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河北省保定市部分高中2023-2024学年高二下学期4月期中生物试题
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这是一份河北省保定市部分高中2023-2024学年高二下学期4月期中生物试题，共10页。试卷主要包含了本试卷主要考试内容，DNA连接酶是“分子缝合针”等内容，欢迎下载使用。
本试卷满分100分，考试用时75分钟。
注意事项：
1.答题前，考生务必将自己的姓名、考生号、考场号、座位号填写在答题卡上。
2.回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。
3.考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。
4.本试卷主要考试内容：人教版选择性必修3。
一、单项选择题：本题共13小题，每小题2分，共26分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。
1.某同学把制酒产生的酒糟和水搅拌后，封存在缸中，一段时间后开缸，香气扑鼻，经检测，该过程中产生了醋。下列相关分析正确的是（ ）
A.产生醋的主要原因是把酒糟封存在缸中B.利用酒糟制成醋的本质是微生物将糖直接转为乙酸
C.发酵产生醋酸的菌种可能来源于空气中D.醋酸菌的最适生长温度为28℃
2.桂林豆腐乳历史悠久，颇负盛名，其制作流程包括磨浆、过滤、定型、压干、霉化、加盐腌制等。制出的豆腐乳块质地细滑松软，表面橙黄透明，味道鲜美奇香，可增进食欲，帮助消化。下列有关叙述正确的是（ ）
A.在腐乳制作过程中有能产生蛋白酶的微生物参与
B.腐乳发酵过程中有多种微生物的参与，起主要作用的是曲霉
C.家庭制作腐乳时，发酵过程的控制有严格标准
D.将豆腐块分层放入瓶中腌制时，随层数加高所加盐减少
3.泡菜腌制过程中会发生反硝化作用，在硝酸盐还原酶的作用下，硝酸盐转化成了亚硝酸盐。已知硝酸盐还原酶在pH为5.0左右时活性最高。某兴趣小组测定了不同盐浓度下泡菜制作过程中亚硝酸盐含量的变化情况，结果如图所示。下列叙述正确的是（ ）
A.亚硝酸盐是乳酸菌通过无氧呼吸产生的物质
B.5%盐浓度下，发酵后期pH下降，可能使硝酸盐还原酶的活性被抑制
C.在泡菜制作过程中，有机物种类和重量随天数增加而减少
D.据图可知，发酵5天左右，泡菜品质较好
4.下列关于微生物培养的基本操作技术的叙述，正确的是（ ）
A.牛肉膏蛋白胨培养基中牛肉膏和蛋白胨都提供了维生素
B.细菌的个体比酵母菌的小，不能用计数板进行观察计数
C.常用的灭菌方法有煮沸灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌
D.发酵生产中，谷氨酸棒状杆菌在中性、酸性、碱性条件下均易形成谷氨酸
5.利用某方法测定野生菌株B的数量，在同一稀释倍数下4个平板上均接种0.1mL样品溶液，菌落数分别为156、178、486、191，经计算得知每毫升原样品溶液中含有目的菌1.75×108个。该菌经人工诱变后，形成了某种氨基酸缺陷型菌株C和D，培养情况如表所示。下列叙述错误的是（ ）
A.据结果可推测，上述测定过程中样液稀释倍数为1×105倍
B.题中“某方法”可以是平板划线法和稀释涂布平板法
C.结果表明菌株C中可能是控制合成氨基酸甲相关酶的基因发生突变
D.结果表明菌株C可能为菌株D提供生长所需的氨基酸乙
6.DNA的粗提取与鉴定实验中，用于溶解DNA和鉴定DNA的物质分别是（ ）
A.体积分数为95%的冷酒精和二苯胺试剂B.2ml·L-1的NaCl溶液和体积分数为95%的冷酒精
C.2ml·L-1的NaCl溶液和二苯胺试剂D.研磨液和体积分数为95%的冷酒精
7.基因工程中，常用PCR特异性地快速扩增目的基因，PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程。下列有 关PCR的叙述，错误的是（ ）
A.DNA模板边解旋边合成子链B.PCR的缓冲液中一般要添加Mg2+
C.PCR需要DNA聚合酶但不需要解旋酶D.复性过程中引物会通过碱基互补配对与模板链结合
8.DNA连接酶是“分子缝合针”。下列关于DNA连接酶的叙述，正确的是（ ）
A.DNA连接酶能恢复被限制酶切开的磷酸二酯键和氢键
DNA 连接酶不具有专一性，T4 DNA连接酶具有专一性
DNA连接酶、T4 DNA连接酶都是从原核生物中分离得到的
DNA 连接酶只能将有互补黏性末端的两个DNA 片段连接起来
9.单克隆抗体能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，，并且可以大量制备，在多种疾病的诊断和病原体鉴定中发挥重要作用。制备单克隆抗体时，诱导细胞融合后还需要进行多次筛选，下列对相关原因的分析，不会理的是（ ）
A.骨髓瘤细胞与B淋巴细胞不一定都能融合成功
B.还存在骨髓瘤细胞间、B淋巴细胞间的融合
C.由于B淋巴细胞的差异，杂交瘤细胞产生的抗体不同
D.大多数杂交瘤细胞失去无限增殖的能力
10.AK、DHDPS是玉米中合成赖氨酸的两种关键酶，赖氨酸达到一定浓度就会与两种酶结合抑制它们的活性，如图所示，因此玉米中赖氨酸含量比较低。将AK中第352位苏氨酸变成异亮氨酸，DHDPS中第104位天冬酰胺变成异亮氨酸，该变化影响了其与赖氨酸的结合，使玉米叶片和种子内游离的赖氨酸分别提高5倍和2倍。下列有关分析错误的是（ ）
A.玉米中赖氨酸含量比较低与负反馈调节密切相关
