【期中复习】2023-2024学年（人教版2019选择性必修3）高二下册生物期中压轴题训练.zip

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1．成都水井坊是我国最古老的酿酒遗址。其特色之一是在小麦、高粱中先后拌入糖曲和酒曲，发酵后进行“量质摘酒”——以如图所示的生铁“天锅”把酒头摘出后，边摘边尝，优中选优。下列有关说法错误的是（ ）
A．小麦、高粱中含有的淀粉多糖为高分子化合物
B．“天锅”材料中只含金属元素
C．如图中“摘酒”操作是指通过蒸馏分离出乙醇溶液
D．通过“量质摘酒”可得到不同酒精度的酒
2．《黄帝内经》中提到：“米酒甘甜，入肝经，能补血行气。”某品牌的甜酒曲中只有需氧型根霉菌，这种菌促进淀粉水解的能力强，产生酒精的能力较弱，因而用其制作的甜米酒甜味明显又略带酒香。下列相关叙述正确的是（ ）
A．可用根霉菌和酵母菌一起进行有氧发酵来提高甜米酒的酒精浓度
B．用适宜的选择培养基即可获得某种用于酿制米酒的优质根霉菌种
C．蒸好的米饭放至室温再添加甜酒曲可以防止根霉菌因高温而失活
D．用纯根霉菌制作的甜米酒中只有酒精一种代谢产物因而更加安全
3．实验小组从甲醛含量丰富的工厂活性污泥中筛选出了能快速降解甲醛的菌株W，用于甲醛降解的生物处理，并探究了甲醛浓度对甲醛降解率的影响，实验结果如图所示。下列说法错误的是（ ）
A．筛选培养基中的甲醛能为菌株W的生长提供碳源
B．在350mg·L-1和600 mg·L-1时，菌株W的降解甲醛的量相同
C．浓度超过750 mg·L-1后，高浓度的甲醛可能会抑制菌株的活性
D．筛选后的培养基在丢弃前可用高压蒸汽锅进行灭菌处理
4．一种广泛使用的除草剂（含氮有机化合物）在土壤中不易降解，长期使用可污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤，可按下图程序选育能降解该除草剂的细菌。下列说法错误的（ ）
A．分离目的菌所用的培养基应该是添加该除草剂的无氮固体培养基
B．步骤C第1次划线前、第5次划线后都要对接种环进行灼烧灭菌
C．将未接种的平板在相同条件下培养，可以判断培养基是否灭菌合格
D．步骤D的两种菌落氮源相同，应该选择透明圈大的菌落进行扩大培养
5．米酒旧时称酒酿，其现代工艺流程如图所示。下列说法错误的是（ ）
A．蒸米有利于根霉分解糯米中的有机物，淋冷防止杀死根霉
B．加酵母曲后应先通入一段时间无菌空气，再进行无氧发酵
C．发酵结束后对发酵液进行灭菌可延长米酒的保存期
D．若酿制的米酒有酸味，应与长期封闭酿酒容器有关
6．关于发酵及发酵工程的叙述，正确的是（ ）
A．进行果酒或泡菜发酵时，发酵装置均要留出1/3空间，防止发酵菌种无氧呼吸产生CO2引起发酵液溢出
B．传统发酵利用的菌种是天然的混合菌种，发酵工程利用的则是经基因工程或诱变育种后选育的单一菌种
C．利用发酵工程生产啤酒时，需对培养基和发酵设备进行灭菌，且发酵过程要严格检测和控制发酵条件
D．发酵工程的产品主要包括微生物的代谢物，不包括酶及菌体本身
7．甜米酒又称酒酿，多以糯米为原料拌入酒曲发酵而成。传统家庭手工制作，产品品质不稳定，容易酸败，下面是工业化生产米酒的流程，其中发酵过程分为主发酵和后发酵两个阶段。据图判断下列说法错误的是（ ）
A．性状优良的酵母菌菌种可以从自然界中筛选，也可以通过诱变育种或基因工程育种获得
B．发酵时要严格控制温度、pH和溶解氧等发酵条件，以免影响微生物的生长繁殖和代谢物的形成
C．酵母菌的繁殖在主发酵阶段完成，而大部分糖的分解和代谢物的生成在后发酵阶段完成
D．罐装、封口、杀菌要在限定时间内完成，若时间过长，产品会腐败变酸
8．酱油是以大豆、小麦或麦麸为原料，依靠微生物发酵而生产的一种液态调味品。如图展示了某企业通过发酵制作酱油的过程，下列叙述错误的是（ ）
A．米曲霉发酵过程需要通入空气并搅拌，可判断米曲霉属于异养好氧微生物
B．在发酵池发酵阶段添加的乳酸菌属于真核生物
C．添加的酵母菌在无氧条件下分解葡萄糖的产物是酒精和二氧化碳
D．发酵池中加入的食盐可以抑制杂菌的生长和繁殖
9．在分离、纯化细菌的实验中，划线接种（甲）及培养结果（乙）如图所示，a、b、c、d是划线的四个区域。下列叙述正确的是（ ）
A．实验所用培养基一般用干热灭菌法进行灭菌
B．为了防止杂菌污染，接种环灼烧后立即蘸取菌液进行划线
C．图中d区域的划线操作是从c区域划线的末端开始的
D．图示划线接种过程中至少需要对接种环灼烧5次
10．科研人员利用诱变方式选育可高产β-胡萝卜素的三孢布拉霉负菌的过程如图所示。未突变菌不能在含有β-紫罗酮的培养基上生长。随β-胡萝卜素含量增加，菌体颜色从黄色加深至橙红色。下列叙述正确的是（ ）
A．将培养基分装于培养皿中后灭菌，可降低培养基污染的概率
B．进行③操作时，应选择直径较小的橙红色菌落中的菌株继续接种培养
C．能在添加β-紫罗酮的培养基上长成菌落的细菌，其遗传物质不一定发生改变
D．经过程①紫外线照射的三孢布拉霉负菌有的不能在含β-紫罗酮的培养基上生长
11．研究人员对小鼠脾细胞进行悬浮培养过程中，发现培养液变黄，推测其原因可能是培养液pH值降低、微生物污染、未及时更换培养液等。下列相关分析不合理的是（ ）
