孢杆菌相互独立，没有种间关系
B. 制作臭豆腐时，豆腐相当于微生物生长的培养基
C. 微生物产生并分泌出单细胞蛋白，可以提取出来用作动物饲料
D. 乳酸菌发酵产生了乳酸和二氧化碳，需定期排气
【答案】B
【解析】
【分析】腐乳的制作原理：参与豆腐发酵的微生物有青霉、酵母、曲霉、毛霉等多种，其中起主要作用的是毛霉，其代谢类型为异养需氧型，适宜温度为15°C~18°C；毛霉能够产生蛋白酶和脂肪酶，将蛋白质和脂肪分别水解成小分子的肽和氨基酸、甘油和脂肪酸。
【详解】A、乳酸菌和芽孢杆菌生活在同一环境下会竞争营养物质和空间等，故卤汁中的乳酸菌和芽孢杆菌存在竞争关系，A错误；
B、制作臭豆腐时，豆腐相当于微生物生长的培养基，能够给微生物提供其生长所需的营养，B正确；
C、单细胞蛋白是微生物菌体，不是由微生物分泌的，C错误；
D、乳酸菌发酵产物是乳酸，不会产生二氧化碳，D错误。
故选B。
4. 工业上利用谷氨酸棒状杆菌生产谷氨酸。关于谷氨酸的工厂化生产，下列说法错误的是（ ）
A. 与传统发酵技术相比，工厂化生产谷氨酸所用的大多是单一菌种
B. 发酵结束后，采用过滤、沉淀等方法进行分离和干燥，即可得到产品
C. 发酵过程中，.中性或弱碱性的条件有利于谷氨酸的积累
D. 发酵罐内的发酵是工厂化生产谷氨酸的中心环节，需严格控制发酵条件
【答案】B
【解析】
【分析】发酵工程是指利用微生物的特定功能，通过现代工程技术，规模化生产对人类有用的产品，主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身。发酵工程一般包括菌种的选育，扩大培养，培养基的配置、火菌，接种，发酵、产品的分离、提纯等方面。发酵过程一般来说都是在常温常压下进行，条件温和、反应安全，原料简单、污染小，反应专一性强，因而可以得到较为专一的产物。
【详解】A、与传统发酵技术相比，工厂化生产谷氨酸所用的大多经过筛选获得的优质菌种，一般是单一菌种，获得的产物产量高更纯，A正确；
B、如果发酵产品是微生物细胞本身，可在发酵结束之后，采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥，即可得到产品，如果产品是代谢物，可根据产物的性质采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品，谷氨酸属于代谢物，B错误；
C、谷氨酸棒状杆菌是谷氨酸发酵的主要菌种，属于细菌，发酵过程中，中性或弱碱性的条件有利于谷氨酸棒状杆菌的繁殖，有利于谷氨酸的积累，C正确；
D、发酵条件能影响产品的品质和产量，发酵罐内的发酵是工厂化生产谷氨酸的中心环节，需严格控制发酵条件，D正确。
故选B。
5. 微生物流行性和爆发性病害相继发生，会严重制约海水养殖业的健康发展。某种细菌是引起海参幼体烂边，溃烂病等病症的主要病原体。为选出最佳杀菌效果的抗生素，研究者将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片a、b、c、d置于布满该种细菌的平板上，培养一段时间后，四种抗生素的滤纸片周围均出现抑菌圈，结果如图所示。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 为提高实验结果的可靠性，可增加一组清水处理的滤纸片
B. 该种致病细菌对这四种抗生素均具有一定的敏感性
C. 该实验表明，临床上疗效最佳的是抗生素D
D. b周围菌落出现的原因有可能是杂菌污染，也有可能是抗生素诱发致病细菌产生了抗性突变
【答案】B
【解析】
【分析】抑菌圈越大，说明该菌对此药敏感性越大，反之越小，若无抑菌圈，则说明该菌对此药具有耐药性。
【详解】A、为提高实验结果的可靠性，可增加一组无菌水处理的滤纸片，以排除滤纸片对实验结果的影响，A错误；
B、由图可知．四种抗生素的滤纸片周围均出现抑菌圈，说明该种致病细菌对这四种抗生素均具有敏感性，B正确；
C、由于含抗生素A的滤纸片a周围抑菌圈最大，因此临床上疗效最佳的是抗生素A，C错误；
D、滤纸片b周围抑菌圈中出现菌落，可能是该菌发生了基因突变，对抗生素B产生抗性，是抗生素B筛选的结果，抗生素不是诱变因素不会诱发基因突变，D错误。
故选B。
6. 下列关于培养基的配制及其应用的说法中，正确的是（ ）
A. 同一种物质可能既作为碳源又作为氮源，所有碳源都能提供能量
B. 是否含水是区别固体培养基和液体培养基的主要依据
C. 培养硝化细菌时，培养基中需要加氮源，无需加入碳源
D. 分离分解尿素的细菌时，尿素是培养基中唯一的碳源和氮源
【答案】C
【解析】
【分析】1、培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物种和氧气的要求。
2、琼脂是一种从红藻中提取的多糖，常作为固体培养基中的凝固剂。
3、选择培养基的概念是：在微生物学中，将允许特定微生物种类生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基，由于分解尿素的细菌都能合成脲酶，脲酶能催化尿素水解，因此在以尿素为唯一氮源的培养基上，分解尿素的菌能以尿素为氮源生长，而不能分解尿素的菌因缺乏氮源而无法生长。
【详解】A、同一种物质可能既作为碳源又作为氮源，如：牛肉膏和蛋白胨，但并不是所有碳源都能提供能量，如：自养型微生物的碳源是二氧化碳，二氧化碳不能提供能量，A错误；
