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    [生物][期末]山东省泰安市2023-2024学年高二下学期7月期末试题(解析版)
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    [生物][期末]山东省泰安市2023-2024学年高二下学期7月期末试题(解析版)

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    这是一份[生物][期末]山东省泰安市2023-2024学年高二下学期7月期末试题(解析版),共27页。试卷主要包含了选择题,非选择题等内容,欢迎下载使用。

    1. 一项新研究发现,女性在怀孕期间除多吃富含蛋白质和脂质的食物外,还应多吃富含植物纤维素的食物,这有利于胎儿免疫系统的发育。下列相关叙述正确的是( )
    A. 组成人体蛋白质的某些氨基酸必须从食物中获得
    B. 蛋白质、脂质和纤维素的单体在排列顺序上都具有多样性
    C. 人体内的细胞能分泌可分解纤维素的酶,从而将其水解为单糖
    D. 胆固醇不参与人体血液中脂质的运输,但参与细胞膜的构成
    【答案】A
    【分析】所有生物体内的生物大分子都是以碳链为骨架的,每一个单体都是以若干个相连的碳原子构成的碳链为基本骨架,由许多单体连接成多聚体。在人体内不能合成,只能从食物中获得的氨基酸称为必需氨基酸,能在体内合成的氨基酸称为非必需氨基酸。
    【详解】A、组成人体蛋白质的氨基酸分为必需氨基酸和非必需氨基酸,人体细胞不能合成必需氨基酸,需从食物中获得,A正确;
    B、纤维素的单体是葡萄糖,在排列顺序上不具有多样性,而组成蛋白质的单体氨基酸存在多种,在排列顺序上具有多样性,B错误;
    C、人体细胞不能分泌分解纤维素的酶,不能利用纤维素,C错误;
    D、人体中的胆固醇既参与血液中脂质的运输,也是细胞膜的重要组成成分,D错误。
    故选A。
    2. 溶酶体参与了细胞的吞噬作用和自噬作用,作用途径如图所示。下列相关叙述错误的是( )

    A. 具有吞噬作用的细胞一定有自噬作用
    B. 清除衰老损伤的细胞和细胞器都是通过自噬作用完成的
    C. 溶酶体膜破裂释放出的各种酸性水解酶在细胞质基质中活性改变
    D. 营养物质缺乏时,细胞可通过加强自噬作用降解非必需物质以维持基本生存
    【答案】B
    【分析】据图分析,细胞通过吞噬作用吞噬细胞外物质后,在与溶酶体结合后被消化处理,细胞自身衰老的细胞器也被溶酶体结合后,最后被清除。
    【详解】A、据题图可知,溶酶体参与了细胞的自噬作用,具有溶酶体的细胞都可进行自噬作用,具有吞噬作用的细胞一定具有溶酶体,因此具有吞噬作用的细胞一定有自噬作用,A正确;
    B、据图可知,清除衰老损伤的细胞器是通过自噬作用完成的,清除衰老和损伤的细胞是通过吞噬作用实现的,B错误;
    C、溶酶体内部水解酶的最适pH呈酸性,而细胞质基质中的pH在7.0左右,故溶酶体膜破裂释放出的各种酸性水解酶在细胞质基质中活性会发生变化,C正确;
    D、在应对生存压力,如营养缺乏时,细胞自噬作用会增强,真核细胞通过降解自身非必需成分,获得生存所需的物质和能量,D正确。
    故选B。
    3. 高尔基体膜上的RS受体特异性识别并结合含有短肽序列RS的蛋白质,以出芽的形式形成囊泡,通过囊泡运输的方式将错误转运到高尔基体的该类蛋白运回内质网并释放。RS受体与RS的结合能力随pH升高而减弱。下列相关叙述错误的是( )
    A. 消化酶和抗体不属于该类蛋白
    B. 该类蛋白运回内质网的过程消耗ATP
    C. 高尔基体内RS受体所在区域的pH比内质网的pH低
    D. RS功能的缺失可能会使高尔基体内该类蛋白的含量减少
    【答案】D
    【分析】根据题干信息“高尔基体膜上的 RS 受体特异性识别并结合含有短肽序列 RS 的蛋白质,以出芽的形式形成囊泡,通过囊泡运输的方式将错误转运到高尔基体的该类蛋白运回内质网并释放”,说明RS 受体和含有短肽序列 RS 的蛋白质结合,将其从高尔基体运回内质网。且 pH 升高结合的能力减弱。
    【详解】A、根据题干信息可以得出结论,高尔基体产生的囊泡将错误转运至高尔基体的蛋白质运回内质网,即这些蛋白质不应该运输至高尔基体,而消化酶和抗体属于分泌蛋白,需要运输至高尔基体并发送至细胞外,所以消化酶和抗体不属于该类蛋白,A正确;
    B、细胞通过囊泡运输需要消耗能量ATP,B正确;
    C、根据题干信息“RS 受体特异性识别并结合含有短肽序列 RS 的蛋白质,RS 受体与 RS 的结合能力随 pH 升高而减弱”,如果高尔基体内 RS 受体所在区域的 pH 比内质网的 pH 高,则结合能力减弱,所以可以推测高尔基体内 RS 受体所在区域的 pH 比内质网的 pH 低,C正确;
    D、通过题干可以得出结论“RS 受体特异性识别并结合含有短肽序列 RS 的蛋白质,通过囊泡运输的方式将错误转运到高尔基体的该类蛋白运回内质网并释放”,因此可以得出结论,如果RS 功能的缺失,则受体不能和错误的蛋白质结合,并运回内质网,因此能会使高尔基体内该类蛋白的含量增加,D错误。
    故选D。
    4. 用物质的量浓度为2ml·L-1的乙二醇溶液和2ml·L-1的蔗糖溶液分别浸泡某种植物细胞,观察到质壁分离现象,其原生质体体积变化情况如图所示。下列相关叙述正确的是( )
    A. 该细胞可能是某种植物根尖分生区的细胞
    B. 根据AB段曲线可以推测此时该种植物细胞的吸水能力越来越弱
    C. BC段形成的原因是乙二醇进入细胞致使细胞液浓度大于外界溶液而吸水
    D. 甘蔗中富含蔗糖,人食用甘蔗会导致人体细胞中也有蔗糖分子
    【答案】C
    【分析】植物细胞的原生质层相当于一层半透膜,植物细胞也是通过渗透作用吸水和失水的。当细胞液的浓度小于外界溶液的浓度时,细胞液中的水就透过原生质层进入外界溶液中,使细胞壁和原生质层都出现一定程度的收缩。当细胞不断失水时,由于原生质层比细胞壁的伸缩性大,原生质层就会与细胞壁逐渐分离开来,也就是逐渐发生了质壁分离。当细胞液的浓度大于外界溶液的浓度时,外界溶液中的水就透过原生质层进入细胞液中,整个原生质层就会慢慢地恢复成原来的状态,使植物细胞逐渐发生质壁分离的复原。
    【详解】A、植物根尖分生区细胞没有中央大液泡,将其放在高浓度的外界溶液中,细胞会失水,但不能发生质壁分离现象,所以该细胞不可能是根尖分生区细胞,A错误;