A．pH值降低的原因可能是未添加缓冲液或CO2培养箱的气体含量比例异常
B．微生物污染的原因可能是对培养器皿、接种用具和培养液的灭菌不彻底
C．未及时更换培养液可能会导致代谢产物的积累和营养物质的供应不充足
D．培养液变黄的原因还可能是悬浮培养过程中未使用胰蛋白酶处理脾细胞
12．研究人员利用甲、乙两种二倍体植物的各自优势，通过植物体细胞杂交技术培育兼有两种植物优势且耐盐的目的植株，其实验流程如下图，a~e表示不同操作。下列相关叙述正确的是（ ）
A．通过a操作获得完整且有活性的原生质体，主要利用了纤维素酶和果胶酶的高效性
B．b操作可使用聚乙二醇促进两种原生质体的膜融合，以获得未分化状态的杂种细胞
C．d操作所用培养基应添加一定浓度的钠盐，且生长素与细胞分裂素用量比值小于1
D．甲、乙植株是两个不同物种，因此通过该技术培育出的目的植株会表现出高度不育
13．为解决杂交瘤细胞在传代培养中出现来自B淋巴细胞的染色体丢失的问题，研究者用EBV（一种病毒颗粒）感染已免疫的B淋巴细胞，获得“染色体核型稳定”的EBV转化细胞，进而获得染色体稳定的杂交瘤细胞，基本实验流程如图。EBV转化细胞能在HAT培养基中存活，但对Oua敏感；骨髓瘤细胞在HAT培养基中不能存活，但对Oua不敏感。下列分析正确的是（ ）
A．杂交瘤细胞产生的抗体能针对相应抗原和EBV
B．HAT培养基可去除骨髓瘤细胞和自身融合的骨髓瘤细胞
C．灭活病毒诱导细胞融合的原理是促进骨髓瘤细胞核和B细胞核融合
D．图示筛选获得的杂交瘤细胞即可在小鼠腹腔内生产单克隆抗体
14．如图为产业化繁育良种牛的部分过程。下列相关叙述错误的是（ ）
A．过程②常使用显微操作去核法对MII期的卵母细胞进行处理
B．过程②无核卵母细胞可以为重组细胞全能性的表达提供物质基础
C．过程③可用物理或化学方法进行处理，目的是激活重组细胞完成细胞分裂和发育进程，使其在体外发育至原肠胚后用于胚胎移植
D．E的遗传物质来自供体A和C，F的核遗传物质全部来自供体B
15．2011 年我国首次利用转基因和体细胞核移植技术成功培育了高产赖氨酸转基因克隆奶牛。其基本流程为：构建乳腺专一表达载体——表达载体转入牛胚胎成纤维细胞（BEF）----核移植----重组细胞的体外培养及胚胎移植----检测。下列叙述错误的是（ ）
A．表达载体转入牛胚胎成纤维细胞（BEF） 为核供体细胞
B．需将重组细胞体外培养至早期囊胚再进行胚胎移植
C．高产赖氨酸转基因克隆奶牛的性状与受体母牛极为相似
D．可用DNA分子杂交技术检测克隆奶牛体内目的基因是否导入
16．临床上常对羊水中胎儿脱落的细胞进行染色体分析，得出染色体数量以及结构变异的重要信息，辅助医生产前诊断。具体操作步骤如下图所示，下列选项中说法错误的是（ ）
A．秋水仙素处理可使细胞周期停滞在中期，便于进行染色体分析
B．实验中低渗处理的目的是使细胞吸水膨胀，使染色体分散便于观察
C．细胞培养过程中需适时更换培养液，防止代谢产物积累过多危害细胞生长
D．利用该技术能够检测镰状细胞贫血、唐氏综合征等染色体异常遗传病
17．治疗性克隆对解决供体器官缺乏和器官移植后免疫排斥反应具有重要意义，具体流程如下图所示，下列说法中正确的是（ ）
A．个体A提供的卵母细胞通常是指初级卵母细胞
B．胚胎干细胞可以来自囊胚中的滋养层细胞
C．若将图中获得的组织器官移植至个体A，不会发生免疫排斥反应
D．我国禁止生殖性克隆，主张对治疗性克隆进行有效监管和严格审查
18．VP1为引起手足口病的主要病毒EV71中的特异性结构蛋白，以VPl蛋白为抗原制备单克隆抗体的过程如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A．克隆化培养可用液体培养基，除提供细胞所需营养物质外，还需加入血清
B．骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合与植物原生质体融合的诱导方法相同
C．通过HAT培养基和抗体检测筛选，可得到产VP1蛋白抗体的杂交瘤细胞
D．从注射过VP1蛋白的小鼠脾脏中可获取产VP1蛋白抗体的B淋巴细胞
19．图为抗体-药物偶联物（ADC）形成和作用过程示意图，其中①②③表示细胞。下列叙述错误的是（ ）
A．注射抗原只引起体液免疫
B．筛选出②需要用选择培养基
C．筛选出③需要克隆化培养
D．ADC能选择性杀伤肿瘤细胞
20．“标记”是生物技术与工程常用的技术手段，下列相关叙述错误的是（ ）
A．诱导植物原生质体融合时，通过红绿荧光蛋白标记检测细胞融合情况
B．分析工程酵母发酵产物的合成及分泌时，通过同位素标记监测产物转移路径
C．验证转基因抗虫棉是否成功时，通过RNA分子标记检测目的基因是否表达
D．对目的基因进行扩增时，通过荧光标记技术实时定量测定产物的量
21．某实验室通过提高小鼠胚胎干细胞pSTAT3基因的表达水平，体外制备出桑葚胚样全能细胞。该细胞在分子水平及发育潜能上均具有自然胚胎桑葚期细胞特性，并在体外成功模拟了小鼠胚胎发育至原肠胚阶段。根据该研究，下列叙述正确的是（ ）
注：pSTAT3是调控胚胎发育的关键基因
