2024武汉十一中高二下学期6月考试生物试卷含解析

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一、单选题
1. 灰霉病是由灰葡萄孢（一种真菌）引起的农作物病害。为了绿色、高效地防治灰霉病，研究人员从灰霉病多发的大棚土壤中取样、分离出多种单菌落并进行扩大培养，随后将各组微生物的无菌发酵滤液与未凝固的普通培养基混合后倒平板，冷却后在平板中央接种灰葡萄孢，通过比较灰葡萄孢菌丝生长情况，从而筛选出高效的灰葡萄孢拮抗菌。下列叙述，错误的是（ ）
A. 在灰霉病多发的大棚土壤取样，比普通土壤更有可能获得灰葡萄孢拮抗菌
B. 取无菌发酵滤液的目的是用拮抗菌的代谢产物对灰葡萄孢产生抑制作用
C. 为筛选出高效拮抗菌，只需在普通培养基接种等量灰葡萄孢作为对照
D. 灰葡萄孢菌丝生长最缓慢、稀疏的组别对应的微生物即为最高效拮抗菌
【答案】C
【解析】
【分析】纯化微生物常用平板划线法和稀释涂布平板法，平板划线分离法的过程是：由接种环沾取少许待分离的材料，在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线，微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少，并逐步分散开来，如果划线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，可在平板表面得到单菌落。稀释涂布平板法是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞。
【详解】A、由题意可知，灰霉病是由灰葡萄孢（一种真菌）引起的农作物病害，因此在灰霉病多发的大棚土壤取样，比普通土壤更有可能获得灰葡萄孢拮抗菌，A正确；
B、取无菌发酵滤液的目的是排除其他杂菌的干扰，利用拮抗菌的代谢产物对灰葡萄孢产生抑制作用，从而获得专一性的拮抗菌，B正确；
C、为筛选出高效拮抗菌，需在普通培养基接种等量不同浓度的灰葡萄孢来进行实验，挑选出对灰葡萄孢拮抗效果最好的拮抗菌，C错误；
D、最高效拮抗菌对灰葡萄孢的拮抗效果是最好的，导致灰葡萄孢菌丝生长最缓慢、稀疏，D正确。
故选C。
2. 微生物需要从外界吸收营养物质来维持正常的生长和繁殖。下列关于微生物营养的叙述，正确的是（ ）
A. 尿素分解菌和纤维素分解菌的培养基中可能含有相同的无机盐
B. 筛选硝化细菌（自养型）的培养基中需加入适宜浓度的有机碳源
C. 只含有水和无机盐两类成分的培养基中不可能形成生物群落
D. 乳酸菌需要的特殊营养物质是指其自身不能合成的某些无机物
【答案】A
【解析】
【分析】培养基一般含有水、碳源、氮源、无机盐。培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。如培养乳酸杆菌时需添加维生素，培养霉菌时需将pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或微碱性。选择培养基是指允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。
【详解】A、尿素分解菌培养基中含有的无机盐是KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4，纤维素分解菌的培养基中含有的无机盐是NaNO3、KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、KCl。A正确；
B、硝化细菌是自养生物，可以用空气中CO2作为碳源，用缺乏有机碳源的培养基可以筛选硝化细菌。B错误；
C、只含有水和无机盐两类成分的培养基，可以培养既能固氮又能以CO2作为碳源的微生物（如固氮蓝藻）。C错误；
D、乳酸菌需要的特殊营养物质是维生素，是有机物。D错误。
故选A。
3. 堆肥指利用自然界广泛存在的微生物，有控制地促进固体废物中可降解有机物转化为稳定的腐殖质的生物化学过程。下图为堆肥处理时材料内部温度的变化曲线。若要从堆肥材料中筛选出能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌，下列相关叙述错误的是（ ）
A. 微生物呼吸作用释放的热量积累，导致堆肥内部温度逐渐升高
B. 与a点相比b点时微生物的数量较多，与c点相比b点时微生物种类较多
C. c点时，可对堆肥取样并用角蛋白氮源培养基对微生物群进行培养
D. 若采用平板划线法分离微生物，需对取样获得的原液进行适当稀释后再划线
【答案】D
【解析】
【分析】微生物常见的接种的方法：（1）平板划线法：把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环在平板培养基，通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞，经培养后生长繁殖成单菌落，通常把这种单菌落当作待分离微生物的纯种。（2）稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。
【详解】A、在堆肥过程中，微生物呼吸作用产生的热量积累，会导致其堆肥内部逐渐升高，A正确；
B、a点温度较低且微生物的分解作用刚刚开始，此时堆肥材料中的微生物的数量相对较少，b点时经过一段时间的代谢和增殖，b点处微生物的数量比a点多，b点到c点过程中，堆肥温度逐渐升高，并达到80℃左右，该温度条件下不耐热的微生物大量死亡，所以c点时微生物的种类数少于b点，B正确；