B.要替换AK、DHDPS中的氨基酸需要通过改造相应基因来实现
C.改造后的AK和DHDPS 活性提高，导致玉米合成赖氨酸的能力增强
D.改造后的AK和DHDPS空间结构改变，与赖氨酸结合的能力降低
11.应用胚胎工程技术培育良种牛的过程如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A.过程①表示同期发情处理
B.过程②表示发情配种或人工授精
C.若过程③中再采用胚胎分割技术，则可得到遗传信息相同的后代
D.优良后代1、2的繁殖方式分别是有性生殖、无性生殖
12.病毒可以使人患病并危及生命安全，但合理利用病毒，也可以造福人类。下列有关病毒的应用实践，应当禁止的是（ ）
A.引入兔黏液瘤病毒控制野兔的数量以保护澳洲草原
B.在适当条件下用灭活的仙台病毒诱导动物细胞融合
C.将外源基因与噬菌体基因融合并使其表达以研究外源基因的功能
D.对流感病毒基因进行改造，使具有某种易感基因的人群感染这种病毒
13.ADC即抗体—药物偶联物，如图所示，其能精准定位肿瘤细胞释放高效细胞毒素。ADC药物不仅能准确识别靶点，而且对非癌细胞不造成影响，相较于其他化疗药物，ADC药物通过抗原、抗体特异性结合的方式大大提高了药效并减少了毒副作用。下列有关叙述正确的是（ ）
A.ADC由三部分组成，其中③代表细胞毒素物质
B.ADC通过自由扩散或者主动运输进入癌细胞
C.ADC的制备是在单克隆抗体制备的基础上实现的
D.ADC进入细胞后抗体会与靶细胞中的抗原结合
二、多项选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有两个或两个以上选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。
14.我国科考船采集了深海冷泉附近的沉积物样品，从中分离出微生物，并进一步研究了其生物学特性，以便更好地利用深海微生物，具体过程如图所示，图中Ⅰ～Ⅴ表示操作步骤。下列相关叙述错误的是（ ）
A.培养基①是液体培养基，培养基②是固体培养基
B.用平板划线法纯化菌种时，接种环的灼烧次数比划线次数多一次
C.若在培养过程中向培养基①内充满N2，则此时的培养基①是鉴别培养基
D.Ⅴ过程用稀释涂布平板法对微生物进行计数，结果会大于实际微生物数
15.生物技术的安全性和伦理问题是社会关注的热点。下列叙述正确的是（ ）
A.生物武器包括致病菌类、病毒类和生化毒剂类等
B.治疗性克隆是为了获得治疗所用的克隆个体，且需要严格的监管
C.“设计试管婴儿”与“试管婴儿”的主要区别在于前者需要进行遗传学诊断
D.转基因植物进人自然生态系统后可能因具有较强的“选择优势”而影响生物多样性
16.卡铂为一种广谱抗肿瘤药，其通过抑制DNA复制来起效。卡铂微溶于水，其在水溶液中不稳定，溶液中的CI-也会促进其分解。临床上用5%的葡萄糖溶液与卡铂制成试剂后用于注射治疗。某生物小组为验证卡铂试剂的作用，进行了如图所示的实验。下列说法错误的是（ ）
A.宫颈癌细胞培养过程中会出现贴壁生长及接触抑制现象
B.①组属于对照组，②组中的M可为5%葡萄糖溶液
C.培养宫颈癌细胞时的气体环境是95%的空气和5%的二氧化碳
D.本实验的预期结果为①组的癌细胞数目低于②或③组的
17.制备单克隆抗体的过程如图所示，所制得的抗体为鼠源性抗体。下列有关叙述正确的是（ ）
A.图中注射特定的抗原使小鼠产生体液免疫
B.图中B淋巴细胞分泌的抗体不一定都能特异性结合注射的抗原
C.图中获得的鼠源性抗体可直接与药物结合用于人体疾病的治疗
D.图中①过程获得的融合细胞培养时不一定都能无限增殖
18.PCR定点突变技术是一种基因工程技术，它可以通过人工合成的引物，使目标DNA序列发生特定的突变，从而实现对基因的精确编辑。PCR定点突变技术的过程如图所示（图中对应的字母为引物）。下列叙述错误的是（ ）
A.获得片段1所需要的引物为F和R m，且一次循环即得片段1
B.获得片段2所需要的引物为R和R m，且一次循环即得片段2
C.图中两种引物F m和R m之间，不能够进行碱基互补配对
D.图中PCR扩增所需要的引物F和R最好不配对
三、非选择题：本题共5小题，共59分。
19.（12分）利用微生物发酵制作酱油在我国具有悠久的历史。在古代，人们将大豆和盐混合并放置在陶罐里，经过一段时间的自然发酵，就酿造出酱油了。某企业通过发酵工程制作酱油的流程如图所示。回答下列问题：
（1）若是传统家庭制作酱油，则米曲霉可来自 。米曲霉的代谢类型为异养需氧型，因此在发酵过程中需要提供的条件是 。
（2）酱油发酵制作原理与腐乳制作原理相似，据图推测，该原理是米曲霉将发酵池中的蛋白质分解成 。
（3）从发酵产物的角度分析，在发酵池发酵阶段添加乳酸菌的作用是 （答出1点）。生产过程中发现发酵池表面会形成菌膜，推测该菌膜最可能由酵母菌等形成，而不是乳酸菌，理由是 。
（4）与传统家庭制作的酱油相比，该企业通过发酵工程制作的酱油的产量和质量明显提高，该过程的工程手段有 （答出2点）。
20.（12分）木材和树皮具有坚硬、不容易腐烂的特性，这与木材中的木质素有关。木质素是一类复杂的有机聚合物，是植物界中储量仅次于纤维素的第二大生物质资源。为了更好地利用木质素，科研人员从木材场土壤中筛选分离出木质素分解菌，实验流程如图所示。已知木质素能与苯胺蓝结合形成蓝色复合物。回答下列问题：
（1）为分离木质素分解菌，科研人员利用木材场土壤制得土壤浸出液，理由是 ，为保证每个菌落都是由一个单细胞发育而来的，图中进行的操作是 ， 图中土壤共稀释了 倍。
（2）图中所用培养基常用的灭菌方法为 ，为检测培养基灭菌是否彻底，应进行的操作是 。
