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四川省眉山市仁寿县2023-2024学年高二下学期4月期中联考生物试题（Word版附解析）
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这是一份四川省眉山市仁寿县2023-2024学年高二下学期4月期中联考生物试题（Word版附解析），共39页。试卷主要包含了单选题，非选择题等内容，欢迎下载使用。
1. 人工防护林具有防风、固沙及保护农田等作用，对维护区域生态系统稳定具有重要意义。下列叙述正确的是（ ）
A. 防护林通过自组织、自我调节可实现自身结构与功能的协调
B. 防护林建设应选择本地种，遵循了生态工程的循环原理
C. 防护林建成后，若失去人类的维护将会发生初生演替
D. 防护林的防风、固沙及保护农田的作用体现了生物多样性的直接价值
2. “一粥一饭，当思来之不易；半丝半缕，恒念物力维艰”体现了日常生活中减少生态足迹的理念，下列选项中都能减少生态足迹的是（ ）
①光盘行动②自驾旅游③高效农业④桑基鱼塘⑤一次性餐具使用⑥秸秆焚烧
A. ①③④B. ①④⑥C. ②③⑤D. ②⑤⑥
3. 下列关于微生物纯培养与发酵工程的说法正确的是（ ）
A. 微生物的纯培养物就是不含有代谢废物的微生物培养物
B. 平板划线法既可以用于微生物的纯培养，又可用于微生物计数
C. 利用酵母菌发酵产生的单细胞蛋白属于分泌蛋白，可制成微生物饲料
D. 在农牧业中，利用发酵工程生产的微生物肥料一般是微生物的代谢产物
4. 下列关于豆腐乳制作的相关叙述，说法错误的是（ ）
A. 在加盐腌制豆腐乳时，接近瓶口表面的盐要铺厚一些
B. 青霉、曲霉、酵母、毛霉等多种微生物参与豆腐乳发酵
C. 现代食品企业是在无菌条件下接种毛霉来生产豆腐乳
D. 卤汤中酒的含量过高，豆腐乳成熟的时间会明显提前
5. 用培养液培养三种细菌，让它们在三支不同的试管中生长，如图显示了细菌的生长层，如果此时往三支试管中通入氧气，则细菌的繁殖速度将是( )
A. 甲不变，乙减慢，丙加快B. 甲加快，乙加快，丙减慢
C. 甲减慢，乙减慢，丙加快D. 甲减慢，乙加快，丙减慢
6. 菜籽粕含有35%～45%蛋白质，是畜禽饲料的重要原料，但其中的单宁等抗营养因子限制了菜籽粕的应用。研究者将不同菌种接种到菜籽粕与麸皮制成的培养基中发酵48h，测定菜籽粕中单宁的含量，结果如图，下列相关叙述不正确的是（ ）
A. 菜籽粕与麸皮为微生物提供氮源和碳源
B. 接种后需对培养基进行高压蒸汽灭菌
C. 黑曲霉菌对单宁的去除效果最为理想
D. 对照组为不接种微生物的培养基
7. 苯酚及其衍生物对人和动植物具有很强的毒害作用，已被列入环境优先控制污染物名单。某生物科技小组欲从工业污水中分离耐盐苯酚降解细菌（W3） 并测定不同盐度下其生长、降解200mg/L苯酚情况，实验结果如图所示。下列有关说法错误的是（ ）
A. 分离W3的培养基中需要以苯酚为唯一的碳源
B. 当盐度由5%升至10%时，W3种群的K值及对苯酚的降解率均降低
C. 与盐度1%相比，W3在盐度5%条件下对苯酚的降解率基本相同
D. 可检测W3在高盐条件下液泡内溶质的种类和含量变化以探究其耐盐机理
8. 安徽徽州毛豆腐是通过人工接种法，使豆腐表面生长出一层白色绒毛，其中主要的微生物是毛霉。豆腐经过发酵后所含的植物蛋白转化成多种氨基酸，经烹饪后味道鲜美。有关说法错误的是（ ）
A. 毛霉菌与乳酸菌的区别是前者有成形的细胞核
B. 豆腐可以看作给毛霉生长提供营养物质的培养基
C. 吃腐乳时，腐乳外部的“皮”是细菌繁殖形成的
D. 毛霉产生蛋白酶和肽酶可将蛋白质最终转化为氨基酸
9. 如下图为研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素细菌的示意图，有关叙述不正确的是（ ）
A. 配制步骤②、③的培养基都要进行严格灭菌
B. 步骤③采用涂布平板法接种，并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素
C. 步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种，比较细菌分解尿素的能力
D. 步骤③纯化分解尿素的细菌的原理是将聚集的细菌分散，以获得单细胞形成的菌落
10. 从自然界中筛选具有优良性状菌种的一般步骤为：采集样品→富集培养（使菌体数量增多）→纯种分离→性能测定，如图a、b是采用两种接种方法接种后纯化培养的效果图。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 可使用液体培养基进行富集培养
B. 为获得纯种的目的菌种，需对采集的样品进行灭菌
C. 获得图a所示结果的接种过程中，接种环需灼烧灭菌3次
D. 利用图b计算出样品中菌体浓度为5．85×108个/ml，则接种稀释液的稀释倍数为107倍
11. 菠菜（2N=12）是XY型性别决定的生物，用菠菜进行单倍体育种，下列正确的是（ ）
A. 单倍体育种的后代，染色体数目是12条
B. 单倍体育种需要经过花药离体培养，因此后代均为雄性
C. 菠菜中的雌株一般可产生染色体组成不同的两种雌配子
D. 单倍体育种常使用秋水仙素，目的是抑制着丝点的分裂
12. 下列植物育种过程中可以不需要植物组织培养的是（ ）
A. 脱毒作物的培育过程
B. 单倍体农作物的育种过程
C. 多倍体植物的培育过程
D. 体细胞杂交培育农作物的过程
13. 研究人员研究了马铃薯茎尖外植体大小对苗的成苗率和脱毒率的影响，实验结果如图所示，下列叙述正确的是（ ）
A. 马铃薯的茎尖经过灭菌后才能用于脱毒苗培育
B. 利用组织培养技术获得的脱毒苗，是具有抗病毒的新品种
C. 茎尖和脱分化形成的愈伤组织细胞中核酸种类相同
D. 兼顾成苗率和脱毒率，马铃薯脱毒培养中茎尖外植体的适宜大小为0.27mm
14. 科学家通过体外诱导小鼠成纤维细胞获得一种类似胚胎干细胞的细胞，具有活跃的分裂能力，称为诱导多能干细胞(简称iPS 细胞)，下列叙述错误的是（ ）
A. iPS 细胞具有很高的全能性，且诱导过程无须破坏胚胎
B. 培养iPS 细胞需提供95%氧气和5%CO₂的混合气体
C. 由病人体细胞诱导产生的iPS细胞进行自体移植理论上可避免发生免疫排斥
D. iPS 细胞具有分裂活性，用它进行治疗时可能存在分化成肿瘤细胞的风险
15. 利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是
A. 用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体
B. 体外培养单个效应B细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体
C. 将等量效应B细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞
D. 利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者
16. 某兴趣小组按照“探究抗生素对细菌的选择作用”的实验步骤进行拓展实验：分别使用含相同浓度艾叶汁和氨苄青霉素的两种滤纸片，对大肠杆菌进行选择培养，测量抑菌圈的直径变化如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A. 连续培养时应从抑菌圈边缘的菌落上挑取大肠杆菌
B. 氨苄青霉素导致大肠杆菌发生了耐药性突变
C. 氨苄青霉素的抑菌效果比艾叶汁更显著
D. 使用氨苄青霉素可能更易出现耐药菌
17. 某生物兴趣小组完成了“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”的实验，操作流程如图所示。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 应采集地面表层土作为土壤样品
B. 必须在酒精灯火焰旁采集土壤
C. 振荡可使土壤中的微生物充分稀释到水中
D. 若根据图示菌落进行计数，则10克土样中的菌株数约为1.6×106个
18. 现有基因型为AABB、aabb的两个品种，为了培育出基因型为AAbb的优良品种，可采用的方法如图所示。下列有关分析错误的是（ ）
A. 图中①②③过程所示的育种方式的原理为基因重组
B. 图中⑥过程一般可用秋水仙素处理幼苗
C 经图中④过程处理后比较难得到目标突变
D. 图中⑤⑥过程要多次自交才能得到目标植株
19. 下列对相关操作流程的叙述，错误的是（ ）
A. 泡菜制作：煮沸、冷却盐水→蔬菜处理、加调料、装坛→加盐水→无氧发酵→泡菜
B. 果酒制作：挑选葡萄→剪枝→冲洗→无氧发酵→果酒
C. 酵母菌的纯培养：配制培养基→灭菌→倒平板→接种和分离酵母菌→培养酵母菌
D. 分解尿素的细菌的培养与计数：土壤取样→样品稀释→涂布平板→培养与观察→计数
20. 消毒和灭菌是两个不同的概念，消毒是指使用较为温和的物理、化学或生物的方法杀死物体表面或内部的一部分微生物。灭菌则是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。下列关于消毒和灭菌的理解，错误的是（ ）
A. 常用消毒方法有煮沸消毒、巴氏消毒、紫外线消毒等
B. 湿热灭菌指利用沸水、流通蒸汽或高压蒸汽进行灭菌
C. 常用的灭菌方法有湿热灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌等
D. 操作的空间和操作者的衣着需要进行严格灭菌
21. 野生型谷氨酸棒状杆菌能在基本培养基上生长，精氨酸依赖型谷氨酸棒状杆菌因缺乏将鸟氨酸转化为精氨酸的酶不能在基本培养基上生长，可作为鸟氨酸发酵的优良菌种。如图为纯化精氨酸依赖型谷氨酸棒状杆菌(目的菌)的部分流程图。下列相关叙述错误的是（ ）
注：①②③④代表培养基，A、B、C表示操作步骤，D、E为菌落
A. 紫外线诱导菌种基因突变可增加突变株的数量B. B操作需用涂布器把菌液均匀涂到②的表面
C. 培养基③因缺少精氨酸导致菌落数目比④少D. 目的菌E扩大培养后可用于工业化生产鸟氨酸
22. 将一个具有两个野生型基因（A+、B+）的人体细胞和一个具有两个隐性突变基因（A-、B-）小鼠细胞诱导融合，筛选得到的杂种细胞在传代培养过程中，人体细胞中的某条染色体会发生丢失现象，小鼠的染色体不丢失。最终通过检测基因产物，确定基因A+、B+是否位于一条染色体上。下列说法正确的是（ ）
A. 杂种细胞传代培养需要添加激素及血清等天然成分的选择培养液
B. 诱导融合后的细胞具有两种细胞的遗传物质并发生了基因重组
C. 如果子细胞中只出现（A+、B+）和（A-、B-）所表达的基因产物，说明基因A+、B+在同一染色体上
D. 如果子代细胞出现（A+、B-）、（A-、B+）、（A+、B+）和（A-、B-）等所表达的全部基因产物，说明A+、B+位于两条染色体上
23. 某杂种植株的获取过程如图所示，下列有关分析正确的是（ ）
A. 叶片经消毒后需用流水多次冲洗，以避免消毒剂长时间作用而产生毒害作用
B. 图示①过程采用酶解法获取原生质体时，可用聚乙二醇调节渗透压
C. 图示②过程通过抽真空处理使酶溶液渗入细胞间隙，提高酶解效率
D. 经④过程获得的杂种细胞经鉴定和筛选后进行植物组培，即可获得目标杂种植株
24. 调查发现，某些非法分子在市售牛乳中添加了β-内酰胺酶，该酶能选择性地分解牛奶中残留的抗生素使其失活，从而掩盖牛奶中实际含有的抗生素。某实验小组将小鼠等分为高、中和低3个β-内酰胺酶剂量免疫组，每次免疫分别为200μg只、100μg/只、50μg/只，制备单克隆抗体后测定了各组的抗体效价（以其与抗原反应的多少来表示其免疫效果），结果如下图所示。下列叙述正确的是（ ）
A. 制备过程应使用高剂量组的小鼠的B淋巴细胞进行融合
B. 细胞融合前要分别在体外培养B淋巴细胞和骨髓瘤细胞
C. PEG可使培养基中的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞定向融合
D. 经抗体检测可筛选出产生抗β-内酰胺酶抗体的杂交瘤细胞
25. 月季在我国享有“花中皇后”的美誉。为了建立月季某新品种的快速繁殖体系，以芽体为外植体，在MS培养基中添加不同浓度的6-BA和IBA进行芽体增殖实验，芽分化率（%）结果如表。
关于上述实验，下列叙述错误的是（ ）
A. 6-BA浓度大于4．0mg·L-1时，芽分化率明显降低
B. 6-BA与IBA的比例为10：1时芽分化率均高于其他比例
C. 在培养基中同时添加适量的6-BA和IBA，可促进芽分化
D. 2．0mg·L-16-BA和0．2mg·L-1IBA是实验处理中芽分化的最佳组合
二、非选择题(5道大题，共计50分)
26. 苹果醋是以苹果汁为原料经发酵而成的，回答下列问题：
（1）酵母菌的呼吸代谢途径如图所示。图中过程①和②是苹果醋生产的第一阶段，其产物乙醇与______________试剂反应呈现灰绿色，这一反应可用于乙醇的检验；过程③在酵母菌细胞的________________ 中进行，与无氧条件相比，在有氧条件下，酵母菌的增殖速度________________ 。
（2）第二阶段是在________________ （微生物名称）的作用下将第一阶段产生的乙醇转变为醋酸的过程，该菌细胞结构中________________ （填“含有”或“不含有”）线粒体，根据该菌的呼吸作用类型，该过程需要在________________ 条件下才能完成；该阶段反应式可表示为________________ 。
（3）果醋制作是否成功，除了观察菌膜的形成，嗅味和品尝等进行初步鉴定外，还可以通过检测和比较________________ 进一步鉴定。
27. 中国科学家运用合成生物学方法构建了一株嗜盐单胞菌 H，以糖蜜（甘蔗榨糖后的废弃液，含较多蔗糖）为原料，在实验室发酵生产 PHA 等新型高附加值可降解材料，期望提高甘蔗的整体利用价值，工艺流程如图所示。
回答下列问题：
（1）为获得对蔗糖的耐受能力和利用效率高的菌株 H，可将蔗糖作为液体培养基的________，并不断提高其浓度，多代培养选择;从功能上看，所用培养基为______________ 。培养过程中定期取样并用___________ 进行菌落计数，评估菌株增殖状况;为减小误差，每次应________进行重复计数，然后求出平均值。
（2）基于菌株 H 嗜盐、酸碱耐受能力强等特性，研究人员设计了一种不需要灭菌的发酵系统，其培养基盐浓度设为60g/L，pH 为10，菌株 H 可正常持续发酵60 d以上。该系统不需要灭菌的原因是______________________________________（答出两点即可）。
（3）研究人员在工厂进行扩大培养，在适宜的营养物浓度、温度、pH 条件下发酵，结果发现发酵液中菌株 H 细胞增殖和 PHA 产量均未达到预期，并产生了少量乙醇等物质，说明发酵条件中_____________可能是高密度培养的限制因素。发酵工程的中心环节是______________。
（4）菌株 H 还能通过分解餐厨垃圾（主要含蛋白质、淀粉、脂肪等）来生产 PHA，说明其能分泌__________________________________________。
28. 科学家将番茄（2N）和马铃薯（4N）利用如图技术得到“番茄——马铃薯”植株。请据图回答下列问题。
（1）上图中所示技术的原理是____________和_______________。
（2）过程I使用____________酶去除细胞壁，从而获得有活力的原生质体。c表示__________。植物体细胞融合完成的标志是__________________。
（3）诱导试管f中植株生根过程的培养基中，生长素与细胞分裂素的比值较过程Ⅳ______（填“高”或“低”），培养基中添加蔗糖的作用__________________。
（4）过程Ⅳ和Ⅴ运用的技术还广泛用于细胞产物的工厂化生产，如从红豆杉树皮中分离出具有抗癌活性的紫杉醇。请依据所学知识写出生产紫杉醇的过程图：_________（用文字和箭头表示）。
29. 甲胎蛋白（AFP） 是癌细胞表面的一种特异性糖蛋白，可以用来进行肝癌的早期诊断。现用单克隆抗体技术生产抗AFP单克隆抗体，过程如下图一，请据图回答：
（1）制备单克隆抗体过程中要用到的动物细胞工程技术是____和____，要生产抗AFP单克隆抗体，首先需要向小鼠体内注入____作为抗原。
（2）细胞①是____，它与骨髓瘤细胞融合时使用的化学试剂是____。
（3）细胞融合是随机的，为将需要的杂交瘤细胞筛选出来，利用的选择培养基原理是：细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基蝶呤阻断。淋巴细胞中有两条DNA合成途径，而骨髓瘤细胞中只有D途径，如图二。如果只考虑细胞两两融合，融合的细胞有____类。根据上述原理将杂交瘤细胞分离出来，使用的选择培养基里面应加入____
（4）制备单克隆抗体需要进行两次筛选，其中第二次筛选的方法为____技术。
（5）通过此过程生产的单克隆抗体和氟尿嘧啶结合后制成生物导弹来治疗肝癌，其中能对癌细胞起到杀伤作用的是____
30. 营养缺陷型菌株是人工诱变或自发突变后，某些酶被破坏，使代谢过程中某些合成反应不能进行的菌株。这种菌株能积累正常菌株不能积累的某些代谢中间产物，可为工业生产提供原料。以下是科研人员利用影印法初检某种氨基酸缺陷型菌株的过程。请回答下列问题：
（注：氨基酸缺陷型菌株在基本培养基中不能生长，在完全培养基中能生长。）
（1）从培养基成分分析，图中基本培养基与完全培养基存在差异的成分是_____。根据用途分类，图中基本培养基属于_____（填“选择”或“鉴别”）培养基。
