高考生物复习选择性必修三第十单元第33讲微生物的培养技术及应用课件

这是一份高考生物复习选择性必修三第十单元第33讲微生物的培养技术及应用课件，共60页。PPT课件主要包含了续上表，倒平板的操作步骤，④计算公式，2实验流程，微生物筛选的方法，微生物的鉴别方法，答案B等内容，欢迎下载使用。

第33讲　微生物的培养技术及应用【课标要求】　1.阐明在发酵工程中灭菌是获得纯净的微生物培养物的前提。2.阐明无菌技术是在操作过程中，保持无菌物品与无菌区域不被微生物污染的技术。3.举例说明通过调整培养基的配方可有目的地培养某种微生物。4.概述平板划线法和稀释涂布平板法是实验室中进行微生物分离和纯化的常用方法。5.概述稀释涂布平板法和显微镜计数法是测定微生物数量的常用方法。6.活动：通过配制培养基、灭菌、接种和培养等实验操作获得纯化的酵母菌菌落。7.活动：分离土壤中分解尿素的细菌，并进行计数。
考点一　微生物的基本培养技术
1．培养基的配制(1)概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。(2)用途：用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。(3)营养组成。①一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等。
②需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O2的需求。
(4)类型。①按物理状态可分为液体培养基和固体培养基。
②按功能或用途可分为选择培养基和鉴别培养基。
提醒：(1)常见选择培养基举例。①缺少氮源的培养基可以筛选能利用大气中N2的微生物。②含青霉素的培养基可淘汰细菌，筛选出真菌。③无有机碳源的培养基可筛选出自养微生物。(2)几种微生物的营养和能量来源。
2.无菌技术(1)含义：在培养微生物的操作中，用来防止杂菌污染的方法。(2)目的：获得纯净的培养物。(3)消毒与灭菌的比较。
提醒：①用酒精消毒时，体积分数为70%的酒精消毒效果最好，原因是浓度过高，菌体表面蛋白质凝固形成一层保护膜，酒精不能渗入其中；浓度过低，杀菌力减弱。②接种室、接种箱或超净工作台在使用前可以用紫外线照射30 min，以杀死物体表面或空气中的微生物。在照射前，适量喷洒石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液，可以加强消毒效果。③芽孢是某些细菌生长到一定阶段，在细胞内形成的休眠体。孢子是某些微生物的繁殖体。
(4)常见灭菌方法在操作中的注意事项。
提醒：选择无菌技术的原则：一要考虑无菌技术的效果，灭菌的效果比消毒要好；二要考虑操作对象的承受能力，活体生物材料、操作者的手等只能采用消毒，而不能用灭菌。(5)其他操作。①做好消毒和灭菌工作后，要注意避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触。②为了避免周围环境中微生物的污染，接下来的许多操作都应在超净工作台上并在酒精灯火焰附近进行。
3．微生物的纯培养(1)概念辨析。
(2)接种方法：平板划线法和稀释涂布平板法。(3)纯培养步骤：配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等。
(4)酵母菌纯培养的操作步骤。
1．自养型微生物与异养型微生物的区别(1)划分自养型微生物与异养型微生物的主要依据是能否以CO2作为碳源。需根据微生物的代谢特点去选择相应的培养基。如自养型微生物可以利用空气中的CO2，因此缺碳源培养基可以培养自养型微生物。(2)自养型微生物所需的碳源、氮源来自含碳、含氮的无机物，而异养型微生物需要的碳源、氮源来自含碳、含氮的有机物，因此可根据培养基中的营养物质判断微生物的代谢类型。含氮无机物不但能给自养型微生物提供氮源，也能作为能源物质提供能量，如NH3既能为硝化细菌提供氮源，也能作为能源物质。
注意事项：(1)培养基要冷却到50 ℃左右时开始倒平板。温度过高会烫手，过低培养基又会凝固。(2)要使锥形瓶的瓶口通过酒精灯火焰。通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。
