青神中学校2023-2024学年高二下学期期中考试生物试卷(含答案)

这是一份青神中学校2023-2024学年高二下学期期中考试生物试卷(含答案)，共20页。试卷主要包含了单选题，多选题，填空题，读图填空题，实验探究题等内容，欢迎下载使用。

一、单选题
1．以下是以泡菜坛为容器制作泡菜时的4个处理：①沸盐水冷却后再倒入坛中；②盖好坛盖后，向坛盖边沿的水槽中注满水；③盐水需要浸没全部菜料；④检测泡菜中亚硝酸盐的含量。下列说法错误的是( )
A.①主要是为了防止菜料表面的乳酸杆菌被杀死
B.②是为了使气体只能进入泡菜坛而不能排出
C.③的主要目的是提供无氧环境
D.④可检测到完整发酵过程中亚硝酸盐含量先升高后降低
2．芘（C16H10）是一种高分子多环芳烃（PAH），普遍存在于污染的环境中，其分子结构是强致癌物质苯并芘的基础。研究人员从海洋湿地中分离了一株花降解菌（DFA1），并研究其降解效率。已知含芘的培养基不透明，该培养基上形成的单菌落大小基本一致，下列叙述错误的是( )
A.富集培养DFA1的培养基中应加入适量的芘和琼脂
B.DFA1降解芘能力的强弱可以用透明圈的大小来表示
C.与显微镜直接计数法相比，稀释涂布平板法更适合统计活菌数
D.应选择菌落数在30~300之间的平板对DFA1菌落计数
3．某种物质S（一种含有C、H、N的有机物）难以降解，会对环境造成污染，只有某些细菌能降解S。研究人员按照图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解S的细菌菌株。实验过程中需要甲、乙两种培养基，甲的组分为无机盐、水和S，乙的组分为无机盐、水、S和Y。下列相关叙述正确的是( )
A.甲、乙培养基都以物质S为唯一的碳源和氮源
B.甲培养基中进行的是扩大培养，扩大培养后稀释度数越低越好
C.乙为固体培养基，所以配制乙培养基时不应加入水
D.多次筛选的过程是诱导细菌发生基因突变，产生高效降解S的菌株
4．下列关于发酵工程的叙述，错误的是( )
A.由谷氨酸棒状杆菌发酵可得到谷氨酸，谷氨酸经一系列处理后可制成味精
B.利用发酵工程生产的微生物农药，可以作为生物防治的重要手段
C.从人工培养的微生物菌体中提取的蛋白质——单细胞蛋白，可作为食品添加剂
D.将乙型肝炎病毒的抗原基因转入酵母菌，再通过发酵可生产乙型肝炎疫苗
5．如图是科学家采用不同方法培育良种牛的过程，a~h为操作过程。下列说法正确的是( )
A.A、B、C牛均为雄性
B.图中d、f均代表胚胎移植，它是胚胎工程的最终技术环节
C.c要注意将桑葚胚的内细胞团均等分割
D.图中涉及体外受精、动物细胞核移植、胚胎分割、胚胎移植等多项技术
6．辣椒的辣椒素是食品调味料的重要成分之一，辣椒素可通过下图途径获得，下列叙述正确的是( )
A.①过程需对外植体进行灭菌以防止后续培养过程中杂菌污染，且有利于获得脱毒苗
B.图中所示的愈伤组织是未分化的有固定形态的薄壁组织团块，具备较强的分裂分化能力
C.若在细胞分离过程中使用盐酸进行解离，则植物细胞继续增殖前需再生细胞壁
D.在脱分化过程中一般不需要光照，在再分化过程中光照可诱导植物形态建成
7．为了培育菊花新品种，科学家利用二倍体野生夏菊和六倍体栽培秋菊进行杂交，培育过程如下图所示。下列有关叙述正确的是( )
A.野生夏菊和栽培秋菊通过植物体细胞杂交得到四倍体植株
B.d植株含有夏菊和秋菊的遗传物质，形成d植株的过程中，遗传物质的传递遵循孟德尔的遗传规律
C.①过程常选择酶解法去除细胞壁，一般在等渗溶液中进行
D.与②过程有关的细胞器只有高尔基体比较活跃
8．中药藿香长期种植会出现种质退化、易感染病虫害等问题。为解决这些问题，研究者对组织培养过程中不同阶段的藿香进行了辐射处理（如图），以期获得性状优良的突变株。下列叙述正确的是( )