    B、AB段原生质体体积逐渐减小,表明细胞在不断失水,其细胞液浓度在逐渐增大,据此可推测,此时该种植物细胞的吸水能力越来越强,B错误;
    C、BC段原生质体体积逐渐增大,表明细胞因不断吸收乙二醇而导致细胞液的浓度不断增大,致使细胞液浓度大于外界溶液,细胞逐渐由失水状态转为吸水状态,出现质壁分离复原,C正确;
    D、甘蔗中富含蔗糖,人食用甘蔗,其中的蔗糖被分解为葡萄糖和果糖后才能被人体细胞吸收,所以人体细胞中不会有蔗糖分子,D错误。
    故选C。
    5. 下图为细胞外的葡萄糖调节胰岛B细胞分泌胰岛素的示意图。下列有关叙述错误的是( )
    A. 葡萄糖进入红细胞与进入胰岛B细胞方式均为协助扩散
    B. 与胰岛素合成相关的细胞器有核糖体、内质网、高尔基体、线粒体
    C. 胰岛B细胞分泌胰岛素的方式是胞吐,该过程不需要能量
    D. ATP水解释放的磷酸基团使蛋白质磷酸化,蛋白质空间结构改变使K+外流受阻
    【答案】C
    【分析】当细胞摄取大分子时,首先是大分子与膜上的蛋白质结合,从而引起这部分细胞膜内陷形成小囊,包围着大分子。然后小囊从细胞膜上分离下来,形成囊泡进入细胞内部,这种现象叫作胞吞。与细胞需要外排的大分子,先在细胞内形成囊泡,囊泡移动到细胞膜处,与细胞膜融合,将大分子排出细胞,这种现象叫作胞吐。
    【详解】A、葡萄糖进入红细胞属于协助扩散,据图可知,葡萄糖进入胰岛B细胞是顺浓度梯度进行的,且需要载体蛋白协助,故属于协助扩散,A正确;
    B、胰岛素属于分泌蛋白,核糖体是蛋白质的合成场所,内质网和高尔基体是对蛋白质进行加工,线粒体为蛋白质合成和加工提供能量,即与胰岛素合成相关的细胞器为核糖体、内质网、高尔基体和线粒体,B正确;
    C、胰岛素属于大分子物质,胰岛B细胞分泌胰岛素的方式是胞吐,该过程需要能量,C错误;
    D、蛋白质的空间结构决定其功能,ATP水解释放的磷酸基团使K+通道蛋白磷酸化,蛋白质空间结构改变,K+通道关闭,K+外流受阻,D正确;
    故选C。
    6. 小肠绒毛上皮细胞可通过膜上钠—钾泵的活动使细胞内形成低钠环境,膜上的氨基酸转运载体可将氨基酸和钠离子同向转运至细胞内,进入细胞的氨基酸再以协助扩散的方式转运到组织液,然后进入血液。下列叙述正确的是( )
    A. 氨基酸由肠腔进入细胞所需要的能量直接来自线粒体
    B. 抑制钠—钾泵的活动可能会使氨基酸进入细胞的速度减慢
    C. 推测组织液中的氨基酸浓度高于小肠绒毛上皮细胞中的
    D. 氨基酸转运载体可同时运输氨基酸和钠离子,体现不出载体的特异性
    【答案】B
    【分析】自由扩散的方向是从高浓度向低浓度,不需载体和能量,常见的有水、CO2、O2、甘油、苯、酒精等;
    协助扩散的方向是从高浓度向低浓度,需要转运蛋白,不需要能量,如红细胞吸收葡萄糖;
    主动运输的方向是从低浓度向高浓度,需要载体蛋白和能量,常见的如小肠绒毛上皮细胞吸收氨基酸、葡萄糖,K+等。
    【详解】A、氨基酸由肠腔进入小肠绒毛上皮细胞的动力来自Na+浓度梯度势能,A错误;
    B、抑制钠—钾泵的活动,可能会使细胞内外的Na+浓度差减小,而氨基酸由肠腔进入小肠绒毛上皮细胞的动力来自Na+浓度梯度势能,进而导致Na+浓度梯度势能减小,氨基酸进入细胞的速率减慢,B正确;
    C、进入细胞的氨基酸以协助扩散的方式转运到组织液,由此可推测小肠绒毛上皮细胞中的氨基酸浓度高于组织液中的,C错误;
    D、氨基酸转运载体可以运输氨基酸和钠离子,而不能运输其他其他物质,所以可体现载体的特异性,D错误。
    故选B。
    7. 在淀粉-琼脂块上的5个圆点位置,分别用蘸有不同液体的棉签涂抹,然后将其放入37℃恒温箱中保温。2h后取出淀粉-琼脂块,用碘液(红棕色)处理1min,然后用清水冲洗掉碘液,观察圆点的颜色变化。五种处理的结果记录如下表。下列叙述,错误的是( )
    A. 圆点①属于对照处理的圆点,因为处理的液体仅为清水,未添加试剂
    B. 圆点②和圆点③的颜色反应结果,是由于高温和盐酸改变了唾液中酶的活性
    C. 圆点④中唾液进行适当的稀释后得到相同的实验结果,是因为酶具有高效性
    D. 若圆点⑤呈现蓝黑色,很可能是使用的蔗糖酶溶液含有淀粉酶
    【答案】D
    【详解】A、圆点①处理的液体仅为清水,未添加试剂,属于空白对照处理的圆点,A正确;
    B、圆点②加入的是煮沸新鲜唾液,其中淀粉酶的空间结构被高温破坏而失活,,使淀粉未被分解,所以遇碘液呈现蓝黑色,圆点③加入的是与盐酸混合的新鲜唾液,其中淀粉酶的空间结构被盐酸破坏而失活,使淀粉未被分解,所以遇碘液呈现蓝黑色,故圆点②和圆点③的颜色反应结果相同,是由于高温和盐酸改变了唾液中酶的活性,B正确;
    C、酶微量高效,即具有高效性,适当稀释酶与新鲜酶作用效果几乎相同;故圆点④中唾液进行适当的稀释后得到相同的实验结果,是因为酶具有高效性,C正确;
    D、蔗糖酶具有专一性,不能水解淀粉,故圆点⑤呈现蓝黑色;若使用的蔗糖酶溶液含有淀粉酶,淀粉被分解,原点⑤将呈现红棕色,D错误。
    故选D。
    8. 酶的抑制剂能参与酶促反应速率的调控,因此其在生产中有着广泛的应用。当发生酶促反应时,底物要先与酶结合得到复合物再催化反应的发生。竞争性抑制剂的结构与底物相似,能与底物竞争结合酶分子从而抑制酶促反应速率;非竞争性抑制剂与酶结合后,导致酶的结构发生改变而不能与底物结合。科学家通过实验研究了两种抑制剂对某消化酶的酶促反应速率的影响,结果如图所示。下列有关分析正确的是( )
    A. 所有的酶分子变性前后都能与双缩脲试剂发生紫色反应
    B. 曲线①在S2点后速率不再增加的原因是酶降低的化学反应的活化能在减少
    C. 曲线②对应的最大速率不会超过曲线①对应的最大速率
    D. 曲线②和③分别代表加入非竞争性抑制剂和竞争性抑制剂后的情况
    【答案】C
    【分析】题图分析:依题意,竞争性抑制剂与底物结构相似,可与底物竞争性结合酶的活性部位,随着底物浓度的增加,底物的竞争力增强,酶促反应速率加快,底物浓度足够大时,反应速率可由底物浓度决定。非竞争性抑制剂可与酶的非活性部位不可逆性结合,从而使酶的活性部位功能丧失,导致最大酶促反应速率减小。结合图示分析,图中抑制剂Ⅱ为非竞争性抑制剂,抑制剂Ⅰ为竞争性抑制剂。