（3）采用苯胺蓝培养基筛选木质素分解菌时，在适宜条件的恒温箱中培养得到了上图⑥中的菌落，推测⑥中含有不以木质素作为碳源的菌落，推测依据是 。⑥中菌落 （填数字）合成的木质素降解酶最多。
21.（11分）我国得到克隆猴的技术流程如图1所示。回答下列问题：
（1）通常通过显微操作处理进行“去核”，此处的“核”是指 ， “去核”的目的是 。
（2）胚胎移植前，还需要对代孕母猴进行激素处理，以保证胚胎能够继续发育，胚胎移植的实质是 。
（3）获得的克隆猴与胎猴样貌有一些差别，主要原因是 ，克隆猴的获得说明 具有全能性。
（4）体细胞克隆猴的技术难点之一是胚胎发育率低。上图中的Kdm4d为组蛋白去甲基化酶，科研人员为确定Kdm4d的mRNA的作用，进行了相关实验，其中A组用正常培养液培养重构胚，B组用正常培养液培养注入了Kdm4d的mRNA的重构胚，实验结果如下图所示。根据实验结果推测， Kdm4d的mRNA的作用机理是 。（ ）
22.（11分）紫草宁是从紫草细胞中提取的一种药物和色素，具有抗菌、消炎、抗肿瘤等活性。通过外植体培养后，可从紫草植株和细胞培养物中提取紫草宁，但从后者提取的效率更高。利用植物细胞培养生产的紫草宁是世界上首例药用植物细胞工程产品。回答下列问题：
（1）在离体条件下对单个细胞或细胞团进行培养使其增殖的技术称为 ；该技术对于社会、经济、环境保护具有重要意义，原因是 （答出2点）。
（2）过程②③的实质是 ；过程②中，诱导生根、诱导生芽的培养基中， 这两种激素用量的比值不同。
（3）在过程⑤中用射线照射悬浮细胞的目的是 。挑取单个细胞在相同条件下分别进行培养得到不同细胞系，测量并计算出每个细胞系紫草宁含有率（细胞收获量与紫草宁收获量的比值） ，细胞系紫草宁含有率 （填“高”或“低”）的细胞系是高产细胞株。
（4）在培养过程中，要不断通入无菌空气并进行搅拌，搅拌的作用有 和 。
23.（13分）研究者培育出了转K基因的植株。图1、图2分别表示在该培育过程中构建的含K基因的DNA片段和Ti质粒。回答下列问题：
（1）图中启动子的作用是 ，组成T-DNA的基本单位是 。为使K基因定向连接到质粒中，应选用的限制酶组合为 ，不选用EcRⅠ或NtⅠ的原因是 。
（2）引物的作用是 。扩增含K基因的DNA片段时，需要在PCR仪中加入的引物是 。
（3）培育转K基因植株的过程中， K基因导入植物细胞的方法是 法；由图可知，在培养该转基因植物时，为得到含K基因的愈伤组织，培养基中须加入 进行筛选。
高二年级下学期期中考试
生物学参考答案
1.C 【解析】醋酸菌是需氧型细菌，产生醋的主要原因不是把酒糟封存在缸中，A项错误。根据题干信息可知，醋酸菌可能将乙醇转为了乙酸，B项错误。多数醋酸菌的最适生长温度为30～35℃，D项错误。
2.A 【解析】腐乳发酵过程中有多种微生物的参与，起主要作用的是毛霉，B项错误。家庭制作腐乳时，没有严格标准，C项错误。因为瓶口受污染的概率更高，所以将豆腐块分层放入瓶中腌制时，随层数加高所加盐增多，有利于抑制微生物的繁殖，D项错误。
3.B 【解析】亚硝酸盐不是乳酸菌无氧呼吸的产物，A项错误。5%盐浓度下，发酵后期乳酸逐渐增多，pH下降，可能使硝酸盐还原酶的活性被抑制，使亚硝酸盐含量下降，B项正确。在泡菜制作过程中，有机物种类会增加，C项错误。据图可知，发酵5天左右，亚硝酸盐的含量较高，不适合食用，D项错误。
4.A 【解析】细菌可以利用细菌计数板计数，B项错误。煮沸是消毒，不是灭菌，C项错误。发酵生产中，谷氨酸棒状杆菌在中性和弱碱性条件下均易形成谷氨酸，D项错误。
5.B 【解析】统计的菌落数应介于30～300之间，故选择细菌菌落数为156、178和191的平板计数，每毫升原祥品溶液中的菌落数为（156+178+191）÷3÷0.1×稀释倍数=1.75X108个，因此稀释倍数为1×105。计数一般用稀释涂布平板法。B项符合题意。
6.C 【解析】DNA的粗提取与鉴定实验中，研磨液有利于充分研磨，DNA 不溶于酒精，能溶解DNA和鉴定DNA的物质分别是2 ml·L-1的NaCl溶液和二苯胺试剂，C项符合题意。
7.A 【解析】PCR过程中，DNA模板因变性而解旋后合成子链，A项错误。
8.D 【解析】被限制酶切开的是磷酸二酯键，A项错误。酶都具有专一性，B项错误。T4 DNA连接酶是从噬菌体中分离得到的，C项错误。
9.D 【解析】单克隆抗体制备过程中，由于细胞不一定都能融合成功，且融合过程是随机的，所以得到的细胞包括没有融合的细胞、同种细胞的融合细胞和杂交瘤细胞，因此需要通过筛选选出杂交瘤细胞。不同的杂交瘤细胞分泌的抗体存在差异，因此还需要通过筛选将能产生特定抗体的杂交瘤细胞选出。适宜的培养条件下，杂交瘤细胞通常都具有无限增殖的能力。D项符合题意。
10.C 【解析】由题可知，赖氨酸与AK、DHDPS结合，抑制它们的活性从而使反应速率下降，属于负反馈调节。改造AK和DHDPS可借助蛋白质工程技术。改造后的AK和DHDPS的空间结构改变，与赖氨酸结合的能力降低。C项符合题意。
11.D 【解析】优良后代1.2的繁殖过程都经历了受精作用，因此都是有性生殖，D项错误。
12.D 【解析】对流感病毒基因进行改造，使具有某种易感基因的人群感染这种病毒，这种被改造的病毒属于生物武器，应当禁止，D项符合题意。
13.C 【解析】③代表抗体，ADC通过胞吞进入细胞，抗体不会在细胞中与抗原结合。C项符合题意。
14.CD 【解析】培养基①是液体培养基，培养基②是固体培养基，A项正确。每次划线前后均需要对接种环进行灼烧，接种环的灼烧次数比划线次数多一次，B项正确。若在培养过程中向培养基①内充满N2，以N2为氮源，则此时的培养基①是选择培养基，C项错误。V过程用稀释涂布平板法对微生物进行计数，结果会小于实际微生物数，因为两个细菌连在一起，平板上看到的是一个菌落，D项错误。