（2）过程①的接种方法为_____，进行②过程培养时，应先将丝绒布转印至_____（填“基本”或“完全”）培养基上，理由是_____，从_____培养基上获得相应的营养缺陷型菌株。
（3）统计菌落种类和数量时要每隔24h观察统计一次，直到各类菌落数目稳定，以防止培养时间不足导致_____，或培养时间太长导致_____。
（4）为进一步完成对初检营养缺陷型菌株的鉴定，科研人员进行如下操作：
①用接种针挑取_____（填“菌落A”或“菌落B”）接种于盛有完全培养液的离心管中，28℃振荡培养1~2天后，离心，取沉淀物用无菌水洗涤3次，并制成菌悬液。
②吸取1mL菌悬液加入无菌培养皿中，倾注15mL融化并冷却至50℃左右的基本培养基，待其冷凝后，用记号笔在_____（填“皿盖”或“皿底”）划分五个区域，标记A、B、C、D、E（如图所示）。
③在划分的五个区域上分别放入少量氨基酸粉末（如下表所示），经培养后，观察生长圈出现的区域，从而确定属于何种氨基酸缺陷型。
在上述鉴定实验中，发现只在培养基A、D区域出现生长圈，说明该菌株_____营养缺陷型。6-BA/（mg·L-1）
IBA/（mg·L-1）
0． 1
0．2
0．3
0．4
0．5
1．0
31
63
58
49
41
2．0
40
95
76
69
50
3．0
37
75
64
54
41
4．0
25
35
31
30
25
5．0
8
21
12
8
4
区域
放入的氨基酸
A
组氨酸
苏氨酸
谷氨酸
苯丙氨酸
亮氨酸
B
精氨酸
苏氨酸
赖氨酸
甲硫氨酸
天冬氨酸
C
酪氨酸
谷氨酸
赖氨酸
色氨酸
丙氨酸
D
甘氨酸
苯丙氨酸
甲硫氨酸
色氨酸
丝氨酸
E
半胱氨酸
亮氨酸
天冬氨酸
丙氨酸
丝氨酸
高2025届高二（下）第一次月考生物试题
一、单选题(共25个小题，每小题2分,共50分)
1. 人工防护林具有防风、固沙及保护农田等作用，对维护区域生态系统稳定具有重要意义。下列叙述正确的是（ ）
A. 防护林通过自组织、自我调节可实现自身结构与功能的协调
B. 防护林建设应选择本地种，遵循了生态工程的循环原理
C. 防护林建成后，若失去人类的维护将会发生初生演替
D. 防护林的防风、固沙及保护农田的作用体现了生物多样性的直接价值
【答案】A
【解析】
【分析】生物多样性的价值包括直接价值（食用、药用、工业用、旅游观赏、科研、文学艺术等）、间接价值（对生态系统起到的调节功能）和潜在价值（目前不清楚）。
【详解】A、防护林通过自组织、自我调节可实现自身结构与功能的协调，A正确；
B、防护林建设应选择本地种，遵循了生态工程的协调原理，B错误；
C、防护林建成后，若失去人类的维护将会发生次生演替，C错误；
D、防护林的防风、固沙及保护农田的作用体现了生物多样性的间接价值，D错误。
故选A。
2. “一粥一饭，当思来之不易；半丝半缕，恒念物力维艰”体现了日常生活中减少生态足迹的理念，下列选项中都能减少生态足迹的是（ ）
①光盘行动②自驾旅游③高效农业④桑基鱼塘⑤一次性餐具使用⑥秸秆焚烧
A. ①③④B. ①④⑥C. ②③⑤D. ②⑤⑥
【答案】A
【解析】
【分析】生态足迹：（1）概念:在现有技术条件下，维持某一人口单位生存所需的生产资源和吸纳废物的土地及水域的面积。
（2）意义:生态足迹的值越大,代表人类所需的资源越多,对生态和环境的影响就越大。
（3）特点:生态足迹的大小与人类的生活方式有关。生活方式不同,生态足迹的大小可能不同。
【详解】①光盘行动可以避免食物浪费，能够减少生态足迹，①正确；
②自驾旅游会增大生态足迹，②错误；
③④高效农业、桑基鱼塘，能够合理利用资源，提高能量利用率，减少生态足迹，③④正确；
⑤一次性餐具使用，会造成木材浪费，会增大生态足迹，⑤错误；
⑥秸秆焚烧，使秸秆中的能量不能合理利用，造成浪费且空气污染，会增大生态足迹，⑥错误。
综上可知，①③④正确。
故选A。
3. 下列关于微生物纯培养与发酵工程的说法正确的是（ ）
A. 微生物的纯培养物就是不含有代谢废物的微生物培养物
B. 平板划线法既可以用于微生物的纯培养，又可用于微生物计数
C. 利用酵母菌发酵产生的单细胞蛋白属于分泌蛋白，可制成微生物饲料
D. 在农牧业中，利用发酵工程生产的微生物肥料一般是微生物的代谢产物
【答案】D
【解析】
【分析】微生物常见的接种的方法：
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在划线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】A、微生物的纯培养物就是由单一个体繁殖所获得的微生物群体，A错误；
B、平板划线法可以用于微生物的纯培养，不可用于微生物计数，B错误；
C、利用酵母菌发酵产生的单细胞蛋白属于微生物菌体，可制成微生物饲料，C错误；
D、在农牧业中，利用发酵工程生产的微生物肥料一般是微生物的代谢产物，D正确。
故选D。
4. 下列关于豆腐乳制作的相关叙述，说法错误的是（ ）
A. 在加盐腌制豆腐乳时，接近瓶口表面的盐要铺厚一些
B. 青霉、曲霉、酵母、毛霉等多种微生物参与豆腐乳发酵
C. 现代食品企业是在无菌条件下接种毛霉来生产豆腐乳
D. 卤汤中酒的含量过高，豆腐乳成熟的时间会明显提前
【答案】D
【解析】
【分析】1、作腐乳利用的是主要是毛霉，毛霉产生的蛋白酶可将豆腐中的蛋白质水解成多肽和氨基酸，产生的脂肪酶能够将豆腐中的脂肪水解为甘油和脂肪酸。
2、含水量过大时腐乳不易成形，进行腐乳制作所选豆腐含水量不宜超过70%。
3、酒精含量的高低与腐乳后期发酵时间的长短有很大关系。酒精含量越高，对蛋白酶的抑制作用也越大，使腐乳成熟期延长；酒精含量过低，蛋白酶的活性高，加快蛋白质的水解，杂菌繁殖快，豆腐易腐败，难以成块。
【详解】A、越接近瓶口，杂菌污染的可能性越大，因此要随着豆腐层的加高增加盐的用量，在接近瓶口的表面，盐要铺厚一些，以有效防止杂菌污染，A正确；
B、多种微生物参与了豆腐的发酵，如酵母、曲霉和毛霉等，其中起主要作用的是毛霉，B正确；
C、传统的腐乳制作过程中，有多种微生物在起作用，但主要是毛霉。现代腐乳生产接种优良的毛霉菌种，不仅可以防止其他杂菌的污染，而且能保证腐乳的风味，保证腐乳质量，C正确；
D、酒精含量越高，对蛋白酶的抑制作用也越大，使腐乳成熟期延长，D错误。
故选D。
5. 用培养液培养三种细菌，让它们在三支不同的试管中生长，如图显示了细菌的生长层，如果此时往三支试管中通入氧气，则细菌的繁殖速度将是( )
A. 甲不变，乙减慢，丙加快B. 甲加快，乙加快，丙减慢
C. 甲减慢，乙减慢，丙加快D. 甲减慢，乙加快，丙减慢
【答案】B
【解析】
【分析】本题是细胞呼吸的方式和特点，细胞呼吸有有氧呼吸和无氧呼吸2种方式，有氧呼吸必须在有氧条件下进行，无氧呼吸不需要氧气，有氧气时无氧呼吸受抑制。试管的不同部位氧气浓度不同，上层氧气浓度高，下层氧气浓度低。甲试管中细菌趋向于试管上部，说明是需氧菌，乙试管中细菌均匀分布，说明是兼性厌氧菌，丙试管中细菌趋向于试管底部，说明是厌氧菌。
【详解】分析题图可以知道，甲中该细菌只在试管的上部繁殖，说明该细菌只进行有氧呼吸；乙中该细菌在试管的上部、中部、底部都繁殖，说明该细菌即进行有氧呼吸也进行无氧呼吸；丙中该细菌只在试管的底部繁殖，该细菌的呼吸方式应是无氧呼吸。若此时通入氧气，甲试管中的细菌进行有氧呼吸，通入氧气后有氧呼吸加快，细菌繁殖速度加快；乙试管中的细菌既可以进行有氧呼吸也可以进行无氧呼吸，通入氧气后，有氧呼吸加快，细菌的繁殖速度加快；丙试管的细菌只进行无氧呼吸，有氧气时无氧呼吸受抑制，细菌繁殖速度减慢。
因此甲、乙、丙在通入氧气后，细菌的繁殖速度分别是加快、加快、减慢。
故选B。
【点睛】有氧呼吸：
第一阶段
在细胞质的基质中，一个分子的葡萄糖分解成两个分子的丙酮酸，同时脱下4个[H]（活化氢）；在葡萄糖分解的过程中释放出少量的能量，其中一部分能量用于合成ATP，产生少量的ATP。这一阶段不需要氧的参与，是在细胞质基质中进行的。反应式：C6H12O6酶→2C3H4O3（丙酮酸）+4[H]+少量能量 （2ATP）
第二阶段
丙酮酸进入线粒体的基质中，两分子丙酮酸和6个水分子中的氢全部脱下，共脱下20个[H]，丙酮被氧化分解成二氧化碳；在此过程释放少量的能量，其中一部分用于合成ATP，产生少量的能量。这一阶段也不需要氧的参与，是在线粒体基质中进行的。反应式：2C3H4O3 （丙酮酸）+6H2O→20[H]+6CO2+少量能量 （2ATP）
第三阶段
在线粒体的内膜上，前两阶段脱下的共24个[H]与从外界吸收或叶绿体光合作用产生的6个O2结合成水；在此过程中释放大量的能量，其中一部分能量用于合成ATP，产生大量的能量。这一阶段需要氧的参与，是在线粒体内膜上进行的。反应式：24[H]+6O2→12H2O+大量能量（34ATP）
无氧呼吸
第一阶段：在细胞质的基质中，与有氧呼吸过程的第一阶段完全相同。即一分子的葡萄糖分解成两分子的丙酮酸，过程中释放少量的[H]和少量能量。
第二阶段：在细胞质的基质中，丙酮酸在不同酶的催化下，分解为酒精和二氧化碳，或者转化为乳酸。须特别注意的是，丙酮酸转化为酒精或者乳酸的过程中并不产生能量。
6. 菜籽粕含有35%～45%蛋白质，是畜禽饲料的重要原料，但其中的单宁等抗营养因子限制了菜籽粕的应用。研究者将不同菌种接种到菜籽粕与麸皮制成的培养基中发酵48h，测定菜籽粕中单宁的含量，结果如图，下列相关叙述不正确的是（ ）
A. 菜籽粕与麸皮为微生物提供氮源和碳源
B. 接种后需对培养基进行高压蒸汽灭菌
C. 黑曲霉菌对单宁的去除效果最为理想
D. 对照组为不接种微生物的培养基
【答案】B
【解析】
【分析】制备培养基的基本过程：计算、称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板。对培养基灭菌常用高压蒸汽灭菌。图中不同菌种接种到菜籽粕与麸皮制成的固体培养基中，发酵48h后，与对照组相比，发酵菜籽粕中单宁含量都发生了不同程度的减少，说明微生物发酵可去除单宁。
【详解】A、菜籽粕含有35%～45%的蛋白质（基本组成元素：C、H、O、N），麸皮富含纤维素（元素组成：C、H、O），故菜籽粕与麸皮可为微生物提供氮源和碳源，A正确；
B、对培养基灭菌常用高压蒸汽灭菌，对培养基灭菌应在接种前，接种后再灭菌，菌种将被杀死，B错误；
C、据图可知，与对照组相比，黑曲霉菌发酵菜籽粕中单宁含量最低，说明黑曲霉菌对单宁的去除效果最为理想，C正确；
D、对照组为不接种微生物的固体培养基，目的是作为对照，说明微生物具有去除单宁的作用，D正确。
故选B。
7. 苯酚及其衍生物对人和动植物具有很强的毒害作用，已被列入环境优先控制污染物名单。某生物科技小组欲从工业污水中分离耐盐苯酚降解细菌（W3） 并测定不同盐度下其生长、降解200mg/L苯酚情况，实验结果如图所示。下列有关说法错误的是（ ）
A. 分离W3的培养基中需要以苯酚为唯一的碳源
B. 当盐度由5%升至10%时，W3种群的K值及对苯酚的降解率均降低
C. 与盐度1%相比，W3在盐度5%条件下对苯酚的降解率基本相同
D. 可检测W3在高盐条件下液泡内溶质的种类和含量变化以探究其耐盐机理
【答案】D
【解析】
【分析】由图可知，与盐度1%相比，W3在盐度5%条件细菌数量相对值几乎重合，苯酚浓度曲线几乎重合，说明在这两个浓度条件下，W3的K值和降解率几乎相等。当盐度由5%升至10%时，W3种群的K值（W3细菌数量相对值降低）及对苯酚的降解率均降低（苯酚浓度增大）。
【详解】A、欲从工业污水中分离耐盐苯酚降解细菌（W3） ，则分离W3培养基中需要以苯酚为唯一的碳源，A正确；
B、由图可知，当盐度由5%升至10%时，W3种群的K值（W3细菌数量相对值降低）及对苯酚的降解率均降低（苯酚浓度增大），B正确；
C、与盐度1%相比，W3在盐度5%条件下对苯酚的降解率基本相同（苯酚浓度曲线几乎重合），C正确；
D、W3细菌是原核生物，无液泡，D错误。
故选D。
8. 安徽徽州毛豆腐是通过人工接种法，使豆腐表面生长出一层白色绒毛，其中主要的微生物是毛霉。豆腐经过发酵后所含的植物蛋白转化成多种氨基酸，经烹饪后味道鲜美。有关说法错误的是（ ）
A. 毛霉菌与乳酸菌的区别是前者有成形的细胞核
B. 豆腐可以看作给毛霉生长提供营养物质的培养基
C. 吃腐乳时，腐乳外部的“皮”是细菌繁殖形成的
D. 毛霉产生的蛋白酶和肽酶可将蛋白质最终转化为氨基酸
【答案】C
【解析】
【分析】
腐乳的制作原理：（1）腐乳的发酵在多种微生物的协同作用下进行，其中起主要作用的是毛霉，它是一种丝状真菌，新陈代谢类型是异养需氧型。（2）毛霉等微生物产生的蛋白酶可以将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可以将脂肪水解成甘油和脂肪酸。
【详解】A、毛霉菌是真菌，与原核生物乳酸菌的区别是前者有成形的细胞核，A正确；
B、豆腐可以看作给毛霉生长提供营养物质的培养基，B正确；
C、腐乳外部的“皮”是前期发酵时毛霉等微生物在豆腐表面上生长的菌丝（匍匐菌丝），对人体无害，C错误；
D、毛霉产生的蛋白酶和肽酶可将蛋白质最终转化为氨基酸，D正确。
故选C。
9. 如下图为研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素细菌的示意图，有关叙述不正确的是（ ）
A. 配制步骤②、③的培养基都要进行严格灭菌
B. 步骤③采用涂布平板法接种，并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素
C. 步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种，比较细菌分解尿素的能力
D. 步骤③纯化分解尿素的细菌的原理是将聚集的细菌分散，以获得单细胞形成的菌落
【答案】B
【解析】
【分析】从红棕壤中筛选高效分解尿素细菌过程：
（1）制备红棕壤浸出液；
（2）取上清液2mL放在选择培养基中培养；
（3）可用移液器取1mL菌液放在以尿素为唯一氮源的培养基中进行分离单菌落，筛选、纯化分解尿素的细菌；
（4）挑选单菌落接种于尿素液体培养基，进行鉴定分解尿素的能力。
【详解】A、在配制步骤②、③的培养基时，均需要进行高压蒸汽灭菌，A正确；
B、要筛选出能高效分解尿素的细菌，所选用的培养基要以尿素为唯一氮源，但牛肉膏和蛋白胨中都含有氮源，因此步骤③所用的培养基中不能含有牛肉膏、蛋白胨，B错误；
C、步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种，形成相互对照实验，比较细菌分解尿素的能力，C正确；
D、步骤③纯化分解尿素的细菌的原理是将聚集的细菌分散，以获得单细胞菌落，D正确。
故选B。
10. 从自然界中筛选具有优良性状的菌种的一般步骤为：采集样品→富集培养（使菌体数量增多）→纯种分离→性能测定，如图a、b是采用两种接种方法接种后纯化培养的效果图。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 可使用液体培养基进行富集培养
B. 为获得纯种的目的菌种，需对采集的样品进行灭菌
C. 获得图a所示结果的接种过程中，接种环需灼烧灭菌3次
D. 利用图b计算出样品中菌体浓度为5．85×108个/ml，则接种稀释液的稀释倍数为107倍
【答案】A
【解析】
【分析】微生物常见的接种的方法①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】A、与使用固体培养基相比，使用液体培养基培养菌种时，菌体可以分布在整个培养基中，可充分利用其中的营养物质，提高培养液中氧气含量，菌体数量增加的更快，A正确；
B、需从采集的样品分离得到目的菌种，不能对样品进行灭菌，B错误；
C、图a所示结果的接种次数为3次，接种环需灭菌4次，C错误；
D、利用稀释涂布平板法计算菌体浓度的方法为菌落数÷接种液体积×稀释倍数，而用于计数的平板的菌落数应在30-300之间，因此58.5个÷0.1ml×稀释倍数=5.85×108个/ml，计算得出稀释倍数为106倍，D错误。
故选A。
11. 菠菜（2N=12）是XY型性别决定的生物，用菠菜进行单倍体育种，下列正确的是（ ）
A. 单倍体育种的后代，染色体数目是12条
B. 单倍体育种需要经过花药离体培养，因此后代均为雄性
C. 菠菜中的雌株一般可产生染色体组成不同的两种雌配子
D. 单倍体育种常使用秋水仙素，目的是抑制着丝点的分裂
【答案】A
【解析】
【分析】单倍体育种是植物育种手段之一。即利用植物组织培养技术（如花药离体培养等）诱导产生单倍体植株，再通过某种手段使染色体组加倍（如用秋水仙素处理），从而使植物恢复正常染色体数。单倍体是具有体细胞染色体数为本物种配子染色体数的生物个体。单倍体育种得到的个体并不是单倍体。
【详解】A、根据题干可知，菠菜体细胞染色体数目是12条，在单倍体育种时，经花药离体培养后形成染色体数目为6的的单倍体，然后秋水仙素处理加倍，形成染色体数目为12的二倍体，A正确；
B、菠菜（2N=12）是XY型性别决定的生物，单倍体育种经花药离体培养形成的是5+X或者5+Y的单倍体，然后秋水仙素形成10+XX或者10+YY个体，10+XX是雌性，B错误；
C、菠菜雌株染色体组成为10+XX，产生的配子只有5+X，C错误；
D、单倍体育种常使用秋水仙素，目的是抑制纺锤体的形成，导致染色体不能移向两极，染色体数目加倍，D错误。
故选A。
12. 下列植物育种过程中可以不需要植物组织培养的是（ ）
A. 脱毒作物的培育过程
B. 单倍体农作物的育种过程
C. 多倍体植物的培育过程
D. 体细胞杂交培育农作物的过程
【答案】C
【解析】
