四川省成都市蓉城名校联盟2023-2024学年高二下学期4月期中生物试题

这是一份四川省成都市蓉城名校联盟2023-2024学年高二下学期4月期中生物试题，共13页。

注意事项：
1.答题前，考生务必在答题卡上将自己的姓名、座位号、准考证号用0.5毫米的黑色签字笔填写清楚，考生考试条形码由监考老师粘贴在答题卡上的“贴条形码区”。
2.选择题使用2B铅笔填涂在答题卡上对应题目标号的位置上，如需改动，用橡皮擦擦干净后再填涂其它答案：非选择题用0.5毫米的黑色签字笔在答题卡的对应区域内作答，超出答题区域答题的答案无效；在草稿纸上、试卷上答题无效。
3.考试结束后由监考老师将答题卡收回。
一、选择题：本题共30小题，1~20题每题1分，21~30题每题2分，共40分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。
1.下列关于人口增长与环境的叙述，错误的是（ ）
A.环境污染、自然灾害频发等可能与人口的过度增长密切相关
B.我国的生态足迹总量位居世界首位，这给我国的发展带来巨大挑战
C.经济、社会的发展能解决因人口增长过快导致的资源短缺问题
D.世界人口如果继续增长，全球的生态环境可能会面临更大的压力
2.苏联切尔诺贝利核电站爆炸产生的核辐射粒子云被送到了2000km外的北欧，说明生态环境问题具有全球性，需要全人类的关注和合作。下列关于全球性生态环境问题的叙述，错误的是（ ）
A.土地荒漠化、水资源短缺、环境污染等属于全球性生态环境问题
B.煤、石油和天然气的大量燃烧以及水泥的生产等会导致全球变暖
C.全球性生态环境问题会影响生物圈的稳态以及人类的生存和发展
D.围湖造田，并在农田内种植多种农作物，有利于增加生物多样性
3.下列关于生态工程的叙述，错误的是（ ）
A.生态工程希望达到经济效益和生态效益同步发展的目的
B.进行生态工程建设时，不应走“先污染、破坏，后治理”的老路
C.处理好生物与环境、生物与生物的协调与平衡，需考虑环境容纳量
D.依据生态工程所遵循的基本原理，应该对秸秆进行焚烧处理
4.下列叙述不会导致生物多样性降低的是（ ）
A.外来物种的盲目引入
B.鼎湖山自然保护区的建立
C.生物栖息地的碎片化和栖息地丧失
D.对野生物种生存环境的破坏和掠夺式利用
5.下列关于传统发酵技术的说法，正确的是（ ）
A.腐乳的制作过程中，多种微生物参与了豆腐的发酵，其中起主要作用的是乳酸菌
B.传统发酵以单一菌种的固体发酵及半固体发酵为主，通常是家庭式或作坊式
C.果酒制作过程中，用体积分数为90%的酒精对发酵瓶、榨汁机等器具消毒
D.醋酸菌是好氧细菌，在缺少糖源时可将乙醇转化为乙醛，再将乙醛变为乙酸
6.某同学设计了如图所示的发酵装置，下列有关叙述错误的是（ ）
A.果醋制作时，发酵温度一般控制在30~35℃
B.果酒制作时，菌种可来自果皮表面的野生酵母菌
C.果酒制作时，取新鲜葡萄后先去除枝梗再清水冲洗
D.图中长而弯曲的胶管可防止空气中微生物的进入
7.无菌技术在微生物培养中非常重要，下列叙述正确的是（ ）
A.消毒可杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子
B.耐高温且需要保持干燥的物品，可采用湿热灭菌法灭菌
C.无菌技术可以用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染
D.巴氏消毒法可杀死牛奶中全部微生物，且只破坏小部分营养成分
8.研究人员采用图示流程获得高耐酒精的高产醋酸菌。下列相关叙述错误的是（ ）
A.在菌种确定后，要选择原料制备培养基，培养基配方实验一次即可投入使用
B.工业发酵罐的体积大，需要接入的菌种总体积也大，所以需要扩大培养