C、筛选能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌，因此既要耐高温，又要能够高效降解角蛋白，所以在c点取样，并且用角蛋白氮源培养基进行选择培养，C正确；
D、采用平板划线法分离微生物，不需要对取样原液进行适当稀释，通过连续多次划线即可达到分离微生物的目的，D错误。
故选D。
4. 油菜的绿叶对黄化叶为显性。与绿叶基因相比，黄化叶基因有一个碱基对发生了改变，从而出现一个限制酶B的酶切位点。为鉴定某绿叶油菜的基因型，提取其DNA进行了PCR和电泳。下列叙述正确的是（ ）
A. 需设计能与目的基因结合的双链DNA作为PCR引物
B. 应在PCR扩增体系中添加Mg2＋，以激活DNA聚合酶
C. 可适当降低复性的温度，以减少PCR中非特异性条带的产生
D. 用酶B作用后进行电泳，若有2条电泳条带可判断为杂合子
【答案】B
【解析】
【分析】PCR原理：在解旋酶作用下，打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4种游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。
【详解】A、PCR引物一般是单链DNA，A错误；
B、PCR过程中用到了缓冲液，缓冲液中一般要添加Mg2+用于激活DNA聚合酶，B正确；
C、复性温度过低会导致引物与模板链的结合不牢固，会增加PCR中非特异性条带，C错误；
D、用酶B作用后进行电泳后得到的2条条带，说明DNA分子上有1个酶B的酶切位点，且酶切后得到2个片段，无法判断是否为杂合子，D错误。
故选B。
5. 某同学利用洋葱为实验材料，进行DNA粗提取和鉴定实验。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 该同学也可选择鸡血、猪肝等动物细胞为实验材料提取DNA，但方法可能有所不同
B. 将洋葱切碎加研磨液研磨、过滤后，滤液放置4℃冰箱中静置几分钟后，DNA存在于沉淀物中
C. 向含有DNA的粗提取液中加入体积分数为95%的冷酒精后，出现的白色丝状物为DNA
D. 鉴定DNA时，需先将DNA溶解2ml/L NaCl溶液，再加入二苯胺试剂并进行沸水浴加热
【答案】B
【解析】
【分析】1、DNA的粗提取与鉴定的实验原理是：
①DNA的溶解性，DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同，利用这一特点可以选择适当浓度的盐溶液可以将DNA溶解或析出，从而达到分离的目的；
②DNA不容于酒精溶液，细胞中的某些蛋白质可以溶解于酒精，利用这一原理可以将蛋白质和DNA进一步分离；
③DNA对于酶、高温和洗涤剂的耐受性，蛋白酶能水解蛋白质，但是不能水解DNA，蛋白质不能耐受较高温度，DNA能耐受较高温度洗涤剂能瓦解细胞膜，但是对DNA没有影响；
④在沸水浴的条件下DNA遇二苯胺会呈现蓝色；
2、DNA粗提取与鉴定的实验中，不同操作步骤中加水的作用不同，破碎细胞获取含DNA的滤液时加蒸馏水的目的是使血细胞涨破；出去滤液中的杂质时，加蒸馏水的目的是降低NaCl溶液浓度使DNA析出。
【详解】A、不同类型的生物材料(如植物细胞、动物细胞、微生物)中DNA的提取过程虽有相似之处，但也存在差异。例如，使用动物血液作为实验材料时，通常利用红细胞破裂释放出的DNA进行提取，而不需要研磨和去除细胞壁的过程，A正确；
B、在DNA粗提取实验中，通 常首先通过研磨和加入适量的洗涤剂与食盐溶液来释放细胞中的DNA，并破坏细胞膜和其他细胞结构。然后，在此混合液中DNA会溶解在溶液中，并随同蛋白质、多糖等其他物质一起存在。DNA在一定浓度的NaCl溶液中溶解度较高，所以初步处理后的滤液经过离心或静置 后，DNA不会形成沉淀，而是在溶液中，B错误；
C、在DNA提取过程中，当加入高浓度酒精后，DNA会因不溶于酒精而析出，形成白色的絮状或丝状沉淀，这就是粗提取得到的DNA，C正确；
D、鉴定DNA时，常用的方法之一就是二苯胺显色反应。需要将DNA样品溶解在适当的NaCl溶液中，然后加入二苯胺试剂，在沸水中加热后，若存在DNA，则反应液会变为蓝色，D正确。
故选B。
6. 下图示利用重叠延伸PCR技术改造目的基因的原理。相关叙述错误的是（ ）

A. 图示操作中至少需要用2种限制酶对目的基因进行处理
B. 操作中引物2和引物3序列应含有拟突变位点，且可以互补
C. 应选用引物1和引物4进行PCR3，以获得大量目的基因序列
D. 此过程实现的基因序列改变属于基因突变，未发生基因重组
【答案】C
【解析】
【分析】PCR是聚合酶链式反应的缩写。它是一项根据DNA半保留复制的原理，在体外提供参与DNA复制的各种组分与反应条件，对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技术。每次循环可以分为变性、复性和延伸三步。其过程如下:
①高温变性：当温度上升到90℃以上时，双链DNA解聚为单链。
②低温复性：温度下降到50℃左右，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合。
③中温延伸：温度上升到72℃左右，溶液中的四种脱氧核苷酸在耐高温的DNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链。
【详解】A、由图可知：借助引物1、2进行PCR1，借助引物3、4进行PCR2，而引物1、3结合在同一模板链的不同部位，引物2、4也结合在同一模板链的不同部位，所以图示操作中至少需要用2种限制酶对目的基因进行处理，A正确；
