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黑龙江省大庆市实验中学实验二部2023-2024学年高二下学期期中考试生物试卷（原卷版+解析版）
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这是一份黑龙江省大庆市实验中学实验二部2023-2024学年高二下学期期中考试生物试卷（原卷版+解析版），文件包含黑龙江省大庆市实验中学实验二部2023-2024学年高二下学期期中考试生物试卷原卷版docx、黑龙江省大庆市实验中学实验二部2023-2024学年高二下学期期中考试生物试卷解析版docx等2份试卷配套教学资源，其中试卷共48页， 欢迎下载使用。
2.满分100分，考试时间90分钟。
一、单项选择题（本大题共35小题，每小题1分，共35分）
1. 葡萄果实中含有丰富的营养成分，用新鲜的葡萄为原料可以家庭制作葡萄酒和葡萄醋，下列有关叙述正确的是（ ）
A. 在葡萄酒发酵旺盛时，醋酸菌能将果汁中的糖发酵为醋酸
B. 葡萄酒和葡萄醋所用的菌种都含有线粒体，可进行有氧呼吸
C. 在变酸的酒表面形成的菌膜是乳酸菌在表面大量繁殖而形成的
D. 在家庭酿制葡萄酒发酵的后期拧松瓶盖的时间间隔可适当延长
2. 获得纯净培养物的关键是要防止杂菌污染，下列有关无菌技术消毒和灭菌的叙述错误的是（ ）
A. 可通过化学消毒法处理水源，也可通过生物消毒法净化污水
B. 常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、湿热灭菌等
C. 配制培养基和接种时，均需在酒精灯火焰附近进行操作
D. 煮沸消毒法可杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢
3. 由于发酵工程生产条件温和、原料来源丰富、价格低廉等，在食品工业、医药工业，农牧业等许多领域得到了广泛的应用。下列有关发酵工程过程及其应用的叙述，正确的是（ ）
A. 分离、提纯产物来获得微生物细胞本身或其代谢产物，是发酵工程的中心环节
B. 单细胞蛋白指从大量培养微生物菌体中获得的蛋白质，可作为家禽、家畜饲料
C. 在啤酒的工业化生产过程中，酒精的生成主要在后发酵阶段完成
D. 利用发酵工程生产的根瘤菌肥作为微生物肥料可以促进植物的生长
4. 下列关于传统发酵技术应用的叙述，正确的是（ ）
A. 利用乳酸菌制作酸奶过程中，先通气培养，后密封发酵
B. 家庭制作的酱油、豆豉和腐乳等通常是混合菌种发酵
C. 果醋制作过程中发酵液pH逐渐降低，果酒制作过程中情况相反
D. 传统发酵技术只能利用原材料中天然存在的微生物进行发酵
5. 桑葚玫瑰酒既融合了桑葚和玫瑰的果香、花香，又使其营养价值和功能活性增加，极大地满足人们的需求。图1为制作桑葚玫瑰酒的装置图；图2为不同桑葚汁与玫瑰质量比对花色苷含量、酒精度和感官评分（感官评分越高，品质越好）的影响。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 图1中排气口连接长而弯曲的胶管可避免其他微生物进入装置
B. 由图2可知，桑葚汁与玫瑰质量比对酒精度影响不大
C. 各组中桑葚汁与玫瑰质量比为4：1时酒的感官评分最高
D. 桑葚玫瑰酒发酵所用菌种的代谢类型与醋酸菌相同
6. 下列有关细菌培养的叙述，正确的是（ ）
A. 细菌的纯培养物指不含有代谢废物的细菌培养物
B. 在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长
C. 向液体培养基中通入氧气能促进破伤风芽孢杆菌的生长
D. 培养细菌时一般将培养基调至中性或弱碱性
7. 酵母菌是一种单细胞真菌，属于生物学常用微生物。下列有关酵母菌的叙述正确的是（ ）
A. 在无氧条件下培养酵母菌，培养基中加入丙酮酸能为酵母菌合成其他物质提供原料和ATP
B. 利用发酵工程制备纯种酵母菌，使发酵罐中酵母菌数量维持在K值可持续获得较高产量
C. 利用酵母菌探究种群数量变化时，可采用抽样检测法统计酵母菌数量，统计结果往往偏小
D. 利用培养基进行酵母菌的纯培养时，配制培养基过程中可以加入蒸馏水进行定容
8. 我国是名副其实的发酵大国，发酵工程在食品工业、医院工业及农牧业等许多领域得到了广泛的应用。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 利用发酵工程生产的微生物农药，作为化学防治的重要手段，可用于防治病虫害
B. 利用产生蛋白酶的黑曲霉将大豆原科中的蛋白质水解，经淋洗后可调制成酱油
C. 将乙型肝炎病毒的抗原基因转入酵母菌，再通过发酵可生产乙型肝炎疫苗
D. 菌种选育时，可通过诱变育种或者基因工程育种获得性状优良的菌种
9. 产脂肪酶细菌可用于含油废水处理，在含有底物的培养基上可分解脂肪形成肉眼可见的透明圈。科研人员用射线照射从土壤中分离的菌株，反复筛选后获得产酶能力提高的菌株。筛选具体流程如图所示，相关叙述正确的是（ ）
A. 步骤①取土壤样品灭菌后溶于无菌水中制成菌悬液
B. 步骤③中菌落周围的透明圈越大，其脂肪酶活性不一定越高
C. 产脂肪酶的细菌进行培养时应放在4℃的恒温箱中培养
D. 步骤②的固体平板是以脂肪为唯一碳源和氮源的选择培养基
10. 平板接种常用在微生物培养中。下列说法正确的是（ ）
A. 不含氮源的平板不能用于微生物培养
B. 平板涂布时涂布器使用前必须进行消毒
C. 接种后未长出菌落的培养基可以直接丢弃
D. 稀释涂布平板法可统计样品中的活菌数
11. 灭菌、消毒、无菌操作是生物学实验中常见的操作。下列叙述正确的是（ ）
A. 将外植体插入诱导愈伤组织形成的培养基时需在酒精灯火焰旁进行
B. 微生物、动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染
