广东省东莞外国语学校，寮步镇外国语学校2023-2024学年高二下学期4月月考生物试题（原卷版+解析版）

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一、单选题（1-12题每题2分，13-16题每题4分，共40分）
1. “葡萄美酒夜光杯，欲饮琵琶马上催。”葡萄酒中含有多种酚类化合物、花青素等，具有抗氧化作用，能够减少自由基对身体的损伤，延缓衰老，因而广受人们的喜爱。酿制葡萄酒时，向培养基中添加一定浓度的葡萄糖溶液有利于发酵的进行。研究发现，自酿的葡萄酒中通常含有甲醇，甲醇主要来自原料中果胶的分解、氨基酸脱氧和发酵原料的霉变。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 自酿葡萄酒时，主要利用葡萄皮表面附着的野生酵母菌来进行发酵
B. 酿制葡萄酒时，葡萄糖浓度越高，由于能量充足，酵母菌的繁殖速度越快
C. 酿制葡萄酒时，前期通入空气有利于酵母菌进行有氧呼吸，从而大量繁殖
D. 改进葡萄酒酿制方法，如增加过滤、杀菌等工序，可使葡萄酒中的甲醇含量减少
【答案】B
【解析】
【分析】酵母菌是一类单细胞真菌，能以多种糖类作为营养物质和能量的来源，因此在一些含糖量较高的水果、蔬菜表面经常可以发现酵母菌的存在。酵母菌是兼性厌氧微生物，在无氧条件下能进行酒精发酵，可用于酿酒、制作馒头和面包等。
【详解】A、家庭自酿葡萄酒时，由于葡萄皮上有酵母菌，可以利用葡萄皮表面附着的野生酵母菌来进行发酵，A正确；
B、酿制葡萄酒时，葡萄糖可以作为酵母菌呼吸作用的底物，但并不是葡萄糖浓度越高越好，葡萄糖浓度过高，会导致溶液渗透压过高，抑制酵母菌的增殖，B错误；
C、酵母菌是兼性厌氧微生物，在酿制葡萄酒时，前期通入空气有利于酵母菌进行有氧呼吸，产生更多的能量，从而大量繁殖，C正确；
D、在酿酒过程中，改进葡萄酒酿制方法，如增加过滤、杀菌等工序，使杂菌数量减少、葡萄酒中的甲醇含量减少，D正确。
故选B。
2. 发酵工程可实现发酵产品的大规模生产，下图为发酵工程的基本环节，相关叙述正确的是（ ）

A. ①、②可以是诱变育种或基因工程育种
B. ③是发酵工程的中心环节
C. 产物浓度的检测必须在发酵结束后进行
D. 发酵条件为室温和近中性的pH等
【答案】A
【解析】
【分析】发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术。
【详解】A、发酵工程的基本环节有选育菌种、扩大培养、配制培养基、灭菌、接种和发酵、产品的分离和纯化，其中优良菌种可以从自然界中筛选出来，也可以通过诱变育种或基因工程育种获得，因此①、②可以是诱变育种或基因工程育种，A正确；
B、发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节，③是培养基的灭菌，不是发酵工程的中心环节，B错误；
C、在发酵过程中，要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度，以了解发酵进程，同时要严格控制发酵条件，如温度、pH、溶解氧，故可能需要适时添加营养物质等，C错误；
D、不同微生物的最适温度和pH 值有所不同，因此不同发酵过程温度和pH也有所不同，D错误。
故选A。
3. 某同学在家里进行了提取花椰菜DNA的实验。取绿色的花芽部分，充分研磨获得匀浆；再加入含有中性洗涤剂的浓度约为2ml/L的盐水，其作用是[甲]，以释放细胞核和细胞器[乙]中的DNA；静置10min后过滤，然后将滤液轻轻倒入[丙]溶液中，出现白色絮状物。下列选项中，甲、乙、丙对应的内容，正确的是（ ）
A. AB. BC. CD. D
【答案】C
【解析】
【分析】蛋白酶能水解蛋白质，但对DNA没有影响。大多数蛋白质不能忍受60-80℃的高温，而DNA在80℃以上才会变性。洗涤剂能够瓦解细胞膜，但对DNA没有影响。将处理后的滤液过滤，加入与滤液体积相等的、冷却的酒精溶液（体积分数为95%），静置2-3min，溶液中会出现白色丝状物，这就是粗提取的DNA。
【详解】取绿色的花芽部分，充分研磨获得匀浆是为了破坏细胞膜；再加入含有中性洗涤剂的浓度约为2ml/L的盐水是为了溶解DNA；细胞器线粒体、叶绿体中有DNA；向含DNA的滤液中加冷酒精搅拌后有白色絮状物析出，C符合题意，ABD不符合题意。
