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2024南京六校联合体高二下学期5月月考试题生物含答案
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这是一份2024南京六校联合体高二下学期5月月考试题生物含答案，文件包含六校联合体高二下期中调研生物试卷docx、六校联合体高二下期中调研生物试卷答案pdf、六校联合体高二下期中调研生物答题卡pdf等3份试卷配套教学资源，其中试卷共11页， 欢迎下载使用。
一、单项选择题：本部分包括14题，每题2分，共计28分。每题只有一个选项最符合题意，请将答案填涂在答题卡中。
1. 下列关于制作传统发酵食品的叙述，错误的是
A．制作腐乳利用了毛霉等微生物产生的蛋白酶、脂肪酶等
B．发酵温度过低可能会导致泡菜“咸而不酸”
C．将玻璃瓶用酒精消毒后，装满葡萄汁进行发酵
D．制作果醋时，醋酸菌能以乙醇作为碳源和能源
2．下图为啤酒生产的主要流程，相关叙述错误的是
A．粉碎麦芽的目的是有利于麦芽中的淀粉与淀粉酶充分接触促进糖化过程
B．加入酒花的主要目的是提供酵母菌菌种有利于主发酵进行并产生大量酒精
C．麦汁煮沸的主要目的是抑制糖化过程后残留酶的活性同时杀死麦汁中微生物
D．主发酵结束后发酵液还要在低温密闭的环境下储存一段时间才能形成成熟啤酒
3．下图表示用马铃薯琼脂培养基对酵母菌纯培养的结果，有关叙述正确的是
A．培养基的制备流程为：计算→称量→溶化→定容→灭菌→调pH→倒平板
B．用高压蒸汽灭菌法灭菌结束后，待培养基冷却至50℃左右开始倒平板
C．用平板划线法接种可获得图示培养结果，接种过程中接种环需要灼烧3次
D．用液体培养基能提高目的菌对营养物质的利用效率以及分离的成功率
4．研究者对组织培养过程中不同阶段的藿香进行了辐射处理（如下图），以期获得性状优良的突变株。下列叙述正确的是
A．愈伤组织细胞分化程度低，辐射处理易发生定向突变
B．过程①中外植体通常用无水乙醇和次氯酸钠溶液进行消毒
C．过程②使细胞失去了特有的结构和功能，降低了细胞的全能性
D．筛选出目标突变株后可利用植物细胞培养技术生产药用成分
5．某科学小组探索长寿花组织培养过程中外植体的消毒条件，实验结果如下表。下列分析错误的是
注：褐化是指培养材料在组培过程中向培养基中释放褐色物质，并变褐死亡的现象。
A．消毒处理时间越长，组织培养成功率越高
B．消毒处理时间越长，外植体的污染率越低
C．诱导培养外植体脱分化为愈伤组织的过程中一般不需要光照
D．组织培养过程中提高生长素与细胞分裂素的比例有助于生根
6．灌流式培养是在细胞培养管内，一边不断注入新鲜培养基，一边将培养液的上清液不断移出。关于灌流式培养的叙述正确的是
A．灌流速率越高，营养物质利用越充分
B．连续灌流系统使细胞稳定处在较好的营养环境中，有害代谢废物浓度较低
C．制备灌流式培养所需的培养基不需要考虑培养基的渗透压
D．向培养管注入的新鲜培养基中补充动物血清是为了防止杂菌污染
7．干细胞治疗被认为是未来医学的新支柱。下列叙述正确的是
A．干细胞有多种类型，它们存在于从胚胎到成体的各个阶段
B．胚胎干细胞的核质比小，物质运输效率高
C．iPS细胞具有组织特异性，只能分化成特定的细胞或组织
D．iPS细胞分化为神经元细胞的过程体现了细胞的全能性
8．下列有关哺乳动物受精过程和胚胎早期发育的叙述，选项中正确的有几项
①动物排出的卵子成熟程度不同，但都需要到MII期时才能受精
②自然情况下，在雌性动物的子宫内精子进入卵细胞完成受精过程
③获能的精子与卵细胞相遇时，会引起透明带反应和卵细胞膜反应
④受精卵在输卵管内进行卵裂时，胚胎总体积并不增加，细胞数量增加
⑤原肠胚时期三个胚层的形成是由遗传物质改变引起的
A．1项B．2项C．3项D．4项
9．下图表示研究人员利用胚胎工程培育优质奶牛的过程，下列叙述正确的是
A．通过过程①-⑤培育优质奶牛的过程与克隆牛的原理相同
B．在胚胎发育中，桑葚胚时期的胚胎会从透明带中伸展出来
C．③代表胚胎分割，需均等分割原肠胚的内细胞团，以免影响胚胎发育