C. 为防止蛋白质变性，不能用湿热灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌
D. 无菌操作时对操作的空间、操作者的衣着和手要进行清洁和灭菌
12. 利用某种微生物发酵生产DHA油脂，可获取DHA（一种不饱和脂肪酸）。下图为发酵过程中物质含量变化曲线。下列叙述错误的是（ ）
A. DHA油脂的产量与生物量呈正相关
B. 温度和溶解氧的变化能影响DHA油脂的产量
C. 葡萄糖代谢可为DHA油脂的合成提供能量
D. 12～60h，DHA油脂的合成对氮源的需求比碳源高
13. 很多生活实例中蕴含着生物学原理，下列相关说法不准确的是（ ）
A. 酿酒时先来“水”后来“酒”——酵母菌先进行有氧呼吸后进行无氧呼吸
B. 夏天开瓶后的红酒容易变酸——醋酸菌将乙醇转化为醋酸和CO2
C. 制作泡菜时加入“老汤”——“老汤”中含较多乳酸菌，可加速发酵
D. 含抗生素的牛奶无法用来制成酸奶——抗生素会抑制乳酸菌生长、繁殖
14. 下列关于植物组织培养的叙述，正确的是（ ）
A. 进行植物组织培养时须用适宜浓度的乙醇和次氯酸钠的混合液消毒
B. 提高培养基中生长素和细胞分裂素的比值，有利于诱导生芽
C. 移栽前先打开封口膜或瓶盖让试管苗在培养箱中生长几日
D. 无论脱分化还是再分化过程，均需要提供光照环境
15. Leigh综合征是一种严重神经障碍，其致病基因位于线粒体DNA中。一位母亲约有1/4的线粒体携带这种致病基因，她的前两个孩子因为患有Leigh综合征而夭亡，她的第三个孩子因为接受另一名女性捐赠的健康卵母细胞而成为全球首个拥有“三个父母”的男婴。该“三亲”男婴的孕育过程如下图所示。下列说法错误的是（ ）
A. Leigh综合征的遗传不遵循孟德尔遗传规律
B. 该技术可以降低生下血友病等严重疾病婴儿的概率
C. 该健康男婴孕育的过程使用了核移植、胚胎移植等技术
D. 该婴儿同时拥有自己父母及捐赠者的部分基因
16. 下列关于植物细胞工程的应用，叙述正确的是（ ）
A. 单倍体是进行体细胞诱变育种和研究遗传突变的理想材料
B. 脱毒苗培育所选的组织培养材料可以来自植株的任何部位
C. 葡萄的扦插、桃树的嫁接等繁殖方式都属于微型繁殖
D. 次生代谢物是一类小分子有机化合物，是植物生长生存所必需的
17. 下图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图，下列有关叙述正确的是（ ）
A. 利用蛋白酶合成抑制剂或电刺激可以激活重构胚
B. 后代丁的遗传性状由甲和丙的遗传物质共同决定
C. 过程②常使用显微操作去核法对受精卵进行处理
D. 过程③将激活后的重组细胞培养至原肠胚后移植
18. 下列关于动物细胞工程的叙述，正确的是（ ）
A. 细胞培养时通常采用培养皿或打开培养瓶盖的方法来获取氧气
B. 胚胎干细胞是发现最早、应用最为成熟的一类成体干细胞
C. 早期胚胎需移植到经同期发情处理的同种雌性动物体内
D. 将骨髓瘤细胞和B淋巴细胞混合，经诱导后融合的细胞即为杂交瘤细胞
19. 如图为将胡萝卜的离体组织在一定条件下培育形成试管苗的过程示意图，有关叙述正确的是（ ）
A. ①、②过程中均发生细胞的增殖和分化
B. 利用此过程获得的试管苗可能为杂合子
C. 多倍体植株的培育需经过如图所示过程
D. 愈伤组织可继续在原培养基中分化形成植株
20. 下列有关哺乳动物受精作用和早期胚胎发育的叙述正确的是（ ）
A. 在精子触及卵细胞膜的瞬间，卵细胞膜会发生生理反应，阻止多精入卵
B. 受精卵发育为桑葚胚的过程是在透明带内完成的，孵化后进入囊胚期
C. 胚胎发育至原肠胚时期即开始了细胞分化，随后发育形成三个胚层
D. 受精卵在输卵管内进行卵裂时，细胞数量增加但胚胎总体积并不增加
21. 若下图表示细胞工程操作中的某些过程，请判断下列相关描述中正确的是（ ）
A. 若该图表示植物体细胞杂交技术，则C细胞再生出细胞壁后标志着该技术成功
B. 若该图表示动物细胞融合技术，其融合的原理与植物原生质体融合的基本原理不同
C. 若A、B分别是白菜（2n）和甘蓝（2n）的体细胞，则C细胞发育成的植株不可育
D. 若A、B分别是取自优良奶牛的卵母细胞和精子，则B细胞需经过获能处理才能和A结合
22. 人造皮肤的构建、动物分泌蛋白的规模化生产等，都离不开动物细胞培养。下列有关动物细胞培养的叙述错误的是（ ）
A. 动物细胞培养时一般要在含95%空气和5%CO2的CO2培养箱中培养
B. 动物细胞培养是动物细胞工程的基础，培养时需保证无菌、无毒的环境
C. 培养液中通常含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清
D. 培养瓶中细胞都需要定期用胰蛋白酶处理，分瓶后才能继续增殖
23. 我国首例克隆猫“大蒜”于2019年7月21日经代孕猫自然分娩顺利出生，它是从本体猫“大蒜”的大腿部采集了一块皮下组织，提取体细胞的细胞核与去核的卵母细胞融合，形成重构胚，激活后的胚胎再植入代孕猫的子宫内，直至分娩。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 需用显微操作法对减数分裂I中期的卵母细胞去核
B. 将皮下组织细胞注射到去核卵母细胞中，用钙离子载体诱导两细胞融合
C. 克隆猫“大蒜”的培育说明动物细胞有全能性，克隆猫与供体猫的性状完全相同
D. 克隆猫“大蒜”的胚胎与代孕猫建立生理和组织上的联系，其遗传物质一般不会发生变化
24. 抗体—药物偶联物（ADC）通过将细胞毒素与单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。ADC组成及作用机制如图，下列叙述正确的是（ ）
A. 细胞毒素的特异性是ADC能选择性作用于肿瘤细胞的关键
B. ADC进入肿瘤细胞的运输方式为主动运输，需要消耗能量
C. ADC中药物的作用是通过诱发肿瘤细胞坏死而杀死肿瘤细胞