故选C。
4. 单倍体胚胎干细胞是指只含一套染色体，但拥有类似于正常干细胞分裂分化能力的细胞群。利用小鼠建立单倍体胚胎干细胞的操作如图所示。下列叙述不正确的是（ ）
A. 体外受精前应将卵母细胞培养至M Ⅰ中期
B. 建立的单倍体胚胎干细胞中只含一条性染色体X或Y
C. 上述过程涉及动物细胞培养、体外受精和核移植等操作
D. 理论上可用物质激活卵母细胞完成M Ⅱ实现由①直接转变为④
【答案】ABD
【解析】
【分析】1、哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或从原始性腺中分离出来。
2、具有胚胎细胞的特性，在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养的条件下，可以增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可进行遗传改造。
【详解】A、外受精前应将卵母细胞培养至减数分裂Ⅱ中期，A错误；
B、精子中含有的性染色体为X染色体或Y染色体，卵细胞中含有的性染色体为X染色体，由图可知，在建立单倍体胚胎干细胞过程中，是去除雄原核，所以获得的单倍体干细胞中含有的性染色体是X染色体，而不含Y染色体，B错误；
C、由图可知，在培养单倍体胚胎干细胞的过程中，首先发生体外受精，然后通过核移植去除雄原核，再对去除雄原核的细胞进行培养，C正确；
D、激活卵母细胞完成MⅡ得到的是卵细胞和极体，二者都不具备分裂能力，所以不能得到单倍体胚胎干细胞，D错误。
故选ABD。
5. 我国科学家突破重重困难，重复多次下图操作过程，获得了两只克隆猴——“中中”和“华华”，率先将体细胞核移植技术成功地应用于非人灵长类动物的克隆。下列有关说法正确的是（ ）
A. 灭活病毒处理是为了促进体细胞核膜与卵母细胞的细胞膜融合
B. 重构胚的培养需要一定浓度CO2、适宜的温度和pH等条件
C. 用胎猴的体细胞进行克隆的成功率显著低于成年猴的体细胞
D. 克隆猴“中中”和“华华”遗传物质和性状表现完全相同
【答案】B
【解析】
【分析】克隆是用体细作为供体细胞进行的细胞核移植，它利用了胚胎细胞进行核移植的传统方式，没有经过雌雄交配，不需要精子和卵子的结合，只需要从动物身上提取一个细胞（供体细胞），从屠宰场的母畜的卵巢内采集卵母细胞，培养至减数第二次分裂的中期，然后显微操作去除卵母细胞的细胞核，将供体细胞核移入除去核的卵母细胞中，使其重组构建一个重组细胞，并体外培养发育成一个新的胚胎，再将胚胎移植到雌性动物子宫内，就可以孕育出新的个体，“中中”和“华华”的获得就是利用了克隆技术。
【详解】A、灭活病毒处理是为了促进体细胞的细胞膜与卵母细胞的细胞膜融合，A错误；
B、 动物组织培养需要一定浓度CO2、适宜的温度和pH等条件，B正确；
C、用胎猴的体细胞进行克隆的成功率显著高于成年猴的体细胞，C错误；
D、遗传物质相同的个体形状表现不一定完全相同，还受环境因素的影响，D错误。
故选B。
6. 通过细胞培养构建的人造皮肤在治疗大面积烧伤时具有较好的应用前景，下列叙述正确的是（ ）
A. 选择非患者细胞进行培养获得人造皮肤，可以降低免疫排斥的发生
B. 细胞培养获得人造皮肤的过程中，可加入纤维素酶处理贴壁的细胞
C. 细胞培养时需置于含有95%O2和5%CO2的混合气体的CO2培养箱
D. 由于对细胞所需的营养物质未全部研究清楚，培养时通常加入血清
【答案】D
【解析】
【分析】动物细胞培养的条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素，定期更换培养液，以清除代谢废物；（2）营养物质：葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质；（3）温度和pH；（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）5%的CO2（维持培养液的pH）。
【详解】A、选择患者自身的细胞进行培养获得人造皮肤，可以避免免疫排斥的发生，选择非患者细胞进行培养获得人造皮肤，一般会发生免疫排斥反应，A错误；
B、细胞培养获得人造皮肤的过程中，可加入胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理贴壁的细胞，B错误；