C.纯化培养时一般使用的是固体培养基，培养基内需加入凝固剂，如琼脂
D.发酵工程中所用的菌种大多是单一菌种，一旦杂菌污染，可能导致产量大幅下降
9.下列关于发酵工程在农牧业上的应用的说法，错误的是（ ）
A.在厌氧发酵制作青贮饲料时，添加乳酸菌可提高饲料的品质
B.微生物农药利用微生物或其代谢物来防治病虫害，是生物防治的重要手段
C.从微生物细胞中提取的单细胞蛋白可制成微生物饲料，能使家畜增重快
D.微生物肥料利用了微生物产生的有机酸、生物活性物质等来增进土壤肥力
10.用植物体细胞杂交的方法可得到“番茄—马铃薯”杂种植株。科学家利用荧光染料标记原生质体的膜蛋白，下列相关说法正确的是（ ）
A.诱导原生质体融合运用的原理是细胞膜的功能特性
B.过程④中的MS培养基需添加赤霉素和细胞分裂素
C.过程②再生出细胞壁，是植物细胞融合完成的标志
D.过程①常利用纤维素酶和蛋白酶去除植物细胞壁
11.动物细胞培养是动物细胞工程的基础，下列有关说法错误的是（ ）
A.蛋白酶分散细胞的时间太长会分解膜蛋白，造成细胞损伤
B.动物细胞培养时，可能会多次使用胰蛋白酶来分散细胞
C.贴壁细胞的生长有接触抑制的现象，需要对细胞进行分瓶培养
D.动物细胞培养时，充入5%CO2的目的是刺激细胞的正常呼吸
12.关于动物细胞融合技术与单克隆抗体，下列说法错误的是（ ）
A.与原生质体融合相比，动物细胞融合还可使用灭活的病毒
B.动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性，未体现细胞的全能性
C.杂交瘤细胞和浆细胞都是能合成并分泌抗体的细胞
D.抗体—药物偶联物中的药物能特异性识别并杀伤肿瘤细胞
13.关于受精作用，下列说法正确的是（ ）
A.精子和卵子都需要获能才能完成受精作用
B.获能是指精子获得能量，可以与卵子进行受精
C.卵细胞的透明带和细胞膜是两道屏障，可以阻止多精入卵
D.雌、雄原核融合形成合子是受精开始的标志
14.关于胚胎的早期发育，下列说法错误的是（ ）
A.胚胎发育的场所是输卵管和子宫
B.囊胚期的内细胞团，将来发育成胎膜和胎盘
C.卵裂使细胞数目增多，胚胎总体积不变
D.囊胚的扩大会导致透明带的破裂
15.如图是受精作用以及胚胎发育的示意图，下列叙述错误的是（ ）
A.①过程的完成依赖细胞表面糖蛋白的识别
B.②过程发生在透明带内，细胞开始出现分化
C.③过程胚胎内部出现含有液体的囊胚腔
D.④过程包括了胚胎的孵化，没有孵化的胚胎无法继续发育
16.关于基因工程的基本工具，下列叙述正确的是（ ）
A.不同的限制酶切出的黏性末端一定不同
B.限制酶和DNA连接酶都作用在磷酸二酯键
C.用质粒上的抗生素合成基因来筛选重组DNA分子
D. E.cli DNA连接酶可以缝合DNA片段的平末端
17.基因工程有广阔的应用前景，下列有关说法正确的是（ ）
A.基因工程能培育出可以降解多种污染物的“超级细菌”
B.抗虫棉产生的Bt蛋白可以抵抗棉铃虫、细菌、病毒等
C.植物细胞中出现了新基因就可以确定该植物为转基因植物
D.乳腺生物反应器的获得需要将目的基因导入动物乳腺细胞
18.将大豆GsSAMS基因利用农杆菌转化法导入水稻，获得转基因株系，明显提高了该株系水稻的盐碱胁迫耐受性。下列有关说法错误的是（ ）
A.盐碱胁迫耐受性的提高可能与渗透调节相关基因的表达有关
B.该株系的成功培育说明了农杆菌对水稻细胞有侵染能力
C. Ti质粒的T-DNA可以携带目的基因整合到细胞染色体DNA上
D.步骤④是脱分化和再分化的过程，其原理是细胞的全能性
19.下列关于基因工程和蛋白质工程的叙述，正确的是（ ）
A.两种工程操作的直接对象一般都是基因
B.两种工程都可以生产自然界本不存在的蛋白质