    【详解】A、酶绝大多数是蛋白质,少数是RNA,故不是所有的酶分子变性前后都能与双缩脲试剂发生紫色反应,A错误;
    B、曲线①(无抑制剂)在S2点后参与反应的底物是足够的,速率不再增加说明酶的数量有限,B错误;
    CD、依题意,竞争性抑制剂与底物结构相似,可与底物竞争性结合酶的活性部位,随着底物浓度的增加,底物的竞争力增强,酶促反应速率加快。当底物浓度足够大时,反应速率可由底物浓度决定,则此时加竞争性抑制剂和不加抑制剂反应速率差不多。非竞争性抑制剂可与酶的非活性部位不可逆性结合,从而使酶的活性部位功能丧失,导致最大酶促反应速率减小。结合图示,可知曲线②表示的是加入竞争性抑制剂,曲线③代表加入非竞争性抑制剂。相同数量的酶一部分和底物结合,一部分和可竞争性抑制剂Ⅰ结合,故曲线②对应的最大速率不会超过曲线①对应的最大速率,C正确,D错误。
    故选C。
    9. 摘取若干萤火虫的发光器,干燥研成粉末,分两等份分别装入试管中,再加入等量水混合,可以观察到两试管均发出荧光。约过15min荧光消失,再将ATP溶液加入A试管,将等量的葡萄糖溶液加入B试管,结果如图。下列叙述错误的是( )
    A. 据实验可知发光器的粉末中含有ATP
    B. ATP可水解为一个磷酸和一个腺苷
    C. 以上实验说明ATP是直接的能源物质
    D. 萤火虫发光是将化学能转化成光能
    【答案】B
    【分析】发光器之所以能发光,是因为试管内有荧光素和荧光素酶,该过程需要ATP作为直接能源物质提供能量,但各种物质必须在水中,才能有效接触碰撞发生这些生物化学反应,这也说明发光器研磨成的粉末中含有少量的ATP。
    【详解】A、摘取若干萤火虫的发光器,干燥研成粉末,分两等份分别装入试管中,再加入等量水混合,可以观察到两试管均发出荧光,说明发光器研磨成的粉末中含有少量的ATP,A正确;
    B、ATP中文名称是腺苷三磷酸,可水解为一个腺苷和三个磷酸,B错误;
    C、根据实验结果说明,荧光消失后加入葡萄糖,荧光没有再次出现,说明葡萄糖不是生命活动的直接能源物质,加入ATP后发荧光,说明ATP是直接的能源物质,C正确;
    D、萤火虫发光过程是将ATP中活跃的化学能转变成光能的过程,这一过程转变成的光能所需的能量是由ATP 水解直接提供,D正确;
    故选B。
    10. 线粒体起源的内共生学说认为,原始真核细胞吞噬了能进行有氧呼吸的原始细菌,它们之间逐渐形成了互利共生关系,最终原始细菌演变成线粒体。根据该学说,下列相关叙述不相符的是( )
    A. 线粒体中具有的环状双链DNA与细菌的不相似
    B. 线粒体的外膜和内膜在原始来源上是不相同的
    C. 线粒体内含有DNA、RNA和核糖体,具有相对独立的遗传表达系统
    D. 线粒体RNA聚合酶可被原核细胞RNA聚合酶的抑制剂所抑制
    【答案】A
    【分析】线粒体是有氧呼吸的主要场所,由内外两层膜构成,线粒体是半自主细胞器,能进行DNA的复制、基因的表达等。
    【详解】A、线粒体中具有环状双链DNA,细菌的拟核区的DNA也为环状,线粒体中具有的环状双链DNA与细菌的相似,A错误;
    B、原始真核细胞吞噬了能进行有氧呼吸的原始细菌,线粒体的外膜来源于原始真核细胞,线粒体的内膜来源于能进行有氧呼吸的原始细菌,所以线粒体的外膜和内膜在原始来源上是不相同的,B正确;
    C、线粒体内含有DNA、RNA和核糖体,具有相对独立的遗传表达系统,能进行DNA的复制、表达等,C正确;
    D、线粒体RNA聚合酶是蛋白质,可被原核细胞RNA聚合酶的抑制剂所抑制,D正确。
    故选A。
    11. 某兴趣小组为了解手机上细菌的情况进行了如下实验,初筛后将平板B的菌落通过“影印”方法接种到C培养基上培养,使C培养基对应位置上出现相同菌落,然后用伊红-亚甲蓝染液对平板C进行染色,得到平板D的结果(伊红-亚甲蓝染液可使大肠杆菌菌落呈深紫色)。下列相关叙述错误的是( )
    A. 对菌液进行系列梯度稀释,菌落数为30~300时适合进行计数
    B. 若在A培养基上长出各种形态的菌落,该培养基很可能是牛肉膏蛋白胨培养基
    C. 用伊红-亚甲蓝染液染色后,根据平板D的结果,可判断平板B中3是大肠杆菌菌落
    D. 在实验前,需对培养皿和培养基进行干热灭菌,保证没有其他微生物的干扰
    【答案】D
    【详解】A、取附着在手机上细菌进行取样培养后,对菌液进行系列梯度稀释后取30~300菌落数计数,数目过少出现偶然误差,过多不易计数,A正确;
    B、牛肉膏、蛋白胨提供的主要营养是氮源、维生素和生长因子,A平板上生长的菌落有多种形态,说明附着在手机细菌种类较多,该培养基很可能是牛肉膏蛋白胨培养基,B正确;
    C、分析题意可知,伊红一亚甲蓝染液可使大肠杆菌菌落呈深紫色,由图可知3号菌落为大肠杆菌菌落,C正确;
    D、为保证没有其他微生物的干扰,需要对培养基和培养皿进行灭菌,但培养基的灭菌方法是湿热灭菌,通常用高压蒸汽灭菌法,D错误。
    故选D。
    12. 研究发现,骆驼蓬体内有多种具有抗肿瘤作用的生物碱。科研人员为了快速繁殖骆驼蓬及获取生物碱,进行了如图所示的操作流程。下列相关叙述错误的是( )
    A. 若培育出的骆驼蓬为脱毒苗,则所用外植体可能是茎尖
    B. 进行①过程前,外植体需要进行消毒处理, 以免杂菌污染
    C. 利用该操作流程获取生物碱可减少人类对自然资源的破坏
    D. 进行①和③过程的外界培养条件相同, 但激素比例不同
    【答案】D
    【分析】植物细胞工程技术的应用:植物繁殖的新途径(包括微型繁殖、作物脱毒等)、作物新品种的培育(单倍体育种突变体的利用)、细胞产物的工厂化生产。
    【详解】A、由于植物顶端分生区附近(如茎尖)的病毒很少, 甚至无病毒, 所以利用茎尖可以培育出脱毒苗, A 正确;
    B、进行植物组织培养时,外植体需要进行消毒处理, B正确;
    C、由工厂化细胞培养提取生物碱的过程不需要考虑土地资源的消耗,同时也不需要考虑季节、时间的限制, 因而可减少对自然资源的破坏, C正确;
    D、进行①和③过程的外界培养条件不同,①过程不需要光照,③过程需要光照, D错误。
    故选D。
    13. 奶牛活体采卵—体外胚胎生产(OPU-IVP)技术的诞生标志着奶牛繁育技术进入“5G”时代。该技术包括奶牛活体采卵及体外培养、体外受精、性别控制、胚胎移植等操作。已知奶牛Y染色体上有一段雄性特异的高度重复序列,依据该重复序列设计引物,建立了用于奶牛胚胎性别鉴定的PCR体系(SRY-PCR)。下列叙述错误的是 ( )