【分析】植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞，进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。植物体细胞杂交依据的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。
【详解】A、脱毒作物的培育过程即切取一定大小的茎尖进行组织培养，再生的植株就有可能不带病毒，从而获得脱毒苗，所以脱毒作物的培育过程需要植物组织培养，A错误；
B、单倍体育种是采用花药（花粉）离体培养的方法来获得单倍体植株，然后经过人工诱导使染色体数目加倍，重新恢复到正常植株的染色体数目，所以单倍体农作物的育种过程需要植物组织培养，B错误；
C、多倍体植物的育种过程：用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，此过程没有植物组织培养， C正确；
D、体细胞杂交培育农作物的过程：先是植物体细胞融合成杂种细胞，再通过植物组织培养获得杂种植株，所以体细胞杂交培育农作物的过程需要植物组织培养，D错误。
故选C。
13. 研究人员研究了马铃薯茎尖外植体大小对苗的成苗率和脱毒率的影响，实验结果如图所示，下列叙述正确的是（ ）
A. 马铃薯的茎尖经过灭菌后才能用于脱毒苗培育
B. 利用组织培养技术获得的脱毒苗，是具有抗病毒的新品种
C. 茎尖和脱分化形成的愈伤组织细胞中核酸种类相同
D. 兼顾成苗率和脱毒率，马铃薯脱毒培养中茎尖外植体的适宜大小为0.27mm
【答案】D
【解析】
【分析】分析题图：图示表示茎尖外植体大小对苗的脱毒率和成活率的影响，实验的自变量是茎尖大小，因变量是成苗率和脱毒率。
【详解】A、马铃薯茎尖经过灭菌后会死亡，用于脱毒苗培育之前需要经过消毒处理，A错误；
B、利用组织培养技术获得的脱毒苗，是脱毒苗，而非能抗病毒，B错误；
C、核酸包括DNA和RNA，由于基因的选择性表达，茎尖和脱分化形成的愈伤组织细胞中核酸种类不完全相同，C错误；
D、据图可知，实验范围内，在茎尖外植体为0.27mm时成苗率和脱毒率均相对较高，是马铃薯脱毒培养中茎尖外植体的适宜大小，D正确。
故选D。
14. 科学家通过体外诱导小鼠成纤维细胞获得一种类似胚胎干细胞的细胞，具有活跃的分裂能力，称为诱导多能干细胞(简称iPS 细胞)，下列叙述错误的是（ ）
A. iPS 细胞具有很高的全能性，且诱导过程无须破坏胚胎
B. 培养iPS 细胞需提供95%氧气和5%CO₂的混合气体
C. 由病人体细胞诱导产生的iPS细胞进行自体移植理论上可避免发生免疫排斥
D. iPS 细胞具有分裂活性，用它进行治疗时可能存在分化成肿瘤细胞的风险
【答案】B
【解析】
【分析】胚胎干细胞（ES细胞）具有自我更新及多向分化潜能，为发育学、遗传学、人类疾病的发病机理与替代治疗等研究提供非常宝贵的资源。iPS细胞技术是借助基因导入技术将某些特定因子基因导入动物或人的体细胞，以将其重编程或诱导为ES细胞样的细胞，即iPS细胞。
【详解】A、诱导获得iPS细胞的过程无须破坏胚胎，不存在早期生命的破坏或抛弃过程，不涉及伦理问题，A正确；
B、培养iPS细胞时需提供95%空气（提供氧气，有助于细胞呼吸）和5%CO2（有助于维持培养液的pH）的混合气体环境，B错误；
C、用自身iPS细胞进行治疗的病人，一般不会发生免疫排斥反应，C正确；
D、由于iPS细胞具有活跃的分裂能力，若不受控制可能转化为癌细胞，所以用它进行治疗时可能存在安全风险，D正确。
故选B。
15. 利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是
A. 用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体
B. 体外培养单个效应B细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体
C. 将等量效应B细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞
D. 利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者
【答案】D
【解析】
【分析】单克隆抗体的制备：
1、细胞来源：B淋巴细胞：能产生特异性抗体，在体外不能无限繁殖；骨髓瘤细胞：不产生专一性抗体，体外能无限繁殖。
2、杂交瘤细胞的特点：既能大量增殖，又能产生特异性抗体。
【详解】A、用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体化学性质不单一，不是单克隆抗体，A错误；
B、体外培养单个浆细胞，不能无限繁殖，所以无法获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体，B错误；
C、将等量B细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞不都是杂交瘤细胞，还有B细胞自身融合的细胞、骨髓瘤细胞自身融合的细胞，C错误；
D、由于抗体具有专一性，该单克隆抗体是以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出的，所以利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者，D正确。
故选D。
16. 某兴趣小组按照“探究抗生素对细菌的选择作用”的实验步骤进行拓展实验：分别使用含相同浓度艾叶汁和氨苄青霉素的两种滤纸片，对大肠杆菌进行选择培养，测量抑菌圈的直径变化如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A. 连续培养时应从抑菌圈边缘的菌落上挑取大肠杆菌
B. 氨苄青霉素导致大肠杆菌发生了耐药性突变
C. 氨苄青霉素的抑菌效果比艾叶汁更显著
D. 使用氨苄青霉素可能更易出现耐药菌
【答案】B
【解析】
【分析】在自然选择的作用下，具有有利变异的个体有更多的机会产生后代，种群中相应基因的频率会不断提高；相反，具有不利变异的个体留下后代的机会少，种群中相应基因的频率会下降。因此，在自然选择的作用下，种群的基因频率会发生定向改变，导致生物朝着一定的方向不断进化。
【详解】A、抗生素能够杀死细菌，抑菌圈边缘抗生素浓度较低，可能存在具有耐药性的细菌，因此要从抑菌圈边缘的菌落上挑取细菌，A正确；
B、突变具有不定向性，B错误；
C、图中可以看出氨苄青霉素的抑菌圈的直径较大，可知氨苄青霉素的抑菌效果比艾叶汁更显著，C正确；
D、氨苄青霉素的抑菌效果比艾叶汁更显著，因此使用氨苄青霉素可能更易出现耐药菌，D正确。
故选B。
17. 某生物兴趣小组完成了“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”的实验，操作流程如图所示。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 应采集地面表层土作为土壤样品
B. 必须在酒精灯火焰旁采集土壤
C. 振荡可使土壤中的微生物充分稀释到水中
D. 若根据图示菌落进行计数，则10克土样中的菌株数约为1.6×106个
【答案】C
【解析】
【分析】活菌计数法：
①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌；
②操作：a、设置重复组，增强实验的说服力与准确性。b、为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数；
③计算公式：每克样品中的菌株数=（c÷V）×M，其中c代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数。
【详解】A、取距地表约3～8cm的土壤样品，A错误；
B、取样品时不用在酒精灯火焰旁，B错误；
C、振荡主要目的是使土壤中的微生物充分释放到无菌水中，C正确；
D、图示平板中有16个菌落，该过程中稀释的倍数为10000，最后只取了0.1mL进行涂布稀释，因此由图示菌落计数结果可知10克土样中的菌株数约为16×104÷0.1×10=1.6×107个，D错误。
故选C。
18. 现有基因型为AABB、aabb的两个品种，为了培育出基因型为AAbb的优良品种，可采用的方法如图所示。下列有关分析错误的是（ ）
A. 图中①②③过程所示的育种方式的原理为基因重组
B. 图中⑥过程一般可用秋水仙素处理幼苗
C. 经图中④过程处理后比较难得到目标突变
D. 图中⑤⑥过程要多次自交才能得到目标植株
【答案】D
【解析】
【分析】分析题图，①②③过程为杂交育种，原理是基因重组；①⑤⑥为单倍体育种，原理是染色体变异；④是诱变育种原理是基因突变。
【详解】A、据图可知：图中①②③过程所示的育种为杂交育种，原理是基因重组，A正确;
B、图中⑥过程一般可用秋水仙素处理幼苗Ab，导致其染色体数目加倍，得到AAbb个体，B正确；
C、图中④表示用射线处理aabb品种，进而获得AAbb，属于诱变育种，原理是基因突变，由于突变具有低频性和不定向性，因此比较难得到目标突变，C正确;
D、图中⑤⑥过程直接得到AaBb的配子，然后秋水仙素或者低温处理，就可以得到目标植株，不需要自交，D错误。
故选D。
19. 下列对相关操作流程的叙述，错误的是（ ）
A. 泡菜制作：煮沸、冷却盐水→蔬菜处理、加调料、装坛→加盐水→无氧发酵→泡菜
B. 果酒制作：挑选葡萄→剪枝→冲洗→无氧发酵→果酒
C. 酵母菌的纯培养：配制培养基→灭菌→倒平板→接种和分离酵母菌→培养酵母菌
D. 分解尿素的细菌的培养与计数：土壤取样→样品稀释→涂布平板→培养与观察→计数
【答案】B
【解析】
【分析】制作泡菜利用的是乳酸菌，乳酸菌是厌氧菌。果酒制作利用的是酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。
【详解】A、制作泡菜利用的菌种是乳酸菌，异化方式为厌氧型，需在无氧条件下发酵，泡菜制作为煮沸、冷却盐水→蔬菜处理、加调料、装坛→加盐水→无氧发酵→泡菜，A正确；
B、制作果酒时应先冲洗后去枝梗，减少杂菌污染的机会，B错误；
C、酵母菌的纯培养过程为配制培养基→灭菌→倒平板→接种和分离酵母菌→培养酵母菌，C正确；
D、分解尿素的细菌的培养与计数：土壤取样→样品稀释→将稀释液涂布到以尿素为唯一氮源的培养基上→培养与观察→计数，D正确。
故选B。
20. 消毒和灭菌是两个不同的概念，消毒是指使用较为温和的物理、化学或生物的方法杀死物体表面或内部的一部分微生物。灭菌则是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。下列关于消毒和灭菌的理解，错误的是（ ）
A. 常用的消毒方法有煮沸消毒、巴氏消毒、紫外线消毒等
B. 湿热灭菌指利用沸水、流通蒸汽或高压蒸汽进行灭菌
C. 常用的灭菌方法有湿热灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌等
D. 操作的空间和操作者的衣着需要进行严格灭菌
【答案】D
【解析】
【分析】消毒常用煮沸消毒法，巴氏消毒法（对于一些不耐高温的液体）及化学药剂消毒法，如用如酒精、氯气、石炭酸等消毒。
【详解】A、消毒是使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子），常用的方法有煮沸消毒、巴氏消毒、紫外线消毒等，A正确；
BC、灭菌较为彻底，常用的灭菌方法有湿热灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌等，其中湿热灭菌指利用沸水、流通蒸汽或高压蒸汽进行灭菌，BC正确；
D、实验操作的空间、操作者的衣着和手，需要进行清洁和消毒，而非灭菌，D错误。
故选D。
21. 野生型谷氨酸棒状杆菌能在基本培养基上生长，精氨酸依赖型谷氨酸棒状杆菌因缺乏将鸟氨酸转化为精氨酸的酶不能在基本培养基上生长，可作为鸟氨酸发酵的优良菌种。如图为纯化精氨酸依赖型谷氨酸棒状杆菌(目的菌)的部分流程图。下列相关叙述错误的是（ ）
注：①②③④代表培养基，A、B、C表示操作步骤，D、E为菌落
A. 紫外线诱导菌种基因突变可增加突变株的数量B. B操作需用涂布器把菌液均匀涂到②的表面
C. 培养基③因缺少精氨酸导致菌落数目比④少D. 目的菌E扩大培养后可用于工业化生产鸟氨酸
【答案】D
【解析】
【分析】由图分析可知，图中首先利用稀释涂布平板法分离细菌，然后运用将菌种接种到两种培养基中，分别是基本培养基、完全培养基；在基本培养基中，某氨基酸突变株不能生长，而在完全培养基中能够生长，据此可以选择出氨基酸突变株。
【详解】A、紫外线处理可以提高突变的频率，紫外线诱导菌种基因突变可增加突变株的数量，A正确；
B、由图（②中菌落分布状态）可知，B操作为稀释涂布平板，需用涂布器把菌液均匀涂到②的表面，B正确；
C、根据题干信息和图形分析，图中①②④为完全培养基（含有精氨酸的基本培养基），③为基本培养基，培养基③因缺少精氨酸导致菌落数目比④少，C正确；
D、从图中可看出，D在基本培养基中无法生长，在完全培养基中可生长，说明D是氨基酸依赖型菌落，即D才是生产鸟氨酸的目的菌种，D错误。
故选D。
22. 将一个具有两个野生型基因（A+、B+）的人体细胞和一个具有两个隐性突变基因（A-、B-）小鼠细胞诱导融合，筛选得到的杂种细胞在传代培养过程中，人体细胞中的某条染色体会发生丢失现象，小鼠的染色体不丢失。最终通过检测基因产物，确定基因A+、B+是否位于一条染色体上。下列说法正确的是（ ）
A. 杂种细胞传代培养需要添加激素及血清等天然成分的选择培养液
B. 诱导融合后的细胞具有两种细胞的遗传物质并发生了基因重组
C. 如果子细胞中只出现（A+、B+）和（A-、B-）所表达的基因产物，说明基因A+、B+在同一染色体上
D. 如果子代细胞出现（A+、B-）、（A-、B+）、（A+、B+）和（A-、B-）等所表达的全部基因产物，说明A+、B+位于两条染色体上
【答案】C
【解析】
【分析】动物细胞培养时，培养基中需要加入糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等营养物质，还需加入血清、血浆等天然物质。细胞需置于含CO2的混合气体的培养箱中培养，CO2的主要作用是维持培养液的pH。
【详解】A、杂种细胞传代培养需要添加激素及血清等天然成分完全培养液，A错误；
B、诱导融合后的细胞具有两种细胞的遗传物质，属于染色体变异，B错误；
C、由题可知，某个子细胞中同时检测到（A+、B+）基因所表达的产物，而不是单独出现A+或者B+ 所表达的产物，说明基因A+、B+在同一染色体上，C正确；
D、如果子代细胞出现（A+、B-）、（A-、B+）、（A+、B+）和（A-、B-）等所表达的全部基因产物，可能A+、B+位于一条染色体上，不能排除在染色体之间发生了结构变异的可能性，D错误。
故选C。
23. 某杂种植株的获取过程如图所示，下列有关分析正确的是（ ）
A. 叶片经消毒后需用流水多次冲洗，以避免消毒剂长时间作用而产生毒害作用
B. 图示①过程采用酶解法获取原生质体时，可用聚乙二醇调节渗透压
C 图示②过程通过抽真空处理使酶溶液渗入细胞间隙，提高酶解效率
D. 经④过程获得的杂种细胞经鉴定和筛选后进行植物组培，即可获得目标杂种植株
【答案】C
【解析】
【分析】1、植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。
2、过程：（1）诱导融合的方法：物理法包括离心、振动、电刺激等。化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂。（2）细胞融合完成的标志是新的细胞壁的生成。（3）植物体细胞杂交的终点是培育成杂种植株，而不是形成杂种细胞就结束。（4）杂种植株的特征：具备两种植物的遗传特征，原因是杂种植株中含有两种植物的遗传物质。
【详解】A、叶片经消毒后需用无菌水冲洗，以避免消毒剂长时间作用而产生毒害作用，A错误；
B、聚乙二醇是诱导细胞融合的物质，不是调节渗透压的物质，通常加入甘露醇来调节渗透压，B错误；
C、为了提高酶解效率，图示②过程可通过抽真空处理，利用负压使酶溶液快速渗入细胞间隙，通过处理，酶解效率会提高，C正确；
D、经组培获得的杂种幼苗，一般需要经过由无菌到有菌的炼苗过程才能用于生产实践，D错误。
故选C
24. 调查发现，某些非法分子在市售牛乳中添加了β-内酰胺酶，该酶能选择性地分解牛奶中残留的抗生素使其失活，从而掩盖牛奶中实际含有的抗生素。某实验小组将小鼠等分为高、中和低3个β-内酰胺酶剂量免疫组，每次免疫分别为200μg只、100μg/只、50μg/只，制备单克隆抗体后测定了各组的抗体效价（以其与抗原反应的多少来表示其免疫效果），结果如下图所示。下列叙述正确的是（ ）
A. 制备过程应使用高剂量组的小鼠的B淋巴细胞进行融合
B. 细胞融合前要分别在体外培养B淋巴细胞和骨髓瘤细胞
C. PEG可使培养基中的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞定向融合
D. 经抗体检测可筛选出产生抗β-内酰胺酶抗体的杂交瘤细胞
【答案】D
【解析】
【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
【详解】A、根据图示的结果可知，制备单克隆抗体的过程中要用低剂量组的小鼠的B淋巴细胞进行融合，以增加抗体的效价，A错误；
B、细胞融合前要在体外培养骨髓瘤细胞，但是由于B淋巴细胞在体外不能增殖，因此B淋巴细胞不能进行体外培养，B错误；
C、PEG即可以诱导不同种类的细胞发生细胞融合，也可以诱导相同种类的细胞之间发生细胞融合，C错误；