15.ACD 【解析】治疗性克隆是为了获得治疗所用的克隆细胞或组织，而不是个体，B项错误。
16.AD 【解析】癌细胞能无限增殖，癌细胞培养过程中不会出现接触抑制现象，A项错误。本实验的预期结果为①组的癌细胞数目高于②或③组的，D项错误。
17.ABD 【解析】鼠源性抗体不可直接与药物结合用于人体疾病的治疗，C项错误。
18.ABC 【解析】根据图中信息可得，获得片段1所需要的引物为F和R_m，获得片段2所需要的引物为R和F_m，且两次循环才得片段1与片段2，A、B项错误。图中两种引物F_m和R_m之间，能够进行碱基互补配对，C项错误。F与R最好不能配对，若F与R配对，则会影响PCR扩增，D项正确。
19.（1）原材料中或者前一次发酵保存下来的发酵物中（答出1点给1分，2分）营养物（或有机物）和氧气（或空气）（2分）
（2）小分子肽和氨基酸（2分）
（3）无氧呼吸产生乳酸进而调节发酵液pH（或无氧呼吸产生乳酸进而调节酱油的风味或无氧呼吸产生乳酸抑制有害微生物生长）（2分）酵母 菌为兼性厌氧菌，乳酸菌为厌氧菌，发酵液表面氧气多，更适合酵母菌繁殖，不适合乳酸菌繁殖（2分）
（4）选择合适的菌种、发酵过程中的严格消毒、培养基物质的配比更科学、严格的发酵条件控制（合理即可，答出2点，2分）
【解析】若是传统家庭制作酱油，则米曲霉可来自原材料中或者前一次发酵保存下来的发酵物中。米曲霉的代谢类型为异养需氧型，因此在发酵过程中需要为米曲霉提供有机物和氧气。米曲霉分泌的蛋白酶可将发酵池中的蛋白质分解成小分子肽和氨基酸。与传统家庭制作相比，发酵工程可通过选择合适的菌种、发酵过程中严格消毒、选择科学的多种培养基物质的配比、严格控制发酵条件等措施来提高酱油的产量和质量。
20.（1）木材场土壤中木质素多，木质素分解菌的量相对更多（2分） 将浸出液（或将土壤悬浮液）梯度稀释（2分） 1×104（1分）
（2）高压蒸汽灭菌（或湿热灭菌）（2分） 设置空白培养基，放入恒温箱中培养， 观察是否产生菌落（2分）
（3）菌落5周围没有透明圈，若以木质素作为碳源，则不会出现菌落5（2分） 3（1分）
【解析】木材场土壤中木质素多，木质素分解菌的量更多，科研人员可从木材场土壤中获得木质素分解菌，图中利用了稀释涂布平板法分离、纯化木质素分解菌。木质素能与苯胺蓝结合形成蓝色复合物，培养基中的木质素分解菌落能分解木质素，在菌落周围会产生透明圈。菌落5周围没有透明圈，说明菌落5的微生物不是木质素分解菌，推测该微生物用了其他碳源。透明圈直径与菌落直径的比值越大，说明木质素分解菌分解木质素的能力越强。
21.（1）纺锤体—染色体的复合物（2分）保证染 色体（或核DNA）都来自体细胞（1分）
（2）早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移（2分）
（3）克隆猴有部分遗传物质来自卵母细胞的细胞质（2分）动物细胞细胞核（1分）
（4）通过翻译产生的去甲基化酶促进相关基因的表达，进而促进内细胞团和囊胚的形成（3分）
【解析】通过显微操作处理进行“去核”，此处“核”是指纺锤体—染色体的复合物，“去核”的目的是保证遗传物质几乎都来自体细胞。图中A组用正常培养液培养重构胚，B组用正常培养液培养注人了Kdm4d的mRNA的重构胚，结果为B组的囊胚形成率和内细胞团形成率高于A组的，推测Kdm4d的mRNA的作用机理是通过翻译产生的去甲基化酶促进相关基因的表达，进而促进内细胞团和囊胚的形成。
22.（1）植物细胞培养（1分） 不占 用耕地，几乎不受季节、天气等的限制（2分）
（2）基因选择性表达（1分） 生长素 和细胞分裂素（2分）
（3）诱导细胞产生突变（为培育高产细胞株提供选择材料）（2分） 低（1 分）
（4）增加溶氧量（1分） 使细胞与培养液充分接触，提高物质利用率（1分）
【解析】过程②③被称为再分化，再分化过程中细胞发生了分化，分化的实质是基因选择性表达，诱导生根、诱导生芽的培养基中，生长素和细胞分裂素的用量的比值不同。在过程⑤中用射线照射悬浮细胞的目的是诱导细胞产生突变，为培育高产细胞株提供选择材料；挑取单个细胞在相同条件下分别进行培养得到不同细胞系，因测量的是每个细胞系紫草宁含有率，即细胞收获量与紫草宁收获量的比值，紫草宁含有率低的细胞系是高产细胞株。
23.（1）驱动目的基因（或K基因）转录出mRNA（2分） 脱氧核苷酸（1 分） BamHⅠ和SacⅠ（2分） 若选用EcRⅠ或NtⅠ，则会破坏K基因（2分）
（2）使DNA聚合酶从引物的3＇端开始连接脱氧核苷酸（2分） 引物2和引物3（2分）
（3）农杆菌转化（1分） 潮霉素（1 分）
【解析】（1）启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动目的基因转录出mRNA，组成T-DNA的基本单位是脱氧核苷酸。为使K基因定向连接到质粒中，应选用的限制酶组合是BamHⅠ和SacⅠ ，若选用EcRⅠ或NtⅠ，则会破坏K基因，若选用Hind Ⅲ ，则会导致重组质粒中不含启动子。（2）引物的作用是使DNA聚合酶从引物的3＇端开始连接脱氧核苷酸。扩增含K基因的DNA片段时，需要在PCR仪中加入的引物是引物2和引物3。（3）卡那霉素抗性基因不能随T-DNA转入植物染色体；潮霉素抗性基因位于T-DNA，可随T-DNA转入植物染色体并表达。在培养该转基因植物时，为得到含K基因的愈伤组织，培养基中须加入潮霉素进行筛选。接种的菌种
一般培养基
