江西省宜春市丰城中学2023-2024学年高二下学期第三次段考生物试卷(含答案)

这是一份江西省宜春市丰城中学2023-2024学年高二下学期第三次段考生物试卷(含答案)，共21页。试卷主要包含了单选题，多选题，读图填空题等内容，欢迎下载使用。

一、单选题
1．利用微生物分解纤维素对废弃物污染的减轻和作物秸秆再利用具有重要意义。某兴趣小组从富含纤维素的土壤中取样，加入选择培养基中进行振荡培养，之后接种于鉴别培养基上进行培养，筛选出能够分解纤维素的微生物。下列叙述错误的是( )
A.选择培养的目的是促进纤维素分解菌的生长，抑制其他微生物的生长
B.振荡培养可以增加溶解氧量，有利于微生物对营养物质的充分接触和利用
C.鉴别培养基上涂布接种时，将0.1mL菌液滴到培养基表面再用涂布器涂布均匀
D.加入刚果红的培养基上所出现的有透明圈的菌落，一定是能分解纤维素的细菌繁殖而成的
2．液体深层培养是指以获得大量发酵产物为目的的发酵罐大容量液体培养，可通过调节培养液的pH和温度、营养条件以及气体环境促使微生物迅速生长，产生大量代谢产物，是发酵工业生产的基本培养方法。下列相关叙述错误的是( )
A.在进行液体深层培养前需要对发酵罐中的培养基进行严格灭菌
B.在培养厌氧微生物时，前期密封保持无氧，后期可根据产物不同决定是否放气
C.若发酵产品是微生物代谢产物，发酵结束后，可通过过滤、沉淀等方法获得
D.液体深层培养过程中要密切关注培养液的pH、温度以及营养物质的消耗情况
3．“筛选”是生物工程中常用的技术手段，下列关于筛选的叙述错误的是( )
A.用选择培养基对微生物进行筛选时，实验组接种微生物，对照组不接种微生物
B.植物体细胞杂交过程中，原生质体融合后获得的细胞需要进行筛选
C.单克隆抗体制备过程中，在完成细胞融合后，第一次筛选出的是杂交瘤细胞
D.基因工程中通过标记基因筛选出的细胞不一定含有重组质粒
4．研究人员利用植物体细胞杂交技术，将培育的野生猕猴桃的单倍体的细胞与栽培二倍体猕猴桃细胞的原生质体融合，获得了三倍体植株，为其种质改良开辟了新途径。下列说法错误的是( )
A.原生质体获得后需要在等渗培养液中进行培养
B.原生质体融合时可采用灭活的病毒进行诱导
C.三倍体植株的形成需经过脱分化和再分化等培养过程
D.二倍体猕猴桃植株和三倍体猕猴桃植株属于不同的物种
5．植物细胞工程在农业、医药工业等方面有着广泛的应用，如图表示科学家利用植物细胞工程对红豆杉植株进行繁殖以及获得紫杉醇的过程，下列叙述正确的是( )
A.外植体形成愈伤组织的过程中，会发生DNA的复制、转录和翻译
B.外植体形成愈伤组织和培养愈伤组织所用的培养基成分相同
C.诱导愈伤组织形成的过程属于脱分化，该过程不存在基因的选择性表达
D.培养过程中应先用生长素相对含量较高的培养基诱导生芽，再更换培养基诱导生根
6．2021年6月，我国首个原创性抗体偶联药物（ADC）获批上市。该药采用人源化抗HER2抗体，通过可切割的接头与高效毒性分子MMAE偶联。ADC被肿瘤细胞内吞后，载荷MMAE被释放到细胞质中后，可抑制细胞中微管蛋白聚合，进而影响纺锤体的形成。下列叙述错误的是( )
A.传统鼠源性单抗可能会引起人体产生相应抗体进而影响ADC的效果
B.ADC中接头稳定性偏低会导致药物分子脱落而对正常细胞造成损伤
C.连接抗体和MMAE的接头可能在肿瘤细胞溶酶体中被蛋白酶破坏
D.MMAE可能抑制肿瘤细胞内着丝粒分裂从而使其停滞在分裂中期
7．精子载体法是以精子作为载体携带外源基因进入卵细胞的方法，利用该方法制备转基因鼠的基本流程如图。下列叙述正确的是( )
A.导入外源基因的精子需放入ATP溶液中进行获能处理才具备受精能力
B.导入外源基因的精子和卵细胞经过②过程后即转化完成
C.过程③需将受精卵体外培养至桑椹胚或囊胚期才可进行胚胎移植
D.过程④进行同期发情处理以降低代孕母鼠对外来胚胎的免疫排斥反应
8．某实验小组利用菜花进行DNA的提取及电泳鉴定，并对菜花非常保守的叶绿体基因trnL进行PCR扩增。下列相关叙述错误的是( )
A.将预冷的酒精溶液加入菜花研磨滤液离心获得的上清液中，静置可见丝状物
