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四川省眉山市仁寿县实验中学2023-2024学年高二下学期4月期中生物试题（原卷版+解析版）
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这是一份四川省眉山市仁寿县实验中学2023-2024学年高二下学期4月期中生物试题（原卷版+解析版），文件包含四川省眉山市仁寿县实验中学2023-2024学年高二下学期4月期中生物试题原卷版docx、四川省眉山市仁寿县实验中学2023-2024学年高二下学期4月期中生物试题解析版docx等2份试卷配套教学资源，其中试卷共36页， 欢迎下载使用。
一、单选题（20×2=40分）
1. 平板接种常用在微生物培养中。下列说法正确的是（ ）
A. 不含氮源的平板不能用于微生物培养
B. 平板涂布时涂布器使用前必须进行消毒
C. 接种后未长出菌落培养基可以直接丢弃
D. 利用以尿素为唯一氮源的平板能分离出合成脲酶的微生物
2. 我国早在9000年前就可以运用发酵技术获得产品，为生活增添丰富的色彩。下列说法正确的是（ ）
A. 制作果酒时，可通过控制发酵温度、发酵液pH等措施降低杂菌使果酒变质的概率
B. 利用酵母菌进行传统酿酒过程中，需一直保持无氧的条件
C. 泡菜坛装八成满可以防止发酵过程中酵母菌、乳酸菌等产生的CO2使发酵液溢出
D. 腐乳鲜美的味道主要由曲霉分解蛋白质产生的小分子肽和氨基酸引起
3. 无菌技术包括以下几个方面的叙述，其中正确的是（ ）
A. 紫外线照射前，适量喷洒石炭酸等消毒液，可以加强消毒效果
B. 不耐高温的牛奶可使用巴氏消毒法，其优点是能够杀死全部微生物，保留牛奶风味
C. 为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落
D. 在微生物接种的实验中，用95%酒精对实验者的双手和超净工作台进行消毒
4. 以下是以泡菜坛为容器制作泡菜时的4个处理：①沸盐水冷却后再倒入坛中；②盐水需要浸没全部菜料；③盖好坛盖后，向坛盖边沿的水槽中注满水；④检测泡菜中亚硝酸盐的含量。下列说法正确的是（ ）
A. ①主要是为了防止菜料表面的醋酸杆菌被杀死
B. ②的主要目的是用盐水杀死菜料表面的杂菌
C. ③为了使气体只能从泡菜坛排出而不能进入
D. ④可检测到完整发酵过程中亚硝酸盐含量逐渐降低
5. 微生物的纯培养包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤。如图为酵母菌的纯培养的部分操作步骤，下列说法正确的是（ ）
A. 完成步骤④的过程中，接种环共灼烧处理了5次
B. 以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基中加入尿素和酚红的目的是相同的
C. 该接种方法可用于获得酵母菌的纯培养物
D. 接种后，待菌液被培养基吸收，将④倒置培养，皿盖上标注菌种及接种日期等信息
6. 科学家采用体外受精技术获得紫羚羊胚胎，并将其移植到长角羚羊体内，使后者成功妊娠并产仔，该工作有助于恢复濒危紫羚羊的种群数量。此过程不涉及的操作是（ ）
A. 超数排卵B. 精子获能处理
C. 细胞核移植D. 胚胎培养
7. 解脂菌能利用分泌的脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸收利用。脂肪酸会使醇溶青琼脂平板变为深蓝色。将不能直接吸收脂肪的甲，乙两种菌分别等量接种在醇溶青琼脂平板上培养。甲菌菌落周围呈现深蓝色，乙菌菌落周围不变色，下列说法错误的是（ ）
A. 甲菌属于解脂菌
B. 实验中所用培养基以脂肪为唯一碳源
C. 可将两种菌分别接种在同一平板的不同区域进行对比
D. 该平板可用来比较解脂菌分泌脂肪酶的能力
8. 小曲白酒以大米、大麦、小麦等为原料，以小曲为发酵剂酿造而成。小曲中所含的微生物主要有好氧微生物霉菌、兼性厌氧型微生物酵母菌，还有乳酸菌、醋酸菌等细菌。酿酒的原理主要是酵母菌在无氧条件下利用葡萄糖发酵产生酒精。传统酿造工艺流程如图所示。关于小曲白酒的酿造过程，下列叙述错误的是（ ）
A. 若发酵坛密封不严可能会导致酒变酸
B. 蒸熟的原料立即加入糟醅后密封可高效进行酒精发酵
C. 糖化主要是利用霉菌将淀粉水解为葡萄糖
D. 酿造白酒的过程也是微生物生长繁殖的过程
9. 在利用洋葱进行“DNA的粗提取和鉴定”的实验中，相关操作正确的是（ ）
A. 研磨洋葱时，加入适量的研磨液瓦解细胞膜，充分释放核DNA
B. 利用定性滤纸进行过滤，以去除杂质，提高DNA的含量和纯度
C. 向DNA滤液中加入等体积、预冷的50%酒精，以获得DNA粗提物
