山西省阳泉市2023-2024学年高二下学期4月期中考试生物(含答案)

这是一份山西省阳泉市2023-2024学年高二下学期4月期中考试生物(含答案)，共19页。试卷主要包含了单选题，多选题，读图填空题，实验探究题等内容，欢迎下载使用。


一、单选题
1．利用葡萄、苹果等水果为原料，采用发酵等技术酿制果酒和果醋，可提高果品的经济效益。下列关于果酒和果醋制作的叙述，正确的是( )
A.菌种均为异养真核生物B.都需要不断通入无菌空气
C.发酵过程中都需定时排气D.都可以利用糖源进行发酵
2．以番茄和辣椒为原料制作的红酸汤，颜色鲜红、味道酸爽，是苗族人民喜爱的传统食品，制作流程如下图。下列叙述正确的是( )
A.装坛时不装满的原因是为了促进微生物繁殖
B.发酵时间和温度不会影响红酸汤口味和品质
C.红酸汤制作过程中用到的微生物主要是醋酸菌
D.装坛时加入成品红酸汤是为了增加发酵菌种的数量
3．许多生活经验中蕴含着生物学原理，下列实例和生物学原理对应不准确的是( )
A.夏天开瓶后的红酒容易变酸——醋酸菌将乙醇变成乙醛再变为乙酸
B.泡菜坛内有时会长一层白膜——大量乳酸菌聚集在发酵液表面形成一层白膜
C.巴氏消毒法对牛奶消毒——杀死牛奶中的微生物但不破坏牛奶中的营养成分
D.放久的剩菜一般不宜食用——剩菜中的硝酸盐会被微生物还原成亚硝酸盐
4．与传统发酵技术相比，发酵工程的产品种类更加丰富，产量和质量明显提高。下列叙述错误的是( )
A.通过发酵工程可以从微生物细胞中提取单细胞蛋白
B.工业发酵之前需要对目的菌种进行筛选和扩大培养
C.发酵条件变化可能影响微生物的生长繁殖和代谢途径
D.发酵工程的产品包括微生物细胞本身和代谢物等
5．下列操作不能达到灭菌目的的是( )
A.用一定浓度氯气处理饮用水B.将涂布器在酒精灯火焰上灼烧
C.用干热灭菌箱处理金属用具D.使用高压蒸汽灭菌锅处理器皿
6．下图为实验室培养微生物的有关操作，下列叙述错误的是( )
A.步骤①需将接种工具灼烧至变红，以杀灭杂菌
B.步骤②将接种工具冷却时不宜距酒精灯火焰太远
C.步骤③可使菌种逐渐稀释，经培养后获得单菌落
D.接种后应将培养皿倒置并根据结果进行微生物计数
7．细菌气溶胶是由悬浮于大气或附着于颗粒物表面的细菌形成的。利用空气微生物采样器对某公共场所采样，并通过稀释涂布平板法检测细菌气溶胶的浓度。下列叙述错误的是( )
A.采样前需对空气微生物采样器进行灭菌处理
B.同一稀释度下至少对3个平板计数并取平均值
C.气溶胶样品稀释倍数越高，检测结果就越准确
D.该方法检测的细菌气溶胶浓度往往比实际值低
8．下列有关“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验的叙述，正确的是( )
A.选择农田或公园的表层土壤作为样品分离目的菌株
B.在选择培养基中需添加尿素作为唯一氮源和碳源
C.采取连续划线的方法可使微生物均匀分布
D.对分离的菌种进行鉴定还需要借助生物化学的方法
9．SOD是细胞中的一种抗氧化酶，能增强植物的抗逆性。某农作物新品种的培育过程如图所示。下列叙述错误的是( )
A.①中常用农杆菌转化法将基因导入植物细胞
B.②需要进行照光培养，以诱导叶绿素的形成
C.③表示再分化过程，需进行严格的无菌操作
D.该育种方式体现了植物细胞的全能性
10．下图为植物原生质体融合的示意图，下列叙述正确的是( )
A.诱导a和b融合前需进行脱分化处理
B.该技术培育植物新品种可打破生殖隔离
C.c的形成与a、b细胞膜的选择透过性有关
D.c将同时表达a和b中的所有基因
11．对某种动物的肝肿瘤细胞进行培养，下列叙述正确的是( )
A.利用肝组织块制备细胞悬液时，可用胰蛋白酶或胃蛋白酶处理
B.肝肿瘤细胞应在CO2培养箱中培养，其中CO2用于维持培养液的pH
C.一般使用液体培养基，需进行灭菌处理但无需定期更换
D.培养肝肿瘤细胞发生接触抑制时，需进行分瓶培养
12．在自然条件下，哺乳动物受精过程的顺序为( )
①卵细胞膜发生生理反应，拒绝其他精子再进入卵内
②雌、雄原核相向移动，彼此靠近，核膜消失，形成受精卵
③精子释放出多种酶，溶解卵细胞膜外的一些结构
④卵细胞膜外的透明带发生反应，阻止后来的精子进入透明带
⑤雌、雄原核的形成
A.③④⑤②①B.④③①⑤②C.③④①⑤②D.③①④⑤②