B、琼脂是常用的凝固剂，是否含琼脂是区别固体培养基与液体培养基的主要依据，B错误；
C、培养硝化细菌时，需先配制合适的培养基。应选用以铵盐为唯一氮源的培养基进行培养，由于硝化细菌是自养型细菌，能制造有机物，故该培养基中不需要加碳源，C正确；
D、要获得分解尿素的细菌，需在以尿素为唯一的氮源培养基中培养，碳源主要是糖类，D错误。
故选C。
7. 细菌气溶胶是由悬浮于大气或附着于颗粒物表面的细菌形成的。利用空气微生物采样器对某市人员密集型公共场所采样并检测细菌气溶胶的浓度（菌落数/m³）。下列叙述错误的是（ ）
A. 采样前需对空气微生物采样器进行无菌处理
B. 细菌气溶胶样品恒温培养时需将平板倒置
C. 同一稀释度下至少对3个平板计数并取平均值
D. 稀释涂布平板法检测的细菌气溶胶浓度比实际值高
【答案】D
【解析】
【分析】稀释涂布平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞。计数时，首先将待测样品制成均匀的系列稀释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在（否则一个菌落就不只是代表一个细胞），再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。经培养后，由单个细胞生长繁殖形成菌落，统计菌落数目，即可计算出样品中的含菌数。
【详解】A、为防止杂菌感染，接种前需要对培养基、培养皿、微生物采样器进行灭菌，对实验操作者的双手进行消毒，A正确；
B、纯化培养时，为防止污染培养基和水分蒸发，培养皿应倒置放在恒温培养箱内培养，B正确；
C、微生物计数时在同一稀释度下，应至少需要对3个菌落数目在30～300的平板进行计数，以确保实验的准确性，C正确；
D、使用稀释涂布平板法对微生物计数，数值往往偏小，原因是两个或多个细胞连在一起时，在平板上只能观察到一个菌落，D错误。
故选D。
8. 啤酒发酵流程一般都包含发芽、焙烤、碾磨、糖化、蒸煮、发酵、消毒、终止等。按酿造工艺可分为艾尔（上发酵）和拉格（下发酵）两类。艾尔啤酒酵母在发酵罐顶端工作，温度在10～20℃；拉格啤酒酵母在发酵罐底部工作，温度在10℃以下。下列叙述错误的是（ ）
A. 焙烤是通过加热杀死种子胚但不使淀粉酶失活
B. 蒸煮可以使淀粉分解，形成糖浆，并对糖浆灭菌
C. 酵母菌繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成
D. 发酵的温度和发酵的时间随啤酒品种和口味的要求不同而有所差异
【答案】B
【解析】
【分析】现代工业酿酒分为主发酵和后发酵，主发酵是主要的生产过程，主发酵后还要通过后发酵来促酒成熟、澄清。
【详解】A、焙烤是加热杀死种子的胚，但不使淀粉酶失活，A正确；
B、蒸煮过程中高温使淀粉酶失活，可以终止淀粉酶的进一步作用，并对糖浆灭菌，B错误；
C、酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都是在主发酵阶段完成，C正确；
D、发酵温度和发酵时间随着啤酒品种和口味要求的不同而有所差异，D正确。
故选B。
9. 红豆杉（2n=24）生长缓慢且紫杉醇（可制作抗癌药物）含量非常低。红豆杉和柴胡（2n=12）的亲缘关系较远，研究人员尝试运用体细胞杂交技术培育产生紫杉醇的柴胡。先用一定剂量的紫外线照射红豆杉原生质体，破坏部分染色体，再将其与未经紫外线照射的柴胡原生质体融合，得到两两融合的细胞，然后筛选杂种细胞，杂种细胞中两种植物细胞的染色体间排斥较为明显。下列说法错误的是（ ）
A. 融合前需将红豆杉细胞和柴胡细胞用纤维素酶和果胶酶处理
B. 可以用化学诱导剂PEG诱导红豆杉原生质体与柴胡原生质体融合
C. 融合细胞中染色体数为13～23的为杂种细胞，24条的可能不是杂种细胞
D. 应在能合成紫杉醇的杂交细胞中选择红豆杉染色体数较少的细胞进行培养
【答案】C
【解析】
【分析】导原生质体融合的方法基本可以分为两大类--物理法和化学法。物理法包括电融合法、离心法等;化学法包括聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2+-高pH融合法等。
【详解】A、植物细胞有细胞壁，所以在两种植物细胞融合前，需要用纤维素酶和果胶酶处理，A正确；
B、诱导植物细胞原生质体融合的方法：电融合法、PEG融合法，B正确；
C、先用一定剂量的紫外线照射红豆杉原生质体，破坏部分染色体，所以红豆杉染色体<24条，融合细胞中染色体数为两种植物细胞染色体数目的加和：13～36的为杂种细胞，24条的可能是杂种细胞，C错误；
D、杂种细胞中两种植物细胞的染色体间排斥较为明显，所以应在能合成紫杉醇的杂交细胞中选择红豆杉染色体数较少的细胞进行培养，这样染色体间的排斥较弱，D正确。
故选C。
10. 获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，研究人员对于无菌技术则围绕着如何避免杂菌污染展开讨论。下列操作中错误的是（ ）
A. 倒平板后，对空白培养基进行培养，可检测培养基是否被污染
B. 若培养皿盖和培养皿底之间溅有培养基，则不宜用此培养皿培养大肠杆菌
C. 高压蒸汽灭菌时的灭菌条件通常是121℃，15~30min