A.筛选出目标突变株后可利用植物组织培养技术生产药用成分
B.过程①在接种前，外植体常用无水乙醇和次氯酸钠溶液消毒
C.②③④过程添加的植物激素种类、浓度和比例均不相同
D.组织培养过程中细胞分裂旺盛，辐射处理易发生定向突变
9．为了检测药物X、Y和Z的抗癌效果，采用细胞培养板添加溶于DMSO溶剂的三种药物培养肺癌细胞，培养过程及结果如图所示。下列说法正确的是( )
A.细胞培养液中通常需要加入一定量的血清和抗生素，防止病毒污染
B.对照组中应将药物换成等体积的生理盐水
C.起始肺癌细胞数量应保持一致，计数前应用胃蛋白酶处理贴壁细胞
D.根据实验结果，药物X的抗癌效果比Y好，药物Z没有抗癌作用
10．华蟾素注射液是我国经典抗肿瘤药物，研究人员为探寻华蟾素注射液抗肝癌HepG—2细胞的作用机理，用华蟾素注射液和肝癌HepG—2细胞进行了一系列实验，结果如图所示。下列叙述错误的是( )
A.为防止细胞培养过程发生污染，培养液中要加入抗生素
B.每隔一段时间需更换1次培养液，目的是防止代谢物积累对细胞自身造成危害
C.据图甲可知，华蟾素能有效地抑制肝癌HepG—2细胞增殖，且只与浓度呈正相关
D.图乙的结果进一步表明，华蟾素的作用机理可能是抑制肝癌HepG—2细胞的DNA分子复制
11．2017年，我国科学家首次培育了体细胞克隆猴，这一成果在科学界引起了轰动。培育克隆猴的流程如图所示。下列说法正确的是( )
A.体细胞克隆猴的线粒体DNA都来自去核的卵母细胞
B.体细胞克隆猴的培育成功体现了动物体细胞的全能性
C.组蛋白的甲基化水平降低和乙酰化水平升高可提高重构胚的发育率
D.图中采集的卵母细胞应在获能液中培养至减数分裂Ⅱ中期（MⅡ期）
12．pSTAT3是调控胚胎发育的关键基因，某实验室通过提高小鼠胚胎干细胞pSTAT3基因的表达水平，体外制备了桑葚胚样全潜能细胞。该细胞在分子水平及发育潜能上均具有自然胚胎桑葚胚期细胞特性，并在体外成功模拟了小鼠胚胎发育至原肠胚阶段的过程。下列相关说法错误的是( )
A.桑葚胚样细胞可诱导发育至囊胚期
B.诱导桑葚胚样细胞时，基因的碱基序列和表达的情况都发生改变
C.将囊胚期细胞重置至桑葚胚样细胞的过程类似于脱分化
D.据此推测，桑葚胚发育成囊胚的过程中，pSTAT3的表达降低
13．通过生物技术与工程可以按照人们预先设计的生物蓝图改造或重新创造设计细胞的遗传物质，培育出新品种，以工业规模制造产品。下列相关叙述正确的是( )
A.在植物体细胞杂交中，可采用质壁分离实验检测制备的原生质体的活性情况
B.在生产单克隆抗体的过程中，获得的杂交瘤细胞能产生多种针对同一抗原的抗体
C.利用动物体细胞核移植的方法得到克隆动物是培育新物种的一种方式
D.将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组生产低乳糖牛奶，涉及基因工程、胚胎工程技术
14．下列关于生物工程和技术的表述错误的是( )
A.杂交瘤细胞制备过程中，可用灭活的病毒诱导细胞融合
B.胚胎移植中，供体和受体相当于双亲中的父本和母本
C.PCR的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定，需要在紫外灯下观察
D.用PCR技术扩增目的基因时，不需要提前知道基因的全部序列
15．CBF基因控制合成的转录因子能够特异性结合抗冻基因的启动子区，从而激活抗冻基因的表达，以提高植物的抗寒性。现需要将CBF基因与抗冻基因表达载体连接后导入植物细胞，已知Klenw酶具有DNA聚合酶活性，可以将黏性末端补平。CBF基因和抗冻基因表达载体上的酶切位点以及相关限制酶识别序列及切割位点如图所示，则在载体构建过程中需要的酶的种类至少有( )