D. 将白色丝状物加入4mL二苯胺试剂中沸水浴，以利于发生颜色反应
10. 如图表示细胞工程操作中的某些过程，下列叙述正确的是（ ）
A. 若A、B分别表示白菜和甘蓝的原生质体，则需对C每日给予光照以获得白菜—甘蓝植株
B. 若A、B分别表示B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，则仅利用抗原—抗体结合的原理即可筛选获得可分泌特定抗体的C
C 若A、B分别表示精子和卵细胞，体外受精后，需将C培养至原肠胚阶段再进行胚胎分割，以获得更多个体
D. 若A、B分别表示体细胞和去核卵母细胞，则C的遗传物质与A不完全相同
11. 豆科植物苦参能产生苦参碱，苦参碱具有调节免疫、抗癌等作用。科研人员利用苦参下胚轴进行育苗和生物碱提取，过程如图。下列说法正确的是（ ）
A. 下胚轴切段需用无水乙醇和次氯酸钠进行消毒处理
B. 过程①和过程②分别发生了细胞的脱分化和再分化
C. 过程③所得苦参无毒幼苗具有抗病毒的遗传特性
D. 通过植物细胞培养获得苦参碱的过程不需要实现细胞的全能性
12. 下列关于细胞工程的叙述，正确的是（ ）
A. 植物体细胞杂交技术属于有性杂交，包括细胞融合和植物组织培养技术
B. 植物组织培养技术和动物细胞培养技术的原理相同
C. 卵母细胞去核的方法是显微注射法，还可以用紫外光短时间照射等方法
D. 重构胚需要用物理或化学方法激活，使之完成细胞分裂和发育进程
13. 清酒乳杆菌是臭鳜鱼中的优势乳酸菌，科研人员尝试从臭鳜鱼中分离优质的清酒乳杆菌，实验流程如图①～⑤所示。图中MRS培养基的主要成分有胰蛋白胨、牛肉膏、酵母粉、番茄汁、葡萄糖、碳酸钙（乳酸能与碳酸钙反应出现溶钙圈）、溴甲酚绿（pH显色剂，酸性显示黄色、碱性显示蓝绿色）、琼脂。下列叙述错误的是（ ）
A. 制作上述平板时培养基中要加入血清，细胞才能正常生长
B. 步骤③将菌悬液稀释了1000倍，④应进行厌氧培养
C. 为清酒乳杆菌提供氮源的主要是胰蛋白胨和牛肉膏
D. 步骤④应挑取平板上呈黄色、有溶钙圈的菌落进行重复划线培养
14. 科学家通过体外诱导小鼠成纤维细胞，获得了类似胚胎干细胞的一种细胞，称为诱导多能干细胞（简称iPS细胞）。下列叙述错误的是（ ）
A. 干细胞存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等组织和器官中
B. 将特定基因转入成纤维细胞能诱导其转化形成iPS细胞
C. iPS细胞具有组织特异性，能分化成特定的细胞或组织
D. 培养人类扩展的多能干细胞的培养基中一般要加入血清
15. 胚胎工程的许多技术,实际上是在体外条件下,对动物自然受精和早期胚胎发育条件进行的模拟操作。因此,了解哺乳动物受精和早期胚胎发育的规律十分重要。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 在自然条件下，哺乳动物的受精过程在子宫中完成
B. 精子入卵后，卵细胞膜会立即发生生理反应,阻止其他精子入卵
C. 胚胎发育早期，细胞的数量不断增加,但胚胎的总体积并不增加
D. 囊胚期会出现透明带破裂,胚胎从其中伸展出来，这一过程叫作孵化
16. 我国科学家领衔在世界上首次将人类多能干细胞（PSC）转化为8细胞阶段的全能性胚胎样细胞（8CLC，相当于受精卵发育3天状态的全能干细胞），并且转化产生的8CLC在体内还能分化成胎盘细胞。下列有关说法正确的是（ ）
A. PSC能发育成多种组织，体现了细胞的全能性
B. 8CLC在体外培养时不能被诱导分化为造血干细胞
C. 8CLC在体内可逐渐分化成胎儿的各种组织细胞，体现了基因的选择性表达
D. 人体内胎盘是由囊胚期内细胞团发育而来的
17. 线粒体置换技术是将妈妈携带突变线粒体的卵子细胞核移植到去核的健康线粒体捐赠者卵胞浆中获得的重构卵母细胞，与携带者丈夫精子进行受精，从而获得重构胚胎也就是通常说的“三亲胚胎”，也被称为“第四代试管婴儿”。下列有关说法错误的是（ ）
A. 重构卵母细胞需培养成熟才可以与获能精子受精
B. 第四代试管婴儿的DNA来自携带者与其丈夫
C. 第四代试管婴儿可避免线粒体疾病
D. 第四代试管婴儿的培育还需要经历早期胚胎培养和胚胎移植等技术
18. 某细菌DNA分子上有4个Sau3A Ⅰ的酶切位点，经Sau3AⅠ处理后会形成4个大小不同的DNA片段。若是用BamHⅠ处理，则只会形成2个大小不同的DNA片段。Sau3AⅠ和BamH Ⅰ的识别序列及切割位点如表所示。下列叙述不正确的是（ ）
A. 上述两种限制酶切割后可形成相同的黏性末端
B. 该DNA分子上有两个BamHⅠ的酶切位点
C. 黏性末端能通过T4DNA连接酶连接
D. 若用两种酶共同处理，会形成6个大小不同的DNA片段