实验处理和结果
野生菌株B
能生长
不处理
诱变菌株C
不生长
添加氨基酸甲，能生长
诱变菌株D
不生长
添加氨基酸乙，能生长
诱变菌株C+D
能生长
不添加氨基酸甲、乙，都能生长
本试卷满分100分，考试用时75分钟。
注意事项：
1.答题前，考生务必将自己的姓名、考生号、考场号、座位号填写在答题卡上。
2.回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。
3.考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。
4.本试卷主要考试内容：人教版选择性必修3。
一、单项选择题：本题共13小题，每小题2分，共26分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。
1.某同学把制酒产生的酒糟和水搅拌后，封存在缸中，一段时间后开缸，香气扑鼻，经检测，该过程中产生了醋。下列相关分析正确的是（ ）
A.产生醋的主要原因是把酒糟封存在缸中B.利用酒糟制成醋的本质是微生物将糖直接转为乙酸
C.发酵产生醋酸的菌种可能来源于空气中D.醋酸菌的最适生长温度为28℃
2.桂林豆腐乳历史悠久，颇负盛名，其制作流程包括磨浆、过滤、定型、压干、霉化、加盐腌制等。制出的豆腐乳块质地细滑松软，表面橙黄透明，味道鲜美奇香，可增进食欲，帮助消化。下列有关叙述正确的是（ ）
A.在腐乳制作过程中有能产生蛋白酶的微生物参与
B.腐乳发酵过程中有多种微生物的参与，起主要作用的是曲霉
C.家庭制作腐乳时，发酵过程的控制有严格标准
D.将豆腐块分层放入瓶中腌制时，随层数加高所加盐减少
3.泡菜腌制过程中会发生反硝化作用，在硝酸盐还原酶的作用下，硝酸盐转化成了亚硝酸盐。已知硝酸盐还原酶在pH为5.0左右时活性最高。某兴趣小组测定了不同盐浓度下泡菜制作过程中亚硝酸盐含量的变化情况，结果如图所示。下列叙述正确的是（ ）
A.亚硝酸盐是乳酸菌通过无氧呼吸产生的物质
B.5%盐浓度下，发酵后期pH下降，可能使硝酸盐还原酶的活性被抑制
C.在泡菜制作过程中，有机物种类和重量随天数增加而减少
D.据图可知，发酵5天左右，泡菜品质较好
4.下列关于微生物培养的基本操作技术的叙述，正确的是（ ）
A.牛肉膏蛋白胨培养基中牛肉膏和蛋白胨都提供了维生素
B.细菌的个体比酵母菌的小，不能用计数板进行观察计数
C.常用的灭菌方法有煮沸灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌
D.发酵生产中，谷氨酸棒状杆菌在中性、酸性、碱性条件下均易形成谷氨酸
5.利用某方法测定野生菌株B的数量，在同一稀释倍数下4个平板上均接种0.1mL样品溶液，菌落数分别为156、178、486、191，经计算得知每毫升原样品溶液中含有目的菌1.75×108个。该菌经人工诱变后，形成了某种氨基酸缺陷型菌株C和D，培养情况如表所示。下列叙述错误的是（ ）
A.据结果可推测，上述测定过程中样液稀释倍数为1×105倍
B.题中“某方法”可以是平板划线法和稀释涂布平板法
C.结果表明菌株C中可能是控制合成氨基酸甲相关酶的基因发生突变
D.结果表明菌株C可能为菌株D提供生长所需的氨基酸乙
6.DNA的粗提取与鉴定实验中，用于溶解DNA和鉴定DNA的物质分别是（ ）
A.体积分数为95%的冷酒精和二苯胺试剂B.2ml·L-1的NaCl溶液和体积分数为95%的冷酒精
C.2ml·L-1的NaCl溶液和二苯胺试剂D.研磨液和体积分数为95%的冷酒精
7.基因工程中，常用PCR特异性地快速扩增目的基因，PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程。下列有 关PCR的叙述，错误的是（ ）
A.DNA模板边解旋边合成子链B.PCR的缓冲液中一般要添加Mg2+
C.PCR需要DNA聚合酶但不需要解旋酶D.复性过程中引物会通过碱基互补配对与模板链结合
8.DNA连接酶是“分子缝合针”。下列关于DNA连接酶的叙述，正确的是（ ）
A.DNA连接酶能恢复被限制酶切开的磷酸二酯键和氢键
DNA 连接酶不具有专一性，T4 DNA连接酶具有专一性
DNA连接酶、T4 DNA连接酶都是从原核生物中分离得到的
DNA 连接酶只能将有互补黏性末端的两个DNA 片段连接起来
9.单克隆抗体能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，，并且可以大量制备，在多种疾病的诊断和病原体鉴定中发挥重要作用。制备单克隆抗体时，诱导细胞融合后还需要进行多次筛选，下列对相关原因的分析，不会理的是（ ）
A.骨髓瘤细胞与B淋巴细胞不一定都能融合成功
B.还存在骨髓瘤细胞间、B淋巴细胞间的融合
C.由于B淋巴细胞的差异，杂交瘤细胞产生的抗体不同
D.大多数杂交瘤细胞失去无限增殖的能力
10.AK、DHDPS是玉米中合成赖氨酸的两种关键酶，赖氨酸达到一定浓度就会与两种酶结合抑制它们的活性，如图所示，因此玉米中赖氨酸含量比较低。将AK中第352位苏氨酸变成异亮氨酸，DHDPS中第104位天冬酰胺变成异亮氨酸，该变化影响了其与赖氨酸的结合，使玉米叶片和种子内游离的赖氨酸分别提高5倍和2倍。下列有关分析错误的是（ ）
A.玉米中赖氨酸含量比较低与负反馈调节密切相关
B.要替换AK、DHDPS中的氨基酸需要通过改造相应基因来实现
C.改造后的AK和DHDPS 活性提高，导致玉米合成赖氨酸的能力增强
D.改造后的AK和DHDPS空间结构改变，与赖氨酸结合的能力降低