13．科学家在培育克隆羊时分别将乳腺上皮细胞、胚胎成纤维细胞和早期胚胎细胞的细胞核移入去核的卵母细胞，形成重构胚进而发育成重组胚胎。这三种重组胚胎受孕率分别为7.69%、40%和51.85%。下列叙述错误的是( )
A.克隆羊的遗传信息与供核细胞不完全相同
B.体细胞核移植后的受孕难度高于胚胎细胞核移植
C.核移植后需用PEG、乙醇、电击法等激活重构胚
D.以上三种克隆羊均可能表现出遗传和生理缺陷
14．下列关于哺乳动物胚胎发育的叙述，错误的是( )
A.受精卵早期分裂时细胞数量和胚胎的总体积均增加
B.囊胚期形成的内细胞团将发育成胎儿的各种组织
C.囊胚期胚胎从破裂的透明带中伸展出来称为孵化
D.胚胎早期发育过程中存在细胞衰老与凋亡的现象
15．在家畜优良品种培育过程中常涉及胚胎工程的相关技术。下列叙述错误的是( )
A.胚胎分割技术提高了移植胚胎的成活率
B.体外受精技术是提高动物繁殖能力的有效措施
C.胚胎移植可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力
D.胚胎移植实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移
16．下列关于基因工程基本工具的叙述，错误的是( )
A.①B.②C.③D.④
17．基因工程中常用的载体有克隆载体和表达载体，建构克隆载体是为了复制出更多的目的基因，而表达载体则使外源基因在受体细胞中高效表达。下列叙述错误的是( )
A.克隆载体的基本元件包括复制原点、标记基因与限制酶切割位点
B.重组克隆载体导入后，可利用受体细胞的DNA聚合酶等进行复制
C.表达载体的基本元件包括启动子和终止子，但无需具备复制能力
D.基因工程中被用作载体的质粒都是在天然质粒的基础上改造的
18．现临床使用的人生长激素是采用基因工程和发酵工程，由大肠杆菌表达分泌并大规模生产的。下列叙述错误的是( )
A.发酵过程需严格控制温度和溶氧量等条件
B.利用PCR可获取和快速扩增人生长激素基因
C.检测大肠杆菌是否表达出人生长激素常用抗原-抗体杂交技术
D.用于发酵生产的大肠杆菌工程菌具有易培养易发生突变等优点
19．科学家将能控制芳烃、萜烃、多环芳烃、脂肪烃四种环境污染物降解的4种基因组合到同一菌株中，创造了一种“超级细菌”。下列叙述错误的是( )
A.从未知结构与功能的基因中筛选4种目的基因
B.可通过构建基因文库来获取4种目的基因
C.可用PCR检测4种目的基因的表达
D.超级细菌还需改造才能成为高效表达的工程菌株
20．某小组同学选择菜花为实验材料进行“DNA粗提取与鉴定”的实验，并进行了一些改进。基本流程为：裂解→分离→沉淀→鉴定。下列分析错误的是( )
A.裂解：研磨时加入适量纤维素酶可加速细胞破裂释放出DNA等物质
B.分离：利用DNA溶于酒精的特性去除混合物中的蛋白质等物质
C.沉淀：多次离心研磨液并将沉淀物收集晾干可提高DNA的纯度
D.鉴定：在一定温度下，DNA遇二苯胺试剂呈现蓝色
二、多选题
21．啤酒是以大麦为主要原料经酵母菌发酵而成的，主要工艺流程如图所示，其中糖化的目的是将麦芽中的淀粉等有机物水解为小分子物质。下列叙述错误的是( )
A.利用大麦作原料时，淀粉是酵母菌直接利用的主要碳源
B.焙烤是为了利用高温杀死大麦种子胚但不使淀粉酶失活
C.过程②中碾磨有利于淀粉与淀粉酶充分接触，缩短糖化过程的时间
D.过程③的发酵阶段需要始终保持厌氧环境，以便完成酒精的生成
22．间充质干细胞存在于骨髓中，具有分化为肌细胞、肝细胞、成骨细胞、脂肪细胞等多种细胞的能力，对于组织损伤的修复有重要作用。下列叙述正确的是( )
A.间充质干细胞属于成体干细胞，具有组织特异性
B.间充质干细胞分化成脂肪细胞，体现了细胞的全能性
C.体外诱导间充质干细胞分化为不同细胞时，需提供不同的条件
D.在临床上可用于肝硬化、骨和肌肉衰退性病等疾病的治疗研究
23．杜泊羊以生长速度快、肉质好等优点，被称为“钻石级”肉用绵羊。科研工作者通过胚胎工程繁殖杜泊羊的流程如下图所示，下列叙述错误的是( )
A.采集的卵母细胞可直接与获能的精子进行体外受精
B.体外受精后得到的受精卵需进行培养、检查，才可进行移植
C.普通绵羊需进行免疫抑制处理，才可成功接受外来胚胎