(3)倒平板时，要用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，不要完全打开，以免杂菌污染培养基。(4)平板冷凝后，要将平板倒置。因为平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，平板倒置后，既可避免培养基表面的水分过快地挥发，又可防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。(5)在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，那么这个平板不能用来培养微生物。因为空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。(6)整个操作过程要在酒精灯火焰旁进行，避免杂菌污染。
3．平板划线法操作步骤
(1)实验成功关键点。①第一次划线及每次划线之前都需灼烧接种环灭菌，划线操作结束仍需灼烧接种环。②灼烧接种环之后，要等其冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。③在作第二次以及其后的划线操作时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样才能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终得到由单个细菌繁殖而来的菌落。④划线时最后一区域不要与第一区域相连。⑤划线用力大小要适当，防止用力过大将培养基划破。
(2)平板划线中几次灼烧接种环的目的。
考向1　结合培养基的配制、无菌技术及其应用，考查科学思维1．(2022·广东深圳)米诺环素(分子式：C23H27N3O7)是一种四环素类抗生素，应用于人类疾病治疗和畜禽养殖。由于进入人体或动物体内不能完全被吸收，造成其在环境中残留。某研究人员在自然水域中筛选和分离得到了一种米诺环素高效降解菌DM13，并展开相关研究。下表是研究过程中使用的培养基种类及配方，回答下列问题：
(1)分离微生物前，可通过选择培养来增加米诺环素降解菌的浓度，需在BP培养基中添加一定浓度的____________________，该物质同时提供微生物生长需要的______________。(2)选择培养得到的微生物样品先稀释，再涂布到______(填“BP”“BPA”或“MM”)培养基的平板进行培养。如果水样中降解米诺环素的微生物数量较少，为了避免分离筛选失败，可采取的措施是________________________________________________________________________________________________________ (回答1点)。
(3)为了测定菌株DM13在自然水体中降解米诺环素的效果，在锥形瓶中用自然水体配制四种不同初始浓度的米诺环素溶液，进行实验。①8 h处理后，在米诺环素溶液初始浓度100 μg/L的水体中，空白对照测得的米诺环素溶液浓度41.8 μg/L，加入菌株DM13测得的浓度24.3 μg/L，相较空白对照组，米诺环素降解菌的降解率为__________________________________。②为了测定菌株DM13的实际降解效果，可选择表中的MM培养基替换自然水体，这样做的目的是________________________________________________________________________________________________________________________________。
解析：(1)分离微生物前，可通过选择培养来增加米诺环素降解菌的浓度，需在BP培养基中添加一定浓度的米诺环素溶液，以提供选择培养的条件，该物质中含有碳元素和氮元素，因而可同时提供微生物生长需要的碳源和氮源。(2)选择培养得到的微生物样品先稀释，再涂布到BPA培养基的平板进行培养，因为该培养基是固体培养基，且其中含有微生物生长所需的碳源和氮源。如果水样中降解米诺环素的微生物数量较少，可能导致实验失败，为了避免分离筛选失败，可把各种稀释倍数的溶液都涂布到平板进行培养，增加重复平板的数量，从而可分离得到相应的单菌落。(3)本实验的目的是测定菌株DM13在自然水体中降解米诺环素的效果，因而设计在锥形瓶中用自然水体配制四种不同初始浓度的米诺环素溶液，进行实验。①8h处理后，在米诺环素溶液初始浓度100 μg/L的水体中，空白对照测得的米诺环素溶液浓度41.8 μg/L，加入菌株DM13测得的浓度24.3 μg/L，相较空白对照组，