19. 为解决杂交瘤细胞在传代培养中出现来自B淋巴细胞的染色体丢失问题，研究者将抗原刺激后的B淋巴细胞，用EBV（一种病毒颗粒）感染，获得“染色体核型稳定”的EBV转化细胞。EBV转化细胞能够在HAT培养基中存活，但对Oua敏感。骨髓瘤细胞在HAT培养基中不能存活，但对Oua不敏感。下图表示操作过程。下列分析错误的是（ ）
A. B淋巴细胞可从多次间歇注射某种抗原的动物脾脏中获得
B. HAT培养基和Oua筛选去除的是未融合的EBV转化细胞
C. 杂交瘤细胞染色体丢失可能会导致抗体的产生能力下降
D. 图中获得的杂交瘤细胞需经抗体检测筛选后才可用于生产
20. THP9基因是野生玉米中控制高蛋白含量的优良基因，研究者利用基因工程技术将THP9基因转到玉米细胞内，从而获得转基因高蛋白玉米新品种。已知图中THP9基因转录的方向为从左往右。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 若采用PCR技术对一个THP9基因进行扩增，则第n代复制共需要引物2n-1个
B. 构建基因表达载体时，用Mfe Ⅰ、Hind Ⅲ切割质粒，用EcR Ⅰ、Hind Ⅲ切割目的基因
C. 利用PCR技术获取THP9基因时应选择引物1和引物4
D. PCR过程中用到了缓冲液，缓冲液中一般要添加Mg2+用于激活RNA聚合酶
二、非选择题（共60分）
21. 工业上所说的发酵是指微生物在有氧或无氧条件下通过分解与合成代谢将某些原料物质转化为特定产品的过程。利用微生物发酵制作酱油在我国具有悠久的历史。某企业通过发酵制作酱油的流程示意图如下。
回答下列问题：
（1）米曲霉发酵过程中，加入大豆、小麦和麦麸可以为米曲霉的生长提供营养物质，大豆中的___________可为米曲霉的生长提供氮源，小麦中的淀粉可为米曲霉的生长提供___________。
（2）米曲霉发酵过程的主要目的是使米曲霉充分生长繁殖，大量分泌制作酱油过程所需的酶类，这些酶中的_____、______能分别将发酵池中的蛋白质和脂肪分解成易于吸收、风味独特的成分，如将蛋白质分解为小分子的肽和__________。米曲霉发酵过程需要提供营养物质、通入空气并搅拌，由此可以判断米曲霉属于___________（填“自养厌氧”“异养厌氧”或“异养好氧”）微生物。
（3）在发酵池发酵阶段添加的乳酸菌属于___________（填“真核生物”或“原核生物”）；添加的酵母菌在无氧条件下分解葡萄糖的产物是___________。在该阶段抑制杂菌污染和繁殖是保证酱油质量的重要因素，据图分析该阶段中可以抑制杂菌生长的物质是___________（答出1点即可）。
22. 某种物质S（一种含有C、H、N的有机物）难以降解，会对环境造成污染，只有某些细菌能降解S。研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解S的细菌菌株。实验过程中需要甲、乙两种培养基，甲的组分为无机盐、水和S，乙的组分为无机盐、水、S和Y。
回答下列问题：
（1）实验时，盛有水或培养基的摇瓶通常采用_______________的方法进行灭菌。乙培养基中的Y物质是_______________。甲、乙培养基均属于______________培养基。
（2）实验中初步估测摇瓶M中细菌细胞数为2×107 个/mL，若要在每个平板上涂布100μL稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过200个，则至少应将摇瓶M中的菌液稀释________________倍。
（3）在步骤⑤筛选过程中，发现当培养基中的S超过某一浓度时，某菌株对S的降解量反而下降，其原因可能是________________（答出1点即可）。
（4）若要测定淤泥中能降解S的细菌细胞数，请写出主要实验步骤________________。
（5）上述实验中，甲、乙两种培养基所含有的组分虽然不同，但都能为细菌的生长提供4类营养物质，即________________。
23. 紫杉醇是红豆杉产生的一种重要抗癌物质，利用植物组织培养技术获得紫杉醇的基本过程如图所示。回答下列问题：
（1）外植体经_________过程形成愈伤组织。用纤维素酶和果胶酶对愈伤组织进行处理的目的是_________。
（2）将诱导出的愈伤组织接种至装有液体培养基的三角瓶中振荡培养，影响细胞的生长速度和紫杉醇含量的因素除了温度、pH、光照、氧气等条件、培养基的营养物质外，还有等_________（答出两点）。
（3）如要将外源基因导入红豆杉细胞进行遗传改造，图1表示构建重组DNA的过程示意图，载体质粒P0具有四环素抗性基因（tetr）和氨苄青霉素抗性基因（ampr），回答下列问题：