D. ADC中抗体作用是与肿瘤细胞特异性结合，将细胞毒素带到肿瘤细胞
25. “筛选”是生物技术与工程中常用的技术手段。下列叙述不正确的是（ ）
A. 筛选尿素分解菌时，需配制以尿素为唯一氮源的选择培养基
B. 单倍体育种时，一般需对F1的花药进行筛选后才可继续进行组织培养
C. 制备单克隆抗体时，需从分子水平筛选能产生所需抗体的杂交瘤细胞
D. 胚胎移植前，需对通过体外受精或其他方式得到的胚胎进行质量筛选
26. 下列关于动物细胞工程和胚胎工程的叙述正确的是（ ）
A. 悬浮培养的细胞和贴壁生长的细胞都可用离心法直接收集
B. 克隆牛技术涉及体细胞核移植、动物细胞培养、胚胎移植等过程
C. 动物细胞培养和植物组织培养依据的原理都是细胞的全能性
D. 将小鼠桑葚胚分割成2等份获得同卵双胎的过程属于有性生殖
27. 下列关于DNA重组技术基本工具说法，正确的是（ ）
A. DNA连接酶可催化脱氧核苷酸链间形成氢键
B. 限制酶切割DNA后一定能产生黏性末端
C. 质粒是基因工程中唯一的载体
D. 微生物中的限制酶对自身DNA无损害作用
28. 乙醇是生物学实验中常用的试剂。下表列出了乙醇在实验中的作用，其中正确的是（ ）
A. AB. BC. CD. D
29. 下列关于PCR的叙述错误的是（ ）
A. 用PCR方法扩增目的基因时需要知道基因的部分序列
B. 复性温度过高可能导致PCR反应得不到任何扩增产物
C. PCR技术是在生物体内快速扩增目的基因的过程
D. 第四轮循环产物中含有两种引物的DNA片段所占比例为7/8
30. CD163蛋白是PRRSV病毒感染家畜的受体。为实时监控CD163蛋白的表达和转运过程，将红色荧光蛋白RFP基因与CD163基因拼接在一起（如下图），使其表达成一条多肽。该拼接过程的关键步骤是除去（ ）
A. CD163基因中编码起始密码子的序列
B. CD163基因中编码终止密码子的序列
C. RFP基因中编码起始密码子的序列
D. RFP基因中编码终止密码子的序列
31. 基因工程操作离不开三种工具，下列有关说法不正确的是（ ）
A. 用相同的限制性内切核酸酶处理目的基因和质粒，可获得相同的末端
B. 载体质粒的基本单位是脱氧核糖核苷酸，另外两种工具的基本单位是氨基酸
C. DNA连接酶与DNA聚合酶催化合成的化学键相同，催化反应的底物也相同
D. 限制性内切核酸酶主要从原核生物中分离获得，具有识别特定核苷酸序列的能力
32. 下列实验条件的改变，对实验结果影响最小的是（ ）
A. 用乙醇代替葡萄糖作为底物用于醋酸菌制作各种风味的醋
B. 用脂肪酶代替胰蛋白酶处理幼龄动物组织获取分离的细胞
C. 用2ml/LNaCl溶液代替95%乙醇析出较为纯净的DNA
D. 用干热灭菌法代替湿热灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基灭菌
33. PCR又称聚合酶链式反应，现在已成为分子生物学实验中的一种常规手段，它可以在体外很短的时间内将DNA大量扩增。你认为下列符合在体外进行PCR反应条件的一组是（ ）
①稳定的缓冲溶液环境②DNA模板③引物④4种脱氧核苷酸⑤耐高温的DNA聚合酶⑥解旋酶⑦限制性内切核酸酶⑧温控设备
A. ①②③④⑤⑥B. ①②③④⑤⑥⑦⑧C. ③④⑤⑥⑧D. ①②③④⑤⑧
34. 基因工程中需使用多种工具酶，几种限制酶的切割位点如图所示。下列说法正确的是（ ）
A. 限制酶Smal和EcRV切割形成的末端，可以通过E.cli DNA连接酶相互连接
B. DNA连接酶、DNA聚合酶和RNA聚合酶均可催化磷酸二酯键的形成
C. 限制酶EcRI进行一次切割，会切断2个磷酸二酯键，形成1个游离的5’末端
D. 若两种限制酶的识别序列相同，则形成的末端一定能通过DNA连接酶相互连接
35. 将水稻耐盐碱基因OsMYB56导入不耐盐碱水稻品种吉粳88中，培育耐盐碱海水稻新品种。下图PCR扩增OsMYB56时需要添加引物，应选用的引物组合为（ ）
A. 5'-CTTCGATGAT-3'和5'-TCTGTTGAAT-3'
B. 5'-CTTGGATGAT-3'和5'-TAAGTTGTCT-3'
C. 5'-ATTCAACAGA-3'和5'-ATCATCCAAG-3'
D. 5'-ATTCAACAGA-3'和5'-GAACCTACTA-3
二、不定项选择题（共5小题，每个3分，共15分）
36. 在《诗经·掷风·谷风》中有“我有旨蓄，亦以御冬”的记载，“旨蓄”就是储藏的美味食品，也就是今天腌制的酸菜、泡菜。下列叙述错误的是（ ）
A. 制作泡菜时腌制时间过长会引起细菌大量繁殖
B. 发酵坛表面可能出现一层由酵母菌繁殖形成的白膜
C. 发酵过程中，蔬菜中的糖会分解成醋酸使溶液的pH降低
D. 制作泡菜的盐水需煮沸冷却后再倒入坛中，要没过全部菜料
37. 针对肺结核病患者，联合使用多种抗生素可以达到很好的疗效。某研究人员在通过生物安全规范鉴定的微生物实验室，对结核分枝杆菌进行两种新抗生素感受性分析，该研究人员将结核分枝杆菌分别接种在含有不同浓度抗生素A与B的培养基中（“+”代表抗生素浓度，加号越多抗生素浓度越高，“-”代表不含抗生素），在37℃环境下培养24小时后，观察菌落，结果如图。下列叙述正确的是（ ）
A. 该实验接种结核分枝杆菌使用的接种方法是稀释涂布平板法
B. 为了防止杂菌污染，接种操作应该在酒精灯火焰附近进行
C. 长期使用抗生素A可能会增加结核杆分枝杆菌的抗药性基因频率
D. 与单独使用抗生素A相比，联合使用抗生素B可显著增强对结核杆菌的抑制作用
38. 我国科学家首次通过把食蟹猴的胚胎干细胞注射到猪的胚胎中，培育出了“猪—猴嵌合体”仔猪（如下图所示）。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 细胞培养过程中细胞会因接触抑制而停止分裂，需用胃蛋白酶处理后继续传代培养
B. 采集的卵母细胞需培养至MII期才能与获能的精子受精，进而获得猪胚胎