D.子代杜泊羊的遗传性状来自提供卵母细胞及精子的双亲
24．研究人员将一种海鱼的抗冻蛋白基因afp整合到土壤农杆菌的Ti质粒上，然后用它侵染番茄细胞，获得了抗冻的番茄品种。下列叙述错误的是( )
A.构建含有afp基因的Ti质粒需要限制酶和DNA连接酶
B.被侵染的番茄细胞需要先用CaCl2处理以提高细胞壁的通透性
C.抗冻蛋白基因afp一旦整合到番茄细胞的染色体上就能正常表达
D.从转基因番茄中检测出抗冻蛋白就代表抗冻番茄培育成功
25．基因工程应用广泛，成果丰硕。下列叙述正确的是( )
A.将Bt基因转入马铃薯内可获得脱毒新品种
B.从工程菌细胞内获得的干扰素都可直接应用
C.抗虫棉的广泛种植有效控制了棉铃虫的种群数量
D.导入外源生长激素基因可以提高鲤鱼的生长速率
三、读图填空题
26．W是一种具有特定功能的人体蛋白质。某研究小组拟仿照制备乳腺生物反应器的研究思路，制备一种膀胱生物反应器来获得W，基本过程如图所示。
（1）为获得多枚胚胎，需对雌性供体施行____________处理，并对供体雌性动物和代孕母体进行______处理。
（2）若要检测W基因是否成功导入，需在早期胚胎发育至______期时取______细胞进行检测。同时______（填“需要”或“不需要”）对胚胎进行性别鉴定。原因是________________________。
（3）上述流程主要应用了胚胎工程中的________________________（至少写出两项）技术。
（4）一般来说，同一动物体内乳腺上皮细胞与膀胱上皮细胞的染色体DNA所含的遗传信息______（填“相同”或“不同”），原因是_____________________________。
27．人血清白蛋白（HSA）是血浆蛋白的主要成分，具有维持血浆渗透压和进行物质运输的功能。科学家利用PCR获得大量HSA基因。请回答下列问题：
（1）PCR是根据______的原理进行体外快速扩增目的基因的技术。PCR需要在一定的缓冲液中进行，缓冲液一般添加Mg2+的作用是________________________。
（2）PCR每次循环分为______、复性和______三步。反应中使用Taq DNA聚合酶而不是大肠杆菌DNA聚合酶，主要原因是________________________。
（3）DNA复制时，子链延伸的方向是：5′-3′，若要扩增出基因HSA，应选择图中______两种引物。引物的作用是________________________。
28．柽柳是一种强耐盐植物，它可以将吸收到植物体内的无机盐排出体外。我国科研人员从柽柳中筛选到相关基因TrSOS1，经过体外重组和转化，最终获得了耐盐的棉花新品种。请回答下列问题：
（1）基因TrSOS1通过______和______表达出TrSOS1蛋白，位于细胞膜的TrSOS1蛋白数量在盐胁迫下明显增加，推测其功能为________________________。
（2）利用转基因技术培育耐盐棉的核心工作是基因表达载体的构建，此步骤的作用有____________（答出1点即可）。据图1分析，构建基因TrSOS1表达载体过程中应选择限制酶______、______切割目的基因与质粒。
图1
（3）科研人员根据需要在载体中构建了诱导型启动子，当诱导物存在时，可以______目的基因的表达。图2为耐盐棉植株中基因TSOS1的PCR产物检测结果，所使用的鉴定方法为____________。据图分析基因TrSOS1在耐盐棉中的表达情况______________________________。
图2
注：M为DNA标准样品；H2O为无菌水；V为普通棉花，1-6为不同耐盐棉植株。
四、实验探究题
29．为从原油污染土壤中筛选产脂肪酶菌株用于土壤修复，科研人员进行了相关实验。请回答下列问题：
（1）筛选所需菌株时，需制备以______为唯一碳源的固体培养基。培养一段时间后，可依据菌落的______等特征进行初步的鉴定和分类。利用菌落特征能够鉴定微生物的原因是__________________。
（2）对产脂肪酶菌株进行计数时采用稀释涂布平板法，通过统计平板上的菌落数推测出样品的活菌数，原因是________________________。为保证结果准确，一般选择菌落数为______的平板进行计数。