①图中酶1和酶3分别是_________；②为筛选出含重组质粒P3的菌落，采用含有不同抗生素的平板进行筛选，得到甲、乙、丙三类菌落，三类菌落形态相同，生长情况如图2所示，应选择的菌落类型是_________类，未转入质粒的菌落类型是_________类；（填字母类型）
（4）下图是通过植物细胞工程技术培育耐盐杂种植株的过程。回答下列问题：
上述培育耐盐杂种植株的过程运用了植物体细胞杂交技术，此技术的优势是_________。若甲植物（2N=18），乙植物（4N=32），则目的植株_________（填“可育”或“不可育”），原因是_________。
24. 为降低人类乳腺癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体一药物偶联物（ADC），过程如下图所示。
（1）动物细胞培养时，可以用____________酶处理动物组织，得到分散的组织细胞，培养基中应含有细胞所需要的各种营养物质。在培养瓶中动物细胞培养一段时间后停止增殖的原因是____________（至少回答两点）。
（2）为了刺激小鼠机体产生更多的B淋巴细胞，每隔2周用取自____________的特定抗原注射小鼠1次，共注射3次。最后一次免疫后第3天，取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合，常用的生物诱导剂是____________。为了获得杂交瘤细胞，应将诱导融合后的细胞放在____________培养基上进行培养。
（3）通过过程②得到的细胞还必须经过过程③克隆化培养和____________才能筛选得到符合要求的杂交瘤细胞，杂交瘤细胞的特点是____________。杂交瘤细胞可采用注射到小鼠腹腔内培养或进行体外培养的方式进行扩大培养。体外培养时，首先应保证其处于____________的环境，除了适宜的营养物质、温度等条件外，还需要控制气体条件是____________与5%CO₂的混合气体，此外在使用合成培养基时通常还需加入血清。
（4）单克隆抗体的优点是____________。单克隆抗体是ADC中的____________（填“a”或“b”）部分。
（5）研究发现，ADC在患者体内的作用如下图所示。
①单克隆抗体除了运载药物外，还有____________等作用。
②ADC进入乳腺癌细胞后，细胞中的溶酶体可将其水解，释放出的药物最终作用于细胞核，可导致____________。
③ADC能降低乳腺癌治疗药物的副作用，是因为单克隆抗体能精确地定位乳腺癌细胞，该过程依赖于____________原理。
25. 人血清白蛋白（HSA）在临床上的需求量大，由于其来源有限和有生物污染的风险，重组人血清白蛋白（rHSA），成为其重要的替代品。回答下列（一）（二）小题：
（一）途径一：基因工程结合发酵工程构建人血清白蛋白工程菌：
科研人员将HSA基因转入酵母菌细胞，获得了重组人血清白蛋白。图为酵母菌基因改造以及工业化发酵生产rHSA的过程示意图，其中I、II、III、IV是四种不同的限制酶，具各自识别的酶切位点如表所示。
（1）随着测序技术的发展，为获取人血清白蛋白基因，可通过检索_________获取其编码序列，用化学合成法制备得到。将HSA基因插入质粒中时，最好选择限制酶_________进行共同切割。将受体酵母菌置于含有_________的培养基中进行筛选培养，以获得能表达HSA的细胞。重组基因表达载体中的启动子的作用是_________。
（2）工业化发酵生产rHSA的过程一般包括菌种的选育，扩大培养、_________、接种、发酵、产品的分离、提纯等方面，将rHSA工程菌接种至发酵罐内进行扩增，培养过程中可定期取样并使用细菌计数板对_________（填“菌体”或“菌落”）进行直接计数，以评估增殖情况。发酵结束后，采用_________（答出2点即可）等方法获得所需的发酵产品。
（二）途径二：基因工程结合细胞工程构建人血清白蛋白乳腺反应器
I．采集良种供体牛的卵母细胞和精液，通过体外受精，形成奶牛受精卵；
II．构建基因的表达载体，并将其导入奶牛受精卵，形成转基因细胞；
III．电脉冲刺激转基因细胞促使其形成早期胚胎；
IV．将胚胎移植到受体母牛的子宫中，最终发育成转基因小牛。
（3）实验步骤I中，在体外受精前，需要对奶牛的精子进行_________处理。
（4）实验步骤III中当胚胎发育至囊胚阶段，取其_________做DNA分析来进行性别鉴定，筛选出发育状态良好的雄性胚胎进行移植。
（5）实验步骤IV进行胚胎移植，其实质是_________。为实现这一工序，需用相应激素对受体进行_________处理。
（6）有人提议将乳腺反应器改成膀胱反应器，请分析利用膀胱反应器比乳腺反应器产量高的原因_________（答出两点即可）。限制酶名称