考向2　结合微生物的纯培养及其应用，考查科学探究2．(2022·广东韶关二模)海洋塑料垃圾每年造成数十万海洋动物死亡，其中聚乙烯(PE)塑料因缺乏有效降解的微生物和酶类而难以降解，危害巨大。2021年，中科院海洋所首次发现能有效降解PE塑料的海洋微生物菌群。(1)要获得能有效降解PE塑料的海洋微生物菌群，应选择__________________的环境进行筛选。(2)研究人员利用______________________法纯化降解PE塑料的微生物菌群，使其生长出单个菌落，然后根据菌落的___________________________________(至少写出两种)等来进行初步区分，从中获得了3株能稳定降解PE塑料的菌种P1、P2和P3。(3)研究人员将红色PE塑料粉碎成粉末，均匀混合在无碳固体培养基中，之后再接种经过稀释的三种菌液，一段时间后可测得透明圈大小(D)与菌圈大小(d)(如右图所示)。如使用单一菌种进行扩大培养，应选用__________菌种，理由是__________________________________________________________________________________。
(4)与传统填埋、焚烧相比，该微生物菌群对PE塑料的降解具有__________________的优点。
考点二　微生物的选择培养和计数
1．微生物筛选的原理人为提供有利于目的菌生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物的生长，即根据不同微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性不同而制备培养基。2．选择培养基(1)概念：指在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。(2)举例：筛选土壤中分解尿素的细菌的选择培养基是以尿素为唯一氮源，按物理性质归类为固体培养基。
提醒：常见选择培养基举例：①缺少氮源的培养基可以筛选自生固氮微生物。②含青霉素的培养基可抑制细菌，筛选出真菌。③无有机碳源的培养基可筛选出自养微生物。④将培养基放在高温环境中培养，可分离出耐高温的微生物。3．微生物的选择培养——稀释涂布平板法(1)系列梯度稀释操作：常用于将细胞接种到培养基之前，通过液体稀释的方法分散细胞，随着稀释程度的增大，单位体积中的微生物细胞数量减少，细胞得以分散。操作步骤：取1 mL上清液加入盛有9 mL无菌水的试管中，依次等比稀释。
(2)涂布平板操作步骤。
(3)培养：待涂布的菌液被培养基吸收后，将平板倒置，放入30～37 ℃的恒温培养箱中培养1～2 d。(4)结果：可观察到分离的单菌落。4．微生物的数量测定微生物的计数方法有显微镜直接计数法和活菌计数法。(1)稀释涂布平板法——活菌计数法(间接计数法)。①计数原理：培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。所以统计结果一般用菌落数代表活菌数。②计数标准：一般选择菌落数为30～300的平板进行计数。③计数方法：在同一稀释度下，至少应将3个平板作为重复组进行重复计数，然后求出平均值，以增强实验的说服力与准确性。
⑤计数误差：当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，所以计数结果一般比实际活菌数目少。样品的稀释度将直接影响平板上的菌落数目，如果平板上菌落数目过多，应该进一步稀释再重复实验。
(2)显微镜直接计数法。
5．土壤中分解尿素的细菌的分离与计数(1)实验原理。
(3)实验结果分析与评价。
6．分解纤维素的微生物的分离(1)分离方法与原理。
(2)纤维素分解菌的培养基成分及鉴定原理。
1．区分选择培养基与鉴别培养基
2.两种纯培养方法的比较
提醒：微生物分离与计数实验中对照组的设置及作用①判断培养基中“是否被杂菌污染”，需将未接种的培养基同时进行培养。②判断选择培养基“是否具有选择作用”，需设置牛肉膏蛋白胨培养基进行接种后培养，观察两种培养基上菌落数目，进行对比得出结论。
5.设置对照和重复实验
6.选择培养基四种常见制备方法或实例(1)加入某些特定的物质(前提是培养基具备全部营养成分)。
(2)改变培养基的营养成分。
(3)利用培养基“特定化学成分”分离。
(4)通过某些“特殊环境”分离。
考向1　结合选择培养基及其应用，考查科学探究1．(2022·华南师大附中)我国规定每升饮用水中大肠杆菌不能超过3个。某兴趣小组尝试对某品牌饮用水的大肠杆菌含量进行检测，操作简图如图甲，伊红亚甲蓝培养基配方如图乙。