B.用二苯胺鉴定DNA时，试管中溶液无蓝色出现可能是DNA提取量过少或无
C.将混合液注入凝胶的加样孔时，需留一个加样孔加入指示分子大小的标准参照物
D.PCR反应体系中必须含有trnL基因的引物、Mg2+、4种脱氧核糖核苷酸以及ATP等成分
9．注射胰岛素是治疗1型糖尿病的主要手段。如图是利用基因工程生产人胰岛素的操作示意图，下列叙述错误的是( )
A.以细胞1中提取的mRNA为模板，可逆转录出胰高血糖素的基因
B.通过过程⑤的重复进行，可以短时间内获得大量的胰岛素基因
C.过程⑦将目的基因与基因载体相连，这是基因工程的核心步骤
D.丙中往往含标记基因，便于筛选含胰岛素基因的受体细胞
10．乙肝病毒表面主蛋白是由H基因控制合成。下图是将H基因导入某酵母菌生产乙肝疫苗的过程。5′A和3′TT分别是该酵母菌中某基因的启动子和终止子，此启动子还能使外源基因在酵母菌中高效表达，3′A是该基因下游的序列。科学家将改造过的P质粒与H基因连接形成重组质粒，再在重组质粒特定部位酶切，形成的重组DNA片段可以整合到酵母菌染色体上，最终实现H基因的表达。下列叙述错误的是( )
A.构建重组质粒时，可在H基因两侧分别接上SnaBⅠ和AvrⅡ的识别序列
B.用含有氨苄青霉素的培养基可以筛选出含有H基因的酵母菌
C.步骤1中，将重组质粒先导入大肠杆菌的目的是复制出大量重组质粒
D.步骤3中，用BglⅡ对重组质粒进行酶切可以获得图示的重组DNA片段
11．目的基因和载体如果用同一种限制酶处理，连接时会出现正反接的情况，为鉴定筛选出的表达载体中是否含有正确插入目的基因的重组质粒，拟设计引物进行PCR后，结合电泳技术鉴定，图示为甲、乙、丙3条引物在正确重组质粒中的相应位置，其中目的基因为长度300bp的片段。下列有关说法错误的是( )
A.PCR复性温度不宜太低，避免引物错配和模板链形成双链
B.电泳条带迁移的位置和速度与DNA分子的大小、带电量和构象有关
C.选取引物甲、丙，扩增出450bp长度片段时，可以说明目的基因正接
D.选取引物甲、乙，扩增出400bp长度片段时，可以说明目的基因反接
12．NewPhytlgist杂志发表了我国科学家有关大豆对盐胁迫响应的分子调控机制，过程如图所示。研究发现，miR160a可通过切割GmARF16基因转录的mRNA使大豆具有耐盐性。下列叙述错误的是( )
A.大豆的不耐盐与耐盐这对性状受多对基因共同决定
B.若GmMYC2基因启动子甲基化程度增加可提高耐盐性
C.脯氨酸含量增加可增大根部细胞渗透压引起耐盐性增强
D.miR160a通过碱基互补配对原则识别mRNA并断裂氢键
二、多选题
13．古籍记载了许多古人在生产中运用发酵技术加工食品积累的宝贵经验，下列对相关记载的理解，正确的是( )
A.“浸曲发”的目的是活化酵母菌，此时酵母菌通过有氧呼吸和无氧呼吸释放CO2
B.“舒令极冷”是为了防止蒸熟的米温度过高而杀死酒曲中的酵母菌等微生物
C.“令没菜把即止”的主要目的是让蔬菜充分吸收盐分，使风味品质更佳
D.“用水三斗”是为了避免酒精浓度过高杀死醋酸菌
14．酵母菌细胞壁的主要成分是几丁质。酿酒酵母产酒精能力强，但没有合成淀粉酶的能力；糖化酵母能合成淀粉酶，但酒精发酵能力弱。为了实现以谷物为原料高效生产酒精的目的，科研人员进行了下图所示改良酵母菌种实验。下列叙述不正确的是( )
A.以谷物为原料用酿酒酵母酿酒时，需对原料进行糖化处理用
B.PEG诱导之前需用纤维素酶去除两种酵母的细胞壁
C.在培养基X中以淀粉为唯一碳源即可筛选出杂种酵母
D.以淀粉转化为还原糖的效率作为最终鉴定目的菌的指标
15．CD47是一种跨膜糖蛋白，它可与巨噬细胞表面的信号调节蛋白结合，从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。肺癌、结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1.6~5倍，导致巨噬细胞对肿瘤细胞的清除效果减弱。科学家推测，抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，为此他们按照如下流程进行了实验。下列说法不正确的是( )