A.4种B.5种C.6种D.7种
16．在草莓脱毒苗组织培养过程中，诱导生根是很重要的一步。研究生根培养的过程中，不同培养基和NAA浓度对草莓脱毒苗生根情况的影响结果如表所示，下列相关说法错误的是( )
(注：1/2MS培养基指微量元素减少一半的MS培养基)
A.将消毒后的茎尖置于无菌培养基中诱导其出现愈伤组织
B.与MS培养基相比，1/2MS培养基更适合草莓脱毒苗脱分化生根
C.在1/2MS培养基中，使用NAA促进脱毒苗生根效果更显著
D.茎尖等分生区部位的细胞几乎不含病毒，可培育出脱毒苗
17．为了制备鹅细小病毒VP2蛋白的特异性单克隆抗体，科研人员构建了含有融合基因（VP2基因与一段引导序列NES）的大肠杆菌表达载体，受体细胞经过诱导后能表达VP2蛋白并将其分泌到细胞外。利用纯化的VP2蛋白免疫小鼠，采用杂交瘤技术制备了3株可稳定分泌VP2蛋白的单克隆抗体（VP2单抗）的杂交瘤细胞株。下列叙述错误的是( )
A.引导序列NES的作用可能是介导VP2蛋白分泌到细胞外
B.VP2单抗的制备利用了重组DNA技术、细胞融合等技术
C.体外培养该免疫小鼠的单个B淋巴细胞也能得到VP2单抗
D.VP2单抗可用于鹅细小病毒病的诊断和治疗
18．中国科学院团队在猪体内培育人源中期肾脏，人源细胞高达70%，验证动物体内再造人体器官可行性。该过程通过构建的高分化潜能、强增殖及抗凋亡能力的多能干细胞移植到肾脏缺陷猪模型中，最终成功在嵌合体猪体内再生了人源中肾（如图所示）。下列说法错误的是( )
A.过程①中，需提高MYCN和BCL2的表达量
B.过程②需要将抗凋亡的人源iPS细胞植入囊胚并放在充满CO2的培养箱中培养
C.移植后胚胎的发育受母体激素影响，同时也影响母体激素分泌
D.最终获得的嵌合体猪各体细胞的基因型一般不相同
19．下列关于基因工程的叙述，正确的是( )
A.若受体大肠杆菌含有构建重组质粒时用到的限制性核酸内切酶，则一定有利于该重组质粒进入受体并保持结构稳定
B.抗除草剂基因转入某抗盐植物获得2个稳定遗传转基因品系，抗性鉴定为抗除草剂抗盐和抗除草剂不抗盐。表明一定是抗盐性的改变与抗除草剂基因的转入无关
C.抗除草剂基因转入某植物获得转基因植株，其DNA检测均含目的基因，抗性鉴定为抗除草剂和不抗除草剂。表明一定是前者表达了抗性蛋白而后者只表达抗性基因RNA
D.已知不同分子量DNA可分开成不同条带，相同分子量的为一条带。用某种限制性核酸内切酶完全酶切环状质粒后，出现3条带。表明该质粒上一定至少有3个被该酶切开的位置
20．研究发现，胰岛素进入血液循环后容易被降解，糖尿病患者需要反复注射胰岛素才能达到治疗效果。科研人员借助蛋白质工程改变了胰岛素中的某些氨基酸，提高了胰岛素在患者体内的稳定性，延长了其作用时间。下列有关叙述错误的是( )
A.蛋白质工程的实质是在DNA分子水平上进行设计和改造
B.氨基酸序列的差异是影响胰岛素在患者体内是否稳定的原因之一
C.改造胰岛素应首先从设计胰岛素基因中的脱氧核苷酸序列出发
D.蛋白质工程难度很大与蛋白质发挥功能必须依赖于正确的高级结构有关
21．2022年1月7日，马兰里医学中心成功将猪心脏移植到一名57岁的心脏病患者身上，虽然这颗心脏仅仅存活了2个月，但仍然为异种器官移植的可行性提供了可观的数据。为了降低免疫排斥反应，研究者借助CRISPR/Cas9技术对移植的猪心脏进行了基因编辑。CRISPR/Cas9系统主要由向导RNA（sgRNA）和Cas9蛋白两部分组成，sgRNA可引导Cas9蛋白到特定基因位点进行切割、其机制如图所示。下列说法错误的是( )
A.sgRNA通过与目标DNA序列互补配对引导Cas9蛋白到位.