A．桑葚胚发育成囊胚的过程中，pSTAT3的表达上升
B．诱导桑葚胚样细胞时，基因的碱基序列和表达的情况都发生改变
C．囊胚期细胞重置至桑葚样细胞的过程类似于脱分化
D．桑葚胚样细胞不可诱导发育至囊胚期
22．小鼠胚胎干细胞经定向诱导可获得多种功能细胞，制备流程如图所示。下列有关叙述正确的是（ ）
A．胚胎干细胞只能从囊胚的内细胞团中分离获得
B．分离出的细胞a、b要在CO2培养箱中进行培养
C．定向诱导胚胎干细胞形成多种功能细胞时表达基因都不同
D．向培养液中加入动物血清会刺激胚胎干细胞表现出全能性
23．胚胎工程等生物技术促进了具有优良性状和经济价值的动物快速繁育与应用。下列叙述错误的是（ ）
A．克隆珍稀野生动物，可使用体细胞核移植结合胚胎工程技术
B．胚胎分割技术可增加移植胚胎数目，还可产生遗传性状相同的后代
C．为提高体外受精成功率，新采集的精子应直接用于体外受精
D．动物胚胎移植前，控制胚胎性别比例可降低后代的伴性遗传病发病率
24．中科院神经科学研究所团队利用体细胞克隆技术克隆出了猕猴“中中”和“华华”，为了提高重组胚胎的发育率和妊娠率，我国科研人员将组蛋白去甲基化酶（KDM4d）的mRNA注入了重构胚，同时用组蛋白脱乙酰酶抑制剂（TSA）进行处理，流程如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A．重构胚组蛋白的甲基化程度高有利提高胚胎发育率
B．体外培养成纤维细胞通常需要在培养液中加入动物血清等一些天然成分
C．卵母细胞一般要培养至减数分裂Ⅱ中期才去核
D．“中中”和“华华”的成功培育体现了动物体细胞核的全能性
25．治疗性克隆有望解决供体器官短缺和免疫排斥等问题。下图表示治疗性克隆的过程，下列说法错误的是（ ）
A．细胞A常采用去核卵母细胞作为移植的受体细胞
B．动物细胞的培养需提供95%空气和5%CO2的混合气体
C．胚胎干细胞分化为多种体细胞是基因选择性表达的结果
D．该治疗性过程应用了核移植、动物细胞培养和胚胎移植等技术
26．下列有关“DNA粗提取与鉴定”、“PCR扩增”、“琼脂糖凝胶电泳”实验的叙述中，正确的是（ ）
A．DNA的粗提取与鉴定实验中可利用DNA在酒精中溶解度较大的特点来提取DNA
B．将提取到的丝状物与二苯胺溶液充分混匀后，溶液即可变为蓝色
C．PCR反应体系中需加入耐高温的DNA聚合酶，该酶在延伸过程中起作用
D．凝胶载样缓冲液中加入的核酸染料能与DNA分子结合，便于在紫外灯下观察
27．退化性起源学说将病毒的起源归纳为两个阶段。首先寄生物在细胞内产生可独立复制的DNA质粒，其次编码寄生物亚细胞结构单位的基因发生突变，形成编码病毒外壳蛋白的相关基因。随着进化的进行，新获得的可在细胞间转移的特性被进一步选择下来。下列有关说法错误的是（ ）
A．寄生物产生的可独立复制的DNA质粒上具有复制原点
B．编码病毒蛋白外壳的相关基因可能位于DNA质粒上
C．通过自然选择保留下的病毒对宿主细胞是有利的
D．可转移特性使病毒具有侵染宿主细胞的能力
28．匙叶草是一种泌盐植物。科研工作者将匙叶草液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白基因(TaNHX2基因)转移到棉花细胞内，获得了转基因耐盐棉花新品种。图1表示获取的含有目的基因的DNA片段，Sau3AⅠ、EcRⅠ、BamHⅠ为三种限制酶，图中箭头所指为三种限制酶的切点；图2是三种限制酶的识别序列与酶切位点示意图；图3是土壤农杆菌中用于携带目的基因的Ti质粒结构示意图。下列叙述错误的是（ ）
A．基因工程中，TaNHX2基因可以通过PCR技术扩增
B．切割图1所示的DNA片段应优先选用Sau3AⅠ和BamHⅠ
C．将含有TaNHX2基因的重组质粒导入受体细胞后，还需要利用植物组织培养技术
D．为了确定耐盐棉花植株是否培育成功，可以从个体水平鉴定棉花植株的耐盐性
29．New Phytlgist杂志发表了我国科学家有关大豆对盐胁迫响应的分子调控机制，过程如图所示。研究发现，miR160a可通过切割GmARF16基因转录的mRNA使大豆具有耐盐性。下列叙述错误的是（ ）
A．大豆的不耐盐与耐盐这对性状受多对基因共同决定
B．若GmMYC2基因启动子甲基化程度增加可提高耐盐性
C．脯氨酸含量增加可增大根部细胞渗透压引起耐盐性增强
D．miR160a通过碱基互补配对原则识别mRNA并断裂氢键
30．下列关于教材实验中所涉及的方法、操作和结论的叙述正确的是（ ）
A．证明DNA半保留复制方式的实验和分泌蛋白的合成和运输实验都用到放射性同位素标记法
B．质壁分离和复原实验、低温诱导植物细胞染色体数目的变化实验都要先用低倍镜观察，再换成高倍镜观察
C．鉴定DNA时，不能将丝状物直接加入到二苯胺试剂中进行沸水浴
D．调查草地中某双子叶植物的种群密度和探究抗生素对细菌的选择作用时，选取样方、挑选菌落均要随机取样
31．棉花是我国重要的经济作物，黄萎病是棉花的最主要病害之一，有棉花的“癌症”之称。我国科学家在世界上首次获得转基因抗黄萎病棉花新株系。这将使棉花“癌症”有望得到根治。科学家将从海岛棉中分离出来的抗黄萎病基因At7导入陆地棉中，使陆地棉获得抗病性状。下列对转基因棉的检测与鉴定的叙述，错误的是（ ）