D. 在接种箱或超净工作台的使用过程中，可用紫外线照射30min来进行消毒
【答案】D
【解析】
【分析】实验室常用的灭菌方法：①灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌；②干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌；③高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100kPa,温度为121℃的条件下，维持15～30min。
【详解】A、实验室中检测培养基是否被污染，一般在倒平板后，对空白培养基进行培养，A正确；
B、空气中的微生物可能在皿盖和皿底之间的培养基上滋生，因此若培养皿盖和皿底之间溅有培养基，则不宜用此培养基培养大肠杆菌，B正确；
C、高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100kPa,温度为121℃的条件下，维持15～30min，C正确；
D、接种箱或超净工作台在使用前，可用紫外线照射30min,进行消毒，D错误。
故选D。
11. 辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域。辣椒素的获得途径如图。下列叙述正确的是（ ）
A. 需要先后用酒精和次氯酸钠对外植体进行灭菌，并均立即用无菌水冲洗
B. 外植体的形态学上、下端都可以插入培养基，不需要考虑方向
C. 获得脱毒苗可以选择的外植体有茎尖等，脱毒苗不具有更强的抗病毒能力
D. 愈伤组织是已分化的有固定形态的薄壁组织团块，具备分裂分化能力
【答案】C
【解析】
【分析】植物组织培养技术是指将离体的植物器官、组织或细胞等，在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术。其具体流程为：接种外植体→诱导愈伤组织→诱导生芽→诱导生根→移栽成活。在一定的激素和营养等条件的诱导下，外植体可脱分化形成愈伤组织。愈伤组织能重新分化成芽、根等器官，该过程称为再分化。
【详解】A、要先后用酒精和次氯酸钠对外植体进行消毒，并均立即用无菌水冲洗，A错误；
B、外植体的形态学下端插入培养基，方向不可反，B错误；
C、获得脱毒苗可以选择的外植体有茎尖等含病毒极少甚至无病毒的组织，脱毒苗不具有更强的抗病毒能力，C正确；
D、愈伤组织是外植体经脱分化形成的排列疏松而无规则的一种不定形态的薄壁组织团块，D错误。
故选C。
12. 《本草纲目》记载，樱桃具有利脾、止泻的功效。樱桃中的槲皮素等酚类化合物具有抗氧化活性。我国已经利用组织培养技术繁育樱桃优良品种，满足人们食用和药用需要。下列叙述错误的是（ ）
A. 应用微型繁殖技术可获得大量樱桃脱毒苗
B. 可以选用樱桃幼嫩的芽原基和叶原基作外植体
C. 富含色氨酸的培养基有利于樱桃幼嫩的芽合成生长素
D. 应用樱桃细胞培养可工厂化生产初生代谢产物槲皮素
【答案】D
【解析】
【分析】植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（微型繁殖、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。
【详解】A、应用微型繁殖技术采用茎尖作为外植体可获得大量樱桃脱毒苗，A正确；
B、由于芽原基和叶原基分裂能力旺盛，因而可以选用樱桃幼嫩的芽原基和叶原基作外植体，B正确；
C、生长素是由色氨酸经过一系列转变产生的，因此，用富含色氨酸的培养基有利于樱桃幼嫩的芽合成生长素，C正确；
D、应用樱桃细胞培养可工厂化生产次生代谢产物槲皮素，D错误。
故选D。
13. 小鼠的某种上皮细胞与某种淋巴细胞体外培养时，细胞周期基本相同，但上皮细胞在培养时，呈现扁平不规则多角形，且黏附在培养瓶内壁上；而淋巴细胞则常常悬浮在培养液中。下列叙述错误的是（ ）
A. 培养上皮细胞比淋巴细胞更容易观察及判断细胞是否具有接触抑制
B. 培养液中通常含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清
C. 恒温培养箱中的CO2浓度维持在5%左右，主要作用是维持培养液的pH值
D. 上皮细胞和淋巴细胞传代培养时，都可直接用离心法收集，然后分瓶培养
【答案】D
【解析】
【分析】动物细胞培养过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。
【详解】A、上皮细胞在培养时，呈现扁平不规则多角形，且粘附在培养瓶内壁上，而淋巴细胞则常常悬浮在培养液中，因此培养上皮细胞更易观察判断细胞是否具有接触抑制现象，A正确；
B、培养液中通常含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清（含有促进细胞增殖和生长的物质），B正确；
C、细胞培养应在含CO2恒温培养箱中进行，恒温培养箱中的CO2浓度维持在5%左右，以维持培养液的pH值，C正确；
D、上皮细胞属于贴壁细胞，需要重新用胰蛋白酶分散成单个细胞后再用离心法收集来传代培养，D错误。
故选D。
14. 研究发现，在失重条件下，心肌细胞培养96h后凋亡率显著增加。为探究其机制，科学家检测了模拟失重条件下培养96h的心肌细胞中相关基因的表达情况，结果如图所示。下列说法错误的是（ ）