B、实现基因的定点诱变时，需要根据目的基因序列设计两种常规引物，以及根据拟突变位点处碱基序列的位置设计两种突变引物，图中属于突变引物的是引物2、3；与常规引物相比，图中的2、3两种引物必须要有一段互补的序列，可以进行碱基互补配对，而且应含有拟突变位点，否则无法实现进行PCR3筛选的突变产物的形成，B正确；
C、进行重叠延伸时，上链和下链在突变位点处的碱基序列互补，能起到引物2、3的作用，因此不需要另加引物，即可得到进行PCR3筛选的突变产物，C错误；
D、利用重叠延伸PCR技术实现了基因的定点诱变。可见，此过程实现的基因序列改变属于基因突变，未发生基因重组，D正确。
故选C。
7. 生物技术与工程学相结合，可研究、设计和加工生产各种生物工程产品。下列有关叙述正确的有（ ）
①用花药培养得到单倍体植株需要用到植物组织培养技术
②由iPS细胞产生的特定细胞，可以在新药的测试中发挥重要作用
③胚胎移植作为胚胎工程最后技术环节，推动了胚胎工程其他技术的研究和应用
④PCR反应过程可以在PCR扩增仪中自动完成，而后常用琼脂糖凝胶电泳来鉴定PCR的产物
⑤利用基因工程技术的生物反应器，可以让哺乳动物批量生产相应的药物
⑥蛋白质工程仅以蛋白质结构为基础，逆中心法则进行，就可以改造或制造新的蛋白质
A. 2项B. 3项C. 4项D. 5项
【答案】D
【解析】
【分析】PCR技术是对体内DNA复制过程的模仿，也需要模板、原料、酶和引物等。待扩 增的DNA分子是模板，原料是4种脱氧核苷三磷酸，即dNTP，N代表A、T、G、C四 种碱基。PCR过程 包括多次循环，每个循环分为3个步骤。①变性：模板DNA 双链在高温下 （90 ℃） 氢键断裂，解旋成2条 DNA 单链，这个过程称为变性。 ②退火：温度降低（50 ℃）后，2个引物分别与各自互补的DNA单链结合，称为 退火。③延伸：分别以两条DNA单链为模板，4种脱氧核苷三磷酸为原料，耐高温的 DNA 聚合酶在适宜的温度（约72 ℃）下，以引物与模板形成的小段DNA双链区为 起点，催化合成一条新的DNA互补链。
【详解】①用花药需要经过脱分化，再经过再分化，培养得到单倍体植株，所用技术为植物组织培养技术，①正确；
②iPS细胞为多功能干细胞，能分裂分化产生的特定细胞，可以在新药的测试中发挥重要作用，②正确；
③胚胎移植作为胚胎工程的最后技术环节，推动了胚胎工程其他技术的研究和应用，例如胚胎分割技术，可通将胚胎均等分割后经胚胎移植实现无性繁殖，③正确；
④PCR反应过程可以在PCR扩增仪中自动完成，PCR的产物的分子量大小等不同，因此常用琼脂糖凝胶电泳来鉴定PCR的产物，④正确；
⑤利用基因工程技术的制造的生物反应器，可以利用哺乳动物源源不断地批量生产相应的药物，例如乳腺生物反应器，可通过乳腺细胞批量合成分泌相应药物，再从乳汁中获取，⑤正确；
⑥蛋白质工程是指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要，⑥错误。
故选D。
8. 科研人员研究发现，微藻能合成很多独特的对人体非常有益的生物活性物质，如EPA和DHA等不饱和脂肪酸。科研人员将自养的绿色巴夫藻和既可自养又能异养的四鞭藻进行融合，经筛选获得融合藻株。在自养培养条件下，测定它们的生长速率和EPA、DHA产率，如下表。下列有关说法错误的是（ ）
A. 融合藻具有生长迅速又能合成EPA和DHA的优点
B. 诱导融合前用酶解法处理两种藻以获得原生质体
C. 细胞诱导融合完成后培养体系中应有3种类型的细胞
D. 获得的融合藻还需进行克隆化培养和EPA、DHA检测
【答案】C
【解析】
【分析】根据表格信息可知，绿色巴夫藻能合成EPA和DHA，而四鞭藻不能合成DHA，融合藻可合成EPA和DHA。融合藻的生长速率与四鞭藻接近，但大于绿色巴夫藻。
【详解】A、根据表格可知，融合藻生长速率最大，且能合成EPA和DHA，A正确；
B、诱导两种藻细胞融合前需先用纤维素酶等处理以获得原生质体，便于细胞膜融合，B正确；
C、细胞诱导融合完成后培养体系中应有未融合的绿色巴夫藻细胞、四鞭藻细胞以及两个绿色巴夫藻细胞融合体、两个四鞭藻细胞融合体、一个四鞭藻细胞和一个绿色巴夫藻细胞融合体，共5种类型的细胞，C错误；
D、获得的融合藻还需进行克隆化培养和EPA、DHA检测，以便获得符合要求的融合细胞，D正确。
故选C。
9. 滁菊为菊科多年生草本植物，长期营养繁殖易造成病毒积累，导致滁菊花色劣变。某科研小组比较了3种脱毒方法对滁菊体内菊花B病毒（CVB）和菊花矮化类病毒（CSVd）脱除的效果，结果见下表；下图是对不同试管苗进行RT-PCR（逆转录PCR）后的电泳示意图（引物根据CVB的基因序列设计），下列叙述错误的是（ ）
不同脱毒方法对“滁菊”茎尖脱毒率的影响
A. RT-PCR技术中用到的酶有逆转录酶、耐高温的DNA聚合酶
B. 热处理、病毒唑处理后，试管苗存活率下降
C. 试管苗2、5尚未脱毒成功，3、4已脱去CSVd和CVB病毒
D. 只脱除CSVd病毒时，可选择病毒唑结合茎尖分生组织培养
【答案】C
【解析】
【分析】本实验研究的是不同的脱毒方法对滁菊体内菊花B病毒（CVB）和菊花矮化类病毒（CSVd）脱除的效果，由表格数据可知，热处理结合茎尖培养和病毒唑结合茎尖培养的效果在脱毒率方面均优于单独的茎尖分生组织培养。
详解】A、逆转录过程需要用到逆转录酶，PCR过程需要用到热稳定DNA聚合酶，A正确；
B、热处理和病毒唑处理后，相比于对照组，成活样本数减少，成活率下降，B正确；
C 、2、5电泳结果显示标准片段之外的阳性结果，3，4则没有，说明3、4成功脱去CVB病毒，2、5未能脱去CVB病毒，本实验不能确定是否脱去CSVd，因为没有设计CSVd的基因序列，C错误；