C.基因工程是分子水平操作，蛋白质工程是性状水平操作
D.通过氨基酸序列推测出的DNA的碱基序列是唯一的
20.蛋白质工程要按照功能需求，对蛋白质结构进行设计改造，下列不属于该工程的设计改造的是（ ）
A.改变蛋白质的部分氨基酸序列
B.预期蛋白质功能推测其应有的氨基酸序列
C.改进酶的性能或开发新的工业用酶
D.直接对胰岛素进行空间结构的改造
21.关于生态足迹，下列叙述正确的是（ ）
A.发达国家经济发展快，人口增长慢，人均生态足迹小
B.生态足迹值越大，人类所需资源越多，对生态和环境影响越大
C.林地表示生产肉、奶、毛、皮等畜牧产品所需的林地面积
D.碳足迹表示吸收化石燃料燃烧排放的二氧化碳等所需的森林和海洋面积
22.下图统计了若干植物的遗传多样性程度情况，据图分析，下列说法错误的是（ ）
A.生物多样性的间接价值明显小于它的直接价值
B.生物多样性包括遗传多样性、物种多样性和生态系统多样性
C.保护生物多样性，关键是要处理好人与自然的相互关系
D.如果某种植物病害爆发或环境剧变，野生种生存几率大于栽培种
23.某同学在制作泡菜时，在不同时间测定了泡菜中乳酸菌、乳酸、亚硝酸盐的含量，结果如曲线图所示。下列叙述错误的是（ ）
A.如果人体摄入过量亚硝酸盐，会发生中毒，甚至死亡
B.从亚硝酸盐的含量看，在发酵中期食用泡菜比较合适
C.发酵后期，乳酸大量增加会导致乳酸菌相对含量下降
D.发酵过程中，乳酸积累导致pH下降，对其他微生物生长有抑制作用
24.下图为实验室酵母菌的纯培养过程中的部分操作步骤，下列说法正确的是（ ）
A.步骤①操作时，需待培养基冷却至50℃左右时倒入，然后立即将培养皿倒置
B.步骤②灼烧接种环后，立即在酒精灯火焰附近用接种环蘸取菌液
C.步骤③每次划线前都需对接种环灼烧灭菌，划线结束后不用再灼烧
D.完成平板划线后，待菌液被培养基吸收后，再倒置放入恒温培养箱中培养
25.利用纤维素废弃物代替粮食生产酒精的研究工作前景广阔，其流程如图所示。下列说法错误的是（ ）
A.筛选纤维素分解菌需用到以纤维素为唯一碳源的培养基
B.纤维素分解菌和酵母菌都是真核生物，代谢类型都是异养需氧型
C.图中发酵阶段常用的菌种是酵母菌，发酵产物可以用酸性重铬酸钾来检验
D.筛选纤维素分解菌的过程中，用到的铁铲和纸袋等在使用前都需要灭菌
26.紫花苜蓿易使家畜患鼓胀病，我国科学家利用另一种植物百脉根培育抗鼓胀病的苜蓿新品种F，主要流程如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A.该育种方法可以打破生殖隔离，实现种间基因交流
B.融合的原生质体再生细胞壁的过程与高尔基体有关
C.该育种方法体现膜的流动性和植物细胞的全能性
D.培养D的培养基生长素和细胞分裂素比例保持不变
27.利妥昔单抗适用于复发或耐药的滤泡性中央型淋巴瘤的治疗，下图是其制备过程的示意图（HAT培养基为特定的选择培养基），下列相关说法错误的是（ ）
A.利用HAT培养基可以筛选出杂交瘤细胞
B.第二次筛选是选出能生成特定抗体的杂交瘤细胞
C.将抗体检测呈阴性的杂交瘤细胞大规模培养
D.除了体外培养，还可将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内增殖
28.EcRI限制酶能专一识别GAATTC序列，并在G和A之间将这段序列切开，切割位点可表示为5′-G^AATTC-3′，下列相关说法错误的是（ ）
A. EcRI限制酶切割DNA分子产生的是黏性末端
B.若在GAATTC的A和T之间切割会得到平末端
C. EcRI限制酶识别一次序列切割出一个黏性末端
D. EcRI限制酶能特异性识别特定的DNA序列
29.右图是基因表达载体的模式图，下列说法错误的是（ ）