D．⑤代表胚胎移植，胚胎移植能否成功，与供体和受体的生理状态有关
10．下图表示“DNA的粗提取与鉴定”实验中的两个操作步骤，下列叙述错误的是
A．可以用菜花、洋葱、猪肝等作为实验材料粗提取DNA
B．图中的丝状物是粗提取的DNA，溶液b是2ml/L的NaCl溶液
C．图l操作的原理是DNA能溶于酒精，而蛋白质等杂质不溶于酒精
D．图2所示实验的结果是试管1不变蓝，试管2变蓝色
11．DNA重组技术中需要使用工具酶。下列叙述正确的是
A．限制性内切核酸酶主要是从病毒中分离纯化而来
B．真核细胞中任意一个DNA片段都能被限制酶切割
C．被SmaI酶切割后的DNA可以用T4DNA连接酶连接
D．DNA连接酶可以将游离的单个脱氧核苷酸连接成链
12．下列有关目的基因导入受体细胞和检测与鉴定的叙述，正确的是
A．用Ca2＋处理植物细胞有利于重组Ti质粒的导入
B．对目的基因进行扩增时，通过荧光标记技术实时定量测定产物的量
C．将某种药用蛋白基因导入动物乳腺细胞中可获得乳腺生物反应器
D．验证转基因抗虫棉是否成功时，通过RNA分子标记检测目的基因是否表达
13．下图是PCR扩增目的基因时的参数设定，图中线上、线下分别为温度和时间设定。下列叙述错误的是
A．步骤2的温度及时间设定主要保障模板DNA的完全解聚
B．步骤3的温度及时间设定主要依据引物的长度及G、C含量
C．步骤4延伸时间的设定主要依据目的基因的碱基数目
D．步骤5除设定循环次数（25次）外，还应将“GOTO”设定为步骤3
14．下图表示应用基因工程技术生产干扰素的三条途径，下列相关叙述错误的是
A．途径甲中，过程Ⅰ应将干扰素基因和乳腺中特异表达的基因的启动子重组
B．途径乙中，过程Ⅱ一般所采用的方法是农杆菌转化法
C．途径丙中，过程Ⅱ可用Ca2+处理大肠杆菌，以制备感受态细胞
D．三条途径中，由于使用的目的基因相同，表达出的干扰素结构也完全相同
二、多项选择题：本部分包括4题，每题3分，共计12分。每题有不止一个选项符合题意，全选对者得3分，选对但不全的得1分，错选或不答的得0分，请将答案填涂在答题卡中。
15．科研人员从木材场土壤中筛选分离出木质素分解菌，实验流程如下图所示。已知木质素能与苯胺蓝结合形成蓝色复合物，采用含苯胺蓝培养基筛选得到了如图⑥所示的菌落。下列有关叙述正确的是
A．图示操作过程共将土壤稀释了10000倍
B．图示所用的接种方法是平板划线法，且接种后需倒置培养
C．图⑥中所用的培养基以木质素为唯一碳源，其上的菌1∽5均为异养型
D．若要进一步筛选降解木质素能力强的菌株，可以从图⑥中菌3获取
16．甲品种青花菜具有由核基因控制的多种优良性状，但属于胞质雄性不育品种。通过体细胞杂交，成功地将乙品种细胞质中的可育基因引入甲中，如图为该操作示意图。下列相关叙述错误的是
A．过程B常用的诱导方法有灭活病毒诱导法、电融合法、聚乙二醇（PEG）诱导法
B．杂种细胞再生出细胞壁是细胞融合成功的标志，融合成功之后再进行组织培养
C．原生质体融合依赖生物膜的流动性，融合原生质体需放在无菌水中以防杂菌污染
D．筛选出的杂种植株含有控制甲青花菜优良性状的基因，可通过母本或父本进行传递
17．畜牧业上可通过下图两种途径实现良种牛的快速大量繁殖。下列叙述错误的是
A．图中的激素处理是用添加促性腺激素的饲料使雌牛超数排卵
B．为提高体外受精成功率，新采集的精子应直接用于体外受精
C．途径2进行胚胎移植前，不要对供体和受体进行免疫检查
D．途径1和途径2过程中都有胚胎的形成，均为有性生殖
18．用A和B两种限制酶同时和分别处理同一DNA片段，假设限制酶对应切点一定能切开。两种酶切位点及酶切产物电泳分离结果如图1和图2所示。下列叙述正确的是
A．用A和B两种限制酶同时处理图中同一DNA片段得到6个游离的磷酸基团
B．图1中X代表的碱基对数为4500，Y是限制酶A的酶切位点
C．电泳凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子大小和构象等有关
D．利用PCR技术从图1DNA中扩增出等长的X片段，至少需要3次循环