D、观察表格发现，病毒唑结合基尖培养时，CSVd病毒脱除率最高，适用于只脱除CSVd病毒，D正确。
故选C。
10. 我国科学家成功地用iPS细胞克隆出了活体小鼠，部分流程如下图所示，其中Kdm4d为组蛋白去甲基化酶，TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂。下列说法正确的是（ ）

A. 组蛋白脱乙酰化和去甲基化有利于重构胚后续的胚胎发育过程
B. 用电刺激、Ca²+载体等方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程
C. ③过程中使用有活性的病毒处理的目的是诱导细胞融合
D. 图示流程运用了重组DNA、体细胞核移植、胚胎移植等技术
【答案】B
【解析】
【分析】生物体基因的碱基序列保持不变，但基因表达和表型发生可遗传变化的现象，叫作表观遗传。除了DNA甲基化，构成染色体的组蛋白发生甲基化、乙酰化等修饰也会影响基因的表达。
【详解】A、结合题图，重构胚在加入中Kdm4d的mRNA和TSA后，发育成克隆鼠，而Kdm4d的mRNA表达产物为组蛋白去甲基化酶，可以使组蛋白去甲基化，TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂，抑制组蛋白脱乙酰酶的作用，保持组蛋白乙酰化，即组蛋白乙酰化和去甲基化有利于重构胚后续的胚胎发育过程，A错误；
B、在体细胞核移植过程中，用物理方法或化学方法（如电脉冲、钙离子载体、乙醇、蛋白质合成酶抑制剂等）激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程，B正确；
C、③为动物细胞融合的过程，诱导动物细胞发生融合所用的是灭活的病毒，C错误；
D、图示流程运用了体细胞核移植、胚胎移植等技术，并未运用重组 DNA技术，D错误。
故选B。
11. 华蟾素注射液是我国经典抗肿瘤药物，研究人员为探寻华蟾素注射液抗肝癌HepG-2细胞的作用机理，用华蟾素注射液和肝癌HepG-2细胞进行了一系列实验，结果如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A. 为防止细胞培养过程发生污染，培养液中要加入抗生素
B. 每隔一段时间需更换1次培养液，目的是防止代谢物积累对细胞自身造成危害
C. 据图甲可知，华蟾素能有效地抑制肝癌HepG-2细胞增殖，且只与浓度呈正相关
D. 图乙的结果进一步表明，华蟾素的作用机理可能是抑制肝癌HepG-2细胞的DNA分子复制
【答案】C
【解析】
【分析】动物细胞培养的条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和PH：36.5℃+0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2 （维持培养液的pH）。
【详解】A、动物细胞培养时，为防止培养过程发生污染要加入抗生素，A正确；
B、每隔一段时间更换1次培养液，目的是防止代谢物积累对细胞自身造成危害（补充细胞所需营养物质），B正确；
C、据图甲可知，华蟾素能有效地抑制肝癌HepG-2细胞增殖，与浓度和作用时间都呈正相关，C错误；
D、图乙的结果进一步表明，随着华蟾素浓度的增加，处于间期的细胞增多，则华蟾素的作用机理可能是抑制肝癌HepG-2细胞进入分裂期，可能是抑制肝癌HepG-2细胞的DNA分子复制 ，D正确。
故选C。
12. “筛选”是生物技术与工程中常用的技术手段。下列叙述错误的是（ ）
A. 单倍体育种时，需对F1的花药进行筛选后才可继续进行组织培养
B. 培育转基因抗虫棉时，需从分子水平及个体水平进行筛选
C. 胚胎移植前，需对通过体外受精或其他方式得到的胚胎进行质量筛选
D. 制备单克隆抗体时，需从分子水平筛选能产生所需抗体的杂交瘤细胞
【答案】A
【解析】
【分析】1、单克隆抗体制备的两次筛选：①利用选择培养基筛选得到杂交瘤细胞(去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞) ：②进行抗体检测，筛选出能够产生特异性抗体的杂交瘤细胞。
2、胚胎移植前，需对通过体外受精或其他方式得到的胚胎进行质量筛选，此时胚胎应发育到桑葚胚或囊胚阶段。
【详解】A、单倍体育种时，F1的花药不需要筛选直接进行组织培养，之后用秋水仙素处理单倍体幼苗使染色体加倍后，再进行筛选，A错误；
B、培育转基因抗虫棉时，在将目的基因导入受体细胞后，需要从分子水平上鉴定目的基因（Bt基因）是否成功导入、稳定存在和表达，还需要通过采摘抗虫棉的叶片饲喂棉铃虫来从个体水平上确定Bt基因是否赋予了棉花抗虫特性和评估其抗性程度，从而筛选出有较好抗虫特性的转基因抗虫棉。所以，培育转基因抗虫棉时，需从分子水平及个体水平进行筛选，B正确；
C、胚胎移植前，需对通过体外受精或其他方式得到的胚胎进行质量筛选，挑取质量好，活性强的胚胎进行培养或保存，可以提高胚胎移植成功的概率，C正确；
D、制备单克隆抗体时，在筛选出杂交瘤细胞后，需要进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。上述筛选过程中涉及的抗体检测属于分子水平的筛选，所以，制备单克隆抗体时，需从分子水平筛选能产生所需抗体的杂交瘤细胞，D正确。
故选A。
13. 图1表示的是科学家获得iPS细胞（类似于胚胎干细胞），再将iPS细胞转入小鼠乙体内培养的过程，图2表示研究人员利用小鼠（2N=40）获取单倍体胚胎干细胞的一种方法，以下分析错误的是：