D、经抗体检测可以获得产生抗β-内酰胺酶抗体的杂交瘤细胞，然后在体外培养即可，D正确。
故选D。
25. 月季在我国享有“花中皇后”的美誉。为了建立月季某新品种的快速繁殖体系，以芽体为外植体，在MS培养基中添加不同浓度的6-BA和IBA进行芽体增殖实验，芽分化率（%）结果如表。
关于上述实验，下列叙述错误的是（ ）
A. 6-BA浓度大于4．0mg·L-1时，芽分化率明显降低
B. 6-BA与IBA的比例为10：1时芽分化率均高于其他比例
C. 在培养基中同时添加适量的6-BA和IBA，可促进芽分化
D. 2．0mg·L-16-BA和0．2mg·L-1IBA是实验处理中芽分化的最佳组合
【答案】B
【解析】
【分析】本实验目的为以芽体为外植体，在MS培养基中添加不同浓度的6-BA和IBA进行芽体增殖实验，自变量为不同浓度的6-BA和IBA，因变量为芽分化率，据表分析可知，随着6-BA浓度增加，芽分化率先增加后减少，随着IBA浓度增加，芽分化率先增加后减少，据此作答。
【详解】A、据表可知，6-BA浓度为从4.0mg·L-1到5.0mg·L-1时，芽分化率降低非常明显，故6-BA浓度大于4．0mg·L-1时，芽分化率明显降低，A正确；
B、据表可知，当6-BA与IBA的比例为10：1时，芽分化率为31%、95%、64%、30%、4%
，因此6-BA与IBA的比例为10：1时，芽分化率不一定都高于其他比例，B错误；
C、据表可知，6-BA与IBA的比例会影响芽的分化率，因此在培养基中同时添加适量的6-BA和IBA，可促进芽分化，C正确；
D、据表可知，芽分化率为95%是最高的，此时6-BA和IBA分别为2.0mg·L-1、0.2mg·L-1，是实验处理中芽分化的最佳组合，D正确。
故选B。
二、非选择题(5道大题，共计50分)
26. 苹果醋是以苹果汁为原料经发酵而成的，回答下列问题：
（1）酵母菌的呼吸代谢途径如图所示。图中过程①和②是苹果醋生产的第一阶段，其产物乙醇与______________试剂反应呈现灰绿色，这一反应可用于乙醇的检验；过程③在酵母菌细胞的________________ 中进行，与无氧条件相比，在有氧条件下，酵母菌的增殖速度________________ 。
（2）第二阶段是在________________ （微生物名称）的作用下将第一阶段产生的乙醇转变为醋酸的过程，该菌细胞结构中________________ （填“含有”或“不含有”）线粒体，根据该菌的呼吸作用类型，该过程需要在________________ 条件下才能完成；该阶段反应式可表示为________________ 。
（3）果醋制作是否成功，除了观察菌膜的形成，嗅味和品尝等进行初步鉴定外，还可以通过检测和比较________________ 进一步鉴定。
【答案】 ①. （酸性）重铬酸钾 ②. 线粒体 ③. 快 ④. 醋酸杆菌 ⑤. 不含有 ⑥. 有氧 ⑦. C2H5OH+O2→CH3COOH+H2O ⑧. 醋酸发酵前后PH
【解析】
【分析】参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。分析题图：①表示细胞呼吸的第一阶段，②表示无氧呼吸的第二阶段，③表示有氧呼吸的第二阶段和第三阶段。
【详解】（1）乙醇与（酸性）重铬酸钾试剂反应呈现灰绿色；过程③为有氧呼吸的第二、三阶段，在酵母菌细胞的线粒体中进行，由于有氧呼吸释放的能量比无氧呼吸释放的能量多，所以与无氧条件相比，在有氧条件下，酵母菌的增殖速度快。
（2）果醋发酵时，第二阶段是在醋酸杆菌的作用下将第一阶段产生的乙醇转变为醋酸的过程，醋酸杆菌为原核生物，不含线粒体，醋酸杆菌为需氧菌，需要在有氧条件下才能完成果醋发酵；该阶段反应式可表示为C2H5OH+O2→CH3COOH+H2O。
（3）果醋制作是否成功，除了观察菌膜的形成，嗅味和品尝等进行初步鉴定外，还可以通过检测和比较醋酸发酵前后PH进一步鉴定。
【点睛】本题结合图解，考查果醋的制作，要求考生识记参与果醋制作的微生物及其代谢类型，掌握果醋制作的原理、条件等基础知识，能正确分析题图，再结合所学的知识准确答题。
27. 中国科学家运用合成生物学方法构建了一株嗜盐单胞菌 H，以糖蜜（甘蔗榨糖后的废弃液，含较多蔗糖）为原料，在实验室发酵生产 PHA 等新型高附加值可降解材料，期望提高甘蔗的整体利用价值，工艺流程如图所示。
回答下列问题：
（1）为获得对蔗糖的耐受能力和利用效率高的菌株 H，可将蔗糖作为液体培养基的________，并不断提高其浓度，多代培养选择;从功能上看，所用培养基为______________ 。培养过程中定期取样并用___________ 进行菌落计数，评估菌株增殖状况;为减小误差，每次应________进行重复计数，然后求出平均值。
（2）基于菌株 H 嗜盐、酸碱耐受能力强等特性，研究人员设计了一种不需要灭菌的发酵系统，其培养基盐浓度设为60g/L，pH 为10，菌株 H 可正常持续发酵60 d以上。该系统不需要灭菌的原因是______________________________________（答出两点即可）。
（3）研究人员在工厂进行扩大培养，在适宜的营养物浓度、温度、pH 条件下发酵，结果发现发酵液中菌株 H 细胞增殖和 PHA 产量均未达到预期，并产生了少量乙醇等物质，说明发酵条件中_____________可能是高密度培养的限制因素。发酵工程的中心环节是______________。
（4）菌株 H 还能通过分解餐厨垃圾（主要含蛋白质、淀粉、脂肪等）来生产 PHA，说明其能分泌__________________________________________。
【答案】（1） ①. 唯一碳源 ②. 选择培养基 ③. 稀释涂布平板法 ④. 至少对3个平板
（2）盐浓度为60g/L的条件下，其他杂菌因失水过多而死亡；pH为10的条件下，其他杂菌的酶变性失活，生长繁殖受抑制
（3） ①. 氧气（O2或溶解氧） ②. 发酵罐内发酵
（4）蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶等
【解析】
【分析】在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。
【小问1详解】
根据题意分析，该实验的目的是提高菌株H对蔗糖的耐受能力和利用效率，结合微生物的代谢需求，其液体培养基应该以蔗糖作为唯一碳源。并不断提高其浓度，经多次传代培养可筛选出目标菌株；能进行筛选的培养基是选择培养基。稀释涂布平板法可以通过系列稀释和涂布平板最终获得由单个细胞繁殖来的菌落，因此培养过程中可定期取样并用稀释涂布平板法将菌液接种到固体培养基上，待形成菌落后进行菌落计数，评估菌株增殖状况。为降低因偶然因素造成的误差，每次应至少对3个平板进行重复计数，然后求出平均值。
【小问2详解】
已知菌株H具有嗜盐、酸碱耐受能力强等特性，因此当培养基盐浓度为60g/L，pH为10时，菌株H可正常持续发酵60d以上，而盐浓度为60g/L的条件下，其他杂菌因失水过多而死亡；pH为10的条件下，其他杂菌的酶变性失活，生长繁殖受抑制，故该系统不需要灭菌。
【小问3详解】
分析题意，扩大培养时，在适宜的营养物浓度、温度、pH等条件下，发酵液中菌株H细胞增殖和PHA产量均未达到预期，并产生了少量乙醇等物质，说明发酵条件中氧气不足，使菌种进行无氧呼吸产生乙醇，即氧气（O2或溶解氧）是限制高密度培养的重要因素；发酵工程一般包括菌种选育、扩大培养、培养基的配制、灭菌、接种、发酵罐内发酵、产品的分离和提纯等，其中心环节是发酵罐内发酵。
【小问4详解】
根据酶具有专一性的特点可知，菌株H之所以能通过分解餐厨垃圾（主要含蛋白质、淀粉、脂肪等）来生产PHA，说明其能分泌蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶等。
28. 科学家将番茄（2N）和马铃薯（4N）利用如图技术得到“番茄——马铃薯”植株。请据图回答下列问题。
（1）上图中所示技术的原理是____________和_______________。
（2）过程I使用____________酶去除细胞壁，从而获得有活力的原生质体。c表示__________。植物体细胞融合完成的标志是__________________。
（3）诱导试管f中植株生根过程的培养基中，生长素与细胞分裂素的比值较过程Ⅳ______（填“高”或“低”），培养基中添加蔗糖的作用__________________。
（4）过程Ⅳ和Ⅴ运用的技术还广泛用于细胞产物的工厂化生产，如从红豆杉树皮中分离出具有抗癌活性的紫杉醇。请依据所学知识写出生产紫杉醇的过程图：_________（用文字和箭头表示）。
【答案】（1） ①. 细胞膜具有一定的流动性 ②. 细胞全能性
（2） ①. 纤维素酶和果胶酶 ②. 正在融合的原生质体 ③. 杂种细胞再生出细胞壁（形成新的细胞壁）
（3） ①. 高 ②. 为植物细胞提供能量，调节培养基内的渗透压
（4）豆杉树皮细胞 愈伤组织→提取紫杉醇
【解析】
【分析】分析题图，图示为植物体细胞杂交过程示意图，其中Ⅰ表示去除细胞壁获得原生质体的过程；Ⅱ表示人工诱导原生质体融合的过程；Ⅲ表示再生出新细胞壁的过程；IV表示脱分化过程；V表示再分化过程。
【小问1详解】
上图示技术的名称是植物体细胞杂交技术，体现了细胞膜具有一定的流动性；将杂种细胞培育成杂种植株需要采用植物组织培养技术，其原理是植物细胞具有全能性。
【小问2详解】
过程Ⅰ表示去除细胞壁获得原生质体的过程，由于植物细胞壁的成分主要是纤维素和果胶，根据酶的专一性可知，需要用纤维素酶和果胶酶除去细胞壁；c表示正在融合的原生质体；植物体细胞融合完成是杂种细胞再生出细胞壁（形成新的细胞壁）。
【小问3详解】
当细胞分裂素与生长素的浓度比值大于1时，可以促进芽的分化，当该比值小于1时，可以促进根的分化，故诱导 f 中植株生根过程的培养基中生长素与细胞分裂素的比值较过程IV（脱分化）高；培养基中添加蔗糖的作用一是可以为植物提供能量，二是可以维持培养基的渗透压。
【小问4详解】
利用植物组织培养技术，能将细胞培养成愈伤组织，再大量培养愈伤组织细胞，从中提取紫杉醇，生产过程图为：离体的 红豆杉树皮细胞 愈伤组织→提取紫杉醇 植物体细胞。
29. 甲胎蛋白（AFP） 是癌细胞表面的一种特异性糖蛋白，可以用来进行肝癌的早期诊断。现用单克隆抗体技术生产抗AFP单克隆抗体，过程如下图一，请据图回答：
（1）制备单克隆抗体过程中要用到的动物细胞工程技术是____和____，要生产抗AFP单克隆抗体，首先需要向小鼠体内注入____作为抗原。
（2）细胞①是____，它与骨髓瘤细胞融合时使用的化学试剂是____。
（3）细胞融合是随机的，为将需要的杂交瘤细胞筛选出来，利用的选择培养基原理是：细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基蝶呤阻断。淋巴细胞中有两条DNA合成途径，而骨髓瘤细胞中只有D途径，如图二。如果只考虑细胞两两融合，融合的细胞有____类。根据上述原理将杂交瘤细胞分离出来，使用的选择培养基里面应加入____
（4）制备单克隆抗体需要进行两次筛选，其中第二次筛选的方法为____技术。
（5）通过此过程生产的单克隆抗体和氟尿嘧啶结合后制成生物导弹来治疗肝癌，其中能对癌细胞起到杀伤作用的是____
【答案】 ①. 动物细胞培养 ②. 动物细胞融合 ③. 特定的抗原蛋白 ④. 淋巴B细胞 ⑤. 聚乙二醇 ⑥. 三类 ⑦. 氨基蝶呤 ⑧. 抗原-抗体杂交 ⑨. 氟尿嘧啶
【解析】
【分析】1、单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
2、两次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）；②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群。
3、杂交瘤细胞的特点：既能大量增殖，又能产生特异性抗体。
4、诱导动物细胞融合的方法有：物理法（离心、振动）、化学法（聚乙二醇）、生物法（灭活的病毒）。
5、单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优势在于特异性强，灵敏度高，可大量制备。
6、生物导弹：单克隆抗体+放射性同位素、化学药物或细胞毒素，借助单克隆抗体的定位导向作用将药物定向带到癌细胞，在原位杀死癌细胞。疗效高，副作用小，位置准确。
【详解】（1）单克隆抗体的制备过程有骨髓瘤细胞和B细胞的培养，及两种细胞的融合，涉及的技术有细胞培养技术和细胞融合技术。要生产抗AFP单克隆抗体，首先需要向小鼠体内注入特定的抗原蛋白作为抗原。
（2）细胞①是淋巴B细胞，它与骨髓瘤细胞融合时使用的化学试剂是聚乙二醇
（3）B淋巴细胞自身融合的细胞、骨髓瘤细胞自身融合的细胞、杂交瘤细胞，共3种类型细胞。为了筛选出杂交瘤细胞，除去其他细胞，可向培养液中加入氨基蝶呤，使D合成途径阻断，仅有该合成途径的骨髓瘤细胞及其彼此融合的瘤细胞就不能增殖，但人淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂种细胞可以利用淋巴细胞中的S途径合成DNA而增殖。
（4）第一次筛选的方法是利用特定选择培养基筛选，获得杂交瘤细胞，即AB型细胞；第二次筛选：利用多孔板法和抗原-抗体杂交法筛选，获得产生特定抗体的杂交瘤细胞。
（5）通过此过程生产的单克隆抗体和氟尿嘧啶结合后制成生物导弹来治疗肝癌，其中能对癌细胞起到杀伤作用的是氟尿嘧啶，单克隆抗体起导向作用。
【点睛】本题考查单克隆抗体制备的相关知识，意在考查考生利用所学内容解决实际问题的能力，难度中等。
30. 营养缺陷型菌株是人工诱变或自发突变后，某些酶被破坏，使代谢过程中某些合成反应不能进行的菌株。这种菌株能积累正常菌株不能积累的某些代谢中间产物，可为工业生产提供原料。以下是科研人员利用影印法初检某种氨基酸缺陷型菌株的过程。请回答下列问题：
（注：氨基酸缺陷型菌株在基本培养基中不能生长，在完全培养基中能生长。）
（1）从培养基成分分析，图中基本培养基与完全培养基存在差异的成分是_____。根据用途分类，图中基本培养基属于_____（填“选择”或“鉴别”）培养基。
（2）过程①的接种方法为_____，进行②过程培养时，应先将丝绒布转印至_____（填“基本”或“完全”）培养基上，理由是_____，从_____培养基上获得相应的营养缺陷型菌株。
（3）统计菌落种类和数量时要每隔24h观察统计一次，直到各类菌落数目稳定，以防止培养时间不足导致_____，或培养时间太长导致_____。
（4）为进一步完成对初检营养缺陷型菌株的鉴定，科研人员进行如下操作：
①用接种针挑取_____（填“菌落A”或“菌落B”）接种于盛有完全培养液的离心管中，28℃振荡培养1~2天后，离心，取沉淀物用无菌水洗涤3次，并制成菌悬液。
②吸取1mL菌悬液加入无菌培养皿中，倾注15mL融化并冷却至50℃左右的基本培养基，待其冷凝后，用记号笔在_____（填“皿盖”或“皿底”）划分五个区域，标记A、B、C、D、E（如图所示）。
③在划分的五个区域上分别放入少量氨基酸粉末（如下表所示），经培养后，观察生长圈出现的区域，从而确定属于何种氨基酸缺陷型。
在上述鉴定实验中，发现只在培养基A、D区域出现生长圈，说明该菌株为_____营养缺陷型。
【答案】（1） ①. 氨基酸 ②. 选择
（2） ①. 稀释涂布平板法 ②. 基本 ③. 防止将特定营养成分带入培养基 ④. 完全
（3） ①. 遗漏菌落的种类和数目 ②. 菌落粘连影响计数、培养基表面干燥脱水、微生物衰败菌落特征不易观察
（4） ①. 菌落A ②. 皿底 ③. 苯丙氨酸
【解析】
【分析】分析题图：图中首先利用稀释涂布平板法分离细菌，然后运用“影印法”将菌种接种到两种培养基中：基本培养基、完全培养基，在基本培养基中，氨基酸缺陷型菌株不能生长，而在完全培养基中能够生长，据此可以选择出氨基酸缺陷型菌株。
【小问1详解】
图示是利用影印法初检氨基酸缺陷型菌株的过程，氨基酸缺陷型菌株在基本培养基中不能生长，在完全培养基中能生长，据此可知，与基本培养基（只含碳源、无机盐、水）相比，待测培养皿中的特有的成分有氨基酸；根据用途分类，图中基本培养基属于选择培养基；
【小问2详解】
根据过程①所得培养基中菌落的分布结可以判断，该过程所采用的接种方法为稀释涂布平板法；进行②过程培养时，转印的操作相当于接种，应先将丝绒布转印至基本培养基上，目的是防止将特定营养成分带入培养基，再从完全培养基上获得相应的营养缺陷型菌株；
【小问3详解】
）统计菌落种类和数量时要每隔24h观察统计一次，直到各类菌落数目稳定，以防止培养时间不足导致遗漏菌落的种类和数目，或培养时间太长导致菌落粘连影响计数、培养基表面干燥脱水、微生物衰败菌落特征不易观察；
【小问4详解】
为了进一步完成对初检的营养缺陷型菌株的鉴定，在基本培养基中，氨基酸缺陷型菌株不能生长，而在完全培养基中能够生长，因此图中菌落A应该为氨基酸缺陷型菌株，结合对（2）的分析可知：①用接种针挑取菌落A接种并培养；②培养皿是倒置培养微生物的，因此在皿底划分五个区域；③表中信息显示：A、D区域含有、其它区域不含有的氨基酸是苯丙氨酸，而实验结果只有A、D区域出现生长圈，说明该营养缺陷型菌株属于苯丙氨酸缺陷型。
6-BA/（mg·L-1）
IBA/（mg·L-1）
0． 1
0．2
0．3
0．4
0．5
1．0
31
63
58
49
41
2．0
40
95
76
69
50
3．0
37
75
64
54
41
4．0
25
35
31
30
25
5．0
8
21
12
8
4
区域
放入的氨基酸
A
组氨酸
苏氨酸
谷氨酸
苯丙氨酸
亮氨酸
B