A.图中②使用选择培养基筛选，③用抗原—抗体杂交的方法筛选
B.杂交瘤细胞的制备原理是细胞增殖和细胞膜的流动性
C.对照组应设置为巨噬细胞＋正常细胞共培养体系＋单克隆抗体
D.实验组中巨噬细胞的吞噬指数显著低于对照组可验证上述推测
16．Cre酶是一种重组酶，LxP是能被Cre酶识别的特异DNA序列。Cre/LxP重组酶系统能够实现特异位点的基因敲除、基因插入等操作。一般而言，当一条DNA链上存在两个相同的LxP序列且方向相同时，Cre酶能有效切除两个位点间的DNA序列，如图所示。下列说法不正确的是( )
A.无Cre酶存在的细胞因STOP的作用而无法发出荧光
B.Cre酶能将两个核糖核苷酸之间的磷酸二酯键断开
C.当有两个相同的LxP序列时Cre酶就能有效切除一个
D.启动子能启动绿色荧光基因翻译荧光蛋白的过程
三、读图填空题
17．一部手机上携带的细菌种类繁多，包括沙门氏菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌、变形杆菌等，这已成为致病细菌传播的重要途径之一。为验证该观点，某同学进行了实验调查。如图是实验流程和实验结果。下表是2种可供选择的培养基配方。
(1)经发现，手机上存在着大量的微生物，如酵母菌和绿脓杆菌等，这两种微生物的主要区别是____________。
(2)从物理性质上看，题述两种培养基属于培养基，为达到实验目的，应选择上表中的培养基____________，理由是____________。
(3)为防止外来杂菌的入侵，对实验使用的培养基应使用____________灭菌。
(4)结果如图所示，如何证明该培养基是否被杂菌污染？____________。
(5)将上述菌悬液进行梯度稀释，取0.1mL稀释倍数为102的样品接种到3个平板上，经培养计数，3个平板的细菌菌落数分别是108、105、102，则该取样区域细菌密度约为个/cm2.
18．用化学方法激活小鼠成熟的卵母细胞得到phESC（孤雌单倍体干细胞），然后通过基因编辑技术使phESC中的3个基因沉默，phESC的细胞核状态便可接近精子细胞核的状态，如下图1所示。用化学方法激活小鼠的精子得到ahESC（孤雄单倍体干细胞），然后对ahESC中的8个基因进行编辑，ahESC的细胞核便具有卵细胞核的特点，如下图2所示。根据以上资料回答下列问题：
(1)体内受精过程中，精子入卵后被激活的卵子完成____________，排出____________后，形成____________。
(2)用____________对雌性小鼠进行处理可得到大量卵母细胞，将这些卵母细胞转化为phESC的过程类似于植物组织培养中的____________过程。
(3)ahESC与精子和去核卵细胞融合后，得到的融合细胞的性染色体组成可能是____________。
(4)据图1和图2分析可知，只依赖雌性小鼠就可以得到孤雌小鼠，而只依赖雄性小鼠是不能得到孤雄小鼠的，请写出两点理由：____________，____________。
19．M基因编码的M蛋白在动物A的肝细胞中特异性表达。现设计实验，将外源DNA片段F插入M基因的特定位置，再通过核移植、胚胎培养和胚胎移植等技术获得M基因失活的转基因克隆动物A，流程如图所示。回答下列问题：
(1)在构建含有片段F的重组质粒过程中，切割质粒DNA的工具酶是____________，这类酶能将特定部位的两个核苷酸之间的____________断开。
(2)在无菌、无毒等适宜环境中进行动物A成纤维细胞的原代和传代培养时，需要定期更换培养液，目的是____________。
(3)与胚胎细胞核移植技术相比，体细胞核移植技术的成功率更低，原因是____________。
(4)鉴定转基因动物：以免疫小鼠的____________淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行融合，筛选融合杂种细胞，制备M蛋白的单克隆抗体。简要写出利用此抗体确定克隆动物A中M基因是否失活的实验思路。____________。