A. 图1过程中，成纤维细胞转变为iPS细胞，类似于植物组织培养中的脱分化过程
B. 研究人员将iPS细胞团注射入缺乏T细胞的小鼠体内，细胞团能继续生长.由此可推测图1中iPS细胞团逐渐退化的原因可能是小鼠乙发生免疫反应造成的
C. 图2中，研究人员使小鼠丙超数排卵，再利用SrC12溶液处理后体外培养至④囊胚期，再筛选出单倍体干细胞
D. 研究发现，单倍体胚胎干细胞有发育全能性，该技术培育的单倍体动物可成为研究显性基因功能的理想细胞模型
【答案】D
【解析】
【分析】据图一分析，小鼠甲提取出成纤维细胞与特异性基因结合，形成iPS细胞，导入小鼠乙。据图二分析，对小鼠丙处理，从而获得更多的卵母细胞，再利用SrC12溶液处理、激活卵母细胞，并在体外培养至囊胚，进而培育成单倍体。
【详解】图1过程中，成纤维细胞转变为iPS细胞，即从高度分化的细胞形成分化程度低的细胞，过程类似于植物组织培养中的脱分化过程，A正确；将iPS细胞团注射入缺乏T细胞的小鼠体内，细胞团能继续生长．由此可推测图1中iPS细胞团逐渐退化的原因是小鼠乙（受体）发生免疫反应，使得iPS细胞团失去生命力，B正确；图2中，对实验小鼠丙注射促性腺激素使其超数排卵，从而获得更多的卵母细胞，再利用SrC12溶液处理、激活卵母细胞，并在体外培养至④囊胚期，再利用流式细胞仪筛选出单倍体细胞，C正确；单倍体胚胎干细胞也能分化，形成不同功能的细胞、组织和器官，该技术培育的单倍体动物可成为研究隐性基因功能的理想细胞模型，因为显性基因在正常的生物体内也能表达，D错误；故选D。
【点睛】本题考查动物细胞培养、胚胎工程等相关知识，意在考查学生的识图和推理能力，难度不大。
14. 澳大利亚一对小姐弟被确认为全球第二对半同卵双胞胎，发育成该对半同卵双胞胎的受精卵形成过程如图所示。图3中染色单体分离后分别移向细胞的三个不同方向，从而分裂成A、B、C三个细胞，其中两个细胞发育成姐弟二人。下列叙述错误的是（ ）
A. 图1表示卵子的异常受精过程，此时卵子发育到减数第二次分裂的中期
B. 该卵子与2个精子受精，表明透明带、卵细胞膜反应未能阻止多精入卵
C. 若图4细胞A中父系染色体组仅1个，则细胞C含2个父系染色体组
D. 这对小姐弟来源于母亲的染色体一般相同，来源干父亲的染色体可能不同
【答案】C
【解析】
【分析】图3中有6个染色体组，来自母亲的染色体组有两个，来源于父亲的染色体组有四个。
【详解】A、正常情况下只能有一个精子细胞进入卵细胞，此时卵子发育到减数第二次分裂的中期，A正确；
B、透明带、卵细胞膜反应能阻止多精入卵，该卵子与2个精子受精，表明透明带、卵细胞膜反应未能阻止多精入卵，B正确；
C、若图4细胞A中父系染色体组仅1个，则细胞可能C含2个父系染色体组，也可能含1个母系染色体组和一个父系染色体组，C错误；
D、来自母亲的染色体组有两个，并且是复制得到的，这对小姐弟来源于母亲的染色体一般相同，来源于父亲的染色体组有四个，其中两两相同，所以来源于父亲的染色体可能不同，D正确；
故选C。
15. 小鼠正常2细胞期胚胎经过电融合诱导形成四倍体胚胎，四倍体胚胎具有发育缺陷，只能发育形成胎盘等胚体以外的结构。ES细胞能够诱导分化形成所有的细胞类型，但很难分化形成胎盘。将ES细胞和四倍体胚胎聚合形成新的重构胚，可发育成完整小鼠个体，称为四倍体补偿技术。下列说法错误的是（ ）
A. 重构胚中ES细胞具有自我更新能力，但很难分化为胎盘等胚外组织
B. 重构胚发育至桑葚胚或囊胚再移植到生理状态相同的小鼠子宫内才能发育成完整小鼠个体
C. 通过四倍体补偿技术得到的小鼠个体的基因型与供体ES细胞的基因型不同
D. 利用四倍体补偿技术，可将ES细胞经过体外遗传学修饰，得到经过人为修饰的目的小鼠
【答案】C
【解析】
【分析】胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术。包括体外受精、胚胎移植、胚胎分割移植、胚胎干细胞培养等技术。胚胎工程的许多技术，实际是在体外条件下，对动物自然受精和早期胚胎发育条件进行的模拟操作。嵌合体-遗传学上用以指不同遗传性状嵌合或混杂表现的个体。
【详解】A、据题干信息“ES细胞能够诱导分化形成所有的细胞类型，但很难分化形成胎盘”，所以重构胚中的ES细胞具有自我更新能力，但很难分化为胎盘等胚外组织，可分化为处胎盘以外的所有细胞类型，A正确；
B、胚胎发育至桑椹（桑葚）胚或囊胚期再移植入与之生理状态相同的小鼠子宫内才可以进一步发育，B正确；
C、四倍体胚胎与ES细胞的嵌合体则会使二者的发育潜能相互补偿，可得到ES小鼠，其中的四倍体胚胎只能发育成胚外组织，所以嵌合体发育形成的ES小鼠基因型与供体ES细胞的基因型相同，C错误；
D、正常小鼠是二倍体，所以两个2细胞期胚胎用灭活病毒等诱导法使细胞融合，可得到一个含四个染色体组的细胞，再经胚胎的早期培养可得到四倍体胚胎，可将ES细胞经过体外遗传学修饰，得到经过人为修饰的目的小鼠，D正确。
故选C。
16. 下列应用实例最可能造成生物技术安全性与伦理问题的是（ ）
A. 对先天性免疫缺陷症患儿的免疫细胞进行基因编辑，然后回输给患儿进行治疗
B. 利用干细胞培养出具有单个腔室结构的迷你跳动心脏
C. 利用人体的成纤维细胞转变成iPS细胞，进而利用iPS细胞治疗阿尔茨海默病
D. 利用基因编辑技术设计试管婴儿，以期得到身高标准、智力超群的“完美婴儿”
【答案】D
【解析】
【分析】转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）．对待转基因技术的利弊，正确的做法应该是趋利避害，不能因噎废食。