C、动物细胞培养的气体环境是5%CO2和95%空气，CO2可维持pH，C错误；
D、在进行动物细胞培养时，培养液中通常需加入血清、血浆等一些天然成分，主要目的是为细胞提供促生长因子，以补充细胞生长和增殖过程中所需的营养物质，D正确。
故选D。
7. 聚合酶链式反应（PCR）能实现对相应核苷酸序列的大量复制，相关叙述正确的是（ ）
A. 该技术需要用到引物、脱氧核苷酸、解旋酶等
B. 复性是为了使解旋后的两条链恢复双螺旋结构
C. PCR的产物通常用抗原－抗体杂交技术进行鉴定
D. 为激活相应酶，PCR反应缓冲液中需加入Mg2+
【答案】D
【解析】
【分析】PCR技术：1、概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。2、原理：DNA复制。3、前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。4、条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）5、过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。
【详解】A、PCR技术不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开，A错误；
B、复性是为了使解旋后的两条链与引物碱基互补配对，B错误；
C、PCR的产物为DNA，故通常用DNA分子杂交技术进行鉴定，C错误；
D、Mg2+可激活热稳定DNA聚合酶，故PCR反应缓冲液中需加入Mg2+，D正确。
故选D。
8. 某同学想从泡菜汁中筛选耐高盐乳酸菌，进行了如下实验：取泡菜汁样品，划线接种于一定NaCl浓度梯度的培养基，经培养得到了单菌落。下列叙述正确的是（ ）
A. 培养基pH需偏碱性
B. 筛选得到的微生物不一定是乳酸菌
C. 需在有氧条件下培养
D. 泡菜汁需多次稀释后才能划线接种
【答案】B
【解析】
【分析】培养基的营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或弱碱性，培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件。
【详解】A、乳酸菌为细菌，培养基PH需调至中性或弱碱性，A错误；
B、参与泡菜发酵的微生物有乳杆菌、短乳杆菌和明串珠菌等，所以分离得到的微生物除了乳酸菌，还会有其他耐高盐的微生物，B正确；
C、乳酸菌是厌氧菌，需要在无氧条件下培养，C错误；
D、平板划线接种时不需要稀释，D错误
故选B。
9. 近期感染支原体的人数较往年有明显增加。检测支原体常用的方法为：配制支原体培养基（含酵母浸粉、葡萄糖、琼脂等），灭菌并冷却至50℃，加入适量的小牛血清和青霉素，倒平板；将待检样品接种于平板后与空白平板一起培养。下列叙述合理的是（ ）
A. 酵母浸粉、葡萄糖均为支原体提供了碳源和氮源
B. 临床上可以用青霉素类药物有效治疗支原体肺炎
C. 小牛血清既可提供特殊营养物质又可起酸碱缓冲作用
D. 接种的平板有菌落生长即可表明待测样品中有支原体
【答案】C
【解析】
【分析】微生物的营养物质主要有碳源、氮源、水和无机盐等，有的微生物还需要特殊的营养物质和条件，如维生素、生长因子等。
【详解】A、酵母浸粉、葡萄糖均为支原体提供了碳源，但葡萄糖不能提供氮源，A错误；
B、青霉素类药物主要通过抑制细菌细胞壁的合成，从而抑制细菌的繁殖，但支原体是原核生物，没有细胞壁，所以临床上不能用青霉素类药物有效治疗支原体肺炎，B错误；
C、血清可以补充合成培养基中缺乏的物质，小牛血清既可提供基础培养基中没有的特殊营养物质，血清中还含有缓冲物质，起酸碱缓冲作用调节pH值，C正确；
D、接种的平板有菌落生长，可能是真菌形成的菌落，D错误。
故选C。
10. 常规PCR只能扩增两引物间的DNA区段，要扩增已知DNA序列两侧的未知DNA序列，可用反向PCR技术。反向PCR技术扩增的原理如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A. 酶切阶段，L中不能含有酶切时所选限制酶的识别序列