三、非选择题：本题包括5小题，共60分。
19．(12分)某生物兴趣小组试图探究牛和山羊的瘤胃中的微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能降解尿素的细菌（目的菌）。培养基成分如表1所示，实验步骤如图2所示。请分析回答问题：
(1)从成分上看，表1所示培养基能筛选到降解尿素的细菌的原因是 ▲ ，制成的培养基常用 ▲ 法进行灭菌，富集培养过程中不需要振荡培养来提高溶氧量，原因是 ▲ 。
(2)用来筛选降解尿素得细菌的培养基含有KH2PO₄和Na2HPO₄，其作用有 ▲ (2分)。
(3)在实验中，每隔24小时统计一次菌落数目，并选取菌落数目稳定时的记录作为实验结果，这样可以防止 ▲ 。梯度稀释时，每个稀释梯度下要涂布至少3个平板，这样做的目的是 ▲ (2分)，该结果往往比实际值偏小，原因是 ▲ 。
(4)分离降解尿素的细菌实验时，甲同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。甲同学实验结果差异的原因可能有 ▲ （填序号）。
①取样不同 ②培养基污染 ③操作失误 ④没有设置对照
(5)为进一步确定取自瘤胃中液体的适当稀释倍数，各稀释倍数下降解尿素的细菌菌落数统计结果见表，其中合理的稀释倍数为 ▲ 。
(6)上述实验过程中，关于无菌操作的叙述错误的有 ▲ 。
A．取自瘤胃中的液体稀释时加入清水，且在无菌操作台进行
B．实验中用到的试管、培养皿等工具，用干热灭菌法进行灭菌
C．进行稀释涂布操作时，接种环需进行灼烧灭菌
D．实验结束后，将实验产生的废弃物进行灭菌处理
20．(12分)从紫草细胞内提取得到的紫草宁具有抗炎、抑制癌细胞增殖的作用，下图表示获得紫草宁的两种工艺路线，请回答下列相关问题:
(1)若要通过植物组培获得脱毒紫草植株，应优先选择紫草植株的 ▲ 部位作为外植体，外植体经消毒处理后，需用无菌水冲洗多次，目的 ▲ 。外植体经愈伤组织形成紫草植株的原理是 ▲ 。
(2)因为愈伤组织细胞有 ▲ 特点，从而有利于获得生长迅速的悬浮细胞系。用射线照射悬浮细胞系后，在显微镜下挑取单个细胞分别进行培养得到多个悬浮细胞系， ▲ 后收集细胞并称重，通过一定的方法获得 ▲ 比值，选取数值最小的数据作为高产细胞株。获取得到的高产细胞株常需进行多次传代培养来确定是否为稳定的高产细胞株，因为细胞在传代过程中会发生 ▲ ，导致以上比值出现增大的现象。
(3)下图表示在发酵培养中接种细胞密度与细胞收获量、紫草宁含有率(培养14天)关系的实验结果:
注意:紫草宁含有率是指紫草宁质量/细胞收获量
根据实验结果可推测当接种细胞密度超过6g·dry wt./L时，细胞内紫草宁合成会 ▲ ，从而导致紫草宁含有率的下降。根据图中数据，在发酵培养中选择接种细胞密度为6g·dry wt./L而不是接种细胞密度为4g·dry wt./L的原因是 ▲ (2分)。
(4)在培养过程中，要不断通入无菌空气并进行搅拌的目的是 ▲ 和 ▲ 。
21．(12分)科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体一药物偶联物（ADC）来治疗乳腺癌，过程如下图所示。
(1)动物细胞培养时，可以用 ▲ 酶处理动物组织，得到分散的组织细胞，在培养瓶中动物细胞贴壁培养一段时间后停止增殖的原因是出现了 ▲ 现象。
(2)每隔2周用取自 ▲ 的特定抗原注射小鼠1次，共注射3次，目的是 ▲ ，为了获得杂交瘤细胞，应将诱导融合后的细胞放在 ▲ 培养基上进行培养。
(3)过程②得到的细胞还必须经过过程③ ▲ 和 ▲ 才能筛选得到具有 ▲ 特点的杂交瘤细胞。杂交瘤细胞在体外培养时，除了提供适宜的营养物质、温度等条件外，还需要提供 ▲ 与5%CO₂的混合气体，此外在使用合成培养基时通常还需加入 ▲ 。
(4)与传统药物相比，ADC治疗乳腺癌的优点是 ▲ (2分)。