A. 在进行心肌细胞培养时，为保证无毒的环境，需要定期更换培养液，清除代谢物
B. 体外培养心肌细胞所需的合成培养基中通常需要添加血清等一些天然成分
C. 动物细胞进行体外培养时，大多数种类细胞是悬浮在培养液中生长增殖的
D. 据图推测c~myc基因和CATA—4基因相对表达量的变化与失重条件下心肌细胞凋亡率增加密切相关
【答案】C
【解析】
【分析】动物细胞培养是指从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。
【详解】A、动物细胞培养的条件是无菌无毒、适宜的温度和pH、营养物质，相应的气体环境，为保证无毒的环境，需要定期更换培养液，清除代谢物，A正确；
B、由于人们对细胞所需营养物质尚未全部研究清楚，因此使用合成培养基时，通常需要加入血清等一些天然成分，B正确；
C、体外培养的动物细胞可以分为两类：一类细胞能够悬浮在培养液中生长增殖，另一类则需要贴附于某些基质表面才能生长增殖，大多数细胞属于这种类型，C错误；
D、在失重条件下，心肌细胞培养96h后凋亡率显著增加，据图可知c~myc基因和CATA-4基因相对表达量在失重条件下发生明显变化，可推测c~myc基因和CATA-4基因相对表达量的变化与失重条件下心肌细胞凋亡率增加密切相关，D正确。
故选C。
15. 2017年，某国批准了首例使用细胞核移植技术培育“三亲婴儿”的申请。其培育过程可选用如下技术路线。据图分析下列叙述错误的是（ ）
A. 该技术避免了母亲的细胞质遗传病基因传递给后代
B. 卵母细胞捐献者携带的红绿色盲基因能够遗传给“三亲婴儿”
C. 该技术涉及动物细胞培养、细胞核移植等操作
D. “三亲婴儿”同时拥有自己父亲、母亲及卵母细胞捐献者的部分基因
【答案】B
【解析】
【分析】分析题图：图示表示三亲婴儿的培育过程，由图可知，三亲婴儿的培育采用了动物细胞核移植技术、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术等。
【详解】A、母亲为“三亲婴儿”提供的是卵母细胞的细胞核，后代的线粒体基因来自捐献者的卵母细胞，故该技术可避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代，A正确；
B、捐献者携带的红绿色盲基因位于其细胞核内，而捐献者给三亲婴儿提供的是卵母细胞的细胞质，故捐献者携带的红绿色盲基因不能遗传给“三亲婴儿”，B错误；
C、由题图可知，该技术涉及动物细胞培养、动物细胞核移植、体外受精等操作，C正确；
D、“三亲婴儿”的细胞核基因一半来自母亲，一半来自父亲，线粒体基因来自于卵母细胞捐献者，D正确。
故选B。
二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有一项或多项符合题目要求。全部选对得3分，选对但不全得1分，有选错得0分。
16. 酱油起源于我国，至今已有数千年历史。大豆、小麦中的蛋白质、淀粉等有机物在米曲霉、酵母菌和乳酸菌等微生物及其酶系的作用下，被分解形成具有特殊色泽和风味的酱油。利用发酵工程生产酱油的流程如图。下列叙述正确的是（ ）
A. 可以用平板划线法对酵母菌进行分离和计数
B. 与传统发酵相比，利用发酵工程生产酱油可以提高产量和质量
C. 大豆中的蛋白质可为米曲霉的生长提供碳源和氮源
D. 发酵池发酵阶段使用食盐灭菌以保证酱油质量
【答案】BC
【解析】
【分析】由题图信息分析可知，制作酱油的过程中利用的微生物主要有米曲霉、酵母菌和乳酸菌等，其中米曲霉能够产生蛋白酶和脂肪酶，将蛋白质和脂肪分别水解成小分子的肽和氨基酸、甘油和脂肪酸。
【详解】A、平板划线法可以对微生物进行分离，但不能计数，A错误；
B、淀粉等有机物在米曲霉、酵母菌和乳酸菌等微生物及其酶系的作用下，利用发酵工程生产酱油可以提高产量和质量，B正确；
C、大豆中的蛋白质可为米曲霉的生长提供氮源、碳源等，C正确；
D、抑制杂菌污染和繁殖是保证酱油质量的重要因素，在发酵池中酵母菌产生的酒精能抑制杂菌的生长,乳酸菌产生的乳酸使发酵液呈酸性也能抑制杂菌的生长，同时往发酵池中添加的食盐也能抑制杂菌的生长，D错误。
故选BC。
17. 以苹果的幼茎为外植体，探究激素对愈伤组织诱导及愈伤组织褐变（褐变会使愈伤组织失去分裂和分化能力，甚至导致死亡）的影响，结果如下表。下列分析正确的是（ ）
A. 苹果幼茎愈伤组织褐变率与两种激素的浓度及其配比均有关
B. 苹果幼茎愈伤组织诱导率与两种激素的配比有关，与浓度无关
C. 高浓度的2，4-D容易导致苹果幼茎愈伤组织发生褐变
D. 上述组合中诱导脱分化的最佳激素组合为2，4-D +6-BA（2.0+0.5）mg/L
【答案】ACD
【解析】
【分析】结合题干分析表格数据可知，本实验探究不同浓度组合的2，4-D和6-BA对愈伤组织诱导及愈伤组织褐变的影响，实验自变量为2，4-D和6-BA的不同浓度组合，因变量为愈伤组织诱导率和褐变率，共设置了6组。
【详解】AB、当6-BA浓度不变，2，4-D升高时，诱导率、褐变率在升高；当两种激素配比升高时，诱导率和褐变率也在升高说明红豆杉幼茎愈伤组织褐变率与两种激素浓度比值、浓度高低均有关，A正确，B错误；
C、比较第1～3组，或第4～6组，在6-BA浓度一定的情况下，褐变率随2，4-D浓度的增大而增大，说明高浓度的2，4-D容易导致红豆杉幼茎愈伤组织发生褐变，C正确；