C. 从食蟹猴囊胚期胚胎的内细胞团获取胚胎干细胞具有发育成各种组织、器官的潜能
D. 培育出的“仔猪”细胞遗传物质是猴细胞与猪细胞之和，具有猴和猪的融合性状
39. 研究者用EBV（一种病毒颗粒）感染动物B淋巴细胞，获得“染色体核型稳定”的EBV转化细胞，用以解决杂交瘤细胞传代培养中B淋巴细胞染色体丢失的问题。EBV转化细胞能够在HAT培养基中存活，但对乌本苷（0ua）敏感，骨髓瘤细胞不能在HAT培养基中存活。下图为该实验操作示意图。相关叙述错误的是（ ）
A. B淋巴细胞可从注射抗原的动物脾脏中获得
B. HAT培养基的作用主要是为了去除未融合的EBV转化细胞
C. 未融合的EBV转化细胞和骨髓瘤细胞死亡的原因相同
D. 图中所获得的杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生特异性抗体
40. 人血清白蛋白（HSA）是血浆蛋白的主要成分，具有维持血浆渗透压和进行物质运输的功能。科学家利用PCR技术来大量扩增HSA基因。下列相关叙述错误的（ ）
A. PCR技术是利用DNA半保留复制的原理对目的基因进行大量复制
B. 扩增出HSA基因用于基因表达载体的构建，应选择引物Ⅱ和引物Ⅲ
C. PCR过程每次循环分为3步，其中温度最低的一步是第三步
D. 在PCR反应缓冲液中加入Mg°的作用是激活耐高温的DNA聚合酶
三、非选择题（共5小题，每空2分，共50分）
41. 以鲜苹果汁为原料利用发酵瓶制作果酒和果醋的过程如图1所示，图2为发酵装置。请分析回答：
（1）家庭酿苹果酒时不需要添加酵母菌菌种，菌种来源是_______。
（2）图1中甲过程和乙过程利用的菌种在结构上最大的区别是前者_________。欲检测甲过程发酵样液中是否含有酒精，可以用________试剂来检验。
（3）若利用已制备的葡萄酒，继续使用图2装置制作葡萄醋，需改变的条件是______。（答出2点）
（4）市场上购买的真空包装酸菜，在没有漏气的状态下发生了“胀袋”现象，同学A怀疑是杂菌污染导致的，同学B怀疑是乳酸菌大量繁殖导致的，你支持谁的观点并说明理由_________。
42. 磷是植物生长的重要元素，施入土中的磷大多数与Ca2+等离子结合形成难溶性磷酸盐。科研人员从贡柑果园土中选出可以将难溶性或不溶性磷转化成可溶性磷的高效解磷菌，主要流程见下图，请回答下列问题：
（1）经步骤③最后一次稀释之后若在3个平板上分别接入0.1mL稀释液，经适当培养后，得到的结果是：39、38、37，则每克土样中的活菌数为_______个。
（2）通常情况下，对获得的纯菌种可以依据_________对细菌进行初步的鉴定和分类。
（3）为进一步测定初步筛选的三种菌株实际溶解磷的能力，研究人员将它们接种到基础培养基中，并在37℃、200r·min-1摇床培养，定期取上清液，测定溶液中可溶性磷含量。用摇床进行培养的好处是_____。（答出2点）获得纯淀粉分解菌的关键是_______。
（4）图5的接种方法中接种环至少需要灼烧________次。
43. 不对称体细胞杂交是指利用射线破坏染色质的供体细胞，与未经射线照射的受体细胞融合，所得融合细胞含受体全部遗传物质及供体部分遗传物质。科研人员用大剂量的X射线处理拟南芥（2n=10）的原生质体，然后诱导其与柴胡（2n=12）的原生质体融合，最终获得不对称杂种植株。回答下列问题：
（1）为获得拟南芥和柴胡的原生质体，可将流水冲洗后的外植体进行消毒，消毒后的外植体用小刀切碎，放入含有______酶的缓冲液中，以获得原生质体。植物体细胞杂交成功的标志是_______。
（2）可采用二乙酸荧光素（FAD）法测定原生质体活力，已知FAD本身无荧光，当其进入细胞后可被酯酶分解为无毒、具有荧光的物质，该荧光物质不能透过细胞膜，会留在细胞内发出荧光。据此应选择______（“发出荧光”“不发荧光”）的原生质体用于融合。
（3）科研人员对获得的部分植株细胞进行染色体观察、计数和DNA分子标记鉴定，统计结果如下表所示：
由表可知，后代植株中_______类型一定不是杂种植株。科研人员推测杂种植株的染色体主要由柴胡亲本来源的染色体组成，拟南芥亲本的遗传物质可能不是以染色体的形式存在于杂种植株细胞中，而是以DNA片段的方式整合进柴胡的基因组，作出以上推测的依据是_______。
44. 青岛农业大学科研人员从一只成年雌性森林猫皮肤组织中分离培养得到成纤维细胞，将该细胞的细胞核移入中华田园猫的卵母细胞，构建重组细胞，然后经人工激活后获得多枚体细胞克隆胚胎。将克隆胚胎移植到受体母猫中，经过62天孕育，成功得到一只森林猫体细胞克隆后代。请回答下列相关问题：
（1）在构建重组细胞前，要对成年雌性森林猫皮肤组织中分离得到的成纤维细胞进行动物细胞培养，培养时需提供适宜的气体环境，其中CO2的作用是_____。培养时要定期更换培养液，目的是______。
（2）猫泛白细胞减少症也叫猫瘟热，该病是由猫泛白细胞减少症病毒引起的猫（特别是幼龄猫）的一种发热性高度接触性、致死性传染病，而抗猫泛白细胞减少症病毒单克隆抗体的应用会大大降低该病毒引起的死亡率。下图为用小鼠制备该单克隆抗体的简图，若甲细胞为小鼠骨髓瘤细胞，则乙细胞为_______。①②筛选的目的分别是________。
45. 工程菌是指用基因工程的方法，使外源基因得到高效表达的菌类细胞株系。下图是利用大肠杆菌生产人胰岛素过程中使用的质粒及目的基因的部分结构。
（1）启动子是_____的识别和结合部位。图中胰岛素基因以_____链作为模板进行转录。
（2）构建基因表达载体时一般至少需要两种限制酶，以防止____和目的基因与质粒的反向连接。为了使目的基因与载体能正确连接，需要在引物的____端添加限制酶_____的识别序列。选项
实验
乙醇的作用
A
DNA粗提取与鉴定
溶解DNA，初步分离DNA与蛋白质
B
微生物的纯培养
工作台和接种工具的灭菌
C
绿叶中的色素的提取和分离
分离绿叶中的色素
D
低温诱导染色体数目加倍