A.基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建
B.启动子和终止子是转录和翻译的起点和终点
C.构建基因表达载体要用限制酶和DNA连接酶
D.复制原点是DNA复制起始的位点
30.PCR技术是基因工程扩增目的基因的常用方法，下列说法错误的是（ ）
A.该技术可以不用解旋酶，但需要耐高温的DNA聚合酶
B.DNA聚合酶将4种游离的脱氧核苷酸加到引物的3′端
C.第三次循环产物中出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段
D.PCR技术使用的一对特异性引物的碱基序列是互补的
二、非选择题：本题共5小题，共60分。
31.（12分）
下图是某农村综合发展型生态工程示意图，蚯蚓分解处理技术能实现固体废物的资源化和减量化。回答下列问题：
（1）生活垃圾发酵处理可______（填“增大”或“缩小”）该生态工程的生态足迹，生态足迹是指在现有技术条件下维持某一人口单位生存所需的______和______的土地及水域的面积。
（2）在这一案例中，主要运用的生态学基本原理有______（答出4点）。该生态工程中的能量能得到最有效的利用，原因是______。
（3）生态工程以生态系统的______、自我调节功能为基础；与传统工程相比，具有______（答出2点即可）的特点。
32.（12分）
某地土壤有机物A污染严重，某生物兴趣小组提出，土壤中可能存在以有机物A为唯一碳源的微生物。小组同学计划分离并计数土壤中分解有机物A的微生物。回答下列问题：
（1）在制备培养基时，一般都含有水、无机盐和______（答出2点即可）等营养物质。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对特殊营养物质的需求，如在培养乳酸杆菌时，需要在培养基中添加______。
（2）小组同学欲统计土壤样品中能分解化合物A的活菌数目，可用______法接种，统计结果一般比实际活菌数偏______。下图中______不是该方法得到的培养结果。
（3）由于小组同学是第一次做相关实验，故将稀释倍数范围适当放宽进行平板培养，这样做是为保证______。微生物培养过程中，选取______时的记录作为结果。
33.（12分）
植物的种间杂交、植物的体细胞杂交都是培育杂种植物的手段。随着多种育种方式的兴起，越来越多的植物新品种出现。回答下列问题：
（1）油菜是一个非常“年轻”的物种。它由白菜（染色体组为AA，n=10，n表示一个染色体组中染色体的条数）和甘蓝（染色体组为CC，n=9）天然杂交、自然加倍而形成。天然杂交后得到的是______倍体个体，染色体条数为______条。该个体减数分裂时细胞中无同源染色体，会出现染色体______的现象，是高度不育的，所以需要自然加倍后才能恢复育性，使其加倍的自然因素最可能为______。
（2）科研人员尝试用萝卜（染色体组为RR，n=9）和油菜作为亲本杂交，通过如图所示途径获得油菜新品种：
①油菜AACC与萝卜RR杂交获得F1，F1______（填“可育”或“不可育”）。
②植株BC1的染色体组成是______。若其中的染色体组R的9条染色体在减数第一次分裂的后期，每条都随机移向细胞两极，则植株BC2的染色体数目可能在______条之间。
34.（12分）
科研人员将R基因作为目的基因，构建基因表达载体，下图是目的基因的DNA的片段和所用到的质粒。回答下列问题：
（1）在扩增R基因时，需要加入引物，根据R基因______（填“内部”或“两端”）的核苷酸序列来设计特异性引物；利用PCR技术合成的DNA分子与模板DNA分子比较，长度一般______（选填“较长”或“较短”）。