识别序列及切割位点
BamH Ⅰ
G↓GATCC
Sau3A Ⅰ
↓GATC
EcRⅠ
BamHⅠ
KpnⅠ
MfeⅠ
HindⅢ
限制酶
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
Ⅳ
识别序列及切割位点
一、单选题（20×2=40分）
1. 平板接种常用在微生物培养中。下列说法正确的是（ ）
A. 不含氮源的平板不能用于微生物培养
B. 平板涂布时涂布器使用前必须进行消毒
C. 接种后未长出菌落培养基可以直接丢弃
D. 利用以尿素为唯一氮源的平板能分离出合成脲酶的微生物
2. 我国早在9000年前就可以运用发酵技术获得产品，为生活增添丰富的色彩。下列说法正确的是（ ）
A. 制作果酒时，可通过控制发酵温度、发酵液pH等措施降低杂菌使果酒变质的概率
B. 利用酵母菌进行传统酿酒过程中，需一直保持无氧的条件
C. 泡菜坛装八成满可以防止发酵过程中酵母菌、乳酸菌等产生的CO2使发酵液溢出
D. 腐乳鲜美的味道主要由曲霉分解蛋白质产生的小分子肽和氨基酸引起
3. 无菌技术包括以下几个方面的叙述，其中正确的是（ ）
A. 紫外线照射前，适量喷洒石炭酸等消毒液，可以加强消毒效果
B. 不耐高温的牛奶可使用巴氏消毒法，其优点是能够杀死全部微生物，保留牛奶风味
C. 为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落
D. 在微生物接种的实验中，用95%酒精对实验者的双手和超净工作台进行消毒
4. 以下是以泡菜坛为容器制作泡菜时的4个处理：①沸盐水冷却后再倒入坛中；②盐水需要浸没全部菜料；③盖好坛盖后，向坛盖边沿的水槽中注满水；④检测泡菜中亚硝酸盐的含量。下列说法正确的是（ ）
A. ①主要是为了防止菜料表面的醋酸杆菌被杀死
B. ②的主要目的是用盐水杀死菜料表面的杂菌
C. ③为了使气体只能从泡菜坛排出而不能进入
D. ④可检测到完整发酵过程中亚硝酸盐含量逐渐降低
5. 微生物的纯培养包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤。如图为酵母菌的纯培养的部分操作步骤，下列说法正确的是（ ）
A. 完成步骤④的过程中，接种环共灼烧处理了5次
B. 以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基中加入尿素和酚红的目的是相同的
C. 该接种方法可用于获得酵母菌的纯培养物
D. 接种后，待菌液被培养基吸收，将④倒置培养，皿盖上标注菌种及接种日期等信息
6. 科学家采用体外受精技术获得紫羚羊胚胎，并将其移植到长角羚羊体内，使后者成功妊娠并产仔，该工作有助于恢复濒危紫羚羊的种群数量。此过程不涉及的操作是（ ）
A. 超数排卵B. 精子获能处理
C. 细胞核移植D. 胚胎培养
7. 解脂菌能利用分泌的脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸收利用。脂肪酸会使醇溶青琼脂平板变为深蓝色。将不能直接吸收脂肪的甲，乙两种菌分别等量接种在醇溶青琼脂平板上培养。甲菌菌落周围呈现深蓝色，乙菌菌落周围不变色，下列说法错误的是（ ）
A. 甲菌属于解脂菌
B. 实验中所用培养基以脂肪为唯一碳源
C. 可将两种菌分别接种在同一平板的不同区域进行对比
D. 该平板可用来比较解脂菌分泌脂肪酶的能力
8. 小曲白酒以大米、大麦、小麦等为原料，以小曲为发酵剂酿造而成。小曲中所含的微生物主要有好氧微生物霉菌、兼性厌氧型微生物酵母菌，还有乳酸菌、醋酸菌等细菌。酿酒的原理主要是酵母菌在无氧条件下利用葡萄糖发酵产生酒精。传统酿造工艺流程如图所示。关于小曲白酒的酿造过程，下列叙述错误的是（ ）
A. 若发酵坛密封不严可能会导致酒变酸
B. 蒸熟的原料立即加入糟醅后密封可高效进行酒精发酵
C. 糖化主要是利用霉菌将淀粉水解为葡萄糖
D. 酿造白酒的过程也是微生物生长繁殖的过程
9. 在利用洋葱进行“DNA的粗提取和鉴定”的实验中，相关操作正确的是（ ）
A. 研磨洋葱时，加入适量的研磨液瓦解细胞膜，充分释放核DNA
B. 利用定性滤纸进行过滤，以去除杂质，提高DNA的含量和纯度
C. 向DNA滤液中加入等体积、预冷的50%酒精，以获得DNA粗提物
D. 将白色丝状物加入4mL二苯胺试剂中沸水浴，以利于发生颜色反应
10. 如图表示细胞工程操作中的某些过程，下列叙述正确的是（ ）
A. 若A、B分别表示白菜和甘蓝的原生质体，则需对C每日给予光照以获得白菜—甘蓝植株
B. 若A、B分别表示B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，则仅利用抗原—抗体结合的原理即可筛选获得可分泌特定抗体的C