精氨酸
苏氨酸
赖氨酸
甲硫氨酸
天冬氨酸
C
酪氨酸
谷氨酸
赖氨酸
色氨酸
丙氨酸
D
甘氨酸
苯丙氨酸
甲硫氨酸
色氨酸
丝氨酸
E
半胱氨酸
亮氨酸
天冬氨酸
丙氨酸
丝氨酸
1. 人工防护林具有防风、固沙及保护农田等作用，对维护区域生态系统稳定具有重要意义。下列叙述正确的是（ ）
A. 防护林通过自组织、自我调节可实现自身结构与功能的协调
B. 防护林建设应选择本地种，遵循了生态工程的循环原理
C. 防护林建成后，若失去人类的维护将会发生初生演替
D. 防护林的防风、固沙及保护农田的作用体现了生物多样性的直接价值
2. “一粥一饭，当思来之不易；半丝半缕，恒念物力维艰”体现了日常生活中减少生态足迹的理念，下列选项中都能减少生态足迹的是（ ）
①光盘行动②自驾旅游③高效农业④桑基鱼塘⑤一次性餐具使用⑥秸秆焚烧
A. ①③④B. ①④⑥C. ②③⑤D. ②⑤⑥
3. 下列关于微生物纯培养与发酵工程的说法正确的是（ ）
A. 微生物的纯培养物就是不含有代谢废物的微生物培养物
B. 平板划线法既可以用于微生物的纯培养，又可用于微生物计数
C. 利用酵母菌发酵产生的单细胞蛋白属于分泌蛋白，可制成微生物饲料
D. 在农牧业中，利用发酵工程生产的微生物肥料一般是微生物的代谢产物
4. 下列关于豆腐乳制作的相关叙述，说法错误的是（ ）
A. 在加盐腌制豆腐乳时，接近瓶口表面的盐要铺厚一些
B. 青霉、曲霉、酵母、毛霉等多种微生物参与豆腐乳发酵
C. 现代食品企业是在无菌条件下接种毛霉来生产豆腐乳
D. 卤汤中酒的含量过高，豆腐乳成熟的时间会明显提前
5. 用培养液培养三种细菌，让它们在三支不同的试管中生长，如图显示了细菌的生长层，如果此时往三支试管中通入氧气，则细菌的繁殖速度将是( )
A. 甲不变，乙减慢，丙加快B. 甲加快，乙加快，丙减慢
C. 甲减慢，乙减慢，丙加快D. 甲减慢，乙加快，丙减慢
6. 菜籽粕含有35%～45%蛋白质，是畜禽饲料的重要原料，但其中的单宁等抗营养因子限制了菜籽粕的应用。研究者将不同菌种接种到菜籽粕与麸皮制成的培养基中发酵48h，测定菜籽粕中单宁的含量，结果如图，下列相关叙述不正确的是（ ）
A. 菜籽粕与麸皮为微生物提供氮源和碳源
B. 接种后需对培养基进行高压蒸汽灭菌
C. 黑曲霉菌对单宁的去除效果最为理想
D. 对照组为不接种微生物的培养基
7. 苯酚及其衍生物对人和动植物具有很强的毒害作用，已被列入环境优先控制污染物名单。某生物科技小组欲从工业污水中分离耐盐苯酚降解细菌（W3） 并测定不同盐度下其生长、降解200mg/L苯酚情况，实验结果如图所示。下列有关说法错误的是（ ）
A. 分离W3的培养基中需要以苯酚为唯一的碳源
B. 当盐度由5%升至10%时，W3种群的K值及对苯酚的降解率均降低
C. 与盐度1%相比，W3在盐度5%条件下对苯酚的降解率基本相同
D. 可检测W3在高盐条件下液泡内溶质的种类和含量变化以探究其耐盐机理
8. 安徽徽州毛豆腐是通过人工接种法，使豆腐表面生长出一层白色绒毛，其中主要的微生物是毛霉。豆腐经过发酵后所含的植物蛋白转化成多种氨基酸，经烹饪后味道鲜美。有关说法错误的是（ ）
A. 毛霉菌与乳酸菌的区别是前者有成形的细胞核
B. 豆腐可以看作给毛霉生长提供营养物质的培养基
C. 吃腐乳时，腐乳外部的“皮”是细菌繁殖形成的
D. 毛霉产生蛋白酶和肽酶可将蛋白质最终转化为氨基酸
9. 如下图为研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素细菌的示意图，有关叙述不正确的是（ ）
A. 配制步骤②、③的培养基都要进行严格灭菌
B. 步骤③采用涂布平板法接种，并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素
C. 步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种，比较细菌分解尿素的能力
D. 步骤③纯化分解尿素的细菌的原理是将聚集的细菌分散，以获得单细胞形成的菌落
10. 从自然界中筛选具有优良性状菌种的一般步骤为：采集样品→富集培养（使菌体数量增多）→纯种分离→性能测定，如图a、b是采用两种接种方法接种后纯化培养的效果图。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 可使用液体培养基进行富集培养
B. 为获得纯种的目的菌种，需对采集的样品进行灭菌
C. 获得图a所示结果的接种过程中，接种环需灼烧灭菌3次
D. 利用图b计算出样品中菌体浓度为5．85×108个/ml，则接种稀释液的稀释倍数为107倍
11. 菠菜（2N=12）是XY型性别决定的生物，用菠菜进行单倍体育种，下列正确的是（ ）
A. 单倍体育种的后代，染色体数目是12条
B. 单倍体育种需要经过花药离体培养，因此后代均为雄性
C. 菠菜中的雌株一般可产生染色体组成不同的两种雌配子
D. 单倍体育种常使用秋水仙素，目的是抑制着丝点的分裂
12. 下列植物育种过程中可以不需要植物组织培养的是（ ）
A. 脱毒作物的培育过程
B. 单倍体农作物的育种过程
C. 多倍体植物的培育过程
D. 体细胞杂交培育农作物的过程
13. 研究人员研究了马铃薯茎尖外植体大小对苗的成苗率和脱毒率的影响，实验结果如图所示，下列叙述正确的是（ ）
A. 马铃薯的茎尖经过灭菌后才能用于脱毒苗培育
B. 利用组织培养技术获得的脱毒苗，是具有抗病毒的新品种
C. 茎尖和脱分化形成的愈伤组织细胞中核酸种类相同
D. 兼顾成苗率和脱毒率，马铃薯脱毒培养中茎尖外植体的适宜大小为0.27mm
14. 科学家通过体外诱导小鼠成纤维细胞获得一种类似胚胎干细胞的细胞，具有活跃的分裂能力，称为诱导多能干细胞(简称iPS 细胞)，下列叙述错误的是（ ）
A. iPS 细胞具有很高的全能性，且诱导过程无须破坏胚胎
B. 培养iPS 细胞需提供95%氧气和5%CO₂的混合气体
C. 由病人体细胞诱导产生的iPS细胞进行自体移植理论上可避免发生免疫排斥
D. iPS 细胞具有分裂活性，用它进行治疗时可能存在分化成肿瘤细胞的风险
15. 利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是
A. 用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体
B. 体外培养单个效应B细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体
C. 将等量效应B细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞
D. 利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者
16. 某兴趣小组按照“探究抗生素对细菌的选择作用”的实验步骤进行拓展实验：分别使用含相同浓度艾叶汁和氨苄青霉素的两种滤纸片，对大肠杆菌进行选择培养，测量抑菌圈的直径变化如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A. 连续培养时应从抑菌圈边缘的菌落上挑取大肠杆菌
B. 氨苄青霉素导致大肠杆菌发生了耐药性突变
C. 氨苄青霉素的抑菌效果比艾叶汁更显著
D. 使用氨苄青霉素可能更易出现耐药菌
17. 某生物兴趣小组完成了“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”的实验，操作流程如图所示。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 应采集地面表层土作为土壤样品
B. 必须在酒精灯火焰旁采集土壤
C. 振荡可使土壤中的微生物充分稀释到水中
D. 若根据图示菌落进行计数，则10克土样中的菌株数约为1.6×106个
18. 现有基因型为AABB、aabb的两个品种，为了培育出基因型为AAbb的优良品种，可采用的方法如图所示。下列有关分析错误的是（ ）
A. 图中①②③过程所示的育种方式的原理为基因重组
B. 图中⑥过程一般可用秋水仙素处理幼苗
C 经图中④过程处理后比较难得到目标突变
D. 图中⑤⑥过程要多次自交才能得到目标植株
19. 下列对相关操作流程的叙述，错误的是（ ）
A. 泡菜制作：煮沸、冷却盐水→蔬菜处理、加调料、装坛→加盐水→无氧发酵→泡菜
B. 果酒制作：挑选葡萄→剪枝→冲洗→无氧发酵→果酒
C. 酵母菌的纯培养：配制培养基→灭菌→倒平板→接种和分离酵母菌→培养酵母菌
D. 分解尿素的细菌的培养与计数：土壤取样→样品稀释→涂布平板→培养与观察→计数
20. 消毒和灭菌是两个不同的概念，消毒是指使用较为温和的物理、化学或生物的方法杀死物体表面或内部的一部分微生物。灭菌则是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。下列关于消毒和灭菌的理解，错误的是（ ）
A. 常用消毒方法有煮沸消毒、巴氏消毒、紫外线消毒等
B. 湿热灭菌指利用沸水、流通蒸汽或高压蒸汽进行灭菌
C. 常用的灭菌方法有湿热灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌等
D. 操作的空间和操作者的衣着需要进行严格灭菌
21. 野生型谷氨酸棒状杆菌能在基本培养基上生长，精氨酸依赖型谷氨酸棒状杆菌因缺乏将鸟氨酸转化为精氨酸的酶不能在基本培养基上生长，可作为鸟氨酸发酵的优良菌种。如图为纯化精氨酸依赖型谷氨酸棒状杆菌(目的菌)的部分流程图。下列相关叙述错误的是（ ）
注：①②③④代表培养基，A、B、C表示操作步骤，D、E为菌落
A. 紫外线诱导菌种基因突变可增加突变株的数量B. B操作需用涂布器把菌液均匀涂到②的表面
C. 培养基③因缺少精氨酸导致菌落数目比④少D. 目的菌E扩大培养后可用于工业化生产鸟氨酸
22. 将一个具有两个野生型基因（A+、B+）的人体细胞和一个具有两个隐性突变基因（A-、B-）小鼠细胞诱导融合，筛选得到的杂种细胞在传代培养过程中，人体细胞中的某条染色体会发生丢失现象，小鼠的染色体不丢失。最终通过检测基因产物，确定基因A+、B+是否位于一条染色体上。下列说法正确的是（ ）
A. 杂种细胞传代培养需要添加激素及血清等天然成分的选择培养液
B. 诱导融合后的细胞具有两种细胞的遗传物质并发生了基因重组
C. 如果子细胞中只出现（A+、B+）和（A-、B-）所表达的基因产物，说明基因A+、B+在同一染色体上
D. 如果子代细胞出现（A+、B-）、（A-、B+）、（A+、B+）和（A-、B-）等所表达的全部基因产物，说明A+、B+位于两条染色体上
23. 某杂种植株的获取过程如图所示，下列有关分析正确的是（ ）
A. 叶片经消毒后需用流水多次冲洗，以避免消毒剂长时间作用而产生毒害作用
B. 图示①过程采用酶解法获取原生质体时，可用聚乙二醇调节渗透压
C. 图示②过程通过抽真空处理使酶溶液渗入细胞间隙，提高酶解效率
D. 经④过程获得的杂种细胞经鉴定和筛选后进行植物组培，即可获得目标杂种植株
24. 调查发现，某些非法分子在市售牛乳中添加了β-内酰胺酶，该酶能选择性地分解牛奶中残留的抗生素使其失活，从而掩盖牛奶中实际含有的抗生素。某实验小组将小鼠等分为高、中和低3个β-内酰胺酶剂量免疫组，每次免疫分别为200μg只、100μg/只、50μg/只，制备单克隆抗体后测定了各组的抗体效价（以其与抗原反应的多少来表示其免疫效果），结果如下图所示。下列叙述正确的是（ ）
A. 制备过程应使用高剂量组的小鼠的B淋巴细胞进行融合
B. 细胞融合前要分别在体外培养B淋巴细胞和骨髓瘤细胞
C. PEG可使培养基中的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞定向融合
D. 经抗体检测可筛选出产生抗β-内酰胺酶抗体的杂交瘤细胞
25. 月季在我国享有“花中皇后”的美誉。为了建立月季某新品种的快速繁殖体系，以芽体为外植体，在MS培养基中添加不同浓度的6-BA和IBA进行芽体增殖实验，芽分化率（%）结果如表。
关于上述实验，下列叙述错误的是（ ）
A. 6-BA浓度大于4．0mg·L-1时，芽分化率明显降低
B. 6-BA与IBA的比例为10：1时芽分化率均高于其他比例
C. 在培养基中同时添加适量的6-BA和IBA，可促进芽分化
D. 2．0mg·L-16-BA和0．2mg·L-1IBA是实验处理中芽分化的最佳组合
二、非选择题(5道大题，共计50分)
26. 苹果醋是以苹果汁为原料经发酵而成的，回答下列问题：
（1）酵母菌的呼吸代谢途径如图所示。图中过程①和②是苹果醋生产的第一阶段，其产物乙醇与______________试剂反应呈现灰绿色，这一反应可用于乙醇的检验；过程③在酵母菌细胞的________________ 中进行，与无氧条件相比，在有氧条件下，酵母菌的增殖速度________________ 。
（2）第二阶段是在________________ （微生物名称）的作用下将第一阶段产生的乙醇转变为醋酸的过程，该菌细胞结构中________________ （填“含有”或“不含有”）线粒体，根据该菌的呼吸作用类型，该过程需要在________________ 条件下才能完成；该阶段反应式可表示为________________ 。
（3）果醋制作是否成功，除了观察菌膜的形成，嗅味和品尝等进行初步鉴定外，还可以通过检测和比较________________ 进一步鉴定。
27. 中国科学家运用合成生物学方法构建了一株嗜盐单胞菌 H，以糖蜜（甘蔗榨糖后的废弃液，含较多蔗糖）为原料，在实验室发酵生产 PHA 等新型高附加值可降解材料，期望提高甘蔗的整体利用价值，工艺流程如图所示。
回答下列问题：
（1）为获得对蔗糖的耐受能力和利用效率高的菌株 H，可将蔗糖作为液体培养基的________，并不断提高其浓度，多代培养选择;从功能上看，所用培养基为______________ 。培养过程中定期取样并用___________ 进行菌落计数，评估菌株增殖状况;为减小误差，每次应________进行重复计数，然后求出平均值。
（2）基于菌株 H 嗜盐、酸碱耐受能力强等特性，研究人员设计了一种不需要灭菌的发酵系统，其培养基盐浓度设为60g/L，pH 为10，菌株 H 可正常持续发酵60 d以上。该系统不需要灭菌的原因是______________________________________（答出两点即可）。
（3）研究人员在工厂进行扩大培养，在适宜的营养物浓度、温度、pH 条件下发酵，结果发现发酵液中菌株 H 细胞增殖和 PHA 产量均未达到预期，并产生了少量乙醇等物质，说明发酵条件中_____________可能是高密度培养的限制因素。发酵工程的中心环节是______________。
（4）菌株 H 还能通过分解餐厨垃圾（主要含蛋白质、淀粉、脂肪等）来生产 PHA，说明其能分泌__________________________________________。
28. 科学家将番茄（2N）和马铃薯（4N）利用如图技术得到“番茄——马铃薯”植株。请据图回答下列问题。
（1）上图中所示技术的原理是____________和_______________。
（2）过程I使用____________酶去除细胞壁，从而获得有活力的原生质体。c表示__________。植物体细胞融合完成的标志是__________________。
（3）诱导试管f中植株生根过程的培养基中，生长素与细胞分裂素的比值较过程Ⅳ______（填“高”或“低”），培养基中添加蔗糖的作用__________________。
（4）过程Ⅳ和Ⅴ运用的技术还广泛用于细胞产物的工厂化生产，如从红豆杉树皮中分离出具有抗癌活性的紫杉醇。请依据所学知识写出生产紫杉醇的过程图：_________（用文字和箭头表示）。
29. 甲胎蛋白（AFP） 是癌细胞表面的一种特异性糖蛋白，可以用来进行肝癌的早期诊断。现用单克隆抗体技术生产抗AFP单克隆抗体，过程如下图一，请据图回答：
（1）制备单克隆抗体过程中要用到的动物细胞工程技术是____和____，要生产抗AFP单克隆抗体，首先需要向小鼠体内注入____作为抗原。
（2）细胞①是____，它与骨髓瘤细胞融合时使用的化学试剂是____。
（3）细胞融合是随机的，为将需要的杂交瘤细胞筛选出来，利用的选择培养基原理是：细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基蝶呤阻断。淋巴细胞中有两条DNA合成途径，而骨髓瘤细胞中只有D途径，如图二。如果只考虑细胞两两融合，融合的细胞有____类。根据上述原理将杂交瘤细胞分离出来，使用的选择培养基里面应加入____
（4）制备单克隆抗体需要进行两次筛选，其中第二次筛选的方法为____技术。
（5）通过此过程生产的单克隆抗体和氟尿嘧啶结合后制成生物导弹来治疗肝癌，其中能对癌细胞起到杀伤作用的是____
30. 营养缺陷型菌株是人工诱变或自发突变后，某些酶被破坏，使代谢过程中某些合成反应不能进行的菌株。这种菌株能积累正常菌株不能积累的某些代谢中间产物，可为工业生产提供原料。以下是科研人员利用影印法初检某种氨基酸缺陷型菌株的过程。请回答下列问题：
（注：氨基酸缺陷型菌株在基本培养基中不能生长，在完全培养基中能生长。）
（1）从培养基成分分析，图中基本培养基与完全培养基存在差异的成分是_____。根据用途分类，图中基本培养基属于_____（填“选择”或“鉴别”）培养基。
（2）过程①的接种方法为_____，进行②过程培养时，应先将丝绒布转印至_____（填“基本”或“完全”）培养基上，理由是_____，从_____培养基上获得相应的营养缺陷型菌株。