（3）对分离所得的菌株采用辐射方法处理以提高产脂肪酶能力，获得A、B两突变菌株，为评价两菌株的相关性能，进行了培养实验，结果如图。据图分析，应选择菌株______进行后续相关研究，理由是________________________。
30．为研制抗病毒X的单克隆抗体，科研人员以小鼠为实验材料，设计了以下实验流程。其中①-⑤代表相关过程。据下图回答下列问题：
（1）过程①是给小鼠注射病毒X，其目的是________________________。过程②常用的方法有PEG融合法、电融合法和______等。
（2）过程③是指把细胞群稀释后进行选择培养，只有______细胞能够存活且增殖。过程④通过对筛选的细胞进行____________和抗体检测，将抗体检测呈______的细胞进行培养。过程⑤可通过____________和____________的方式以获取大量单克隆抗体。
（3）由图可知，单克隆抗体制备过程运用的动物细胞工程技术有______和______。
参考答案
1．答案：D
解析：A、果酒发酵的菌种是酵母菌，为真核生物，醋酸发酵的菌种是醋酸菌，为原核生物，二者均为异养生物，A错误;B、酵母菌发酵时需要在无氧条件下进行无氧呼吸产生酒精，因此需要隔绝空气，B错误;C、果酒发酵时酵母菌在密闭环境中进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳，二氧化碳不断在发酵装置中积累会导致发酵装置压强增大，因此需要定时排气，而利用醋酸杆菌发酵制作果醋时不是密封环境，因此不需要定期排气，C错误;D、酵母菌可将葡萄糖分解为酒精和二氧化碳，当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的葡萄糖分解成醋酸，因此二者都可以利用糖原进行发酵，D正确。故选D。
2．答案：D
解析：A、装坛时坛口留有一点空间而不装满的目的是防止番茄发酵后液体膨胀外溢，A错误;B、红酸汤制作需要用到乳酸菌，温度会影响酶的活性，发酵时间过短，产生的乳酸少，发酵时间过长，产生乳酸多，会影响口感，发酵时间和温度会影响红酸汤口味和品质,B错误;C、红酸汤制作过程中用到的微生物主要是乳酸菌，醋酸菌是需氧型细菌，不能在密封条件下发酵，C错误;D、成品红酸汤中含有乳酸菌，装坛时加入成品红酸汤是为了增加发酵菌种的数量，D正确，故选D。
3．答案：B
解析：A、夏天开瓶后的红酒，在有氧的条件下，空气中的醋酸菌将乙醇变成乙醛而后变为乙酸，导致红酒变酸，A正确;B、泡菜坛内有时会长层白膜是大量酵母菌聚集在发酵液表面形成的，乳酸菌是厌氧型，不会聚集在发酵液表面，B错误;C、用巴氏消毒法对牛奶消毒既能杀死牛奶中的微生物，又不破坏牛奶中的营养成分，C正确;D、长时间存放的剩菜中的硝酸盐会被微生物还原成亚硝酸盐，危害人体健康，D正确。故选B。
4．答案：A
解析：A、单细胞蛋白是菌体本身，不是从微生物体内提取的蛋白质，A错误;B、工业发酵之前需要对目的菌种进行筛选和扩大培养，以保证获得足够数量的目的菌，B正确;C、发酵过程中的温度、pH、氧气含量等发酵条件都会影响微生物的生长繁殖和代谢途径，C正确;D、发酵工程是指利用微生物的特定功能，通过现代工程技术，规模化生产对人类有用的产品，主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身，D正确。故选A。
5．答案：A
解析：A、用一定浓度氯气处理饮用水，属于消毒，不能达到灭菌的目的，A符合题意;B、将涂布器在酒精灯火焰上灼烧属于灼烧灭菌能达到灭菌的目的，B不符合题意;C、用干热灭菌箱处理金属用具属于干热灭菌，可以达到灭菌的目的，C不符合题意;D、使用高压蒸汽灭菌锅处理器皿属于高压蒸汽灭菌，能达到灭菌的目的，D不符合题意。故选A。
6．答案：D
解析：A、步骤①中,需将接种工具灼烧至变红,以杀灭杂菌,A正确;B、由于酒精灯的火焰旁存在一个无菌区域,因此步骤②中,将接种工具冷却时不宜距酒精灯火焰太远,防止杂菌污染,B正确;C、图中接种方法为平板划线法,其目的是使菌种逐渐稀释,经培养后获得单个菌落,C正确;D、图示采用的接种方法是平板划线法,该方法不能为对微生物进行计数,D错误。故选:D。
7．答案：C