B.有时sgRNA会因错误结合而出现“脱靶”现象，一般sgRNA序列越短，脱靶率越低
C.Cas9蛋白作用于磷酸二酯键
D.通过CRISPR/Cas9技术敲除猪心脏的某个抗原蛋白基因，至少需要设计两个序列不同的sgRNA
22．青霉素是世界上第一个应用于临床的抗生素。研究人员发现青霉素生产菌的发酵过程是高耗氧的，并且发酵过程中总有头孢霉素产生。下列叙述错误的是( )
A.青霉素发酵过程中需要对温度、pH、溶解氧、通气量等指标进行监测和控制
B.青霉素属于抗生素可以杀死细菌，在青霉素生产过程中不会发生杂菌污染
C.可利用转基因技术将血红蛋白基因转入青霉素生产菌来提高菌体对氧的吸收
D.可以通过对某种基因进行改造或敲除，实现使青霉素生产菌只生产头孢霉素
二、多选题
23．小米具有丰富的营养价值，某工厂的技术人员欲利用乳酸菌和酵母菌进行发酵，开发一款特殊风味的饮品。下图为不同温度及不同乳酸菌与酵母菌比例下发酵实验测得的相关结果。下列叙述正确的是( )
A.通过图1测得的酒精含量变化，可推测发酵过程中酵母菌的种群数量先升高后降低
B.将发酵温度控制在34℃可缩短生产周期，乳酸菌和酵母菌在该温度繁殖速度均较快
C.生产上可将乳酸菌和酵母菌按照2：1比例接种，可溶性固形物含量较低、口感较好
D.两种菌的细胞结构有较大差异，代谢类型也不同，发酵过程中需持续通入无菌空气
24．苏云金杆菌是杀灭玉米螟的重要生物，灭蚊球孢菌具有杀灭蚊子的效能，某人将这两种菌的原生质体融合获得既能杀蚊又能杀螟的新菌株，过程见下图。微生物原生质体的获得等过程和植物的类似。下列叙述错误的是( )
A.①试管中加入PEG的目的是诱导A、B原生质体融合及细胞壁再生
B.图中过程与植物体细胞杂交过程相比，去壁方法、诱导融合的方法、所依据的原理均完全相同
C.离心洗涤后向培养液中加入的酶可能是溶菌酶，目的是溶解细菌的细胞壁以获得原生质体
D.图中的甲实验和乙实验是指灭蚊实验和杀灭玉米螟实验，获得的融合株染色体数目加倍
25．为了获得抗蚜虫棉花新品种，研究人员将雪花莲凝集素基因（GNA）和尾穗苋凝集素基因（ACA）与载体（pBI121）结合，然后导入棉花细胞（如图所示）。下列操作与实验目的相符的是( )
A.用限制酶BsaBⅠ和DNA连接酶处理两种基因可获得GNA-ACA融合基因
B.用KpnⅠ和XhⅠ两种酶处理融合基因和载体可保证基因转录方向正确
C.将棉花细胞接种在含氨苄青霉素的培养基上可筛选出转基因细胞
D.用PCR技术可检测GNA和ACA基因是否导入棉花细胞中
三、填空题
26．赖氨酸是人体必需氨基酸之一，它能促进人体的发育，增强免疫力并有提高中枢神经功能的作用。由于人类的主要食物中赖氨酸含量很低，故称为第一限制性的氨基酸。人们尝试利用生物技术来提高食物中赖氨酸含量。请回答下列问题：
（1）植物细胞合成的赖氨酸达到一定浓度时，能抑制合成过程中两种关键酶的活性，导致赖氨酸含量维持在一定浓度水平，这种调节机制属于___________，据此，在培养基中添加一定量的_____________可用于筛选得到抗赖氨酸类似物的细胞突变体，再通过__________技术获得再生植株。
（2）利用转基因和体细胞核移植技术培育高产赖氨酸转基因克隆奶牛，其基本流程为：
①构建乳腺专一表达载体，首先获取富含赖氨酸的酪蛋白基因(目的基因)，再将目的基因与含有____________________________________启动子的相应载体连接，构建出乳腺专一表达载体，
②表达载体转入牛胚胎成纤维细胞(BEF)。
③核移植。将_________________________________作为核供体细胞，从牛卵巢获取卵母细胞，经体外培养成熟，去核后作为受体细胞，将两种细胞进行电融合。
④重组细胞的体外培养及胚胎移植。重组细胞体外培养至___________期，植入代孕母牛子 宫，直至小牛出生。
⑤检测。利用___________技术，可检测到目的基因在转基因牛的耳组织细胞和乳腺细胞中的表达情况依次是_____________、___________。
四、读图填空题
27．某些植物根际促生菌具有生物固氮、分解淀粉和抑制病原菌等作用。回答下列问题：
（1）若从植物根际土壤中筛选分解淀粉的固氮细菌，培养基的主要营养物质包括水和____。
（2）现从植物根际土壤中筛选出一株解淀粉芽孢杆菌H，其产生的抗菌肽抑菌效果见表。据表推测该抗菌肽对_________________的抑制效果较好，若要确定其有抑菌效果的最低浓度，需在__________μg·mL-1浓度区间进一步实验。