【详解】A、对先天性免疫缺陷症患儿的免疫细胞进行基因编辑，然后回输给患儿进行治疗，未涉及到新生命（例如已发育的胚胎、婴儿等），不会造成生物技术安全与伦理问题，A错误；
B、利用干细胞培养出具有单个腔室结构的迷你跳动心脏，以增加器官移植供体来源，未涉及到新生命（例如已发育的胚胎、婴儿等），不会造成生物技术安全与伦理问题，B错误；
C、利用人体的成纤维细胞转变成iPS细胞，进而利用iPS细胞治疗阿尔茨海默病，未涉及到新生命（例如已发育的胚胎、婴儿等），不会造成生物技术安全与伦理问题，C错误；
D、利用基因编辑技术设计试管婴儿，以期得到身高标准和智力超群的“完美婴儿”，已经涉及到新生命的诞生，会造成生物技术安全与伦理问题，D正确。
故选D。
17. 治疗性克隆对解决供体器官缺乏和器官移植后免疫排斥反应具有重要意义。流程如图所示。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 核移植过程中需对卵母细胞去核，这里的核是指纺锤体—染色体复合物
B. 将图中获得的组织器官移植给个体A，则基本不会发生免疫排斥反应
C. 体细胞在体外培养时需要提供适量CO2，作为体液因子调节呼吸运动
D. 治疗性克隆过程不产生独立生存的新个体，不存在任何伦理道德问题
【答案】A
【解析】
【分析】生殖性克隆是指通过克隆技术产生独立生存的新个体。治疗性克隆是指将患者的细胞诱导成特定的细胞、组织和器官，用它们来修复或替代受损的细胞、组织和器官，从而达到治疗疾病的目的。
【详解】A、核移植过程中需对处于减数分裂Ⅱ中期的卵母细胞去核，这里的“核”其实是纺锤体—染色体复合物，A正确；
B、图中的个体A、B分别为提供细胞质的个体、提供细胞核的个体，个体B的细胞核遗传物质和组织器官的细胞核遗传物质相同，理论上将图中获得的组织器官移植给个体B，则基本不会发生免疫排斥反应，B错误；
C、体细胞在体外培养时需要提供适量CO2，CO2的主要作用是维持培养液的pH，C错误；
D、治疗性克隆也会面临伦理问题，我国对对治疗性克隆进行有效监控和严格审查，D错误。
故选A。
18. 人类γ基因启动子上游的调控序列中含有BCL11A蛋白结合位点，该位点结合BCL11A蛋白后，γ基因的表达被抑制。通过改变该结合位点的序列，解除对基因表达的抑制，可对某种地中海贫血症进行基因治疗。科研人员扩增了γ基因上游不同长度的片段（Fn与R），将这些片段分别插入表达载体中进行转化和荧光检测，以确定BCL11A蛋白结合位点的具体位置。相关信息如图所示。下列有关叙述错误的是（ ）

A. 为将扩增后的产物定向插入载体，指导荧光蛋白基因表达，需用MunI和XhI处理载体
B. 从产物扩增到载体构建完成的整个过程需6种酶
C. 将构建的载体导入去除BCL1IA基因的受体细胞，可能出现含F1与R扩增产物的受体细胞无荧光，而含F2-F7与R扩增产物的受体细胞有荧光
D. 向培养液中添加适量的雌激素，可导致部分受体细胞不再有荧光
【答案】C
【解析】
【分析】基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。
（4）目的基因的检测与鉴定。
【详解】A、观察载体的部分结构的图示，荧光蛋白基因的左侧为终止子，为了将扩增后的产物定向插入载体指导荧光蛋白基因表达，扩增后的产物的插入点应在荧光蛋白基因的右侧，而荧光蛋白基因的右侧有三个限制酶切点，分别是MunI、EcRI和XhI限制酶的切点，但因为用EcRI会破坏荧光蛋白基因，所以只能用MunI和XhI限制酶切割，A正确；
B、从产物扩增到载体构建完成的整个过程共需要6种酶，分别是Taq酶、限制酶EcRI、限制酶SalI、限制酶MunI、限制酶XhI、DNA连接酶，B正确；
C、据图可知，F1与R的序列要长于F2～F7与R序列，故不可能出现含F1与R扩增产物的受体细胞无荧光，而含F2～F7与R扩增产物的受体细胞有荧光的现象，C错误；
D、分析题意可知，P是在雌激素诱导下发挥作用的启动子，向培养液中添加适量的雌激素，雌激素能诱导启动子发挥作用，构建的载体含有BCL11A基因，导入构建载体的受体细胞能合成BCL11A蛋白，γ基因的表达被抑制，故向培养液中添加适量的雌激素，可导致部分受体细胞不再有荧光，D正确。
故选C。
19. 沙门氏菌是影响畜产品品质的重要病原菌之一。若使用庆大霉素（GM）等抗生素治疗，会有细菌耐药性和抗生素残留等问题。如使用植物乳杆菌等益生菌（可分泌抗菌物质）替代治疗，可有效解决上述问题。已知MRS培养基常用于培养植物乳杆菌。回答下列问题：
（1）为探究LPC（用MRS培养植物乳杆菌后获得的上清液）对沙门氏菌生长的影响，研究人员进行了相关实验，测得不同处理下沙门氏菌的生长曲线如图1所示。需选用物理状态为______（填“液体”或“固体”）的培养基，才能用抽样检测的方法估算沙门氏菌的种群数量。据图1分析，该实验结论为______。若不改变现有条件，沙门氏菌组继续培养72h后，种群数量不再增加，限制其种群增长的生物因素是______。
（2）为进一步研究LPC对沙门氏菌的作用机制，对实验组的LPC进行了如下处理：NaOH-LPC（加入NaOH调节pH值至近中性）、Heat-LPC（用100℃处理15min），再采用______（方法）接种沙门氏菌进行抑菌圈实验，结果如图2所示。分析设置MRS组的目的是______。根据实验结果分析，LPC的热稳定性______（填“强”或“弱”），LPC对沙门氏菌发挥作用的机制是______。
【答案】（1） ①. 液体 ②. LPC抑制沙门氏菌的生长（答出“抑制生长”的意思即可） ③. 种内竞争（加剧）