    A. 通过OPU-IVP技术获得优良奶牛的过程属于有性生殖
    B. 活体采卵前可对供体母牛注射促性腺激素促使其超数排卵
    C. 采集的精子需要经过获能处理才能与培养成熟的卵子完成受精
    D. 取滋养层细胞进行SRY-PCR,应选择结果为阳性的胚胎进行移植
    【答案】D
    【分析】体外受精主要包括:卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精。
    (1)卵母细胞的采集和培养:①主要方法是用促性腺激素处理,使其超数排卵,然后从输卵管中冲取卵子。②第二种方法:从已屠宰母畜的卵巢中采集卵母细胞或直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞。
    (2)精子的采集和获能:①收集精子的方法:假阴道法、手握法和电刺激法。②对精子进行获能处理:包括培养法和化学诱导法。
    (3)受精:在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程。
    【详解】A、OPU-IVP技术包括体外受精过程,故其获得优良奶牛的过程属于有性生殖,A正确;
    B、为获取更多的卵(母)细胞,可对供体母牛注射促性腺激素,使其超数排卵,B正确;
    C、采集的精子需要经过获能处理,才具备受精的能力,才能与培养成熟的卵子完成受精,C正确;
    D、结果为阳性的胚胎说明其含有Y染色体,为雄性,为获得可以产生牛奶的奶牛应选择结果为阴性的胚胎进行移植,D错误。
    故选D。
    14. “DNA粗提取与鉴定”的实验步骤是:研磨→去杂质→析出→鉴定;某研究小组欲探究不同的去杂质方法对实验结果的影响,实验结果如表所示。下列叙述错误的是( )
    注:OD260与OD280的比值可检查DNA纯度。纯DNA的OD260/OD280为1.8,当存在蛋白质污染时,这一比值会明显降低。
    A. 猪肝和菜花均可作为提取DNA的材料
    B. 对研磨液进行离心是为了加速DNA的沉淀
    C. 离心法可以获得更高纯度的DNA
    D. 离心或沉淀后应取上清液进一步提取DNA
    【答案】B
    【分析】DNA的粗提取与鉴定的实验原理是:①DNA的溶解性,DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同,利用这一特点可以选择适当浓度的盐溶液可以将DNA溶解或析出,从而达到分离的目的;②DNA不溶于酒精溶液,细胞中的某些蛋白质可以溶解于酒精,利用这一原理可以将蛋白质和DNA进一步分离;③在沸水浴的条件下DNA遇二苯胺会呈现蓝色。
    【详解】A、DNA粗提取与鉴定的实验中,应选择富含DNA的材料,猪肝和菜花均可作为提取DNA的材料,A正确;
    BC、离心研磨液的目的是加速沉淀,离心能够加速细胞膜、细胞器、一些较大杂质的沉淀,离心法可以获得更高纯度的DNA,B错误,C正确;
    D、离心或沉淀后应取上清液进一步提取DNA,D正确。
    故选B。
    15. 为评估外源基因Vgb在菊花中的稳定性以及对生态环境的影响,研究人员在种植转基因菊花的第二年,随机选取转基因菊花株系及周边非转基因菊花和各种杂草,提取DNA。根据Vgb设计特异性引物进行PCR扩增,电泳结果如图。下列说法不正确的是( )
    注:CK表示质粒阳性对照,1为空白对照,2~10 为转基因株系, 11~15为不同种类杂草,16~20 为非转基因菊花
    A. 设置空白实验是为了排除实验操作、试剂污染等对结果的影响
    B. 结果表明2年内Vgb基因在菊花细胞中稳定,且未发生向周边植物的扩散
    C. 转基因植物与周边其他植物之间不可能通过花粉发生基因交流
    D. 将Vgb基因转入其他植物时同样要经过安全性评价
    【答案】C
    【分析】据题意可知,1为空白对照,2~10 为转基因株系,11~15为不同种类杂草,16~20 为非转基因菊花,图中2~10 含有Vgb基因,其他植物都不含Vgb基因,说明2年内Vgb基因在菊花细胞中稳定,且未发生向周边植物的扩散。
    【详解】A、设置空白实验目的是排除无关变量对实验结果的干扰,本实验无关变量为实验操作、试剂污染等,A正确;
    B、据题意可知, 11~15为不同种类杂草,16~20 为非转基因菊花,图中它们都没有外源基因Vgb,因此推测2年内Vgb基因在菊花细胞中稳定,且未发生向周边植物的扩散,B正确;
    C、外源基因若转入细胞核就有可能通过花粉进行传播,发生基因交流,C错误;
    D、不同基因具有不同表达模式和功能,对植物自身和环境造成的影响以及带来的安全性问题,因此将Vgb基因转入其他植物时同样要经过安全性评价,D正确。
    故选C。
    二、选择题:本题共5小题,每小题3分,共15分。每小题有一个或多个选项符合题目要求,全部选对得3分,选对但不全的得1分,有选错的得0分。
    16. 植物细胞内10%~25%的葡萄糖经过一系列反应,产生NADPH、CO2和多种中间产物,该过程称为磷酸戊糖途径。该途径的中间产物可进一步生成氨基酸和核苷酸等。下列相关叙述错误的是( )
    A. 磷酸戊糖途径产生的NADPH与有氧呼吸产生的还原型辅酶相同
    B. 葡萄糖经磷酸戊糖途径产生的能量与有氧呼吸相同
    C. 正常生理条件下,利用14C标记的葡萄糖可追踪磷酸戊糖途径中各产物的生成
    D. 受伤组织修复过程中所需要的原料可由该途径的中间产物转化生成
    【答案】ABC
    【分析】有氧呼吸是葡萄糖等有机物彻底氧化分解并释放能量的过程。由题干信息可知,磷酸戊糖途径可以将葡萄糖转化成其他中间产物,这些中间产物可以作为原料进一步生成其他化合物。
    【详解】A、磷酸戊糖途径产生的NADPH是为其他物质的合成提供还原剂的,而有氧呼吸产生的还原型辅酶是NADH,能与O2反应产生水,A错误;
    B、有氧呼吸是葡萄糖彻底氧化分解释放能量的过程,而磷酸戊糖途径产生了多种中间产物,中间产物还进一步生成了其他有机物,所以葡萄糖经磷酸戊糖途径产生的能量比有氧呼吸少,B错误;
    C、磷酸戊糖途径中也会生成水,水不含碳,因此利用14C标记的葡萄糖不可追踪磷酸戊糖途径中各产物的生成,C错误;
    D、受伤组织修复即是植物组织的再生过程,细胞需要增殖,所以需要核苷酸和氨基酸等原料,而磷酸戊糖途径的中间产物可生成氨基酸和核苷酸等,D正确。