（2）构建基因表达载体时，一般选择同种限制酶，据图分析，可以选择的酶是______，但用一种限制酶切割，会出现R基因和质粒的自身环化，或者R基因与质粒的反向连接。为避免上述现象，并且要在基因表达载体中保留标记基因，在切割质粒和目的基因时都采用两种限制酶切割，据图分析，该过程最适合选用的两种酶是______。
（3）将上述过程构建的基因表达载体导入到细菌，这些细菌将会获得对______的抗性。导入前，一般先用钙离子处理细菌，使其处于能吸收环境中______的生理状态。
（4）如果要将表达载体导入动物受精卵，常用的方法是______。
35.（12分）
某工厂的污水池中含一种有害的有机化合物X，工厂研究人员用镁盐、磷酸盐、化合物X、某类含氮有机物以及微量元素等配制的培养基，筛选得到能高效降解化合物X的细菌（目的菌）。回答下列问题：
（1）要从污水池中的污泥样品里分离出目的菌，从营养物质的角度分析，图中培养皿里培养基的特点是______。
（2）如果从污水池中获得的目的菌数量不多，可用______（填物理状态）培养基对目的菌进行扩大培养，该过程中振荡的目的是________________________。实验操作过程中获得纯净目的菌的关键是______。
（3）有研究人员提出通过基因工程改造细菌的基因也可获得高效降解化合物X的目的菌。基因工程是在______水平上进行设计和施工的，因此又叫做______。获取目的基因的方法有多种，现在常用PCR特异性地快速扩增目的基因。PCR是______的缩写，利用了______的原理。
2023~2024学年度下期高中2022级期中考试
生物参考答案及评分标准
一、选择题：本题共30小题，1~20题每小题1分，21~30题每小题2分，共40分。
1~5：CDDBD6~10：CCACC11~15：DDCBB16~20：BADAD
21~25：BABDB26~30：DCCBD
二、非选择题：本题共5小题，共60分。（以下为参考答案，其他合理答案酌情给分）
31.（12分，除标注外，每空2分）
（1）缩小 生产资源（1分） 吸纳废物（1分）（以上两空顺序可交换）
（2）整体、循环、协调、自生（答不全得1分，有错不给分）
充分利用了废弃物中的能量，实现了能量的多级利用（合理即可）
（3）自组织
少消耗、多效益、可持续（2分，答2点即可，一点1分）
32.（12分，除标注外，每空2分）
（1）碳源、氮源（2分，一点1分） 维生素
（2）稀释涂布平板 小（或“少”）（1分） C（1分）
（3）能从中选出菌落数为30~300的平板进行计数（或“能从中选出菌落数目合适的平板进行计数”）菌落数目稳定
33.（12分，除标注外，每空2分）
（1）二（1分） 19 联会紊乱 低温
（2）①不可育（1分）
②AACCR 38~47
34.（12分，除标注外，每空2分）
（1）两端 较短
（2）EcRI PstI、EcRI（2分，全对才给分）
（3）四环素 DNA分子（1分）
（4）显微注射法（1分）
35.（12分，除标注外，每空2分）
（1）以化合物X为唯一碳源
（2）液体（1分） 使目的菌与培养液充分接触，增加培养液中的溶氧量，有利于目的菌生长繁殖防止杂菌污染
（3）（DNA）分子（1分） 重组DNA技术（1分）
聚合酶链式反应（1分） DNA半保留复制
解析：
1.C
【解析】经济、社会的发展能缓解但不能根本解决资源短缺问题。故选C。
2.D
【解析】围湖造田会降低生物多样性。故选D。
3.D
【解析】依据生态工程所遵循的原理，不应该焚烧秸秆，可让秸秆还田、堆肥等。故选D。
4.B
【解析】建立自然保护区属于就地保护，是生物多样性的保护措施。故选B。
5.D