洗去卡诺氏液并参与组成解离液
后代植株类型
染色体数目形态
DNA分子标记鉴定
甲
12，与柴胡染色体相似
含双亲DNA片段
乙
12，与柴胡染色体相似
无拟南芥DNA片段
丙
12，与柴胡染色体相似
含双亲DNA片段和新的DNA片段
2.满分100分，考试时间90分钟。
一、单项选择题（本大题共35小题，每小题1分，共35分）
1. 葡萄果实中含有丰富的营养成分，用新鲜的葡萄为原料可以家庭制作葡萄酒和葡萄醋，下列有关叙述正确的是（ ）
A. 在葡萄酒发酵旺盛时，醋酸菌能将果汁中的糖发酵为醋酸
B. 葡萄酒和葡萄醋所用的菌种都含有线粒体，可进行有氧呼吸
C. 在变酸的酒表面形成的菌膜是乳酸菌在表面大量繁殖而形成的
D. 在家庭酿制葡萄酒发酵的后期拧松瓶盖的时间间隔可适当延长
2. 获得纯净培养物的关键是要防止杂菌污染，下列有关无菌技术消毒和灭菌的叙述错误的是（ ）
A. 可通过化学消毒法处理水源，也可通过生物消毒法净化污水
B. 常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、湿热灭菌等
C. 配制培养基和接种时，均需在酒精灯火焰附近进行操作
D. 煮沸消毒法可杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢
3. 由于发酵工程生产条件温和、原料来源丰富、价格低廉等，在食品工业、医药工业，农牧业等许多领域得到了广泛的应用。下列有关发酵工程过程及其应用的叙述，正确的是（ ）
A. 分离、提纯产物来获得微生物细胞本身或其代谢产物，是发酵工程的中心环节
B. 单细胞蛋白指从大量培养微生物菌体中获得的蛋白质，可作为家禽、家畜饲料
C. 在啤酒的工业化生产过程中，酒精的生成主要在后发酵阶段完成
D. 利用发酵工程生产的根瘤菌肥作为微生物肥料可以促进植物的生长
4. 下列关于传统发酵技术应用的叙述，正确的是（ ）
A. 利用乳酸菌制作酸奶过程中，先通气培养，后密封发酵
B. 家庭制作的酱油、豆豉和腐乳等通常是混合菌种发酵
C. 果醋制作过程中发酵液pH逐渐降低，果酒制作过程中情况相反
D. 传统发酵技术只能利用原材料中天然存在的微生物进行发酵
5. 桑葚玫瑰酒既融合了桑葚和玫瑰的果香、花香，又使其营养价值和功能活性增加，极大地满足人们的需求。图1为制作桑葚玫瑰酒的装置图；图2为不同桑葚汁与玫瑰质量比对花色苷含量、酒精度和感官评分（感官评分越高，品质越好）的影响。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 图1中排气口连接长而弯曲的胶管可避免其他微生物进入装置
B. 由图2可知，桑葚汁与玫瑰质量比对酒精度影响不大
C. 各组中桑葚汁与玫瑰质量比为4：1时酒的感官评分最高
D. 桑葚玫瑰酒发酵所用菌种的代谢类型与醋酸菌相同
6. 下列有关细菌培养的叙述，正确的是（ ）
A. 细菌的纯培养物指不含有代谢废物的细菌培养物
B. 在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长
C. 向液体培养基中通入氧气能促进破伤风芽孢杆菌的生长
D. 培养细菌时一般将培养基调至中性或弱碱性
7. 酵母菌是一种单细胞真菌，属于生物学常用微生物。下列有关酵母菌的叙述正确的是（ ）
A. 在无氧条件下培养酵母菌，培养基中加入丙酮酸能为酵母菌合成其他物质提供原料和ATP
B. 利用发酵工程制备纯种酵母菌，使发酵罐中酵母菌数量维持在K值可持续获得较高产量
C. 利用酵母菌探究种群数量变化时，可采用抽样检测法统计酵母菌数量，统计结果往往偏小
D. 利用培养基进行酵母菌的纯培养时，配制培养基过程中可以加入蒸馏水进行定容
8. 我国是名副其实的发酵大国，发酵工程在食品工业、医院工业及农牧业等许多领域得到了广泛的应用。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 利用发酵工程生产的微生物农药，作为化学防治的重要手段，可用于防治病虫害
B. 利用产生蛋白酶的黑曲霉将大豆原科中的蛋白质水解，经淋洗后可调制成酱油
C. 将乙型肝炎病毒的抗原基因转入酵母菌，再通过发酵可生产乙型肝炎疫苗
D. 菌种选育时，可通过诱变育种或者基因工程育种获得性状优良的菌种
9. 产脂肪酶细菌可用于含油废水处理，在含有底物的培养基上可分解脂肪形成肉眼可见的透明圈。科研人员用射线照射从土壤中分离的菌株，反复筛选后获得产酶能力提高的菌株。筛选具体流程如图所示，相关叙述正确的是（ ）
A. 步骤①取土壤样品灭菌后溶于无菌水中制成菌悬液
B. 步骤③中菌落周围的透明圈越大，其脂肪酶活性不一定越高
C. 产脂肪酶的细菌进行培养时应放在4℃的恒温箱中培养
D. 步骤②的固体平板是以脂肪为唯一碳源和氮源的选择培养基
10. 平板接种常用在微生物培养中。下列说法正确的是（ ）
A. 不含氮源的平板不能用于微生物培养
B. 平板涂布时涂布器使用前必须进行消毒
C. 接种后未长出菌落的培养基可以直接丢弃
D. 稀释涂布平板法可统计样品中的活菌数
11. 灭菌、消毒、无菌操作是生物学实验中常见的操作。下列叙述正确的是（ ）
A. 将外植体插入诱导愈伤组织形成的培养基时需在酒精灯火焰旁进行
B. 微生物、动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染
C. 为防止蛋白质变性，不能用湿热灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌
D. 无菌操作时对操作的空间、操作者的衣着和手要进行清洁和灭菌
12. 利用某种微生物发酵生产DHA油脂，可获取DHA（一种不饱和脂肪酸）。下图为发酵过程中物质含量变化曲线。下列叙述错误的是（ ）
A. DHA油脂的产量与生物量呈正相关
B. 温度和溶解氧的变化能影响DHA油脂的产量
C. 葡萄糖代谢可为DHA油脂的合成提供能量