注：“+”表示长菌，“-”表示未长菌。
（3）研究人员利用解淀粉芽孢杆菌H的淀粉酶编码基因M构建高效表达质粒载体，转入大肠杆菌成功构建基因工程菌A。在利用A菌株发酵生产淀粉酶M过程中，传代多次后，生产条件未变，但某子代菌株不再产生淀粉酶M。分析可能的原因是______（答出两点即可）。
（4）研究人员通过肺上皮干细胞诱导生成肺类器官，可自组装或与成熟细胞组装成肺类装配体，如图所示。肺类装配体培养需要满足适宜的营养、温度、渗透压、pH以及_____（答出两点）等基本条件。肺类装配体形成过程中是否运用了动物细胞融合技术___（填“是”或“否”）。
（5）耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）是一种耐药菌，严重危害人类健康。科研人员拟用MRSA感染肺类装配体建立感染模型，来探究解淀粉芽孢杆菌H抗菌肽是否对MRSA引起的肺炎有治疗潜力。以下实验材料中必备的是______。
①金黄色葡萄球菌感染的肺类装配体
②MRSA感染的肺类装配体
③解淀粉芽孢杆菌H抗菌肽
④生理盐水
⑤青霉素（抗金黄色葡萄球菌的药物）
⑥万古霉素（抗MRSA的药物）
五、实验探究题
28．接种疫苗是预防传染病的一项重要措施，乙肝疫苗的使用可有效阻止乙肝病毒的传播，降低乙型肝炎发病率。乙肝病毒是一种DNA病毒。重组乙肝疫苗的主要成分是利用基因工程技术获得的乙肝病毒表面抗原（一种病毒蛋白）。回答下列问题。
（1）接种上述重组乙肝疫苗不会在人体中产生乙肝病毒，原因是_________。
（2）制备重组乙肝疫苗时，需要利用重组表达载体将乙肝病毒表面抗原基因（目的基因）导入酵母细胞中表达。重组表达载体中通常含有抗生素抗性基因，抗生素抗性基因的作用是_________。能识别载体中的启动子并驱动目的基因转录的酶是_________。
（3）目的基因导入酵母细胞后，若要检测目的基因是否插入染色体中，需要从酵母细胞中提取_________进行DNA分子杂交，DNA分子杂交时应使用的探针是_________。
（4）若要通过实验检测目的基因在酵母细胞中是否表达出目的蛋白，请简要写出实验思路。
29．难治性幽门螺杆菌感染(RHPI)是指经过标准四联抗菌治疗≥3次后仍以失败告终的病例。中医药名方“半夏泻心汤”具有消炎抗菌、保护胃黏膜、调节肠道的作用。本实验探究半夏泻心汤分阶段综合治疗RHPI的效果。科研人员选取122例RHPI患者作为研究对象，随机平分成两组。实验过程如下表，并分别统计RHPI患者的幽门螺杆菌治疗情况(图1)和复感情况(图2)。
(1)部分RHPI患者使用抗菌药物效果不佳的可能原因是_________(写出一点)。
(2)本实验选取122例患者应在年龄、病程等特征上保持一致，是为了_________；实验组第三巩固阶段要用半夏泻心汤治疗_________周。
(3)据图可知采用半夏泻心汤治疗幽门螺杆菌的根除率为_________(用百分数表示，保留一位小数)；利用半夏泻心汤分阶段综合治疗RHPI_________(有效/无效)。
(4)半夏泻心汤中有一味药材是甘草，科研人员想继续探究甘草是否具有杀死幽门螺杆菌的作用，请写出实验思路：_________。
参考答案
1．答案：B
解析：
2．答案：A
解析：A、富集培养所用的培养基为液体培养基，液体培养基中要加入芘作为唯一的碳源，但是不能加入琼脂，A错误;
B、由于该培养基上形成的单菌落大小基本一致，所以DFA1降解芘能力的强弱可以用透明圈的大小来表示，透明圈越大，则降解能力越强，B正确;
C、显微镜直接计数法统计的是活菌和死菌的总数，一般稀释涂布平板法适合用于统计活菌数，C正确;
D、一般来说，稀释涂布平板法应选择菌落数在30~300之间的平板进行计数，D正确。
3．答案：A
解析：
4．答案：C
解析：A、由谷氨酸棒状杆菌发酵可得到谷氨酸，谷氨酸经一系列处理后可制成味精，A正确；
B、微生物农药是利用微生物或其代谢物来防治病虫害的，微生物农药作为生物防治的重要手段，将在农业的可持续发展方面发挥越来越重要的作用，B正确；
C、单细胞蛋白指的是微生物菌体本身，C错误；
D、一种生产乙型肝炎疫苗的方法就是将乙型肝炎病毒的抗原基因转入酵母菌，再通过发酵生产，可以大大提高生成效率，D正确。
故选C。
5．答案：B
解析：
6．答案：D