22．(12分)与普通玉米相比，甜玉米细胞中可溶性糖向淀粉的转化较慢，从而导致可溶性糖含量高，汁多质脆，研究发现这与甜玉米G蛋白含量较高有关。为提高甜玉米的商品价值，科研人员培育出了超量表达G蛋白的转基因甜玉米新品种。在超量表达G基因载体的构建中，所用DNA片段和Ti质粒的酶切位点如图1、2所示。
(1)图1中强启动子是一段特殊序列的DNA片段，位于基因的 ▲ ，驱动基因持续转录，该转录过程中模板链的5'端位于 ▲ （填“M”或“N”）端。
(2)图2所示载体为农杆菌的Ti质粒，当农杆菌侵染植物细胞后，能将Ti质粒上的 ▲ 转移到被侵染的细胞，并且将其整合到 ▲ 。
(3)结合图1和图2，为使DNA片段能定向插入Ti质粒中，可用PCR技术在DNA片段的两端添加限制酶识别序列，M、N端添加的序列分别是限制酶 ▲ 、 ▲ 的识别序列。
(4)外植体经脱分化过程形成的愈伤组织放入农杆菌液（含重组Ti质粒）浸泡后，进行植物组织培养时培养基中需加入 ▲ 进行筛选，最终获得玉米植株Y1、Y2、Y3，通过对3个植株的G蛋白表达量和还原糖的含量进行测定，发现Y3植株的G蛋白表达量最多，但却不是还原糖含量最多的植株，原因可能是 ▲ 。
(5)为了进一步提高甜玉米中淀粉的含量，科研人员提出通过降低淀粉酶合成有关基因的表达实现生产目标。研究人员研究发现吗啉反义寡核苷酸是一种RNA剪接抑制剂，将其注入植物细胞内会使基因表达受阻，科研人员将吗啉反义寡核苷酸导入玉米的受精卵中起到明显效果。针对它的具体作用，科研人员提出以下假说：
假说1：导致RNA前体上内含子1的对应序列不能被剪。
假说2：导致RNA前体上内含子1和外显子2的对应序列同时被剪切。
为了验证上述假说，分别从受精卵发育后3天的实验组和对照组胚细胞中提取 ▲ ，逆转录形成cDNA。若假说1成立，使用右图所示引物2和引物4进行PCR后电泳的结果为 ▲ （填字母）。
A． 实验组有目的条带 B． 实验组无目的条带
C． 对照组有目的条带 D． 对照组无目的条带
若要证明假说2成立，需要选择如图所示引物 ▲ (2分)进行PCR。
23．(12分)虾青素可由β-胡萝卜素在β-胡萝卜素酮化酶（BKT）和β-胡萝卜素羟化酶（CRTR-B）的作用下转化而来，具有抗衰老、增强免疫、保护心血管等功能。杜氏盐藻是单细胞浮游植物，生长快，易培养，能大量合成β-胡萝卜素。科研人员利用“无缝克隆技术”（如图1）构建含BKT基因和CRTR-B基因的表达载体（如图2，3），导入杜氏盐藻，以实现虾青素的工厂化生产，回答下列问题。
(1)获取目的基因：雨生红球藻是天然虾青素重要来源，提取雨生红球藻的总DNA为 ▲ ，设计特异性引物扩增BKT基因和CRTR-B基因，此过程需要 ▲ 酶的催化。
(2)构建转化载体：
①PCR获取抗除草剂基因过程中，为确保基因两端具有所需同源序列，需在引物的一端添加对应的同源序列。若将来需要将抗除草剂基因能够从重组质粒中切除，还需要在基因两侧加入限制酶识别序列，则扩增抗除草剂基因时，设计的引物序列（→）为 ▲ 。
A．同源序列＋抗除草剂基因部分序列＋限制酶识别序列
B．同源序列＋限制酶识别序列＋抗除草剂基因部分序列
C．抗除草剂基因部分序列＋限制酶识别序列＋同源序列
②科研人员利用“无缝克隆技术”同时将BKT基因和CRTR-B基因插入质粒，形成的重组质粒对应部位如图2所示，推测此过程扩增BKT基因所用的引物为 ▲ ；扩增CRTR-B基因所用的引物为 ▲ 。
③最终形成的重组质粒如图3所示，其中atpA启动子和psbA启动子均为杜氏盐藻叶绿体启动子，选用内源性启动子的目的是 ▲ 。
(3)准备受体细胞：选取初始杜氏盐藻涂布到杜氏盐藻固体培养基进行培养，一段时间后，挑取生长状态良好的单藻落到杜氏盐藻液体培养基中继续培养。两次培养的目的分别为 ▲ 、 ▲ 。
(4)目的基因导入及相关检测：采用基因枪法将重组质粒导入杜氏盐藻叶绿体，一段时间后，先用含 ▲ 的培养基初筛已转化的杜氏盐藻，然后采用 ▲ 技术检测是否成功表达产生 ▲ (2分)。次氯酸钠处理时间（min）
8
10
12
酒精处理时间（min）
20
30
40
20
30
40
20
30
40
污染率（%）
25.6
21.1
13.3
22.2
16.7