A．检测转基因棉是否导入基因At7，需要一段能与基因At7互补的短单链核酸引物
B．检测转基因棉中的基因At7是否转录出mRNA，其原理是抗原与抗体的特异性结合
C．检测到转基因棉表达出At7蛋白，说明转基因棉中成功导入了基因At7并能表达
D．检测转基因棉是否抗黄萎病，可接种黄萎病的病原体到转基因棉植株上
32．在生物学实验中，常常利用一些颜色反应来鉴定细胞中的某些化学物质或细胞的结构。以下说法错误的是（ ）
A．DNA与二苯胺试剂在加热条件下反应出现蓝色
B．鉴定还原糖实验所用的斐林试剂必须现配现用
C．利用台盼蓝染液可把死细胞染成蓝色，而活细胞不被着色
D．观察洋葱根尖分生组织的有丝分裂，可选用酸性染料醋酸洋红染液染色
33．DNA测序时，先将待测单链DNA模板、引物、有关酶、4种脱氧核苷三磷酸（dNTP，N代表A、T、C、G，能提供能量并作为DNA复制的原料）均加入4个试管中，再分别加入一定量的含放射性同位素标记的ddNTP（ddGTP、ddATP、ddCTP、ddTTP）。不同于dNTP的是，ddNTP的五碳糖的3位不含羟基。在DNA合成时ddNTP随机与dNTP竞争核苷酸链延长位点，并终止DNA的延伸，从而形成不同长度的一系列终止处带有放射性同位素标记的DNA链。下图是DNA测序时得到含放射性标记的子代DNA的电泳图谱。下列相关说法错误的是（ ）
A．反应体系中的引物为单链，DNA聚合酶从引物的3'端连接脱氧核苷酸
B．ddNTP终止子链延伸，其原理可能是其五碳糖的3'位不含羟基，无法连接新的脱氧核苷酸
C．图中加入ddCTP的一组中，可以形成3种长度的子链
D．图中子代DNA的碱基序列是5'-GATCCGAAT-3'
34．为研究3对等位基因在染色体上的相对位置关系，科研人员以某果蝇若干精子为材料，用PCR技术检测单个精子中的相应基因，统计结果如表所示。不考虑突变和致死，下列叙述错误的是（ ）
注：已知表中精子种类和比例与该果蝇理论上产生的配子种类和比例相当
A．e基因可能位于X染色体上
B．A/a基因只能位于常染色体上
C．A/a和B/b不遵循自由组合定律
D．Ab和Abe两种精子可能来自同一个次级精母细胞
35．关于实验的叙述，正确的是（ ）
A．DNA片段的扩增及电泳鉴定中，在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶浓度有关
B．调查遗传病时，选发病率较高的多基因遗传病更容易推断其遗传方式
C．依据绿叶中光合色素吸收光谱的差异对光合色素进行层析分离
D．探究酵母菌呼吸方式时，向酵母菌培养液中加入酸性重铬酸钾出现灰绿色，说明一定有酒精产生
36．在基因工程操作中，常用原核生物作为受体细胞，其中以大肠杆菌应用最为广泛。某动物体内有科研人员所需要的目的基因，欲将该基因导入大肠杆菌的质粒中保存。该质粒上有EcRI、XhI、Mun I、Sal I和 NheI限制酶识别序列，相关结构的示意图如下。下列叙述错误的是（ ）
注：LacZ基因编码产生的β-半乳糖苷酶可以分解X-gaI产生蓝色物质，使菌落呈现蓝色，否则菌落为白色。
A．启动子位于基因的上游，是RNA聚合酶识别和结合的部位
B．操作过程宜保留氨苄青霉素抗性基因，将目的基因插入LacZ基因中
C．在设计PCR引物时，应在两种引物的5'端添加SalI和NheI限制酶识别序列
D．在添加氨苄青霉素和X-gaI的培养基上生长的白色菌落为导人重组质粒的大肠杆菌
37．常规PCR只能扩增两引物间的DNA区段，要扩增已知DNA序列两侧的未知DNA序列，可用反向PCR技术。反向PCR技术扩增的原理如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A．酶切阶段，L中不能含有酶切时所选限制酶的识别序列
B．环化阶段，可选用E.cli DNA连接酶或T4 DNA连接酶
C．图中引物，应选择引物1和引物4，且二者间不能互补配对
D．PCR扩增，每轮循环前应加入限制酶将环状DNA切割成线状
38．图甲表示真核细胞DNA复制的部分过程，其中一条链具有“不连续合成”的特点。图乙表示真核生物基因的遗传信息从DNA转移到RNA上之后，对有效遗传信息进行“剪断”与重新“拼接”的过程。下列说法错误的是（ ）
A．图甲中两条子链的合成方向都是由5'延伸到3'
B．图乙过程①需要DNA聚合酶的参与
C．图乙过程②有磷酸二酯键的断裂和合成
D．正常mRNA逆转录形成的cDNA与S基因不完全相同
39．2020年诺贝尔化学奖颁给了开发基因组编辑方法的两位女科学家，CRISPA/Cas9基因编辑技术可对基因进行定点编辑，其原理是由一条单链导RNA引导核酸内切酶Cas9到一个特定的基因位点进行切割，示意图如下。下列叙述错误的是（ ）
A．向导RNA可识别、切割DNA上的目标位点
B．单链向导RNA与识别序列，通过氢键连接
C．引入供体DNA分子插入切割点，可以对基因进行定向改造
D．生物体自身存在的修复系统能将断裂上下游两端的序列连接起来，实现目标基因的敲除