D、在6种组合中，第3组（2.0+0.5）愈伤组织诱导率为70%，且褐变率较低，为诱导脱分化的最佳激素组合，D正确。
故选ACD。
18. 下图为实验室培养和纯化大肠杆菌过程中部分操作步骤，下列说法正确的是（ ）
A. 制备①步骤使用的培养基的过程是先灭菌再调pH
B. ②③④步骤操作时只需要在接种前和划线结束后灼烧灭菌
C. 操作③到④的过程中，接种环共灼烧处理了6次
D. 接种结束后，将④倒置培养，皿底上标注菌种及接种日期等信息
【答案】CD
【解析】
【分析】由图可知，①是倒平板，②是用接种环沾取菌液，③是进行平板划线，④是培养。制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的基本过程为计算、称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板五个步骤。
【详解】A、①步骤表示倒平板，倒平板的培养基需要先调节pH后灭菌，A错误；
B、除了在接种前和划线结束后灼烧灭菌，在每次划线之间也需要灼烧灭菌，B错误；
C、接种环在每次接种前和接种结束后都要通过灼烧来灭菌，所以完成步骤④中5次划线操作前都要灼烧灭菌，接种结束后还需灼烧灭菌1次，防止造成污染，由此可见，完成步骤④共需灼烧接种环6次，C正确；
D、接种结束后，将④倒置培养，皿底上标注菌种及接种日期等信息，D正确。
故选CD。
19. 2023年1月，中国药监局批准单抗联合紫杉醇治疗晚期肺癌的方案。将特定的药物与单克隆抗体结合在一起，可特异性地杀死患者体内的癌细胞。下图为制备过程，据图分析，下列相关叙述正确的是（ ）
A. ①过程需要在小鼠的骨髓中获得细胞甲
B. ③和④的选择方法和原理相同
C. 过程⑤既可以在小鼠腹腔内进行，也可以在体外培养液中进行
D. 抗体的靶向作用使⑥过程具有高度的特异性
【答案】CD
【解析】
【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养:最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
【详解】A、细胞甲是B淋巴细胞，从小鼠的脾脏中获取，A错误；
B、③是用选择培养基选择，④是用抗体进行检测，B错误；
C、过程⑤既可以在小鼠腹腔内进行，也可以在体外培养液中进行，C正确；
D、抗体具有特异性，所以抗体的靶向作用使⑥过程具有高度的特异性D正确。
故选CD。
20. 科学家将0ct3、Sx2、c—Mye和Klf4基因通过逆转录病毒转入小鼠成纤维细胞中，然后在培养胚胎干细胞（ES细胞）的培养基上培养这些细胞。2~3周后，这些细胞显示出ES细胞的形态，具有活跃的分裂能力，称为iPS细胞，这一研究成果有望为人类某些疾病的治疗带来福音。下列有关该实验的分析错误的是（ ）
A. 理论上可以利用病人体内的iPS细胞诱导形成心脏，这样可以避免免疫排斥
B. 小鼠成纤维细胞和小鼠iPS细胞中的DNA相同，蛋白质完全不相同
C. 将小鼠成纤维细胞在培养基上培养作为对照，可排除ips细胞的产生不是培养基的作用
D. 用iPS进行人类某些疾病治疗可能存在风险
【答案】AB
【解析】
【分析】iPS为诱导多能干细胞，是指通过基因转染技术将某些转录因子导入动物或人的体细胞，使体细胞直接重构称为胚胎干细胞细胞样的多潜能细胞。iPS细胞建立的过程主要包括: ①分离和培养宿主细胞；②通过病毒或质粒载体将若干个多能性相关的基因导入宿主细胞；③将病毒感染后的细胞种植于饲养层细胞上，并于ES 细胞专用培养体系中培养， 同时在培养液中根据需要加入相应的小分子物质以促进重编程； ④出现ES样克隆后进行iPS 细胞的鉴定(细胞形态、表观遗传学、体外分化潜能等方面)。
【详解】A、iPS细胞是将0ct3、Sx2、c-Mye和Klf4基因通过逆转录病毒转入小鼠成纤维细胞中在体外培养基上形成的，不是体内本身存在的细胞，但若利用病人体内体细胞诱导形成iPS细胞，然后再诱导形成心脏，这样可以避免免疫排斥，A错误；
B、由题意可知，小鼠成纤维细胞转入逆转录病毒后在培养胚胎干细胞（ES细胞）的培养基上培养后得到了小鼠iPS细胞，因此细胞中的DNA相同，由于基因选择性表达，所以二者细胞中蛋白质不完全相同，B错误；
C、对照组可以排除干扰因素，所以要排除iPS细胞的产生不是由培养基作用的结果需将小鼠成纤维细胞直接在培养基上培养作为对照，C正确；
D、由于iPS细胞具有活跃的分裂能力，若不受控制可能转化为癌细胞，所以用它进行治疗时可能存在安全风险，D正确。
故选AB。
三、非选择题：本题共5小题，共55分。
21. 图1所示装置既可用于生产果酒，又可用于生产果醋;图2为腐乳的制作流程图;图3为某兴趣小组为了制作泡菜而查阅资料得到的相关指标变化示意图。回答下列相关问题:
（1）制备果醋时，原料可以是葡萄糖，也可以是酵母菌产生的____。若用图1所示的装置制备果醋，则开关1和开关2的控制操作是________________，原因是________________。
（2）图2中豆腐发酵的过程①主要长出______，经过该微生物的发酵，豆腐中的蛋白质被水解成______，所以腐乳味道鲜美并易于消化和吸收。