解析：A、为防止杂菌感染，接种前需要对培养基、培养皿、微生物采样器进行灭菌，对实验操作者的双手进行消毒，A正确;B、微生物计数时在同一稀释度下，应至少需要对3个菌落数目在30~300的平板进行计数，以确保实验的准确性，B正确;C、常选择菌落数目在30-300之间进行计数，所以不是气溶胶样品稀释倍数越高，检测结果就越准确C错误;D、使用稀释涂布平板法对微生物计数，数值往往比实际值低，原因是两个或多个细胞连在一起时，在平板上只能观察到一个菌落，D正确。故选C。
8．答案：D
解析：A、土壤取样:细菌适宜在酸碱度接近中性的潮湿土壤中生长，绝大部分分布在距地表3~8cm的土壤层，取样时一般要铲去表层土，A错误;B、分离土壤中能分解尿素的细菌时，应选择以尿素为唯一氮源的培养基，只能利用尿素的细菌才能在此培养基上生长繁殖。制备选择培养基时，应以尿素为唯一氨源，需加入尿素、琼脂、葡萄糖(作为碳源)等物质，但不能加入硝酸盐，B错误;C、平板划线法是通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，该方法不能使微生物均匀分布，接种土壤微生物稀释液时，稀释涂布平板法的操作使微生物均匀分布，C错误;D、一般来说，在相同的培养条件下，同种微生物表现出稳定的菌落特征，但是只是初步筛选了能分解尿素的细菌，对分离的菌种进行鉴定还需要借助生物化学的方法，这样才能确定被分离的菌种，D正确。故选D。
9．答案：B
解析：A、形成转基因植物常用农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞，A正确;B、②过程是脱分化形成愈伤组织的过程，不需要光，B错误;C、③表示再分化过程，需进行严格的无菌操作，以防止杂菌污染，影响其形成幼苗，C正确;D、②③表示植物组织培养过程，其原理是植物细胞具有全能性，D正确，故选B。
10．答案：B
解析：A、诱导a和b融合前需先通过酶解法去掉细胞壁融合前不需要脱分化处理，A错误;B、该技术可诱导来自不同物种的细胞融合，因此该技术培育植物新品种可打破生殖隔离，B正确;C、c的形成是a、b融合的结果，与a、b细胞膜的流动性有关，C错误;D、c细胞包含细胞和b细胞所有的基因，但生物发育的不同阶段表达的基因不同，即基因是选择性表达的，不会同时表达所有基因，D错误，故选B。
11．答案：B
解析：A、胃蛋白酶作用的适宜pH约为2，当pH大于6时，就失去活性，胰蛋白酶作用的pH为7.2-8.4，多数动物细胞培养的适宜pH为7.2-7.4，因此制备肝肿瘤细胞悬液时，可用胰蛋白酶处理肿瘤组织块，A错误;
B、细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是维持培养液的pH，B正确;
C、为了防止细胞培养过程中细菌的污染，要求对培养液进行消毒、灭菌，也可向培养液中加入适量的抗生素，抑制细菌生长，定期更换培养液，以清除代谢废物，C错误;
D、肿瘤细胞没有接触性抑制现象，有无限增殖的能力，不需进行分瓶培养，D错误。故选B。
12．答案：C
解析：受精过程的顺序为:精子释放出多种酶，溶解卵细胞膜外的一些结构一卵细胞膜外的透明带发生反应，阻止后来的精子进入透明带一卵细胞膜反应一雌、雄原核的形成一雌、雄原核相向移动，彼此靠近，核膜消失，形成受精卵。故过程为③④①⑤②。ABD错误，C正确。故选C。
13．答案：C
解析：A、由于克隆羊的遗传物质来自供核细胞的细胞核和卵母细胞的细胞质，因此克隆羊的遗传信息与供核细胞不完全相同，A正确;
B、由于体细胞分化程度高，恢复分裂能力难度大，因此体细胞核移植后的受孕难度高于胚胎细胞核移植，B正确;
C、可用电刺激、Ca2+载体、乙醇或蛋白酶合成抑制剂等方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程，C错误;
D、由题意可知，这三种重组胚胎受孕率分别为7.69%、40%和51.85%，可能是胚胎存在生理缺陷，使胚胎不能继续发育，因此以上三种克隆羊均可能表现出遗传和生理缺陷，D正确。故选C。
14．答案：A