40．HIV感染是引起艾滋病的原因。利用进入抑制剂阻止HIV进入靶细胞是阻止 HIV感染的重要途径。研究者按照如图所示的途径构建了一种可视化的、无感染性的进入抑制剂检测模型。
下列说法正确的是（ ）
A．env蛋白是介导HIV侵染靶细胞的重要蛋白
B．进入抑制剂通过破坏env蛋白结构阻止HIV侵染
C．通过测定融合细胞中env表达量判定进入抑制剂的效果
D．进行上述系统操作的实验员有感染HIV的风险
二、多选题
41．黄曲霉毒素是由黄曲霉产生的代谢产物，具有极强的毒性和致癌性。科研人员用黄曲霉毒素B（AFB1）的结构类似物——豆香素（C9H6O2）筛选出能高效降解AFB1的菌株，实验过程如下图中的①—④。已知菌体对有机物的降解途径有胞外分泌物降解和菌体吸附降解两种。对降解菌的培养液进行离心，发现上清液中AFB1的残留率明显低于菌悬液中的残留率。检测发现上清液中含有蛋白质K，为验证蛋白质K是降解AFB1的有效成分，进行了实验⑤：在A中加入水解蛋白质K的酶、B中加等量的蒸馏水，充分反应后在两试管中均加入等量的豆香素（C9H6O2）。下列说法错误的是（ ）
A．1号培养基属于选择性培养基，通常需要提前在121℃下进行湿热灭菌
B．步骤③使用稀释涂布平板法，目的是筛选出能降解黄曲霉毒素的单菌落
C．实验⑤的结果是A试管中豆香素含量基本不变，B试管中豆香素含量减少
D．蛋白质K属于降解菌产生的胞外分泌物，可以分解培养液中的蛋白质
42．为探究不同抗生素抑制支原体生长的情况，研究人员进行了相关实验。制备培养基培养支原体后，将蘸有相同浓度的阿奇霉素、克拉霉素和青霉素的圆形滤纸片放置于平板不同位置。培养一段时间后，平板上出现的抑菌圈情况如图所示。下列说法正确的是（ ）
A．“？”处放置的是蘸有无菌水的圆形滤纸片
B．青霉素对支原体不起作用
C．实际使用时克拉霉素抑制支原体的效果比阿奇霉素好
D．长期使用克拉霉素可以增强抑制支原体的效果
43．某大肠杆菌的质粒上含有AmpR基因（氨苄青霉素抗性基因）和LacZ基因（编码的酶能使含X-gal的平板上的菌落变蓝），科研人员欲利用该质粒构建L-天冬酰胺酶高表达载体，并利用含氨苄青霉素和X-gal的平板对受体菌进行筛选，该受体菌在普通平板上形成的菌落为白色，目的基因结构和质粒结构如图，图中的多种限制酶识别序列各不相同。选用的限制酶和菌落应为（ ）
A．EcRⅠ和BamHⅠB．EcRⅠ和KpnⅠ
C．白色菌落D．蓝色菌落
44．某种除草剂（一种含氮有机物，在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明）在土壤中不易降解，长期使用会污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤，按下图过程选育能降解该除草剂的细菌。下列叙述正确的是（ ）
A．图中培养基在各种成分都溶化后且分装前进行灭菌
B．图中接种方法为平板划线法，该方法可以于细菌计数
C．实验过程中需要将培养皿中培养基调至中性或弱碱性
D．培养基上形成的两种菌落中的细菌所利用的氮源不同
45．2018年3月，最后一头雄性北方白犀牛去世，至此世界上仅剩两头雌性个体。如今，科研团队拟采用提前保存的北方白犀牛冷冻精子借助核移植、体外受精等技术，以南方白犀牛作为代孕母畜人工繁育北方白犀牛。下列叙述合理的是（ ）
A．须注射免疫抑制剂以减弱代孕母畜对植入胚胎的免疫排斥反应
B．冷冻保存的精子需再经获能处理才可用于体外受精
C．若取雌性白犀牛的体细胞进行核移植，获得的克隆后代可繁衍为一个种群
D．理论上可取早期胚胎用酶处理成单个细胞分别培养，以提高胚胎的利用率
46．为了快速检测某病毒，以该病毒外壳蛋白A为抗原来制备单克隆抗体，主要技术路线如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A．步骤①和步骤⑤分别向小鼠注射的是抗原和抗体
B．步骤②所用的SP2/0细胞的生长特点是能在体外无限增殖
C．已免疫的B淋巴细胞可通过原代培养扩大其细胞数量
D．利用多次克隆化培养和抗体检测筛选特定的杂交瘤细胞
47．体细胞杂交不仅可以进行不同种、属、科间的远缘杂交，还可以省去有性杂交育种中很多中间环节。下图为将风味佳的美味猕猴桃（甲）和抗寒性极强的软枣猕猴桃（乙）进行体细胞杂交的过程。据下图分析，下列叙述错误的是（ ）
A．植物细胞经①后得到的a、b不再发生质壁分离，因为已经不存在渗透作用失水
B．预期的体细胞杂交产物是能在低温地区栽种的风味佳的新物种
C．②过程利用了细胞膜的流动性，③过程中有高尔基体参与
D．③④⑤分别表示脱分化、再分化和分化过程，本质都为基因的选择性表达
48．单克隆抗体制备的目的之一是获得适宜条件下能无限增殖的可分泌特异性抗体的杂交瘤细胞，部分过程如图1所示，其中HAT培养基是一种添加了氨基蝶呤（A）、次黄嘌呤（H）和胸腺嘧啶核苷（T）的选择培养基。DNA合成的两条途径如图2所示，氨基蝶呤（A）能阻断其中的全合成途径。B淋巴细胞内有两条DNA合成途径，但增殖能力有限；骨髓瘤细胞仅具有全合成途径。下列叙述错误的是（ ）
A．诱导融合前需要先用胃蛋白酶处理贴壁生长的骨髓瘤细胞