11.应用胚胎工程技术培育良种牛的过程如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A.过程①表示同期发情处理
B.过程②表示发情配种或人工授精
C.若过程③中再采用胚胎分割技术，则可得到遗传信息相同的后代
D.优良后代1、2的繁殖方式分别是有性生殖、无性生殖
12.病毒可以使人患病并危及生命安全，但合理利用病毒，也可以造福人类。下列有关病毒的应用实践，应当禁止的是（ ）
A.引入兔黏液瘤病毒控制野兔的数量以保护澳洲草原
B.在适当条件下用灭活的仙台病毒诱导动物细胞融合
C.将外源基因与噬菌体基因融合并使其表达以研究外源基因的功能
D.对流感病毒基因进行改造，使具有某种易感基因的人群感染这种病毒
13.ADC即抗体—药物偶联物，如图所示，其能精准定位肿瘤细胞释放高效细胞毒素。ADC药物不仅能准确识别靶点，而且对非癌细胞不造成影响，相较于其他化疗药物，ADC药物通过抗原、抗体特异性结合的方式大大提高了药效并减少了毒副作用。下列有关叙述正确的是（ ）
A.ADC由三部分组成，其中③代表细胞毒素物质
B.ADC通过自由扩散或者主动运输进入癌细胞
C.ADC的制备是在单克隆抗体制备的基础上实现的
D.ADC进入细胞后抗体会与靶细胞中的抗原结合
二、多项选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有两个或两个以上选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。
14.我国科考船采集了深海冷泉附近的沉积物样品，从中分离出微生物，并进一步研究了其生物学特性，以便更好地利用深海微生物，具体过程如图所示，图中Ⅰ～Ⅴ表示操作步骤。下列相关叙述错误的是（ ）
A.培养基①是液体培养基，培养基②是固体培养基
B.用平板划线法纯化菌种时，接种环的灼烧次数比划线次数多一次
C.若在培养过程中向培养基①内充满N2，则此时的培养基①是鉴别培养基
D.Ⅴ过程用稀释涂布平板法对微生物进行计数，结果会大于实际微生物数
15.生物技术的安全性和伦理问题是社会关注的热点。下列叙述正确的是（ ）
A.生物武器包括致病菌类、病毒类和生化毒剂类等
B.治疗性克隆是为了获得治疗所用的克隆个体，且需要严格的监管
C.“设计试管婴儿”与“试管婴儿”的主要区别在于前者需要进行遗传学诊断
D.转基因植物进人自然生态系统后可能因具有较强的“选择优势”而影响生物多样性
16.卡铂为一种广谱抗肿瘤药，其通过抑制DNA复制来起效。卡铂微溶于水，其在水溶液中不稳定，溶液中的CI-也会促进其分解。临床上用5%的葡萄糖溶液与卡铂制成试剂后用于注射治疗。某生物小组为验证卡铂试剂的作用，进行了如图所示的实验。下列说法错误的是（ ）
A.宫颈癌细胞培养过程中会出现贴壁生长及接触抑制现象
B.①组属于对照组，②组中的M可为5%葡萄糖溶液
C.培养宫颈癌细胞时的气体环境是95%的空气和5%的二氧化碳
D.本实验的预期结果为①组的癌细胞数目低于②或③组的
17.制备单克隆抗体的过程如图所示，所制得的抗体为鼠源性抗体。下列有关叙述正确的是（ ）
A.图中注射特定的抗原使小鼠产生体液免疫
B.图中B淋巴细胞分泌的抗体不一定都能特异性结合注射的抗原
C.图中获得的鼠源性抗体可直接与药物结合用于人体疾病的治疗
D.图中①过程获得的融合细胞培养时不一定都能无限增殖
18.PCR定点突变技术是一种基因工程技术，它可以通过人工合成的引物，使目标DNA序列发生特定的突变，从而实现对基因的精确编辑。PCR定点突变技术的过程如图所示（图中对应的字母为引物）。下列叙述错误的是（ ）
A.获得片段1所需要的引物为F和R m，且一次循环即得片段1
B.获得片段2所需要的引物为R和R m，且一次循环即得片段2
C.图中两种引物F m和R m之间，不能够进行碱基互补配对
D.图中PCR扩增所需要的引物F和R最好不配对
三、非选择题：本题共5小题，共59分。
19.（12分）利用微生物发酵制作酱油在我国具有悠久的历史。在古代，人们将大豆和盐混合并放置在陶罐里，经过一段时间的自然发酵，就酿造出酱油了。某企业通过发酵工程制作酱油的流程如图所示。回答下列问题：
（1）若是传统家庭制作酱油，则米曲霉可来自 。米曲霉的代谢类型为异养需氧型，因此在发酵过程中需要提供的条件是 。
（2）酱油发酵制作原理与腐乳制作原理相似，据图推测，该原理是米曲霉将发酵池中的蛋白质分解成 。
（3）从发酵产物的角度分析，在发酵池发酵阶段添加乳酸菌的作用是 （答出1点）。生产过程中发现发酵池表面会形成菌膜，推测该菌膜最可能由酵母菌等形成，而不是乳酸菌，理由是 。
（4）与传统家庭制作的酱油相比，该企业通过发酵工程制作的酱油的产量和质量明显提高，该过程的工程手段有 （答出2点）。
20.（12分）木材和树皮具有坚硬、不容易腐烂的特性，这与木材中的木质素有关。木质素是一类复杂的有机聚合物，是植物界中储量仅次于纤维素的第二大生物质资源。为了更好地利用木质素，科研人员从木材场土壤中筛选分离出木质素分解菌，实验流程如图所示。已知木质素能与苯胺蓝结合形成蓝色复合物。回答下列问题：
（1）为分离木质素分解菌，科研人员利用木材场土壤制得土壤浸出液，理由是 ，为保证每个菌落都是由一个单细胞发育而来的，图中进行的操作是 ， 图中土壤共稀释了 倍。
（2）图中所用培养基常用的灭菌方法为 ，为检测培养基灭菌是否彻底，应进行的操作是 。
（3）采用苯胺蓝培养基筛选木质素分解菌时，在适宜条件的恒温箱中培养得到了上图⑥中的菌落，推测⑥中含有不以木质素作为碳源的菌落，推测依据是 。⑥中菌落 （填数字）合成的木质素降解酶最多。
21.（11分）我国得到克隆猴的技术流程如图1所示。回答下列问题：