20．PHB2蛋白具有抑制细胞增殖的作用。为初步探究某动物PHB2蛋白抑制人宫颈癌细胞增殖的原因，研究者从基因数据库中获取了该蛋白的基因编码序列（简称phb2基因），大小为0.9kb（1kb＝1000碱基对），利用大肠杆菌表达该蛋白。回答下列问题：
注：箭头表示切割位点。
(1)图1为所用载体图谱，图中限制酶的识别序列及切割位点见表。为使phb2基因（该基因序列不含图1中限制酶的识别序列）与载体正确连接，在扩增的phb2基因两端分别引入____________和____________两种不同限制酶的识别序列。经过这两种酶酶切的phb2基因和载体进行连接时，可选用____________（填“E。cliDNA连接酶”或“T4DNA连接酶”）。
(2)转化前需用CaCl2处理大肠杆菌细胞，使其处于____________的生理状态，以提高转化效率。
(3)将转化后的大肠杆菌接种在含氨苄青霉素的培养基上进行培养，随机挑取菌落（分别编号为1、2、3、4）培养并提取质粒，用（1）中选用的两种限制酶进行酶切，酶切产物经电泳分离，结果如图2，____________号菌落的质粒很可能是含目的基因的重组质粒。
21．玉米是重要的粮食作物，其叶片细胞中的P蛋白是一种水通道蛋白，由P基因编码，在植物生长发育过程中对水分的吸收具有重要的调节功能。科研人员成功培育出超量表达P蛋白的转基因玉米，回答下列问题。
(1)构建重组质粒需要使用DNA连接酶。下列属于DNA连接酶底物的是____________。
(2)利用PCR技术以图1中的DNA片段为模板扩增P基因，需要的引物有____________（从A、B、C、D四种单链DNA片段中选择）。
(3)培育超量表达P蛋白的转基因玉米过程中所用DNA片段和Ti质粒的酶切位点如图2所示（农杆菌侵染植物细胞时，只有T—DNA进入植物细胞，菌体本身不进入）。为使P基因在玉米植株中超量表达，应优先选用____________酶组合。
(4)将农杆菌浸泡过的玉米愈伤组织去菌后进行植物组织培养，培养基中需加入____________（填“潮霉素”“卡那霉素”或“潮霉素或卡那霉素”）进行筛选。
(5)P蛋白在玉米株系的表达量如图3所示，可作为超量表达P蛋白转基因玉米的生理特性研究实验材料的有____________。
参考答案
1．答案：D
解析：A、选择培养的原理是人为提供有利于目的菌生长的条件，同时抑制或阻止其他微生物的生长，因此选择培养的目的是促进纤维素分解菌生长，抑制其他微生物的生长，A正确；
B、振荡培养可以增加溶解氧量，促进微生物对营养物质和氧气的充分接触和利用，B正确；
C、可用稀释涂布平板法进行微生物的接种，鉴别培养基上涂布接种时，将0.1mL菌液滴到培养基表面再用涂布器涂布均匀，C正确；
D、加入刚果红的培养基上所出现的透明圈的菌落是能够分解纤维素的微生物，能够分解纤维素的微生物既有真菌也有细菌，D错误。
故选D。
2．答案：C
解析：A、为了防止微生物的污染，则在进行液体深层培养前需要对发酵罐中的培养基进行严格灭菌，A正确；
B、在培养厌氧微生物时，前期密封保持无氧，后期可根据产物是否含有气体，则决定是否放气，B正确；
C、发酵产品不同，分离、提纯的方法不同，如果发酵产品是微生物细胞本身，可采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥，如果产品是代谢产物，可用萃取、蒸馏、离子交换等方法进行提取，C错误；
D、营养物质、pH、温度等条件会影响微生物的代谢，所以液体深层培养过程中要密切关注培养液的pH、温度以及营养物质的消耗情况，D正确。
故选C。
3．答案：A
解析：A、用选择培养基对微生物进行筛选时，实验组和对照组均接种相同数量的微生物，实验组接种在选择培养基上，对照组接种在普通培养基上，若实验组菌落数少于对照组，说明选择培养基具有筛选作用，A错误；