B．图1中两种自身融合细胞不能在HAT培养基中存活的原因不同
C．经HAT培养基筛选后得到的杂交瘤细胞都能产生所需的特定抗体
D．若只考虑细胞两两融合，则放入HAT培养基之前有全合成途径的融合细胞有2种
49．大鼠早期胚胎可以利用细胞竞争机制“杀死”外来的人类干细胞，从而导致人—鼠嵌合胚胎的嵌合率低下。科学家拟通过以下途径获得具有人类胰腺的幼鼠，下列分析合理的是（ ）
A．iPS细胞的分裂、分化能力可能与图中b区域的细胞相当
B．为获得更多的受精卵，可对雌鼠注射适量的促性腺激素
C．步骤①基因编辑的目的可能是破坏受精卵中与胰腺形成有关的基因
D．图中过程涉及转基因技术、动物细胞培养及核移植、胚胎移植等
50．下图是三亲婴儿的培育过程。据图分析，下列叙述正确的是（ ）
A．三亲婴儿的遗传物质全部来自于父亲和母亲
B．该技术能避免三亲婴儿携带母亲细胞质中的致病基因
C．体外受精前，需将精子在获能液中培养一段时间使其获能
D．受精卵发育到桑葚胚阶段，开始进行细胞分化
51．下图为利用生物技术获得生物新品种的过程，有关说法正确的是（ ）
A．A→B过程中用到的原料有4种，加入的引物有2种
B．A→B过程利用了DNA半保留复制原理，需要使用耐高温的DNA聚合酶
C．B→C为转基因绵羊的培育过程，常选用的受体细胞是卵母细胞
D．B→D为转基因植物的培育过程，其中④过程常用的方法是农杆菌转化法
52．双脱氧终止法对DNA进行测序原理如图，在4支试管中分别加入4种脱氧核苷三磷酸(dNTP)和1种双脱氧核苷三磷酸(ddNTP) ； ddNTP可以与dNTP竞争核苷酸链延长位点，并终止DNA片段的延伸。在4支试管中DNA链将会分别在A、C、G及T位置终止，并形成不同长度的DNA片段。这些片段随后可被电泳分开并显示出来。
下列说法正确的是 （ ）
A．这种测序方法需要引物和耐高温的DNA聚合酶
B．电泳图谱中的箭头所指的DNA片段以鸟嘌呤结尾
C．测得未知DNA的序列为5′—GATTCGAGCTGA—3′
D．ddNTP与dNTP竞争的延长位点是核苷酸链的5′末端
53．下图是某单基因（A/a）遗传病的家系图以及将各家庭成员的相关DNA用酶剪切成不同的片段，将这些片段进行电泳分离（可以将DNA片段按大小分开）的结果示意图。已知仅一种基因上有MstⅡ的酶切位点。相关叙述错误的是（ ）
A．该遗传病的发病率女性高于男性
B．图中已知正常个体的基因型均为Aa
C．A和a基因的碱基数目相同，序列不同
D．若Ⅱ5的基因型为AA，则其不含MstⅡ的酶切位点
54．稻米胚乳直链淀粉含量高会导致食用品质差。研究发现，水稻蜡质基因（Wx）编码直链淀粉合成酶。若Wx基因中第226位碱基是正常的G，该位点所在的内含子能被正常剪接，胚乳中直链淀粉含最高，基因型记做GG；若该位点突变成T，则不能被正常剪接，胚乳中直链淀粉的合成水平会降低，基因型记做TT。为检测Wx基因该位点碱基是G或T，研究人员以待测水稻叶片总DNA为材料，以Wx基因片段设计引物，对PCR扩增产物经AccI酶切后电泳。如图所示，已知引物1为5′-GCTTCACTTCTCTGCTTGTG-3′，AccⅠ酶的识别位点为5′-GTATAC-3′，两引物之间无另外的AccI酶的识别位点。下列叙述正确的是（ ）
A．该实验中需设计的引物2为5′一TTCAACTCTCGTTAAATCAT-3′
B．若电泳结果只能观察到530bp的DNA条带，则表明该水稻品种为TT型
C．GT杂合型水稻品种酶切电泳结果为3条条带
D．组成上述两种淀粉合成酶的氨基酸的种类不同，数目相同
55．研究人员通过构建一系列基因表达载体，将改造后的苯丙氨酸合成关键酶基因（P1）导入谷氨酸棒状杆菌中，最终获得了能产生大量苯丙氨酸的转基因工程菌株。基因表达载体的构建经历了如下图所示的质粒1~质粒5的转变过程，其中质粒1通过PCR扩增去除筛选效率较低的基因SacB获得质粒2；质粒2与质粒3中的基因RpsL拼接形成质粒4；质粒4与目的基因P1连接形成质粒5。下列说法错误的是（ ）
A．由质粒1经PCR扩增获得质粒2时需加入引物1和引物2
B．PCR扩增质粒3中的基因RpsL时，需在引物的5＇端加入XhⅠ识别序列
C．最终获得的转基因工程菌株表现出链霉素敏感和卡那霉素抗性
D．可利用PCR技术鉴定谷氨酸棒状杆菌的染色体DNA上是否成功整合基因P1
三、非选择题
56．滤膜法常用于对水体中的微生物进行计数，其大致流程：先用滤膜过滤待测水样，水样中的微生物留在滤膜上，再将滤膜转移到培养基上培养并统计菌落数目，如图所示。回答下列问题：
(1)该实验中所用培养基属于 （按物理性质分类）培养基，此类培养基配制时除水和各种营养成分外，还需加入 。配制好的培养基通常用 法灭菌，如何检测该培养基灭菌是否彻底？ 。
(2)滤膜法可用于检测饮用水中大肠杆菌是否超标，培养基中需加入 ，统计呈 的菌落。
(3)检测人员用滤膜过滤5L水样后培养统计大肠杆菌菌落数（重复三次），结果如下表，该水样中的大肠杆菌密度为 个/100mL。对水样中的大肠杆菌计数，还可用稀释涂布平板法；与滤膜法相比，通常稀释涂布平板法适用于 的水样。
57．一次性口罩主要成分是由C、H两种元素组成的聚丙烯纤维。研究人员欲从合适的土壤样品中筛选出能高效讲解一次性口罩的细菌，请回答下列问题：