    故选ABC。
    17. 水杨酸(SA)对植物抗逆性有一定作用。为研究SA作用机制,科研人员用适宜浓度的SA喷洒小麦叶片后,测定两种光照条件下的D1蛋白(D1是促进光合作用活性的关键蛋白)含量,结果如图甲所示(实验一、二为重复实验)。科研人员继续在较强光照强度下进行了相关实验,以探究SA对小麦作用的适宜浓度,结果如图乙所示。下列相关叙述错误的是( )
    A. SA通过减少较强光照造成的D1蛋白含量降低程度,提高抗逆性
    B. 图甲重复实验的目的是为了进一步实验摸索条件
    C. 为确定SA作用的最适浓度,应在0.1~0.3μml/L之间进一步实验
    D. 较强光照下,特定浓度NaCl与SA对小麦光合作用存在协同作用
    【答案】BD
    【分析】图甲显示,较强光照会导致D1蛋白含量下降,喷洒适宜浓度的SA会减弱较强光照造成的D1蛋白含量降低,能提高抗逆性,据此,若要提高小麦产量,从外源因素考虑,可喷洒适宜浓度的水杨酸,从分子水平考虑,可通过提高D1蛋白的含量来实现。
    【详解】A、由图可知,较强光照会导致D1含量下降,较强光下用SA处理后D1含量虽仍低于CK组,但明显高于W2组,可推测经SA处理后,SA通过减少较强光照造成的D1蛋白含量及光系统Ⅱ活性降低程度,提高抗逆性,A正确;
    B、重复实验的目的是减少误差,B错误;
    C、从图乙可知,最适浓度在0.1~0.3μml/L之间,C正确;
    D、由图乙可知,在较强光照下,与清水组相比,单独使用特定浓度 NaCl处理后,小麦光合相对值降低,而与特定浓度 NaCl 与 SA共同处理组相比,小麦光合相对值有所提高,说明特定浓度 NaCl 与 SA对小麦光合作用存在负相关作用,D错误。
    故选BD。
    18. 如图为核移植实验过程示意图。据图分析,下列相关叙述正确的是( )
    A. 去核的时期应该在MⅡ期,原因是该时期第一极体和卵细胞核较近
    B. 桑葚胚细胞应提取出细胞核后,尽快注入去核的卵母细胞中
    C. 电融合法可促使重构胚形成,后期还需要其他方法激活重构胚
    D. 受体动物应选择与供体相同的品种,防止出现免疫排斥现象
    【答案】AC
    【分析】受精前的准备阶段:(1)准备阶段1-精子获能,刚刚排出的精子,不能立即与卵子受精,必须在雌性动物生殖道发生相应的生理变化后,才能获得受精能力。(2)准备阶段2-卵子的准备,动物排出的可能是初级卵母细胞也可能是次级卵母细胞,都要在输卵管内进一步成熟,达到减数第二次分裂中期时,才具备与精子受精的能力。
    【详解】A、去核的时期应该在MⅡ期,此时第一极体和卵细胞核较近,利用显微操作去核法,将细胞核和第一极体一并吸出,A正确;
    B、由图可知,桑葚胚细胞不需要提取出细胞核,可直接注入去核的卵母细胞中,B错误;
    C、电融合法可促使重组胚胎形成,后期还需要其他方法(如电刺激、Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等)激活重组胚胎,C正确;
    D、受体动物应选择与供体相同的品种,一般不会出现免疫排斥现象,两者之间无关,D错误。
    故选AC。
    19. 科学家通过体外诱导成纤维细胞、T细胞和B细胞等,获得了类似于胚胎干细胞的一种细胞,称为诱导多能干细胞(简称iPS细胞)。因为诱导过程无须破坏胚胎,而且iPS细胞可来源于病人自身的体细胞,因此iPS细胞的应用前景优于胚胎干细胞。下列相关叙述正确的是( )
    A. 干细胞包括胚胎干细胞和成体干细胞等,前者存在于早期胚胎中
    B. 在进行iPS细胞培养时,必须保证环境是无菌的,所以要定期更换培养液
    C. 来源于病人自身的体细胞的iPS细胞,其细胞表面的HLA与体内细胞的基本相同能够避免免疫排斥问题
    D. 神经干细胞和iPS细胞在治疗阿尔茨海默病等方面有重要价值
    【答案】ACD
    【分析】动物细胞培养需要满足以下条件
    (1)充足的营养供给微量元素、无机盐、糖类、氨基酸、促生长因子、血清等。
    (2)适宜的温度:36.5℃±0.5℃;适宜的pH:7.2~7.4。
    (3)无菌、无毒的环境:培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素,以防培养过程中的污染。此外,应定期更换培养液,防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。
    (4)气体环境:95%空气+5%CO2,O2是细胞代谢所必需的,CO2的主要作用是维持培养液的pH。
    【详解】A、干细胞包括胚胎干细胞和成体干细胞,前者只存在于早期胚胎中,而成体干细胞多来自于人体的组织且增殖能力有限,A正确;
    B、在进行iPS细胞培养时,必须保证环境是无菌的,要对培养液和培养用具进行灭菌处理以及在无菌条件下进行操作,而定期更换培养液是防止代谢产物积累对细胞自身造成危害,B错误;
    C、iPS细胞可以来源于病人自身的体细胞,将它移植回病人体内后,因为其细胞表面的HLA(组织相容性抗原)基本相同,故能够避免免疫排斥问题,C正确;
    D、神经干细胞在治疗神经组织损伤和神经系统退行性疾病如帕金森病、阿尔茨海默病等方面有重要的应用价值;用iPS细胞治疗阿尔茨海默病、心血管疾病等领域的研究也取得了新进展,可见神经干细胞和iPS细胞在治疗阿尔茨海默病等方面有重要价值,D正确。
    故选ACD。
    20. dNTP(包括dATP、dTTP、dGTP、dCTP)的结构与ATP类似,除碱基不同外,dNTP含有脱氧核糖。与dNTP相比,ddNTP的五碳糖为双脱氧核糖,其3'碳位为-H且不能与磷酸形成化学键。现有甲~丁四个PCR反应体系,甲体系中含有放射性磷标记的ddATP(记作ddATP+)和DNA模板链。PCR完成后,经电泳(分子量小的DNA在电场中移动快)将甲体系中一组长度不等的DNA单链分离。丙、乙、丁三个PCR体系与甲相似,分别用于检测T、C、G的碱基序列,检测结果如图。下列相关叙述正确的是( )
    A. ddATP+中的放射性磷酸基团应位于ddATP的末端
    B. 模板DNA的碱基序列为3'CTGGACTGACAT5'
    C. 甲体系中除含ddATP+外,还应含有dTTP、dGTP、dCTP
    D. ddNTP与dNTP竞争脱氧核苷酸链的3'末端和5'末端