回答下列相关问题：(1)图甲中滤膜的孔径应________(填“大于”或“小于”)大肠杆菌。受此启发，对某些不耐高温的试剂可以怎样除菌？______________________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)配制图乙中的基础培养基时，除了水分、无机盐以外，还应加入________(一种营养成分)以及________。伊红亚甲蓝培养基上生长的大肠杆菌菌落呈现深紫色，从功能上划分，该培养基属于________培养基。(3)该小组通过统计________的数目，计算出单位体积样品中大肠杆菌数目。理论上他们的统计值要比实际________(填“偏高”或“偏低”)，理由是：_________________________________________________________________________________。
解析：(1)实验将待测水样进行过滤，用得到的滤膜进行微生物培养，因此水中的大肠杆菌应留在滤膜上，即图甲中滤膜的孔径应小于大肠杆菌。受此启发，对某些不耐高温的试剂可以用滤膜过滤除菌。(2)鉴别培养基是固体培养基，必须加入凝固剂琼脂，图中乳糖为碳源，因此培养基中还应该加入氮源。(3)在伊红亚甲蓝培养基上，可以鉴定出菌落为深紫色的具有金属光泽的大肠杆菌，因此该小组通过统计深紫色菌落的数目，计算出单位体积样品中大肠杆菌数目，由于培养基中两个或多个大肠杆菌连在一起时，平板上只能观察到1个菌落，因此理论上他们的统计值比实际值偏低。
答案：(1)小于　用滤膜过滤除菌(2)氮源　琼脂　鉴别(3)深紫色菌落　偏低　两个或多个大肠杆菌连在一起时，平板上只能观察到1个菌落
考向2　围绕微生物的接种和分离，考查科学探究2．(2022·广东汕头一中)酱油主要是用黄豆、小麦作为原料，经多种微生物的联合作用酿制而成的，内含氨基酸、糖类等多种营养物质。这些营养物质易被多种微生物利用，尤其是在夏季气温高时极易发生胀袋，给产品品质造成巨大影响。实验小组从某品牌胀袋酱油中筛选出两株能引起胀袋的产气菌株。回答下列问题：(1)为了筛选引起胀袋的产气菌株，实验人员准备了三个平板甲、乙和丙，并向甲平板中接种了适量的胀袋酱油，乙平板中接种等量的无菌水，丙平板中应接种______________________________，然后对比上述____________两个平板分离出的菌落形态，将形态不同的被怀疑是产气微生物的菌株进行分离。(2)该实验小组筛选出了四株被怀疑是产气微生物的菌株(Z1、Z2、Z3、Z4)，他们可采用______________________来接种这些菌株；Z1、Z2、Z3、Z4的菌落形态不同，实验室区别菌落的特征包括________________________(答出3点)，筛选的菌株一般置于_____________中临时保藏，若要长期保存，则可采用____________的方法。
(3)现有Z1、Z2、Z3、Z4四种菌株的液体培养基，请简要写出可判断Z1、Z2、Z3、Z4四种菌株能否产气的实验思路：______________________________________________________________________________________________________________________________________________。
解析：(1)实验共分三组，甲接种了胀袋酱油，乙接种了等量的无菌水，则丙应接种等量的同品牌的正常酱油，以与甲、乙形成对照。培养一段时间后，对比甲和丙中菌落形态，分离可能的产气微生物菌株。(2)将菌种进行临时保藏时，一般放在4 ℃的冰箱中保藏；若要长期保存，需要采用甘油管藏的方法。(3)产气菌株进行新陈代谢时会产生气体，若在液体环境下将会产生气泡。因此可将Z1、Z2、Z3、Z4四种菌株在液体培养基中培养一段时间，并观察是否有气泡产生。
答案：(1)等量的同品牌的正常酱油　甲和丙(2)平板划线法或稀释涂布平板法　菌落的大小、形状、颜色和隆起程度等　4 ℃的冰箱　甘油管藏(3)将Z1、Z2、Z3、Z4四种菌株在液体培养基中培养一段时间，并观察是否有气泡产生
高考真题体验1.(2021·山东卷)解脂菌能利用分泌的脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸收利用。脂肪酸会使醇溶青琼脂平板变为深蓝色。将不能直接吸收脂肪的甲、乙两种菌分别等量接种在醇溶青琼脂平板上培养。甲菌菌落周围呈现深蓝色，乙菌菌落周围不变色，下列说法错误的是(　　)A．甲菌属于解脂菌B．实验中所用培养基以脂肪为唯一碳源C．可将两种菌分别接种在同一平板的不同区域进行对比D．该平板可用来比较解脂菌分泌脂肪酶的能力