C 若A、B分别表示精子和卵细胞，体外受精后，需将C培养至原肠胚阶段再进行胚胎分割，以获得更多个体
D. 若A、B分别表示体细胞和去核卵母细胞，则C的遗传物质与A不完全相同
11. 豆科植物苦参能产生苦参碱，苦参碱具有调节免疫、抗癌等作用。科研人员利用苦参下胚轴进行育苗和生物碱提取，过程如图。下列说法正确的是（ ）
A. 下胚轴切段需用无水乙醇和次氯酸钠进行消毒处理
B. 过程①和过程②分别发生了细胞的脱分化和再分化
C. 过程③所得苦参无毒幼苗具有抗病毒的遗传特性
D. 通过植物细胞培养获得苦参碱的过程不需要实现细胞的全能性
12. 下列关于细胞工程的叙述，正确的是（ ）
A. 植物体细胞杂交技术属于有性杂交，包括细胞融合和植物组织培养技术
B. 植物组织培养技术和动物细胞培养技术的原理相同
C. 卵母细胞去核的方法是显微注射法，还可以用紫外光短时间照射等方法
D. 重构胚需要用物理或化学方法激活，使之完成细胞分裂和发育进程
13. 清酒乳杆菌是臭鳜鱼中的优势乳酸菌，科研人员尝试从臭鳜鱼中分离优质的清酒乳杆菌，实验流程如图①～⑤所示。图中MRS培养基的主要成分有胰蛋白胨、牛肉膏、酵母粉、番茄汁、葡萄糖、碳酸钙（乳酸能与碳酸钙反应出现溶钙圈）、溴甲酚绿（pH显色剂，酸性显示黄色、碱性显示蓝绿色）、琼脂。下列叙述错误的是（ ）
A. 制作上述平板时培养基中要加入血清，细胞才能正常生长
B. 步骤③将菌悬液稀释了1000倍，④应进行厌氧培养
C. 为清酒乳杆菌提供氮源的主要是胰蛋白胨和牛肉膏
D. 步骤④应挑取平板上呈黄色、有溶钙圈的菌落进行重复划线培养
14. 科学家通过体外诱导小鼠成纤维细胞，获得了类似胚胎干细胞的一种细胞，称为诱导多能干细胞（简称iPS细胞）。下列叙述错误的是（ ）
A. 干细胞存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等组织和器官中
B. 将特定基因转入成纤维细胞能诱导其转化形成iPS细胞
C. iPS细胞具有组织特异性，能分化成特定的细胞或组织
D. 培养人类扩展的多能干细胞的培养基中一般要加入血清
15. 胚胎工程的许多技术,实际上是在体外条件下,对动物自然受精和早期胚胎发育条件进行的模拟操作。因此,了解哺乳动物受精和早期胚胎发育的规律十分重要。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 在自然条件下，哺乳动物的受精过程在子宫中完成
B. 精子入卵后，卵细胞膜会立即发生生理反应,阻止其他精子入卵
C. 胚胎发育早期，细胞的数量不断增加,但胚胎的总体积并不增加
D. 囊胚期会出现透明带破裂,胚胎从其中伸展出来，这一过程叫作孵化
16. 我国科学家领衔在世界上首次将人类多能干细胞（PSC）转化为8细胞阶段的全能性胚胎样细胞（8CLC，相当于受精卵发育3天状态的全能干细胞），并且转化产生的8CLC在体内还能分化成胎盘细胞。下列有关说法正确的是（ ）
A. PSC能发育成多种组织，体现了细胞的全能性
B. 8CLC在体外培养时不能被诱导分化为造血干细胞
C. 8CLC在体内可逐渐分化成胎儿的各种组织细胞，体现了基因的选择性表达
D. 人体内胎盘是由囊胚期内细胞团发育而来的
17. 线粒体置换技术是将妈妈携带突变线粒体的卵子细胞核移植到去核的健康线粒体捐赠者卵胞浆中获得的重构卵母细胞，与携带者丈夫精子进行受精，从而获得重构胚胎也就是通常说的“三亲胚胎”，也被称为“第四代试管婴儿”。下列有关说法错误的是（ ）
A. 重构卵母细胞需培养成熟才可以与获能精子受精
B. 第四代试管婴儿的DNA来自携带者与其丈夫
C. 第四代试管婴儿可避免线粒体疾病
D. 第四代试管婴儿的培育还需要经历早期胚胎培养和胚胎移植等技术
18. 某细菌DNA分子上有4个Sau3A Ⅰ的酶切位点，经Sau3AⅠ处理后会形成4个大小不同的DNA片段。若是用BamHⅠ处理，则只会形成2个大小不同的DNA片段。Sau3AⅠ和BamH Ⅰ的识别序列及切割位点如表所示。下列叙述不正确的是（ ）
A. 上述两种限制酶切割后可形成相同的黏性末端
B. 该DNA分子上有两个BamHⅠ的酶切位点
C. 黏性末端能通过T4DNA连接酶连接
D. 若用两种酶共同处理，会形成6个大小不同的DNA片段
19. 为解决杂交瘤细胞在传代培养中出现来自B淋巴细胞的染色体丢失问题，研究者将抗原刺激后的B淋巴细胞，用EBV（一种病毒颗粒）感染，获得“染色体核型稳定”的EBV转化细胞。EBV转化细胞能够在HAT培养基中存活，但对Oua敏感。骨髓瘤细胞在HAT培养基中不能存活，但对Oua不敏感。下图表示操作过程。下列分析错误的是（ ）
A. B淋巴细胞可从多次间歇注射某种抗原的动物脾脏中获得