解析：A、①过程需对外植体进行消毒以防止后续培养过程中杂菌污染，且有利于获得脱毒苗，A错误;B、愈伤组织是一团没有特定结构和功能，排列疏松而无规则，高度液泡化的呈无定形状态的薄壁组织团块。愈伤组织是由外植体脱分化形成，它要经过再分化形成植物个体，因此愈伤组织是未分化的，具有分裂分化能力，B错误。C、盐酸会杀死细胞，不能用盐酸分离细胞，C错误;D、在脱分化过程中一般不需要光照，利于形成愈伤组织，再分化过程中光可诱导叶绿素的合成，可诱导植物形态建成，D正确。
7．答案：C
解析：A、夏菊是二倍体，栽培秋菊是六倍体，两者通过植物体细胞杂交得到的是八倍体植株，A错误；B、d植株含有夏菊和秋菊的遗传物质，形成d植株的过程中遗传物质的传递不遵循孟德尔的遗传规律，B错误；C、①表示通过酶解法去壁，为了防止原生质体变形，该过程需要在渗溶液中进行，C正确；D、②过程表示融合后的原生质体再生细胞壁形成杂种细胞c，较活跃的细胞器有高尔基体、线粒体，D错误。故选C。
8．答案：A
9．答案：D
解析：分析实验结果,加入药物X的组癌细胞是6.7×104个/孔,加入药物Y的组癌细胞是5.3×105个/孔,说明药物X的抗癌效果比Y好,加入药物Z的组癌细胞是8.0×106个/孔,与空白对照相近,说明药物Z无抗癌作用,D正确。
10．答案：C
解析：C项据图甲可知，华蟾素能有效地抑制肝癌HepG-2细胞增殖，与浓度和作用时间都呈正相关，C错误，故选C。
11．答案：C
解析：
12．答案：B
解析：A、胚胎发育的过程为受精卵→桑葚胚→囊胚→原肠胚→幼体，因此桑葚胚样细胞可诱导发育至囊胚期，A正确;
B、诱导桑葚胚样细胞时，基因的碱基序列并未发生改变，B错误;
C、胚胎发育至囊胚期即开始了细胞分化，因此囊胚期细胞重置至桑葚样细胞的过程类似于脱分化，C正确;
D、具体分析通过提高小鼠胚胎干细胞pSTAT3基因的表达水平，体外制备出桑葚胚样全潜能细胞，因此推断桑葚胚发育成囊胚的过程中，pSTAT3的表达下降，D正确。
13．答案：D
解析：A、在植物体细胞杂交中，需要去除细胞壁才能让原生质体融合，此时的细胞不能发生质壁分离现象，A错误;
B、生产单克隆抗体过程中，由于用一种抗原刺激小鼠，抗原和抗体特异性结合的原因，获得的杂交瘤细胞能够产生针对抗原的一种抗体，B错误;
C、动物体细胞核移植技术利用动物细胞核的全能性，属于无性繁殖，获得的动物不属于新物种，没有存在生殖隔离，C错误;
D、将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组生产低乳糖牛奶，涉及目的基因导入受体细胞等基因工程步骤，同时获得的受精卵需要通过胚胎工程培育长大，D正确。
14．答案：B
解析：B项,胚胎移植中,供体和受体相当于双亲中的母本和父本,故B项错误。
15．答案：C
16．答案：B
解析：
17．答案：C
解析：A、引导序列NES具有引导作用，其引导作用可能是介导VP2蛋白分泌到细胞外，A正确；
B、VP2单抗的制备过程涉及构建基因表达载体以及B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的融合，因此VP2单抗的制备利用了重组DNA技术、细胞融合等技术，B正确；
C、体外培养该免疫小鼠的单个B淋巴细胞会得到抗体，不能得到VP2单抗，C错误；
D、VP2单抗具有特异性强、灵敏度高、可大量制备等优点，可用于鹅细小病毒病的诊断和治疗，D正确。
故选C。
18．答案：B
解析：
19．答案：D
解析：本题考查基因工程的相关知识。若受体大肠杆菌含有构建重组质粒时用到的限制性核酸内切酶，则该限制性核酸内切酶可能会切割重组质粒，破坏重组质粒的结构，A错误；抗除草剂基因转入某抗盐植物后，一部分抗盐植株的抗盐性消失，说明抗除草剂基因的转入可能导致抗盐性改变，B错误；抗除草剂基因转入某植物后，若DNA检测含有目的基因，而抗性鉴定为不抗除草剂，其原因可能是目的基因转录出RNA但无法翻译，也可能是目的基因无法转录，还可能是翻译出来的蛋白质无活性，C错误；若环状质粒上有1个某种限制性核酸内切酶的酶切位置，则该环状质粒被该酶酶切后形成1个条带，若要形成2个条带，则该环状质粒上至少有2个该酶的酶切位置，若要形成3个条带，则该环状质粒上至少有3个该酶的酶切位置，D正确。
20．答案：C