B. 环化阶段，可选用E.cli DNA连接酶或T4 DNA连接酶
C. 图中引物，应选择引物1和引物4，且二者间不能互补配对
D. PCR扩增，每轮循环前应加入限制酶将环状DNA切割成线状
【答案】D
【解析】
【分析】PCR只能扩增两端序列已知的基因片段，反向PCR可扩增中间一段已知序列，而两端序列未知的基因片段。酶切时用限制性内切酶，环化时用DNA链接酶，再用引物和DNA聚合酶扩增。在环化后，通过一对方向相反的引物实现已知序列两侧基因序列的扩增。
【详解】A、在酶切阶段，已知序列L中不能含有酶切时所选限制酶的识别序列，不然会将已知序列L切断，造成序列识别混乱，A正确；
B、T4 DNA连接酶或E.cli DNA连接酶都可以用来连接黏性末端，因此环化阶段，可选用E.cli DNA连接酶或T4 DNA连接酶，B正确；
C、PCR过程需要两种引物，能分别与目的基因两条链的3'端通过碱基互补配对结合，为保证延伸的是已知序列两侧的未知序列，应该选择引物1和引物4，且二者间不能互补配对，C正确；
D、PCR的扩增只需要第一次循环前加入足够的限制酶，并不需要每轮都加入，D错误。
故选D。
11. 我国中科院海洋所的科研工作者首次发现能有效降解聚乙烯（分子式（C2H4）n）塑料的海洋真菌，有望解决塑料不能降解带来的生态问题。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 应在富含聚乙烯的海洋环境中筛选所需的海洋真菌
B. 用接种环在培养基表面对样品连续划线、逐步稀释，纯化海洋微生物
C. 筛选和纯化该类微生物的培养基应以聚乙烯为唯一氮源
D. 后期可进一步利用基因工程方法增强微生物的降解聚乙烯的能力
【答案】C
【解析】
【分析】1、培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质；培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物种和氧气的要求；在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基。
2、微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线,在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】A、在自然界中寻找目的菌株时，要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找，应在富含聚乙烯的海洋环境中筛选所需的海洋真菌，A正确；
B、用接种环在培养基表面对样品连续划线、逐步稀释，纯化海洋微生物，B正确；
C、筛选和纯化该类微生物的培养基应以聚乙烯为唯一碳源，C错误；
D、后期可进一步利用基因工程方法增强微生物的降解聚乙烯的能力，D正确。
故选C。
12. 下列关于动物细胞工程和胚胎工程的叙述，错误的是（ ）
A. 抗体—药物偶联物（ADC）中单克隆抗体主要发挥靶向运输作用
B. 试管牛所采用的技术中包含克隆技术和体外受精、胚胎移植
C. 胚胎干细胞培养需在CO2培养箱中进行
D. 将小鼠桑葚胚分割成2等份获得同卵双胎的过程属于无性生殖
【答案】B
【解析】
【分析】动物细胞工程常用的技术手段有动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等，其中动物细胞培养技术是其他动物工程技术的基础。
【详解】A、抗体具有特异性，可以特异性的结合抗原，所以抗体一药物偶联物（ADC）中单克隆抗体主要发挥靶向运输作用，A正确；
B、克试管牛技术涉及体外受精、动物细胞培养、胚胎移植等过程，B错误；
C、胚胎干细胞的培养需在CO2培养箱中进行，C正确；
D、将小鼠桑葚胚分割成2等份获得同卵双胎的过程可以看做动物无性繁殖或克隆的方法，D正确。
故选B。
13. CD47是一种跨膜糖蛋白，肺癌、结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47含量明显高于正常细胞。为此科学家研究并制备了抗CD47单克隆抗体，以抑制肿瘤细胞表面CD47蛋白的活性，从而促进巨噬细胞吞噬肿瘤细胞。提取肿瘤细胞的mRNA，通过RT-PCR技术扩增获得大量CD47基因，再利用基因工程、单克隆抗体制备以获得大量抗CD47单克隆抗体。相关叙述正确的是（ ）