B. HAT培养基和Oua筛选去除的是未融合的EBV转化细胞
C. 杂交瘤细胞染色体丢失可能会导致抗体的产生能力下降
D. 图中获得的杂交瘤细胞需经抗体检测筛选后才可用于生产
20. THP9基因是野生玉米中控制高蛋白含量的优良基因，研究者利用基因工程技术将THP9基因转到玉米细胞内，从而获得转基因高蛋白玉米新品种。已知图中THP9基因转录的方向为从左往右。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 若采用PCR技术对一个THP9基因进行扩增，则第n代复制共需要引物2n-1个
B. 构建基因表达载体时，用Mfe Ⅰ、Hind Ⅲ切割质粒，用EcR Ⅰ、Hind Ⅲ切割目的基因
C. 利用PCR技术获取THP9基因时应选择引物1和引物4
D. PCR过程中用到了缓冲液，缓冲液中一般要添加Mg2+用于激活RNA聚合酶
二、非选择题（共60分）
21. 工业上所说的发酵是指微生物在有氧或无氧条件下通过分解与合成代谢将某些原料物质转化为特定产品的过程。利用微生物发酵制作酱油在我国具有悠久的历史。某企业通过发酵制作酱油的流程示意图如下。
回答下列问题：
（1）米曲霉发酵过程中，加入大豆、小麦和麦麸可以为米曲霉的生长提供营养物质，大豆中的___________可为米曲霉的生长提供氮源，小麦中的淀粉可为米曲霉的生长提供___________。
（2）米曲霉发酵过程的主要目的是使米曲霉充分生长繁殖，大量分泌制作酱油过程所需的酶类，这些酶中的_____、______能分别将发酵池中的蛋白质和脂肪分解成易于吸收、风味独特的成分，如将蛋白质分解为小分子的肽和__________。米曲霉发酵过程需要提供营养物质、通入空气并搅拌，由此可以判断米曲霉属于___________（填“自养厌氧”“异养厌氧”或“异养好氧”）微生物。
（3）在发酵池发酵阶段添加的乳酸菌属于___________（填“真核生物”或“原核生物”）；添加的酵母菌在无氧条件下分解葡萄糖的产物是___________。在该阶段抑制杂菌污染和繁殖是保证酱油质量的重要因素，据图分析该阶段中可以抑制杂菌生长的物质是___________（答出1点即可）。
22. 某种物质S（一种含有C、H、N的有机物）难以降解，会对环境造成污染，只有某些细菌能降解S。研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解S的细菌菌株。实验过程中需要甲、乙两种培养基，甲的组分为无机盐、水和S，乙的组分为无机盐、水、S和Y。
回答下列问题：
（1）实验时，盛有水或培养基的摇瓶通常采用_______________的方法进行灭菌。乙培养基中的Y物质是_______________。甲、乙培养基均属于______________培养基。
（2）实验中初步估测摇瓶M中细菌细胞数为2×107 个/mL，若要在每个平板上涂布100μL稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过200个，则至少应将摇瓶M中的菌液稀释________________倍。
（3）在步骤⑤筛选过程中，发现当培养基中的S超过某一浓度时，某菌株对S的降解量反而下降，其原因可能是________________（答出1点即可）。
（4）若要测定淤泥中能降解S的细菌细胞数，请写出主要实验步骤________________。
（5）上述实验中，甲、乙两种培养基所含有的组分虽然不同，但都能为细菌的生长提供4类营养物质，即________________。
23. 紫杉醇是红豆杉产生的一种重要抗癌物质，利用植物组织培养技术获得紫杉醇的基本过程如图所示。回答下列问题：
（1）外植体经_________过程形成愈伤组织。用纤维素酶和果胶酶对愈伤组织进行处理的目的是_________。
（2）将诱导出的愈伤组织接种至装有液体培养基的三角瓶中振荡培养，影响细胞的生长速度和紫杉醇含量的因素除了温度、pH、光照、氧气等条件、培养基的营养物质外，还有等_________（答出两点）。
（3）如要将外源基因导入红豆杉细胞进行遗传改造，图1表示构建重组DNA的过程示意图，载体质粒P0具有四环素抗性基因（tetr）和氨苄青霉素抗性基因（ampr），回答下列问题：
①图中酶1和酶3分别是_________；②为筛选出含重组质粒P3的菌落，采用含有不同抗生素的平板进行筛选，得到甲、乙、丙三类菌落，三类菌落形态相同，生长情况如图2所示，应选择的菌落类型是_________类，未转入质粒的菌落类型是_________类；（填字母类型）
（4）下图是通过植物细胞工程技术培育耐盐杂种植株的过程。回答下列问题：