（3）统计菌落种类和数量时要每隔24h观察统计一次，直到各类菌落数目稳定，以防止培养时间不足导致_____，或培养时间太长导致_____。
（4）为进一步完成对初检营养缺陷型菌株的鉴定，科研人员进行如下操作：
①用接种针挑取_____（填“菌落A”或“菌落B”）接种于盛有完全培养液的离心管中，28℃振荡培养1~2天后，离心，取沉淀物用无菌水洗涤3次，并制成菌悬液。
②吸取1mL菌悬液加入无菌培养皿中，倾注15mL融化并冷却至50℃左右的基本培养基，待其冷凝后，用记号笔在_____（填“皿盖”或“皿底”）划分五个区域，标记A、B、C、D、E（如图所示）。
③在划分的五个区域上分别放入少量氨基酸粉末（如下表所示），经培养后，观察生长圈出现的区域，从而确定属于何种氨基酸缺陷型。
在上述鉴定实验中，发现只在培养基A、D区域出现生长圈，说明该菌株_____营养缺陷型。6-BA/（mg·L-1）
IBA/（mg·L-1）
0． 1
0．2
0．3
0．4
0．5
1．0
31
63
58
49
41
2．0
40
95
76
69
50
3．0
37
75
64
54
41
4．0
25
35
31
30
25
5．0
8
21
12
8
4
区域
放入的氨基酸
A
组氨酸
苏氨酸
谷氨酸
苯丙氨酸
亮氨酸
B
精氨酸
苏氨酸
赖氨酸
甲硫氨酸
天冬氨酸
C
酪氨酸
谷氨酸
赖氨酸
色氨酸
丙氨酸
D
甘氨酸
苯丙氨酸
甲硫氨酸
色氨酸
丝氨酸
E
半胱氨酸
亮氨酸
天冬氨酸
丙氨酸
丝氨酸
高2025届高二（下）第一次月考生物试题
一、单选题(共25个小题，每小题2分,共50分)
1. 人工防护林具有防风、固沙及保护农田等作用，对维护区域生态系统稳定具有重要意义。下列叙述正确的是（ ）
A. 防护林通过自组织、自我调节可实现自身结构与功能的协调
B. 防护林建设应选择本地种，遵循了生态工程的循环原理
C. 防护林建成后，若失去人类的维护将会发生初生演替
D. 防护林的防风、固沙及保护农田的作用体现了生物多样性的直接价值
【答案】A
【解析】
【分析】生物多样性的价值包括直接价值（食用、药用、工业用、旅游观赏、科研、文学艺术等）、间接价值（对生态系统起到的调节功能）和潜在价值（目前不清楚）。
【详解】A、防护林通过自组织、自我调节可实现自身结构与功能的协调，A正确；
B、防护林建设应选择本地种，遵循了生态工程的协调原理，B错误；
C、防护林建成后，若失去人类的维护将会发生次生演替，C错误；
D、防护林的防风、固沙及保护农田的作用体现了生物多样性的间接价值，D错误。
故选A。
2. “一粥一饭，当思来之不易；半丝半缕，恒念物力维艰”体现了日常生活中减少生态足迹的理念，下列选项中都能减少生态足迹的是（ ）
①光盘行动②自驾旅游③高效农业④桑基鱼塘⑤一次性餐具使用⑥秸秆焚烧
A. ①③④B. ①④⑥C. ②③⑤D. ②⑤⑥
【答案】A
【解析】
【分析】生态足迹：（1）概念:在现有技术条件下，维持某一人口单位生存所需的生产资源和吸纳废物的土地及水域的面积。
（2）意义:生态足迹的值越大,代表人类所需的资源越多,对生态和环境的影响就越大。
（3）特点:生态足迹的大小与人类的生活方式有关。生活方式不同,生态足迹的大小可能不同。
【详解】①光盘行动可以避免食物浪费，能够减少生态足迹，①正确；
②自驾旅游会增大生态足迹，②错误；
③④高效农业、桑基鱼塘，能够合理利用资源，提高能量利用率，减少生态足迹，③④正确；
⑤一次性餐具使用，会造成木材浪费，会增大生态足迹，⑤错误；
⑥秸秆焚烧，使秸秆中的能量不能合理利用，造成浪费且空气污染，会增大生态足迹，⑥错误。
综上可知，①③④正确。
故选A。
3. 下列关于微生物纯培养与发酵工程的说法正确的是（ ）
A. 微生物的纯培养物就是不含有代谢废物的微生物培养物
B. 平板划线法既可以用于微生物的纯培养，又可用于微生物计数
C. 利用酵母菌发酵产生的单细胞蛋白属于分泌蛋白，可制成微生物饲料
D. 在农牧业中，利用发酵工程生产的微生物肥料一般是微生物的代谢产物
【答案】D
【解析】
【分析】微生物常见的接种的方法：
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在划线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】A、微生物的纯培养物就是由单一个体繁殖所获得的微生物群体，A错误；
B、平板划线法可以用于微生物的纯培养，不可用于微生物计数，B错误；
C、利用酵母菌发酵产生的单细胞蛋白属于微生物菌体，可制成微生物饲料，C错误；
D、在农牧业中，利用发酵工程生产的微生物肥料一般是微生物的代谢产物，D正确。
故选D。
4. 下列关于豆腐乳制作的相关叙述，说法错误的是（ ）
A. 在加盐腌制豆腐乳时，接近瓶口表面的盐要铺厚一些
B. 青霉、曲霉、酵母、毛霉等多种微生物参与豆腐乳发酵
C. 现代食品企业是在无菌条件下接种毛霉来生产豆腐乳
D. 卤汤中酒的含量过高，豆腐乳成熟的时间会明显提前
【答案】D
【解析】
【分析】1、作腐乳利用的是主要是毛霉，毛霉产生的蛋白酶可将豆腐中的蛋白质水解成多肽和氨基酸，产生的脂肪酶能够将豆腐中的脂肪水解为甘油和脂肪酸。
2、含水量过大时腐乳不易成形，进行腐乳制作所选豆腐含水量不宜超过70%。
3、酒精含量的高低与腐乳后期发酵时间的长短有很大关系。酒精含量越高，对蛋白酶的抑制作用也越大，使腐乳成熟期延长；酒精含量过低，蛋白酶的活性高，加快蛋白质的水解，杂菌繁殖快，豆腐易腐败，难以成块。
【详解】A、越接近瓶口，杂菌污染的可能性越大，因此要随着豆腐层的加高增加盐的用量，在接近瓶口的表面，盐要铺厚一些，以有效防止杂菌污染，A正确；
B、多种微生物参与了豆腐的发酵，如酵母、曲霉和毛霉等，其中起主要作用的是毛霉，B正确；
C、传统的腐乳制作过程中，有多种微生物在起作用，但主要是毛霉。现代腐乳生产接种优良的毛霉菌种，不仅可以防止其他杂菌的污染，而且能保证腐乳的风味，保证腐乳质量，C正确；
D、酒精含量越高，对蛋白酶的抑制作用也越大，使腐乳成熟期延长，D错误。
故选D。
5. 用培养液培养三种细菌，让它们在三支不同的试管中生长，如图显示了细菌的生长层，如果此时往三支试管中通入氧气，则细菌的繁殖速度将是( )
A. 甲不变，乙减慢，丙加快B. 甲加快，乙加快，丙减慢
C. 甲减慢，乙减慢，丙加快D. 甲减慢，乙加快，丙减慢
【答案】B
【解析】
【分析】本题是细胞呼吸的方式和特点，细胞呼吸有有氧呼吸和无氧呼吸2种方式，有氧呼吸必须在有氧条件下进行，无氧呼吸不需要氧气，有氧气时无氧呼吸受抑制。试管的不同部位氧气浓度不同，上层氧气浓度高，下层氧气浓度低。甲试管中细菌趋向于试管上部，说明是需氧菌，乙试管中细菌均匀分布，说明是兼性厌氧菌，丙试管中细菌趋向于试管底部，说明是厌氧菌。
【详解】分析题图可以知道，甲中该细菌只在试管的上部繁殖，说明该细菌只进行有氧呼吸；乙中该细菌在试管的上部、中部、底部都繁殖，说明该细菌即进行有氧呼吸也进行无氧呼吸；丙中该细菌只在试管的底部繁殖，该细菌的呼吸方式应是无氧呼吸。若此时通入氧气，甲试管中的细菌进行有氧呼吸，通入氧气后有氧呼吸加快，细菌繁殖速度加快；乙试管中的细菌既可以进行有氧呼吸也可以进行无氧呼吸，通入氧气后，有氧呼吸加快，细菌的繁殖速度加快；丙试管的细菌只进行无氧呼吸，有氧气时无氧呼吸受抑制，细菌繁殖速度减慢。
因此甲、乙、丙在通入氧气后，细菌的繁殖速度分别是加快、加快、减慢。
故选B。
【点睛】有氧呼吸：
第一阶段
在细胞质的基质中，一个分子的葡萄糖分解成两个分子的丙酮酸，同时脱下4个[H]（活化氢）；在葡萄糖分解的过程中释放出少量的能量，其中一部分能量用于合成ATP，产生少量的ATP。这一阶段不需要氧的参与，是在细胞质基质中进行的。反应式：C6H12O6酶→2C3H4O3（丙酮酸）+4[H]+少量能量 （2ATP）
第二阶段
丙酮酸进入线粒体的基质中，两分子丙酮酸和6个水分子中的氢全部脱下，共脱下20个[H]，丙酮被氧化分解成二氧化碳；在此过程释放少量的能量，其中一部分用于合成ATP，产生少量的能量。这一阶段也不需要氧的参与，是在线粒体基质中进行的。反应式：2C3H4O3 （丙酮酸）+6H2O→20[H]+6CO2+少量能量 （2ATP）
第三阶段
在线粒体的内膜上，前两阶段脱下的共24个[H]与从外界吸收或叶绿体光合作用产生的6个O2结合成水；在此过程中释放大量的能量，其中一部分能量用于合成ATP，产生大量的能量。这一阶段需要氧的参与，是在线粒体内膜上进行的。反应式：24[H]+6O2→12H2O+大量能量（34ATP）
无氧呼吸
第一阶段：在细胞质的基质中，与有氧呼吸过程的第一阶段完全相同。即一分子的葡萄糖分解成两分子的丙酮酸，过程中释放少量的[H]和少量能量。
第二阶段：在细胞质的基质中，丙酮酸在不同酶的催化下，分解为酒精和二氧化碳，或者转化为乳酸。须特别注意的是，丙酮酸转化为酒精或者乳酸的过程中并不产生能量。
6. 菜籽粕含有35%～45%蛋白质，是畜禽饲料的重要原料，但其中的单宁等抗营养因子限制了菜籽粕的应用。研究者将不同菌种接种到菜籽粕与麸皮制成的培养基中发酵48h，测定菜籽粕中单宁的含量，结果如图，下列相关叙述不正确的是（ ）
A. 菜籽粕与麸皮为微生物提供氮源和碳源
B. 接种后需对培养基进行高压蒸汽灭菌
C. 黑曲霉菌对单宁的去除效果最为理想
D. 对照组为不接种微生物的培养基
【答案】B
【解析】
【分析】制备培养基的基本过程：计算、称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板。对培养基灭菌常用高压蒸汽灭菌。图中不同菌种接种到菜籽粕与麸皮制成的固体培养基中，发酵48h后，与对照组相比，发酵菜籽粕中单宁含量都发生了不同程度的减少，说明微生物发酵可去除单宁。
【详解】A、菜籽粕含有35%～45%的蛋白质（基本组成元素：C、H、O、N），麸皮富含纤维素（元素组成：C、H、O），故菜籽粕与麸皮可为微生物提供氮源和碳源，A正确；
B、对培养基灭菌常用高压蒸汽灭菌，对培养基灭菌应在接种前，接种后再灭菌，菌种将被杀死，B错误；
C、据图可知，与对照组相比，黑曲霉菌发酵菜籽粕中单宁含量最低，说明黑曲霉菌对单宁的去除效果最为理想，C正确；
D、对照组为不接种微生物的固体培养基，目的是作为对照，说明微生物具有去除单宁的作用，D正确。
故选B。
7. 苯酚及其衍生物对人和动植物具有很强的毒害作用，已被列入环境优先控制污染物名单。某生物科技小组欲从工业污水中分离耐盐苯酚降解细菌（W3） 并测定不同盐度下其生长、降解200mg/L苯酚情况，实验结果如图所示。下列有关说法错误的是（ ）
A. 分离W3的培养基中需要以苯酚为唯一的碳源
B. 当盐度由5%升至10%时，W3种群的K值及对苯酚的降解率均降低
C. 与盐度1%相比，W3在盐度5%条件下对苯酚的降解率基本相同
D. 可检测W3在高盐条件下液泡内溶质的种类和含量变化以探究其耐盐机理
【答案】D
【解析】
【分析】由图可知，与盐度1%相比，W3在盐度5%条件细菌数量相对值几乎重合，苯酚浓度曲线几乎重合，说明在这两个浓度条件下，W3的K值和降解率几乎相等。当盐度由5%升至10%时，W3种群的K值（W3细菌数量相对值降低）及对苯酚的降解率均降低（苯酚浓度增大）。
【详解】A、欲从工业污水中分离耐盐苯酚降解细菌（W3） ，则分离W3培养基中需要以苯酚为唯一的碳源，A正确；
B、由图可知，当盐度由5%升至10%时，W3种群的K值（W3细菌数量相对值降低）及对苯酚的降解率均降低（苯酚浓度增大），B正确；
C、与盐度1%相比，W3在盐度5%条件下对苯酚的降解率基本相同（苯酚浓度曲线几乎重合），C正确；
D、W3细菌是原核生物，无液泡，D错误。
故选D。
8. 安徽徽州毛豆腐是通过人工接种法，使豆腐表面生长出一层白色绒毛，其中主要的微生物是毛霉。豆腐经过发酵后所含的植物蛋白转化成多种氨基酸，经烹饪后味道鲜美。有关说法错误的是（ ）
A. 毛霉菌与乳酸菌的区别是前者有成形的细胞核
B. 豆腐可以看作给毛霉生长提供营养物质的培养基
C. 吃腐乳时，腐乳外部的“皮”是细菌繁殖形成的
D. 毛霉产生的蛋白酶和肽酶可将蛋白质最终转化为氨基酸
【答案】C
【解析】
【分析】
腐乳的制作原理：（1）腐乳的发酵在多种微生物的协同作用下进行，其中起主要作用的是毛霉，它是一种丝状真菌，新陈代谢类型是异养需氧型。（2）毛霉等微生物产生的蛋白酶可以将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可以将脂肪水解成甘油和脂肪酸。
【详解】A、毛霉菌是真菌，与原核生物乳酸菌的区别是前者有成形的细胞核，A正确；
B、豆腐可以看作给毛霉生长提供营养物质的培养基，B正确；
C、腐乳外部的“皮”是前期发酵时毛霉等微生物在豆腐表面上生长的菌丝（匍匐菌丝），对人体无害，C错误；
D、毛霉产生的蛋白酶和肽酶可将蛋白质最终转化为氨基酸，D正确。
故选C。
9. 如下图为研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素细菌的示意图，有关叙述不正确的是（ ）
A. 配制步骤②、③的培养基都要进行严格灭菌
B. 步骤③采用涂布平板法接种，并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素
C. 步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种，比较细菌分解尿素的能力
D. 步骤③纯化分解尿素的细菌的原理是将聚集的细菌分散，以获得单细胞形成的菌落
【答案】B
【解析】
【分析】从红棕壤中筛选高效分解尿素细菌过程：
（1）制备红棕壤浸出液；
（2）取上清液2mL放在选择培养基中培养；
（3）可用移液器取1mL菌液放在以尿素为唯一氮源的培养基中进行分离单菌落，筛选、纯化分解尿素的细菌；
（4）挑选单菌落接种于尿素液体培养基，进行鉴定分解尿素的能力。
【详解】A、在配制步骤②、③的培养基时，均需要进行高压蒸汽灭菌，A正确；
B、要筛选出能高效分解尿素的细菌，所选用的培养基要以尿素为唯一氮源，但牛肉膏和蛋白胨中都含有氮源，因此步骤③所用的培养基中不能含有牛肉膏、蛋白胨，B错误；
C、步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种，形成相互对照实验，比较细菌分解尿素的能力，C正确；
D、步骤③纯化分解尿素的细菌的原理是将聚集的细菌分散，以获得单细胞菌落，D正确。
故选B。
10. 从自然界中筛选具有优良性状的菌种的一般步骤为：采集样品→富集培养（使菌体数量增多）→纯种分离→性能测定，如图a、b是采用两种接种方法接种后纯化培养的效果图。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 可使用液体培养基进行富集培养
B. 为获得纯种的目的菌种，需对采集的样品进行灭菌
C. 获得图a所示结果的接种过程中，接种环需灼烧灭菌3次
D. 利用图b计算出样品中菌体浓度为5．85×108个/ml，则接种稀释液的稀释倍数为107倍
【答案】A
【解析】
【分析】微生物常见的接种的方法①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】A、与使用固体培养基相比，使用液体培养基培养菌种时，菌体可以分布在整个培养基中，可充分利用其中的营养物质，提高培养液中氧气含量，菌体数量增加的更快，A正确；
B、需从采集的样品分离得到目的菌种，不能对样品进行灭菌，B错误；
C、图a所示结果的接种次数为3次，接种环需灭菌4次，C错误；
D、利用稀释涂布平板法计算菌体浓度的方法为菌落数÷接种液体积×稀释倍数，而用于计数的平板的菌落数应在30-300之间，因此58.5个÷0.1ml×稀释倍数=5.85×108个/ml，计算得出稀释倍数为106倍，D错误。
故选A。
11. 菠菜（2N=12）是XY型性别决定的生物，用菠菜进行单倍体育种，下列正确的是（ ）
A. 单倍体育种的后代，染色体数目是12条
B. 单倍体育种需要经过花药离体培养，因此后代均为雄性
C. 菠菜中的雌株一般可产生染色体组成不同的两种雌配子
D. 单倍体育种常使用秋水仙素，目的是抑制着丝点的分裂
【答案】A
【解析】
【分析】单倍体育种是植物育种手段之一。即利用植物组织培养技术（如花药离体培养等）诱导产生单倍体植株，再通过某种手段使染色体组加倍（如用秋水仙素处理），从而使植物恢复正常染色体数。单倍体是具有体细胞染色体数为本物种配子染色体数的生物个体。单倍体育种得到的个体并不是单倍体。
【详解】A、根据题干可知，菠菜体细胞染色体数目是12条，在单倍体育种时，经花药离体培养后形成染色体数目为6的的单倍体，然后秋水仙素处理加倍，形成染色体数目为12的二倍体，A正确；
B、菠菜（2N=12）是XY型性别决定的生物，单倍体育种经花药离体培养形成的是5+X或者5+Y的单倍体，然后秋水仙素形成10+XX或者10+YY个体，10+XX是雌性，B错误；
C、菠菜雌株染色体组成为10+XX，产生的配子只有5+X，C错误；
D、单倍体育种常使用秋水仙素，目的是抑制纺锤体的形成，导致染色体不能移向两极，染色体数目加倍，D错误。
故选A。
12. 下列植物育种过程中可以不需要植物组织培养的是（ ）
A. 脱毒作物的培育过程
B. 单倍体农作物的育种过程
C. 多倍体植物的培育过程
D. 体细胞杂交培育农作物的过程
【答案】C
【解析】
【分析】植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞，进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。植物体细胞杂交依据的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。