（3）据图3可知，在制作泡菜的过程中，亚硝酸盐含量的变化规律是_____________，pH下降的主要原因是_______________。制作泡菜时，需要经常向泡菜坛的水槽补充水，目的是______________。
【答案】（1） ①. 酒精##乙醇 ②. 开关1和开关2都需要打开 ③. 醋酸菌属于好氧菌，只能进行有氧呼吸，打开开关1可以向发酵瓶中充气，其余的气体需要通过开关2排出
（2） ①. 毛霉 ②. 小分子肽和氨基酸
（3） ①. 先增加后减少，最终维持在较低的水平 ②. 乳酸菌发酵过程中产生了乳酸 ③. 给泡菜坛内提供无氧的环境
【解析】
【分析】1、腐乳制作的基本原理就是控制毛霉的生长，即先创造适宜的条件让毛霉生长，利用毛霉进行前期发酵，当发酵到一定程度时，再加盐抑制毛霉的生长，毛霉等微生物产生的蛋白酶将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶将脂肪水解为甘油和脂肪酸，使腐乳相比豆腐含有更多的有机物种类，营养丰富，鲜香可口。
2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。最适温度为 30～35℃ 。
【小问1详解】
制备果醋时，原料可以是葡萄糖，也可以是酵母菌产生的酒精(或乙醇)，醋酸菌可将酒精(或乙醇)变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。果醋是严格的好氧菌，只能进行有氧呼吸，需要通入氧气，打开开关1可以向发酵瓶中充气，剩余的空气需要通过开关2排出，因此开关1和开关2都需要打开。
【小问2详解】
腐乳发酵的主要微生物是毛霉，图2中豆腐发酵的过程①主要长出毛霉。毛霉可以分泌蛋白酶，将蛋白质分解为小分子的肽和氨基酸，使腐乳具有一定的风味且易于消化和吸收。
【小问3详解】
据图3可知，亚硝酸盐先增加后减少，最终维持在较低的水平。由于乳酸菌发酵过程中产生了乳酸，使pH下降。泡菜发酵的主要微生物是乳酸菌，乳酸菌是厌氧菌，因此制作泡菜时，需要经常向泡菜坛的水槽补充水，目的是给泡菜坛内提供无氧的环境。
【点睛】本题结合图解，主要考查果醋发酵、腐乳的制作和泡菜制作的相关知识点，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构的能力。
22. 有机磷农药使用不当有时会造成瓜果蔬菜等食品农药残留超标，危害人类健康。某生物兴趣小组同学提出：土壤中可能存在高效降解有机磷农药的微生物。请回答下列问题：
（1）在制备固体培养基时需加入的常用凝固剂是___________。若培养基需要调节pH，则应在灭菌之___________（填“前”或“后”）调节。为了获得能降解有机磷农药的微生物菌种，可在被有机磷农药污染的土壤中取样，并在培养基中添加适量的___________进行选择培养。
（2）该小组在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板在适宜条件下先培养一段时间，这样做的目的是___________。
（3）如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，图B接种方法是____________。利用图A的方法在5个平板上各接种稀释倍数为103的菌液样品（涂布体积为0.2mL），培养一段时间后，平板上的菌落数分别为96个、100个、108个、112个、430个，则每升原菌液样品中的细菌数为___________个，用这种方法测定菌体密度时，实际活菌数量要比测得的数量多，原因是___________。
（4）将获得3种待选微生物菌种甲、乙、丙分别接种在1L含20mg有机磷农药的相同培养液中培养（培养液中其他营养物质充裕、条件适宜），观察从实验开始到微生物停止生长所用的时间，甲、乙、丙分别为32小时、45小时、16小时，则应选择微生物____________（填“甲”“乙”或“丙”）作为菌种进行后续培养。
【答案】（1） ①. 琼脂 ②. 前 ③. 有机磷农药
（2）检测培养基平板灭菌是否合格（或观察培养一段时间后的未接种的空白平板是否有菌落形成）
（3） ①. 平板划线法 ②. 5.2× 108 ③. 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落
（4）丙
【解析】
【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养，在线的开始部分微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【小问1详解】
在制备固体培养基时需加入的常用凝固剂是琼脂；制备培养基过程中，为了避免杂菌污染，应该先调节pH后灭菌； 因为要获得能降解有机磷农药的微生物菌种，所以要在添加了适量的有机磷农药的培养基上进行选择培养；
【小问2详解】
检测培养基平板灭菌是否合格的方法：将未接种的空白培养基在适宜条件下培养一段时间后观察，无菌落形成说明该培养基灭菌合格，有菌落形成就不合格；
【小问3详解】
图A菌落分布较均匀，说明接种方法是稀释涂布平板法，图B菌落集中呈线状，说明接种方法是平板划线法；为了保证结果准确，一般选择菌落数为30~300的平板进行计数，根据题意可知，每升原菌液样品中细菌数为（96+100+108+112）÷4÷0.2×1000×103=5.2 × 108个；当样品的稀释度足够高时，培养基表面一个活菌就生长为一个菌落，故用这种方法测定菌体密度时，由于存在少数两个或多个活菌细胞连在一起的现象，而平板上观察到的只是一个菌落，所以实际活菌数量要比测得的数量多；