解析：A、受精卵早期分裂时细胞数量增加，每个细胞体积减小，但胚胎的总体积基本不变，A错误;BC、囊胚期细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织;而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘;胚胎内部逐渐出现囊胚腔，囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化，BC正确;D、细胞衰老和凋亡贯穿个体的整个生命历程，因此胚胎早期发育过程中存在细胞衰老与凋亡的现象，D正确。故选A。
15．答案：A
解析：A、胚胎分割可以获得多个胚胎，分割次数越多，分割后胚胎成活的概率越小，因此胚胎分割技术不能提高移植胚胎的成活率，A错误;B、体外受精能提高繁殖能力，因此体外受精技术是提高动物品种繁殖能力的有效措施，B正确;C、胚胎移植可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力，这是胚胎工程的优点，C正确;D、胚胎移植是将胚胎移植到同种的、生理状态相同的雌性动物体内，实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移，D正确。故选A。
16．答案：C
解析：AB、限制性内切核酸酶具有特异性，能够识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开，AB正确;C、酶的专一性是指一种酶只能催化一种或一类底物，DNA连接酶能连接两个脱氧核苷酸之间的化学键，能体现DNA连接酶的专一性，C错误;D、在基因工程操作中，真正被用作载体的质粒，都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的，D正确，故选C。
17．答案：C
解析：A、作为运载体必须要具备的条件有:含有限制酶的切割位点(便于目的基因的插入)、复制原点(便于目的基因的扩增)及标记基因(便于筛选含有目的基因的受体细胞)等，因此载体A和载体B都必须含有限制酶切割位点、复制原点和标记基因，A正确;B、重组克隆载体导入后，可利用受体细胞的原料，能量、DNA聚合酶等进行复制，B正确;C、表达载体的目的是使外源基因在受体中高效表达，包括转录和翻译，因此表达载体的元件中必须含有标记基因(用来筛选表达载体)，也需要复制原点，保证表达载体能在受体细胞中自我复制，C错误;D、基因工程中被用作载体的质粒都是在天然质粒的基础上改造的，D正确。故选C。
18．答案：D
解析：A、大肠杆菌属于厌氧菌，其代谢和增殖过程受温度和溶氧量的影响，因此发酵过程需严格控制温度和溶氧量等条件，A正确;B、PCR技术的原理是DNA半保留复制，利用PCR可获取和快速扩增人生长激素基因，B正确;C、生长激素本质为蛋白质，抗原和抗体可发生特异性结合，因此检测大肠杆菌是否表达出人生长激素常用抗原-抗体杂交技术，C正确;D、用于发酵生产的大肠杆菌工程菌具有繁殖快、易培养、产量高的优点，易发生突变不属于用其发酵的优点，D错误。故选D。
19．答案：A
解析：A、筛选合适的目的基因方法是从相关的已知结构和功能清晰的基因中进行筛选是较为有效的方法之-，A错误;B、获取目的基因方法:从基因文库获取或者PCR获取目的基因都可，B正确;C、基因的表达包括转录和翻译过程，目的基因的检测和鉴定:分子水平的检测可通过PCR技术检测四种目的基因的mRNA，初步检测目的基因的表达情况，C正确;D、超级细菌只是将四种环境污染物降解的4种基因组合到同一菌株中，但是要想获得高效表达的工程菌株还需进行改造，D正确。故选A。
20．答案：B
解析：A、植物细胞壁主要由纤维素和果胶组成，研磨时加入纤维素酶可以分解纤维素破坏细胞壁，从而加快细胞破裂释放出DNA等物质，A正确;B、利用DNA不能溶于酒精溶液，而某些蛋白质能溶于酒精溶液，利用体积分数为95%的酒精可将DNA与蛋白质分离，B错误;Cc、不同物质分子的质量不同，离心时可将不同分子量的物质进行分离，因此多次离心研磨液并将沉淀物收集晾干可提高DNA的纯度，C正确;D、DNA遇二苯胺试剂在沸水浴条件下呈现蓝色，D正确。翻故选B。
21．答案：AD
解析：A、利用大麦作原料时，淀粉需要分解成葡萄糖才能被酵母菌的利用，A错误;
B、利用大麦发芽产生的淀粉酶进行发酵，焙烤是为了利用高温杀死大麦种子胚但不使淀粉酶失活为后续的糖化过程做准备，B正确;