解析：A、蛋白质工程的基本流程为：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有氨基酸序列→据氨基酸序列推出脱氧核苷酸序列（基因）→DNA合成，最终要利用基因工程上来解决蛋白质的合成，因此蛋白质工程的实质是在DNA分子水平上进行设计和改造蛋白质，A正确;
B、氨基酸序列差异，导致胰岛素的空间结构有所改变，影响了它的功能，B正确;
C、胰岛素属于蛋白质，改造胰岛素应首先从设计预期的蛋白质结构出发，C错误；
D、多数蛋白质除具有一级结构（即氨基酸顺序）外，还具有复杂的高级结构，即空间结构，而很多蛋白质的空间结构是人们目前还不清楚的，因此实施蛋白质工程的难度很大，D正确。
故选C。
21．答案：B
解析：B、据图,一个“CRISPR/Cas9系统”只能在DNA分子上切开一个切口。去除一个基因,需在该基因两端各有一个切口,需要设计两个“CRISPR/Cas9系统”,其sgRNA的序列不同,B错误。
22．答案：B
解析：A、青霉素发酵过程中需要适宜的温度和酸碱度等条件，需要对温度、pH、溶解氧、通气量等指标进行监测和控制，A正确；
B、青霉素属于抗生素可以杀死细菌，但是培养过程中也可能会有别的真菌或抗青霉素的细菌污染，B错误；
C、由于血红蛋白能够携带氧气，可以用基因工程的方法，将血红蛋白基因转入青霉素生产菌来提高菌体对氧的吸收和利用率，C正确；
D、利用基因工程对基因进行改造或敲除某种酶的基因，实现使青霉素生产菌只生产青霉素或者头孢霉素一种产物，D正确。
故选B。
23．答案：BC
解析：图1是在不同温度下测得的酒精含量随温度的变化，因此不能推测出发酵过程中酵母菌的种群数量变化情况,A项错误;酒精含量的变化可反映酵母菌数量,pH大小可反映乳酸菌数量，图1显示乳酸菌和酵母菌在34℃繁殖速度均较快，因此将发酵温度控制在该温度可缩短生产周期,B项正确;图2显示乳酸菌和酵母菌按照2:1比例接种,可溶性固形物含量较低、口感较好,生产上可按该比例接种,C项正确;乳酸菌为原核生物,酵母菌为真核生物，二者基本结构差异较大，乳酸菌为厌氧生物,酵母菌为兼性厌氧生物，二者代谢类型也不同,但发酵过程中需保持无氧环境,D项错误。
24．答案：ABD
解析：A、①试管中加入PEG的目的是诱导A、B原生质体融合，PEG不具有诱导细胞壁再生的作用，A错误;B、去除细菌细胞壁和植物细胞的细胞壁都可以用酶解法，但所用酶的种类不同;图中为细菌细胞的杂交过程，与植物体细胞杂交过程相比，诱导融合的方法不完全相同;图中过程与植物体细胞杂交所依据的原理均有细胞膜具有一定的流动性，但植物体细胞杂交还利用了植物细胞具有全能性的原理，将杂种细胞培育为杂种植物，B错误;C、溶菌酶可以溶解细菌的细胞壁。离心洗涤后向培养液中加入的酶可能是溶菌酶，目的是溶解细菌的细胞壁以获得原生质体，C正确;D、筛选到的融合株，还要从个体生物学水平检测其是否具有杀灭玉米螟和杀灭蚊子的能力，所以图中的甲实验和乙实验是指灭蚊实验和杀灭玉米螟实验，获得的融合株既有苏云金杆菌的基因，又有灭蚊球孢菌的基因，但这两种生物是原核生物，不含染色体，D错误。故选ABD。
25．答案：AD
解析：两个基因中都有限制酶BsaBⅠ的一个识别位点，用该限制酶切割后再用DNA连接酶可拼接成GNA-ACA融合基因，A正确；GNA-ACA融合基因的两端有限制酶KpnⅠ和XhⅠ的切割位点，而质粒上也有限制酶KpnⅠ和XhⅠ的切割位点，但方向不一致，用两酶切割，正好是反向连接目的基因和运载体，B错误；运载体上带有卡那霉素的抗性基因，没有氨苄青霉素的抗性基因，转基因细胞在含有氨苄青霉素的培养基上不能存活，C错误；用PCR技术扩增GNA和ACA基因后，再通过分子杂交或电泳的方式，可检测是否导入棉花细胞中，D正确。
26．答案：（1）负反馈调节赖氨酸类似物；植物组织培养
（2）①乳腺中特异表达的基因的；③转基因的BEF（转基因的牛胚胎成纤维细胞）；④桑葚胚或囊胚；⑤抗原-抗体杂交；不表达（阴性）；表达（阳性）
解析：（1）负反馈调节是指在一个系统中，系统工作的效果，反过来又作为信息调节该系统的工作，并且使系统工作的效果减弱或受到限制，有助于系统保持稳定。植物细胞合成的赖氨酸达到一定浓度时，能抑制合成过程中两种关键酶的活性，导致赖氨酸含量维持在一定浓度水平，这种调节方式属于负反馈调节。如果想得到抗赖氨酸类似物的细胞突变体可在培养基中添加一定浓度的赖氨酸类似物。筛选出来的细胞再利用植物组织培养技术，便要得到个体。