(1)选择土壤样品时最好选择一次性口罩腐烂程度 的土壤用于分离目标菌株。
(2)在选择培养时，培养基中应以 （填化合物名称）为唯一碳源；为增大菌体与培养基的接触面积，从物理性质看，该培养基应是 培养基。
(3)将分离纯化得到的不同菌种分别接种到鉴别培养基上，鉴别培养基中加入了能与聚丙烯纤维结合的显色染色剂。设不同菌种的菌落面积为s，菌落周围透明圈的面积为S，选择S/s的比值 的菌落，就是能高效降解一次性口罩的目的菌群。
(4)欲估算某土壤样品中有多少能高效降解一次性口罩的目的菌，接种平板时应用 法。根据下图操作能计算出1g该土壤中约有 个高效降解一次性口罩的目的菌。该结果有可能比实际活菌数要少，原因是 。
58．双特异性抗体（BsAb）是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，双特异性抗体在自然状态下并不存在，可以通过重组 DNA 或细胞融合技术人工制备实现。长春花所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。图 1 是科研人员通过免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术生产双特异性抗体的部分过程。图2 是某双特异性抗体作用图示。回答下列问题。
(1)图1中①步骤注射癌胚抗原的目的是 。过程③所用的HAT培养基从用途上看属于选择培养基，在该培养基上， 细胞不能生长。
(2)过程④中将杂交瘤细胞进行多倍稀释，接种在多孔的细胞培养板上，使每孔细胞不超过1个，通过培养让其增殖，然后利用 原理检测各孔上清液中细胞分泌的抗体，筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。与传统血清抗体相比，单克隆抗体的优点有 。
(3)图1注射长春碱后，要获取单克隆杂交—杂交瘤细胞，方框内至少需要经过 次筛选。体外培养到一定时期的单克隆杂交—杂交瘤细胞因为 （答 2 点）等因素而分裂受阻，需进行传代培养。
(4)与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是 。
59．科研人员拟以某病毒外壳蛋白A为抗原制备单克隆抗体，作为诊断试剂用于医学检测，其主要技术路线如图所示，回答下列问题：
(1)现在常用PCR特异性地快速扩增目的基因。在生物体内进行DNA复制时，需要 打开DNA双链，PCR体系中该过程用 代替。在体内或者体外进行DNA片段的复制或者扩增都需要引物，引物的作用是 。
(2)图中诱导动物细胞融合的常用方法有 。按功能来区分，HAT培养基属于 培养基，筛选得到符合要求的杂交瘤细胞应具有的特点包括 。
(3)单克隆抗体能准确地识别抗原的细微差异，除了可以作为诊断试剂外，还具有的应用是 (答出2点)。
60．土地盐渍化是一种全球化现象，严重制约着农业生产的发展。我国育种专家用普通小麦（2N=42）与耐盐偃麦草（（2N=70）体细胞杂交获得耐盐新品种山融3号，培育过程如下图所示，图中序号代表过程或结构。回答下列问题：
(1)细胞①表示 。进行原生质体融合之前需要先去除细胞壁，原因是 。PEG的作用是 。某愈伤组织在诱导生芽的培养基上未形成芽，但分化出了根，原因可能是 。
(2)用特异性引物对普通小麦和耐盐偃麦草基因组DNA进行PCR扩增，得到两亲本的差异性条带，可用于杂种植株的鉴定。下图表示用该引物对双亲及再生植株1-6进行PCR扩增的结果。据图判断，再生植株1-6中确定为杂种植株的有 ，判断依据是 。
注：Ⅰ为普通小麦，Ⅱ为耐盐偃麦草
(3)在植物体细胞杂交中，为保证原生质体在制备过程中的完整性，经常需要将原生质体放入适宜浓度的甘露醇中以维持原生质体形态。为探究普通小麦原生质体制备中甘露醇溶液的适宜浓度，进行了如下实验。
实验材料及用具：普通小麦单细胞悬液、浓度为2ml/L的甘露醇溶液、纤维素酶、蒸馏水、培养瓶、血细胞计数板、显微镜（具有测距功能）等。
实验思路： ，处理相同且适宜时间后，用血细胞计数板和显微镜对各个培养瓶中的原生质体计数，测量原生质体的体积并记录。其中原生质体数目最多，且原生质体体积最接近植物细胞体积对应的浓度即是最适宜的甘露醇溶液浓度。
61．研究发现人溶菌酶（hLZ）是天然抗生素替代品。科学家培育出转入溶菌酶基因山羊，以大规模生产人溶菌酶（从乳汁中提取），过程如图所示。其中编号①~⑨表示过程：质粒S中的基因Leu通过控制相关酶的合成而控制亮氨酸的合成（亮氨酸是山羊细胞维持生命活动必不可少的一种必需氨基酸），基因GFP控制合成绿色荧光蛋白。四种限制性内切核酸酶的识别序列及切割位点见下表。请回答下列问题：
(1)过程②需要的限制性内切核酸酶是 ，在③中，B与切割后的质粒S用 酶连接，在两个片段相邻处形成 ，获得重组质粒T。
(2)为成功筛选出含重组质粒T的成纤维细胞，质粒S中用作标记基因的是 。为达到筛选目的，培养基的营养成分中特殊之处是 。若用PCR检测目的基因是否成功导入受体细胞中，实验组以待测的样本DNA为模板，使用目的基因的特异性引物进行PCR扩增，同时将以 片段为模板的组别作为阳性对照组，将以非目的基因片段为模板的组别作为阴性对照组。