    【答案】B
    【分析】PCR是聚合酶链式反应的缩写。它是一项根据DNA半保留复制的原理,在体外提供参与DNA复制的各种组分与反应条件,对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技术。PCR反应需要在一定的缓冲液中才能进行,需提供DNA模板,分别与两条模板链结合的2种引物,4种脱氧核苷酸和耐高温的DNA聚合酶,同时通过控制温度使DNA复制在体外反复进行。
    【详解】A、ddNTP的3'碳位为-H且不能与磷酸形成化学键,因此在PCR的原料中加入ddNTP,若ddNTP参与子链的合成,则子链的延伸停止。据此可知,ddNTP可用于标记不同长短的DNA片段,因此ddATP+中的放射性磷酸基团应位于ddATP中与A最接近的位置,A错误;
    B、若ddNTP参与子链的合成,则子链的延伸停止,因此DNA合成链可能随机停止在任何碱基处。 PCR扩增时,子链由5'端向3'端延伸,则根据电泳图及分子量小的DNA在电场中移动快可知,该DNA片段的待测碱基序列阅读方向由上往下为5'GACCTGACTGTA3',因此模板DNA的碱基序列为3'CTGGACTGACAT5',B正确;
    C、甲体系中除含ddATP+外,还应含有dATP、dTTP、dGTP、dCTP,C错误;
    D、DNA复制过程中,子链的延伸方向由5'至3',因此,ddNTP与dNTP竞争脱氧核苷酸链的3'末端,D错误。
    故选B。
    三、非选择题:本题共5小题,共55分。
    21. 如图甲为某植物非绿色器官细胞呼吸过程部分示意图,图乙表示该植株的非绿色器官在不同O2浓度下,单位时间内O2吸收量和CO2释放量的变化(细胞呼吸分解的有机物全部为葡萄糖),图丙的锥形瓶中是新鲜的土豆块茎碎块。
    (1)该植物细胞中,图甲中过程①发生的场所是___,过程①②③的共同点是___,④过程释放能量较少的原因是___。不能用是否产生CO2作为判断该植物细胞呼吸方式的依据,原因是___。
    (2)O2浓度为a时,无氧呼吸消耗的葡萄糖是有氧呼吸的___倍,O2浓度为b时,该器官不进行___(填:“无氧呼吸”或“有氧呼吸”),O2浓度由0到b的过程中,有氧呼吸消耗葡萄糖的速率逐渐___(填:“增加”或“减少”)。
    (3)若在锥形瓶中放入装有氢氧化钠的小烧杯,红色液滴左移,则可以得出的结论是___。
    (4)为准确科学地测定土豆块茎细胞有氧呼吸的速率,排除环境因素对实验结果的影响,图丙中装置图除了要做(3)中的修改外,还需___。
    【答案】(1)①. 细胞质基质 ②. 大量的能量以热能的形式散失,少部分贮存在ATP中 ③. 大部分能量贮存在酒精中 ④. 因为有氧呼吸和无氧呼吸都产生二氧化碳
    (2)①. 3 ②. 无氧呼吸 ③. 增加
    (3)锥形瓶中的土豆块进行了有氧呼吸过程
    (4)还需设置对照装置,对照组的设置为将土豆块茎换成煮熟的等质量的土豆块茎,其他的与修改后的装置相同
    【小问1详解】
    图中过程①是有氧呼吸的第一阶段,发生的场所是细胞质基质,过程①②③是有氧呼吸的三个阶段,共同点是大量的能量以热能的形式散失,少部分贮存在ATP中。④过程释放能量较少的原因是大部分能量贮存在酒精中。不能用是否产生CO2作为判断该植物细胞呼吸方式的依据,原因是植物的无氧呼吸和有氧呼吸都产生二氧化碳。
    【小问2详解】
    据图可知,氧气浓度为a时,CO2的释放量约为0.6,包括有氧呼吸和无氧呼吸释放的CO2总量,此时氧气的吸收量为0.3,据此推知,有氧呼吸消耗的葡萄糖为0.05,无氧呼吸释放的CO2-0.6-0.3=0.3,根据反应式可知,无氧呼吸消耗的葡萄糖为0.15,因此O2浓度为a时,无氧呼吸消耗的葡萄糖是有氧呼吸的3倍;当氧气浓度为b时,释放的二氧化碳和吸收的氧气量相等,根据有氧呼吸的总反应方程式,可知,植物只进行有氧呼吸;O2浓度由0到b的过程中,氧浓度升高,有氧呼吸速率加快,则有氧呼吸消耗葡萄糖的速率逐渐增加。
    【小问3详解】
    若在锥形瓶中放入装有氢氧化钠的小烧杯,由于有氧呼吸消耗氧气产生二氧化碳随后二氧化碳被吸收,导致锥形瓶中气压下降,因此,红色液滴左移,因此,可以得出的结论是锥形瓶中的土豆块进行了有氧呼吸过程。
    【小问4详解】
    若要探究不同温度对土豆块茎细胞有氧呼吸的影响,则图乙中装置图除了要做(3)中的修改外,还需设置对照装置,对照组的设置为将土豆块茎换成煮熟的等质量的土豆块茎,其他的与修改后的装置相同。
    22. 图1表示植物叶肉细胞中光合作用和有氧呼吸的部分过程,其中(C3在不同代谢过程中表示不同的化合物;图2表示该细胞中的某种生物膜和其上所发生的部分生化反应,其中e-表示电子;图3表示25℃下叶片的光合作用速率。
    (1)图1中过程①至④表示的生化反应,发生在生物膜上的有___个。当过程③发生时,细胞与外界环境无CO2交换,此时该细胞所处的生理状态是___。
    (2)图2所示生物膜上发生的能量变化为___。二硝基酚(DNP)会导致该生物膜对H+的通透性增大但不影响电子转移,DNP作用于该膜时ATP的合成量会减少,原因是H+跨膜顺浓度梯度运输促进ATP合成,DNP作用于该膜时导致H+的通透性增大,H+在膜内外的浓度梯度会___(填:“减小或消除”、“增大”或“不变”)。
    (3)图3中A点时会发生图1中的___(填序号)过程,将该植物先置于此条件下12小时,然后置于C点条件下12小时,在这24小时该植物叶肉细胞内有机物量___(填:“增加”、“减少”或“无法判断”)。
    (4)某植物工厂为提高生菜产量进行了一系列实验,结果如图所示。
    注:对照组:白光;A组:红光:蓝紫光=1:2;B组:红光:蓝紫光=3:2;C组:红光:蓝紫光=2:1。
    每组总光照强度相同,图2显示,A、B、C组的干重都高于对照组,结合图1分析,原因是___。基于以上研究成果,工厂管理者欲采购一批红、蓝玻璃对工厂进行改造以提高生菜产量,该做法___(填:“合理”或“不合理”),原因是___。
    【答案】(1)①. 0 ②. 呼吸作用强度等于光合作用强度
    (2)①. 光能转化为 ATP(和 NADPH)中活跃的化学能 ②. 减小或消除
    (3)①. ①③ ②. 增加
    (4)①. 与对照组相比,A、B、 C组使用的是红光和蓝紫光,且使用了不同的配比,这使得氮含量和叶绿素含量增加,从而使净光 合速率增加,最终干重增加 ②. 不合理 ③. 使用红、蓝玻璃会使透过的光照强度减弱,光合速率下降