（2）目的基因要在乳腺生物反应器中表达，得要构建乳腺中特异表达的基因的启动子，因此要将目的基因与特异表达的基因的启动子相结合；以上构建的牛胚胎成纤维细胞(BEF)的细胞核中就含有目的基因，取其核与卵母细胞融合，再经体外早期胚胎培养，便可获得含目的基因的胚胎。重组的细胞，要培养至桑椹胚或囊胚才移植入代孕母牛子宫，直至小牛出生；如果基因表达载体构建成功且正确表达，则该基因在牛耳细胞中不表达，在乳腺细胞中可以表达，所以可以利用抗原-抗体杂交法检测相应的基因表达产物。
27．答案：（1）无机盐、淀粉
（2）金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌；1.73~3.45
（3）淀粉酶编码基因M发生突变；重组质粒在大肠杆菌分裂过程中丢失
（4）无菌、无毒环境，含95%空气和5%CO2的气体环境；否
（5）②③④⑥
解析：（1）固氮细菌能够自身固氮，培养基中不需要氮源，因此其培养基的主要营养物质包括水和无机盐、碳源等。
（2）分析表格可知，抗菌肽在1.73～3.45μg·mL-1最低浓度区间，金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌都不能生长，因此在1.73~3.45μg·mL-1浓度区间进一步筛选，筛选其抑菌效果的最低浓度。
（3）在利用A菌株发酵生产淀粉酶M过程中，传代多次后，生产条件未变，但某子代菌株不再产生淀粉酶M，原因可能是①淀粉酶编码基因M可能发生突变；②生产淀粉酶M菌株，传代多次产生的某些子代细胞中基因M发生甲基化，不能表达。
（4）动物细胞培养需要适宜的营养、温度、渗透压、pH以及无菌无毒环境、含95%空气和5%二氧化碳气体环境等条件。由图示可知，肺类装配体形成过程中没有利用动物细胞融合技术。
（5）耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）是一种耐药菌，可引起肺炎。本实验目的是拟用MRSA感染肺类装配体建立感染模型，来探究解淀粉芽孢杆菌H抗菌肽是否对MRSA引起的肺炎有治疗潜力，因此必须有MRSA感染的肺类装配体的感染模型、解淀粉芽孢杆菌H抗菌肽，另外还需要设置用万古霉素（抗MRSA的药物）与解淀粉芽孢杆菌H抗菌肽对照，观察二者对MRSA引起的肺炎治疗效果。故选：②③⑥。
28．答案：（1）重组乙肝疫苗成分为蛋白质，无法独立在宿主体内增殖
（2）筛选；RNA聚合酶
（3）核染色体DNA；被标记的目的基因的单链DNA片段
（4）通过使用相应抗体，利用抗原-抗体杂交技术，检测mRNA是否翻译形成蛋白质
解析：（1）重组乙肝疫苗的成分是乙肝病毒表面的一种病毒蛋白。蛋白质注入人体后，无法完成病毒遗传物质的复制与蛋白质的合成，无法独立增殖，
（2）抗生素抗性基因作为标记基因，用于转化细胞的筛选。RNA聚合酶结合目的基因启动子并驱动转录。
（3）检测的对象是目的基因是否插入染色体中，故提取酵母细胞染色体进行目的基因鉴定。基因探针是一段带有检测标记，且顺序已知的，与目的基因互补的核酸序列。
（4）要检出目的基因是否表达，除了需要检测目的基因是否插入染色体外，还需要检查目的基因是否转录与表达。检测是否转录，用核酸分子杂交技术，检测是否翻译用抗原-抗体杂交技术。
29．答案：(1)部分患者感染的是药物不敏感型幽门螺杆菌
(2)排除无关变量对实验结果的影响；4/四
(3)88.5%；有效
(4)配置培养幽门螺杆菌的培养基，经灭菌后平均分为两组，一组加入灭菌后的甘草，另一组加入等量的无菌水，两组用涂布法接种等量的幽门螺杆菌，在适宜条件下培养，一段时间后观察两组培养基上菌落的数量
组别
培养基类型
NAA浓度/（mg•L-1）
平均生根数/条
1
MS
0.0
2.47
2
MS
0.1
2.87
3
1/2MS
0.0
5.53
4
1/2MS
0.1
6.80
测试菌
抗菌肽浓度/（µg·mL-1）
55.20
27.60
13.80
6.90
3.45
1.73
0.86
金黄色葡萄球菌
-
-
-
-
-
+
+
枯草芽孢杆菌
-
-
-
-
-
+
+
禾谷镰孢菌
-
+
+
+
+
+
+
假丝酵母
-
+
+
+
+
+
+
第一准备阶段
第二关键阶段
第三巩固阶段
对照组
铝碳酸镁片；双歧杆菌三联活菌胶囊枸橼酸莫沙必利片复方消化酶胶囊
四联抗菌治疗：阿莫西林胶囊、雷贝拉唑钠肠溶片胶体果胶铋胶囊克拉霉素片
前两周持续服用双歧杆菌三联活菌胶囊；后两周持续服用胶体果胶铋胶囊
实验组
半夏泻心汤治疗
四联抗菌治疗(同上)
半夏泻心汤治疗