解析：甲可以分泌脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸，脂肪酸会使醇溶青琼脂平板变为深蓝色，因此甲菌属于解脂菌，A项正确；乙菌菌落周围没有出现深蓝色，说明乙菌不能产生脂肪酶，不能利用脂肪为其供能，但乙菌也可以在培养基上生存，说明该培养基不是以脂肪为唯一碳源，B项错误；可将两种菌分别接种在同一平板的不同区域进行对比，更加直观，C项正确；可以利用该平板来比较解脂菌分泌脂肪酶的能力，观察指标可以是菌落周围深蓝色圈的大小，D项正确。
2．(2022·广东卷)研究深海独特的生态环境对于开发海洋资源具有重要意义。近期在“科学号”考察船对南中国海科考中，中国科学家采集了某海域1 146米深海冷泉附近沉积物样品，分离、鉴定得到新的微生物菌株并进一步研究了其生物学特性。
回答下列问题：(1)研究者先制备富集培养基，然后采用__________________法灭菌，冷却后再接入沉积物样品，28 ℃厌氧培养一段时间后，获得了含拟杆菌的混合培养物，为了获得纯种培养，除了稀释涂布平板法，还可采用__________法。据图分析，拟杆菌新菌株在以________为碳源时生长状况最好。(2)研究发现，将采集的样品置于各种培养基中培养，仍有很多微生物不能被分离筛选出来，推测其原因可能是________________________________________________________________________________________________________ (答出1点即可)。(3)藻类细胞解体后的难降解多糖物质，通常会聚集形成碎屑沉降到深海底部。从生态系统组成成分的角度考虑，拟杆菌对深海生态系统碳循环的作用可能是_______________________________________________________________________。
(4)深海冷泉环境特殊，推测此环境下生存的拟杆菌所分泌的各种多糖降解酶，除具有酶的一般共性外，其特性可能还有____________________________________________________________________________________________________________。
解析：(1)分析题图可知，在以纤维素为碳源的培养基中，细胞数量最多，可推知拟杆菌新菌株在以纤维素为碳源时生长状况最好。(2)将采集的样品置于各种培养基中培养，仍可能有很多微生物不能被分离筛选出来。推测其原因可能是某些微生物只有利用深海冷泉中的特有物质才能生存(或需要在深海冷泉的特定环境中才能存活)。(3)拟杆菌为异养生物，作为该生态系统的分解者，能将沉降到深海底部的难降解多糖物质分解为无机物，归还到非生物环境中，有利于碳循环的顺利进行。(4)深海冷泉温度较低，故生活在其中的拟杆菌所分泌的各种多糖降解酶，应具有耐低温的特性，才能高效降解多糖，保证拟杆菌的正常生命活动所需。
答案：(1)高压蒸汽灭菌　平板划线　纤维素(2)某些微生物只有利用深海冷泉中的特有物质才能生存(或需要在深海冷泉的特定环境中才能存活)(3)拟杆菌作为分解者，将沉降到深海底部的难降解多糖物质分解为无机物，归还到非生物环境中，有利于碳循环的顺利进行(4)耐低温
3．(2022·全国甲卷)某同学从被石油污染的土壤中分离得到A和B两株可以降解石油的细菌，在此基础上采用平板培养法比较二者降解石油的能力，并分析两个菌株的其他生理功能。实验所用的培养基成分如下：培养基Ⅰ：K2HPO4，MgSO4，NH4NO3，石油。培养基Ⅱ：K2HPO4，MgSO4，石油。操作步骤：①将A、B菌株分别接种在两瓶液体培养基Ⅰ中培养，得到A、B菌液；②液体培养基Ⅰ、Ⅱ中添加琼脂，分别制成平板Ⅰ、Ⅱ，并按图中所示在平板上打甲、乙两孔。回答下列问题：
(1)实验所用培养基中作为碳源的成分是________。培养基中NH4NO3的作用是为菌株的生长提供氮源，氮源在菌体内可以参与合成______________________(答出2种即可)等生物大分子。