    【分析】分析题图1,①表示葡萄糖分解成丙酮酸,②表示暗反应中C3还原成有机物过程,⑤表示C3再生C5过程,④表示光合作用暗反应CO2的固定,③表示丙酮酸产生CO2过程。根据图2中显示,图2中发生的是光反应,故该膜为类囊体膜。图3表示光照强度对光合作用速率的影响,自变量是光照强度,因变量是光合作用的强度。
    【小问1详解】
    ①表示葡萄糖分解成丙酮酸,在细胞质基质中进行,②表示暗反应中C3还原成有机物过程,发生叶绿体基质中,③表示丙酮酸产生CO2过程,发生在线粒体基质中,④表示光合作用暗反应CO2的固定,发生在叶绿体基质中,因此发生在生物膜上的有0个,③表示丙酮酸产生CO2过程,即植物进行有氧呼吸的第二阶段,偌细胞与外界环境无CO2交换,说明细胞呼吸作用产生的二氧化碳都进入了叶绿体进行光合作用,此时该细胞所处的生理状态是呼吸作用等于光合作用。
    小问2详解】
    图2表示的光合作用的光反应,能量变化为光能转变为ATP(和NADPH)中活跃的化学能。根据题意, 二硝基酚(DNP)会导致该生物膜对H+的通透性增大但不影响电子转移,DNP作用于该膜时ATP的合成量会减少,而H+跨膜顺浓度梯度运输促进ATP合成,说明DNP作用于该膜时,H+跨膜顺浓度梯度运输在减小,因此DNP作用于该膜时导致H+的通透性增大,H+在膜内外的浓度梯度会减小或消除。
    【小问3详解】
    图3中的A点光照强度为0,植物进行呼吸作用,释放二氧化碳,因此会发生呼吸作用,即图1中的①③过程。点光照强度为0,此时只进行呼吸作用,这12小时消耗有机物的量用二氧化碳的释放量表示是12×5=60,然后置于C点条件下12小时,此时的净光合积累的有机物用二氧化碳吸收量表示是12×20=240,在这24小时内,植物要从外界吸收二氧化碳,说明有机物在积累增加。
    【小问4详解】
    与对照组相比, A、B、C组使用的是红光和蓝紫光,增加了氮含量和叶绿素含量,使得净光合速率增加,最终使干重增加。使用红、蓝玻璃会使透过的光照强度减弱,光合速率下降,因此采购一批红、蓝玻璃对工厂进行改造以提高生菜产量这一做法不合理。
    23. 发酵工程是指采用现代工程技术手段,利用微生物的某些特定功能,为人类生产有用的产品或直接利用微生物的工作过程。生活中的很多食品都是利用发酵工程生产的。
    (1)在实验室里筛选用于发酵工程的菌种时,需要对获得的菌种进行分离纯化。最常用的分离单菌落的方法是___和___。纯化菌株时,在第二次及以后划线时,总是从上一次的末端开始划线,这样做的原因是___。在发酵之前还需要对菌种进行___。
    (2)如图是发酵工程中常见的发酵控制装置。若是用此装置生产酒精,可以先通入无菌空气,一段时间后密闭。通入无菌空气的目的是___。生产上可以通过利用该装置检测发酵液的温度、___等实时检测和控制整个发酵过程。在发酵工程的发酵环节中,发酵条件变化不仅会影响___,而且会影响___。
    (3)分离或提纯发酵产品是工业发酵制取产品必经的步骤。如果发酵产品是菌体本身,可采用___等方法将菌体分离干燥后即可得到产品。
    【答案】(1)①. 划线分离法 ②. 涂布分离法 ③. 将聚集的菌体逐步稀释以得到单菌落 ④. 扩大培养
    (2)①. 既防杂菌污染又能促进酵母菌需氧呼吸 ②. PH(溶氧量、营养供给等)③. 微生物的生长繁殖 ④. 微生物的代谢途径 (3)过滤或沉淀
    【分析】发酵工程,是指采用现代工程技术手段,利用微生物的某些特定功能,为人类生产有用的产品,或直接把微生物应用于工业生产过程的一种新技术。发酵工程的内容包括菌种的选育、培养基的配制、灭菌、扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面。
    【小问1详解】
    纯化微生物时常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法,其中平板划线法的操作相对简单。纯化菌株时,通常使用的划线工具是接种环。在第二次及以后划线时,总是从上一次的末端开始划线,这样做可以将聚集的菌落逐步稀释以获得单个菌落。在发酵之前还需要对菌种进行扩大培养。
    【小问2详解】
    若是用此装置生产酒精,反应罐中应加入反应液和酵母菌。在装入后较短时间内,应通入无菌空气,目的是有利于酵母菌进行需氧呼吸,增加菌体的数量,同时又可以防止杂菌污染。发酵过程中由于营养物质和氧气的消耗、代谢废物的产生,会导致装置中溶氧量、温度、pH的改变,使种群数量发生改变。故在生产上可以通过利用该装置检测发酵液的温度、pH、溶氧量、营养供给等实时检测和控制整个发酵过程。在发酵工程的发酵环节中,发酵条件变化不仅会影响微生物的生长繁殖,还会影响微生物的代谢途径。
    【小问3详解】
    分离或提纯发酵产品是工业发酵制取产品必经的步骤。如果发酵产品是菌体本身,可采用过滤或沉淀等方法将菌体分离干燥后即可得到产品。
    24. 研究表明,转铁蛋白受体(TfR)在多种肿瘤中高表达,其在肿瘤细胞中的主要作用是参与铁离子吸收,而铁离子对包括肿瘤细胞在内的所有细胞的生长和代谢至关重要,由转铁蛋白(Tf)和TfR参与的铁运输过程如图1所示。TfR单克隆抗体能与TfR特异性结合,可阻止肿瘤细胞对铁离子的吸收,进而导致肿瘤细胞死亡,因此可用于控制肿瘤增长。
    (1)据图1,简述TfR单克隆抗体控制肿瘤增长的机理:___。
    (2)制备TfR单克隆抗体的基本流程,如图2所示:
    ①过程Ⅰ中,常用的化学方法是___;“?”表示的内容是___。
    ②由于密度差异导致骨髓瘤细胞与B淋巴细胞不能长时间混匀、___(答出1点)等原因,得到的少数是杂交瘤细胞,因此需要进行筛选1。
    ③筛选2是对杂交瘤细胞进行___,要进行筛选2的原因是___。
    (3)克隆培养杂交瘤细胞时,需将杂交瘤细胞放入含有5%CO2和95%空气的混合气体的培养箱中培养,其中CO2的主要作用是___。
    (4)单克隆抗体被广泛用作诊断试剂的原因是___。
    【答案】(1)TfR单克隆抗体与TfR特异性结合,阻止全铁转铁蛋白与TfR结合,从而阻止肿瘤细胞吸收铁离子,进而导致肿瘤细胞死亡
    (2)①. PEG融合法 ②. 能分泌TfR抗体的杂交瘤 ③. 细胞融合成功率低、细胞融合是随机的 ④. 克隆化培养和抗体检测 ⑤. 从小鼠脾脏中分离到的B淋巴细胞有多种,形成的杂交瘤细胞有多种 (3)维持培养液的pH