【详解】A、脱毒作物的培育过程即切取一定大小的茎尖进行组织培养，再生的植株就有可能不带病毒，从而获得脱毒苗，所以脱毒作物的培育过程需要植物组织培养，A错误；
B、单倍体育种是采用花药（花粉）离体培养的方法来获得单倍体植株，然后经过人工诱导使染色体数目加倍，重新恢复到正常植株的染色体数目，所以单倍体农作物的育种过程需要植物组织培养，B错误；
C、多倍体植物的育种过程：用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，此过程没有植物组织培养， C正确；
D、体细胞杂交培育农作物的过程：先是植物体细胞融合成杂种细胞，再通过植物组织培养获得杂种植株，所以体细胞杂交培育农作物的过程需要植物组织培养，D错误。
故选C。
13. 研究人员研究了马铃薯茎尖外植体大小对苗的成苗率和脱毒率的影响，实验结果如图所示，下列叙述正确的是（ ）
A. 马铃薯的茎尖经过灭菌后才能用于脱毒苗培育
B. 利用组织培养技术获得的脱毒苗，是具有抗病毒的新品种
C. 茎尖和脱分化形成的愈伤组织细胞中核酸种类相同
D. 兼顾成苗率和脱毒率，马铃薯脱毒培养中茎尖外植体的适宜大小为0.27mm
【答案】D
【解析】
【分析】分析题图：图示表示茎尖外植体大小对苗的脱毒率和成活率的影响，实验的自变量是茎尖大小，因变量是成苗率和脱毒率。
【详解】A、马铃薯茎尖经过灭菌后会死亡，用于脱毒苗培育之前需要经过消毒处理，A错误；
B、利用组织培养技术获得的脱毒苗，是脱毒苗，而非能抗病毒，B错误；
C、核酸包括DNA和RNA，由于基因的选择性表达，茎尖和脱分化形成的愈伤组织细胞中核酸种类不完全相同，C错误；
D、据图可知，实验范围内，在茎尖外植体为0.27mm时成苗率和脱毒率均相对较高，是马铃薯脱毒培养中茎尖外植体的适宜大小，D正确。
故选D。
14. 科学家通过体外诱导小鼠成纤维细胞获得一种类似胚胎干细胞的细胞，具有活跃的分裂能力，称为诱导多能干细胞(简称iPS 细胞)，下列叙述错误的是（ ）
A. iPS 细胞具有很高的全能性，且诱导过程无须破坏胚胎
B. 培养iPS 细胞需提供95%氧气和5%CO₂的混合气体
C. 由病人体细胞诱导产生的iPS细胞进行自体移植理论上可避免发生免疫排斥
D. iPS 细胞具有分裂活性，用它进行治疗时可能存在分化成肿瘤细胞的风险
【答案】B
【解析】
【分析】胚胎干细胞（ES细胞）具有自我更新及多向分化潜能，为发育学、遗传学、人类疾病的发病机理与替代治疗等研究提供非常宝贵的资源。iPS细胞技术是借助基因导入技术将某些特定因子基因导入动物或人的体细胞，以将其重编程或诱导为ES细胞样的细胞，即iPS细胞。
【详解】A、诱导获得iPS细胞的过程无须破坏胚胎，不存在早期生命的破坏或抛弃过程，不涉及伦理问题，A正确；
B、培养iPS细胞时需提供95%空气（提供氧气，有助于细胞呼吸）和5%CO2（有助于维持培养液的pH）的混合气体环境，B错误；
C、用自身iPS细胞进行治疗的病人，一般不会发生免疫排斥反应，C正确；
D、由于iPS细胞具有活跃的分裂能力，若不受控制可能转化为癌细胞，所以用它进行治疗时可能存在安全风险，D正确。
故选B。
15. 利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是
A. 用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体
B. 体外培养单个效应B细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体
C. 将等量效应B细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞
D. 利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者
【答案】D
【解析】
【分析】单克隆抗体的制备：
1、细胞来源：B淋巴细胞：能产生特异性抗体，在体外不能无限繁殖；骨髓瘤细胞：不产生专一性抗体，体外能无限繁殖。
2、杂交瘤细胞的特点：既能大量增殖，又能产生特异性抗体。
【详解】A、用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体化学性质不单一，不是单克隆抗体，A错误；
B、体外培养单个浆细胞，不能无限繁殖，所以无法获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体，B错误；
C、将等量B细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞不都是杂交瘤细胞，还有B细胞自身融合的细胞、骨髓瘤细胞自身融合的细胞，C错误；
D、由于抗体具有专一性，该单克隆抗体是以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出的，所以利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者，D正确。
故选D。
16. 某兴趣小组按照“探究抗生素对细菌的选择作用”的实验步骤进行拓展实验：分别使用含相同浓度艾叶汁和氨苄青霉素的两种滤纸片，对大肠杆菌进行选择培养，测量抑菌圈的直径变化如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A. 连续培养时应从抑菌圈边缘的菌落上挑取大肠杆菌
B. 氨苄青霉素导致大肠杆菌发生了耐药性突变
C. 氨苄青霉素的抑菌效果比艾叶汁更显著
D. 使用氨苄青霉素可能更易出现耐药菌
【答案】B
【解析】
【分析】在自然选择的作用下，具有有利变异的个体有更多的机会产生后代，种群中相应基因的频率会不断提高；相反，具有不利变异的个体留下后代的机会少，种群中相应基因的频率会下降。因此，在自然选择的作用下，种群的基因频率会发生定向改变，导致生物朝着一定的方向不断进化。
【详解】A、抗生素能够杀死细菌，抑菌圈边缘抗生素浓度较低，可能存在具有耐药性的细菌，因此要从抑菌圈边缘的菌落上挑取细菌，A正确；
B、突变具有不定向性，B错误；
C、图中可以看出氨苄青霉素的抑菌圈的直径较大，可知氨苄青霉素的抑菌效果比艾叶汁更显著，C正确；
D、氨苄青霉素的抑菌效果比艾叶汁更显著，因此使用氨苄青霉素可能更易出现耐药菌，D正确。
故选B。
17. 某生物兴趣小组完成了“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”的实验，操作流程如图所示。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 应采集地面表层土作为土壤样品
B. 必须在酒精灯火焰旁采集土壤
C. 振荡可使土壤中的微生物充分稀释到水中
D. 若根据图示菌落进行计数，则10克土样中的菌株数约为1.6×106个
【答案】C
【解析】
【分析】活菌计数法：
①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌；
②操作：a、设置重复组，增强实验的说服力与准确性。b、为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数；
③计算公式：每克样品中的菌株数=（c÷V）×M，其中c代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数。
【详解】A、取距地表约3～8cm的土壤样品，A错误；
B、取样品时不用在酒精灯火焰旁，B错误；
C、振荡主要目的是使土壤中的微生物充分释放到无菌水中，C正确；
D、图示平板中有16个菌落，该过程中稀释的倍数为10000，最后只取了0.1mL进行涂布稀释，因此由图示菌落计数结果可知10克土样中的菌株数约为16×104÷0.1×10=1.6×107个，D错误。
故选C。
18. 现有基因型为AABB、aabb的两个品种，为了培育出基因型为AAbb的优良品种，可采用的方法如图所示。下列有关分析错误的是（ ）
A. 图中①②③过程所示的育种方式的原理为基因重组
B. 图中⑥过程一般可用秋水仙素处理幼苗
C. 经图中④过程处理后比较难得到目标突变
D. 图中⑤⑥过程要多次自交才能得到目标植株
【答案】D
【解析】
【分析】分析题图，①②③过程为杂交育种，原理是基因重组；①⑤⑥为单倍体育种，原理是染色体变异；④是诱变育种原理是基因突变。
【详解】A、据图可知：图中①②③过程所示的育种为杂交育种，原理是基因重组，A正确;
B、图中⑥过程一般可用秋水仙素处理幼苗Ab，导致其染色体数目加倍，得到AAbb个体，B正确；
C、图中④表示用射线处理aabb品种，进而获得AAbb，属于诱变育种，原理是基因突变，由于突变具有低频性和不定向性，因此比较难得到目标突变，C正确;
D、图中⑤⑥过程直接得到AaBb的配子，然后秋水仙素或者低温处理，就可以得到目标植株，不需要自交，D错误。
故选D。
19. 下列对相关操作流程的叙述，错误的是（ ）
A. 泡菜制作：煮沸、冷却盐水→蔬菜处理、加调料、装坛→加盐水→无氧发酵→泡菜
B. 果酒制作：挑选葡萄→剪枝→冲洗→无氧发酵→果酒
C. 酵母菌的纯培养：配制培养基→灭菌→倒平板→接种和分离酵母菌→培养酵母菌
D. 分解尿素的细菌的培养与计数：土壤取样→样品稀释→涂布平板→培养与观察→计数
【答案】B
【解析】
【分析】制作泡菜利用的是乳酸菌，乳酸菌是厌氧菌。果酒制作利用的是酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。
【详解】A、制作泡菜利用的菌种是乳酸菌，异化方式为厌氧型，需在无氧条件下发酵，泡菜制作为煮沸、冷却盐水→蔬菜处理、加调料、装坛→加盐水→无氧发酵→泡菜，A正确；
B、制作果酒时应先冲洗后去枝梗，减少杂菌污染的机会，B错误；
C、酵母菌的纯培养过程为配制培养基→灭菌→倒平板→接种和分离酵母菌→培养酵母菌，C正确；
D、分解尿素的细菌的培养与计数：土壤取样→样品稀释→将稀释液涂布到以尿素为唯一氮源的培养基上→培养与观察→计数，D正确。
故选B。
20. 消毒和灭菌是两个不同的概念，消毒是指使用较为温和的物理、化学或生物的方法杀死物体表面或内部的一部分微生物。灭菌则是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。下列关于消毒和灭菌的理解，错误的是（ ）
A. 常用的消毒方法有煮沸消毒、巴氏消毒、紫外线消毒等
B. 湿热灭菌指利用沸水、流通蒸汽或高压蒸汽进行灭菌
C. 常用的灭菌方法有湿热灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌等
D. 操作的空间和操作者的衣着需要进行严格灭菌
【答案】D
【解析】
【分析】消毒常用煮沸消毒法，巴氏消毒法（对于一些不耐高温的液体）及化学药剂消毒法，如用如酒精、氯气、石炭酸等消毒。
【详解】A、消毒是使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子），常用的方法有煮沸消毒、巴氏消毒、紫外线消毒等，A正确；
BC、灭菌较为彻底，常用的灭菌方法有湿热灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌等，其中湿热灭菌指利用沸水、流通蒸汽或高压蒸汽进行灭菌，BC正确；
D、实验操作的空间、操作者的衣着和手，需要进行清洁和消毒，而非灭菌，D错误。
故选D。
21. 野生型谷氨酸棒状杆菌能在基本培养基上生长，精氨酸依赖型谷氨酸棒状杆菌因缺乏将鸟氨酸转化为精氨酸的酶不能在基本培养基上生长，可作为鸟氨酸发酵的优良菌种。如图为纯化精氨酸依赖型谷氨酸棒状杆菌(目的菌)的部分流程图。下列相关叙述错误的是（ ）
注：①②③④代表培养基，A、B、C表示操作步骤，D、E为菌落
A. 紫外线诱导菌种基因突变可增加突变株的数量B. B操作需用涂布器把菌液均匀涂到②的表面
C. 培养基③因缺少精氨酸导致菌落数目比④少D. 目的菌E扩大培养后可用于工业化生产鸟氨酸
【答案】D
【解析】
【分析】由图分析可知，图中首先利用稀释涂布平板法分离细菌，然后运用将菌种接种到两种培养基中，分别是基本培养基、完全培养基；在基本培养基中，某氨基酸突变株不能生长，而在完全培养基中能够生长，据此可以选择出氨基酸突变株。
【详解】A、紫外线处理可以提高突变的频率，紫外线诱导菌种基因突变可增加突变株的数量，A正确；
B、由图（②中菌落分布状态）可知，B操作为稀释涂布平板，需用涂布器把菌液均匀涂到②的表面，B正确；
C、根据题干信息和图形分析，图中①②④为完全培养基（含有精氨酸的基本培养基），③为基本培养基，培养基③因缺少精氨酸导致菌落数目比④少，C正确；
D、从图中可看出，D在基本培养基中无法生长，在完全培养基中可生长，说明D是氨基酸依赖型菌落，即D才是生产鸟氨酸的目的菌种，D错误。
故选D。
22. 将一个具有两个野生型基因（A+、B+）的人体细胞和一个具有两个隐性突变基因（A-、B-）小鼠细胞诱导融合，筛选得到的杂种细胞在传代培养过程中，人体细胞中的某条染色体会发生丢失现象，小鼠的染色体不丢失。最终通过检测基因产物，确定基因A+、B+是否位于一条染色体上。下列说法正确的是（ ）
A. 杂种细胞传代培养需要添加激素及血清等天然成分的选择培养液
B. 诱导融合后的细胞具有两种细胞的遗传物质并发生了基因重组
C. 如果子细胞中只出现（A+、B+）和（A-、B-）所表达的基因产物，说明基因A+、B+在同一染色体上
D. 如果子代细胞出现（A+、B-）、（A-、B+）、（A+、B+）和（A-、B-）等所表达的全部基因产物，说明A+、B+位于两条染色体上
【答案】C
【解析】
【分析】动物细胞培养时，培养基中需要加入糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等营养物质，还需加入血清、血浆等天然物质。细胞需置于含CO2的混合气体的培养箱中培养，CO2的主要作用是维持培养液的pH。
【详解】A、杂种细胞传代培养需要添加激素及血清等天然成分完全培养液，A错误；
B、诱导融合后的细胞具有两种细胞的遗传物质，属于染色体变异，B错误；
C、由题可知，某个子细胞中同时检测到（A+、B+）基因所表达的产物，而不是单独出现A+或者B+ 所表达的产物，说明基因A+、B+在同一染色体上，C正确；
D、如果子代细胞出现（A+、B-）、（A-、B+）、（A+、B+）和（A-、B-）等所表达的全部基因产物，可能A+、B+位于一条染色体上，不能排除在染色体之间发生了结构变异的可能性，D错误。
故选C。
23. 某杂种植株的获取过程如图所示，下列有关分析正确的是（ ）
A. 叶片经消毒后需用流水多次冲洗，以避免消毒剂长时间作用而产生毒害作用
B. 图示①过程采用酶解法获取原生质体时，可用聚乙二醇调节渗透压
C 图示②过程通过抽真空处理使酶溶液渗入细胞间隙，提高酶解效率
D. 经④过程获得的杂种细胞经鉴定和筛选后进行植物组培，即可获得目标杂种植株
【答案】C
【解析】
【分析】1、植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。
2、过程：（1）诱导融合的方法：物理法包括离心、振动、电刺激等。化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂。（2）细胞融合完成的标志是新的细胞壁的生成。（3）植物体细胞杂交的终点是培育成杂种植株，而不是形成杂种细胞就结束。（4）杂种植株的特征：具备两种植物的遗传特征，原因是杂种植株中含有两种植物的遗传物质。
【详解】A、叶片经消毒后需用无菌水冲洗，以避免消毒剂长时间作用而产生毒害作用，A错误；
B、聚乙二醇是诱导细胞融合的物质，不是调节渗透压的物质，通常加入甘露醇来调节渗透压，B错误；
C、为了提高酶解效率，图示②过程可通过抽真空处理，利用负压使酶溶液快速渗入细胞间隙，通过处理，酶解效率会提高，C正确；
D、经组培获得的杂种幼苗，一般需要经过由无菌到有菌的炼苗过程才能用于生产实践，D错误。
故选C
24. 调查发现，某些非法分子在市售牛乳中添加了β-内酰胺酶，该酶能选择性地分解牛奶中残留的抗生素使其失活，从而掩盖牛奶中实际含有的抗生素。某实验小组将小鼠等分为高、中和低3个β-内酰胺酶剂量免疫组，每次免疫分别为200μg只、100μg/只、50μg/只，制备单克隆抗体后测定了各组的抗体效价（以其与抗原反应的多少来表示其免疫效果），结果如下图所示。下列叙述正确的是（ ）
A. 制备过程应使用高剂量组的小鼠的B淋巴细胞进行融合
B. 细胞融合前要分别在体外培养B淋巴细胞和骨髓瘤细胞
C. PEG可使培养基中的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞定向融合
D. 经抗体检测可筛选出产生抗β-内酰胺酶抗体的杂交瘤细胞
【答案】D
【解析】
【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
【详解】A、根据图示的结果可知，制备单克隆抗体的过程中要用低剂量组的小鼠的B淋巴细胞进行融合，以增加抗体的效价，A错误；
B、细胞融合前要在体外培养骨髓瘤细胞，但是由于B淋巴细胞在体外不能增殖，因此B淋巴细胞不能进行体外培养，B错误；
C、PEG即可以诱导不同种类的细胞发生细胞融合，也可以诱导相同种类的细胞之间发生细胞融合，C错误；
D、经抗体检测可以获得产生抗β-内酰胺酶抗体的杂交瘤细胞，然后在体外培养即可，D正确。
故选D。
25. 月季在我国享有“花中皇后”的美誉。为了建立月季某新品种的快速繁殖体系，以芽体为外植体，在MS培养基中添加不同浓度的6-BA和IBA进行芽体增殖实验，芽分化率（%）结果如表。