D. 12～60h，DHA油脂的合成对氮源的需求比碳源高
13. 很多生活实例中蕴含着生物学原理，下列相关说法不准确的是（ ）
A. 酿酒时先来“水”后来“酒”——酵母菌先进行有氧呼吸后进行无氧呼吸
B. 夏天开瓶后的红酒容易变酸——醋酸菌将乙醇转化为醋酸和CO2
C. 制作泡菜时加入“老汤”——“老汤”中含较多乳酸菌，可加速发酵
D. 含抗生素的牛奶无法用来制成酸奶——抗生素会抑制乳酸菌生长、繁殖
14. 下列关于植物组织培养的叙述，正确的是（ ）
A. 进行植物组织培养时须用适宜浓度的乙醇和次氯酸钠的混合液消毒
B. 提高培养基中生长素和细胞分裂素的比值，有利于诱导生芽
C. 移栽前先打开封口膜或瓶盖让试管苗在培养箱中生长几日
D. 无论脱分化还是再分化过程，均需要提供光照环境
15. Leigh综合征是一种严重神经障碍，其致病基因位于线粒体DNA中。一位母亲约有1/4的线粒体携带这种致病基因，她的前两个孩子因为患有Leigh综合征而夭亡，她的第三个孩子因为接受另一名女性捐赠的健康卵母细胞而成为全球首个拥有“三个父母”的男婴。该“三亲”男婴的孕育过程如下图所示。下列说法错误的是（ ）
A. Leigh综合征的遗传不遵循孟德尔遗传规律
B. 该技术可以降低生下血友病等严重疾病婴儿的概率
C. 该健康男婴孕育的过程使用了核移植、胚胎移植等技术
D. 该婴儿同时拥有自己父母及捐赠者的部分基因
16. 下列关于植物细胞工程的应用，叙述正确的是（ ）
A. 单倍体是进行体细胞诱变育种和研究遗传突变的理想材料
B. 脱毒苗培育所选的组织培养材料可以来自植株的任何部位
C. 葡萄的扦插、桃树的嫁接等繁殖方式都属于微型繁殖
D. 次生代谢物是一类小分子有机化合物，是植物生长生存所必需的
17. 下图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图，下列有关叙述正确的是（ ）
A. 利用蛋白酶合成抑制剂或电刺激可以激活重构胚
B. 后代丁的遗传性状由甲和丙的遗传物质共同决定
C. 过程②常使用显微操作去核法对受精卵进行处理
D. 过程③将激活后的重组细胞培养至原肠胚后移植
18. 下列关于动物细胞工程的叙述，正确的是（ ）
A. 细胞培养时通常采用培养皿或打开培养瓶盖的方法来获取氧气
B. 胚胎干细胞是发现最早、应用最为成熟的一类成体干细胞
C. 早期胚胎需移植到经同期发情处理的同种雌性动物体内
D. 将骨髓瘤细胞和B淋巴细胞混合，经诱导后融合的细胞即为杂交瘤细胞
19. 如图为将胡萝卜的离体组织在一定条件下培育形成试管苗的过程示意图，有关叙述正确的是（ ）
A. ①、②过程中均发生细胞的增殖和分化
B. 利用此过程获得的试管苗可能为杂合子
C. 多倍体植株的培育需经过如图所示过程
D. 愈伤组织可继续在原培养基中分化形成植株
20. 下列有关哺乳动物受精作用和早期胚胎发育的叙述正确的是（ ）
A. 在精子触及卵细胞膜的瞬间，卵细胞膜会发生生理反应，阻止多精入卵
B. 受精卵发育为桑葚胚的过程是在透明带内完成的，孵化后进入囊胚期
C. 胚胎发育至原肠胚时期即开始了细胞分化，随后发育形成三个胚层
D. 受精卵在输卵管内进行卵裂时，细胞数量增加但胚胎总体积并不增加
21. 若下图表示细胞工程操作中的某些过程，请判断下列相关描述中正确的是（ ）
A. 若该图表示植物体细胞杂交技术，则C细胞再生出细胞壁后标志着该技术成功
B. 若该图表示动物细胞融合技术，其融合的原理与植物原生质体融合的基本原理不同
C. 若A、B分别是白菜（2n）和甘蓝（2n）的体细胞，则C细胞发育成的植株不可育
D. 若A、B分别是取自优良奶牛的卵母细胞和精子，则B细胞需经过获能处理才能和A结合
22. 人造皮肤的构建、动物分泌蛋白的规模化生产等，都离不开动物细胞培养。下列有关动物细胞培养的叙述错误的是（ ）
A. 动物细胞培养时一般要在含95%空气和5%CO2的CO2培养箱中培养
B. 动物细胞培养是动物细胞工程的基础，培养时需保证无菌、无毒的环境
C. 培养液中通常含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清
D. 培养瓶中细胞都需要定期用胰蛋白酶处理，分瓶后才能继续增殖
23. 我国首例克隆猫“大蒜”于2019年7月21日经代孕猫自然分娩顺利出生，它是从本体猫“大蒜”的大腿部采集了一块皮下组织，提取体细胞的细胞核与去核的卵母细胞融合，形成重构胚，激活后的胚胎再植入代孕猫的子宫内，直至分娩。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 需用显微操作法对减数分裂I中期的卵母细胞去核
B. 将皮下组织细胞注射到去核卵母细胞中，用钙离子载体诱导两细胞融合
C. 克隆猫“大蒜”的培育说明动物细胞有全能性，克隆猫与供体猫的性状完全相同
D. 克隆猫“大蒜”的胚胎与代孕猫建立生理和组织上的联系，其遗传物质一般不会发生变化
24. 抗体—药物偶联物（ADC）通过将细胞毒素与单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。ADC组成及作用机制如图，下列叙述正确的是（ ）
A. 细胞毒素的特异性是ADC能选择性作用于肿瘤细胞的关键
B. ADC进入肿瘤细胞的运输方式为主动运输，需要消耗能量
C. ADC中药物的作用是通过诱发肿瘤细胞坏死而杀死肿瘤细胞
D. ADC中抗体作用是与肿瘤细胞特异性结合，将细胞毒素带到肿瘤细胞
25. “筛选”是生物技术与工程中常用的技术手段。下列叙述不正确的是（ ）
A. 筛选尿素分解菌时，需配制以尿素为唯一氮源的选择培养基
B. 单倍体育种时，一般需对F1的花药进行筛选后才可继续进行组织培养
C. 制备单克隆抗体时，需从分子水平筛选能产生所需抗体的杂交瘤细胞
D. 胚胎移植前，需对通过体外受精或其他方式得到的胚胎进行质量筛选
26. 下列关于动物细胞工程和胚胎工程的叙述正确的是（ ）