C、据题意~糖化的目的是将麦芽中的淀粉等有机物水解为小分子物质”，故过程②破碎有利于淀粉与淀粉酶的充分接触，缩短糖化过程所用的时间，C正确;
D、为了提高菌种数量、缩短发酵时间，过程③的主发酵初期应提供氧气，酵母菌在有氧条件下能快速繁殖，错误。故选AD。
22．答案：ACD
解析：A、由题意可知，间充质干细胞是存在于骨髓中层的成体干细胞,具有自我更新及多向分化潜能,可分化为多种间质组织，具有组织特异性，A正确;
B、间充质干细胞分化成脂肪细胞，但不能形成个体，没有体现细胞的全能性，B错误;
C、间充质干细胞在适宜的体内或体外环境下分化为肌细胞、肝细胞、成骨细胞、脂肪细胞等多种细胞的能力，因此需要提供不同的条件，定向诱导分化，C正确;
D、间充质干细胞具有分化为肌细胞、肝细胞、成骨细胞、脂肪细胞等多种细胞的能力，因此在临床上可用于肝硬化、骨和肌肉衰退性病等疾病的治疗研究，D正确。故选ACD。
23．答案：AC
解析：A、从卵巢中采集的卵母细胞需要体外培养到减数第二次分裂中期才可与获能的精子进行体外受精，A错误;
B、体外受精后得到的受精卵需进行培养、检查，检查胚胎的时期，当处于桑椹胚(桑葚胚)或囊胚时才可以进行移植，才可进行移植，B正确;
C、代孕绵羊对植入的胚胎不产生排斥反应，因此不需要对其注射免疫抑制剂，C错误;
D、子代杜泊羊的遗传性状与提供卵母细胞及精子的双亲相似，并由该双亲决定，D正确。故选AC。
24．答案：BCD
解析：A、构建基因表达载体时需要用限制酶切割目的基因和质粒，再用DNA连接酶将目的基因和质粒连接起来，A正确;
B、CaCl2处理只能提高农杆菌细胞的细胞壁的通透性，抗冻蛋白基因afp导入农杆菌前，一般先用Ca2+处理，导入植物细胞常用农杆菌转化法，B错误;
C、抗冻蛋白基因afp整合到番茄细胞的染色体上不一定能表达，还需检测其是否具有抗冻性，C错误;
D、从转基因番茄中检测出抗冻蛋白后，还要继续做个体水平的检测，检测是否具有抗冻的性状，D错误，故选BCD。
25．答案：CD
解析：A、将Bt基因转入马铃薯内可获得抗病毒的植株，A错误;
B、工程菌属于原核生物，没有内质网和高尔基体，不能对干扰素进行加工与修饰，所以由工程菌获得人的干扰素不可直接应用，B错误;
C、转基因抗虫棉在世界范围内被广泛种植，有效控制了棉铃虫的危害，C正确;
D、将外源生长激素基因导入鲤鱼，由于生长激素能促进生长发育，因而可以提高鲤鱼的生长速率，D正确。故选CD。
26．答案：（1）超数排卵；同期发情
（2）囊胚；滋养层；不需要
膀胱生物反应器不受生物性别的限制（或雌雄个体均可通过膀胱生物反应器产生蛋白质）
（3）体外受精；胚胎移植；体外胚胎培养
（4）相同；二者由同一受精卵经细胞分裂和分化形成；细胞中遗传物质未发生改变
解析：(1)为获得多枚胚胎，需对雌性供体施行超数排卵处理，以获得多个卵母细胞，并对供体雌性动物和代孕母体进行同期发情处理，使其生理状态相同。(2)囊胚的内细胞团发育为胎儿的各种组织，滋养层发育为胎盘和胎膜，若要检测W基因是否成功导入，需在早期胚胎发育至囊胚期时取滋养层细胞进行检测。由于膀胱生物反应器不受生物性别的限制(或雌雄个体均可通过膀胱生物反应器产生蛋白质)，所以不需要对胚胎进行性别鉴定。
(3)据图可知，图示利用了体外受精、胚胎移植、体外胚胎培养等技术。
(4)由于同一生物体内不同的体细胞都是由同一受精卵经细胞分裂和分化形成，细胞中遗传物质未发生改变，故同一动物体内乳腺上皮细胞与膀胱上皮细胞的染色体DNA所含的遗传信息相同。
27．答案：（1）DNA半保留复制； DNA聚合酶激活需要Mg2+
（2）变性；延伸；大肠杆菌DNA聚合酶不耐高温；而Taq DNA聚合酶能够耐高温
（3）II和III；使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸30
解析：(1)PCR是根据DNA半保留复制的原理进行体外快速扩增目的基因的技术。PCR需要在一定的缓冲液中进行，缓冲液一般添加Mg2+的作用是激活DNA聚合酶。
(2)PCR每次循环分为变性、复性和延伸三步。由于PCR技术是在高温条件下将DNA两条链解旋，而大肠杆菌DNA聚合酶不耐高温，但TaqDNA聚合酶能够耐高温，故反应中使用TaqDNA聚合酶而不是大肠杆菌DNA聚合酶。