B、植物体细胞杂交过程中，原生质体融合后获得的细胞需要进行筛选，选出杂种细胞，B正确；
C、单克隆抗体制备过程中，在完成细胞融合后，第一次筛选出的是杂交瘤细胞，第二次筛选出的细胞既能无限增殖又能产特定抗体的杂交瘤细胞，C正确；
D、基因工程中通过标记基因筛选出的细胞不一定含重组质粒，如只含有普通质粒，D正确。
故选A。
4．答案：B
解析：A、原生质体没有细胞壁的保护，则需要在等渗培养液中进行培养，防止细胞失水和吸水，A正确；
B、原生质体融合时不可用灭活的病毒进行诱导，灭活的病毒诱导是动物细胞融合特有的方法，B错误；
C、杂种细胞形成杂种植株需要经过植物组织培养技术，涉及脱分化和再分化等培养过程，C正确；
D、二倍体猕猴桃植株和三倍体猕猴桃植株不能进行基因交流，存在生殖隔离，属于不同的物种，D正确。
故选B。
5．答案：A
解析：A、外植体形成愈伤组织的过程，会进行细胞的分裂和分化，故核DNA会进行复制和转录和翻译，A正确；
B、外植体形成愈伤组织和培养愈伤组织所用的培养基成分不同，如激素的比例等都有所差别，B错误；
C、诱导愈伤组织形成的过程属于脱分化，该过程与基因的选择性表达有关，C错误；
D、培养过程中应先用细胞分裂素相对含量较高的培养基诱导生芽，再更换培养基诱导生根，D错误。
故选A。
6．答案：D
解析：A、传统鼠源性单抗对人体来说是抗原，可能会引起人体产生相应抗体，使得单抗药物疗效减弱，并且引起严重的不良反应，进而影响ADC的效果，而人源化单抗能够克服人抗鼠抗体反应，避免单抗分子被免疫系统当作异源蛋白而被快速清除，提高单抗药物的药效，A正确；
B、抗体偶联药物（ADC）是采用人源化抗HER2抗体，通过可切割的接头与高效毒性分子MMAE偶联，因此ADC中接头稳定性偏低会导致药物分子脱落而对正常细胞造成损伤，造成“脱靶毒性”，B正确；
C、抗体的化学本质是蛋白质，连接抗体和MMAE的接头是蛋白质，因此可能在肿瘤细胞溶酶体中被蛋白酶破坏，C正确；
D、据题意可知，ADC被肿瘤细胞内吞后，可抑制细胞中微管蛋白聚合，进而影响纺锤体的形成，进而影响纺锤丝牵拉染色体移向两极，不影响着丝粒的分裂，D错误。
故选D。
7．答案：C
解析：A、导入外源基因的精子需放入人工配置的获能液来模仿雌性生殖道内的获能环境来达到获能状态，A错误；
B、转化是指目的基因进入受体细胞内，并在受体细胞内维持稳定和表达的过程称为转化，导入外源基因的精子和卵细胞经过②过程后并不意味着转化完成，B错误；
C、通过转基因、核移植和体外受精技术获得的胚胎，需在体外培养到桑椹胚或囊胚阶段才可移植，C正确；
D、④是胚胎移植过程，需要对受体母鼠用相关激素进行同期发情处理，保证胚胎移植入相同的生理环境，受体对移入子宫的外来胚胎基本不发生免疫排斥反应，D错误。
故选C。
8．答案：D
解析：A、DNA不溶于冷却的酒精溶液，所以将预冷的酒精溶液加入菜花研磨滤液离心获得的上清液中，静置可见丝状物，A正确；
B、正常情况下二苯胺与DNA在沸水浴条件下反应呈蓝色，试管中溶液无蓝色出现，可能是DNA的提取量过少或未提取出DNA，B正确；
C、在进行电泳时，要预留一个加样孔，加入指示分子大小的标准参照物在进行电泳时，C正确；
D、PCR反应体系中除了添加含有trnL基因的引物、Mg2+、4种脱氧核糖核苷酸以及ATP等成分外，还必须加入模板DNA，D错误。
故选D。
9．答案：A
解析：A、细胞1中含有胰岛素mRNA，可知细胞1是胰岛B细胞，由于基因的选择性表达，细胞1中不含有胰高血糖素mRNA，不能扩增出胰高血糖素的基因，A错误；
B、③④⑤为PCR过程，表示目的基因的扩增过程，通过过程⑤的重复进行，可以短时间内获得大量的胰岛素基因，B正确；
C、过程⑦将目的基因与基因载体相连，⑦为基因表达载体的构建，这是基因工程的核心步骤，C正确；
D、丙（重组质粒）中往往含有标记基因，便于筛选含有胰岛素基因的受体细胞，D正确。
故选A。
10．答案：B
解析：A、为实现H基因和P质粒重组，只能用限制酶SnaBI和AvrⅡ切割质粒，并在H基因两侧的接上相应的限制酶识别序列，这样设计的优点是确保定向连接（避免质粒和目的基因自身环化及自连），A正确；