(2)步骤①中，在资源和空间不受限制的阶段，若最初接种N0个A细菌，繁殖n代后细菌的数量是__________。(3)为了比较A、B降解石油的能力，某同学利用步骤②所得到的平板Ⅰ、Ⅱ进行实验，结果如表所示(“＋”表示有透明圈，“＋”越多表示透明圈越大，“－”表示无透明圈)，推测该同学的实验思路是__________________________________________________________________________________________________________。(4)现有一贫氮且被石油污染的土壤，根据上表所示实验结果，治理石油污染应选用的菌株是____________，理由是______________________________________________________________________________________________________________。
解析：(1)从组成培养基的物质所含化学元素可知，作为碳源的成分是石油。生物大分子DNA、RNA、蛋白质都含有N元素，故氮源在菌体内可以参与合成这些物质。(2)细菌增殖呈“J”形曲线增长，由于DNA的半保留复制，细菌每繁殖一代就是上一代的2倍，根据公式Nt＝N0·λt，λ＝2，繁殖n代后细菌的数量是N0·2n。(3)实验的结果是：在平板Ⅰ上，A菌株降解石油的能力高于B菌株；在平板Ⅱ上，A菌株仍然能降解石油，而B菌株不能降解，根据实验的单一变量和对照原则，推测该同学的思路是：在无菌条件下，将等量等浓度的A菌液和B菌液分别接种到平板Ⅰ的甲和乙两孔处，平板Ⅱ也进行同样的操作，在相同且适宜条件下培养一段时间，比较两个平板的两孔处的透明圈大小并作记录，根据透明圈大降解能力强，透明圈小降解能力弱，进而比较A、B降解石油的能力。(4)由表格数据可知，在平板Ⅱ(无氮源的培养基)上，A菌株仍然能降解石油，而B菌株不能降解，所以要治理贫氮且被石油污染的土壤，应该选用A菌株，因为A菌株降解石油的能力高于B菌株，并且在没有添加氮源的培养基中也能生长。
答案：(1)石油　DNA、RNA、蛋白质(2)N0·2n(3)在无菌条件下，将等量等浓度的A菌液和B菌液分别接种到平板Ⅰ的甲和乙两孔处，平板Ⅱ也进行同样的操作，在相同且适宜条件下培养一段时间，比较两个平板的两孔处的透明圈大小并作记录，根据透明圈大降解能力强，透明圈小降解能力弱，进而比较A、B降解石油的能力(4)A　A菌株降解石油的能力高于B菌株，并且在没有添加氮源的培养基中也能生长
4．(2022·全国乙卷)化合物S被广泛应用于医药、食品和化工工业，用菌株C可生产S，S的产量与菌株C培养所利用的碳源关系密切。为此，某小组通过实验比较不同碳源对菌体生长和S产量的影响，结果见下表。
回答下列问题：(1)通常在实验室培养微生物时，需要对所需的玻璃器皿进行灭菌，灭菌的方法有________________________(答出2点即可)。
(2)由实验结果可知，菌株C生长的最适碳源是______；用菌株C生产S的最适碳源是________。菌株C的生长除需要碳源外，还需要_____________________________________________________________________________ (答出2点即可)等营养物质。(3)由实验结果可知，碳源为淀粉时菌株C不能生长，其原因是_________________。(4)若以制糖废液作为碳源，为进一步确定生产S的最适碳源浓度，某同学进行了相关实验。请简要写出实验思路：_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(5)利用制糖废液生产S可以实现废物利用，其意义是__________________ (答出1点即可)。
解析：(1)通常在实验室培养微生物时，对所需的玻璃器皿进行灭菌，玻璃器皿常用的灭菌的方法有干热灭菌、高压蒸汽灭菌等。(2)由实验结果可知，与以制糖废液为碳源相比，以葡萄糖为碳源时菌株C的细胞干重最大，说明最适于菌株C生长的碳源是葡萄糖；而以制糖废液为碳源时，用菌株C生产S的产量高于以葡萄糖为碳源时的产量，说明最适于生产S的碳源是制糖废液。菌株C的生长除需要碳源外，还需要氮源、无机盐、水等营养物质。(3)在以淀粉为碳源的培养基中，菌株C不能生长，原因可能是菌株C中缺少分解淀粉的酶，不能利用淀粉。(4)要测定生产S的最适制糖废液为碳源的浓度，实验自变量为制糖废液的浓度，可分别配制一系列不同浓度梯度的以制糖废液为唯一碳源的培养基，培养菌株C，其他条件相同且适宜，一段时间后，测定并比较不同浓度制糖废液中的S的产量，S产量最高时对应的制糖废液浓度，即为生产S的最适碳源浓度。