（2） ①. （稀释）涂布平板法 ②. 为排除植物乳杆菌培养液（MRS培养基）对实验结果的影响 ③. 强 ④. 可能是因为LPC中含有酸性物质（pH为酸性），可以起到抑制沙门氏菌生长的作用
【解析】
【分析】培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质；根据物理性质分为固体培养基和液体培养基，培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物种和氧气的要求。
【小问1详解】
需选用物理状态为液体的培养基，才能用抽样检测的方法估算沙门氏菌的种群数量，而且液体培养基有利于菌种与营养物质充分结合，利于其繁殖。据图1分析，与对照组相比，LPC组沙门氏菌的数量显著降低，说明LPC抑制沙门氏菌的生长。若不改变现有条件，沙门氏菌组继续培养72h后，种群数量不再增加，限制其种群增长的生物因素是空间和资源是有限的，种群数量增多，种内竞争加剧。
【小问2详解】
据图2菌落分布状态可知，采用（稀释）涂布平板法接种沙门氏菌进行抑菌圈实验。设置MRS组的目的是为排除植物乳杆菌培养液（MRS培养基）对实验结果的影响，使实验结果更加准确。根据实验结果分析，Heat—LPC组与LPC组的抑菌圈大小一致，说明LPC的热稳定强，NaOH-LPC组没有出现抑菌圈，说明碱性条件下LPC没有发挥作用，故推测LPC对沙门氏菌发挥作用的机制是可能是因为LPC中含有酸性物质(pH为酸性)，可以起到抑制沙门氏菌生长的作用。
20. 银杏的代谢产物，如银杏黄酮（具有抑制癌细胞增殖，扩张冠脉血管、增加冠脉血液流量和解除痉挛的作用）、银杏内酯（具有促进脑血微循环、抑菌抗炎的作用）等，一般从叶片中取得，但传统栽植方法周期长、成本高、受环境影响大，无法很好满足市场需求。因而利用组织培养技术，从愈伤组织中提取，具有一定的研究意义与应用前景。请回答下列相关问题：
（1）研究表明，选择银杏叶片比选择胚作为外植体材料成功率更低，原因可能是诱导叶片脱分化形成愈伤组织的难度较大。因此，往往选择细胞生长分裂旺盛的部位作为外植体，但外植体也不能太嫩，因为太嫩的组织细胞虽细胞分裂较旺盛，但在__________时次氯酸钠等药品渗透也较快，后续用__________多次冲洗也不易清除，导致细胞易失活甚至破裂。
（2）银杏黄酮属于__________（填“初生代谢物”或“次生代谢物”），为了获得银杏黄酮，__________（填“需要”或“不需要”）走完如上述流程图的全过程。有关做法是：可以将__________转入到__________培养基中，进一步扩大培养，以提取有益代谢物，此做法的优点有哪几项__________。
A．与培养基的结合更加充分 B．受培养基中成分差异的影响较小
C．对环境不敏感 D．对营养物质的吸收更容易
（3）此外，研究表明，用通气较为不良的介质封口，如塑料膜或玻璃纸，可以提升黄酮和内酯的产量，可能原因是__________胁迫细胞诱导产生代谢物。
【答案】（1） ①. 消毒 ②. 无菌水
（2） ①. 次生代谢物 ②. 不需要 ③. 愈伤组织 ④. 液体 ⑤. AD （3）低氧（缺氧）
【解析】
【分析】1、植物组织培养就是在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。
2、植物组织培养的条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。
【小问1详解】
外植体也不能太嫩，因为太嫩的组织细胞虽细胞分裂较旺盛，但在消毒时次氯酸钠等药品渗透也较快，在后续用无菌水多次冲洗也不易清除，导致细胞易失活甚至破裂，使外植体死亡。
【小问2详解】
银杏黄酮不是银杏生长所必须，为银杏的次生代谢产物。为获得银杏的次生代谢产物，不需要走完如上述流程图的全过程。可以采用植物细胞培养技术，将愈伤组织转入到液体培养基中，进一步扩大培养，以提取相应的次生代谢物，在此过程中需要做到无菌操作。与固体培养基培养愈伤组织相比，液体培养基培养愈伤组织的优点有：与培养基的结合更加充分、对营养物质的吸收更容易。
【小问3详解】
研究表明，用通气较为不良的介质封口，如塑料膜或玻璃纸，可以提升黄酮和内酯的产量，可能原因是低氧胁迫细胞诱导产生次生代谢物。
21. 人心肌细胞中的肌钙蛋白由三种结构不同的亚基组成，即肌钙蛋白T（cTnT）、肌钙蛋白I（cTnI）和肌钙蛋白C（cTnC），其中cTnI在血液中含量上升是心肌损伤的特异性指标。为制备抗cTnI的单克隆抗体，科研人员完成了以下过程。请据图分析回答下列问题：
（1）细胞培养中，培养液常用___方法灭菌。每隔2周用cTnI作为抗原注射小鼠1次，共注射3次，其目的是___，最后一次免疫后第3天，取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合，常用的化学诱导因素是___。
（2）甲、乙、丙中，只含杂交瘤细胞的是___，②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上，进行抗体阳性检测，之后稀释、培养、再检测，并多次重复上述操作，其目的是筛选获得___。
（3）酶联免疫吸附双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法，具体原理如图所示：
据图分析，固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于不同抗体能与同一抗原表面的不同部位结合。该检测方法中，酶标抗体的作用是___，可通过测定产物量来判断待测抗原量。