A. RT-PCR过程需要逆转录酶和耐高温的DNA聚合酶
B. CD47基因必须插入重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制
C. 细胞B是从经免疫处理的小鼠体内获取的B淋巴细胞
D. 上述方法生产的CD47与肿瘤细胞表面的CD47往往具有不同的结构
【答案】ACD
【解析】
【分析】 单克隆抗体的制备：注射特定抗原、从小鼠的脾脏中获得产生特定抗体的B淋巴细胞、将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合、用特定选择培养基筛选出杂交瘤细胞、再利用克隆化培养和抗体检测获得足够多数量的能分泌所需抗体的细胞、将该细胞在体外培养或者注射到小鼠腹腔内增殖、从细胞培养液或小鼠腹水中获取大量单克隆抗体。
【详解】A、提取肿瘤细胞的mRNA，通过RT-PCR技术扩增获得大量CD47基因，需要用逆转录酶以RNA为模板合成DNA片段，再利用耐高温的DNA聚合酶进行基因扩增，A正确；
B、CD47基因必须插入复制原点才能进行复制，B错误；
C、细胞B是从经免疫处理的小鼠体内获取的B淋巴细胞，能够产生抗CD47抗体，C正确；
D、大肠杆菌为原核生物，其细胞中没有内质网和高尔基体，因此大肠杆菌分泌的CD47蛋白，其形成过程中没有经过内质网和高尔基体的加工；肿瘤细胞中有内质网和高尔基体，所以肿瘤细胞产生的CD47，其形成过程经过了内质网和高尔基体的加工，因此两种不同方式合成的蛋白质往往具有不同的结构，D正确。
故选ACD。
14. 王村醋属于“山东省非物质文化遗产”，它以小米为主要原料， 经酵母菌、醋酸菌等微生物发酵而成。明嘉靖二十五年王村就有“春分酿酒拌醋”之说，有经验的酿醋师可通过附耳听瓮判断发酵的程度。王村醋传统酿造工艺如下表，下列说法错误的是（ ）
A. “春分酿酒拌醋”说明温度影响醋酸发酵B. “听瓮”是通过醋酸菌产生CO₂的状况推测发酵程度
C. 拌曲时温度过高可导致曲中的微生物死亡D. 若不“手抄醅”，则醋酸菌的呼吸强度下降
【答案】B
【解析】
【分析】1、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18~25℃；反应中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。
2、果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解为醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30~35℃。
【详解】A、“春分酿酒拌醋”说明温度影响醋酸发酵，A正确；
B、“听瓮”是通过缸内细微的气泡声，判断酒曲发酵的程度，B错误；
C、拌曲时将煮好的米摊开散热， 待温凉至38℃时加曲抖匀，是因为温度过高可导致曲中的微生物死亡，C正确；
D、醋酸菌是好氧菌，用手抄醅， 有利于醋醅的空气流通，若不“手抄醅”，则醋酸菌的呼吸强度下降，D正确。
故选B。
15. 瘤胃是牛、羊等反刍动物具有的特殊的器官，其中的微生物多为厌氧菌，接触空气后会死亡。已知刚果红可以与纤维素形成红色复合物，但不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。研究人员对瘤胃中的纤维素分解菌进行了分离、鉴定，过程如下图所示。下列有关说法正确的是（ ）
A. 实验时，盛有水或者培养基的摇瓶通常采用巴氏消毒法进行除菌处理
B. 为分离出纤维素分解菌，甲、乙、丙培养基应以纤维素为唯一营养成分
C. 通过向乙和丁培养基中加入刚果红，可对纤维素分解菌进行鉴定和计数
D. 在甲、乙、丙、丁的培养基表面加入一层无菌石蜡能有效获得目标菌落
【答案】D
【解析】
【分析】牛、羊等反刍动物具有特殊的瘤胃，在瘤胃中生活着多种厌氧微生物，其中许多微生物能分解纤维素。在筛选和分离降解纤维素的微生物时，确保能够分离得到目的微生物，一般先将样液进行选择培养，以增大样液中目的微生物的数量。然后用固体培养基培养，分离得到单个菌落。刚果红是一种染色剂，可与纤维素等多糖形成红色复合物。如果培养基中唯一的碳源纤维素被降解了，那么菌落周边就会出现没有红色的透明圈。且透明圈越大，说明微生物降解纤维素的能力越强。