B、重组DNA片段含卡那霉素基因，用含卡那霉素的培养基可以筛选出含有H基因的酵母菌，B错误；
C、将重组质粒导入大肠杆菌，其目的是为了让目的基因在大肠杆菌里扩增，获取大量重组质粒，C正确；
D、步骤3中，重组DNA片段首尾分别是5'和3'，用BglⅡ对重组质粒进行酶切可以获得图示的重组DNA片段，D正确。
故选B。
11．答案：C
解析：A、退火是在高温解旋后降低温度让引物与模板链结合，退火温度不宜太低，避免引物错配和模板链形成双链，A正确；
B、电泳条带迁移的位置和速度与DNA分子的大小、带电量和构象有关，如电泳一段时间后，较大的DNA分子迁移距离小，离加样孔近，而较小的DNA分子迁移距离大，离加样孔远，B正确；
C、由于使用的引物是甲和丙，没有与基因相应位置配对，因此不管基因正接还是反接，均为450bp，C错误；
D、选取引物甲乙，扩增出400bp长度片断时，可以说明目的基因反接，若正接，不能扩增出100bp的片段，D正确。
故选C。
12．答案：D
解析：A、大豆的不耐盐与耐盐受GmARF16基因、GmMYC2基因等多对基因共同决定，A正确；
B、若GmMYC2基因启动子甲基化程度增加，会抑制bHLH转录因子的产生，故脯氨酸合成增加，大豆耐盐性增加，B正确；
C、脯氨酸含量增加可增大根部细胞渗透压，如果外部环境含盐量一定程度的增加，细胞依然可以吸收水分，故大豆耐盐性增强，C正确；
D、miR160a可通过切割GmARF16基因转录的mRNA，故miR160a通过碱基互补配对原则识别mRNA并断裂磷酸二酯键，D错误。
故选D。
13．答案：ABD
解析：A、浸曲发的目的是活化酵母菌，使其由休眠状态变为活跃状态，酵母菌可以进行有氧呼吸（产生CO2和水）和无氧呼吸（产生酒精和CO2），所以都可以释放CO2，A正确；
B、“舒令极冷”是降低米的温度，为了防止蒸熟的米温度过高而杀死酒曲中的酵母菌等微生物，B正确；
C、“令没菜把即止”是用水将蔬菜淹没，制造无氧环境，C错误；
D、“用水三斗”可以将酒精吸收，避免酒精浓度过高杀死醋酸菌而不易形成醋酸菌衣膜，D正确。
故选ABD。
14．答案：BCD
解析：A、酿酒酵母没有合成淀粉酶的能力，因此以谷物为原料用酿酒酵母酿酒时，需对原料进行糖化处理，即将淀粉转变为葡萄糖，A正确；
B、酵母菌的细胞壁主要成分是几丁质，需要用几丁质酶处理，植物细胞壁的成分主要是纤维素和果胶，用纤维素酶不能去除两种酵母的细胞壁，B错误；
C、糖化酵母也能以淀粉为碳源，因此在培养基X中只以淀粉为唯一碳源无法区分杂种酵母和糖化酵母，培养基中可以加入酒精指示剂如重铬酸钾，呈灰绿色透明圈的应该是既能利用淀粉又能产生酒精的杂种酵母，C错误；
D、为了实现以谷物为原料高效生产酒精的目的，目的菌最终的鉴定指标应该是产生酒精的能力，D错误。
故选BCD。
15．答案：CD
解析：A、题图中②使用选择培养基筛选融合的杂交瘤细胞，未融合的细胞死亡，③用抗原—抗体杂交的方法筛选出能产生抗CD47抗体的杂交瘤细胞，A正确；
B、利用细胞膜的流动性使B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合为杂交瘤细胞，再利用其无限增殖的特性，可以产生大量单克隆抗体，B正确；
C、对照组应设置为不加单克隆抗体的巨噬细胞+肿瘤细胞共培养体系，C错误；
D、实验组中加入了单克隆抗体，抗体与肿瘤细胞表面的CD47发生特异性结合，从而解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，而对照组中没有加入单克隆抗体，不能与肿瘤细胞表面的CD47结合，因而无法解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，因此，实验组中吞噬细胞的吞噬指数显著高于对照组可验证上述推测，D错误。
故选CD。
16．答案：BCD
解析：A、题意显示，当一条DNA链上存在两个相同的LxP序列且方向相同时，Cre酶能有效切除两个位点间的DNA序列，图中的终止子会被切除，若无Cre酶存在，则图中STOP的作用会导致荧光蛋白基因不能表达，进而无法发出荧光，A正确；