【小问4详解】
微生物停止生长，说明有机磷农药被分解完，丙分解等量有机磷所用时间比甲、乙少，说明丙分解有机磷农药的能力比甲、乙强，因此应选择微生物丙作为菌种进行后续培养。
23. 同源四倍体的紫花苜被誉为“牧草之王”，但易造成家畜胀病；二倍体的百脉根因富含缩合单宁，饲喂时可防止家畜胀病的发生。某研究人员设计了下列技术路线，以期获得抗胀病的新型苜蓿。（注：IOA可抑制植物细胞呼吸第一阶段，R-6G可阻止线粒体的呼吸作用，二者有效抑制不同植物细胞正常代谢的临界浓度不同）
（1）据图可知，本研究主要利用的生物技术的原理是______。在实验前需通过预实验来探究R-6G或IOA使原生质体失去再生愈伤组织能力的临界浓度，设计思路是______。
（2）步骤①可采用化学法进行诱导，化学法除聚乙二醇融合法外，还有______法等。原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是_______。融合后的原生质体经过。______再生形成杂种细胞，进而经过②脱分化形成愈伤组织。
（3）步骤③先将生长良好的愈伤组织转接到诱导生芽培养基上，通常应在培养基中加入两类植物激素，其中起主要作用的是______。长出芽后，再将其转接到诱导生根培养基上，最终得到杂种植株。请判断：得到的杂种植株，理论上是否可育？并简要阐述理由：______
【答案】（1） ①. 细胞膜的流动性和植物细胞的全能性 ②. 将获取的原生质体分别放置在不同浓度的R-6G或IOA溶液中，培养一段时间后，观察原生质体再生情况
（2） ①. 高Ca2+-高pH融合 ②. 保持原生质体完整性 ③. 细胞壁
（3） ①. 细胞分裂素 ②. 可育，杂种植株细胞中含有成对的同源染色体
【解析】
【分析】植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞，进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。植物体细胞杂交依据的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。
【小问1详解】
由图可知，新型苜蓿的培育过程采用的是植物体细胞杂交技术，该生物技术的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性；在实验前需通过预实验来探究R-6G或IOA使原生质体失去再生愈伤组织能力的临界浓度，由于需要获得 具体的浓度，因此需要将获取的原生质体分别放置在不同浓度的R-6G或IOA溶液中，培养一段时间后，观察原生质体再生情况，根据再生情况获得各自的临界值。
【小问2详解】
步骤①可采用化学法进行诱导，其中化学方法除了聚乙二醇（PEG）融合法，还有高Ca2+—高pH融合法等。原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，保持原生质体完整性，防止原生质体吸水涨破。融合后的原生质体再生出新的细胞壁说明形成杂种细胞，即杂种细胞形成的标志是再生出细胞壁，进而经过②脱分化形成愈伤组织。
【小问3详解】
步骤③先将生长良好的愈伤组织转接到诱导生芽培养基上，通常应在培养基中加入两类植物激素，分别是生长素和细胞分裂素，其中起主要作用的是细胞分裂素。长出芽后，再将其转接到诱导生根培养基上，最终得到杂种植株。紫花苜蓿是同源四倍体，体细胞含有4个染色体组，百脉根是二倍体，体细胞含有2个染色体组，融合后得到的杂种细胞含有4+2=6个染色体组，可见，杂种植株细胞中含有成对的同源染色体，因而能进行正常的减数分裂过程，因而表现为可育。
24. 下科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛，如果要加速转基因奶牛的繁育，可以对此转基因奶牛进行克隆（如图所示）。请结合图示回答下列相关问题：
（1）在进行细胞培养之前，要对取自转基因奶牛的组织细胞进行分散处理，形成单个细胞，这个过程中需要利用________酶处理。
（2）在进行原代培养时，细胞增殖的方式是________。动物细胞的体外培养需要满足营养物质的供应，适宜的温度、pH和渗透压，________的环境以及气体环境。细胞培养所需气体主要有______。
（3）在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面________时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的________。此时，瓶壁上形成的是________层细胞。
（4）将进行培养的供体细胞注入去核的卵母细胞中，需要去除卵母细胞的细胞核，目的是_____。
（5）将重组细胞在培养液中培养成的重构胚移入受体母牛后，该母牛就会生出与供体奶牛遗传物质基本相同的犊牛，但也不是100%的复制，原因可能是_____。
（6）上述过程中涉及的动物细胞工程技术有________。
【答案】（1）胰蛋白(或胶原蛋白)
（2） ①. 有丝分裂 ②. 无菌、无毒 ③. 95％空气和5％CO2