（1）通常通过显微操作处理进行“去核”，此处的“核”是指 ， “去核”的目的是 。
（2）胚胎移植前，还需要对代孕母猴进行激素处理，以保证胚胎能够继续发育，胚胎移植的实质是 。
（3）获得的克隆猴与胎猴样貌有一些差别，主要原因是 ，克隆猴的获得说明 具有全能性。
（4）体细胞克隆猴的技术难点之一是胚胎发育率低。上图中的Kdm4d为组蛋白去甲基化酶，科研人员为确定Kdm4d的mRNA的作用，进行了相关实验，其中A组用正常培养液培养重构胚，B组用正常培养液培养注入了Kdm4d的mRNA的重构胚，实验结果如下图所示。根据实验结果推测， Kdm4d的mRNA的作用机理是 。（ ）
22.（11分）紫草宁是从紫草细胞中提取的一种药物和色素，具有抗菌、消炎、抗肿瘤等活性。通过外植体培养后，可从紫草植株和细胞培养物中提取紫草宁，但从后者提取的效率更高。利用植物细胞培养生产的紫草宁是世界上首例药用植物细胞工程产品。回答下列问题：
（1）在离体条件下对单个细胞或细胞团进行培养使其增殖的技术称为 ；该技术对于社会、经济、环境保护具有重要意义，原因是 （答出2点）。
（2）过程②③的实质是 ；过程②中，诱导生根、诱导生芽的培养基中， 这两种激素用量的比值不同。
（3）在过程⑤中用射线照射悬浮细胞的目的是 。挑取单个细胞在相同条件下分别进行培养得到不同细胞系，测量并计算出每个细胞系紫草宁含有率（细胞收获量与紫草宁收获量的比值） ，细胞系紫草宁含有率 （填“高”或“低”）的细胞系是高产细胞株。
（4）在培养过程中，要不断通入无菌空气并进行搅拌，搅拌的作用有 和 。
23.（13分）研究者培育出了转K基因的植株。图1、图2分别表示在该培育过程中构建的含K基因的DNA片段和Ti质粒。回答下列问题：
（1）图中启动子的作用是 ，组成T-DNA的基本单位是 。为使K基因定向连接到质粒中，应选用的限制酶组合为 ，不选用EcRⅠ或NtⅠ的原因是 。
（2）引物的作用是 。扩增含K基因的DNA片段时，需要在PCR仪中加入的引物是 。
（3）培育转K基因植株的过程中， K基因导入植物细胞的方法是 法；由图可知，在培养该转基因植物时，为得到含K基因的愈伤组织，培养基中须加入 进行筛选。
高二年级下学期期中考试
生物学参考答案
1.C 【解析】醋酸菌是需氧型细菌，产生醋的主要原因不是把酒糟封存在缸中，A项错误。根据题干信息可知，醋酸菌可能将乙醇转为了乙酸，B项错误。多数醋酸菌的最适生长温度为30～35℃，D项错误。
2.A 【解析】腐乳发酵过程中有多种微生物的参与，起主要作用的是毛霉，B项错误。家庭制作腐乳时，没有严格标准，C项错误。因为瓶口受污染的概率更高，所以将豆腐块分层放入瓶中腌制时，随层数加高所加盐增多，有利于抑制微生物的繁殖，D项错误。
3.B 【解析】亚硝酸盐不是乳酸菌无氧呼吸的产物，A项错误。5%盐浓度下，发酵后期乳酸逐渐增多，pH下降，可能使硝酸盐还原酶的活性被抑制，使亚硝酸盐含量下降，B项正确。在泡菜制作过程中，有机物种类会增加，C项错误。据图可知，发酵5天左右，亚硝酸盐的含量较高，不适合食用，D项错误。
4.A 【解析】细菌可以利用细菌计数板计数，B项错误。煮沸是消毒，不是灭菌，C项错误。发酵生产中，谷氨酸棒状杆菌在中性和弱碱性条件下均易形成谷氨酸，D项错误。
5.B 【解析】统计的菌落数应介于30～300之间，故选择细菌菌落数为156、178和191的平板计数，每毫升原祥品溶液中的菌落数为（156+178+191）÷3÷0.1×稀释倍数=1.75X108个，因此稀释倍数为1×105。计数一般用稀释涂布平板法。B项符合题意。
6.C 【解析】DNA的粗提取与鉴定实验中，研磨液有利于充分研磨，DNA 不溶于酒精，能溶解DNA和鉴定DNA的物质分别是2 ml·L-1的NaCl溶液和二苯胺试剂，C项符合题意。
7.A 【解析】PCR过程中，DNA模板因变性而解旋后合成子链，A项错误。
8.D 【解析】被限制酶切开的是磷酸二酯键，A项错误。酶都具有专一性，B项错误。T4 DNA连接酶是从噬菌体中分离得到的，C项错误。
9.D 【解析】单克隆抗体制备过程中，由于细胞不一定都能融合成功，且融合过程是随机的，所以得到的细胞包括没有融合的细胞、同种细胞的融合细胞和杂交瘤细胞，因此需要通过筛选选出杂交瘤细胞。不同的杂交瘤细胞分泌的抗体存在差异，因此还需要通过筛选将能产生特定抗体的杂交瘤细胞选出。适宜的培养条件下，杂交瘤细胞通常都具有无限增殖的能力。D项符合题意。
10.C 【解析】由题可知，赖氨酸与AK、DHDPS结合，抑制它们的活性从而使反应速率下降，属于负反馈调节。改造AK和DHDPS可借助蛋白质工程技术。改造后的AK和DHDPS的空间结构改变，与赖氨酸结合的能力降低。C项符合题意。
11.D 【解析】优良后代1.2的繁殖过程都经历了受精作用，因此都是有性生殖，D项错误。
12.D 【解析】对流感病毒基因进行改造，使具有某种易感基因的人群感染这种病毒，这种被改造的病毒属于生物武器，应当禁止，D项符合题意。
13.C 【解析】③代表抗体，ADC通过胞吞进入细胞，抗体不会在细胞中与抗原结合。C项符合题意。
14.CD 【解析】培养基①是液体培养基，培养基②是固体培养基，A项正确。每次划线前后均需要对接种环进行灼烧，接种环的灼烧次数比划线次数多一次，B项正确。若在培养过程中向培养基①内充满N2，以N2为氮源，则此时的培养基①是选择培养基，C项错误。V过程用稀释涂布平板法对微生物进行计数，结果会小于实际微生物数，因为两个细菌连在一起，平板上看到的是一个菌落，D项错误。
15.ACD 【解析】治疗性克隆是为了获得治疗所用的克隆细胞或组织，而不是个体，B项错误。