    (4)能准确识别抗原的细微差异,可与特定抗原发生特异性结合,并且可以大量制备
    【分析】单克隆抗体的制备一般要经过两次筛选:第一次筛选为从多种融合的细胞中,筛选杂交瘤细胞,即从B淋巴细胞与B淋巴细胞、B淋巴细胞与骨髓瘤细胞、骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞这三种融合细胞中,筛选出融合的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞;第二次筛选是从杂交瘤细胞中筛选出能产生所需抗体的细胞群,然后继续培养,以获得足够数量的细胞,在体外条件下做大规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖。
    【小问1详解】
    据图可知,铁与Tf结合形成全铁转铁蛋白,全铁转铁蛋白能与细胞膜上的TfR结合,通过胞吞将铁运进细胞,而TfR单克隆抗体与TfR能发生特异性结合,阻止全铁转铁蛋白与TfR结合,从而阻止肿瘤细胞吸收铁离子,进而导致肿瘤细胞死亡,因此TfR单克隆抗体可控制肿瘤增长。
    【小问2详解】
    ①过程Ⅰ中是诱导动物细胞融合,常用的化学方法是PEG融合法。“?”表示第二次筛选出的能分泌TfR抗体的杂交瘤。
    ②由于密度差异导致骨髓瘤细胞与B淋巴细胞不能长时间混匀、细胞融合成功率低、细胞融合是随机的等原因,得到的少数是杂交瘤细胞,因此需要进行筛选1。
    ③筛选1获得的是杂交瘤细胞,但小鼠处在多种抗原刺激下,从小鼠脾脏中分离到的B淋巴细胞有多种,形成的杂交瘤细胞有多种,因此获得的杂交瘤细胞不一定能产生所需的抗体,故还需对杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测。
    【小问3详解】
    动物细胞培养中,CO2的作用是维持培养液的pH。
    【小问4详解】
    单克隆抗体被广泛用作诊断试剂的原因是其能准确识别抗原的细微差异,可与特定抗原发生特异性结合,并且可以大量制备。
    25. 抗菌肽是一类广泛存在于自然界中的多肽,对细菌、真菌、寄生虫和病毒具有广泛的抑制作用。科研人员将抗菌肽Piscidin基因及NK-lysin基因进行融合形成杂合肽NK-LPd基因(部分过程如图1所示),从而获得具有更高抗菌活性的杂合抗菌肽。
    (1)DNA聚合酶能够从引物的_____(填“3´”或“5´”)端开始连接脱氧核苷酸。若设计的引物较长,为提高PCR的准确度需要适当_____(填“提高”或“降低”)复性温度。
    (2)Piscidin基因表达以a链为模板,NK-lysin基因表达以d链为模板。为了实现图1中两基因重叠延伸,PCR1过程中需要分别在引物_____和引物_____的5´端添加互补序列。
    (3)图2为PCR1扩增产物(Ⅰ、Ⅱ)和PCR2扩增产物(Ⅲ)的凝胶电泳实验结果,根据结果可说明基因融合成功,判断依据是_____。

    (4)在转化前,需要先构建含NK-LPd基因的表达载体,其目的是_____;在成功转化的酵母菌中提纯得到杂合抗菌肽NK-LPd,为验证NK-LPd对大肠杆菌的抑菌效果,先将大肠杆菌涂布在图3的平板上,再放置滤纸片。根据图示实验结果推测,在A、D区域放置的滤纸片分别为_____。

    【答案】(1)①. 3´ ②. 提高
    (2)①. X ②. Z
    (3)Ⅰ、Ⅱ的长度之和与Ⅲ基本相等
    (4)①. 使融合基因能够在受体细胞中稳定存在,并遗传给下一代,且使融合基因表达和发挥作用 ②. 空白滤纸片、含杂合抗菌肽NK-LPd的滤纸片
    【分析】PCR技术进行的条件有:模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定性的DNA聚合酶,所运用的原理为DNA分子的复制,遵循碱基互补配对原则。
    【小问1详解】
    DNA聚合酶在DNA复制过程中,从引物的3’端 开始连接脱氧核苷酸,因为DNA聚合酶只能催化脱氧核苷酸连接到已有的核苷酸片段的3'羟基上。如果设计的引物较长,那么引物与模板之间的结合会更加稳定,因此需要适当提高复性温度,以确保引物与模板之间的特异性结合。
    【小问2详解】
    已知Piscidin基因表达以a链为模板,NK-lysin基因表达以d链为模板,而在PCR扩增时,引物会与模板链的3´结合,沿着5´→3´方向延伸,所以为了实现图1中两基因重叠延伸,PCR1过程中需要在引物X和引物Z的5端添加互补序列,这是因为融合基因中两个基因的模板链应在同一条DNA单链中。
    【小问3详解】
    图2为PCR1扩增产物(Ⅰ、Ⅱ)和PCR2扩增产物(Ⅲ)的凝胶电泳实验结果,根据结果可说明基因融合成功,判断依据是Ⅰ、Ⅱ的长度之和与Ⅲ基本相等。
    【小问4详解】
    在转化前,需要先构建含NK-LPd基因的表达载体,其目的是使融合基因能够在受体细胞中稳定存在,并遗传给下一代,且使融合基因表达和发挥作用;在成功转化的酵母菌中提纯得到杂合抗菌肽NK-LPd,为验证NK-LPd对大肠杆菌的抑菌效果,先将大肠杆菌涂布在图3的平板上,再放置滤纸片,根据抑菌圈大小可以判断抑菌效果的强弱,在图3中A区域未出现抑菌圈,推测放置的滤纸片为空白滤纸片,D区域抑菌圈最大,根据题干信息可知,将抗菌肽Piscidin基因及NK-lysin基因进行融合形成杂合肽NK-LPd基因,从而获得具有更高抗菌活性的杂合抗菌肽,所以推测D区域放置的滤纸片为含杂合抗菌肽NK-LPd的滤纸片。
    位置
    处理圆点的液体
    碘液处理后的颜色反应

    清水
    蓝黑色

    煮沸的新鲜唾液
    蓝黑色

    与盐酸混合的新鲜唾液
    蓝黑色

    新鲜唾液
    红棕色

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    去杂质方式
    沉淀质量(g)
    DNA浓度(ng/μL)
    OD260/OD280
    二苯胺鉴定
    离心
    0.068
    81.5
    1.53
    蓝色
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    0.1028
    336.4
    1.41
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