(3)DNA的-0H一端属于DNA的3',DNA子链延伸的方向是5'-3'，因此引物应互补在DNA模板链的3一端，因此若要扩增出基因HSA，应选择图中I1和I11两种引物。引物的作用是使DNA聚合酶能够从引物的3´端开始连接脱氧核苷酸。
28．答案：（1）转录；翻译；将无机盐离子转运至细胞外
（2）让目的基因在受体细胞中稳定存在；并且遗传给下一代；使目的基因能够表达和发挥作用；XbaI；SmaI
（3）激活（抑制、激活或抑制）；（琼脂糖凝胶）电泳；TrSOS1基因在转基因棉花根中均存在；可能表现；在叶片中不存在，不表达
解析：(1)基因的表达是指遗传信息转录和翻译形成蛋白质的过程。基因TrSOSI通过转录和翻译表达出TrSOS1蛋白。位于细胞膜的TrSOS1蛋白数量在盐胁迫下明显增加，由此推测，TrSOS1蛋白能将无机盐离子转运至细胞外。
(2)基因表达载体的构建能使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等，由图可知，质粒中含有启动子，目的基因TrSOSI所在DNA分子上含有终止子，目的基因TrSOSI和终止子两侧的限制酶为目的基因Xbal、Smal，因此构建基因TrSOSI表达载体过程中应选择限制酶Xbal、Smal切割目的基因与质粒。
(3)启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点，能启动转录过程，因此当载体中诱导型启动子的诱导物存在时，可以激活或抑制目的基因的表达。常用琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物。由图可知，转基因棉花根中存在基因TrSOSI转录产物，转基因棉花叶中不存在基因TrSOSI转录产物，由此推测TrSOSI基因在转基因棉花根中均存在并表达，在叶片中存在但不表达。
29．答案：（1）脂肪；形状、大小、颜色
一般来说，在相同的培养条件下，同种微生物表现出稳定的菌落特征
（2）当样品的稀释度足够高时；培养基表面生长的一个单菌落；来源于样品稀释液中的一个活菌;30~300个
（3）B；菌株B分解脂肪较快；且细胞增殖较快
解析：(1)只有能够产生脂肪酶的微生物能分解利用脂肪，因此，可以制备以脂肪为唯一碳源的固体培养基来筛选产脂肪酶菌株。一般来说，在相同的培养条件下，同种微生物表现出稳定的菌落特征(如形状、大小和颜色等)，因此，可依据菌落的形状、大小和颜色等特征对微生物进行初步的鉴定和分类。
(2)稀释涂布平板法除可以用于分离微生物外，也常用来统计样品中活菌的数目。当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数为30~300的平板进行计数。
(3)图中，相同时间内，菌株B的细胞密度高于菌株A，说明菌株B增殖速度较快，而菌株B的脂肪剩余量低于菌株A的脂肪剩余量，说明菌株B降解脂肪的能力较强，故进行相关研究可选择菌株B，原因是菌株B增殖速度较快，单细胞蛋白的产量也高，同时降解脂肪的能力较强，净化效果更好。
30．答案：（1）从小鼠中得到能产生针对病毒X抗体的B淋巴细胞；灭活病毒诱导法
（2）融合的杂交瘤细胞；克隆化培养；阳性
体内培养（或注射到小鼠腹腔内培养）；体外培养（或细胞培养液中培养）
（3）动物细胞培养；动物细胞融合
解析：(1)本实验目的是研制抗病毒X的单克隆抗体，因此过程①是给小鼠注射病毒X，其目的是让小鼠产生特异性免疫，从小鼠中得到能产生针对病毒X抗体的B淋巴细胞。诱导动物细胞融合的方法有PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等。
(2)过程③是指把细胞群稀释后进行选择培养，在该选择培养基中只有融合的杂交瘤细胞能够存活且增殖。过程④通过对筛选的细胞进行克隆化培养和抗体检测，由于抗原和抗体能发生特异性结合，抗体检测呈阳性的细胞即为所需的杂交瘤细胞，将抗体检测呈阳性的细胞筛选出来继续培养。过程⑤可通过体内培养(或注射到小鼠腹腔内培养)和体外培养(或细胞培养液中培养)的方式以获取大量单克隆抗体。
(3)单克隆抗体制备过程运用了动物细胞培养和动物细胞融合技术。
工具
限制性内切核酸酶
DNA连接酶
载体
作用
①切割DNA分子
连接DNA片段
将目的基因导入受体细胞
特点
②具有特异性
③不具有专一性
④需进行人工改造