16.AD 【解析】癌细胞能无限增殖，癌细胞培养过程中不会出现接触抑制现象，A项错误。本实验的预期结果为①组的癌细胞数目高于②或③组的，D项错误。
17.ABD 【解析】鼠源性抗体不可直接与药物结合用于人体疾病的治疗，C项错误。
18.ABC 【解析】根据图中信息可得，获得片段1所需要的引物为F和R_m，获得片段2所需要的引物为R和F_m，且两次循环才得片段1与片段2，A、B项错误。图中两种引物F_m和R_m之间，能够进行碱基互补配对，C项错误。F与R最好不能配对，若F与R配对，则会影响PCR扩增，D项正确。
19.（1）原材料中或者前一次发酵保存下来的发酵物中（答出1点给1分，2分）营养物（或有机物）和氧气（或空气）（2分）
（2）小分子肽和氨基酸（2分）
（3）无氧呼吸产生乳酸进而调节发酵液pH（或无氧呼吸产生乳酸进而调节酱油的风味或无氧呼吸产生乳酸抑制有害微生物生长）（2分）酵母 菌为兼性厌氧菌，乳酸菌为厌氧菌，发酵液表面氧气多，更适合酵母菌繁殖，不适合乳酸菌繁殖（2分）
（4）选择合适的菌种、发酵过程中的严格消毒、培养基物质的配比更科学、严格的发酵条件控制（合理即可，答出2点，2分）
【解析】若是传统家庭制作酱油，则米曲霉可来自原材料中或者前一次发酵保存下来的发酵物中。米曲霉的代谢类型为异养需氧型，因此在发酵过程中需要为米曲霉提供有机物和氧气。米曲霉分泌的蛋白酶可将发酵池中的蛋白质分解成小分子肽和氨基酸。与传统家庭制作相比，发酵工程可通过选择合适的菌种、发酵过程中严格消毒、选择科学的多种培养基物质的配比、严格控制发酵条件等措施来提高酱油的产量和质量。
20.（1）木材场土壤中木质素多，木质素分解菌的量相对更多（2分） 将浸出液（或将土壤悬浮液）梯度稀释（2分） 1×104（1分）
（2）高压蒸汽灭菌（或湿热灭菌）（2分） 设置空白培养基，放入恒温箱中培养， 观察是否产生菌落（2分）
（3）菌落5周围没有透明圈，若以木质素作为碳源，则不会出现菌落5（2分） 3（1分）
【解析】木材场土壤中木质素多，木质素分解菌的量更多，科研人员可从木材场土壤中获得木质素分解菌，图中利用了稀释涂布平板法分离、纯化木质素分解菌。木质素能与苯胺蓝结合形成蓝色复合物，培养基中的木质素分解菌落能分解木质素，在菌落周围会产生透明圈。菌落5周围没有透明圈，说明菌落5的微生物不是木质素分解菌，推测该微生物用了其他碳源。透明圈直径与菌落直径的比值越大，说明木质素分解菌分解木质素的能力越强。
21.（1）纺锤体—染色体的复合物（2分）保证染 色体（或核DNA）都来自体细胞（1分）
（2）早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移（2分）
（3）克隆猴有部分遗传物质来自卵母细胞的细胞质（2分）动物细胞细胞核（1分）
（4）通过翻译产生的去甲基化酶促进相关基因的表达，进而促进内细胞团和囊胚的形成（3分）
【解析】通过显微操作处理进行“去核”，此处“核”是指纺锤体—染色体的复合物，“去核”的目的是保证遗传物质几乎都来自体细胞。图中A组用正常培养液培养重构胚，B组用正常培养液培养注人了Kdm4d的mRNA的重构胚，结果为B组的囊胚形成率和内细胞团形成率高于A组的，推测Kdm4d的mRNA的作用机理是通过翻译产生的去甲基化酶促进相关基因的表达，进而促进内细胞团和囊胚的形成。
22.（1）植物细胞培养（1分） 不占 用耕地，几乎不受季节、天气等的限制（2分）
（2）基因选择性表达（1分） 生长素 和细胞分裂素（2分）
（3）诱导细胞产生突变（为培育高产细胞株提供选择材料）（2分） 低（1 分）
（4）增加溶氧量（1分） 使细胞与培养液充分接触，提高物质利用率（1分）
【解析】过程②③被称为再分化，再分化过程中细胞发生了分化，分化的实质是基因选择性表达，诱导生根、诱导生芽的培养基中，生长素和细胞分裂素的用量的比值不同。在过程⑤中用射线照射悬浮细胞的目的是诱导细胞产生突变，为培育高产细胞株提供选择材料；挑取单个细胞在相同条件下分别进行培养得到不同细胞系，因测量的是每个细胞系紫草宁含有率，即细胞收获量与紫草宁收获量的比值，紫草宁含有率低的细胞系是高产细胞株。
23.（1）驱动目的基因（或K基因）转录出mRNA（2分） 脱氧核苷酸（1 分） BamHⅠ和SacⅠ（2分） 若选用EcRⅠ或NtⅠ，则会破坏K基因（2分）
（2）使DNA聚合酶从引物的3＇端开始连接脱氧核苷酸（2分） 引物2和引物3（2分）
（3）农杆菌转化（1分） 潮霉素（1 分）
【解析】（1）启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动目的基因转录出mRNA，组成T-DNA的基本单位是脱氧核苷酸。为使K基因定向连接到质粒中，应选用的限制酶组合是BamHⅠ和SacⅠ ，若选用EcRⅠ或NtⅠ，则会破坏K基因，若选用Hind Ⅲ ，则会导致重组质粒中不含启动子。（2）引物的作用是使DNA聚合酶从引物的3＇端开始连接脱氧核苷酸。扩增含K基因的DNA片段时，需要在PCR仪中加入的引物是引物2和引物3。（3）卡那霉素抗性基因不能随T-DNA转入植物染色体；潮霉素抗性基因位于T-DNA，可随T-DNA转入植物染色体并表达。在培养该转基因植物时，为得到含K基因的愈伤组织，培养基中须加入潮霉素进行筛选。接种的菌种
一般培养基
实验处理和结果
野生菌株B
能生长
不处理
诱变菌株C
不生长
添加氨基酸甲，能生长
诱变菌株D
不生长
添加氨基酸乙，能生长
诱变菌株C+D
能生长
不添加氨基酸甲、乙，都能生长
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