A. 悬浮培养的细胞和贴壁生长的细胞都可用离心法直接收集
B. 克隆牛技术涉及体细胞核移植、动物细胞培养、胚胎移植等过程
C. 动物细胞培养和植物组织培养依据的原理都是细胞的全能性
D. 将小鼠桑葚胚分割成2等份获得同卵双胎的过程属于有性生殖
27. 下列关于DNA重组技术基本工具说法，正确的是（ ）
A. DNA连接酶可催化脱氧核苷酸链间形成氢键
B. 限制酶切割DNA后一定能产生黏性末端
C. 质粒是基因工程中唯一的载体
D. 微生物中的限制酶对自身DNA无损害作用
28. 乙醇是生物学实验中常用的试剂。下表列出了乙醇在实验中的作用，其中正确的是（ ）
A. AB. BC. CD. D
29. 下列关于PCR的叙述错误的是（ ）
A. 用PCR方法扩增目的基因时需要知道基因的部分序列
B. 复性温度过高可能导致PCR反应得不到任何扩增产物
C. PCR技术是在生物体内快速扩增目的基因的过程
D. 第四轮循环产物中含有两种引物的DNA片段所占比例为7/8
30. CD163蛋白是PRRSV病毒感染家畜的受体。为实时监控CD163蛋白的表达和转运过程，将红色荧光蛋白RFP基因与CD163基因拼接在一起（如下图），使其表达成一条多肽。该拼接过程的关键步骤是除去（ ）
A. CD163基因中编码起始密码子的序列
B. CD163基因中编码终止密码子的序列
C. RFP基因中编码起始密码子的序列
D. RFP基因中编码终止密码子的序列
31. 基因工程操作离不开三种工具，下列有关说法不正确的是（ ）
A. 用相同的限制性内切核酸酶处理目的基因和质粒，可获得相同的末端
B. 载体质粒的基本单位是脱氧核糖核苷酸，另外两种工具的基本单位是氨基酸
C. DNA连接酶与DNA聚合酶催化合成的化学键相同，催化反应的底物也相同
D. 限制性内切核酸酶主要从原核生物中分离获得，具有识别特定核苷酸序列的能力
32. 下列实验条件的改变，对实验结果影响最小的是（ ）
A. 用乙醇代替葡萄糖作为底物用于醋酸菌制作各种风味的醋
B. 用脂肪酶代替胰蛋白酶处理幼龄动物组织获取分离的细胞
C. 用2ml/LNaCl溶液代替95%乙醇析出较为纯净的DNA
D. 用干热灭菌法代替湿热灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基灭菌
33. PCR又称聚合酶链式反应，现在已成为分子生物学实验中的一种常规手段，它可以在体外很短的时间内将DNA大量扩增。你认为下列符合在体外进行PCR反应条件的一组是（ ）
①稳定的缓冲溶液环境②DNA模板③引物④4种脱氧核苷酸⑤耐高温的DNA聚合酶⑥解旋酶⑦限制性内切核酸酶⑧温控设备
A. ①②③④⑤⑥B. ①②③④⑤⑥⑦⑧C. ③④⑤⑥⑧D. ①②③④⑤⑧
34. 基因工程中需使用多种工具酶，几种限制酶的切割位点如图所示。下列说法正确的是（ ）
A. 限制酶Smal和EcRV切割形成的末端，可以通过E.cli DNA连接酶相互连接
B. DNA连接酶、DNA聚合酶和RNA聚合酶均可催化磷酸二酯键的形成
C. 限制酶EcRI进行一次切割，会切断2个磷酸二酯键，形成1个游离的5’末端
D. 若两种限制酶的识别序列相同，则形成的末端一定能通过DNA连接酶相互连接
35. 将水稻耐盐碱基因OsMYB56导入不耐盐碱水稻品种吉粳88中，培育耐盐碱海水稻新品种。下图PCR扩增OsMYB56时需要添加引物，应选用的引物组合为（ ）
A. 5'-CTTCGATGAT-3'和5'-TCTGTTGAAT-3'
B. 5'-CTTGGATGAT-3'和5'-TAAGTTGTCT-3'
C. 5'-ATTCAACAGA-3'和5'-ATCATCCAAG-3'
D. 5'-ATTCAACAGA-3'和5'-GAACCTACTA-3
二、不定项选择题（共5小题，每个3分，共15分）
36. 在《诗经·掷风·谷风》中有“我有旨蓄，亦以御冬”的记载，“旨蓄”就是储藏的美味食品，也就是今天腌制的酸菜、泡菜。下列叙述错误的是（ ）
A. 制作泡菜时腌制时间过长会引起细菌大量繁殖
B. 发酵坛表面可能出现一层由酵母菌繁殖形成的白膜
C. 发酵过程中，蔬菜中的糖会分解成醋酸使溶液的pH降低
D. 制作泡菜的盐水需煮沸冷却后再倒入坛中，要没过全部菜料
37. 针对肺结核病患者，联合使用多种抗生素可以达到很好的疗效。某研究人员在通过生物安全规范鉴定的微生物实验室，对结核分枝杆菌进行两种新抗生素感受性分析，该研究人员将结核分枝杆菌分别接种在含有不同浓度抗生素A与B的培养基中（“+”代表抗生素浓度，加号越多抗生素浓度越高，“-”代表不含抗生素），在37℃环境下培养24小时后，观察菌落，结果如图。下列叙述正确的是（ ）
A. 该实验接种结核分枝杆菌使用的接种方法是稀释涂布平板法
B. 为了防止杂菌污染，接种操作应该在酒精灯火焰附近进行
C. 长期使用抗生素A可能会增加结核杆分枝杆菌的抗药性基因频率
D. 与单独使用抗生素A相比，联合使用抗生素B可显著增强对结核杆菌的抑制作用
38. 我国科学家首次通过把食蟹猴的胚胎干细胞注射到猪的胚胎中，培育出了“猪—猴嵌合体”仔猪（如下图所示）。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 细胞培养过程中细胞会因接触抑制而停止分裂，需用胃蛋白酶处理后继续传代培养
B. 采集的卵母细胞需培养至MII期才能与获能的精子受精，进而获得猪胚胎
C. 从食蟹猴囊胚期胚胎的内细胞团获取胚胎干细胞具有发育成各种组织、器官的潜能
D. 培育出的“仔猪”细胞遗传物质是猴细胞与猪细胞之和，具有猴和猪的融合性状
39. 研究者用EBV（一种病毒颗粒）感染动物B淋巴细胞，获得“染色体核型稳定”的EBV转化细胞，用以解决杂交瘤细胞传代培养中B淋巴细胞染色体丢失的问题。EBV转化细胞能够在HAT培养基中存活，但对乌本苷（0ua）敏感，骨髓瘤细胞不能在HAT培养基中存活。下图为该实验操作示意图。相关叙述错误的是（ ）