【解析】腐乳的制作过程中，起主要作用的是毛霉，A错误；传统发酵以混合菌种的固体发酵和半固体发酵为主，B错误；果酒制作过程中用体积分数为70%的酒精消毒，C错误。故选D。
6.C
【解析】应先清水冲洗再去除枝梗。故选C。
7.C
【解析】消毒只能杀死物体表面或内部的一部分微生物，A错误；耐高温且需保持干燥的物品，可用干热灭菌法进行灭菌，B错误；巴氏消毒法可杀死牛奶中的绝大多数微生物，并且基本不会破坏牛奶的营养成分，D错误。故选C。
8.A
【解析】培养基配方要经过反复实验才能确定。故选A。
9.C
【解析】单细胞蛋白不是从微生物细胞中提取的，而是微生物细胞本身。故选C。
10.C
【解析】诱导原生质体融合运用的原理是细胞膜的结构特性，A错误；愈伤组织再分化常添加生长素和细胞分裂素，B错误；去除细胞壁利用的是纤维素酶和果胶酶，D错误。故选C。
11.D
【解析】动物细胞培养时，5%CO2的作用是维持培养液pH。故选D。
12.D
【解析】抗体—药物偶联物中，特异性识别肿瘤细胞的是抗体，抗体起靶向运输的作用。故选D。
13.C
【解析】卵子不需要获能，A错误；精子获能是获得受精能力，不是获得能量，B错误；雌、雄原核的融合是受精完成的标志，不是开始的标志，两者的出现才是受精的标志，D错误。故选C。
14.B
【解析】滋养层细胞发育成胎膜和胎盘。故选B。
15.B
【解析】到桑葚胚的细胞没有分化，B错误。故选B。
16.B
【解析】不同限制酶可以切出相同的黏性末端，这样的酶称为同尾酶，A错误；质粒上的标记基因不是抗生素合成基因，而是抗生素的抗性基因，表达产物一般是分解抗生素的酶，C错误；T4DNA连接酶才可以连接平末端，D错误。故选B。
17.A
【解析】抗虫棉抗虫，不抗细菌、病毒，B错误；基因突变也可能使植物出现新基因，C错误；乳腺生物反应器的基因应导入动物受精卵，D错误。故选A。
18.D
【解析】步骤④是再分化的过程，不包括脱分化。故选D。
19.A
【解析】基因工程一般生产自然界存在的蛋白质，B错误；两个工程都是分子水平的操作，C错误；由于密码子的简并性，通过氨基酸序列推测出的DNA的碱基序列是非常多的，不是唯一的，D错误。故选A。
20.D
【解析】不能对蛋白质分子直接进行空间结构的改造。故选D。
21.B
【解析】发达国家经济发展快，人口增长慢，人均生态足迹不一定小，与人的消费水平、生活方式等有关。A错误；林地表示生产木材、纸浆等林木产品所需的林地面积，C错误；碳足迹要扣除海洋对碳的吸收量，D错误。故选B。
22.A
【解析】生物多样性的间接价值明显大于直接价值。故选A。
23.B
【解析】从亚硝酸盐的含量看，在发酵后期食用泡菜比较合适。故选B。
24.D
【解析】应待培养基冷却凝固后，再倒置培养皿，A错误；接种环灼烧后应在火焰旁冷却后再蘸取菌液，B错误；划线结束后也应灼烧接种环，以免污染环境和感染操作者，C错误。故选D。
25.B
【解析】酵母菌的代谢类型是兼性厌氧型，纤维素分解菌是原核生物，代谢类型是异养需氧型。故选B。26.D
【解析】杂种细胞脱分化形成愈伤组织，再分化出芽和根等，依次使用诱导愈伤组织的培养基、诱导生芽的培养基、诱导生根的培养基。生长素和细胞分裂素的比例有变化。故选D。
27.C
【解析】要筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞，利用抗原去检测，呈阳性的杂交瘤才是能产生特定抗体的。故选C。
28.C
【解析】限制酶识别切割一次DNA分子，能同时得到两个黏性末端。故选C。
29.B
【解析】启动子和终止子是转录的起点和终点，起始密码子和终止密码子是翻译的起点和终点。故选B。
30.D
【解析】如果两个引物序列是互补的，引物之间会形成双链，影响引物结合模板链。故选D。
31.