B、结合题意可知，Cre酶能将特定部位的两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键断开，B错误；
C、当有两个相同的LxP序列且方向相同时，Cre酶就能有效切除两个位点间的DNA序列，包括其中的一个LxP，C错误；
D、启动子能启动绿色荧光基因的转录过程，D错误。
故选BCD。
17．答案：(1)酵母菌具有以核膜为界限的细胞核，而绿脓杆菌没有以核膜为界限的细胞核（或是否有以核膜为界限的细胞核）
(2)固体；甲；培养基甲具有微生物生长所需要的各种营养物质，培养基乙缺乏氮源，不能满足多种微生物的营养需要
(3)高压蒸汽/湿热
(4)将未接种的培养基在相同的条件下进行培养，如果未接种的培养基在培养过程中没有菌落生长，说明培养基没有被杂菌污染，反之则说明培养基被杂菌污染
(5)1×104
解析：（1）酵母菌属于真核生物，绿脓杆菌属于原核生物，两者最主要的区别在于酵母菌具有以核膜为界限的细胞核，而绿脓杆菌没有（或是否有以核膜为界限的细胞核）。
（2）由于两种培养基配方中都有琼脂，所以从物理性质上看，上述两种培养基属于固体培养基。由于培养基甲属于天然培养基，可满足多种微生物的营养需要，而培养基乙缺乏氮源，不能满足多种微生物的营养需要，所以应选择培养基甲进行培养，收集菌落。
（3）培养基常用高压蒸汽灭菌法灭菌。
（4）证明培养基是否被杂菌污染的操作如下，将未接种的培养基在相同的条件下进行培养，如果未接种的培养基在培养过程中没有菌落生长，说明培养基没有被杂菌污染。
（5）根据题干数据，取30～300个菌落的平板进行计数，则细菌密度为（108＋105＋102）÷3÷0.1×10×102÷（7×15）＝1×104个/cm2。
18．答案：(1)减数分裂Ⅱ；第二极体；雌原核
(2)促性腺激素；脱分化
(3)XX、XY或YY
(4)需要将ahESC和另一个精子一起注入一个去核卵细胞中；重构的受精卵发育成的胚胎必须移植到雌性小鼠的体内才能发育为个体
解析：（1）体内受精过程中，获能后的精子在与卵细胞相遇时，首先会发生顶体反应，体内受精时，当精子触及卵细胞膜的瞬间，透明带会迅速产生生理反应阻止后来的精子进入；精子入卵后卵子完成减数分裂Ⅱ、排出第二极体、形成雌原核。
（2）用促性腺激素对雌性小鼠进行超数排卵处理可得到大量卵母细胞，这些卵母细胞转化为phESC（孤雄单倍体干细胞）的过程（发生了分裂）相当于植物组织培养中的脱分化过程。
（3）孤雌单倍体干细胞phESC与精子和去核卵母细胞融合后，得到的融合细胞的性染色体组成可能是XX（含X精子或phESC自身融合、含X精子和phESC融合）、XY（含Y精子和phESC融合）或YY（含Y精子的自身融合）。
（4）据图1和图2分析可知，只依赖雄性小鼠不能得到孤雄小鼠，因为需要将ahESC和另一个精子一起注入一个去核卵细胞中，且重构的受精卵发育成的胚胎必须移植到雌性小鼠的体内才能发育为个体。
19．答案：(1)限制性核酸内切酶（限制酶）；磷酸二酯键
(2)清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害，同时给细胞提供足够营养
(3)动物胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性相对容易，动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难
(4)B；取动物A和克隆动物A的肝组织细胞，分别提取蛋白质进行抗原—抗体杂交
解析：（1）基因工程中切割DNA的工具酶是限制性核酸内切酶（限制酶），故在构建含有片段F的重组质粒过程中，切割质粒DNA的工具酶是限制性核酸内切酶（限制酶）。限制酶是作用于其所识别序列中两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键。