【详解】A、实验时，盛有水或者培养基的摇瓶通常采用高压蒸汽灭菌法进行除菌处理，A错误 ；
B、为分离出纤维素分解菌，甲、乙、丙培养基应以纤维素为唯一碳源，还需要添加氮源等营养成分，B错误；
C、由图可知，将菌液接种到乙上所用的方法是平板划线法，不能用于计数，C错误；
D、牛、羊等反刍动物具有特殊的瘤胃，在瘤胃中生活着多种厌氧微生物，在甲、乙、丙、丁的培养基表面加入一层无菌石蜡能有效获得目标菌落，D正确。
故选D。
16. 杂交育种是水稻育种的重要途径，但不同品种的水稻之间的杂交种常有育性下降的问题。已知水稻8号染色体上有一对等位基因T/t，4号染色体上有一对等位基因G/g，在花粉发育过程中，T或G基因表达对花粉发育重要的蛋白质，t和g基因无法表达有功能的蛋白质。研究人员选取部分植株，通过PCR扩增相关基因后，进行电泳检测，得到下图条带。有关说法错误的是（ ）

注：图A检测T/t基因，图B检测G/g基因，①②个体花粉发育完全正常，④个体花粉有3/4发育正常
A. T/t和G/g两对基因的遗传遵循自由组合定律
B. 杂交种育性下降的原因可能是基因型为tg的花粉发育不正常
C. ③⑤⑥个体中，1/2花粉发育正常的个体有③⑥
D. ④个体自交，后代有8种基因型，花粉发育完全正常的个体占7/16
【答案】D
【解析】
【分析】题图分析：电泳图可知图A检测T/t基因，图B检测G/g基因，图A中两条电泳带的一定是T和t，图B中两条电泳带的一定是G和g，又图中①②个体花粉发育完全正常，则只有图A中上面的条带代表t，下面的条带代表T，图B中上面条带代表G，下面条带代表g。
【详解】A、根据题意“研究人员发现水稻8号染色体上有一对等位基因T/t，4号染色体上有一对等位基因G/g”，这两对等位基因分别位于两对同源染色体上，T/t和G/g基因的遗传遵循基因的自由组合定律，A正确；
B、杂交种如TtGg，其产生的花粉基因型为1/4TG、1/4Tg、1/4tG、1/4tg，有3/4的花粉发育正常；根据题干信息，T或G基因表达对花粉发育重要的蛋白质，t和g基因无法表达有功能的蛋白质，则是基因型为tg的花粉发育不正常导致杂交种育性下降，B正确；
C、由电泳图中图A检测T/t基因，图B检测G/g基因，图A中两条电泳带的一定是T和t，图B中两条电泳带的一定是G和g，又图中①②个体花粉发育完全正常，则只有图A中上面的条带代表t，下面的条带代表T，图B中上面条带代表G，下面条带代表g，即①②③④⑤⑥个体的基因型分别为TtGG、TTGg、ttGg、TtGg、TTGG、ttTg，其中1/2花粉发育正常的个体的基因型是ttGg（③）、ttTg（⑥），C正确；
D、④的基因型为TtGg，该个体自交，雌配子基因型1/4TG、1/4Tg、1/4tG、1/4tg，雄配子基因型为1/3TG、1/3Tg、1/3tG，后代的基因型为1/12TTGG、2/12TtGG、2/12TTGg、3/12TtGg、1/12TTgg、1/12Ttgg、1/12ttGg、1/12ttGG共8种，这些后代基因型花粉全部正常的个体是1/12TTGG、2/12TtGG、2/12TTGg、1/12TTgg、1/12ttGG，占7/12，D错误。
故选D。
二、非选择题（共60分）
17. 回答传统发酵技术应用中的有关问题：
（1）下图为酿制葡萄酒的两个简易装置，请据图分析回答：

①果酒的制作离不开酵母菌，它的新陈代谢类型是____________；在葡萄酒的自然发酵 过程中，酵母菌的来源是_____________________________。
②葡萄汁装入发酵瓶时，要留有大约1/3 的空间，原因是：______________。与乙装置相比，甲装置的优点是__________________。
③如果乙装置忘记盖上盖子，一段时间后会变酸，请写出与此有关的化学反应式： ___________________________。
（2）腐乳的制作中多种微生物参与了该发酵过程，其中起主要作用的微生物是_______，其产生的蛋白酶可将豆腐中的蛋白质水解为小分子肽和_________；腐乳制作的后期可加入由酒和多种香辛料配置而成的卤汤。卤汤具有一定的_________作用外，还能使腐乳具有独特的风味。