【答案】（1） ①. 高压蒸汽 ②. 加强免疫，刺激小鼠机体产生更多的B淋巴细胞 ③. 聚乙二醇(PEG)
（2） ①. 乙和丙 ②. 能产生特异性强、灵敏度高的抗cTnI抗体的杂交瘤细胞
（3）抗体与待测抗原结合，酶催化特定底物反应
【解析】
【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
【小问1详解】
细胞培养中，培养液常用高压蒸汽方法灭菌；为了提高淋巴细胞的免疫能力，刺激小鼠机体形成更多能产生抗cTnI抗体的B淋巴细胞，一般通过多次注射相同抗原实现；取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合，一般采用的化学诱导因素为聚乙二醇（PEG）；
【小问2详解】
据图可知，杂交瘤细胞需要对甲筛选，因此乙和丙应该是筛选得到的杂交瘤细胞；其中①代表用特定的选择培养基进行筛选，②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上，进行克隆化培养和抗体阳性检测，之后稀释、培养、再检测，并多次重复上述操作，就能获得足够数量的能分泌抗cTnI抗体的细胞，该类细胞的特点是既能大量增殖又能产生特异性强、灵敏度高的抗cTnI抗体；
【小问3详解】
分析图中过程可知，两种抗体与检测的抗原均能结合，但结合部位是不同的；该检测方法中，抗体与待测抗原结合，酶催化特定底物反应产生检测产物，可通过测定产物量来判断待测抗原量。
22. 枯草芽孢杆菌所产生的透明质酸是一种应用广泛的粘性多糖，研究者欲改造枯草芽孢杆菌，通过添加诱导型启动子来协调菌体生长与产物生产之间的关系。
（1）图1中透明质酸合成酶基因H以a链为转录模板链，由此可以推测H基因的转录是从其______（填“左侧”或“右侧”）开始的。利用PCR扩增H基因时，设计适当的引物使H基因两侧分别添加相应的限制酶识别序列，则扩增______次才会得到8个等长的目的基因片段。
（2）为通过外源添加诱导剂来控制基因的表达，研究者选择了含木糖诱导型启动子的p质粒。p质粒位点1和2的识别序列所对应的酶分别是 Xh酶和BsaⅠ酶，目的是为了保证______，酶切后加入______酶使它们形成重组质粒。
（3）为协调菌体生长与产物生产之间的关系，将构建好的重组质粒转入经______处理后的枯草芽孢杆菌（D菌），在含______的培养基上筛选，得到枯草芽孢杆菌E（E菌）。对E菌进行工业培养时，培养基应先以蔗糖为唯一碳源，接种2小时后添加______，以诱导E菌产生更多的透明质酸。
（4）质粒在细菌细胞中遗传不稳定、易丢失，研究者尝试将重组质粒进行改造，利用同源区段互换的方法将H基因插入枯草芽孢杆菌D的基因组mpr位点，得到整合型枯草芽孢杆菌F（F菌）。请在图2方框中画出F菌的基因组______。
（5）对三种枯草芽孢杆菌进行培养，结果如图3。
经分析可知，______最适宜工业发酵生产透明质酸，理由包括______。
a. F菌比E菌生长迅速 b. 透明质酸产量高
c. 培养基中不需要添加四环素 d. H基因整合到细菌DNA上，不易丢失
【答案】（1） ①. 右侧 ②. 4
（2） ①. 目的基因正确插入 ②. DNA连接
（3） ①. Ca2+ ②. 四环素 ③. 木糖
（4） （5） ①. F菌 ②. abcd
【解析】
【分析】1、DNA连接酶和DNA聚合酶是两种不同的酶，主要的区别就在于它们的底物是不一样的，DNA连接酶和DNA聚合酶都是形成磷酸二酯键，但是DNA连接酶连接的是DNA片段，DNA聚合酶主要就是将单个脱氧核糖核苷酸按照顺序连接到DNA链上。
2、转录是从DNA链的3'端开始，mRNA自身的延伸方向为5'→3'。
【小问1详解】
由于基因转录方向从模板3’到5’，以a链为转录模板链，由此可以推测H基因的转录是从其右侧开始的。PCR扩增三次后能得到想要的目的基因，如图所示：
此时所有的DNA解开双螺旋后，有8条DNA单链是下一次可以合成所需目的基因的模板链，所以，4代后可以得到等长的8条DNA片段。
【小问2详解】
p质粒位点1和2的识别序列所对应的酶分别是 Xh酶和BsaⅠ酶，两种酶切出的末端不同，目的是为了保证目的基因正确插入，酶切后加入DNA连接酶使它们形成重组质粒。
【小问3详解】
将目的基因导人微生物细胞常用Ca2+处理法，Ca2+处理受体细胞，可使其处于一种能吸收周围环境中DNA分子生理状态，所以将构建好的重组质粒转入经Ca2+处理后的枯草芽孢杆菌（D菌），由图1可知，P质粒含有四环素抗性基因，因此可在含四环素培养基上筛选，得到枯草芽孢杆菌E。枯草芽孢杆菌（D菌）生长需要蔗糖作为碳源和能源物质，2h后由于枯草芽孢杆菌E（E菌）存在木糖诱导型启动子，因此此时可添加木糖。
【小问4详解】
由题意可知，mpr位点为改造后的重组质粒和D菌的同源区段，其间只含有
，所以这一部分互换，将H基因插到了枯草芽孢杆菌的基因组mpr位点，而失去了四环素抗性基因，故最终得到的F菌的基因组为
。
【小问5详解】
由图3可知，F菌最适宜工业发酵生产，原因是：F菌比E菌生长迅速，透明质酸产量高，培养基中不需要添加四环素，H基因整合到细菌DNA上，不易丢失，即abcd。藻体
生长速率（g/L.d）
EPA（％）
DHA（％）
绿色巴夫藻
0.058
0.212
0.073
四鞭藻
0.140
0.058
无
融合藻
0.141
0.067
0.054
脱毒方法
样本存活数
脱除CSVd率
脱除CVB率
茎尖分生组织培养
77
20.78
44.16
热处理结合茎尖培养
71
36.62
63.38
病毒唑结合茎尖培养
71
46.48
49.30