12.2
20
17.8
8.9
褐化率（%）
0
0
8.9
0
5.6
14.4
7.8
16.7
16.7
稀释倍数
10³
104
105
106
10⁷
菌落数
>500
427
248
36
5
一、单项选择题：本部分包括14题，每题2分，共计28分。每题只有一个选项最符合题意，请将答案填涂在答题卡中。
1. 下列关于制作传统发酵食品的叙述，错误的是
A．制作腐乳利用了毛霉等微生物产生的蛋白酶、脂肪酶等
B．发酵温度过低可能会导致泡菜“咸而不酸”
C．将玻璃瓶用酒精消毒后，装满葡萄汁进行发酵
D．制作果醋时，醋酸菌能以乙醇作为碳源和能源
2．下图为啤酒生产的主要流程，相关叙述错误的是
A．粉碎麦芽的目的是有利于麦芽中的淀粉与淀粉酶充分接触促进糖化过程
B．加入酒花的主要目的是提供酵母菌菌种有利于主发酵进行并产生大量酒精
C．麦汁煮沸的主要目的是抑制糖化过程后残留酶的活性同时杀死麦汁中微生物
D．主发酵结束后发酵液还要在低温密闭的环境下储存一段时间才能形成成熟啤酒
3．下图表示用马铃薯琼脂培养基对酵母菌纯培养的结果，有关叙述正确的是
A．培养基的制备流程为：计算→称量→溶化→定容→灭菌→调pH→倒平板
B．用高压蒸汽灭菌法灭菌结束后，待培养基冷却至50℃左右开始倒平板
C．用平板划线法接种可获得图示培养结果，接种过程中接种环需要灼烧3次
D．用液体培养基能提高目的菌对营养物质的利用效率以及分离的成功率
4．研究者对组织培养过程中不同阶段的藿香进行了辐射处理（如下图），以期获得性状优良的突变株。下列叙述正确的是
A．愈伤组织细胞分化程度低，辐射处理易发生定向突变
B．过程①中外植体通常用无水乙醇和次氯酸钠溶液进行消毒
C．过程②使细胞失去了特有的结构和功能，降低了细胞的全能性
D．筛选出目标突变株后可利用植物细胞培养技术生产药用成分
5．某科学小组探索长寿花组织培养过程中外植体的消毒条件，实验结果如下表。下列分析错误的是
注：褐化是指培养材料在组培过程中向培养基中释放褐色物质，并变褐死亡的现象。
A．消毒处理时间越长，组织培养成功率越高
B．消毒处理时间越长，外植体的污染率越低
C．诱导培养外植体脱分化为愈伤组织的过程中一般不需要光照
D．组织培养过程中提高生长素与细胞分裂素的比例有助于生根
6．灌流式培养是在细胞培养管内，一边不断注入新鲜培养基，一边将培养液的上清液不断移出。关于灌流式培养的叙述正确的是
A．灌流速率越高，营养物质利用越充分
B．连续灌流系统使细胞稳定处在较好的营养环境中，有害代谢废物浓度较低
C．制备灌流式培养所需的培养基不需要考虑培养基的渗透压
D．向培养管注入的新鲜培养基中补充动物血清是为了防止杂菌污染
7．干细胞治疗被认为是未来医学的新支柱。下列叙述正确的是
A．干细胞有多种类型，它们存在于从胚胎到成体的各个阶段
B．胚胎干细胞的核质比小，物质运输效率高
C．iPS细胞具有组织特异性，只能分化成特定的细胞或组织
D．iPS细胞分化为神经元细胞的过程体现了细胞的全能性
8．下列有关哺乳动物受精过程和胚胎早期发育的叙述，选项中正确的有几项
①动物排出的卵子成熟程度不同，但都需要到MII期时才能受精
②自然情况下，在雌性动物的子宫内精子进入卵细胞完成受精过程
③获能的精子与卵细胞相遇时，会引起透明带反应和卵细胞膜反应
④受精卵在输卵管内进行卵裂时，胚胎总体积并不增加，细胞数量增加
⑤原肠胚时期三个胚层的形成是由遗传物质改变引起的
A．1项B．2项C．3项D．4项
9．下图表示研究人员利用胚胎工程培育优质奶牛的过程，下列叙述正确的是
A．通过过程①-⑤培育优质奶牛的过程与克隆牛的原理相同
B．在胚胎发育中，桑葚胚时期的胚胎会从透明带中伸展出来
C．③代表胚胎分割，需均等分割原肠胚的内细胞团，以免影响胚胎发育
D．⑤代表胚胎移植，胚胎移植能否成功，与供体和受体的生理状态有关
10．下图表示“DNA的粗提取与鉴定”实验中的两个操作步骤，下列叙述错误的是
A．可以用菜花、洋葱、猪肝等作为实验材料粗提取DNA
B．图中的丝状物是粗提取的DNA，溶液b是2ml/L的NaCl溶液