【解析】
（1）生活垃圾发酵处理可缩小该生态工程的生态足迹，生态足迹是指在现有技术条件下维持某一人口单位生存所需的生产资源和吸纳废物的土地及水域的面积。
（2）生态工程遵循的生态学原理包括整体、协调、循环、自生，在该案例中都有体现。生活垃圾和农林废物、禽畜粪便被再次利用，实现了能量的多级利用。
（3）生态工程以生态系统的自组织、自我调节功能为基础，是一类少消耗、多效益、可持续的工程体系。
32.
【解析】
（1）各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐等营养物质。在培养乳酸杆菌时，需要在培养基中添加维生素。
（2）统计活菌数的接种方法是稀释涂布平板法，统计结果一般比实际活菌数偏小，因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。稀释涂布平板法菌落的分布一般是随机分布的，如图A、B、D，而不会呈线型分布，如图C。
（3）第一次做实验，适当放宽稀释倍数进行平板培养，可保证选出菌落数为30~300的平板，这样计数的误差相对较小。计数时选取菌落数目稳定时的记录作为结果更准确。
33.
【解析】
（1）自然杂交是两植物通过受精作用完成的，形成二倍体，但是两个染色体组来自两个物种，在减数分裂形成配子时，这两个组的染色体联会紊乱，不能产生正常配子，高度不育。秋水仙素处理和低温处理可以使染色体加倍，但是在自然环境中的加倍因素最可能是低温，不是秋水仙素。
（2）①同上，形成的是异源三倍体，联会紊乱，高度不育。
②油菜AACC产生AC配子，多倍体AACCRR产生ACR配子，所以子代植物染色体组成是AACCR。因而产生的配子中染色体最少有19条，最多有28条，故该植株与油菜AACC杂交后，产生的BC2植株的染色体数目可能在38~47条之间。
34.
【解析】
（1）PCR技术扩增的是引物之间的DNA，所以要包括完整的目的基因，因此是根据目的基因两端的序列来设计特异性引物，引物之间的DNA才能扩增，所以合成的DNA分子比模板分子短。
（2）选择一种酶，只能选择EcRⅠ，只有该酶的识别序列在目的基因的两端都有，可以保证把目的基因切割下来，而且在质粒上的T-DNA上也有该酶的识别序列，保证了目的基因与载体的连接。选择PstⅠ和EcRI切割理由有三点：①可以在T-DNA内形成两个不同的黏性末端，这两个酶在目的基因两端也有识别序列，可以在目的基因两侧也切出两个不同的黏性末端，保证了目的基因在质粒上不会反向连接；②使得目的基因位于T-DNA内，保证了目的基因可以整合到受体细胞的染色体DNA上；③这两种酶切割后，使得潮霉素抗性基因丢失，重组质粒导入后细菌具有了四环素的抗性。如果未连接目的基因的空质粒进入细菌，会使得细菌出现两种抗性。所以可以通过细菌具有一种还是两种抗性来区别导入重组质粒和导入空质粒的两种受体细胞。
（3）用了上述两种酶后，抗四环素基因是完整的，使得受体细菌获得了抗四环素的能力。
（4）常用显微注射的方法将目的基因导入动物受精卵。
35.
【解析】
（1）要分离出目的菌，应用选择培养基，其特点就是以化合物X为唯一碳源，从而允许能利用化合物X的微生物生长，阻止其他种类微生物生长。
（2）目的菌数量不多，可利用液体培养基对目的菌进行扩大培养，以增加目的菌数目。振荡的目的就是摇匀目的菌和培养液，使目的菌与培养液充分接触，同时增加培养液中的溶氧量，有利于目的菌生长繁殖。获得纯净微生物培养物的关键是防止杂菌污染。
（3）基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做重组DNA技术。PCR是聚合酶链式反应的缩写，它是一项根据DNA半保留复制的原理，对目的基因进行大量复制的技术。