(3)过程⑧形成的早期胚胎中 （填结构）将发育成完整转基因羊个体。
62．绿色荧光蛋白在紫外线的照射下能发出绿色荧光，最初是在一种海蜇中被发现的。转绿色荧光基因（Gfp）的幼鼠在紫外光下能发出绿色荧光。进一步研究发现，绿色荧光蛋白可以帮助人们了解细胞工作的机制，通过寻找荧光便可知道基因何时以及为什么“开启”，这项成就被称为“21世纪的显微镜”。下图表示转基因绿色荧光小鼠的培育过程，图中Ne基因编码的产物能分解G418，G418是一类对原核细胞和真核细胞都有毒性的抗生素。请回答下列有关问题：
(1)①过程将绿色荧光蛋白基因与目的基因连接起来利用的工具是 。
(2)可以从 中提取胚胎干细胞，③过程胚胎干细胞培养需要的条件有 （答出2点即可）。
(3)⑤过程应把转基因胚胎干细胞导入囊胚的 ，为了获得多只小鼠c，⑥过程的操作是 ，该过程的操作要求是 。
(4)让转基因干细胞与这些细胞一起发育成胚胎，若幼鼠 ，则说明Gfp基因在幼鼠体内成功表达。
(5)据图分析，Ne基因在转基因绿色荧光小鼠的培育过程中发挥作用的机理是 。
63．研究开发镉污染土壤的清洁技术是改良和恢复被镉污染的土壤、合理利用土壤资源的重要途径。植物具有富集土壤中镉元素的能力。科研人员将酵母液泡镉转运蛋白（YCF1）基因导人受试植物，拟提高植物对镉污染土壤的修复能力，过程如图所示。回答下列问题：
(1)镉是人体的非必需元素，一般不影响人体健康。当环境受到镉污染后，镉可在生物体内富集，通过 （填途径）进入人体，引起慢性中毒。
(2)扩增YCF1基因时，一般要向PCR反应缓冲溶液中添加Mg2+，目的是 。扩增YCFI基因选用的引物组合是 ，不选用其他引物的原因是 。
(3)已知A位点是起始密码子对应的碱基序列，b链为转录的模板链，用限制酶SamI和PstI同时切割含YCFl基因的DNA片段。为了使YCFI基因按照正确的方向与质粒连接，需要在A位点相应引物的 （填“3′”或“5′”）端添加限制酶 的识别序列。与其他方法相比，将YCF1基因导入质粒T-DNA的特点是 。
(4)由愈伤组织细胞发育成幼苗，要经历过程③的 阶段。检测后发现土壤中的镉浓度下降，能不能说明已经成功构建具有镉污染土壤高修复能力的转基因植物？请判断并说明理由： 。
64．某科研小组欲用图1所示的质粒构建人胰岛素基因表达载体，让其在大肠杆菌中表达出人胰岛素前体物质，对人胰岛素基因所在的DNA片段进行测序，发现其两端附近无限制酶EcRI、BamHI的酶切位点。已知人胰岛素基因表达时以②链为模板，且其3'端存在启动子，图1所示质粒上的ampR为氨苄青霉素抗性基因，telR为四环素抗性基因。请回答下列问题：
(1)可采用 来获得人胰岛素基因，这一方法需要先针对人胰岛素基因两端的序列来设计引物对。这一方法获得的产物一般通过 进行鉴定，若鉴定发现其中有许多种相对分子质量比人胰岛素基因小的DNA片段，则原因可能是 （答出一点）。
(2)为保证人胰岛素基因能正确连接到用限制酶EcRI和BamHI处理的图1所示质粒上，且利用表达载体上的启动子在受体菌中以②链为模板进行转录，则应在配对到①链的引物5'端添加6个碱基，序列为5'- -3'。
(3)图1质粒上的ampR和tetR一般充当基因表达载体上的标记基因，其作用是 。利用质粒上的标记基因，结合微生物的培养，可以淘汰只转入质粒的大肠杆菌而获得被成功转入人胰岛素基因表达载体的受体菌，则应将重组载体导入 （填“不抗氨苄青霉素”“不抗四环素”或“不抗氨苄青霉素和四环素”）的受体大肠杆菌中。
65．蒂蛀虫是荔枝的重要害虫。科研人员培育转基因抗虫荔枝的过程如下图1所示。图2是SalI、HindⅢ和BamHI三种限制酶的识别序列和切割位点。请回答下列问题：

(1)与RNA相比，质粒特有的化学成分是 ；抗氨苄青霉素基因的作用是 。
(2)研究人员采用了如下图巢式PCR技术获取抗虫基因，巢式PCR是一种变异的聚合酶链反应（PCR），使用两对PCR引物扩增完整的片段。第一对PCR引物（也称外引物）扩增片段和普通PCR相似。第二对引物称为巢式引物（因为他们在第一次PCR扩增片段的内部，也称内引物）结合在第一次PCR产物内部，使得第二次PCR扩增片段短于第一次扩增。
①PCR扩增时加入引物的原因是 ，在最后一个循环结束后通常还需要维持72℃5min的目的是 ，PCR产物常采用 来鉴定。
②相比于常规PCR，巢式PCR获得错误目标产物概率 ，这是因为 。
③为了使抗虫基因定向插入质粒中，第二次PCR扩增时需要在两个引物5'端分别添加的序列是 ，不添加在引物3'端的原因是 。
(3)科研人员采用农杆菌转化法将抗虫基因导入荔枝细胞，由于农杆菌中的 ，能携带目的基因进入受体细胞，并将目的基因整合到受体细胞 上。
(4)培育出的荔枝是否具有抗虫性状，可采用鉴定方法是 。
精子基因组成
aB
aBe
Ab
Abe
精子数量
4
4
4
4
组别
1
2
3
菌落数
3
1
5
限制酶
BamHI
BgIII
HindIII
Xbal
识别序列和切割位点
G'GATCC
A'GATCT
A'AGCTT
TCTAGA