关于上述实验，下列叙述错误的是（ ）
A. 6-BA浓度大于4．0mg·L-1时，芽分化率明显降低
B. 6-BA与IBA的比例为10：1时芽分化率均高于其他比例
C. 在培养基中同时添加适量的6-BA和IBA，可促进芽分化
D. 2．0mg·L-16-BA和0．2mg·L-1IBA是实验处理中芽分化的最佳组合
【答案】B
【解析】
【分析】本实验目的为以芽体为外植体，在MS培养基中添加不同浓度的6-BA和IBA进行芽体增殖实验，自变量为不同浓度的6-BA和IBA，因变量为芽分化率，据表分析可知，随着6-BA浓度增加，芽分化率先增加后减少，随着IBA浓度增加，芽分化率先增加后减少，据此作答。
【详解】A、据表可知，6-BA浓度为从4.0mg·L-1到5.0mg·L-1时，芽分化率降低非常明显，故6-BA浓度大于4．0mg·L-1时，芽分化率明显降低，A正确；
B、据表可知，当6-BA与IBA的比例为10：1时，芽分化率为31%、95%、64%、30%、4%
，因此6-BA与IBA的比例为10：1时，芽分化率不一定都高于其他比例，B错误；
C、据表可知，6-BA与IBA的比例会影响芽的分化率，因此在培养基中同时添加适量的6-BA和IBA，可促进芽分化，C正确；
D、据表可知，芽分化率为95%是最高的，此时6-BA和IBA分别为2.0mg·L-1、0.2mg·L-1，是实验处理中芽分化的最佳组合，D正确。
故选B。
二、非选择题(5道大题，共计50分)
26. 苹果醋是以苹果汁为原料经发酵而成的，回答下列问题：
（1）酵母菌的呼吸代谢途径如图所示。图中过程①和②是苹果醋生产的第一阶段，其产物乙醇与______________试剂反应呈现灰绿色，这一反应可用于乙醇的检验；过程③在酵母菌细胞的________________ 中进行，与无氧条件相比，在有氧条件下，酵母菌的增殖速度________________ 。
（2）第二阶段是在________________ （微生物名称）的作用下将第一阶段产生的乙醇转变为醋酸的过程，该菌细胞结构中________________ （填“含有”或“不含有”）线粒体，根据该菌的呼吸作用类型，该过程需要在________________ 条件下才能完成；该阶段反应式可表示为________________ 。
（3）果醋制作是否成功，除了观察菌膜的形成，嗅味和品尝等进行初步鉴定外，还可以通过检测和比较________________ 进一步鉴定。
【答案】 ①. （酸性）重铬酸钾 ②. 线粒体 ③. 快 ④. 醋酸杆菌 ⑤. 不含有 ⑥. 有氧 ⑦. C2H5OH+O2→CH3COOH+H2O ⑧. 醋酸发酵前后PH
【解析】
【分析】参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。分析题图：①表示细胞呼吸的第一阶段，②表示无氧呼吸的第二阶段，③表示有氧呼吸的第二阶段和第三阶段。
【详解】（1）乙醇与（酸性）重铬酸钾试剂反应呈现灰绿色；过程③为有氧呼吸的第二、三阶段，在酵母菌细胞的线粒体中进行，由于有氧呼吸释放的能量比无氧呼吸释放的能量多，所以与无氧条件相比，在有氧条件下，酵母菌的增殖速度快。
（2）果醋发酵时，第二阶段是在醋酸杆菌的作用下将第一阶段产生的乙醇转变为醋酸的过程，醋酸杆菌为原核生物，不含线粒体，醋酸杆菌为需氧菌，需要在有氧条件下才能完成果醋发酵；该阶段反应式可表示为C2H5OH+O2→CH3COOH+H2O。
（3）果醋制作是否成功，除了观察菌膜的形成，嗅味和品尝等进行初步鉴定外，还可以通过检测和比较醋酸发酵前后PH进一步鉴定。
【点睛】本题结合图解，考查果醋的制作，要求考生识记参与果醋制作的微生物及其代谢类型，掌握果醋制作的原理、条件等基础知识，能正确分析题图，再结合所学的知识准确答题。
27. 中国科学家运用合成生物学方法构建了一株嗜盐单胞菌 H，以糖蜜（甘蔗榨糖后的废弃液，含较多蔗糖）为原料，在实验室发酵生产 PHA 等新型高附加值可降解材料，期望提高甘蔗的整体利用价值，工艺流程如图所示。
回答下列问题：
（1）为获得对蔗糖的耐受能力和利用效率高的菌株 H，可将蔗糖作为液体培养基的________，并不断提高其浓度，多代培养选择;从功能上看，所用培养基为______________ 。培养过程中定期取样并用___________ 进行菌落计数，评估菌株增殖状况;为减小误差，每次应________进行重复计数，然后求出平均值。
（2）基于菌株 H 嗜盐、酸碱耐受能力强等特性，研究人员设计了一种不需要灭菌的发酵系统，其培养基盐浓度设为60g/L，pH 为10，菌株 H 可正常持续发酵60 d以上。该系统不需要灭菌的原因是______________________________________（答出两点即可）。
（3）研究人员在工厂进行扩大培养，在适宜的营养物浓度、温度、pH 条件下发酵，结果发现发酵液中菌株 H 细胞增殖和 PHA 产量均未达到预期，并产生了少量乙醇等物质，说明发酵条件中_____________可能是高密度培养的限制因素。发酵工程的中心环节是______________。
（4）菌株 H 还能通过分解餐厨垃圾（主要含蛋白质、淀粉、脂肪等）来生产 PHA，说明其能分泌__________________________________________。
【答案】（1） ①. 唯一碳源 ②. 选择培养基 ③. 稀释涂布平板法 ④. 至少对3个平板
（2）盐浓度为60g/L的条件下，其他杂菌因失水过多而死亡；pH为10的条件下，其他杂菌的酶变性失活，生长繁殖受抑制
（3） ①. 氧气（O2或溶解氧） ②. 发酵罐内发酵
（4）蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶等
【解析】
【分析】在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。
【小问1详解】
根据题意分析，该实验的目的是提高菌株H对蔗糖的耐受能力和利用效率，结合微生物的代谢需求，其液体培养基应该以蔗糖作为唯一碳源。并不断提高其浓度，经多次传代培养可筛选出目标菌株；能进行筛选的培养基是选择培养基。稀释涂布平板法可以通过系列稀释和涂布平板最终获得由单个细胞繁殖来的菌落，因此培养过程中可定期取样并用稀释涂布平板法将菌液接种到固体培养基上，待形成菌落后进行菌落计数，评估菌株增殖状况。为降低因偶然因素造成的误差，每次应至少对3个平板进行重复计数，然后求出平均值。
【小问2详解】
已知菌株H具有嗜盐、酸碱耐受能力强等特性，因此当培养基盐浓度为60g/L，pH为10时，菌株H可正常持续发酵60d以上，而盐浓度为60g/L的条件下，其他杂菌因失水过多而死亡；pH为10的条件下，其他杂菌的酶变性失活，生长繁殖受抑制，故该系统不需要灭菌。
【小问3详解】
分析题意，扩大培养时，在适宜的营养物浓度、温度、pH等条件下，发酵液中菌株H细胞增殖和PHA产量均未达到预期，并产生了少量乙醇等物质，说明发酵条件中氧气不足，使菌种进行无氧呼吸产生乙醇，即氧气（O2或溶解氧）是限制高密度培养的重要因素；发酵工程一般包括菌种选育、扩大培养、培养基的配制、灭菌、接种、发酵罐内发酵、产品的分离和提纯等，其中心环节是发酵罐内发酵。
【小问4详解】
根据酶具有专一性的特点可知，菌株H之所以能通过分解餐厨垃圾（主要含蛋白质、淀粉、脂肪等）来生产PHA，说明其能分泌蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶等。
28. 科学家将番茄（2N）和马铃薯（4N）利用如图技术得到“番茄——马铃薯”植株。请据图回答下列问题。
（1）上图中所示技术的原理是____________和_______________。
（2）过程I使用____________酶去除细胞壁，从而获得有活力的原生质体。c表示__________。植物体细胞融合完成的标志是__________________。
（3）诱导试管f中植株生根过程的培养基中，生长素与细胞分裂素的比值较过程Ⅳ______（填“高”或“低”），培养基中添加蔗糖的作用__________________。
（4）过程Ⅳ和Ⅴ运用的技术还广泛用于细胞产物的工厂化生产，如从红豆杉树皮中分离出具有抗癌活性的紫杉醇。请依据所学知识写出生产紫杉醇的过程图：_________（用文字和箭头表示）。
【答案】（1） ①. 细胞膜具有一定的流动性 ②. 细胞全能性
（2） ①. 纤维素酶和果胶酶 ②. 正在融合的原生质体 ③. 杂种细胞再生出细胞壁（形成新的细胞壁）
（3） ①. 高 ②. 为植物细胞提供能量，调节培养基内的渗透压
（4）豆杉树皮细胞 愈伤组织→提取紫杉醇
【解析】
【分析】分析题图，图示为植物体细胞杂交过程示意图，其中Ⅰ表示去除细胞壁获得原生质体的过程；Ⅱ表示人工诱导原生质体融合的过程；Ⅲ表示再生出新细胞壁的过程；IV表示脱分化过程；V表示再分化过程。
【小问1详解】
上图示技术的名称是植物体细胞杂交技术，体现了细胞膜具有一定的流动性；将杂种细胞培育成杂种植株需要采用植物组织培养技术，其原理是植物细胞具有全能性。
【小问2详解】
过程Ⅰ表示去除细胞壁获得原生质体的过程，由于植物细胞壁的成分主要是纤维素和果胶，根据酶的专一性可知，需要用纤维素酶和果胶酶除去细胞壁；c表示正在融合的原生质体；植物体细胞融合完成是杂种细胞再生出细胞壁（形成新的细胞壁）。
【小问3详解】
当细胞分裂素与生长素的浓度比值大于1时，可以促进芽的分化，当该比值小于1时，可以促进根的分化，故诱导 f 中植株生根过程的培养基中生长素与细胞分裂素的比值较过程IV（脱分化）高；培养基中添加蔗糖的作用一是可以为植物提供能量，二是可以维持培养基的渗透压。
【小问4详解】
利用植物组织培养技术，能将细胞培养成愈伤组织，再大量培养愈伤组织细胞，从中提取紫杉醇，生产过程图为：离体的 红豆杉树皮细胞 愈伤组织→提取紫杉醇 植物体细胞。
29. 甲胎蛋白（AFP） 是癌细胞表面的一种特异性糖蛋白，可以用来进行肝癌的早期诊断。现用单克隆抗体技术生产抗AFP单克隆抗体，过程如下图一，请据图回答：
（1）制备单克隆抗体过程中要用到的动物细胞工程技术是____和____，要生产抗AFP单克隆抗体，首先需要向小鼠体内注入____作为抗原。
（2）细胞①是____，它与骨髓瘤细胞融合时使用的化学试剂是____。
（3）细胞融合是随机的，为将需要的杂交瘤细胞筛选出来，利用的选择培养基原理是：细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基蝶呤阻断。淋巴细胞中有两条DNA合成途径，而骨髓瘤细胞中只有D途径，如图二。如果只考虑细胞两两融合，融合的细胞有____类。根据上述原理将杂交瘤细胞分离出来，使用的选择培养基里面应加入____
（4）制备单克隆抗体需要进行两次筛选，其中第二次筛选的方法为____技术。
（5）通过此过程生产的单克隆抗体和氟尿嘧啶结合后制成生物导弹来治疗肝癌，其中能对癌细胞起到杀伤作用的是____
【答案】 ①. 动物细胞培养 ②. 动物细胞融合 ③. 特定的抗原蛋白 ④. 淋巴B细胞 ⑤. 聚乙二醇 ⑥. 三类 ⑦. 氨基蝶呤 ⑧. 抗原-抗体杂交 ⑨. 氟尿嘧啶
【解析】
【分析】1、单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
2、两次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）；②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群。
3、杂交瘤细胞的特点：既能大量增殖，又能产生特异性抗体。
4、诱导动物细胞融合的方法有：物理法（离心、振动）、化学法（聚乙二醇）、生物法（灭活的病毒）。
5、单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优势在于特异性强，灵敏度高，可大量制备。
6、生物导弹：单克隆抗体+放射性同位素、化学药物或细胞毒素，借助单克隆抗体的定位导向作用将药物定向带到癌细胞，在原位杀死癌细胞。疗效高，副作用小，位置准确。
【详解】（1）单克隆抗体的制备过程有骨髓瘤细胞和B细胞的培养，及两种细胞的融合，涉及的技术有细胞培养技术和细胞融合技术。要生产抗AFP单克隆抗体，首先需要向小鼠体内注入特定的抗原蛋白作为抗原。
（2）细胞①是淋巴B细胞，它与骨髓瘤细胞融合时使用的化学试剂是聚乙二醇
（3）B淋巴细胞自身融合的细胞、骨髓瘤细胞自身融合的细胞、杂交瘤细胞，共3种类型细胞。为了筛选出杂交瘤细胞，除去其他细胞，可向培养液中加入氨基蝶呤，使D合成途径阻断，仅有该合成途径的骨髓瘤细胞及其彼此融合的瘤细胞就不能增殖，但人淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂种细胞可以利用淋巴细胞中的S途径合成DNA而增殖。
（4）第一次筛选的方法是利用特定选择培养基筛选，获得杂交瘤细胞，即AB型细胞；第二次筛选：利用多孔板法和抗原-抗体杂交法筛选，获得产生特定抗体的杂交瘤细胞。
（5）通过此过程生产的单克隆抗体和氟尿嘧啶结合后制成生物导弹来治疗肝癌，其中能对癌细胞起到杀伤作用的是氟尿嘧啶，单克隆抗体起导向作用。
【点睛】本题考查单克隆抗体制备的相关知识，意在考查考生利用所学内容解决实际问题的能力，难度中等。
30. 营养缺陷型菌株是人工诱变或自发突变后，某些酶被破坏，使代谢过程中某些合成反应不能进行的菌株。这种菌株能积累正常菌株不能积累的某些代谢中间产物，可为工业生产提供原料。以下是科研人员利用影印法初检某种氨基酸缺陷型菌株的过程。请回答下列问题：
（注：氨基酸缺陷型菌株在基本培养基中不能生长，在完全培养基中能生长。）
（1）从培养基成分分析，图中基本培养基与完全培养基存在差异的成分是_____。根据用途分类，图中基本培养基属于_____（填“选择”或“鉴别”）培养基。
（2）过程①的接种方法为_____，进行②过程培养时，应先将丝绒布转印至_____（填“基本”或“完全”）培养基上，理由是_____，从_____培养基上获得相应的营养缺陷型菌株。
（3）统计菌落种类和数量时要每隔24h观察统计一次，直到各类菌落数目稳定，以防止培养时间不足导致_____，或培养时间太长导致_____。
（4）为进一步完成对初检营养缺陷型菌株的鉴定，科研人员进行如下操作：
①用接种针挑取_____（填“菌落A”或“菌落B”）接种于盛有完全培养液的离心管中，28℃振荡培养1~2天后，离心，取沉淀物用无菌水洗涤3次，并制成菌悬液。
②吸取1mL菌悬液加入无菌培养皿中，倾注15mL融化并冷却至50℃左右的基本培养基，待其冷凝后，用记号笔在_____（填“皿盖”或“皿底”）划分五个区域，标记A、B、C、D、E（如图所示）。
③在划分的五个区域上分别放入少量氨基酸粉末（如下表所示），经培养后，观察生长圈出现的区域，从而确定属于何种氨基酸缺陷型。
在上述鉴定实验中，发现只在培养基A、D区域出现生长圈，说明该菌株为_____营养缺陷型。
【答案】（1） ①. 氨基酸 ②. 选择
（2） ①. 稀释涂布平板法 ②. 基本 ③. 防止将特定营养成分带入培养基 ④. 完全
（3） ①. 遗漏菌落的种类和数目 ②. 菌落粘连影响计数、培养基表面干燥脱水、微生物衰败菌落特征不易观察
（4） ①. 菌落A ②. 皿底 ③. 苯丙氨酸
【解析】
【分析】分析题图：图中首先利用稀释涂布平板法分离细菌，然后运用“影印法”将菌种接种到两种培养基中：基本培养基、完全培养基，在基本培养基中，氨基酸缺陷型菌株不能生长，而在完全培养基中能够生长，据此可以选择出氨基酸缺陷型菌株。
【小问1详解】
图示是利用影印法初检氨基酸缺陷型菌株的过程，氨基酸缺陷型菌株在基本培养基中不能生长，在完全培养基中能生长，据此可知，与基本培养基（只含碳源、无机盐、水）相比，待测培养皿中的特有的成分有氨基酸；根据用途分类，图中基本培养基属于选择培养基；
【小问2详解】
根据过程①所得培养基中菌落的分布结可以判断，该过程所采用的接种方法为稀释涂布平板法；进行②过程培养时，转印的操作相当于接种，应先将丝绒布转印至基本培养基上，目的是防止将特定营养成分带入培养基，再从完全培养基上获得相应的营养缺陷型菌株；
【小问3详解】
）统计菌落种类和数量时要每隔24h观察统计一次，直到各类菌落数目稳定，以防止培养时间不足导致遗漏菌落的种类和数目，或培养时间太长导致菌落粘连影响计数、培养基表面干燥脱水、微生物衰败菌落特征不易观察；
【小问4详解】
为了进一步完成对初检的营养缺陷型菌株的鉴定，在基本培养基中，氨基酸缺陷型菌株不能生长，而在完全培养基中能够生长，因此图中菌落A应该为氨基酸缺陷型菌株，结合对（2）的分析可知：①用接种针挑取菌落A接种并培养；②培养皿是倒置培养微生物的，因此在皿底划分五个区域；③表中信息显示：A、D区域含有、其它区域不含有的氨基酸是苯丙氨酸，而实验结果只有A、D区域出现生长圈，说明该营养缺陷型菌株属于苯丙氨酸缺陷型。
6-BA/（mg·L-1）
IBA/（mg·L-1）
0． 1
0．2
0．3
0．4
0．5
1．0
31
63
58
49
41
2．0
40
95
76
69
50
3．0
37
75
64
54
41
4．0
25
35
31
30
25
5．0
8
21
12
8
4
区域
放入的氨基酸
A
组氨酸
苏氨酸
谷氨酸
苯丙氨酸
亮氨酸
B
精氨酸
苏氨酸
赖氨酸
甲硫氨酸
天冬氨酸
C
酪氨酸
谷氨酸
赖氨酸
色氨酸
丙氨酸
D
甘氨酸
苯丙氨酸
甲硫氨酸
色氨酸
丝氨酸
E
半胱氨酸
亮氨酸
天冬氨酸
丙氨酸
丝氨酸
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