C．图l操作的原理是DNA能溶于酒精，而蛋白质等杂质不溶于酒精
D．图2所示实验的结果是试管1不变蓝，试管2变蓝色
11．DNA重组技术中需要使用工具酶。下列叙述正确的是
A．限制性内切核酸酶主要是从病毒中分离纯化而来
B．真核细胞中任意一个DNA片段都能被限制酶切割
C．被SmaI酶切割后的DNA可以用T4DNA连接酶连接
D．DNA连接酶可以将游离的单个脱氧核苷酸连接成链
12．下列有关目的基因导入受体细胞和检测与鉴定的叙述，正确的是
A．用Ca2＋处理植物细胞有利于重组Ti质粒的导入
B．对目的基因进行扩增时，通过荧光标记技术实时定量测定产物的量
C．将某种药用蛋白基因导入动物乳腺细胞中可获得乳腺生物反应器
D．验证转基因抗虫棉是否成功时，通过RNA分子标记检测目的基因是否表达
13．下图是PCR扩增目的基因时的参数设定，图中线上、线下分别为温度和时间设定。下列叙述错误的是
A．步骤2的温度及时间设定主要保障模板DNA的完全解聚
B．步骤3的温度及时间设定主要依据引物的长度及G、C含量
C．步骤4延伸时间的设定主要依据目的基因的碱基数目
D．步骤5除设定循环次数（25次）外，还应将“GOTO”设定为步骤3
14．下图表示应用基因工程技术生产干扰素的三条途径，下列相关叙述错误的是
A．途径甲中，过程Ⅰ应将干扰素基因和乳腺中特异表达的基因的启动子重组
B．途径乙中，过程Ⅱ一般所采用的方法是农杆菌转化法
C．途径丙中，过程Ⅱ可用Ca2+处理大肠杆菌，以制备感受态细胞
D．三条途径中，由于使用的目的基因相同，表达出的干扰素结构也完全相同
二、多项选择题：本部分包括4题，每题3分，共计12分。每题有不止一个选项符合题意，全选对者得3分，选对但不全的得1分，错选或不答的得0分，请将答案填涂在答题卡中。
15．科研人员从木材场土壤中筛选分离出木质素分解菌，实验流程如下图所示。已知木质素能与苯胺蓝结合形成蓝色复合物，采用含苯胺蓝培养基筛选得到了如图⑥所示的菌落。下列有关叙述正确的是
A．图示操作过程共将土壤稀释了10000倍
B．图示所用的接种方法是平板划线法，且接种后需倒置培养
C．图⑥中所用的培养基以木质素为唯一碳源，其上的菌1∽5均为异养型
D．若要进一步筛选降解木质素能力强的菌株，可以从图⑥中菌3获取
16．甲品种青花菜具有由核基因控制的多种优良性状，但属于胞质雄性不育品种。通过体细胞杂交，成功地将乙品种细胞质中的可育基因引入甲中，如图为该操作示意图。下列相关叙述错误的是
A．过程B常用的诱导方法有灭活病毒诱导法、电融合法、聚乙二醇（PEG）诱导法
B．杂种细胞再生出细胞壁是细胞融合成功的标志，融合成功之后再进行组织培养
C．原生质体融合依赖生物膜的流动性，融合原生质体需放在无菌水中以防杂菌污染
D．筛选出的杂种植株含有控制甲青花菜优良性状的基因，可通过母本或父本进行传递
17．畜牧业上可通过下图两种途径实现良种牛的快速大量繁殖。下列叙述错误的是
A．图中的激素处理是用添加促性腺激素的饲料使雌牛超数排卵
B．为提高体外受精成功率，新采集的精子应直接用于体外受精
C．途径2进行胚胎移植前，不要对供体和受体进行免疫检查
D．途径1和途径2过程中都有胚胎的形成，均为有性生殖
18．用A和B两种限制酶同时和分别处理同一DNA片段，假设限制酶对应切点一定能切开。两种酶切位点及酶切产物电泳分离结果如图1和图2所示。下列叙述正确的是
A．用A和B两种限制酶同时处理图中同一DNA片段得到6个游离的磷酸基团
B．图1中X代表的碱基对数为4500，Y是限制酶A的酶切位点
C．电泳凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子大小和构象等有关
D．利用PCR技术从图1DNA中扩增出等长的X片段，至少需要3次循环
三、非选择题：本题包括5小题，共60分。
19．(12分)某生物兴趣小组试图探究牛和山羊的瘤胃中的微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能降解尿素的细菌（目的菌）。培养基成分如表1所示，实验步骤如图2所示。请分析回答问题：