上述培育耐盐杂种植株的过程运用了植物体细胞杂交技术，此技术的优势是_________。若甲植物（2N=18），乙植物（4N=32），则目的植株_________（填“可育”或“不可育”），原因是_________。
24. 为降低人类乳腺癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体一药物偶联物（ADC），过程如下图所示。
（1）动物细胞培养时，可以用____________酶处理动物组织，得到分散的组织细胞，培养基中应含有细胞所需要的各种营养物质。在培养瓶中动物细胞培养一段时间后停止增殖的原因是____________（至少回答两点）。
（2）为了刺激小鼠机体产生更多的B淋巴细胞，每隔2周用取自____________的特定抗原注射小鼠1次，共注射3次。最后一次免疫后第3天，取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合，常用的生物诱导剂是____________。为了获得杂交瘤细胞，应将诱导融合后的细胞放在____________培养基上进行培养。
（3）通过过程②得到的细胞还必须经过过程③克隆化培养和____________才能筛选得到符合要求的杂交瘤细胞，杂交瘤细胞的特点是____________。杂交瘤细胞可采用注射到小鼠腹腔内培养或进行体外培养的方式进行扩大培养。体外培养时，首先应保证其处于____________的环境，除了适宜的营养物质、温度等条件外，还需要控制气体条件是____________与5%CO₂的混合气体，此外在使用合成培养基时通常还需加入血清。
（4）单克隆抗体的优点是____________。单克隆抗体是ADC中的____________（填“a”或“b”）部分。
（5）研究发现，ADC在患者体内的作用如下图所示。
①单克隆抗体除了运载药物外，还有____________等作用。
②ADC进入乳腺癌细胞后，细胞中的溶酶体可将其水解，释放出的药物最终作用于细胞核，可导致____________。
③ADC能降低乳腺癌治疗药物的副作用，是因为单克隆抗体能精确地定位乳腺癌细胞，该过程依赖于____________原理。
25. 人血清白蛋白（HSA）在临床上的需求量大，由于其来源有限和有生物污染的风险，重组人血清白蛋白（rHSA），成为其重要的替代品。回答下列（一）（二）小题：
（一）途径一：基因工程结合发酵工程构建人血清白蛋白工程菌：
科研人员将HSA基因转入酵母菌细胞，获得了重组人血清白蛋白。图为酵母菌基因改造以及工业化发酵生产rHSA的过程示意图，其中I、II、III、IV是四种不同的限制酶，具各自识别的酶切位点如表所示。
（1）随着测序技术的发展，为获取人血清白蛋白基因，可通过检索_________获取其编码序列，用化学合成法制备得到。将HSA基因插入质粒中时，最好选择限制酶_________进行共同切割。将受体酵母菌置于含有_________的培养基中进行筛选培养，以获得能表达HSA的细胞。重组基因表达载体中的启动子的作用是_________。
（2）工业化发酵生产rHSA的过程一般包括菌种的选育，扩大培养、_________、接种、发酵、产品的分离、提纯等方面，将rHSA工程菌接种至发酵罐内进行扩增，培养过程中可定期取样并使用细菌计数板对_________（填“菌体”或“菌落”）进行直接计数，以评估增殖情况。发酵结束后，采用_________（答出2点即可）等方法获得所需的发酵产品。
（二）途径二：基因工程结合细胞工程构建人血清白蛋白乳腺反应器
I．采集良种供体牛的卵母细胞和精液，通过体外受精，形成奶牛受精卵；
II．构建基因的表达载体，并将其导入奶牛受精卵，形成转基因细胞；
III．电脉冲刺激转基因细胞促使其形成早期胚胎；
IV．将胚胎移植到受体母牛的子宫中，最终发育成转基因小牛。
（3）实验步骤I中，在体外受精前，需要对奶牛的精子进行_________处理。
（4）实验步骤III中当胚胎发育至囊胚阶段，取其_________做DNA分析来进行性别鉴定，筛选出发育状态良好的雄性胚胎进行移植。
（5）实验步骤IV进行胚胎移植，其实质是_________。为实现这一工序，需用相应激素对受体进行_________处理。
（6）有人提议将乳腺反应器改成膀胱反应器，请分析利用膀胱反应器比乳腺反应器产量高的原因_________（答出两点即可）。限制酶名称
识别序列及切割位点
BamH Ⅰ
G↓GATCC
Sau3A Ⅰ
↓GATC
EcRⅠ
BamHⅠ
KpnⅠ
MfeⅠ
HindⅢ
限制酶
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
Ⅳ
识别序列及切割位点
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