【答案】（1） ①. 异养兼性厌氧型 ②. 附着在葡萄皮上的野生型酵母菌 ③. 为酵母菌大量繁殖提供适量的氧气，防止发酵旺盛时汁液溢出 ④. 既能及时吸收（发酵产生的）CO2，又能减少被杂菌污染的机会 ⑤. C2H5OH+O2CH3COOH+H2O+能量
（2） ①. 毛霉 ②. 氨基酸 ③. 防腐杀菌
【解析】
【分析】1、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。
2、参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。
【小问1详解】
①酵母菌的新陈代谢类型是异养兼性厌氧型，在葡萄酒的自然发酵过程中，酵母菌的来源是附着在葡萄皮上的野生型酵母菌。
②发酵瓶中留1/3的空间的目的是为酵母菌大量繁殖提供适量的氧气，防止发酵旺盛时汁液溢出。与乙装置相比，甲装置的优点是既能及时吸收（发酵产生的）CO2，又能减少松瓶盖时被杂菌污染的机会。
③乙瓶中一段时间后会变酸，说明有醋酸形成，相关化学反应式为C2H5OH+O2CH3COOH+H2O+能量。
【小问2详解】
腐乳的制作过程中有多种微生物参与，如酵母菌、毛霉等，其中起主要作用的是毛霉，它产生的蛋白酶可将豆腐中的蛋白质水解成小分子肽和氨基酸。腐乳制作的后期可加入由酒和多种香辛料配置而成的卤汤。卤汤具有一定的防腐杀菌作用外，还能使腐乳具有独特的风味。
18. 研究表明，在转录因子C-Myc的激活作用下，胃癌细胞内会大量形成某种长链非编码RNA（用LncRNA-a表示），LncRNA-a通过与某单链小分子RNA（用miRNA-1表示，能与mRNA靶向结合并使其降解）靶向结合来调控SPZI基因的表达，进而加速肿瘤生长及转移，作用机理如下图。据此回答：
（1）在胃癌细胞内，C-Myc激活LncRNA-a基因，在___酶的作用下，以___为模板合成大量的LncRNA-a。
（2）LncRNA-a与SPZ1 mRNA在细胞中通过对___的竞争性结合，从而影响SPZ1基因的___过程，
（3）据图分析，当细胞内LncRNA-a过量表达时会加速患者胃癌肿瘤生长的原因可能是___。
（4）根据上述信息，除了减少LncRNA-a的表达之外，请尝试提出两条治疗胃癌患者的思路___。
【答案】（1） ①. RNA聚合酶 ②. LncRNA-a基因的一条链
（2） ①. miRNA-1 ②. 翻译（或表达）
（3）LncRNA-a过量表达，导致miRNA-1与SPZ/基因mRNA结合受阻，SPZI基因过量表达出相应蛋白抑制细胞凋亡，从而促进肿瘤细胞的生长
（4）促进miRNA-1的合成：降低SPZI基因的表达量等
【解析】
【分析】基因表达包括转录和翻译两个过程，其中转录是以DNA的一条链为模板合成RNA的过程，该过程主要在细胞核中进行，需要RNA聚合酶参与；翻译是以mRNA为模板合成蛋白质的过程，该过程发生在核糖体上，需要以氨基酸为原料，还需要酶、能量和tRNA。
【小问1详解】
转录是以DNA的一条链为模板合成RNA的过程，该过程主要在细胞核中进行，需要RNA聚合酶参与，因此LncRNA-a基因转录形成LncRNA-a，需要RNA聚合酶的参与，以LncRNA-a基因的一条链。
【小问2详解】
据图可知，LncRNA-a与SPZ1 mRNA都能与miRNA-1结合，SPZ1 mRNA能翻译形成SPZ1蛋白，因此推测LncRNA-a与SPZ1 mRNA在细胞中通过对miRNA-1的竞争性结合，从而影响SPZ1基因的翻译过程。
【小问3详解】
据图可知，SPZ1基因能转录形成SPZ1 mRNA，进而翻译形成SPZ1蛋白，SPZ1蛋白能抑制细胞凋亡，当细胞内LncRNA-a过量表达时，大量的LncRNA-a竞争结合miRNA-1，SPZ1 mRNA不能与miRNA-1结合，SPZ1 mRNA能产生大量的SPZ1蛋白，抑制细胞凋亡，所以会加速患者胃癌肿瘤生长。
【小问4详解】
根据以上信息，除了减少LncRNA-a的表达之外，还能通过增大细胞内miRNA-1的含量，使其与SPZ1 mRNA结合，从而降低SPZ1蛋白含量，或者降低SPZI基因的表达量等，促进癌细胞细胞凋亡，从而治疗胃癌。
19. 随着动物细胞工程技术的不断成熟，使通过核移植技术诱导重组体细胞增殖分化获得健康的组织器官成为了可能，这为等待器官移植的非遗传病患者带来了希望。下图为通过该技术获得相应组织器官并进行移植的过程，请回答下列问题：