(1)从成分上看，表1所示培养基能筛选到降解尿素的细菌的原因是 ▲ ，制成的培养基常用 ▲ 法进行灭菌，富集培养过程中不需要振荡培养来提高溶氧量，原因是 ▲ 。
(2)用来筛选降解尿素得细菌的培养基含有KH2PO₄和Na2HPO₄，其作用有 ▲ (2分)。
(3)在实验中，每隔24小时统计一次菌落数目，并选取菌落数目稳定时的记录作为实验结果，这样可以防止 ▲ 。梯度稀释时，每个稀释梯度下要涂布至少3个平板，这样做的目的是 ▲ (2分)，该结果往往比实际值偏小，原因是 ▲ 。
(4)分离降解尿素的细菌实验时，甲同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。甲同学实验结果差异的原因可能有 ▲ （填序号）。
①取样不同 ②培养基污染 ③操作失误 ④没有设置对照
(5)为进一步确定取自瘤胃中液体的适当稀释倍数，各稀释倍数下降解尿素的细菌菌落数统计结果见表，其中合理的稀释倍数为 ▲ 。
(6)上述实验过程中，关于无菌操作的叙述错误的有 ▲ 。
A．取自瘤胃中的液体稀释时加入清水，且在无菌操作台进行
B．实验中用到的试管、培养皿等工具，用干热灭菌法进行灭菌
C．进行稀释涂布操作时，接种环需进行灼烧灭菌
D．实验结束后，将实验产生的废弃物进行灭菌处理
20．(12分)从紫草细胞内提取得到的紫草宁具有抗炎、抑制癌细胞增殖的作用，下图表示获得紫草宁的两种工艺路线，请回答下列相关问题:
(1)若要通过植物组培获得脱毒紫草植株，应优先选择紫草植株的 ▲ 部位作为外植体，外植体经消毒处理后，需用无菌水冲洗多次，目的 ▲ 。外植体经愈伤组织形成紫草植株的原理是 ▲ 。
(2)因为愈伤组织细胞有 ▲ 特点，从而有利于获得生长迅速的悬浮细胞系。用射线照射悬浮细胞系后，在显微镜下挑取单个细胞分别进行培养得到多个悬浮细胞系， ▲ 后收集细胞并称重，通过一定的方法获得 ▲ 比值，选取数值最小的数据作为高产细胞株。获取得到的高产细胞株常需进行多次传代培养来确定是否为稳定的高产细胞株，因为细胞在传代过程中会发生 ▲ ，导致以上比值出现增大的现象。
(3)下图表示在发酵培养中接种细胞密度与细胞收获量、紫草宁含有率(培养14天)关系的实验结果:
注意:紫草宁含有率是指紫草宁质量/细胞收获量
根据实验结果可推测当接种细胞密度超过6g·dry wt./L时，细胞内紫草宁合成会 ▲ ，从而导致紫草宁含有率的下降。根据图中数据，在发酵培养中选择接种细胞密度为6g·dry wt./L而不是接种细胞密度为4g·dry wt./L的原因是 ▲ (2分)。
(4)在培养过程中，要不断通入无菌空气并进行搅拌的目的是 ▲ 和 ▲ 。
21．(12分)科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体一药物偶联物（ADC）来治疗乳腺癌，过程如下图所示。
(1)动物细胞培养时，可以用 ▲ 酶处理动物组织，得到分散的组织细胞，在培养瓶中动物细胞贴壁培养一段时间后停止增殖的原因是出现了 ▲ 现象。
(2)每隔2周用取自 ▲ 的特定抗原注射小鼠1次，共注射3次，目的是 ▲ ，为了获得杂交瘤细胞，应将诱导融合后的细胞放在 ▲ 培养基上进行培养。
(3)过程②得到的细胞还必须经过过程③ ▲ 和 ▲ 才能筛选得到具有 ▲ 特点的杂交瘤细胞。杂交瘤细胞在体外培养时，除了提供适宜的营养物质、温度等条件外，还需要提供 ▲ 与5%CO₂的混合气体，此外在使用合成培养基时通常还需加入 ▲ 。
(4)与传统药物相比，ADC治疗乳腺癌的优点是 ▲ (2分)。
22．(12分)与普通玉米相比，甜玉米细胞中可溶性糖向淀粉的转化较慢，从而导致可溶性糖含量高，汁多质脆，研究发现这与甜玉米G蛋白含量较高有关。为提高甜玉米的商品价值，科研人员培育出了超量表达G蛋白的转基因甜玉米新品种。在超量表达G基因载体的构建中，所用DNA片段和Ti质粒的酶切位点如图1、2所示。
(1)图1中强启动子是一段特殊序列的DNA片段，位于基因的 ▲ ，驱动基因持续转录，该转录过程中模板链的5'端位于 ▲ （填“M”或“N”）端。