（2）在无菌、无毒等适宜环境中进行动物A成纤维细胞的原代和传代培养时，从培养液吸收营养，往培养液排出代谢产物，所以需要定期更换培养液，清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害，同时给细胞补充足够营养。
（3）由于动物胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性相对容易，动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难，故与胚胎细胞核移植技术相比，体细胞核移植技术的成功率低。
（4）先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，制备M蛋白的单克隆抗体；若要利用此抗体确定克隆动物A中M基因是否失活，如果M基因已经失活，则克隆动物A中无法产生M蛋白的单克隆抗体，则可利用抗原—抗体杂交技术进行检测，故实验思路为：提取克隆动物A的肝细胞，培养肝细胞，在肝细胞加入带有荧光标记的抗Mda，检测有无荧光出现。若有荧光出现，说明克隆动物A中的M基因未失活；若无荧光出现，说明克隆动物A中的M基因失活。
20．答案：(1)PvitⅡ；EcRⅠ；T4DNA连接酶
(2)能吸收周围环境中DNA分子
(3)3
解析：（1）根据启动子和终止子的生理作用可知，目的基因应导入启动子和终止子之间。图中看出，两者之间存在于三种限制酶切点，但是由于KpnⅠ在质粒上不止一个酶切位点，所以应该选择PvuⅡ和EcRⅠ两种不同限制酶的识别序列；根据PvuⅡ的酶切序列，切出了平末端，所以构建基因表达载体时，应该用T4DNA连接酶连接质粒和目的基因。
（2）转化时用Ca2+（CaCl2）处理大肠杆菌细胞，使其处于感受态（能吸收周围环境中DNA分子）的生理状态，以提高转化效率。
（3）由于这些菌落都可以生长在含有氨苄青霉素的培养基中，因此都含有质粒，重组质粒包含了目的基因和质粒，如果用PvuⅡ和EcRⅠ两种酶切割重组质粒电泳后将获得含有质粒和目的基因两条条带，由于phb2基因大小为0.9kb，所以对应电泳图是菌落3。
21．答案：(1)④
(2)B、C
(3)BamHⅠ和SacⅠ
(4)潮霉素
(5)a1、a2、a3株系
解析：（1）单链DNA中，5'端存在游离的磷酸基团，3'端存在-OH，两个DNA片段之间的磷酸集团和-OH在DNA连接酶作用下形成磷酸二酯键。
故选④。
（2）已知DNA的合成方向总是从子链的5'端向3'端延伸，由图1可知，5'端对应的引物分别是B和C。
（3）为使P基因在玉米植株中超量表达，则需要强启动子，因此应优先选用BamHI和SacI酶组合，将Ti质粒切开后构建重组表达载体，原因是能将P基因和强启动子完整切割，且在与Ti质粒连接的过程中可避免自身环化等问题；不选用图中其它限制酶的原因是EcRI和NtI会破坏P基因，HindIII会将强启动子和P基因分离。
（4）由图可知，标记基因是潮霉素抗性基因，因此将农杆菌浸泡过的玉米愈伤组织去菌后进行植物组织培养，培养基中需加入潮霉素进行筛选。
（5）a4玉米株系的P蛋白表达量与野生型玉米差异不显著，所以不能选择a4玉米株系作为超量表达P蛋白转基因玉米的生理特性研究的实验材料，可作为超量表达P蛋白转基因玉米的生理特性研究实验材料的有a1、a2、a3。
食品加工
历史记载
酿酒
浸曲发，如鱼眼汤，净淘米八斗，炊作饭，舒令极冷
制醋
大率酒一斗，用水三斗，合瓮盛，置日中曝之……七日后当臭，衣生，勿得怪也，但停置，勿移动、挠搅之。数十日，醋成
泡菜制作
作盐水，令极咸，于盐水中洗菜，即内（纳）瓮中……其洗菜盐水，澄取清者，泻著瓮中，令没菜把即止，不复调和
培养基名称
配方
培养基甲
牛肉膏5g，蛋白胨10g，NaCl5g，蒸馏水1000mL，琼脂20g
培养基乙
葡萄糖15g，KH2PO41g，MgSO4·7H2O0.5g，KCl0.5g，FeSO4·7H2O0.01g，蒸馏水1000mL，琼脂20g
名称
识别序列及切割位点
HindⅢ
EcRⅠ
PvitⅡ
PstⅠ
KpnⅠ
BamHⅠ