（1）图中的供体二为___________（填“患者”或“健康者”），细胞①应为___________细胞。
（2）②为重组细胞，其经过A___________（技术手段）形成囊胚，其中④细胞在形态上具有___________特征。
（3）B过程需要在培养基中加入___________才能获得相应的组织器官。图中B→C过程___________（填“能”或“不能”）体现细胞的全能性，其理由是______________________。
（4）研究表明：已痊愈的新型肺炎患者体内会出现相应抗体，一般抗体的作用会持续半年或者更长时间。若现已从某位志愿者体内获得一定量的B淋巴细胞，实验室有保存的小鼠骨髓瘤细胞，为获得产生相应抗体的杂交瘤细胞，请写出关键过程_________________________________。
【答案】 ①. 患者 ②. （正常的）卵母细胞 ③. 早期胚胎培养 ④. 细胞体积小、细胞核大、核仁明显 ⑤. 分化诱导因子 ⑥. 不能 ⑦. 该过程仅形成组织器官，没有形成完整个体 ⑧. 将获得的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞进行融合，从融合的产物中分离筛选杂交瘤细胞，从杂交瘤细胞中筛选出产生相应抗体的杂交瘤细胞。
【解析】
【分析】分析题意：“通过核移植技术诱导重组体细胞增殖分化获得健康的组织器官成为了可能，这为等待器官移植的非遗传病患者带来了希望”，再结合题图可知：供体一为健康者，而供体二为非遗传病患者，具体过程为：取供体一的正常卵母细胞去核后与供体二的细胞核组成重组细胞后，经早期胚胎培养形成囊胚，分离出胚胎干细胞，经诱导分化形成相应的组织器官，然后抑制到患者体内。
【详解】（1）由分析可知，图中的供体二为患者，细胞①应为健康者提供的（正常的）卵母细胞。
（2）②为重组细胞，其经过A早期胚胎培养形成囊胚，其中④胚胎干细胞在形态上表现为细胞体积小、细胞核大、核仁明显的特征。
（3）由于胚胎干细胞需经诱导分化形成相应的组织器官，所以B过程需要在培养基中加入分化诱导因子才能获得相应的组织器官。图中B→C过程不能体现细胞的全能性，其理由是该过程仅形成组织器官，没有形成完整个体。
（4）若现已从某位志愿者体内获得一定量的B淋巴细胞，实验室有保存的小鼠骨髓瘤细胞，为获得产生相应抗体的杂交瘤细胞的关键过程为：将获得的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞进行融合，从融合的产物中分离筛选杂交瘤细胞，从杂交瘤细胞中筛选出产生相应抗体的杂交瘤细胞。
【点睛】本题考查胚胎工程以及单克隆抗体的制备的相关知识，意在考查考生利用所学知识解决实际问题的能力。
20. 酵母菌是木糖醇生产菌，生产木糖醇时， 发酵体系的温度会因产热而升高。研究人员筛选高温诱导启动子，构建高温诱导启动子－木糖还原酶基因（XYL1）表达载体并导入酵母菌，用以生产木糖醇。
（1）启动子是_______的识别和结合部位。为筛选高温诱导启动子，研究人员选择A1~A7共7个待选启动子并构建了“启动子－绿色荧光蛋白基因”表达载体， 然后导入酵母菌中。 高温条件下， 研究人员根据重组菌的_______选出了A1启动子。
（2）XYL1含有内含子（基因编码区中不能表达的片段），获取无内含子 XYLl（cXYL1）的方法是_______。 为将cXYLl正向插入质粒中，cXYL1的上游和下游应分别构建限制酶的酶切位点，构建方法是_______。 双酶切验证重组质粒上含有“A1－cXYL1”时，应选择的限制酶是_______， 电泳结果应出现与分子大小相符的_______个条带。
（3）研究人员分别在测定了重组菌木糖还原酶活性，实验应以________为酶活性指标。若重组菌构建成功，实验结果应为________。
【答案】（1） ①. RNA 聚合酶 ②. 绿色荧光强度
（2） ①. 获取mRNA， 逆转录为cDNA， 然后 PCR 获取cXYLl ②. 将限制酶序列构建在两引物的 5'端， 然后 PCR ③. BamH1、Kpn I ④. 2
（3） ①. 单位时间内木糖醇的生成量（或：单位时间内木糖的消耗量） ②. 木糖醇的生产速率： 42℃>37℃>30℃（或： 木糖的消耗速率 42℃