(2)图2所示载体为农杆菌的Ti质粒，当农杆菌侵染植物细胞后，能将Ti质粒上的 ▲ 转移到被侵染的细胞，并且将其整合到 ▲ 。
(3)结合图1和图2，为使DNA片段能定向插入Ti质粒中，可用PCR技术在DNA片段的两端添加限制酶识别序列，M、N端添加的序列分别是限制酶 ▲ 、 ▲ 的识别序列。
(4)外植体经脱分化过程形成的愈伤组织放入农杆菌液（含重组Ti质粒）浸泡后，进行植物组织培养时培养基中需加入 ▲ 进行筛选，最终获得玉米植株Y1、Y2、Y3，通过对3个植株的G蛋白表达量和还原糖的含量进行测定，发现Y3植株的G蛋白表达量最多，但却不是还原糖含量最多的植株，原因可能是 ▲ 。
(5)为了进一步提高甜玉米中淀粉的含量，科研人员提出通过降低淀粉酶合成有关基因的表达实现生产目标。研究人员研究发现吗啉反义寡核苷酸是一种RNA剪接抑制剂，将其注入植物细胞内会使基因表达受阻，科研人员将吗啉反义寡核苷酸导入玉米的受精卵中起到明显效果。针对它的具体作用，科研人员提出以下假说：
假说1：导致RNA前体上内含子1的对应序列不能被剪。
假说2：导致RNA前体上内含子1和外显子2的对应序列同时被剪切。
为了验证上述假说，分别从受精卵发育后3天的实验组和对照组胚细胞中提取 ▲ ，逆转录形成cDNA。若假说1成立，使用右图所示引物2和引物4进行PCR后电泳的结果为 ▲ （填字母）。
A． 实验组有目的条带 B． 实验组无目的条带
C． 对照组有目的条带 D． 对照组无目的条带
若要证明假说2成立，需要选择如图所示引物 ▲ (2分)进行PCR。
23．(12分)虾青素可由β-胡萝卜素在β-胡萝卜素酮化酶（BKT）和β-胡萝卜素羟化酶（CRTR-B）的作用下转化而来，具有抗衰老、增强免疫、保护心血管等功能。杜氏盐藻是单细胞浮游植物，生长快，易培养，能大量合成β-胡萝卜素。科研人员利用“无缝克隆技术”（如图1）构建含BKT基因和CRTR-B基因的表达载体（如图2，3），导入杜氏盐藻，以实现虾青素的工厂化生产，回答下列问题。
(1)获取目的基因：雨生红球藻是天然虾青素重要来源，提取雨生红球藻的总DNA为 ▲ ，设计特异性引物扩增BKT基因和CRTR-B基因，此过程需要 ▲ 酶的催化。
(2)构建转化载体：
①PCR获取抗除草剂基因过程中，为确保基因两端具有所需同源序列，需在引物的一端添加对应的同源序列。若将来需要将抗除草剂基因能够从重组质粒中切除，还需要在基因两侧加入限制酶识别序列，则扩增抗除草剂基因时，设计的引物序列（→）为 ▲ 。
A．同源序列＋抗除草剂基因部分序列＋限制酶识别序列
B．同源序列＋限制酶识别序列＋抗除草剂基因部分序列
C．抗除草剂基因部分序列＋限制酶识别序列＋同源序列
②科研人员利用“无缝克隆技术”同时将BKT基因和CRTR-B基因插入质粒，形成的重组质粒对应部位如图2所示，推测此过程扩增BKT基因所用的引物为 ▲ ；扩增CRTR-B基因所用的引物为 ▲ 。
③最终形成的重组质粒如图3所示，其中atpA启动子和psbA启动子均为杜氏盐藻叶绿体启动子，选用内源性启动子的目的是 ▲ 。
(3)准备受体细胞：选取初始杜氏盐藻涂布到杜氏盐藻固体培养基进行培养，一段时间后，挑取生长状态良好的单藻落到杜氏盐藻液体培养基中继续培养。两次培养的目的分别为 ▲ 、 ▲ 。
(4)目的基因导入及相关检测：采用基因枪法将重组质粒导入杜氏盐藻叶绿体，一段时间后，先用含 ▲ 的培养基初筛已转化的杜氏盐藻，然后采用 ▲ 技术检测是否成功表达产生 ▲ (2分)。次氯酸钠处理时间（min）
8
10
12
酒精处理时间（min）
20
30
40
20
30
40
20
30
40
污染率（%）
25.6
21.1
13.3
22.2
16.7
12.2
20
17.8
8.9
褐化率（%）
0
0
8.9
0
5.6
14.4
7.8
16.7
16.7
稀释倍数
10³
104
105
106
10⁷
菌落数
>500
427
248
36
5
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