A. B淋巴细胞可从注射抗原的动物脾脏中获得
B. HAT培养基的作用主要是为了去除未融合的EBV转化细胞
C. 未融合的EBV转化细胞和骨髓瘤细胞死亡的原因相同
D. 图中所获得的杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生特异性抗体
40. 人血清白蛋白（HSA）是血浆蛋白的主要成分，具有维持血浆渗透压和进行物质运输的功能。科学家利用PCR技术来大量扩增HSA基因。下列相关叙述错误的（ ）
A. PCR技术是利用DNA半保留复制的原理对目的基因进行大量复制
B. 扩增出HSA基因用于基因表达载体的构建，应选择引物Ⅱ和引物Ⅲ
C. PCR过程每次循环分为3步，其中温度最低的一步是第三步
D. 在PCR反应缓冲液中加入Mg°的作用是激活耐高温的DNA聚合酶
三、非选择题（共5小题，每空2分，共50分）
41. 以鲜苹果汁为原料利用发酵瓶制作果酒和果醋的过程如图1所示，图2为发酵装置。请分析回答：
（1）家庭酿苹果酒时不需要添加酵母菌菌种，菌种来源是_______。
（2）图1中甲过程和乙过程利用的菌种在结构上最大的区别是前者_________。欲检测甲过程发酵样液中是否含有酒精，可以用________试剂来检验。
（3）若利用已制备的葡萄酒，继续使用图2装置制作葡萄醋，需改变的条件是______。（答出2点）
（4）市场上购买的真空包装酸菜，在没有漏气的状态下发生了“胀袋”现象，同学A怀疑是杂菌污染导致的，同学B怀疑是乳酸菌大量繁殖导致的，你支持谁的观点并说明理由_________。
42. 磷是植物生长的重要元素，施入土中的磷大多数与Ca2+等离子结合形成难溶性磷酸盐。科研人员从贡柑果园土中选出可以将难溶性或不溶性磷转化成可溶性磷的高效解磷菌，主要流程见下图，请回答下列问题：
（1）经步骤③最后一次稀释之后若在3个平板上分别接入0.1mL稀释液，经适当培养后，得到的结果是：39、38、37，则每克土样中的活菌数为_______个。
（2）通常情况下，对获得的纯菌种可以依据_________对细菌进行初步的鉴定和分类。
（3）为进一步测定初步筛选的三种菌株实际溶解磷的能力，研究人员将它们接种到基础培养基中，并在37℃、200r·min-1摇床培养，定期取上清液，测定溶液中可溶性磷含量。用摇床进行培养的好处是_____。（答出2点）获得纯淀粉分解菌的关键是_______。
（4）图5的接种方法中接种环至少需要灼烧________次。
43. 不对称体细胞杂交是指利用射线破坏染色质的供体细胞，与未经射线照射的受体细胞融合，所得融合细胞含受体全部遗传物质及供体部分遗传物质。科研人员用大剂量的X射线处理拟南芥（2n=10）的原生质体，然后诱导其与柴胡（2n=12）的原生质体融合，最终获得不对称杂种植株。回答下列问题：
（1）为获得拟南芥和柴胡的原生质体，可将流水冲洗后的外植体进行消毒，消毒后的外植体用小刀切碎，放入含有______酶的缓冲液中，以获得原生质体。植物体细胞杂交成功的标志是_______。
（2）可采用二乙酸荧光素（FAD）法测定原生质体活力，已知FAD本身无荧光，当其进入细胞后可被酯酶分解为无毒、具有荧光的物质，该荧光物质不能透过细胞膜，会留在细胞内发出荧光。据此应选择______（“发出荧光”“不发荧光”）的原生质体用于融合。
（3）科研人员对获得的部分植株细胞进行染色体观察、计数和DNA分子标记鉴定，统计结果如下表所示：
由表可知，后代植株中_______类型一定不是杂种植株。科研人员推测杂种植株的染色体主要由柴胡亲本来源的染色体组成，拟南芥亲本的遗传物质可能不是以染色体的形式存在于杂种植株细胞中，而是以DNA片段的方式整合进柴胡的基因组，作出以上推测的依据是_______。
44. 青岛农业大学科研人员从一只成年雌性森林猫皮肤组织中分离培养得到成纤维细胞，将该细胞的细胞核移入中华田园猫的卵母细胞，构建重组细胞，然后经人工激活后获得多枚体细胞克隆胚胎。将克隆胚胎移植到受体母猫中，经过62天孕育，成功得到一只森林猫体细胞克隆后代。请回答下列相关问题：
（1）在构建重组细胞前，要对成年雌性森林猫皮肤组织中分离得到的成纤维细胞进行动物细胞培养，培养时需提供适宜的气体环境，其中CO2的作用是_____。培养时要定期更换培养液，目的是______。
（2）猫泛白细胞减少症也叫猫瘟热，该病是由猫泛白细胞减少症病毒引起的猫（特别是幼龄猫）的一种发热性高度接触性、致死性传染病，而抗猫泛白细胞减少症病毒单克隆抗体的应用会大大降低该病毒引起的死亡率。下图为用小鼠制备该单克隆抗体的简图，若甲细胞为小鼠骨髓瘤细胞，则乙细胞为_______。①②筛选的目的分别是________。
45. 工程菌是指用基因工程的方法，使外源基因得到高效表达的菌类细胞株系。下图是利用大肠杆菌生产人胰岛素过程中使用的质粒及目的基因的部分结构。
（1）启动子是_____的识别和结合部位。图中胰岛素基因以_____链作为模板进行转录。
（2）构建基因表达载体时一般至少需要两种限制酶，以防止____和目的基因与质粒的反向连接。为了使目的基因与载体能正确连接，需要在引物的____端添加限制酶_____的识别序列。选项
实验
乙醇的作用
A
DNA粗提取与鉴定
溶解DNA，初步分离DNA与蛋白质
B
微生物的纯培养
工作台和接种工具的灭菌
C
绿叶中的色素的提取和分离
分离绿叶中的色素
D
低温诱导染色体数目加倍
洗去卡诺氏液并参与组成解离液
后代植株类型
染色体数目形态
DNA分子标记鉴定
甲
12，与柴胡染色体相似
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乙
12，与柴胡染色体相似
无拟南芥DNA片段
丙
12，与柴胡染色体相似
含双亲DNA片段和新的DNA片段
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