（3） ①. 相互接触 ②. 接触抑制 ③. 单
（4）使克隆出的动物个体的遗传物质几乎全部来自供体细胞
（5）生物的性状受细胞核基因和细胞质基因共同控制；生物的性状还受环境因素的影响
（6）动物细胞核移植、动物细胞培养
【解析】
【分析】图示为转基因克隆奶牛的培育过程，该过程采用了动物细胞培养技术、动物体核移植技术、早期胚胎培养技术、胚胎移植技术。
【小问1详解】
常用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理动物组织细胞使其分散开来。
【小问2详解】
在进行原代培养时，细胞增殖的方式是有丝分裂。动物细胞的体外培养需要满足营养物质的供应，适宜的温度、pH和渗透压，无菌、无毒的环境以及气体环境。细胞培养所需气体主要有95％空气和5％CO2（二氧化碳的目的是维持培养液的PH）。
【小问3详解】
在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。此时，瓶壁上形成的是单层细胞。
【小问4详解】
去除卵母细胞的细胞核是因为使克隆出的动物个体的遗传物质几乎全部来自供体细胞。
【小问5详解】
生物的性状是由细胞核基因和细胞质基因共同作用的结果，同时，生物的性状还受环境的影响，因此，克隆动物不可能是供体奶牛100%的复制品。
【小问6详解】
图示为转基因克隆奶牛的培育过程，该过程采用了动物细胞培养技术、动物体核移植技术、早期胚胎培养技术、胚胎移植技术，而该克隆动物的培育过程中涉及的动物细胞工程技术有：动物细胞核移植、动物细胞培养技术。
25. 使用细胞毒素类药物治疗乳腺癌可以有效杀死癌细胞，但是对正常细胞同样有杀伤作用。为降低细胞毒素类药物的副作用，研究人员通过单克隆抗体生产抗体—药物偶联物（ADC），实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。ADC的生产过程如图1所示，ADC对乳腺癌细胞和正常细胞的作用如图2所示。回答下列问题：
（1）根据题图信息分析，向小鼠注射的特定抗原来自________细胞，注射该抗原的目的是________。
（2）图1中①过程可使用的不同于植物细胞融合时的方法是________，产生的细胞用特定培养基进行筛选，在该培养基上能够生长的是________细胞，该种细胞的特点是________。
（3）ADC能降低细胞毒素类药物的副作用，是因为________能精确定位乳腺癌细胞，该过程依赖的原理是________。当ADC进入乳腺癌细胞后，细胞中的________会将其水解，释放的细胞毒素作用于细胞核，进而诱导基因的表达，使癌细胞死亡。
【答案】（1） ①. 乳腺癌 ②. 诱导小鼠产生能够分泌抗乳腺癌细胞抗体的B淋巴细胞
（2） ①. 灭活病毒诱导法 ②. 杂交瘤 ③. 既能大量增殖，又能产生特定抗体
（3） ①. 抗乳腺癌细胞的单克隆抗体 ②. 抗原和抗体的特异性识别并结合 ③. 溶酶体
【解析】
【分析】单克隆抗体制备过程：用特定抗原免疫，从小鼠的脾中得到能产生特定抗体的B淋巴细胞→诱导与培养好的骨髓瘤细胞融合→用特定的选择培养基进行筛选：在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长→对选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞→将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞在体外大规模培养或者注射小鼠腹腔中增殖→从细胞培养液或小鼠腹水中获取大量的单克隆抗体。
由图可知，①表示动物细胞的融合，②表示筛选杂交瘤细胞，③表示克隆化培养和专一抗体检测，④表示将单克隆抗体和治疗乳腺癌的药物结合形成ADC。
【小问1详解】
本实验要生产乳腺癌的单克隆抗体，应该选择乳腺癌细胞作为抗原对小鼠进行免疫处理，注射乳腺癌细胞作为抗原能够诱导小鼠产生能够分泌抗乳腺癌细胞抗体的B淋巴细胞。
【小问2详解】
①表示动物细胞的融合，需要将小鼠B淋巴细胞与鼠的骨髓瘤细胞融合，该过程可以使用灭活病毒诱导法，而诱导植物原生质体融合时，不能使用灭活病毒诱导法。产生的细胞用特定培养基进行筛选，在该培养基上，未融合的细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞能正常生长，杂交瘤细胞既能大量增殖，又能产生特定抗体。
【小问3详解】
抗体——药物偶联物（ADC）通过抗乳腺癌细胞的单克隆抗体精确定位乳腺癌细胞，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤，从而降低细胞毒素类药物的副作用，该过程依赖的原理是抗原和抗体的特异性识别并结合。ADC进入乳腺癌细胞后，细胞中的溶酶体可将其水解，释放出的药物作用于细胞核，最终可导致该细胞凋亡。2，4-D（mg/L）+6-BA（mg/L）
1.0+0.5
2.0+0.5
3.0+0.5
1.0+1.0
2.0+1.0
3.0+1.0
诱导率（%）
0
70
100
0
70
100
褐变率（%）
0
62.5
100
0
87.5
100
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